CN111534564A - 一种基于肠道类器官筛选药物的方法 - Google Patents
一种基于肠道类器官筛选药物的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111534564A CN111534564A CN202010307831.9A CN202010307831A CN111534564A CN 111534564 A CN111534564 A CN 111534564A CN 202010307831 A CN202010307831 A CN 202010307831A CN 111534564 A CN111534564 A CN 111534564A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- intestinal organoids
- intestinal
- hole
- screening
- cell viability
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 39
- 210000002220 organoid Anatomy 0.000 title claims abstract description 39
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title claims abstract description 36
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 title claims abstract description 32
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 26
- 238000012216 screening Methods 0.000 title claims abstract description 19
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 claims abstract description 14
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims abstract description 12
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 claims abstract description 12
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims abstract description 12
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 8
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 8
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 claims abstract description 8
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 6
- 238000012054 celltiter-glo Methods 0.000 claims abstract description 5
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 12
- 108010082117 matrigel Proteins 0.000 claims description 11
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 7
- FJHBVJOVLFPMQE-QFIPXVFZSA-N 7-Ethyl-10-Hydroxy-Camptothecin Chemical compound C1=C(O)C=C2C(CC)=C(CN3C(C4=C([C@@](C(=O)OC4)(O)CC)C=C33)=O)C3=NC2=C1 FJHBVJOVLFPMQE-QFIPXVFZSA-N 0.000 claims description 6
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 claims description 6
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 5
- IVTVGDXNLFLDRM-HNNXBMFYSA-N Tomudex Chemical compound C=1C=C2NC(C)=NC(=O)C2=CC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)S1 IVTVGDXNLFLDRM-HNNXBMFYSA-N 0.000 claims description 4
- 244000309459 oncolytic virus Species 0.000 claims description 4
- 229960001756 oxaliplatin Drugs 0.000 claims description 4
- DWAFYCQODLXJNR-BNTLRKBRSA-L oxaliplatin Chemical compound O1C(=O)C(=O)O[Pt]11N[C@@H]2CCCC[C@H]2N1 DWAFYCQODLXJNR-BNTLRKBRSA-L 0.000 claims description 4
- 239000008188 pellet Substances 0.000 claims description 4
- 229960004432 raltitrexed Drugs 0.000 claims description 4
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 claims description 3
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 claims description 3
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 claims description 3
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 3
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 claims description 3
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 claims description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 3
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 claims description 2
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 2
- 239000013049 sediment Substances 0.000 claims description 2
- 238000010008 shearing Methods 0.000 claims description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 abstract description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 9
- 238000011337 individualized treatment Methods 0.000 abstract description 5
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 abstract description 2
- 229920000117 poly(dioxanone) Polymers 0.000 description 19
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 17
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 6
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 5
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 5
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 2
- 208000005016 Intestinal Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 238000007877 drug screening Methods 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 201000002313 intestinal cancer Diseases 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 231100000582 ATP assay Toxicity 0.000 description 1
- 239000007640 basal medium Substances 0.000 description 1
- 238000003570 cell viability assay Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 description 1
- 239000008274 jelly Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 239000013610 patient sample Substances 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
- G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
- G01N33/5011—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics for testing antineoplastic activity
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种基于肠道类器官筛选药物的方法，包括如下步骤：用手术切除的新鲜结直肠癌组织或肠镜活检标本构建肠道类器官；将培养好的肠道类器官消化为单细胞，然后将单细胞按照一定数量铺于96孔酶标板中；将待筛选的药物加入孔中，放入培养箱中培养5天；培养完成后，每孔加入CellTiter‑Glo 3D细胞活力检测试剂10min后，置于OrionⅡ仪器读值，评估细胞活力。本发明提供的一种基于肠道类器官筛选药物的方法采用肠道类器官模型作为疗效评估的手段，通过术中或肠镜活检标本构建肠道类器官，体外应用抗肿瘤药物及靶向药物等处理肠道类器官，效果数据接近真实效果，可为个体化治疗提供依据。
Description
技术领域
本发明涉及生物医药领域，尤其涉及一种基于肠道类器官筛选药物的方法。
背景技术
荷兰Hubrecht研究所Hans Clevers实验室于2009年报道了体外培养小鼠肠道类器官的方法，自此开辟了体外3D细胞培养的技术1。Toshiro Sato等人由结直肠癌患者样本体外构建人的肠道类器官(patient-derived tumor organoids，PDOs)，该技术可在体外模拟体内3D生长环境，与传统二维培养系统相比，能够更加真实反映肠道功能及体内的信号传导及形态，并且与原发肿瘤灶基因突变类型高度一致2。因此科学家们借助类器官这一研究工具，用于研究肠癌发生发展的病理机制及抗肿瘤药物的体外筛选。GeorgiosVlachogiannis等人运用PDOs模型于体外筛选结直肠癌(CRC)患者有效药物，结果表明在PDOs中有效的药物，患者服用后有效率达88％，若在PDOs模型中无效，患者服用后亦无效，证明PDOs能够作为一种有效的抗肿瘤药物筛选手段，实现个体化治疗3。
本发明拟采用PDOs模型作为疗效评估的手段，为个体化治疗提供策略。
参考文献:
1.Sato T,Vries RG,Snippert HJ,etal.Single Lgr5 stem cells buildcrypt-villus structures in vitro without a mesenchymal niche.Nature 2009,459(7244):262-265.
2.Sato T,Stange DE,Ferrante M,et al.Long-term expansionof epithelialorganoids from human colon,adenoma,adenocarcinoma,and Barrett'sepithelium.Gastroenterology 2011,141(5):1762-1772.
3.Vlachogiannis G,Hedayat S,Vatsiou A,et al.Patient-derived organoidsmodel treatment response of metastatic gastrointestinal cancers.Science2018,359(6378):920-926.
发明内容
本发明针对现有技术的不足，提供了一种基于肠道类器官筛选药物的方法，通过术中或肠镜活检标本构建PDOs，体外应用抗肿瘤药物及靶向药物等处理PDOs，通过细胞活力检测评估上述治疗的有效性。
为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
本发明的提供了一种基于肠道类器官筛选药物的方法，包括如下步骤：
步骤一，用手术切除的新鲜结直肠癌组织或肠镜活检标本构建肠道类器官；
步骤二，将培养好的肠道类器官消化为单细胞，然后将单细胞按照一定数量铺于96孔酶标板中；
步骤三，将待筛选的药物加入96孔酶标板的孔中，放入培养箱中培养；
步骤四，培养完成后，每孔加入CellTiter-Glo 3D细胞活力检测试剂10min后，置于OrionⅡ仪器读值，评估细胞活力。
进一步地，药物为5-Fu、奥沙利铂、SN-38、雷替曲塞或溶瘤病毒。
进一步地，细胞活力是基于ATP数值进行评估。
进一步地，步骤一中构建肠道类器官的具体方法包括如下步骤：
(1)将新鲜结直肠癌组织彻底清洗后，然后剪切成碎块，离心，弃上清；
(2)加入消化液，重悬沉淀，剧烈震荡，置于冰上孵育；将孵育后的上清液过滤并离心，弃上清；
(3)重悬步骤(2)获得的细胞沉淀，计数；取细胞悬液于另一离心管中，离心，弃上清；
(4)将步骤(3)获得的细胞沉淀与液态温敏性基质胶混合；孵育，然后加入人结直肠类器官培养基，置于培养箱中培养5-7天。
进一步地，步骤(1)中清洗采用的清洗液为含有1％青霉素/链霉素的PBS溶液。
进一步地，步骤(1)中碎块的大小为2-4mm3。
进一步地，基质胶与细胞的比例为50μl/20000个。
进一步地，基质胶在与细胞沉淀混合之前需要用预冷后枪头吹吸。
本发明采用以上技术方案，与现有技术相比，具有如下技术效果：
本发明提供的一种基于肠道类器官筛选药物的方法采用PDOs模型作为疗效评估的手段，通过术中或肠镜活检标本构建PDOs，体外应用抗肿瘤药物及靶向药物等处理PDOs，效果数据接近真实效果，可为个体化治疗提供依据。
附图说明
图1为本发明一实施例肠癌患者类器官体外生长过程中的状态图片；
图2为本发明一实施例中PDOs模型体外筛药的柱状结果图。
具体实施方式
本发明提供了一种基于肠道类器官筛选药物的方法采用PDOs模型作为疗效评估的手段，通过术中或肠镜活检标本构建PDOs，体外应用抗肿瘤药物及靶向药物等处理PDOs，通过细胞活力检测评估上述治疗的有效性。
上述基于肠道类器官筛选药物的方法包括如下步骤：
步骤一，用手术切除的新鲜结直肠癌组织或肠镜活检标本构建肠道类器官；
步骤二，将培养好的肠道类器官消化为单细胞，然后将单细胞按照一定数量铺于96孔酶标板中；
步骤三，将待筛选的药物加入孔中，放入培养箱中培养；
步骤四，培养完成后，每孔加入CellTiter-Glo 3D细胞活力检测试剂10min后，置于OrionⅡ仪器读值，评估细胞活力。
下面通过具体实施例对本发明进行详细和具体的介绍，以使更好地理解本发明，但是下述实施例并不限制本发明范围。
实施例1
本实施例提供PDOs的构建方法，包括如下步骤：
1.将手术切除的新鲜结直肠癌组织(离体30min内)置于含5ml PBS+1％青霉素/链霉素培养皿内清洗2遍；
2.将肿瘤组织彻底清洗后，持无菌器械将肿瘤组织切成2-4mm3大小的碎块，置于15ml离心管(含冰PBS缓冲液10ml)中，1500rpm×3min离心，弃上清。
3.加入5ml组织消化液(stemcell，cat：07174)，重悬第二步得到的肿瘤碎块组织，剧烈震荡后，置于冰上孵育30min。
4.将孵育后的上清液经100μm滤网过滤至50ml离心管，获得过滤液。
5.取1ml第4步获得的过滤液，以190g转速离心5min，弃上清。
6.以1ml基础培养基重悬细胞后，计数。
7.取出所需细胞悬液转至EP管内，以190g转速离心5min，弃上清后，将EP管置于冰上。
8.在EP管内以预冷的枪头吸取适量4℃液态温敏型Matrigel基质胶(加入比例为50μl Matrigel基质胶/20000个细胞)，并以预冷后枪头吹吸Matrigel基质胶十次，注意在此过程中避免产生气泡。
9.将细胞与基质胶混合液以每孔50μl滴加入预热24孔板上，凝胶在遇热后迅速转变为果冻状。
10.将滴加细胞与基质胶混合物的24孔板置于37℃，5％CO2培养箱孵育30min后，每孔加入700μl人结直肠类器官培养基(stemcell，cat：06011,06012)后置于37℃，5％CO2培养箱培养，显微镜下观察类器官生长状态，如图1所示。
实施例2
本实施例应用实施例1中构建好的PDOs筛选抗肿瘤的药物，其具体的过程包括如下步骤：
1.将实施例1中培养好的类器官消化为单细胞，以4000个细胞每孔铺于96孔板。
2.在孔内加入不同的药物处理，其中，5-Fu浓度为25μg/ml，奥沙利铂浓度为5μg/ml，SN-38浓度为0.1μg/ml，雷替曲塞浓度为0.8μg/ml，溶瘤病毒感染复数MOI值为1。加药后置于37℃，5％CO2培养箱培养5天。
3.经药物处理5天后，每孔加入80微升CellTiter-Glo 3D细胞活力检测试剂10min后，置于OrionⅡ仪器读ATP检测数值，与未加药物对照组对比细胞活力状态，结果如图2所示。
如图2所示，制备的PDOs模型对于5-Fu、奥沙利铂、SN-38及溶瘤病毒均敏感，但对于雷替曲塞不敏感。其中，该PDOs模型对于SN-38的处理极为敏感，细胞存活率不足10％，提示SN-38可以作为该患者治疗方案的优选药物，为临床患者个体化治疗提供依据。
以上对本发明的具体实施例进行了详细描述，但其只是作为范例，本发明并不限制于以上描述的具体实施例。对于本领域技术人员而言，任何对本发明进行的等同修改和替代也都在本发明的范畴之中。因此，在不脱离本发明的精神和范围下所作的均等变换和修改，都应涵盖在本发明的范围内。
Claims (8)
1.一种基于肠道类器官筛选药物的方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤一，用手术切除的新鲜结直肠癌组织或肠镜活检标本构建肠道类器官；
步骤二，将培养好的肠道类器官消化为单细胞，然后将所述单细胞按照一定数量铺于96孔酶标板中；
步骤三，将待筛选的药物加入所述96孔酶标板的孔中，放入培养箱中培养；
步骤四，培养完成后，每孔加入CellTiter-Glo 3D细胞活力检测试剂10min后，置于OrionⅡ仪器读值，评估细胞活力。
2.根据权利要求1中所述的基于肠道类器官筛选药物的方法，其特征在于，所述药物为5-Fu、奥沙利铂、SN-38、雷替曲塞或溶瘤病毒。
3.根据权利要求1所述的基于肠道类器官筛选药物的方法，其特征在于，所述细胞活力是基于ATP数值进行评估。
4.根据权利要求1所述的基于肠道类器官筛选药物的方法，其特征在于，步骤一中所述构建肠道类器官的具体方法包括如下步骤：
(1)将所述新鲜结直肠癌组织彻底清洗后，然后剪切成碎块，置于含有PBS缓冲液的离心管中离心，弃上清；
(2)加入消化液，重悬沉淀，剧烈震荡，置于冰上孵育；将孵育后的上清液过滤并离心，弃上清；
(3)重悬步骤(2)获得的细胞沉淀，计数；取细胞悬液于另一离心管中，离心，弃上清；
(4)将步骤(3)获得的细胞沉淀与液态温敏性基质胶混合；孵育，然后加入人结直肠类器官培养基，置于培养箱中培养5-7天。
5.根据权利要求1所述的基于肠道类器官筛选药物的方法，其特征在于，步骤(1)中清洗采用的清洗液为含有1％青霉素/链霉素的PBS溶液。
6.根据权利要求1所述的基于肠道类器官筛选药物的方法，其特征在于，步骤(1)中所述碎块的大小为2-4mm3。
7.根据权利要求1所述的基于肠道类器官筛选药物的方法，其特征在于，所述基质胶与细胞的比例为50μl/20000个。
8.根据权利要求1所述的基于肠道类器官筛选药物的方法，其特征在于，所述基质胶在与细胞沉淀混合之前需要用预冷后枪头吹吸。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010307831.9A CN111534564A (zh) | 2020-04-17 | 2020-04-17 | 一种基于肠道类器官筛选药物的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010307831.9A CN111534564A (zh) | 2020-04-17 | 2020-04-17 | 一种基于肠道类器官筛选药物的方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN111534564A true CN111534564A (zh) | 2020-08-14 |
Family
ID=71976878
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202010307831.9A Pending CN111534564A (zh) | 2020-04-17 | 2020-04-17 | 一种基于肠道类器官筛选药物的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN111534564A (zh) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112143699A (zh) * | 2020-09-11 | 2020-12-29 | 上海市第十人民医院 | 一种结直肠癌类器官免疫微环境重构的方法 |
| CN112176021A (zh) * | 2020-10-13 | 2021-01-05 | 普罗布诺(重庆)生物技术有限公司 | 一种体外构建的精准预测癌症患者用药的方法 |
| CN112553287A (zh) * | 2020-12-02 | 2021-03-26 | 普罗布诺(重庆)生物技术有限公司 | 检测vegf位点靶向药对肠癌类器官影响的方法 |
| CN113265441A (zh) * | 2021-04-26 | 2021-08-17 | 丹望医疗科技(上海)有限公司 | 三明治夹层培养体系用于检测类器官对大分子药物敏感性的方法 |
| CN114134116A (zh) * | 2021-12-10 | 2022-03-04 | 上海交通大学医学院附属瑞金医院 | 预测结直肠癌患者化疗药物疗效的试剂盒及其应用 |
| CN114480289A (zh) * | 2022-04-08 | 2022-05-13 | 南方医科大学南方医院 | 构建肠道尤文氏肉瘤类器官的方法 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108396010A (zh) * | 2017-02-06 | 2018-08-14 | 王琼 | 一种结直肠癌类器官的体外培养方法 |
| CN108977494A (zh) * | 2017-06-03 | 2018-12-11 | 加乐生医股份有限公司 | 一种预测药物疗效的方法 |
| CN109136188A (zh) * | 2017-06-15 | 2019-01-04 | 上海集技生物技术有限公司 | 一种活检肠道肿瘤类器官的培养、传代、冻存和复苏方法及其应用 |
| CN109554346A (zh) * | 2018-12-05 | 2019-04-02 | 首都医科大学附属北京胸科医院 | 一种肺癌类器官模型及其在肿瘤研究中的应用 |
| KR20200034496A (ko) * | 2018-09-21 | 2020-03-31 | 오가노이드사이언스 주식회사 | 간 유래 줄기세포를 포함하는 간 오가노이드의 제조방법 및 이의 용도 |
-
2020
- 2020-04-17 CN CN202010307831.9A patent/CN111534564A/zh active Pending
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108396010A (zh) * | 2017-02-06 | 2018-08-14 | 王琼 | 一种结直肠癌类器官的体外培养方法 |
| CN108977494A (zh) * | 2017-06-03 | 2018-12-11 | 加乐生医股份有限公司 | 一种预测药物疗效的方法 |
| CN109136188A (zh) * | 2017-06-15 | 2019-01-04 | 上海集技生物技术有限公司 | 一种活检肠道肿瘤类器官的培养、传代、冻存和复苏方法及其应用 |
| KR20200034496A (ko) * | 2018-09-21 | 2020-03-31 | 오가노이드사이언스 주식회사 | 간 유래 줄기세포를 포함하는 간 오가노이드의 제조방법 및 이의 용도 |
| CN109554346A (zh) * | 2018-12-05 | 2019-04-02 | 首都医科大学附属北京胸科医院 | 一种肺癌类器官模型及其在肿瘤研究中的应用 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| GEORGIOS VLACHOGIANNIS等: ""Patient-derived organoids model treatment response of metastatic gastrointestinal cancers"", 《SCIENCE》 * |
| 王文东等: ""类器官在结直肠癌研究中的应用进展"", 《中国微创外科杂志》 * |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112143699A (zh) * | 2020-09-11 | 2020-12-29 | 上海市第十人民医院 | 一种结直肠癌类器官免疫微环境重构的方法 |
| CN112176021A (zh) * | 2020-10-13 | 2021-01-05 | 普罗布诺(重庆)生物技术有限公司 | 一种体外构建的精准预测癌症患者用药的方法 |
| CN112553287A (zh) * | 2020-12-02 | 2021-03-26 | 普罗布诺(重庆)生物技术有限公司 | 检测vegf位点靶向药对肠癌类器官影响的方法 |
| CN113265441A (zh) * | 2021-04-26 | 2021-08-17 | 丹望医疗科技(上海)有限公司 | 三明治夹层培养体系用于检测类器官对大分子药物敏感性的方法 |
| WO2022227289A1 (zh) * | 2021-04-26 | 2022-11-03 | 丹望医疗科技(上海)有限公司 | 三明治夹层培养体系用于检测类器官对大分子药物敏感性的方法 |
| CN113265441B (zh) * | 2021-04-26 | 2023-02-28 | 丹望医疗科技(上海)有限公司 | 三明治夹层培养体系用于检测类器官对大分子药物敏感性的方法 |
| CN114134116A (zh) * | 2021-12-10 | 2022-03-04 | 上海交通大学医学院附属瑞金医院 | 预测结直肠癌患者化疗药物疗效的试剂盒及其应用 |
| CN114480289A (zh) * | 2022-04-08 | 2022-05-13 | 南方医科大学南方医院 | 构建肠道尤文氏肉瘤类器官的方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN111534564A (zh) | 一种基于肠道类器官筛选药物的方法 | |
| CN110475860B (zh) | 使用肿瘤组织的原代癌细胞的三维培养 | |
| CN107976534A (zh) | 一种抗肿瘤药物快速药效筛选方法及其专用装置 | |
| CN112143699A (zh) | 一种结直肠癌类器官免疫微环境重构的方法 | |
| CN113025575B (zh) | 一种人胰腺癌组织类器官模型的构建方法 | |
| CN113106065B (zh) | 一种结直肠癌类器官与肝脏类器官共培养模型及其构建方法 | |
| CN105121657A (zh) | 有关癌症发展及对治疗的反应的快速预测 | |
| CN112176021A (zh) | 一种体外构建的精准预测癌症患者用药的方法 | |
| CN113142135A (zh) | 一种消化道肿瘤pdx模型及标准化模型库的构建方法 | |
| CN112592897A (zh) | 一种肿瘤类器官的制备方法 | |
| CN114181903A (zh) | 结直肠癌类器官培养基及无支架3d培养方法 | |
| CN111903603B (zh) | 用于构建胆管癌异种移植模型的移植体及其制备方法和用途 | |
| CN113278586A (zh) | 一种用于培养甲状腺癌类器官的培养基和培养方法 | |
| CN102559579A (zh) | 一种新型体外检测新生血管的多种细胞三维立体共培养体系及其试剂盒 | |
| CN111040996A (zh) | 一种制备卵巢癌类器官的方法 | |
| CN116904545A (zh) | 一种基于人源肺类器官的高内涵肺损伤评价体系 | |
| CN115584345B (zh) | 确定肿瘤电场治疗参数的方法 | |
| CN116376833A (zh) | 一种保留免疫细胞的结肠癌类器官构建方法 | |
| CN106479973B (zh) | 一种体外iak免疫细胞培养方法 | |
| CN113817683A (zh) | 一种肺癌类器官的培养基及其应用 | |
| CN112608899B (zh) | 一种无血清培养基在培养癌组织起源球状体中的应用 | |
| CN107421791A (zh) | 一种标准化体外肿瘤微组织的制备方法 | |
| CN104060329A (zh) | 一种染色体核型分析永生化质控细胞库及其构建方法 | |
| CN112410301A (zh) | 一种体外构建的精准预测卵巢癌患者用药的方法 | |
| CN116836916B (zh) | 用于预测分化型甲状腺癌摄碘能力的类器官、系统及方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20200814 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |