CN111454377A - 褐灵菇多糖的制作方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了褐灵菇多糖的制作方法，具有以下步骤：前处理：取干褐灵菇除去杂质，并对其破碎处理；提取：取破碎后的感褐灵菇并加入特定质量的清水进行回流提取处理若干次，过滤后合并提取液；浓缩：对提取液进行减压浓缩；精制：向减压浓缩处理后的提取液加入乙醇使醇含量达到75％，使其固液分离并收集沉淀物；干燥及粉碎：将沉淀物干燥并粉碎即制得葡萄多糖。本发明具有制作工艺简单且提取物褐灵菇多糖含量高、不需要借助贵重设备即可稳定制得、方便进行规模化生产的有益效果。
Description
技术领域
本发明涉及褐灵菇多糖制备技术领域，具体的说是一种褐灵菇多糖的制作方法。
背景技术
褐灵菇多糖是从褐灵菇子实体中提取的水溶性蛋白多糖，是褐灵菇中的主要活性成分，时提高人体免疫力的首选营养品。褐灵菇多糖的主要药理活性有：较强的抗癌活性，尤其是对胃癌和腹水癌的治疗和防护，能够一直肿瘤细胞的生长，对致癌物质有吸收、排泄的作用；能够降低血糖、血脂、胆固醇，改善糖尿病和动脉硬化等疾病。是“三高”人群和癌症患者的理想营养品。
但是传统的褐灵菇多糖在提取制作过程中，存在提取制作工艺复杂且存在提取物中褐灵菇多糖含量低的问题，其生产成本较高，难以规模化投入生产。
发明内容
针对现有技术中存在的上述不足之处，本发明目的是提供一种制作工艺简单且提取物褐灵菇多糖含量高、不需要借助贵重设备即可稳定制得、方便进行规模化生产的褐灵菇多糖的制作方法。
本发明为实现上述目的所采用的技术方案是：褐灵菇多糖的制作方法，具有以下步骤：
(1)前处理：取干褐灵菇除去杂质，并对其破碎处理；
(2)提取：取破碎后的感褐灵菇并加入特定质量的清水进行回流提取处理若干次，过滤后合并提取液；
(3)浓缩：对提取液进行减压浓缩；
(4)精制：向减压浓缩处理后的提取液加入乙醇使醇含量达到75％，使其固液分离并收集沉淀物；
(5)干燥及粉碎：将沉淀物干燥并粉碎即制得葡萄多糖。
所述步骤(1)在对干褐灵菇去除杂质时，采用孔径设置在杂质尺寸与干褐灵菇尺寸之间的振动筛。
所述步骤(2)在进行回流提取时，加入水的质量为破碎后干褐灵菇质量的6倍，回流提取进行三次且每次进行1h。
所述步骤(3)在对提取液进行减压浓缩时，浓缩后的相对密度在70～80℃下控制在1.18～1.20之间。
所述步骤(4)在对加入乙醇的提取液进行固液分离时，采用静置的方式获得沉淀物，静置时间控制在12h。
所述步骤(4)在对加入乙醇的提取液进行固液分离时，采用离心机进行离心处理以获得沉淀物。
所述步骤(5)在对沉淀物进行干燥时，干燥温度控制在60～70℃之间。
针对所述步骤(1)～(5)制得的褐灵菇多糖提供的鉴别方法，具有如下内容：
1)供试品溶液：取制得的粉末状褐灵菇多糖1g，加50ml乙醚，超声处理10分钟，过滤并将滤液蒸干，产生的残渣加1ml甲醇使其溶解作为供试品溶液；
2)对照组溶液：取茯苓对照药材1g，加50ml乙醚，超声处理10分钟，过滤并将滤液蒸干，产生的残渣加1ml甲醇使其溶解作为对照组溶液；
3)对比鉴定：按照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、对照组溶液各2·10-6ml，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(比例为：20:5:0.5)为展开剂进行展开,并取出晾干，喷以2％香草醛硫酸-乙醇(比例为：4:1)混合溶液，在105℃加热至至斑点显色清晰。
本发明的有益效果：本发明通过对干褐灵菇除杂、破碎、加水回流提取并收集提取液，对提取液进行减压浓缩并添加乙醇以收集沉淀物，对沉淀物干燥粉碎获得葡萄多糖，整个过程工艺简单且提取物褐灵菇多糖含量高；在整个处理过程中仅需使用成本较低的加工设备，如振动筛、回流提取设备、减压浓缩设备、粉碎机等设备，不需要借助贵重设备即可稳定制得，方便进行规模化生产的。
附图说明
图1为本发明制作褐灵菇多糖的工艺流程图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
请参阅图1，褐灵菇多糖的制作方法，具有以下步骤：
(1)前处理：取干褐灵菇除去杂质，并对其破碎处理；
(2)提取：取破碎后的感褐灵菇并加入特定质量的清水进行回流提取处理若干次，过滤后合并提取液；
(3)浓缩：对提取液进行减压浓缩；
(4)精制：向减压浓缩处理后的提取液加入乙醇使醇含量达到75％，使其固液分离并收集沉淀物；
(5)干燥及粉碎：将沉淀物干燥并粉碎即制得葡萄多糖。
实施例2
请参阅图1，对实施例1作进一步技术方案的补充说明：步骤(1)在对干褐灵菇去除杂质时，采用孔径设置在杂质尺寸与干褐灵菇尺寸之间的振动筛；
步骤(2)在进行回流提取时，加入水的质量为破碎后干褐灵菇质量的6倍，回流提取进行三次且每次进行1h；
步骤(3)在对提取液进行减压浓缩时，浓缩后的相对密度在70～80℃下控制在1.18～1.20之间；
步骤(4)在对加入乙醇的提取液进行固液分离时，采用静置的方式获得沉淀物，静置时间控制在12h；
步骤(4)在对加入乙醇的提取液进行固液分离时，采用离心机进行离心处理以获得沉淀物；
步骤(5)在对沉淀物进行干燥时，干燥温度控制在60～70℃之间。
实施例3
请参阅图1，并以实施例1、2为技术基础，针对步骤(1)～(5)制得的褐灵菇多糖提供的鉴别方法，具有如下内容：
1)供试品溶液：取制得的粉末状褐灵菇多糖1g，加50ml乙醚，超声处理10分钟，过滤并将滤液蒸干，产生的残渣加1ml甲醇使其溶解作为供试品溶液；
2)对照组溶液：取茯苓对照药材1g，加50ml乙醚，超声处理10分钟，过滤并将滤液蒸干，产生的残渣加1ml甲醇使其溶解作为对照组溶液；
3)对比鉴定：按照薄层色谱法(《中国药典》2015版第四部通则0502)试验，吸取供试品溶液、对照组溶液各2·10-6ml，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(比例为：20:5:0.5)为展开剂进行展开,并取出晾干，喷以2％香草醛硫酸-乙醇(比例为：4:1)混合溶液，在105℃加热至至斑点显色清晰。
供试品色谱中，在于对照药草色谱相应的位置上，显示相同的主斑点。
实施例4
请参阅图1，并以实施例1、2为技术基础，针对步骤(1)～(5)制得的褐灵菇多糖提供的含量测定方法，具有如下内容：
s1.对照品溶液制备：称取经105℃干燥至恒重的200mg无水葡萄糖，置于100ml容量瓶中加水溶解并稀释至刻度线处，摇匀后吸取10ml，置另一100ml容量瓶中，加水稀释至刻度线处后摇匀，即获得每ml含0.02mg葡萄糖的对照品溶液；
s2.供试品溶液制备：称取制得的两份200mg褐灵菇多糖，分别置于100ml容量瓶中加水溶解并稀释至刻度线处，摇匀后均吸取10ml并分别置于另外两组100ml容量瓶中加水稀释至刻度线处，摇匀后进行过滤，弃去初滤液并各量取1ml续滤液，分别置于10ml具塞试管中，浸于冰水浴中以制备供试品溶液；
s3.标准曲线的制备：分别吸取0.2ml、0.3ml、0.4ml、0.5ml、0.6ml对照品溶液并分别置于10ml具塞试管中，各用蒸馏水补至1.0ml刻度线处，浸于冰水浴中冷却；
将本步骤中装有不同量对照品溶液的各组具塞试管与步骤s2中其中一组装有供试品溶液的具塞试管中分别加入1ml的4％苯酚溶液后混匀，迅速加入7ml浓硫酸摇匀，置于40℃水浴中保温30min，取出后置于冰水浴中放置5min，以相应试剂为空白组，按照分光光度法在490nm波长处测定吸收度，记录以吸收度纵坐标、浓度为横坐标回执标准曲线，根据标准曲线回归法得出回归方程式的斜率、截距以及相关系数；
s4含量测定：取供试品溶液1ml，加入1ml的4％苯酚溶液后混匀，迅速加入7ml浓硫酸摇匀，置于40℃水浴中保温30min，取出后置冰水浴中放置5min，以相应试剂为空白组，按照风光光度法在490nm波长处测定吸收度，根据供试品吸收度以及回归方程式得出供试品浓度，并计算出供试品中褐灵菇多糖的含量。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。
Claims (8)
1.褐灵菇多糖的制作方法，其特征在于，具有以下步骤：
(1)前处理：取干褐灵菇除去杂质，并对其破碎处理；
(2)提取：取破碎后的感褐灵菇并加入特定质量的清水进行回流提取处理若干次，过滤后合并提取液；
(3)浓缩：对提取液进行减压浓缩；
(4)精制：向减压浓缩处理后的提取液加入乙醇使醇含量达到75％，使其固液分离并收集沉淀物；
(5)干燥及粉碎：将沉淀物干燥并粉碎即制得葡萄多糖。
2.根据权利要求1所述的褐灵菇多糖的制作方法，其特征在于：所述步骤(1)在对干褐灵菇去除杂质时，采用孔径设置在杂质尺寸与干褐灵菇尺寸之间的振动筛。
3.根据权利要求1所述的褐灵菇多糖的制作方法，其特征在于：所述步骤(2)在进行回流提取时，加入水的质量为破碎后干褐灵菇质量的6倍，回流提取进行三次且每次进行1h。
4.根据权利要求1所述的褐灵菇多糖的制作方法，其特征在于：所述步骤(3)在对提取液进行减压浓缩时，浓缩后的相对密度在70～80℃下控制在1.18～1.20之间。
5.根据权利要求1所述的褐灵菇多糖的制作方法，其特征在于：所述步骤(4)在对加入乙醇的提取液进行固液分离时，采用静置的方式获得沉淀物，静置时间控制在12h。
6.根据权利要求1所述的褐灵菇多糖的制作方法，其特征在于：所述步骤(4)在对加入乙醇的提取液进行固液分离时，采用离心机进行离心处理以获得沉淀物。
7.根据权利要求1所述的褐灵菇多糖的制作方法，其特征在于：所述步骤(5)在对沉淀物进行干燥时，干燥温度控制在60～70℃之间。
8.根据权利要求1所述的褐灵菇多糖的制作方法，其特征在于：针对所述步骤(1)～(5)制得的褐灵菇多糖提供的鉴别方法，具有如下内容：
1)供试品溶液：取制得的粉末状褐灵菇多糖1g，加50ml乙醚，超声处理10分钟，过滤并将滤液蒸干，产生的残渣加1ml甲醇使其溶解作为供试品溶液；
2)对照组溶液：取茯苓对照药材1g，加50ml乙醚，超声处理10分钟，过滤并将滤液蒸干，产生的残渣加1ml甲醇使其溶解作为对照组溶液；
3)对比鉴定：按照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、对照组溶液各2·10-6ml，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(比例为：20:5:0.5)为展开剂进行展开,并取出晾干，喷以2％香草醛硫酸-乙醇(比例为：4:1)混合溶液，在105℃加热至至斑点显色清晰。
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