CN111372937B

CN111372937B - 噻吩并二氮杂卓衍生物及其应用

Info

Publication number: CN111372937B
Application number: CN201880061661.1A
Authority: CN
Inventors: 沈春莉; 吴成德; 刘勇; 龚珍; 黎健; 陈曙辉
Original assignee: CSPC Zhongqi Pharmaceutical Technology Shijiazhuang Co Ltd
Current assignee: CSPC Zhongqi Pharmaceutical Technology Shijiazhuang Co Ltd
Priority date: 2017-09-22
Filing date: 2018-09-06
Publication date: 2021-10-01
Anticipated expiration: 2038-09-06
Also published as: AU2018334788B2; KR20200058483A; CN111372937A; EP3686204A4; RU2020113587A; AU2018334788A1; CA3076759A1; US11312726B2; US20210017190A1; EP3686204A1; WO2019056950A1; RU2020113587A3; JP2020534317A; JP7417519B2

Abstract

本发明涉及一类噻吩并二氮杂卓衍生物，及其在制备治疗与BET Bromodomain抑制剂相关疾病的药物中的应用。具体涉及式（Ⅰ）、（Ⅱ）所示化合物及其药学上可接受的盐。

Description

噻吩并二氮杂卓衍生物及其应用

相关申请的引用

本申请主张如下优先权：

CN201710867197.2，申请日2017-09-22。

技术领域

本发明涉及一类噻吩并二氮杂卓衍生物，及其在制备治疗与BET Bromodomain抑制剂相关疾病的药物中的应用。具体涉及式(I)、(II)所示化合物及其药学上可接受的盐。

背景技术

组蛋白赖氨酸乙酰化的识别是组蛋白乙酰化参与表观遗传调控的关键步骤，乙酰化的组蛋白赖氨酸可以被bromodomains(BRDs)结构域所特异性的识别，从而招募染色质调控因子到特定区域，协同完成基因表达调控。其中作用于bromodomain and extra-terminal(BET)蛋白家族的BRD结构域可以调节关键癌基因c-MYC和抗凋亡蛋白的表达。靶向BET溴结构域蛋白的特异性抑制剂研究，已经成为针对表观遗传调控机制的抗癌和抗炎症药物研究的热点。BET bromodomain家族包括四种含串联布罗莫区结构域的蛋白质：BRD2，BRD3，BRD4和BRDT。

发明内容

本发明提供了式(I)、(II)所示化合物、其异构体或其药学上可接受的盐，

其中，

T选自：CH或N；

R₁选自任选被1、2或3个R取代的：C_1-3烷基、C_1-3烷氧基；

R₂、R₃、R₄分别独立地选自H、F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN，或分别独立地选自任选被1、2或3个R取代的：C_1-6烷基、C_1-6杂烷基；

R₅选自H，或选自任选被1、2或3个R取代的：C_1-3烷基；

R₆分别独立地选自H、F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN，或分别独立地选自任选被1、2或3个R取代的：C_1-6烷基、C_1-6杂烷基；

或者，连接在相同C原子上的两个R₆与相连的C原子一起组成-C(＝O)；

环A选自：C_3-7环烷基、5～12元杂环烷基、5～6元杂芳基；

环B选自：4～7元杂环烷基；

且结构单元

不选自：

n选自：0、1、2、3、4、5或6；

R分别独立地选自：F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN，或选自任选被1、2或3个R’取代的：C_1-6烷基、C_1-6杂烷基；

R’分别独立地选自：F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN、Me；

带“*”碳原子为手性碳原子，以(R)或(S)单一对映体形式或富含一种对映体形式存在；

所述C_1-6杂烷基、5～12元杂环烷基、5-6元杂芳基、4～7元杂环烷基之“杂”选自N、-O-、-S-、-NH-、-C(＝O)NH-、-C(＝O)-、-C(＝O)O-、-S(＝O)₂-、-S(＝O)-、-C(＝O)S-；

上述杂原子或杂原子团的数目分别独立地选自1、2、3或4。

本发明的一些方案中，上述R选自F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN，或选自任选被1、2或3个R’取代的：C_1-3烷基、C_1-3烷氧基，其他变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述R选自F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN，或选自任选被1、2或3个R’取代的：Me、Et、

其他变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述R选自：F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN、Me、CF₃、Et、

其他变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述R₁选自任选被1、2或3个R取代的：Me、Et、

其他变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述R₁选自：Me、Et、CF₃、

其他变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述R₂、R₃、R₄分别独立地选自H、F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN，或分别独立地选自任选被1、2或3个R取代的：C_1-3烷基、C_1-3烷氧基，其他变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述R₂、R₃、R₄分别独立地选自：H、F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN、Me、

其他变量如本发明定义。

本发明的一些方案中，上述R₅选自H、Me，其他变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述R₆分别独立地选自H、F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN，或分别独立地选自任选被1、2或3个R取代的：C_1-3烷基、C_1-3杂烷基，其他变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述R₆分别独立地选自H、F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN，或分别独立地选自任选被1、2或3个R取代的：Me、Et、

其他变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述R₆分别独立地选自H、F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN、Me、Et、

其他变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述环A选自：C_4-6环烷基、吡咯烷-2-酮基、嘧啶-4(3H)-酮基、5-氮杂螺[2.4]庚烷-4-酮基、4-氮杂螺[2.4]庚烷-5-酮基、四氢噻吩-1，1-二氧化物基、四氢噻吩-1-氧化物基、四氢呋喃基、吡咯烷基、二氢噻吩-2(3H)-酮基、2-氧杂螺[3.4]辛烷基、二氢呋喃-2(3H)-酮基、1，4，7，10-四氧环十二烷基、1，2，5-恶二唑基、7-氧杂二环[2.2.1]庚烷、吡咯烷-2，5-二酮、5，5-二甲基二氢呋喃-2(3H)-酮基，其他变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述结构单元

选自：

其他变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述结构单元

选自：

其他变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述结构单元

选自：

其他变量如本发明所定义。

本发明的一些方案中，上述结构单元

选自：

其他变量如本发明所定义。

本发明还有一些方案由上述变量任意组合而来。

本发明的一些方案中，上述化合物、其异构体或其药学上可接受的盐，其选自：

其中，

T₁选自：-S(＝O)-、-S(＝O)₂-、-N(R₆)-、-O-、-C(R₆)(R₆)-、

T₂分别独立地选自：-NH-、-O-、-S-；

R₁～R₆如本发明所定义；

带“*”碳原子为手性碳原子，以(R)或(S)单一对映体形式或富含一种对映体形式存在。

本发明还提供了下列化合物、其异构体或其药学上可接受的盐，其选自：

本发明还提供了一种药物组合物，包括治疗有效量的上述的化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分以及药学上可接受的载体。

本发明还提供了上述的化合物、其异构体或其药学上可接受的盐或者上述组合物在制备BET Bromodomain抑制剂相关药物上的应用。

本发明的一些方案中，上述BET Bromodomain抑制剂相关药物是用于抗肿瘤的药物。

定义和说明

除非另有说明，本文所用的下列术语和短语旨在具有下列含义。一个特定的术语或短语在没有特别定义的情况下不应该被认为是不确定的或不清楚的，而应该按照普通的含义去理解。当本文中出现商品名时，意在指代其对应的商品或其活性成分。这里所采用的术语“药学上可接受的”，是针对那些化合物、材料、组合物和/或剂型而言，它们在可靠的医学判断的范围之内，适用于与人类和动物的组织接触使用，而没有过多的毒性、刺激性、过敏性反应或其它问题或并发症，与合理的利益/风险比相称。

术语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的盐，由本发明发现的具有特定取代基的化合物与相对无毒的酸或碱制备。当本发明的化合物中含有相对酸性的功能团时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的碱与这类化合物的中性形式接触的方式获得碱加成盐。药学上可接受的碱加成盐包括钠、钾、钙、铵、有机胺或镁盐或类似的盐。当本发明的化合物中含有相对碱性的官能团时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的酸与这类化合物的中性形式接触的方式获得酸加成盐。药学上可接受的酸加成盐的实例包括无机酸盐，所述无机酸包括例如盐酸、氢溴酸、硝酸、碳酸，碳酸氢根，磷酸、磷酸一氢根、磷酸二氢根、硫酸、硫酸氢根、氢碘酸、亚磷酸等；以及有机酸盐，所述有机酸包括如乙酸、丙酸、异丁酸、马来酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、反丁烯二酸、乳酸、扁桃酸、邻苯二甲酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、柠檬酸、酒石酸和甲磺酸等类似的酸；还包括氨基酸(如精氨酸等)的盐，以及如葡糖醛酸等有机酸的盐。本发明的某些特定的化合物含有碱性和酸性的官能团，从而可以被转换成任一碱或酸加成盐。

本发明的药学上可接受的盐可由含有酸根或碱基的母体化合物通过常规化学方法合成。一般情况下，这样的盐的制备方法是：在水或有机溶剂或两者的混合物中，经由游离酸或碱形式的这些化合物与化学计量的适当的碱或酸反应来制备。

本发明的化合物可以存在特定的几何或立体异构体形式。本发明设想所有的这类化合物，包括顺式和反式异构体、(-)-和(+)-对对映体、(R)-和(S)-对映体、非对映异构体、(D)-异构体、(L)-异构体，及其外消旋混合物和其他混合物，例如对映异构体或非对映体富集的混合物，所有这些混合物都属于本发明的范围之内。烷基等取代基中可存在另外的不对称碳原子。所有这些异构体以及它们的混合物，均包括在本发明的范围之内。

除非另有说明，术语“对映异构体”或者“旋光异构体”是指互为镜像关系的立体异构体。

除非另有说明，术语“顺反异构体”或者“几何异构体”系由因双键或者成环碳原子单键不能自由旋转而引起。

除非另有说明，术语“非对映异构体”是指分子具有两个或多个手性中心，并且分子间为非镜像的关系的立体异构体。

除非另有说明，“(D)”或者“(+)”表示右旋，“(L)”或者“(-)”表示左旋，“(DL)”或者“(±)”表示外消旋。

除非另有说明，用楔形实线键

和楔形虚线键

表示一个立体中心的绝对构型，用直形实线键

和直形虚线键

表示立体中心的相对构型，用波浪线

表示楔形实线键

或楔形虚线键

或用波浪线

表示直形实线键

和直形虚线键

本发明的化合物可以存在特定的。除非另有说明，术语“互变异构体”或“互变异构体形式”是指在室温下，不同官能团异构体处于动态平衡，并能很快的相互转化。若互变异构体是可能的(如在溶液中)，则可以达到互变异构体的化学平衡。例如，质子互变异构体(proton tautomer)(也称质子转移互变异构体(prototropic tautomer))包括通过质子迁移来进行的互相转化，如酮-烯醇异构化和亚胺-烯胺异构化。价键异构体(valencetautomer)包括一些成键电子的重组来进行的相互转化。其中酮-烯醇互变异构化的具体实例是戊烷-2，4-二酮与4-羟基戊-3-烯-2-酮两个互变异构体之间的互变。

除非另有说明，术语“富含一种异构体”、“异构体富集”、“富含一种对映体”或者“对映体富集”指其中一种异构体或对映体的含量小于100％，并且，该异构体或对映体的含量大于等于60％，或者大于等于70％，或者大于等于80％，或者大于等于90％，或者大于等于95％，或者大于等于96％，或者大于等于97％，或者大于等于98％，或者大于等于99％，或者大于等于99.5％，或者大于等于99.6％，或者大于等于99.7％，或者大于等于99.8％，或者大于等于99.9％。

除非另有说明，术语“异构体过量”或“对映体过量”指两种异构体或两种对映体相对百分数之间的差值。例如，其中一种异构体或对映体的含量为90％，另一种异构体或对映体的含量为10％，则异构体或对映体过量(ee值)为80％。

可以通过的手性合成或手性试剂或者其他常规技术制备光学活性的(R)-和(S)-异构体以及D和L异构体。如果想得到本发明某化合物的一种对映体，可以通过不对称合成或者具有手性助剂的衍生作用来制备，其中将所得非对映体混合物分离，并且辅助基团裂开以提供纯的所需对映异构体。或者，当分子中含有碱性官能团(如氨基)或酸性官能团(如羧基)时，与适当的光学活性的酸或碱形成非对映异构体的盐，然后通过本领域所公知的常规方法进行非对映异构体拆分，然后回收得到纯的对映体。此外，对映异构体和非对映异构体的分离通常是通过使用色谱法完成的，所述色谱法采用手性固定相，并任选地与化学衍生法相结合(例如由胺生成氨基甲酸盐)。本发明的化合物可以在一个或多个构成该化合物的原子上包含非天然比例的原子同位素。例如，可用放射性同位素标记化合物，比如氚(³H)，碘-125(¹²⁵I)或C-14(¹⁴C)。又例如，可用重氢取代氢形成氘代药物，氘与碳构成的键比普通氢与碳构成的键更坚固，相比于未氘化药物，氘代药物有降低毒副作用、增加药物稳定性、增强疗效、延长药物生物半衰期等优势。本发明的化合物的所有同位素组成的变换，无论放射性与否，都包括在本发明的范围之内。术语“药学上可接受的载体”是指能够递送本发明有效量活性物质、不干扰活性物质的生物活性并且对宿主或者患者无毒副作用的任何制剂或载体介质代表性的载体包括水、油、蔬菜和矿物质、膏基、洗剂基质、软膏基质等。这些基质包括悬浮剂、增粘剂、透皮促进剂等。它们的制剂为化妆品领域或局部药物领域的技术人员所周知。

“任选”或“任选地”指的是随后描述的事件或状况可能但不是必需出现的，并且该描述包括其中所述事件或状况发生的情况以及所述事件或状况不发生的情况。

术语“被取代的”是指特定原子上的任意一个或多个氢原子被取代基取代，可以包括重氢和氢的变体，只要特定原子的价态是正常的并且取代后的化合物是稳定的。当取代基为氧(即＝O)时，意味着两个氢原子被取代。氧取代不会发生在芳香基上。术语“任选被取代的”是指可以被取代，也可以不被取代，除非另有规定，取代基的种类和数目在化学上可以实现的基础上可以是任意的。

当任何变量(例如R)在化合物的组成或结构中出现一次以上时，其在每一种情况下的定义都是独立的。因此，例如，如果一个基团被0-2个R所取代，则所述基团可以任选地至多被两个R所取代，并且每种情况下的R都有独立的选项。此外，取代基和/或其变体的组合只有在这样的组合会产生稳定的化合物的情况下才是被允许的。

当一个连接基团的数量为0时，比如-(CRR)₀-，表示该连接基团为单键。

当其中一个变量选自单键时，表示其连接的两个基团直接相连，比如A-L-Z中L代表单键时表示该结构实际上是A-Z。

当一个取代基为空缺时，表示该取代基是不存在的，比如A-X中X为空缺时表示该结构实际上是A。当一个取代基可以连接到一个环上的一个以上原子时，这种取代基可以与这个环上的任意原子相键合，例如，结构单元

表示取代基R可在环己基或者环己二烯上的任意一个位置发生取代。当所列举的取代基中没有指明其通过哪一个原子连接到被取代的基团上时，这种取代基可以通过其任何原子相键合，例如，吡啶基作为取代基可以通过吡啶环上任意一个碳原子连接到被取代的基团上。当所列举的连接基团没有指明其连接方向，其连接方向是任意的，例如，

中连接基团L为-M-W-，此时-M-W-既可以按与从左往右的读取顺序相同的方向连接环A和环B构成

也可以按照与从左往右的读取顺序相反的方向连接环A和环B构成

所述连接基团、取代基和/或其变体的组合只有在这样的组合会产生稳定的化合物的情况下才是被允许的。

除非另有规定，“环”表示被取代或未被取代的环烷基、杂环烷基、环烯基、杂环烯基、环炔基、杂环炔基、芳基或杂芳基。所谓的环包括单环、联环、螺环、并环或桥环。环上原子的数目通常被定义为环的元数，例如，“5～7元环”是指环绕排列5～7个原子。除非另有规定，该环任选地包含1～3个杂原子。因此，“5～7元环”包括例如苯基、吡啶和哌啶基；另一方面，术语“5～7元杂环烷基环”包括吡啶基和哌啶基，但不包括苯基。术语“环”还包括含有至少一个环的环系，其中的每一个“环”均独立地符合上述定义。

除非另有规定，术语“杂环”或“杂环基”意指稳定的含杂原子或杂原子团的单环、双环或三环，它们可以是饱和的、部分不饱和的或不饱和的(芳族的)，它们包含碳原子和1、2、3或4个独立地选自N、O和S的环杂原子，其中上述任意杂环可以稠合到一个苯环上形成双环。氮和硫杂原子可任选被氧化(即NO和S(O)p，p是1或2)。氮原子可以是被取代的或未取代的(即N或NR，其中R是H或本文已经定义过的其他取代基)。该杂环可以附着到任何杂原子或碳原子的侧基上从而形成稳定的结构。如果产生的化合物是稳定的，本文所述的杂环可以发生碳位或氮位上的取代。杂环中的氮原子任选地被季铵化。一个优选方案是，当杂环中S及O原子的总数超过1时，这些杂原子彼此不相邻。另一个优选方案是，杂环中S及O原子的总数不超过1。如本文所用，术语“芳族杂环基团”或“杂芳基”意指稳定的5、6、7元单环或双环或7、8、9或10元双环杂环基的芳香环，它包含碳原子和1、2、3或4个独立地选自N、O和S的环杂原子。氮原子可以是被取代的或未取代的(即N或NR，其中R是H或本文已经定义过的其他取代基)。氮和硫杂原子可任选被氧化(即NO和S(O)p，p是1或2)。值得注意的是，芳香杂环上S和O原子的总数不超过1。桥环也包含在杂环的定义中。当一个或多个原子(即C、O、N或S)连接两个不相邻的碳原子或氮原子时形成桥环。优选的桥环包括但不限于：一个碳原子、两个碳原子、一个氮原子、两个氮原子和一个碳-氮基。值得注意的是，一个桥总是将单环转换成三环。桥环中，环上的取代基也可以出现在桥上。

杂环化合物的实例包括但不限于：吖啶基、吖辛因基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并巯基呋喃基、苯并巯基苯基、苯并恶唑基、苯并恶唑啉基、苯并噻唑基、苯并三唑基、苯并四唑基、苯并异恶唑基、苯并异噻唑基、苯并咪唑啉基、咔唑基、4aH-咔唑基、咔啉基、苯并二氢吡喃基、色烯、噌啉基十氢喹啉基、2H，6H-1，5，2-二噻嗪基、二氢呋喃并[2，3-b]四氢呋喃基、呋喃基、呋咱基、咪唑烷基、咪唑啉基、咪唑基、1H-吲唑基、吲哚烯基、二氢吲哚基、中氮茚基、吲哚基、3H-吲哚基、异苯并呋喃基、异吲哚基、异二氢吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异恶唑基、亚甲二氧基苯基、吗啉基、萘啶基，八氢异喹啉基、恶二唑基、1，2，3-恶二唑基、1，2，4-恶二唑基、1，2，5-恶二唑基、1，3，4-恶二唑基、恶唑烷基、恶唑基、羟吲哚基、嘧啶基、菲啶基、菲咯啉基、吩嗪、吩噻嗪、苯并黄嘌呤基、酚恶嗪基、酞嗪基、哌嗪基、哌啶基、哌啶酮基、4-哌啶酮基、胡椒基、蝶啶基、嘌呤基、吡喃基、吡嗪基、吡唑烷基、吡唑啉基、吡唑基、哒嗪基、吡啶并恶唑、吡啶并咪唑、吡啶并噻唑、吡啶基、吡咯烷基、吡咯啉基、2H-吡咯基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、4H-喹嗪基、喹喔啉基、奎宁环基、四氢呋喃基、四氢异喹啉基、四氢喹啉基、四唑基，6H-1，2，5-噻二嗪基、1，2，3-噻二唑基、1，2，4-噻二唑基、1，2，5-噻二唑基、1，3，4-噻二唑基、噻蒽基、噻唑基、异噻唑基噻吩基、噻吩并恶唑基、噻吩并噻唑基、噻吩并咪唑基、噻吩基、三嗪基、1H-1，2，3-三唑基、2H-1，2，3-三唑基、1H-1，2，4-三唑基、4H-1，2，4-三唑基和呫吨基。还包括稠环和螺环化合物。

除非另有规定，术语“烃基”或者其下位概念(比如烷基、烯基、炔基、芳基等等)本身或者作为另一取代基的一部分表示直链的、支链的或环状的烃原子团或其组合，可以是完全饱和的(如烷基)、单元或多元不饱和的(如烯基、炔基、芳基)，可以是单取代或多取代的，可以是一价(如甲基)、二价(如亚甲基)或者多价(如次甲基)，可以包括二价或多价原子团，具有指定数量的碳原子(如C₁-C₁₂表示1至12个碳，C_1-12选自C₁、C₂、C₃、C₄、C₅、C₆、C₇、C₈、C₉、C₁₀、C₁₁和C₁₂；C_3-12选自C₃、C₄、C₅、C₆、C₇、C₈、C₉、C₁₀、C₁₁和C₁₂。)。“烃基”包括但不限于脂肪烃基和芳香烃基，所述脂肪烃基包括链状和环状，具体包括但不限于烷基、烯基、炔基，所述芳香烃基包括但不限于6-12元的芳香烃基，例如苯、萘等。在一些实施例中，术语“烃基”表示直链的或支链的原子团或它们的组合，可以是完全饱和的、单元或多元不饱和的，可以包括二价和多价原子团。饱和烃原子团的实例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、仲丁基、异丁基、环己基、(环己基)甲基、环丙基甲基，以及正戊基、正己基、正庚基、正辛基等原子团的同系物或异构体。不饱和烃基具有一个或多个双键或三键，其实例包括但不限于乙烯基、2-丙烯基、丁烯基、巴豆基、2-异戊烯基、2-(丁二烯基)、2，4-戊二烯基、3-(1，4-戊二烯基)、乙炔基、1-和3-丙炔基，3-丁炔基，以及更高级的同系物和异构体。

除非另有规定，术语“杂烃基”或者其下位概念(比如杂烷基、杂烯基、杂炔基、杂芳基等等)本身或者与另一术语联合表示稳定的直链的、支链的或环状的烃原子团或其组合，有一定数目的碳原子和至少一个杂原子组成。在一些实施例中，术语“杂烷基”本身或者与另一术语联合表示稳定的直链的、支链的烃原子团或其组合物，有一定数目的碳原子和至少一个杂原子组成。在一个典型实施例中，杂原子选自B、O、N和S，其中氮和硫原子任选地被氧化，氮杂原子任选地被季铵化。杂原子或杂原子团可以位于杂烃基的任何内部位置，包括该烃基附着于分子其余部分的位置，但术语“烷氧基”、“烷氨基”和“烷硫基”(或硫代烷氧基)属于惯用表达，是指分别通过一个氧原子、氨基或硫原子连接到分子的其余部分的那些烷基基团。实例包括但不限于-CH₂-CH₂-O-CH₃、-CH₂-CH₂-NH-CH₃、-CH₂-CH₂-N(CH₃)-CH₃、-CH₂-S-CH₂-CH₃、-CH₂-CH₂、-S(O)-CH₃、-CH₂-CH₂-S(O)₂-CH₃、-CH＝CH-O-CH₃、-CH₂-CH＝N-OCH₃和-CH＝CH-N(CH₃)-CH₃。至多两个杂原子可以是连续的，例如-CH₂-NH-OCH₃。

除非另有规定，术语“环烃基”、“杂环烃基”或者其下位概念(比如芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、环烯基、杂环烯基、环炔基、杂环炔基等等)本身或与其他术语联合分别表示环化的“烃基”、“杂烃基”。此外，就杂烃基或杂环烃基(比如杂烷基、杂环烷基)而言，杂原子可以占据该杂环附着于分子其余部分的位置。环烃基的实例包括但不限于环戊基、环己基、1-环己烯基、3-环己烯基、环庚基等。杂环基的非限制性实例包括1-(1，2，5，6-四氢吡啶基)、1-哌啶基、2-哌啶基，3-哌啶基、4-吗啉基、3-吗啉基、四氢呋喃-2-基、四氢呋喃吲哚-3-基、四氢噻吩-2-基、四氢噻吩-3-基，1-哌嗪基和2-哌嗪基。

除非另有规定，术语“烷基”用于表示直链或支链的饱和烃基，可以是单取代(如-CH₂F)或多取代的(如-CF₃)，可以是一价(如甲基)、二价(如亚甲基)或者多价(如次甲基)。烷基的例子包括甲基(Me)，乙基(Et)，丙基(如，n-丙基和异丙基)，丁基(如，n-丁基，异丁基，s-丁基，t-丁基)，戊基(如，n-戊基，异戊基，新戊基)等。

除非另有规定，环烷基包括任何稳定的环状或多环烃基，任何碳原子都是饱和的，可以是单取代或多取代的，可以是一价、二价或者多价。这些环烷基的实例包括，但不限于，环丙基、降冰片烷基、[2.2.2]二环辛烷、[4.4.0]二环癸烷等。

除非另有规定，术语“卤代素”或“卤素”本身或作为另一取代基的一部分表示氟、氯、溴或碘原子。此外，术语“卤代烷基”意在包括单卤代烷基和多卤代烷基。例如，术语“卤代(C₁-C₄)烷基”意在包括但不仅限于三氟甲基、2，2，2-三氟乙基、4-氯丁基和3-溴丙基等等。除非另有规定，卤代烷基的实例包括但不仅限于：三氟甲基、三氯甲基、五氟乙基，和五氯乙基。

“烷氧基”代表通过氧桥连接的具有特定数目碳原子的上述烷基，除非另有规定，C_1-6烷氧基包括C₁、C₂、C₃、C₄、C₅和C₆的烷氧基。烷氧基的例子包括但不限于：甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基和S-戊氧基。

除非另有规定，术语“芳基”表示多不饱和的芳族烃取代基，可以是单取代或多取代的，可以是一价、二价或者多价，它可以是单环或多环(比如1至3个环；其中至少一个环是芳族的)，它们稠合在一起或共价连接。术语“杂芳基”是指含有一至四个杂原子的芳基(或环)。在一个示范性实例中，杂原子选自B、N、O和S，其中氮和硫原子任选地被氧化，氮原子任选地被季铵化。杂芳基可通过杂原子连接到分子的其余部分。芳基或杂芳基的非限制性实施例包括苯基、萘基、联苯基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、吡嗪基、恶唑基、苯基-恶唑基、异恶唑基、噻唑基、呋喃基、噻吩基、吡啶基、嘧啶基、苯并噻唑基、嘌呤基、苯并咪唑基、吲哚基、异喹啉基、喹喔啉基、喹啉基、1-萘基、2-萘基、4-联苯基、1-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、3-吡唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、吡嗪基、2-恶唑基、4-恶唑基、2-苯基-4-恶唑基、5-恶唑基、3-异恶唑基、4-异恶唑基、5-异恶唑基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、2-呋喃基、3-呋喃基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-苯并噻唑基、嘌呤基、2-苯并咪唑基、5-吲哚基、1-异喹啉基、5-异喹啉基、2-喹喔啉基、5-喹喔啉基、3-喹啉基和6-喹啉基。上述任意一个芳基和杂芳基环系的取代基选自下文所述的可接受的取代基。

除非另有规定，芳基在与其他术语联合使用时(例如芳氧基、芳硫基、芳烷基)包括如上定义的芳基和杂芳基环。因此，术语“芳烷基”意在包括芳基附着于烷基的那些原子团(例如苄基、苯乙基、吡啶基甲基等)，包括其中碳原子(如亚甲基)已经被例如氧原子代替的那些烷基，例如苯氧基甲基、2-吡啶氧甲基3-(1-萘氧基)丙基等。

术语“离去基团”是指可以被另一种官能团或原子通过取代反应(例如亲和取代反应)所取代的官能团或原子。例如，代表性的离去基团包括三氟甲磺酸酯；氯、溴、碘；磺酸酯基，如甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、对溴苯磺酸酯、对甲苯磺酸酯等；酰氧基，如乙酰氧基、三氟乙酰氧基等等。

术语“保护基”包括但不限于“氨基保护基”、“羟基保护基”或“巯基保护基”。术语“氨基保护基”是指适合用于阻止氨基氮位上副反应的保护基团。代表性的氨基保护基包括但不限于：甲酰基；酰基，例如链烷酰基(如乙酰基、三氯乙酰基或三氟乙酰基)；烷氧基羰基，如叔丁氧基羰基(Boc)；芳基甲氧羰基，如苄氧羰基(Cbz)和9-芴甲氧羰基(Fmoc)；芳基甲基，如苄基(Bn)、三苯甲基(Tr)、1，1-二-(4′-甲氧基苯基)甲基；甲硅烷基，如三甲基甲硅烷基(TMS)和叔丁基二甲基甲硅烷基(TBS)等等。术语“羟基保护基”是指适合用于阻止羟基副反应的保护基。代表性羟基保护基包括但不限于：烷基，如甲基、乙基和叔丁基；酰基，例如链烷酰基(如乙酰基)；芳基甲基，如苄基(Bn)，对甲氧基苄基(PMB)、9-芴基甲基(Fm)和二苯基甲基(二苯甲基，DPM)；甲硅烷基，如三甲基甲硅烷基(TMS)和叔丁基二甲基甲硅烷基(TBS)等等。

本发明的化合物可以通过本领域技术人员所熟知的多种合成方法来制备，包括下面列举的具体实施方式、其与其他化学合成方法的结合所形成的实施方式以及本领域技术上人员所熟知的等同替换方式，优选的实施方式包括但不限于本发明的实施例。

本发明所使用的溶剂可经市售获得。本发明采用下述缩略词：aq代表水；HATU代表O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸盐；EDC代表N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐；m-CPBA代表3-氯过氧苯甲酸；eq代表当量、等量；CDI代表羰基二咪唑；DCM代表二氯甲烷；PE代表石油醚；DIAD代表偶氮二羧酸二异丙酯；DMF代表N，N-二甲基甲酰胺；DMSO代表二甲亚砜；EtOAc代表乙酸乙酯；EtOH代表乙醇；MeOH代表甲醇；CBz代表苄氧羰基，是一种胺保护基团；BOC代表叔丁氧羰基是一种胺保护基团；HOAc代表乙酸；NaCNBH₃代表氰基硼氢化钠；r.t.代表室温；O/N代表过夜；THF代表四氢呋喃；Boc₂O代表二-叔丁基二碳酸酯；TFA代表三氟乙酸；DIPEA代表二异丙基乙基胺；SOCl₂代表氯化亚砜；CS₂代表二硫化碳；TsOH代表对甲苯磺酸；NFSI代表N-氟-N-(苯磺酰基)苯磺酰胺；NCS代表1-氯吡咯烷-2，5-二酮；n-Bu₄NF代表氟化四丁基铵；iPrOH代表2-丙醇；mp代表熔点；LDA代表二异丙基胺基锂；EDCI代表1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐；dppf代表1，1′-双(二苯基膦)二茂铁；HATU代表2-(7-氧化苯并三氮唑)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯；Ti(i-PrO)4代表四异丙醇钛；NBS代表N-溴代琥珀酰亚胺；dast代表二乙胺基三氟化硫；LiHMDS六甲基二硅基胺基锂；AIBN代表偶氮二异丁腈；POCl₃代表三氯氧磷；PEG400代表聚乙二醇400。

化合物经手工或者

软件命名，市售化合物采用供应商目录名称。

技术效果：本发明化合物具有显著的BET Bromodomain抑制活性；具有显著的抑瘤作用，且动物具有良好的耐受性；同时本发明化合物药代清除率低，吸收良好。

具体实施方式

下面通过实施例对本发明进行详细描述，但并不意味着对本发明任何不利限制。本文已经详细地描述了本发明，其中也公开了其具体实施例方式，对本领域的技术人员而言，在不脱离本发明精神和范围的情况下针对本发明具体实施方式进行各种变化和改进将是显而易见的。

流程1

实施例1

化合物1-2的合成

将化合物1-1(25.00g，139.20mmol，1.00eq)，2-丁酮(11.04g，153.12mmol，13.63mL，1.10eq)和吗啡啉(12.13g，139.20mmol，12.25mL，1.00eq)溶于乙醇(200.00毫升)加入升华硫(4.46g，139.20mmol，1.00eq)，悬浊液升温至70℃氮气保护下搅拌12个小时。先将反应液真空旋干，得到黄色油状物，向油状物中加入水(500毫升)后用乙酸乙酯(200毫升×4)萃取，收集合并有机相，用饱和食盐水(200毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤真空减压旋干。粗品通过硅胶柱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝10/1)，得到化合物1-2。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 7.47(d，J＝8.0Hz，2H)，7.38(d，J＝8.0Hz，2H)，6.43(br s，2H)，2.13(s，3H)，1.56(s，3H).

化合物1-3的合成

化合物1-2(10.00g，37.63mmol，1.00eq)溶于氯仿(100.00毫升)中并滴加2-氯乙酰氯(6.37g，56.45mmol，4.49mL，1.50eq)，滴加完后反应在70℃下搅拌1小时。反应液用饱和碳酸氢钠溶液(100毫升)，饱和食盐水(50毫升)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤后旋干。得到的粗品化合物用甲醇(40毫升)重结晶得到化合物1-3。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm11.81(br s，1H)，7.58(dd，J＝2.0，6.4Hz，2H)，7.45(dd，J＝2.2，8.6Hz，2H)，4.25(s，2H)，2.29(s，3H)，1.72(s，3H).

化合物1-4的合成

化合物1-3(11.00g，32.14mmol，1.00eq)和碘化钠(9.63g，64.28mmol，2.00eq)加入到四氢呋喃(50.00毫升)中，该混合物在60℃下搅拌2小时。反应液直接旋干，得到化合物1-4未纯化直接用于下一步反应。LCMS(ESI)m/z：433.9(M+1)

化合物1-5的合成

化合物1-4(14.00g，32.28mmol，1.00eq)溶于四氢呋喃(100.00毫升)中冷却到-60℃并充氨气30分钟，反应液缓慢升温至20℃并搅拌3小时。反应液直接旋干，得到的固体用乙酸乙酯(150毫升)溶解，并用水(50毫升×3)，饱和食盐水(50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤然后旋干。得到化合物1-5直接用于下一步反应。LCMS(ESI)m/z：322.9(M+1)，344.9(M+Na)

化合物1-6的合成

化合物1-5(10.00g，30.98mmol，1.00eq)溶于异丙醇(150.00毫升)和冰乙酸(50.00毫升)并在90℃下搅拌3小时。反应液减压去除溶剂，剩余混合物溶于氯仿(20毫升)并用饱和碳酸氢钠溶液(20毫升)和饱和食盐水(20毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤然后旋干。粗品化合物用乙酸乙酯(50毫升)重结晶，得到化合物1-6。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm8.98(br s，1H)，7.46(d，8.4Hz，2H)，7.35(d，8.4Hz，2H)，4.80(d，J＝8.8Hz，1H)，3.93(d，J＝8.6Hz，1H)，2.28(s，3H)，1.59(s，3H).

化合物1-7的合成

五硫化二磷(17.07g，76.79mmol，8.17mL，3.60eq)加入到不停搅拌的碳酸钠(4.07g，38.39mmol，1.80eq)的1，2-二氯乙烷(200.00毫升)浑浊液中，在20℃下搅拌1小时，然后加入化合物1-6(6.50g，21.33mmol，1.00eq)，得到的浑浊液在65℃下反应5小时。反应冷却到20℃并过滤，滤饼用乙酸乙酯(2L)溶解并用饱和食盐水(500毫升)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤然后旋干。粗品化合物用硅胶柱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝5/1)，得到化合物1-7。

化合物1-8的合成

在0℃下往化合物1-7(3.50g，10.91mmol，1.00eq)的甲醇(5.00毫升)浑浊液中加入水合肼(1.67g，32.72mmol，1.62mL，98％纯度，3.00eq)，反应在0℃下搅拌1小时。反应液过滤，滤饼烘干。得到化合物1-8并直接用于下一步反应。LCMS(ESI)m/z：318.9(M+1)

化合物1-9的合成

往化合物1-8(2.50g，7.84mmol，1.00eq)的甲苯(100.00毫升)混合液中加入原乙酸三乙酯(3.82g，23.52mmol，4.29mL，3.00eq)，反应在80℃下搅拌1小时。反应液直接旋干，粗品化合物用乙酸乙酯(10毫升)重结晶，得到化合物1-9。LCMS(ESI)m/z：344.9(M+1)

化合物1-10的合成

在-70℃下往化合物1-9(1.50g，4.38mmol，1.00eq)的四氢呋喃(180毫升)溶液中滴加LiHMDS(1M，8.76mL，2.00eq)，反应在该温度下搅拌1小时然后滴加2-溴醋酸叔丁酯(1.28g，6.57mmol，970.82uL，1.50eq)溶于20毫升四氢呋喃的溶液，滴加完后反应缓慢升温至20℃并搅拌5小时。反应液用饱和NH4Cl溶液(50毫升)淬灭，用乙酸乙酯(100毫升)萃取并用饱和食盐水(50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤然后旋干。粗品化合物用快速过柱仪纯化，得到的化合物用SFC分离得到化合物1-10(碱性-EtOH，色谱柱：AS(250mm×30mm，5μm)，流动相B：30％，流速(mL/min)：55)([α]²⁵ _D+54(C 0.6，CHCl₃))。LCMS(ESI)m/z：457.0(M+1)

化合物1-11的合成

化合物1-10(150.00mg，328.23μmol，1.00eq)溶于二氯甲烷(5.00毫升)和三氟乙酸(1.00毫升)，反应在20℃下搅拌4小时。反应直接旋干，得到化合物1-11并直接用于下一步反应。LCMS(ESI)m/z：401.0(M+1)

化合物1的合成

在30℃氮气保护下将N，N-二异丙基乙胺(48.36mg，374.19μmol)缓慢滴加到化合物1-11(50.00mg，124.73μmol)，6-氨基-异吲哚啉-1-酮(27.72mg，187.10μmol)和HATU(71.14mg，187.10μmol)的无水二氯甲烷(15.00毫升)溶液中，加入后在30℃下反应12小时。反应液用水(20毫升×2)洗涤，水相用二氯甲烷(20毫升)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥过滤后旋干。通过制备色谱仪进行纯化得到化合物1。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δppm 9.46(br s，1H)，8.03(br s，1H)，7.85(d，J＝7.6Hz，1H)，7.41(d，J＝8.4Hz，2H)，7.31-7.33(m，3H)，6.57-6.61(m，1H)，4.69-4.73(m，1H)，4.34(s，2H)，3.83-3.88(m，1H)，3.56-3.61(m，1H)，2.69(s，3H)，2.41(s，3H)，1.68(s，3H).LCMS(ESI)m/z：531.1(M+1).

流程2

实施例2

实施例2的合成方法参照实施例1。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δppm 9.62(br s，1H)，8.00(s，1H)，7.76(d，J＝8.4Hz1H)，7.34-7.45(m，5H)，6.14-6.15(m，1H)，4.65-4.68(m，1H)，4.38(s，2H)，3.85-3.91(m，1H)，3.50-3.54(m，1H)，2.71(s，3H)，2.44(s，3H)，1.72(s，3H).LCMS(ESI)m/z：531.1(M+1).

流程3&4

实施例3&4

化合物3-2的合成

在0℃下将甲基溴化镁(3M，6.30mL)加入10毫升无水乙醚中，氮气置换三次，缓慢滴加化合物3-1(2.00g，15.13mmol)的40毫升无水乙醚溶液，并在25℃氮气氛围下搅拌3小时。反应液在搅拌下倒50克冰水中，加入50毫升饱和NH₄Cl溶液搅拌5分钟，分液，水相用50毫升乙酸乙酯萃取，合并有机相并用50毫升饱和碳酸氢钠溶液，50毫升水和80毫升饱和食盐水各洗一次，无水硫酸钠干燥，过滤旋干。粗品用快速过柱仪纯化得到化合物3-2。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δppm 7.14-7.23(m，4H)，2.97-3.08(m，4H)，1.52(s，3H).

化合物3-3的合成

在0℃搅拌下将化合物3-2(200.00mg，1.35mmol)的2毫升二氯甲烷溶液缓慢加入到浓硝酸(4.20g，66.66mmol，3.00mL)和浓硫酸(132.36mg，1.35mmol)的10毫升无水二氯甲烷溶液中，在0℃下搅拌5分钟。反应液在搅拌下缓慢倒入到50克碎冰中，搅拌10分钟，分液，水相用二氯甲烷(30毫升×2)萃取，合并有机相分别用80毫升饱和碳酸氢钠溶液和80毫升饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤旋干。粗品用薄层层析板纯化得到化合物3-3。¹HNMR(400MHz，CDCl₃)：δppm 8.04-8.14(m，2H)，7.32-7.38(m，1H)，3.53-3.57(m，2H)，3.28-3.33(m，2H)，1.81(s，3H).

化合物3-4的合成

将化合物3-3(220.00mg，1.14mmol)，Pd/C(200.00mg，10％纯度)加入到无水甲醇(10.00毫升)中，用氢气置换三次，在25℃氢气球氛围下搅拌16个小时。反应液直接通过垫有硅藻土的布氏漏斗过滤旋干。粗品用薄层层析板纯化得到化合物3-4。

化合物3-5的合成

将化合物3-4(46.00mg，281.83μmol，1.20eq)和二异丙基乙胺(91.06mg，704.58μmol，123.05μL，3.00eq)加入到二氯甲烷(5.00毫升)中，加入化合物1-11(94.15mg，234.86μmol，1.00eq)和HATU(89.30mg，234.86μmol，1.00eq)，氮气置换三次，在25℃氮气氛围下搅拌2小时。向反应液中加入10毫升水荡洗，有机相用饱和食盐水(20毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤旋干。粗品用薄层层析板纯化得到化合物3-5。LCMS(ESI)m/z：546.2(M+1).

化合物3&4的合成

将化合物3-5(98mg，179.46μmol)用SFC手性拆分(色谱柱：AD(250mm×30mm，10μm)；流动相：[0.1％NH₃H₂O EtOH]；B％：40％-40％，60mL/min)得到两个单一构型的产物。实施例3(Rt＝5.311min)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δppm 8.68(s，1H)，7.51(s，1H)，7.41(d，J＝8.4Hz，2H)，7.33(d，J＝8.8Hz，2H)，7.28-7.29(m，1H)，7.12(d，J＝8.0Hz，1H)，4.60-4.64(m，1H)，3.74-3.80(m，1H)，3.44-3.49(m，1H)，2.95-3.03(m，4H)，2.68(s，3H)，2.40(s，3H)，1.68(s，3H)，1.49(s，3H).LCMS(ESI)m/z：546.2(M+1)

实施例4(Rt＝5.926min)¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δppm 8.72(s，1H)，7.51(s，1H)，7.41(d，J＝8.4Hz，2H)，7.33(d，J＝8.8Hz，2H)，7.28-7.29(m，1H)，7.12(d，J＝8.0Hz，1H)，4.60-4.64(m，1H)，3.74-3.80(m，1H)，3.44-3.49(m，1H)，2.95-3.03(m，4H)，2.68(s，3H)，2.40(s，3H)，1.68(s，3H)，1.49(s，3H).LCMS(ESI)m/z：546.1(M+1)

流程5

实施例5

化合物5-2的合成

在0℃下，将氯化亚砜(25.77g，216.65mmol，15.71mL，1.20eq)滴加入甲醇(200.00毫升)中，在0℃搅拌30分钟，滴加化合物5-1(30.00g，180.54mmol，25.86mL，1.00eq)的甲醇(100.00毫升)，滴加完毕后在26℃反应4小时。将反应液减压浓缩干，残留物用二氯甲烷溶解后，用饱和碳酸钠溶液调节pH至8～9，萃取分液，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩干。得到化合物5-2，无进一步纯化，直接进行下一步反应。¹H NMR(400MHz，CDCl3)：δppm 7.26-7.37(m，5H)，4.63(s，2H)，4.11(s，2H)，3.76(s，3H)

化合物5-3的合成

将化合物5-2(16.00g，88.79mmol，1.00eq)和叔丁氧基二(二甲基氨基)甲烷(17.02g，97.67mmol，20.26mL，1.10eq)的混合物加热至90℃反应16小时。将反应液减压浓缩干，残留物用二氯甲烷(80毫升)溶解后用饱和食盐水(25毫升)洗涤，萃取分液，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩干，得到化合物5-3，无需纯化直接进行下一步反应。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δppm 7.26-7.33(m，5H)，6.78(s，1H)，4.63(s，2H)，3.64(s，3H)，2.88(m，6H)

化合物5-4的合成

向化合物5-3(12.00g，51.00mmol，1.00eq)和4-溴-2-氨基吡啶(8.82g，51.00mmol，1.00eq)混合物中加入冰醋酸(40.00毫升)，混合物加热到130℃搅拌16小时。将反应物减压浓缩干。所得的残留物通过柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1)纯化，得到化合物5-4。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δppm 8.72(d，J＝7.6Hz，1H)，8.19(s，1H)，7.89(s，1H)，7.35-7.47(m，5H)，5.19(s，2H).

化合物5-5的合成

向化合物5-4(1.00g，3.02mmol，1.00eq)和氨基甲酸叔丁酯(459.88mg，3.93mmol，1.30eq)的1，4-二氧六环(20.00毫升)溶液依次加入4，5-双(二苯基磷)-9，9-二甲基氧杂蒽(174.73mg，301.97μmol，0.10eq)，三(二亚苄基丙酮)二钯(276.52mg，301.97μmol，0.10eq)和碳酸铯(2.95g，9.06mmol，3.00eq)，氮气置换三次后，氮气保护下加热至100℃反应10小时。将反应液冷却至室温，过滤，滤饼用二氯甲烷(10毫升×2)洗涤，所得滤液减压浓缩干。得到的残留物通过柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1～2∶1)纯化，得到化合物5-5。LCMS(ESI)m/z：368.2(M+1)

化合物5-6的合成

将化合物5-5(190.00mg，517.15μmol，1.00eq)和三氟乙酸(5.00毫升)的混合物加热至90℃搅拌20小时。将反应液减压浓缩干，所得残留物用二氯甲烷(10毫升)溶解后，再次减压浓缩干，得到化合物5-6无进一步纯化，直接进行下一步反应。

化合物5的合成

-10℃氮气保护下，将化合物1-11(60.00mg，149.67μmol，1.00eq)和三乙胺(30.29mg，299.34μmol，41.49μL，2.00eq)溶于无水四氢呋喃(2.00毫升)和无水N，N-二甲基甲酰胺(1.00毫升)的混合液中，再将特戊酰氯(18.05mg，149.67μmol，18.42μL，1.00eq)缓慢滴加到上述溶液中，-10℃搅拌0.5小时。然后将化合物5-6(40.00mg，137.37μmol，0.92eq，TFA)的无水N，N-二甲基甲酰胺(1.00毫升)溶液滴加到反应液中，滴加完毕后升温至27℃搅拌5小时。反应液用水(5毫升)进行淬灭反应，分液，水相用二氯甲烷(5毫升×3)萃取，合并有机相用饱和食盐水(10毫升)洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压旋干。得到的粗品用制备色谱仪纯化(碱性)，得到化合物5。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δppm 8.76(d，J＝7.28Hz，1H)，8.12(s，1H)，7.47(d，J＝8.28Hz，2H)，7.34(d，J＝8.53Hz，3H)，6.56-6.64(m，2H)，5.12(s，1H)，4.72(t，J＝7.15Hz，1H)，3.93-4.00(m，2H)，2.69(s，3H)，2.40(s，3H)，1.68(s，3H).LCMS(ESI)m/z：560.0(M+1)

流程6&7

实施例6&7

化合物6-2的合成

在氮气保护下向化合物6-1(5.00g，27.02mmol，3.65mL，1.00eq)的四氯化碳(20.00毫升)溶液中加入NBS(10.00g，56.19mmol，2.08eq)和AIBN(1.04g，6.33mmol，0.23eq)在65℃下搅拌反应4hr。反应液直接浓缩旋干，粗品用快速过柱仪纯化，得到化合物6-2。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 7.57(d，J＝8.0Hz，1H)，7.32(d，J＝8.0Hz，1H)，7.16(t，J＝7.8Hz，1H)，4.84(s，2H)，4.63(s，2H).

化合物6-3的合成

将中性氧化铝(100.00g，980.78mmol，93.41eq)加入到化合物6-2(3.60g，10.50mmol，1.00eq)溶于正己烷(200.00毫升)的溶液中，反应在75℃下搅拌2小时。反应液直接过滤，滤饼用乙酸乙酯(200毫升)洗涤，滤液直接旋干。粗品化合物用快速过柱仪纯化，得到化合物6-3。¹H NMR(400MHz，CDCl3)：δppm 7.38-7.40(m，1H)，7.16-7.16(m，2H)，5.21(s，2H)，5.10(s，2H).

化合物6-4的合成

往化合物6-3(400.00mg，2.01mmol，1.00eq)，氢氧化钾(225.52mg，4.02mmol，2.00eq)和2-二叔丁基膦-2′，4′，6′-三异丙基联苯(85.34mg，201.00μmol，0.10eq)的1，4-二氧六环(10.00毫升)混合液中加入水(1.00毫升)和三(二亚苄基丙酮)二钯(184.03mg，201.00μmol，0.10eq)，反应在120℃氮气保护下微波仪中反应1小时。反应液直接旋干，残留物用乙酸乙酯(20毫升)溶解，用水(10毫升)及饱和食盐水(10毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤然后旋干。粗品化合物用制备板纯化(石油醚/乙酸乙酯＝5/1)，得到化合物6-4。¹HNMR(400MHz，CDCl₃-d)δppm 7.15(t，J＝7.6Hz，1H)，6.80(d，J＝7.6Hz，1H)，6.66(d，J＝7.6Hz，1H)，5.15(m，4H).

化合物6-5的合成

-5℃氮气保护下将浓硫酸(36.75mg，367.24μmol，19.97μL，98％纯度纯度，1.00eq)加入到化合物6-4(50.00mg，367.24μmol，1.00eq)溶于二氯甲烷(2毫升)的溶液中，然后将发烟硝酸(24.36mg，367.24μmol，17.40μL，1.00eq)(纯度95％)用二氯甲烷(0.5毫升)稀释然后慢慢加入到反应液中并搅拌0.5小时。反应液用二氯甲烷(10毫升)稀释然后用水(5毫升)及饱和食盐水(5毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤然后旋干。粗品化合物用制备板纯化(石油醚/乙酸乙酯＝3/1)，得到化合物6-5。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 7.94(d，J＝8.8Hz，1H)，6.72(d，J＝8.8Hz，1H)，5.32(s，2H)，4.97(s，2H).

化合物6-6的合成

氮气保护下往化合物6-5(40.00mg，220.81μmol，1.00eq)溶于甲醇(10.00毫升)的溶液中加入Pd/C(100.00mg)(含钯20％，水50％)，然后反应体系用氢气置换3次，反应在20℃氢气球(15psi)下反应1小时。反应液直接过滤，滤饼用甲醇(10毫升)洗涤，滤液直接旋干。得到化合物6-6并直接用于下一步反应。LCMS(ESI)m/z：151.9(M+1).

化合物6&7的合成

将化合物1-11(50.00mg，124.73μmol，1.00eq)，化合物6-6(30.00mg，198.32μmol，1.59eq)，三乙胺(37.86mg，374.19μmol，51.86μL，3.00eq)和HATU(71.14mg，187.10μmol，1.50eq)溶于二氯甲烷(5.00毫升)并在氮气保护20℃下搅拌2小时。反应液用二氯甲烷(10毫升)稀释，用水(10毫升)及饱和食盐水(10毫升)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤然后旋干。粗品化合物用制备板纯化，得到化合物6。LCMS(ESI)m/z：534.1(M+1).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 8.47(s，1H)，7.36(d，J＝8.0Hz，2H)，7.28(d，J＝8.4Hz，2H)，7.07(d，J＝8.4Hz，1H)，6.57(d，J＝8.0Hz，1H)，4.85-5.00(m，4H)，4.53-4.56(m，1H)，3.63-3.65(m，1H)，3.34-3.38(m，1H)，2.62(s，3H)，2.34(s，3H)，1.62(s，3H).

化合物7。LCMS(ESI)m/z：534.1(M+1).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 8.65(s，1H)，8.57(br s，1H)，7.35(d，J＝8.4Hz，2H)，7.26(d，J＝8.4Hz，2H)，6.90(d，J＝8.0Hz，1H)，6.53(d，J＝8.8Hz，1H)，4.95(s，2H)，4.90(d，J＝12.8Hz，1H)，4.80(d，J＝12.8Hz，1H)，4.57-4.60(m，1H)，3.63-3.69(m，1H)，3.35-3.39(m，1H)，2.62(s，3H)，2.34(s，3H)，1.61(s，3H).

流程8

实施例8

化合物8-2的合成

将化合物8-1(500.00mg，3.10mmol，1.00eq)与水合肼(4.12g，80.66mmol，4.00mL，26.02eq)加入到微波管中，微波90℃反应小时，反应液中有大量固体析出，不继续进行反应。将反应液过滤，滤饼用水(20毫升×2)洗涤，再加入无水四氢呋喃(20毫升×2)然后旋干。得到化合物8-2不进行进一步纯化。LCMS(ESI)m/z：161.9(M+1).

化合物8的合成

往化合物1-11(100.00mg，249.45μmol，1.00eq)和化合物8-2(100.50mg，623.63μmol，2.50eq)的吡啶(5.00毫升)溶液中滴入POCl₃(114.74mg，748.35μmol，69.54μL，3.00eq)，反应在20℃下搅拌12小时。反应液用乙酸乙酯(10毫升)稀释并用水(5毫升×2)及饱和食盐水(5毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并且旋干。粗品化合物用制备色谱仪纯化，得到化合物8。¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δppm 10.49-10.54(m，1H)9.84(br s，1H)，8.36-8.37(m，1H)，7.79-7.98(m，1H)，7.72-7.74(m，2H)，7.46(d，J＝8.4Hz，2H)，7.34(d，J＝8.4Hz，2H)，4.70-4.73(m，1H)，3.73-3.86(m，2H)，2.68(s，3H)，2.40(s，3H)，1.67(s，3H).LCMS(ESI)m/z：544.1(M+1).

流程9

实施例9

化合物9-2的合成

-20℃氮气保护下，将化合物9-1(2.00g，15.02mmol，1.00eq)和无水二异丙胺(3.16g，31.24mmol，4.39mL，2.08eq)溶于无水四氢呋喃(30.00毫升)中，待溶液温度降至-20℃，缓慢滴加正丁基锂(2.5M，23.73mL，3.95eq)，并使温度维持在-20～30℃之间。滴加完毕后，升温至0℃搅拌反应1小时，再缓慢滴加1，2-二溴乙烷(9.62g，51.22mmol，3.86mL，3.41eq)的无水四氢呋喃(10.00毫升)溶液，滴加完毕后升温至27℃搅拌反应18小时。-20℃下加20毫升饱和氯化铵溶液淬灭反应，3N盐酸(5毫升)将反应液pH值调至2-3，再用3×20毫升乙酸乙酯萃取，合并上述有机相，依次用饱和碳酸氢钠溶液(50毫升)和饱和食盐水(50毫升)洗涤，所得有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩干得紫色固体，粗品用快速过柱仪纯化得到化合物9-2。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δppm 9.12(s，1H)，7.11(m，1H)，6.89-6.96(m，2H)，6.75(d，J＝7.28Hz，1H)，1.70(t，J＝4.0Hz，2H)，1.47(t，J＝4.0Hz，2H).

化合物9-3的合成

-15℃氮气保护下，将硝酸(118.46mg，1.88mmol，84.61μL，1.00eq)缓慢滴加到化合物9-2(300.00mg，1.88mmol，1.00eq)和浓硫酸(184.85mg，1.88mmol，100.46μL，1.00eq)的二氯甲烷(4.00毫升)溶液中，滴加完毕后升温至27℃继续搅拌10小时。在反应液中加约2g冰淬灭反应，用3×5毫升二氯甲烷萃取，合并上述有机相，用饱和碳酸氢钠溶液(10毫升)和饱和食盐水(10毫升)洗涤有机相，再用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩旋干。粗品用薄层层析板纯化得到化合物9-3。¹H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 8.32(s，1H)，8.12(m，1H)，7.67(d，J＝2.0Hz，1H)，6.97(d，J＝8.4Hz，1H)，1.81-1.84(m，2H)，1.61-1.68(m，2H).

化合物9-4的合成

将还原铁粉(462.27mg，8.28mmol，13.00eq)加入到化合物9-3(130mg，636.69μmol，1.0eq)的冰醋酸(8.00毫升)溶液中，25℃氮气保护下搅拌16小时。将反应液过滤，滤液浓缩后加入水(5毫升)中，水相用3×5毫升乙酸乙酯萃取，合并有机相用饱和食盐水(10毫升)洗，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压旋干。将反应液加硅藻土过滤，滤液浓缩旋干。得到的粗品用薄层层析板分离纯化，得到化合物9-4。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 8.37(s，1H)，6.75(d，J＝8.0Hz，1H)，6.48-6.63(m，1H)，6.23(s，1H)，1.64-1.82(m，2H)，1.40-1.51(m，2H).

化合物9的合成

25℃氮气保护下，将化合物1-11(36.82mg，91.85μmol，1.00eq)和化合物9-4(16.00mg，91.85μmol，1.00eq)加入到HATU(41.91mg，110.22μmol，1.20eq)的无水二氯甲烷(4.00毫升)溶液中，再缓慢滴加三乙胺(27.88mg，275.55μmol，38.19uL，3.00eq)，25℃氮气保护下搅拌5小时。往反应液中加3毫升水进行淬灭反应，分液，水相用3×5毫升二氯甲烷萃取，合并上述有机相，用饱和碳酸氢钠溶液(2毫升)和饱和食盐水(2毫升)洗涤有机相，再用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压旋干。得到的粗品用制备色谱仪纯化(碱性)，得到化合物9。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 9.19(s，1H)，8.64(s，1H)，7.31-7.37(m，2H)，7.23-7.27(m，2H)，7.19(s，1H)，7.08-7.11(m，1H)，6.76(d，J＝8.4Hz，1H)，4.60-4.64(m，1H)，3.73-3.79(m，1H)，3.39-3.44(m，1H)，2.61(s，3H)，2.34(s，3H)，1.62-1.64(m，2H)，1.61(s，3H)，1.42-1.43(m，2H).LCMS(ESI)m/z：557.1(M+1)

流程10

实施例10

化合物10-2的合成

将化合物10-1(1.76g，6.77mmol，1.00eq)，氰化亚铜(910.00mg，10.16mmol，2.22mL，1.50eq)，dppf(375.32mg，677.00μmol，0.10eq)，双(二亚苄基丙酮)钯(389.28mg，677.00μmol，0.10eq)和N，N-二甲基甲酰胺(20.00毫升)的混合液加热到110℃搅拌16小时。反应液减压过滤，滤液减压浓缩。浓缩残留物经硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝1/0～3/1)纯化，得到化合物10-2。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 8.98(d，J＝2.3Hz，1H)，8.52(dd，J＝2.3，8.5Hz，1H)，8.05(d，J＝8.3Hz，1H)，4.09(s，3H).

化合物10-3的合成

向化合物10-2(700.00mg，3.40mmol，1.00eq)的冰醋酸(10.00毫升)溶液中加入还原铁粉(1.90g，34.00mmol，10.00eq)。所得反应液20℃下搅拌16小时。反应液经硅藻土过滤，减压浓缩。向浓缩残留中加入乙酸乙酯(100毫升)和饱和碳酸氢钠水溶液(pH7～8)。有机相经饱和食盐水(60毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。浓缩残留物经硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝1/0～1/1)纯化，得到化合物10-3。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 7.47(d，J＝8.3Hz，1H)，7.26(d，J＝2.5Hz，1H)，6.73(dd，J＝2.5，8.3Hz，1H)，4.21(br s，2H)，3.90(s，3H).

化合物10-4的合成

-78℃下，向化合物10-3(100.00mg，567.63μmol，1.00eq)和Ti(i-PrO)₄(643.20mg，2.26mmol，670.00uL，3.99eq)的四氢呋喃(2.00毫升)溶液中加入乙基溴化镁(3M，1.50mL，7.93eq)。所得反应液-78℃～10℃下(缓慢升温)搅拌18小时。向反应液中加入饱和氯化铵溶液(20毫升)生成粘稠浆状液，加入乙酸乙酯(20毫升)，搅拌10分钟后过滤。滤液分液，有机相经饱和食盐水(15毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。浓缩残留物经薄层层析板纯化得到化合物10-4。LCMS：MS(ESI)m/z：174.9(M+1).

化合物10的合成

将化合物1-11(25.00mg，62.36μmol，1.00eq)，化合物10-4(11.95mg，68.60μmol，1.10eq)，HATU(28.45mg，74.84μmol，1.20eq)和三乙胺(15.78mg，155.91μmol，21.61μL，2.50eq)溶于无水二氯甲烷(1.00毫升)中并在氮气保护20℃下搅拌2小时。反应液用二氯甲烷(10毫升)稀释并用水(5毫升)及饱和食盐水(5毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并且旋干。粗品化合物用制备色谱仪纯化，得到化合物10。¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δppm 8.10(br s，1H)7.94(dd，J＝2.0，8.4Hz，1H)，7.43(d，J＝8.4Hz，2H)，7.35(d，J＝8.8Hz，2H)，6.96(d，J＝8.0Hz，1H)，6.83(s，1H)，4.72-4.76(m，1H)，3.86-3.92(m，1H)，3.61-3.66(m，1H)，2.71(s，3H)，2.43(s，3H)，1.71(s，3H)，1.54-1.57(m，2H)，1.35-1.50(m，2H).LCMS(ESI)m/z：557.1(M+1).

流程11

实施例11

化合物11-2的合成

将邻二甲苯(5.00g，47.09mmol，5.68mL，1.00eq)，NBS(17.60g，98.89mmol，2.10eq)，过氧化苯甲酰(228.13mg，941.80μmol，0.02eq)和氯仿(50.00毫升)的混合物在80℃搅拌5小时。反应液冷却到室温，然后加二氯甲烷(100毫升)稀释，分别用水洗涤(80毫升×2)，饱和食盐水洗涤(50毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤滤液减压浓缩干，得到的固体用(石油醚/乙醇＝30∶1；60mL/2mL)在80℃打浆20分钟，冷却到室温过滤，滤饼用石油醚(20毫升)洗涤，滤饼烘干，得到化合物11-2。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 7.40-7.36(m，2H)，7.34-7.30(m，2H)，4.68(s，4H)

化合物11-3的合成

将化合物11-2(6.00g，22.73mmol，3.06mL，1.00eq)，九水合硫化钠(16.38g，68.19mmol，11.45mL，3.00eq)，苄基三乙基氯化铵(258.86mg，1.14mmol，0.05eq)，二氯甲烷(60.00毫升)和水(60.00毫升)的混合物在18℃避光搅拌24小时。加二氯甲烷(100毫升)萃取，有机相分别用水(80毫升×5)洗涤，饱和食盐水(50毫升)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤滤液减压浓缩干，得到化合物11-3，未经进一步纯化直接用于下一步。¹H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 7.20-7.14(m，4H)，4.21(s，4H)

化合物11-4的合成

将化合物11-3(2.80g，20.56mmol，1.00eq)溶解在5～10℃的冰醋酸(15.00毫升)中，然后滴加双氧水(5.90g，52.02mmol，5.00mL，30％纯度纯度，2.53eq)，滴加完毕在20℃搅拌1小时，然后转移到90℃搅拌3小时，反应液冷却有固体析出，过滤滤饼用水(20毫升)洗涤，滤饼用乙醇(20毫升)80℃打浆20分钟，过滤滤饼烘干(1g)；滤液放置24小时后析出固体，过滤滤饼烘干(1g)，合并滤饼得到化合物11-4，未经进一步纯化直接用于下一步。¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δppm 7.41-7.35(m，2H)，7.35-7.29(m，2H)，4.39(s，4H)

化合物11-5的合成

将化合物11-4(300.00mg，1.78mmol，1.00eq)溶解在-10℃的浓硫酸(2.00毫升)中，然后加入硝酸钾(180.31mg，1.78mmol，1.00eq)在-10℃搅拌5分钟。在-10℃加入冰块(20g)淬灭，冰块融化有固体析出，过滤滤饼用水(10毫升)洗涤，滤饼烘干，得到化合物11-5，未经纯化直接用于下一步。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 8.30(s，1H)，8.24(dd，J＝2.0，8.5Hz，1H)，7.69(d，J＝8.5Hz，1H)，4.67(d，J＝8.3Hz，4H)

化合物11-6的合成

将化合物11-5(200.00mg，938.04μmol，1.00eq)和氯化亚锡二水合物(846.68mg，3.75mmol，312.43μL，4.00eq)溶解在乙醇(3.00毫升)中，然后在15℃滴加浓盐酸(1.32g，5.85mmol，1.20mL，37％纯度，6.23eq)，滴加完毕在80℃搅拌1小时。加NaOH溶液(2N)调pH＝10，减压浓缩～50毫升，然后用(二氯甲烷/甲醇＝10∶1)(40毫升×6)萃取，合并有机相用饱和食盐水洗涤(50毫升×2)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤滤液减压浓缩干，得到化合物11-6，未经进一步纯化直接用于下一步。LCMS(ESI)m/z：184.1，206.0(M+1)，(M+23).¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 6.98(d，J＝8.3Hz，1H)，6.56-6.52(m，1H)，6.50(s，1H)，5.31(brs，2H)，4.30(s，2H)，4.24(s，2H)

化合物11的合成

15℃氮气保护下将化合物1-11(1.00g，2.49mmol，1.00eq)和化合物11-6(547.49mg，2.99mmol，1.20eq)溶于无水N，N-二甲基甲酰胺(15.00毫升)中，加入HATU(946.77mg，2.49mmol，1.00eq)，滴加二异丙基乙胺(965.42mg，7.47mmol，1.30mL，3.00eq)，在15℃氮气氛围下搅拌1小时。反应液直接拉干，固体用40毫升水荡洗，二氯甲烷(30毫升×2)萃取，有机相用50毫升饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤旋干。粗品用快速过柱仪纯化得到化合物11。LCMS(ESI)m/z：567.1(M+1).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 9.68(s，1H)7.57(s，1H)，7.22-7.37(m，5H)，7.02(d，J＝8.8Hz，1H)，4.60-4.63(m，1H)，4.17-4.21(m，4H)，3.82-3.88(m，1H)，3.38-3.43(m，1H)，2.62(s，3H)，2.35(s，3H)，1.63(s，3H).

流程12

实施例12

化合物12-2的合成

将化合物12-1(2.00g，7.69mmol，1.00eq)，CuCN(1.04g，11.61mmol，2.54mL，1.51eq)，dppf(426.38mg，769.00μmol，0.10eq)，三(二亚苄基丙酮)二钯(442.25mg，769.00μmol，0.10eq)和N，N-二甲基甲酰胺(20.00毫升)的混合液加热到120℃搅拌16小时。反应液经硅藻土过滤，滤液减压浓缩。浓缩残留经硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝1/0～1/1)纯化。得到化合物12-2。¹H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 8.65(d，J＝2.3Hz，1H)，8.51(dd，J＝2.3，8.8Hz，1H)，8.36(d，J＝8.5Hz，1H)，4.08(s，3H).

化合物12-3的合成

向化合物12-2(900.00mg，4.37mmol，1.00eq)的冰醋酸(20.00毫升)溶液中加入还原铁粉(2.44g，43.70mmol，10.00eq)。所得反应液20℃下搅拌4小时。反应液经硅藻土过滤，减压浓缩。向浓缩残留中加入乙酸乙酯(150毫升)和饱和碳酸氢钠水溶液(pH 7～8)。有机相经饱和食盐水(100毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。浓缩残留经薄层层析板纯化，得到化合物12-3。LCMS(ESI)m/z：177.1(M+1).

化合物12-4的合成

-78℃下，向化合物12-3(490.00mg，2.78mmol，1.00eq)和Ti(i-PrO)₄(3.07g，10.81mmol，3.20mL，3.89eq)的四氢呋喃(15.00毫升)溶液中加入乙基溴化镁(3M，7.40mL，7.99eq)。所得反应液-78℃～15℃下(缓慢升温)搅拌16小时。随反应进行，有黄色固体析出，反应液逐渐变为土黄色粘稠。向反应液中加入饱和氯化铵溶液(30毫升)生成粘稠浆状液，加入乙酸乙酯(30毫升)，搅拌10分钟后经硅藻土过滤。滤液分液，有机相经饱和食盐水(30毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。浓缩残留经薄层层析板纯化，得到化合物12-4。LCMS(ESI)m/z：174.9(M+1).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 7.65(d，J＝8.0Hz，1H)，6.68(dd，J＝2.0，8.3Hz，1H)，6.43(br s，1H)，6.23(d，J＝1.8Hz，1H)，4.04(br s，2H)，1.52-1.46(m，2H)，1.37-1.32(m，2H).

化合物12的合成

将化合物12-4(15.64mg，89.80μmol，1.20eq)和二异丙基乙胺(29.02mg，224.51μmol，39.21μL，3.00eq)溶于无水N，N-二甲基甲酰胺(3.00毫升)中，加入化合物1-11(30.00mg，74.84μmol，1.00eq)和HATU(28.45mg，74.84μmol，1.00eq)，氮气置换三次，在15℃氮气氛围下搅拌16小时。反应液直接拉干，残留物溶解于15毫升二氯甲烷中，然后加入10毫升水荡洗，有机相用饱和食盐水(20毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤旋干。粗品用制备色谱仪纯化，得到化合物12。LCMS(ESI)m/z：557.2(M+1).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 9.91(br s，1H)，7.68(d，J＝8.0Hz，1H)，7.63(s，1H)，7.44(d，J＝8.8Hz，2H)，7.35(d，J＝8.8Hz，2H)，7.22(d，J＝8.0Hz，1H)，4.70-4.74(m，1H)，3.95-3.99(m，1H)，3.50-3.54(m，1H)，2.73(s，3H)，2.45(s，3H)，1.72(s，3H)，1.46-1.51(m，2H)，1.39-1.41(m，2H).

流程13

实施例13

化合物13-1的合成

将化合物11-3(1.80g，13.21mmol，1.00eq)溶解在甲醇(15.00毫升)中，然后滴加溶解高碘酸钠(2.83g，13.21mmol，732.26uL，1.00eq)的H2O(15.00毫升)溶液，滴加完毕在15℃搅拌12小时。将反应液减压浓缩到10毫升左右，加乙酸乙酯(20毫升×5)萃取，合并有机相用饱和食盐水(40毫升)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤滤液减压浓缩干，未经进一步纯化直接用于下一步，得到化合物13-1。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 7.40-7.36(m，2H)，7.36-7.31(m，2H)，4.34-4.27(m，2H)，4.22-4.13(m，2H)

化合物13-2的合成

将化合物13-1(600.00mg，3.94mmol，1.00eq)溶解在-10℃的浓硫酸(5.00毫升)中，然后加入硝酸钾(398.53mg，3.94mmol，1.00eq)在-10℃搅拌5分钟。在-10℃加入冰块(20g)淬灭，冰块融化，用(二氯甲烷/甲醇＝10∶1)萃取(30毫升×4)，合并有机相用饱和食盐水(40毫升)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤滤液减压浓缩，得到化合物13-2，未经纯化直接用于下一步。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 8.30(s，1H)，8.24(dd，J＝2.0，8.5Hz，1H)，7.69(d，J＝8.5Hz，1H)，4.67(d，J＝8.3Hz，4H)

化合物13-3的合成

将化合物13-2(300.00mg，1.52mmol，1.00eq)溶解在乙醇(8.00毫升)中，然后加入氯化亚锡二水合物(686.53mg，3.04mmol，253.33uL，2.00eq)在80℃搅拌1小时。加氢氧化钠溶液(1N)调pH＝10，减压浓缩～50毫升，然后用(二氯甲烷/甲醇＝10∶1)(40毫升×4)萃取，合并有机相用饱和食盐水洗涤(60毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤滤液减压浓缩干，粗品用薄层层析板纯化，得到化合13-3。LCMS(ESI)m/z：167.8(M+1)

化合物13的合成

依次将化合物1-11(60.00mg，149.67μmol，1.00eq)和化合物13-3(30.04mg，179.60μmol，1.20eq)加入到HATU(74.00mg，194.62μmol，1.30eq)的无水N，N-二甲基甲酰胺(3.00毫升)溶液中，再缓慢滴加二异丙基乙胺(59.20mg，458.06μmol，80.00uL，3.06eq)，15℃氮气保护下搅拌6小时。在反应液中加3毫升水进行淬灭反应，用3×5毫升二氯甲烷萃取，合并上述有机相，用饱和碳酸氢钠溶液(5毫升)和饱和食盐水(5毫升)洗涤有机相，再用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压旋干。得到粗品用制备色谱仪纯化，得到化合物13。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 9.35-9.73(m，1H)，7.54-7.64(m，1H)，7.22-7.38(m，5H)，7.09-7.23(m，1H)，4.62-4.64(m，1H)，3.94-4.18(m，4H)，3.81-3.93(m，1H)，3.40-3.50(m，1H)，2.62(s，3H)，2.34(s，3H)，1.62(s，3H).LCMS(ESI)m/z：550.1(M+1)

流程14&15

实施例14&15

将化合物13(38mg，69.08μmol)通过SFC分离(色谱柱：AD(250mm*30mm，10um)；流动相：[0.1％NH₃H₂O EtOH]；B％：55％-55％，50mL/min)得到化合物14(Rt＝0.837min)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 9.49(s，1H)，7.59(s，1H)，7.25-7.38(m，5H)，7.12(d，J＝8.0Hz，1H)，4.61-4.64(m，1H)，3.99-4.18(m，4H)，3.74-3.77(m，1H)，3.44-3.50(m，1H)，2.62(s，3H)，2.34(s，3H)，1.61(s，3H).LCMS(ESI)m/z：550.0(M+1)

化合物15(Rt＝1.666min)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 9.73(s，1H)，7.54(s，1H)，7.22-7.38(m，5H)，7.03(d，J＝8.8Hz，1H)，4.65-4.68(m，1H)，3.4.06-4.13(m，2H)，3.88-3.98(m，3H)，3.40-3.50(m，1H)，2.62(s，3H)，2.34(s，3H)，1.62(s，3H).LCMS(ESI)m/z：550.0(M+1)

流程16

实施例16

将化合物1-11(60.00mg，149.67μmol，1.00eq)和化合物16-1(24.28mg，179.60μmol，1.20eq)溶于无水二氯甲烷(5.00毫升)中，加入HATU(56.91mg，149.67μmol，1.00eq)，滴加二异丙基乙胺(58.03mg，449.01μmol，78.42μL，3.00eq)，在15℃氮气氛围下搅拌1小时。向反应液中加入10毫升水荡洗，有机相用饱和食盐水(20毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤旋干。粗品用制备色谱仪纯化，得到化合物16。

LCMS(ESI)m/z：518.0(M+1).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 8.88(s，1H)，7.62(s，1H)，7.44(d，J＝8.8Hz，2H)，7.36(d，J＝8.8Hz，2H)，7.32-7.34(m，1H)，7.16(d，J＝8.0Hz，1H)，5.08(s，4H)，4.62-4.65(m，1H)，3.79-3.85(m，1H)，3.48-3.53(m，1H)，2.71(s，3H)，2.43(s，3H)，1.71(s，3H).

流程17

实施例17

化合物17-2的合成

-20℃氮气保护下将浓硫酸(16.00毫升)慢慢加入到化合物17-1(3.90g，32.73mmol，3.71mL，1.00eq)溶于二氯甲烷(10.00毫升)的溶液中，滴加完后慢慢升温到20℃然后将二氯甲烷减压除去得到淡棕色溶液。将浓硝酸(5.60g，62.19mmol，4.00mL，1.90eq)(约含70％)慢慢滴加入到上述淡棕色溶液中，确保內温不超过20℃，滴加完后搅拌0.5小时。反应液慢慢加入到冰水(300毫升)中然后用固体碳酸氢钠调节pH＝8并加入甲基叔丁基醚(300毫升)搅拌1小时，分离有机相，水相用甲基叔丁基醚(200毫升×2)萃取，合并有机相用饱和食盐水(300毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并且旋干。得到化合物17-2未纯化并直接用于下一步反应。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 8.05(dd，J＝2.0，8.0Hz，1H)，8.03(s，1H)，7.30(d，J＝8.0Hz，1H)，4.24(s，4H)

化合物17-3的合成

0℃下往化合物17-2(150.00mg，913.74μmol，1.00eq)和三乙胺(277.38mg，2.74mmol，379.98uL，3.00eq)的无水二氯甲烷(5.00毫升)溶液中加入乙酰氯(71.73mg，913.74μmol，65.21uL，1.00eq)，反应在20℃下搅拌2小时。反应液直接旋干，粗品用薄层层析板纯化，得到化合物17-3。¹H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 8.08-8.15(m，2H)，7.35-7.41(m，1H)，4.84(s，2H)，4.81(s，2H)，2.13(s，3H)

化合物17-4的合成

将湿Pd/C(100.00mg，10％Pd)加入到化合物17-3(140.00mg，678.95μmol，1.00eq)的甲醇(3.00毫升)溶液中，氢气置换三次，在15℃下氢气球(15psi)条件下搅拌18小时。将反应液加硅藻土过滤，滤液直接减压浓缩干。得到化合物17-4无需纯化，直接投入下一步反应。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 7.01-7.07(m，1H)，6.57-6.65(m，2H)，4.67-4.73(m，4H)，2.15(s，3H)

化合物17的合成

依次将化合物1-11(200.00mg，498.90μmol，1.00eq)和化合物17-4(100.00mg，567.50μmol，1.14eq)加入到HATU(240.00mg，631.20μmol，1.27eq)的无水N，N-二甲基甲酰胺(5.00毫升)溶液中，再缓慢滴加三乙胺(146.00mg，1.44mmol，200.00uL，2.89eq)，15℃氮气保护下搅拌4小时。在反应液中加5毫升水进行淬灭反应，分液，水相用3×5毫升二氯甲烷萃取，合并上述有机相，用饱和碳酸氢钠溶液(5毫升)和饱和食盐水(5毫升)洗涤有机相，再用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压旋干。将上述粗品用制备色谱仪纯化，得到化合物17。¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δppm 9.16-9.20(m，1H)，7.61-7.70(m，1H)，7.31-7.43(m，5H)，7.14-7.18(m，1H)，4.62-4.76(m，5H)，3.81-3.84(m，1H)，3.47-3.52(m，1H)，2.69(s，3H)，2.41(s，3H)，2.15(s，3H)，1.69(s，3H).LCMS(ESI)m/z：559.1(M+1)

流程18

实施例18

化合物18-1的合成

依次将化合物17-2(30.00mg，182.75μmol，1.00eq)和(Boc)₂O(47.50mg，217.47μmol，50.00uL，1.19eq)加入到4-二甲氨基吡啶(1.00mg，8.19μmol，0.04eq)的无水二氯甲烷(3.00毫升)溶液中，再向反应液中缓慢滴加三乙胺(55.48mg，548.25μmol，76.00uL，3.00eq)，15℃氮气保护下搅拌6小时。在反应液中加3毫升水进行淬灭反应，分液，水相用3×5毫升二氯甲烷萃取，合并上述有机相，用饱和碳酸氢钠溶液(5毫升)和饱和食盐水(5毫升)洗涤有机相，再用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压旋干。得到化合物18-1无需纯化，直接投入下一步反应。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 8.00-8.15(m，2H)，7.28-7.38(m，1H)，4.68(d，J＝10.8Hz，4H)，1.45(s，9H)

化合物18-2的合成

将湿Pd/C(100.00mg，10％Pd)加入到化合物18-1(40.00mg，151.35μmol，1.00eq)的甲醇(3.00毫升)溶液中，氢气置换三次，在15℃下氢气球(15psi)条件下搅拌小时。将反应液加硅藻土过滤，滤液直接减压旋干。得到化合物18-2无需纯化，直接投入下一步反应。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 6.86-6.99(m，1H)，6.44-6.56(m，2H)，4.41-4.53(m，4H)，1.43(s，9H)

化合物18-3的合成

依次将化合物1-11(40.00mg，99.78μmol，1.00eq)和化合物18-2(30.00mg，128.05μmol，1.28eq)加入到HATU(48.00mg，126.24μmol，1.27eq)的无水N，N-二甲基甲酰胺(3.00毫升)溶液中，再缓慢滴加三乙胺(29.20mg，288.57μmol，40.00uL，2.89eq)，15℃氮气保护下搅拌小时。在反应液中加3毫升水进行淬灭反应，分液，水相用3×5毫升二氯甲烷萃取，合并上述有机相，用饱和碳酸氢钠溶液(5毫升)和饱和食盐水(5毫升)洗涤有机相，再用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压旋干。将上述粗品用制备色谱仪纯化，得到化合物18-3。LCMS(ESI)m/z：617.0(M+1)

化合物18的合成

15℃氮气保护下，将三氟乙酸(3.08g，27.01mmol，2.00mL，333.41eq)加入到化合物18-3(50.00mg，81.02μmol，1.00eq)的无水二氯甲烷(6.00毫升)溶液中，15℃搅拌4小时。将反应液直接浓缩旋干，加饱和碳酸氢钠水溶液将其pH调至7，用3×5毫升二氯甲烷萃取，合并上述有机相，用饱和食盐水(5毫升)洗涤有机相，再用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压旋干。将上述粗品用制备色谱仪纯化，得到化合物18。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 9.12(s，1H)，7.57(s，1H)，7.32-7.47(m，5H)，7.13-7.15(m，1H)，4.68-4.71(m，1H)，3.82-3.88(m，1H)，3.50-3.55(m，1H)，2.71(s，3H)，2.43(s，3H)，1.70(s，3H).LCMS(ESI)m/z：539.1(M+1)

流程19

实施例19

化合物19-1的合成

将三乙胺(948.78mg，9.38mmol，1.30mL，2.96eq)加入到化合物17-2(520.00mg，3.17mmol，1.00eq)的二氯甲烷(5.00毫升)溶液中，氮气保护下降温至0℃，向反应液中缓慢滴加甲磺酰氯(370.00mg，3.23mmol，250.00uL，1.02eq)，滴加完毕升温至15℃搅拌2小时。反应液直接减压浓缩，将上述粗品用快速过柱仪纯化得到化合物19-1。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 8.24(d，J＝8.4Hz，1H)，8.17(s，1H)，7.46(d，J＝8.4Hz，1H)，4.83(s，4H)2.97(s，3H)

化合物19-2的合成

将湿Pd/C(100.00mg，10％Pd)加入到化合物19-1(50.00mg，206.40μmol，1.00eq)的甲醇(3.00毫升)溶液中，氢气置换三次，在15℃下氢气球(15psi)条件下搅拌3小时。将反应液加硅藻土过滤，滤液直接减压旋干。得到化合物19-2无需纯化，直接投入下一步反应。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 6.95(d，J＝8.28Hz，1H)，6.54-6.57(m，1H)，6.50(s，1H)，4.52(s，4H)，2.78(s，3H)

化合物19的合成

依次将化合物1-11(60.00mg，149.67μmol，1.00eq)和化合物19-2(40.00mg，188.58μmol，1.26eq)加入到HATU(73.00mg，191.99μmol，1.28eq)的无水二氯甲烷(3.00毫升)溶液中，再缓慢滴加三乙胺(43.80mg，432.55μmol，60.00uL，2.89eq)，15℃氮气保护下搅拌2小时。在反应液中加3毫升水进行淬灭反应，分液，水相用3×5毫升二氯甲烷萃取，合并上述有机相，用饱和碳酸氢钠溶液(5毫升)和饱和食盐水(5毫升)洗涤有机相，再用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。将上述粗品用用薄层层析板纯化，得到化合物19。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 9.82(s，1H)7.51(s，1H)7.17-7.40(m，5H)6.96-6.98(m，1H)，4.68-4.70(m，1H)，4.49(d，J＝17.2Hz，4H)，3.83-3.89(m，1H)，3.46-3.51(m，1H)，2.82(s，3H)，2.62(s，3H)，2.35(s，3H)，1.62(s，3H).LCMS(ESI)m/z：595(M+1)

流程20

实施例20

化合物20的合成

将化合物18(140.00mg，270.77μmol，1.00eq)加入到冰醋酸(2.00毫升)和H2O(2毫升)的混合溶液中，再向反应液中缓慢滴加氰酸钠(35.00mg，538.38μmol，1.99eq)的水(2毫升)溶液，15℃下搅拌18小时。将反应液直接浓缩旋干。将粗品用制备色谱仪纯化，得到化合物20。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 9.09(s，1H)，7.58(s，1H)，7.24-7.37(m，5H)，7.08(d，J＝8.4Hz，1H)，4.50-4.58(m，5H)，4.42(br s，2H)，3.73-3.79(m，1H)，3.39-3.44(m，1H)，2.62(s，3H)，2.34(s，3H)，1.62(s，3H).LCMS(ESI)m/z：560.0(M+1)

流程21

实施例21

化合物21-2的合成

将化合物21-1(300.00mg，1.69mmol，1.00eq)和二乙胺基三氟化硫(545.91mg，3.39mmol，447.47μL，2.00eq)溶于无水二氯甲烷(10.00毫升)中，在15℃氮气氛围下搅拌16小时。反应液中加入30毫升水，然后用二氯甲烷(20毫升×2)萃取，有机相用30毫升饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤旋干。粗品用薄层层析板纯化，得到化合物21-2。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 8.13-8.17(m，2H)，7.39-7.42(m，1H)，3.51-3.59(m，4H).

化合物21-3的合成

将化合物21-2(70.00mg，351.49μmol，1.00eq)和Pd(OH)2/C(50mg，10％纯度)加入到甲醇(5.00毫升)中，在15℃氢气球氛围下搅拌16小时。反应液垫硅藻土过滤旋干。得到化合物21-3无需纯化直接投下一步反应。

化合物21的合成

将化合物1-11(60.00mg，149.67μmol，1.00eq)和化合物21-3(30.38mg，179.60μmol，1.20eq)加入到无水二氯甲烷(5.00毫升)中，随后加入HATU(56.91mg，149.67μmol，1.00eq)，滴加二异丙基乙胺(58.03mg，449.01μmol，78.42uL，3.00eq)氮气置换三次，在15℃氮气氛围下搅拌16小时。反应液直接旋干，然后加入10毫升水荡洗，用乙酸乙酯(10毫升×2)萃取，有机相用20毫升饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤旋干。粗品用制备色谱仪纯化，得到化合物21。LCMS(ESI)m/z：551.9(M+1).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 9.00(s，1H)，7.60(s，1H)，7.43(d，J＝8.4Hz，2H)，7.33-7.38(m，3H)，7.14(d，J＝8.0Hz，1H)，4.64-4.67(m，1H)，3.52-3.80(m，1H)，3.51-3.52(m，1H)，3.34-3.44(m，4H)，2.70(s，3H)，2.43(s，3H)，1.71(s，3H)

流程22

实施例22

化合物22-2的合成

往化合物22-1(1.00g，5.12mmol，1.00eq)和NBS(1.00g，5.63mmol，1.10eq)的四氯化碳(10.00毫升)溶液中加入过氧化苯甲酰(124.02mg，512.00μmol，0.10eq)反应在85℃下搅拌4小时。反应液直接旋干。粗品用快速过柱仪纯化得到化合物22-2。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 8.85(d，J＝2.4Hz，1H)，8.34-8.37(m，1H)，7.71(d，J＝8.8Hz，1H)，5.02(s，2H)，4.03(s，3H)

化合物22-3的合成

0℃氮气保护下，将硫代乙酸(288.90mg，3.80mmol，270.00uL，1.04eq)缓慢滴加到化合物22-2(1.00g，3.65mmol，1.00eq)和碳酸钾(948.40mg，6.86mmol，1.88eq)的丙酮(4.00毫升)溶液中，滴加完毕0℃氮气保护下搅拌30分钟，再升温至15℃搅拌3小时。将反应液浓缩除去丙酮，加入10毫升水稀释，用3×10毫升乙酸乙酯萃取，合并上述有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩干。将上述粗品用用薄层层析板纯化，得到化合物22-3。¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δppm 8.83(s，1H)，8.31-8.32(m，1H)，7.77(m，J＝8.4Hz，1H)，4.56(s，2H)，4.00(s，3H)，2.34(s，3H)

化合物22-4的合成

将化合物22-3(800.00mg，2.97mmol，1.00eq)加入到浓盐酸(5.88g，47.76mmol，4.00mL，16.08eq)中，90℃搅拌2小时。将反应液冷却至室温，用饱和碳酸氢钠溶液调节反应液至pH＝7。用3×10毫升乙酸乙酯萃取，分液，合并上述有机相，得到有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。将上述粗品用快速过柱仪纯化得到化合物22-4。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 8.59(m，J＝2.0Hz，1H)，8.43(dd，J＝8.4，2.0Hz，1H)，7.66(d，J＝8.4Hz，1H)，4.53(s，2H)

化合物22-5的合成

将湿Pd/C(50.00mg，10％Pd)加入到化合物22-4(100.00mg，512.30μmol，1.00eq)的甲醇(3.00毫升)溶液中，氢气置换三次，在15℃下氢气球(15psi)条件下搅拌18小时。将反应液加硅藻土过滤，滤液直接减压旋干。将上述粗品用薄层层析板纯化，得到化合物22-5。LCMS(ESI)m/z：165.8(M+1)

化合物22的合成

依次将化合物1-11(30mg，74.84μmol，1.00eq)和化合物22-5(99.218％纯度)加入到HATU(36.mg，94.68μmol，1.27eq)的无水N，N-二甲基甲酰胺(2毫升)溶液中，再缓慢滴加三乙胺(21.90mg，216.42μmol，30μL，2.89eq)，15℃氮气保护下搅拌18小时。在反应液中加3毫升水进行淬灭反应，分液，水相用3×5毫升二氯甲烷萃取，合并上述有机相，用饱和碳酸氢钠溶液(5毫升)和饱和食盐水(5毫升)洗涤有机相，再用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。将上述粗品用制备色谱仪纯化，得到化合物22。LCMS(ESI)m/z：548.1(M+1).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 10.08(s，1H)，8.01(s，1H)，7.66(d，J＝8.0Hz，1H)，7.29-7.46(m，5H)，4.80-4.83(m，1H)，4.30(s，2H)，3.97-4.03(m，1H)，3.58-3.63(m，1H)，2.78(s，3H)，2.45(s，3H)，1.71(s，3H)

流程23&24

实施例23&24

化合物23-1的合成

将化合物21-1(200.00mg，1.13mmol，1.00eq)和硼氢化钠(85.50mg，2.26mmol，2.00eq)溶于无水甲醇(5.00毫升)中，在15℃氮气氛围下搅拌1小时。反应液直接旋干，向其中加入20毫升水，然后用乙酸乙酯(10毫升×2)萃取，有机相用30毫升饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤旋干。得到化合物23-1无需纯化直接投下一步反应。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 8.00-8.03(m，2H)，7.31(d，J＝8.0Hz，1H)，4.75(br s，1H)，3.18-3.25(m，2H)，2.92-2.97(m，2H)，1.61(br s，1H).

化合物23-2的合成

将化合物23-1(190mg，1.06mmol，1.00eq)和二乙胺基三氟化硫(188.02mg，1.17mmol，154.12uL，1.1eq)溶于无水二氯甲烷(5.00毫升)中，在15℃氮气氛围下搅拌16小时。反应液中加入20毫升水，然后用二氯甲烷(20毫升×2)萃取，有机相用30毫升饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤旋干。粗品用薄层层析板纯化，得到化合物23-2。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 8.03-8.07(m，2H)，7.31-7.35(m，1H)，5.27-5.61(m，1H)，3.26-3.28(m，2H)，3.19-3.20(m，2H).

化合物23-3的合成

将化合物23-2(30mg，165.60μmol，1.00eq)和Pd/C(30mg，10％纯度)加入到甲醇(3毫升)中，在15℃氢气球氛围下搅拌2小时。反应液直接过滤旋干。得到化合物23-3无需纯化直接投下一步反应。¹H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 6.90-6.95(m，1H)，6.52(s，1H)，6.41-6.49(m，1H)，5.24-5.50(m，1H)，2.95-3.11(m，4H).

化合物23-4的合成

将化合物1-11(60mg，149.67μmol，1.00eq)和化合物23-3(25mg，165.37μmol，1.10eq)加入到无水二氯甲烷(3毫升)中，随后加入HATU(56.91mg，149.67μmol，1.00eq)，滴加二异丙基乙胺(58.03mg，449.01μmol，78.21uL，3.00eq)，氮气置换三次，在15℃氮气氛围下搅拌1小时。反应液直接旋干，然后加入10毫升水荡洗，随后用乙酸乙酯(10毫升×2)萃取，有机相用15毫升饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤旋干。粗品用制备色谱仪纯化，得到化合物23-4。LCMS(ESI)m/z：534.1(M+1).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm8.66(br s，1H)，7.60(br s，1H)，7.43(d，J＝8.4Hz，2H)，7.30-7.37(m，3H)，7.20(d，J＝8.4Hz，1H)，5.33-5.64(m，1H)，4.61-4.65(m，1H)，3.79-3.80(m，1H)，3.46-3.51(m，1H)，3.06-3.30(m，4H)，2.70(s，3H)，2.42(s，3H)，1.70(s，3H).

化合物23&24的合成

将化合物23-4(28mg，52.43μmol)送SFC分离((色谱柱：OJ(250mm×30mm，5μm)；流动相：[0.1％NH₃H₂OEtOH]；B％：30％-30％，60mL/min))得到化合物23(Rt＝5.404min)。LCMS(ESI)m/z：534.1(M+1).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 8.99(br s，1H)，7.50(s，1H)，7.23-7.34(m，5H)，7.06(br d，J＝8.0Hz，1H)，5.36(d，J＝53.2Hz 1H)，4.58-4.61(m，1H)，3.71-3.75(m，1H)，3.43-3.47(m，1H)，2.78-3.20(m，4H)，2.60(s，3H)，2.33(s，3H)，1.60(s，3H).

化合物24(Rt＝5.702min)。LCMS(ESI)m/z：534.1(M+1).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 9.00(s，1H)，7.52(s，1H)，7.20-7.34(m，5H)，7.07(br d，J＝8.0Hz，1H)，5.36(d，J＝52.0Hz，1H)，4.58-4.61(bm，1H)，3.65-3.72(m，1H)，3.45-3.49(m，1H)，3.02-3.31(m，4H)，2.60(s，3H)，2.33(s，3H)，1.60(s，3H).

流程25

实施例25

化合物25-1的合成

在15℃氮气氛围下向化合物16-1(300mg，2.22mmol，1eq)，碳酸氢钠(279.70mg，3.33mmol，129.49μL，1.5eq)的二氯甲烷(10毫升)和甲醇(2.5毫升)混合溶液中，滴加氯化碘(1M，2.44mL，1.1eq)，随后在此温度下搅拌4小时。在15℃搅拌下向反应液中滴加25毫升饱和Na2SO3溶液，随后用二氯甲烷(10毫升×2)萃取，有机相用20毫升饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤旋干。粗品用快速过柱仪纯化得到化合物25-1。LCMS(ESI)m/z：261.8(M+1).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 6.88(d，J＝8.0Hz，1H)，6.57(d，J＝8.0Hz，1H)，5.12(s，2H)，4.89(s，2H)，4.00(br s，2H).

化合物25-2的合成

在15℃下将化合物25-1(140mg，489.22μmol，1eq)，氟化铯(260.10mg，1.71mmol，63.13uL，3.5eq)，[1，1′-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(II)(35.80mg，48.92μmol，0.1eq)和甲基硼酸(87.85mg，1.47mmol，3eq)溶于二氧六环(5毫升)中，并在80℃氮气氛围下搅拌4小时。反应液过滤，然后加入20毫升水荡洗，随后用乙酸乙酯(10毫升×2)萃取，合并有机相，用20毫升饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤旋干。粗品用薄层层析板纯化，得到化合物25-2。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 6.81(d，J＝8.0Hz，1H)，6.56(d，J＝8.00Hz，1H)，4.99(s，4H)，3.52(br s，2H)，1.98(s，3H).

化合物25的合成

将化合物1-11(50mg，124.73μmol，1.00eq)和化合物25-2(27.91mg，187.09μmol，1.5eq)溶于无水二氯甲烷(3毫升)中，加入HATU(47.42mg，124.73μmol，1.00eq)，滴加二异丙基乙胺(48.36mg，374.18μmol，65.17μL，3.00eq)，在15℃氮气氛围下搅拌2小时。向反应液中加入10毫升水荡洗，有机相用饱和食盐水(20毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤旋干。粗品用制备色谱仪纯化，得到化合物25。LCMS(ESI)m/z：532.1(M+1).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 8.44(s，1H)，7.57(d，J＝7.6Hz，1H)，7.35(d，J＝8.4Hz，2H)，7.26(d，J＝8.4Hz，2H)，6.96(d，J＝8.0Hz，1H)，4.99-5.02(m，4H)，4.55-4.59(m，1H)，3.70-3.75(m，1H)，3.45-3.50(m，1H)，2.61(s，3H)，2.34(s，3H)，2.08(s，3H)，1.61(s，3H).

流程26

实施例26

实施例26的合成方法参照实施例25。

LCMS(ESI)m/z：532.1(M+1).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 8.39(s，1H)，7.75(s，1H)，7.36(d，J＝8.8Hz，2H)，7.27(d，J＝8.8Hz，2H)，6.97(s，1H)，4.98(d，J＝9.6Hz，4H)，4.53-4.57(m，1H)，3.73-3.78(m，1H)，3.42-3.47(m，1H)，2.62(s，3H)，2.34(s，3H)，2.24(s，3H)，1.62(s，3H).

流程27

实施例27

化合物27-2的合成

将邻二甲苯(20.00g，188.39mmol，22.73mL，1.00eq)，NBS(70.41g，395.62mmol，2.10eq)，过氧化苯甲酰(912.70mg，3.77mmol，0.02eq)和氯仿(200.00毫升)的混合物在80℃搅拌5小时，反应液冷却到室温，然后加二氯甲烷(200毫升)稀释，分别用水洗涤(100毫升×2)，饱和食盐水洗涤(100毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤滤液减压浓缩干，得到的固体用(石油醚/乙醇＝30∶1；240mL/8mL)在80℃重结晶，冷却到室温后固体析出，过滤，滤饼用石油醚(50毫升)洗涤，滤饼烘干得到化合物27-2。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 7.41-7.35(m，2H)，7.35-7.29(m，2H)，4.68(s，4H)

化合物27-3的合成

往0℃的化合物27-2(5g，18.94mmol，2.55mL，1eq)和浓硫酸(30毫升)溶液中分批加入硝酸钾(2.30g，22.73mmol，1.2eq)，然后在0℃搅拌3小时，反应液变成红棕色。将反应液向盛有200g冰块的500毫升烧杯中缓慢滴加，有淡黄色固体析出，然后在0℃搅拌1小时，然后过滤，滤饼用水(100毫升)洗涤，滤饼烘干，得到化合物27-3未经纯化直接用于下一步。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 8.39(d，J＝2.5Hz，1H)，8.19(dd，J＝2.4，8.4Hz，1H)，7.78(d，J＝8.3Hz，1H)，4.94(s，2H)，4.90(s，2H)

化合物27-4的合成

将金属钠(892.94mg，38.84mmol，920.56μL，2.4eq)加入乙醇(20毫升)中在10℃搅拌0.5小时至Na完全消失，然后加入丙二酸二乙酯(3.00g，18.73mmol，2.83mL，1.16eq)的四氢呋喃(10毫升)溶液，迅速加入化合物27-3(5g，16.18mmol，1eq)和四氢呋喃(10毫升)的混合溶液，然后在氮气保护下80℃回流1小时。将反应液减压浓缩干，加水(60毫升)，然后用乙酸乙酯萃取(50毫升×3)，合并有机相用饱和食盐水(50毫升)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤滤液减压浓缩干，经过柱层析分离纯化得到化合物27-4。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 8.13(s，1H)，8.06(dd，J＝2.3，8.3Hz，1H)，7.51(d，J＝8.3Hz，1H)，4.18-4.13(m，4H)，3.59(s，4H)，1.19-1.16(m，6H)

化合物27-5的合成

将化合物27-4(1.3g，4.23mmol，1eq)溶解在乙醇(20毫升)中，然后加入氯化亚锡二水合物(4.77g，21.15mmol，1.76mL，5eq)在80℃搅拌3小时。将反应液减压浓缩干，然后加NaOH溶液(4N)调节pH＝10，然后用乙酸乙酯萃取(40毫升×3)，合并有机相用饱和食盐水(50毫升)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤滤液减压浓缩干，经过柱层析分离纯化得到化合物27-5。LCMS(ESI)m/z：277.9(M+1).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 6.97(d，J＝8.0Hz，1H)，6.56-6.48(m，2H)，4.20(q，J＝7.2Hz，4H)，3.62(br s，2H)，3.50(s，2H)，3.48(s，2H)，1.27-1.24(t，J＝7.2Hz，6H)

化合物27-6的合成

将化合物27-5(500mg，1.80mmol，1eq)溶解在0℃的四氢呋喃(10毫升)中，然后加入四氢铝锂(157.39mg，4.15mmol，2.3eq)在0℃搅拌1小时，加水(0.2毫升)淬灭然后减压浓缩干，然后用乙酸乙酯(100毫升)在10℃打浆10分钟，过滤，滤饼用乙酸乙酯(50毫升)洗涤，滤液减压浓缩干后得到化合物27-6未经纯化直接用于下一步。

化合物27-7的合成

将化合物27-6(150mg，776.23μmol，1eq)溶解在四氢呋喃(3毫升)中，在0℃加入钠氢(46.57mg，1.16mmol，60％纯度，1.5eq)搅拌40分钟，然后加入对甲基苯磺酰氯(147.99mg，776.23μmol，1eq)和四氢呋喃(3毫升)的混合溶液，在0℃搅拌40分钟，然后减压浓缩干。得到油状物，向油状物中加水(50毫升)，用乙酸乙酯萃取(50毫升×3)，合并有机相用饱和食盐水(50毫升)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤滤液减压浓缩干，经过薄层层析板纯化，得到化合物27-7。LCMS(ESI)m/z：348.1(M+1)

化合物27-8的合成

将化合物27-7(50mg，143.91μmol，1eq)溶解在四氢呋喃(3毫升)中，然后加入钠氢(57.56mg，1.44mmol，60％纯度，10eq)在70℃搅拌5小时。加水(05毫升)淬灭反应，然后减压浓缩干后得到油状物。向油状物中加水(30毫升)，用(二氯甲烷/甲醇＝10/1)萃取(40毫升×3)，合并有机相用饱和食盐水(50毫升)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤滤液减压浓缩干，经过薄层层析板纯化，得到化合物27-8。LCMS(ESI)m/z：175.9(M+1).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 6.98(d，J＝8.0Hz，1H)，6.57(s，1H)，6.51(dd，J＝2.1，7.9Hz，1H)，4.67(s，4H)，3.62(br s，2H)，3.16(s，2H)，3.14(s，2H)

化合物27的合成

将二异丙基乙胺(58.03mg，449.01μmol，78.21uL，3eq)加入到化合物1-11(0.06g，149.67μmol，1eq)，化合物27-8(15.74mg，89.80μmol，388.88μL，0.6eq)和HATU(62.60mg，164.64μmol，1.1eq)的无水二氯甲烷(10毫升)溶液，反应在15℃氮气保护下搅拌1小时。反应液用二氯甲烷(10毫升)稀释然后依次用1N盐酸(5毫升)，水(5毫升)及饱和食盐水(10毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤然后旋干。粗品用制备色谱仪纯化，得到化合物27。LCMS(ESI)m/z：558.1(M+1).¹HNMR(CDCl₃400MHz)δppm8.58(s，1H)，7.52(s，1H)，7.42(d，J＝8.8Hz，2H)，7.33(d，J＝8.8Hz，2H)，7.23-7.26(m，1H)，7.11-7.23(m，1H)，4.66(s，4H)，4.58-4.65(m，1H)，3.74-3.79(m，1H)，3.43-3.48(m，1H)，3.21(s，2H)，3.18(s，2H)，2.67(s，3H)，2.40(s，3H)，1.69(s，3H).

流程28

实施例28

化合物28-2的合成

0℃氮气保护下，将化合物28-1(6g，32.87mmol，1eq)的四氢呋喃(10毫升)溶液缓慢滴加到四氢铝锂(2.50g，65.76mmol，2eq)和氯化锌(2.69g，19.72mmol，923.71uL，0.6eq)的四氢呋喃(20毫升)悬浊液中，滴加完毕升温至10℃搅拌6小时。将反应液冷却至0℃，加入10毫升水进行淬灭反应(淬灭过程产生白色沉淀)，用2M盐酸水溶液调节pH约为6。将上述混合溶液用3×20毫升乙酸乙酯萃取，分液，合并有机相，再用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。将上述粗品加入3毫升乙酸乙酯和10毫升石油醚，加热至75℃搅拌回流30分钟，冷却至室温，再加入20毫升石油醚搅拌20分钟(有白色固体析出)，过滤，滤饼直接烘干。得到化合物28-2。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 7.30(s，1H)，7.21-7.22(m，2H)，4.63(s，4H)，2.76(br s，1H)，2.67(br s，1H).

化合物28-3的合成

0℃氮气保护下，将三溴化磷(4.70g，17.38mmol，1.2eq)缓慢滴加到化合物28-2(2.5g，14.48mmol，1eq)的二氯甲烷(20毫升)溶液中，滴加完毕升温至10℃搅拌5小时稀释，用3×20毫升二氯甲烷萃取，合并上述有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩干。将上述粗品用快速过柱仪纯化得化合物28-3。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 7.30(d，J＝2.4Hz，1H)，7.21-7.24(m，2H)，4.53(d，J＝8.8Hz，4H).

化合物28-4的合成

将中性氧化铝(30g，294.23mmol，35.12eq)加入到化合物28-3(2.5g，8.38mmol，1eq)的正己烷(40毫升)的溶液中，75℃下搅拌3小时。将反应液冷却至10℃，过滤，滤液减压浓缩。将上述粗品用快速过柱仪纯化得化合物28-4。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 7.22-7.25(m，2H)，7.15-7.17(m，1H)，5.08(s，4H)

化合物28-5的合成

-10℃下，将化合物28-4(300mg，1.94mmol，1eq)的浓硫酸(2毫升)溶液缓慢滴加到硝酸钾(195.00mg，1.93mmol，9.94e-1eq)的浓硫酸(6毫升)溶液中。滴加完毕，-10℃下搅拌20分钟。将反应液倒入约10毫升冰中搅拌10分钟，用3×10毫升乙酸乙酯萃取，合并上述有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。将上述粗品用快速过柱仪纯化，得到化合物28-5。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 7.78(s，1H)，7.44(s，1H)，5.15(s，4H)

化合物28-6的合成

将氯化亚锡二水合物(900mg，3.99mmol，332.10uL，3.98eq)加入到化合物28-5(200mg，1.00mmol，1.00eq)的甲醇(4毫升)溶液中，20℃下搅拌5小时。将反应液直接旋干。将上述粗品用薄层层析板纯化，得到化合物28-6。¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δppm 7.33(s，1H)，7.0-7.06(m，1H)，5.01(m，4H)

化合物28的合成

0℃下将POCl3(133.87mg，873.08μmol，81.13uL，5eq)缓慢滴加到化合物28-6(40mg，235.84μmol，1.35eq)和化合物1-11(70mg，174.62μmol，1.00eq)的吡啶(3毫升)溶液中，0℃氮气保护下搅拌小时。在反应液中加3毫升冰水进行淬灭反应，用0.5M稀盐酸水溶液将上述混合溶液调至pH约为6，用3×5毫升乙酸乙酯萃取，合并上述有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。将上述粗品用制备色谱仪纯化，得到化合物28。LCMS(ESI)m/z：552.0(M+1).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 8.71(s，1H)，8.22(s，1H)，7.36(d，J＝8.4Hz，2H)，7.26(d，J＝8.4Hz，2H)，7.17(s，1H)，4.98(d，J＝4.0Hz，4H)，4.58(t，J＝6.8Hz，1H)，3.66-3.72(m，1H)，3.51-3.57(m，1H)，2.62(s，3H)，2.34(s，3H)，1.62(s，3H)

流程29

实施例29

化合物29-2的合成

在0℃氮气保护下将化合物29-1(5g，30.10mmol，1eq)的无水四氢呋喃(40毫升)溶液缓慢加入到四氢铝锂(2.28g，60.20mmol，2eq)和氯化锌(2.46g，18.06mmol，845.91uL，0.6eq)的无水四氢呋喃(100毫升)悬浊液中，加入后在10℃下反应小时。向反应液中缓慢加入水(3毫升)淬灭反应，再向反应液中加入水(50毫升)，水相用乙酸乙酯(50毫升×2)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥过滤然后旋干。得到化合物29-2未纯化直接用于下一步反应。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 7.21-7.23(m，1H)，6.93-7.03(m，2H)，4.53-4.55(m，4H)

化合物29-3的合成

将三溴化磷(7.76g，28.66mmol，1.2eq)在0℃氮气保护下缓慢加入到化合物29-2(3.73g，23.89mmol，1eq)的无水二氯甲烷(100毫升)溶液中，加入后在10℃氮气保护下反应6小时。反应液用水(50毫升)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥并过滤旋干。粗品利用快速过柱仪纯化，得到化合物29-3。

化合物29-4的合成

将中性氧化铝(40g，392.31mmol，29.89eq)加入到化合物29-3(3.7g，13.12mmol，1eq)的正己烷(80毫升)溶液中，加入后在75℃下反应20小时。将反应液降温至50℃，趁热过滤滤去不溶物，再用二氯甲烷(50毫升)洗涤滤饼，合并滤液并减压蒸干。得到化合物29-4不进行进一步纯化直接用于下一步反应。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 7.07-7.09(m，1H)，6.84-6.90(m，2H)，5.00(s，4H)

化合物29-5的合成

先将硝酸钾(878.27mg，8.69mmol，1eq)加入到浓硫酸(10毫升)溶液中，再用在-10℃冰盐浴中冷却下来的浓硫酸(5毫升)将化合物29-4(1.2g，8.69mmol，1eq)溶解后在冰盐浴下加入到上述反应液中，加入后在-10℃冰盐浴下反应30分钟。将反应液缓慢滴加到不断搅拌的碎冰(100毫升)上，过滤得到淡棕色固体粗品，粗品用乙酸乙酯(50毫升)溶解，再用无水硫酸钠干燥过滤后旋干。得到化合物29-5不进行进一步纯化直接用于下一步反应。¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δppm 8.71(d，J＝1.6Hz，1H)，8.51(dd，J＝2.0，8.4Hz，1H)，7.65(d，J＝8.4Hz，1H)，5.38(s，4H)

化合物29-6的合成

将化合物29-5(0.183g，999.25μmol，1eq)和氯化亚锡二水合物(901.91mg，4.00mmol，332.81uL，4eq)加入到无水甲醇(5毫升)中，加入后在30℃下反应4小时。将反应液直接旋干，残留物再用乙酸乙酯(50毫升)溶解，过滤滤去不溶物，将滤液用无水硫酸钠干燥过滤后旋干，得到化合物29-6不进行进一步纯化直接用于下一步反应。LCMS(ESI)m/z：153.9(M+1).

化合物29的合成

在0℃氮气保护下将POCl3(71.27mg，464.83μmol，43.20uL，2eq)加入到化合物1-11(100mg，232.41μmol，1eq)和化合物29-6(42.71mg，278.90μmol，1.2eq)的吡啶(2毫升)溶液中，加入后在15℃下反应2小时。向反应液中加入水(5毫升)，再用盐酸将水相调至pH＝7，用二氯甲烷(5毫升×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥过滤后旋干。利用薄层层析板进行纯化得到化合物29。LCMS(ESI)m/z：536.1(M+1).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 8.80(brs，1H)，8.13(d，J＝6.8Hz，1H)，7.36(d，J＝8.4Hz，2H)7.26(d，J＝8.8Hz，2H)，6.88(d，J＝10.0Hz，1H)，4.97(s，4H)，4.5-4.57(m，1H)3.64-3.66(m，1H)，3.52-3.54(m，1H)，2.61(s，3H)，2.34(s，3H)，1.62(s，3H)

流程30

实施例30

化合物30-2的合成

将化合物30-1(0.5g，2.79mmol，1eq)和Pd/C(0.5g，10％纯度纯度)加入到甲醇(5毫升)中，加入后用充满氢气的气球置换3次，后在20℃氢气球(15psi)保护下反应12小时。过滤滤去不溶物，再将滤液浓缩旋干，残留物再用二氯甲烷(50毫升)溶解，过滤得滤液，再将滤液旋干。得到化合物30-2不进行进一步处理直接用于下一步反应。¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δppm 7.19(d，J＝9.2Hz，1H)，6.96-6.98(m，2H)，5.12(s，3H)

化合物30的合成

先将化合物1-11(0.1g，232.41μmol，1eq)，化合物30-2(52.00mg，348.62μmol，1.5eq)和HATU(106.04mg，278.90μmol，1.2eq)加入到无水N，N-二甲基甲酰胺(2毫升)中，再在20℃下将二异丙基乙胺(60.08mg，464.83μmol，80.96uL，2eq)加入到上述溶液中，加入后在20℃下反应12小时。向反应液中加入水(5毫升)，再用二氯甲烷(5毫升×3)萃取，有机相减压浓缩然后加入水(10毫升)冻干除去残留的N，N-二甲基甲酰胺。利用制备色谱仪纯化，得到化合物30。LCMS(ESI)m/z：532.1(M+1).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 9.65(br s，1H)，8.09(d，J＝6.8Hz，1H)，7.68(d，J＝8.0Hz，1H)，7.33-7.35(m，2H)，7.24-7.27(m，3H)，5.15(s，2H)，4.62-4.66(m，1H)，3.80-3.86(m，1H)，3.46-3.51(m，1H)，2.64(s，3H)，2.35(s，3H)，1.63(s，3H)

流程31

实施例31

化合物31-2的合成

20℃氮气保护下往不停搅拌的化合物31-1(0.5g，4.54mmol，757.58uL，1eq)溶于正丁醇(10毫升)的溶液中加入溴化锂一水合物(1.19g，11.35mmol，2.5eq)和氢氧化锂一水合物(400.16mg，9.53mmol，2.1eq)溶于水(1毫升)的溶液，滴加完成后反应液升温到110℃搅拌0.1小时然后加入1，2-二(2-氯乙氧基)乙烷(849.27mg，4.54mmol，532.29uL，1eq)继续在该温度下搅拌5小时。反应用浓HCl调节pH＝4然后直接旋干，残留物加入二氯甲烷(50毫升)及水(30毫升)搅拌0.5小时，分离有机相用饱和食盐水(30毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥过滤然后旋干。粗品化合物用快速过柱仪纯化得到化合物31-2。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm6.89-6.90(m，4H)，4.09-4.11(m，4H)，3.73-3.79(m，8H)

化合物31-3的合成

将化合物31-2(50mg，222.96μmol，1eq)的乙腈(2毫升)溶液升温至85℃，缓慢滴加浓硝酸(38mg，337.71μmol，27.14uL，56％纯度，1.51eq)，滴加完毕，85℃下搅拌0.5小时。将反应液冷却至室温，倒入约10毫升冰中进行淬灭反应，用3×10毫升乙酸乙酯萃取，合并上述有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。得到化合物31-3无需纯化，直接投入下一步反应。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 7.86-7.89(m，1H)，7.81(d，J＝2.8Hz，1H)，6.93(d，J＝8.8Hz，1H)，4.17-4.23(m，4H)，3.84-3.85(m，2H)，3.77-3.80(m，2H)，3.71(s，4H)

化合物31-4的合成

将湿Pd/C(50mg，10％纯度)加入到化合物31-3(50mg，185.70μmol，1.00eq)的甲醇(10毫升)溶液中，氢气置换三次，在15℃下氢气球(15psi)条件下搅拌2小时。将反应液加硅藻土过滤，滤液直接减压旋干。得到化合物31-4无需纯化，直接投入下一步反应。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 6.75(d，J＝8.4Hz，1H)，6.26(d，J＝2.4Hz，1H)，6.18(dd，J＝8.4，2.4Hz，1H)，3.98-4.05(m，4H)，3.75-3.84(m，2H)，3.71(s，6H)，3.27(br s，2H).

化合物31的合成

依次将化合物1-11(35mg，87.31μmol，1.00eq)和化合物31-4(25mg，104.49μmol，1.20eq)加入到HATU(35.00mg，92.05μmol，1.05eq)的无水二氯甲烷(2毫升)溶液中，再缓慢滴加三乙胺(29.08mg，287.38μmol，40uL，3.29eq)，10℃氮气保护下搅拌6小时。在反应液中加3毫升水进行淬灭反应，用3×5毫升二氯甲烷萃取，合并上述有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。将上述粗品用制备色谱仪纯化，得到化合物31。LCMS(ESI)m/z：622.1(M+1).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 8.82(m，1H)，7.23-7.38(m，5H)，6.92-6.94(m，1H)，6.81-6.83(m，1H)，4.57-4.59(m，1H)，3.97-4.15(m，4H)，3.70-3.80(m，9H)，3.43-3.45(m，1H)，2.61(s，3H)，2.34(s，3H)，1.61(s，3H)

流程32

实施例32

化合物32-2的合成

将化合物32-1(0.78g，3.66mmol，1eq)，氨基甲酸叔丁酯(643.39mg，5.49mmol，1.5eq)，三(二亚苄基丙酮)二钯(335.29mg，366.15μmol，0.1eq)，碳酸铯(2.39g，7.32mmol，2eq)和4，5-双(二苯基磷)-9，9-二甲基氧杂蒽(211.86mg，366.15μmol，0.1eq)加入到1，4-二氧六环(10毫升)中，加入后在100℃氮气保护下反应12小时。向反应液中加入水(20毫升)，再加入乙酸乙酯(20毫升)，过滤滤去不溶物，水相再用乙酸乙酯(10毫升)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥过滤后旋干。利用快速过柱仪进行纯化得到化合物32-2。LCMS(ESI)m/z：250.1(M+1).

化合物32-3的合成

将三氟乙酸(3.85g，33.77mmol，2.5mL，18.30eq)加入到化合物32-2(0.46g，1.85mmol，1eq)的无水二氯甲烷(20毫升)中，加入后在20℃下反应12小时。用水(20毫升)洗涤反应液，再用饱和碳酸氢钠溶液将水相pH调至7，水相再用二氯甲烷(10毫升×2)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥过滤后旋干。得到化合物32-3不进行进一步纯化直接用于下一步反应。LCMS(ESI)m/z：149.8(M+1).

化合物32的合成

在0℃将POCl3(76.50mg，498.90μmol，46.36μL，2eq)加入到化合物1-11(100mg，249.45μmol，1eq)和化合物32-3(44.65mg，299.34μmol，1.2eq)的吡啶(2毫升)溶液中，加入后升温至20℃下反应1.5小时。向反应液中加入水(3毫升)淬灭反应，再用2N盐酸将水相pH调至7，水相用二氯甲烷(5毫升×3)萃取，有机相用无水硫酸钠干燥过滤后旋干。利用薄层色谱制备板进行纯化得到化合物32。LCMS(ESI)m/z：532.1(M+1).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 9.98(br s，1H)，7.94(d，J＝6.8Hz，1H)，7.67(d，J＝8.0Hz，1H)，7.32-7.36(m，3H)，7.24-7.27(m，2H)，5.08-5.16(m，2H)，4.57-4.61(m，1H)，3.78-3.84(m，1H)，3.45-3.50(m，1H)，2.63(s，3H)，2.36(s，3H)，1.63(s，3H)

流程33

实施例33

化合物33-2的合成

将化合物33-1(0.5g，2.51mmol，1eq)，CuO(19.99mg，251.25μmol，3.16uL，0.1eq)和碘化亚铜(478.51mg，2.51mmol，1eq)加入到浓氨水(5.46g，155.80mmol，6mL，62.01eq)中，加入后再向上述溶液中滴加几滴N-甲基吡咯烷酮，在微波合成仪140℃下反应0.5小时，再升温到150℃反应1小时。向反应液中加入水(10毫升)稀释反应液，再加入二氯甲烷(10毫升)，过滤滤去不溶物，水相用二氯甲烷(10毫升×2)萃取，有机相用无水硫酸钠干燥过滤然后旋干。得到化合物33-2不进行进一步纯化，直接用于下一步反应。LCMS(ESI)m/z：136.0(M+1).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 7.55(d，J＝9.6Hz，1H)，7.67(dd，J＝2.0，9.6Hz，1H)，6.50(s，1H)，4.63(br s，2H)

化合物33的合成

在0℃氮气保护下将POCl3(35.64mg，232.41μmol，21.60uL，2eq)加入到化合物1-11(50mg，116.21μmol，1eq)和化合物33-2(23.55mg，174.31μmol，1.5eq)的吡啶(1毫升)溶液中，加入后在20℃下反应2小时。向反应液中加入水2(毫升)淬灭反应，再用2N HCl将水相调至pH＝7，水相再用二氯甲烷(5毫升×3)萃取，有机相用无水硫酸钠干燥过滤然后旋干。用制备色谱仪纯化，得到化合物33。LCMS(ESI)m/z：518.1(M+1).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm9.87(br s，1H)，8.33(s，1H)，7.60(d，J＝9.2Hz，1H)，7.37(d，J＝8.8Hz，2H)，7.27(d，J＝8.8Hz，2H)，7.16-7.17(m，1H)，4.55-4.58(m，1H)，3.76-3.82(m，1H)，3.44-3.48(m，1H)，2.64(s，3H)，2.36(s，3H)，1.64(s，3H)

流程34&35

实施例34&35

化合物34-2的合成

将3-氯过氧苯甲酸(3.09g，15.23mmol，85％纯度)加入到化合物34-1(4.45g，17.89mmol，1eq)和对甲苯磺酸一水合物(3.43g，18.01mmol，1.01eq)的乙腈(25毫升)溶液中，升温至77℃搅拌30分钟，再缓慢滴加1，3，5-三甲苯(2.16g，17.99mmol，2.5mL，1.01eq)，滴加完毕，继续在77℃下搅拌3小时。将反应液冷却至室温减压浓缩，残留物加入20毫升石油醚洗涤，过滤，滤饼烘干。得到化合物34-2，无需纯化，直接投入下一步反应。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 8.24(d，J＝9.2Hz，1H)，8.17(d，J＝8.8Hz，1H)，8.06(d，J＝8.8Hz，2H)，7.97(d，J＝8.8Hz，2H)，7.49(d，J＝8.0Hz，2H)，7.12(d，J＝8.8Hz，2H)，2.58(s，3H)，2.51(s，9H).

化合物34-3的合成

0℃氮气保护下，将呋喃(5.60g，82.26mmol，5.98mL，5.55eq)滴加到化合物34-2(8g，14.83mmol，1eq)的甲苯(20毫升)溶液中，再缓慢滴加二(三甲基硅)氨基锂(1M，14.82mL)，滴加完毕，0℃氮气保护下搅拌3小时。将反应液冷却至0℃，加入4毫升饱和氯化铵溶液淬灭反应，用乙酸乙酯(3×5毫升)萃取，合并上述有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。将上述粗品用快速过柱仪纯化，得到化合物34-3。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 8.21(s，1H)，8.19(s，1H)，7.48-7.50(m，1H)，7.11-7.13(m，1H)，7.06-7.08(m，1H)，5.82-5.84(m，2H).

化合物34-4的合成

氮气保护下，将硼氢化钠(12.00mg，317.18μmol，1eq)的水(1毫升)溶液缓慢滴加到化合物34-3(60mg，317.18μmol，1eq)和Pd/C(5mg，10％纯度)的甲醇(2毫升)悬浊液中，25℃氮气保护下搅拌1小时。将反应液用加有硅藻土的漏斗过滤，滤液直接减压浓缩。得到化合物34-4，无需纯化，直接投入下一步反应。LCMS(ESI)m/z：162.1(M+1)

化合物34-5的合成

依次将化合物1-11(35mg，87.31μmol，1.00eq)和化合物34-4(17mg，105.46μmol，1.21eq)加入到HATU(35.00mg，92.05μmol，1.05eq)的无水N，N-二甲基甲酰胺(2毫升)溶液中，再缓慢滴加三乙胺(28.00mg，276.71μmol，38.51uL，3.17eq)，25℃氮气保护下搅拌1小时。在反应液中加3毫升水淬灭反应，分液，水相用二氯甲烷(3×5毫升)萃取，合并上述有机相，用饱和碳酸氢钠溶液(5毫升)和饱和食盐水(5毫升)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压旋干。得到的粗品用薄层层析板纯化，得到化合物34-5。LCMS(ESI)m/z：544.1(M+1)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 8.73(s，1H)，7.52(d，J＝46.4Hz，1H)，7.34(d，J＝8.4Hz，2H)，7.26(d，J＝7.6Hz，2H)，7.05-7.22(m，2H)，5.28(s，2H)，4.52-4.56(m，1H)4.68-3.74(m，1H)，3.37-3.41(m，1H)，2.60(s，3H)，2.33(s，3H)，1.61(s，3H)，1.27(d，J＝6.8Hz，2H)，1.19(d，J＝6.8Hz，2H).

化合物34&35的合成

化合物34-5(20mg，36.73μmol)通过手性分离进行纯化(色谱柱：AD(250mm×30mm，10μm)；流动相：[0.1％NH₃H₂O EtOH]；B％：50％-50％)，得到化合物34(Rt＝0.735分钟)。LCMS(ESI)m/z：544.1(M+1).¹H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 8.79(s，1H)，7.58(s，1H)，7.34(d，J＝8.4Hz，2H)，7.26(d，J＝8.4Hz，2H)，7.11-7.15(m，1H)，7.05-7.07(m，1H)，5.29(t，J＝3.8Hz，2H)，4.53-4.57(m，1H)4.67-3.73(m，1H)，3.38-3.42(m，1H)，2.60(s，3H)，2.33(s，3H)，1.91-1.96(m，2H)，1.61(s，3H)，1.25-1.29(m，2H)。

化合物35(Rt＝1.300分钟)。LCMS(ESI)m/z：544.1(M+1).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 8.76(s，1H)，7.46(s，1H)，7.34(d，J＝8.8Hz，2H)，7.26(d，J＝8.8Hz，2H)，7.21-7.22(m，1H)，7.05-7.07(m，1H)，5.28(s，2H)，4.53-4.57(m，1H)4.68-3.74(m，1H)，3.37-3.42(m，1H)，2.60(s，3H)，2.33(s，3H)，1.94-1.96(m，2H)，1.61(s，3H)，1.25-1.29(m，2H)。

流程36

实施例36

实施例36的合成方法参照实施例1。

LCMS(ESI)m/z：545.1(M+1)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 10.10(s，1H)，8.08(s，1H)，7.73(d，J＝8.0Hz，1H)，7.60(d，J＝8.0Hz，2H)，7.34(d，J＝8.8Hz，2H)，7.25(d，J＝8.8Hz，2H)，4.61-4.65(m，2H)3.80-3.86(m，1H)，3.48-3.53(m，1H)，2.65(s，3H)，2.36(s，3H)，1.63(s，3H)

流程37

实施例37

化合物37-2的合成

0℃氮气保护下，将甲基溴化镁(3M，9.39mL，3eq)缓慢滴加到化合物37-1(2g，9.39mmol，1eq)的无水四氢呋喃(20毫升)溶液中，滴加完毕升温至30℃氮气保护下搅拌3小时。将反应液冷却至0℃，缓慢滴加10毫升饱和氯化铵溶液淬灭反应，再用二氯甲烷(3×10毫升)进行萃取，合并上述有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩干。得到化合物37-2，无需纯化直接投入下一步反应。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 7.44(d，J＝2.0Hz，1H)，7.39(dd，J＝8.4，2.0Hz，1H)，7.22(d，J＝8.4，1H)，4.81(s，2H)，1.70(s，6H).

化合物37-3的合成

将化合物37-2(2.1g，8.57mmol，1eq)加入到活性二氧化锰(7.35g，84.54mmol，9.87eq)的无水四氢呋喃(15毫升)悬浊液中，70℃搅拌小时。将反应液冷却至室温，过滤，滤液减压浓缩干。得到化合物37-3，无需纯化直接投入下一步反应。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)7.65(d，J＝8.0Hz，1H)，7.57(dd，J＝8.0，1.2Hz，1H)，7.49(d，J＝1.2，1H)，1.59(s，6H).

化合物37-4的合成

依次将三(二亚苄基丙酮)二钯(380.00mg，414.98μmol，0.1eq)、4，5-双(二苯基磷)-9，9-二甲基氧杂蒽(240.0mg，414.78μmol，0.1eq)和碳酸铯(2.70g，8.29mmol，2eq)加入到化合物37-3(1g，4.15mmol，1eq)和氨基甲酸叔丁酯(700.00mg，5.98mmol，1.44eq)的无水1，4-二氧六环(10毫升)溶液中，100℃氮气保护下搅拌2小时。将反应液冷却至室温，向反应液中加入10毫升水，再用二氯甲烷(3×10毫升)进行萃取，合并上述有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩干，得到的粗品用硅胶柱纯化(洗脱条件：石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1)，得到化合物37-4。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 7.75(s，1H)，7.67(d，J＝8.0Hz，1H)7.04(dd，J＝8.4，1.6Hz，1H)，6.79(br s，1H)，1.58(s，6H)，1.47(s，9H).

化合物37-5的合成

将三氟乙酸(7.70g，67.53mmol，5mL，18.73eq)缓慢滴加到化合物37-4(1g，3.61mmol，1eq)的无水二氯甲烷(10毫升)溶液中，30℃下搅拌1小时。向反应液中加入5毫升水进行淬灭反应，用饱和碳酸氢钠溶液调节pH＝7，再用二氯甲烷(3×10毫升)萃取，合并上述有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。得到化合物37-5，无需纯化直接投入下一步反应。LCMS(ESI)m/z：177.8(M+1)。

化合物37的合成

0℃下将三氯氧磷(140.00mg，913.05μmol，84.85uL，5.23eq)缓慢滴加到化合物1-11(70mg，174.62μmol，1.00eq)和化合物37-5(40mg，225.73μmol，1.29eq)的吡啶(2毫升)溶液中，0℃氮气保护下搅拌1小时。在反应液中加3毫升水淬灭反应，用1摩尔/升盐酸溶液将上述反应液调至pH＝7，再用二氯甲烷(3×5毫升)萃取，合并上述有机相，用饱和碳酸氢钠溶液(5毫升)和饱和食盐水(5毫升)洗涤有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压旋干。将上述粗品用薄层层析板纯化，得到化合物37。LCMS(ESI)m/z：560.0(M+1)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δppm 9.89(br s，1H)，7.92(s，1H)，7.62(d，J＝8.4Hz，1H)7.36(d，J＝8.4Hz，2H)，7.25-7.30(m，3H)，4.57-4.61(m，1H)，3.78-3.81(m，1H)，3.45-3.50(m，1H)，2.62(s，3H)2.35(s，3H)，1.64(s，3H)，1.54(s，3H)，1.53(s，3H).

BRD4生化活性检测

实验准备：

1)实验使用BPS公司的BRD4-BD1和BRD4-BD2蛋白；ANASPEC公司的多肽；PerkinElmer公司的检测试剂；

2)实验应用TR-FRET的实验原理对化合物进行筛选。

3)相关对照化合物

实验步骤：

1)准备化合物板：

实验中的化合物板的准备通过Echo实现：

化合物稀释由Echo完成，3倍递减稀释成10个浓度：20000、6666.67、2222.22、740.74、246.91、82.305、27.435、9.145、3.048、1.016nM。

2)反应试剂的准备：

相关的反应试剂应在实验当天准备：

a)配制1X assay buffer；

b)配制3X的实验用组分溶液：

1.将试剂取出并放在冰上自然融化待用；

2.使用1X assay buffer来配置实验所用中的“溶液A”(蛋白溶液)，“溶液B”(多肽溶液)，和“溶液C”(检测试剂溶液)，并使得各个组分在实验反应体系中，形成3X的溶液，溶液A，B，C的量须足够该轮实验所需量。

3)实验操作步骤：

实验板即实验前使用ECHO准备好的含有化合物梯度浓度和相应的DMSO溶液的板子：

a)取出实验板，并向实验板的第2～23列，加入5μL/孔的“溶液A”(蛋白溶液)，再向实验板的第1和24列加入5ul/孔的1X assay buffer，1和24列作为实验系统中的Mincontrol；

b)离心1000转，30秒；

c)将板子置于23℃孵育20分钟；

d)孵育20分钟之后，向实验板的1～24列加入5μL/孔的“溶液B”(多肽溶液)；

e)离心1000转，30秒；

f)将板子置于23℃孵育20分钟；

g)孵育20分钟之后，向实验板的1～24列加入5μL/孔的“溶液C”(检测试剂溶液)；

h)离心1000转，30秒；

i)将板子置于23℃孵育40分钟；

j)将实验板置于EnVision上读板。

4)数据分析：

a)用每块实验板的相应的Max control和Min control来换算出该实验板的Z’值，并确保每块板的Z’值＞0.5；

b)对照化合物的信号通过XLFIT5计算出IC₅₀值，并确保其维持在历史数据平均值的3倍以内，结果见表1。

表1 BRD4检测IC50测试结果

结论：本发明化合物具有显著的BET Bromodomain抑制活性。

化合物32对人乳腺癌MDA-MB-231_luc细胞皮下异种移植肿瘤模型的体内药效学研究

1.实验设计

表2 受试物配制方法

表3 体内药效实验动物分组及给药方案

2.实验材料

2.1实验动物

种属：小鼠

品系：BALB/c裸小鼠

周龄及体重：6-8周龄，体重18-22克

性别：雌性

供应商：上海西普尔-必凯实验动物有限公司

3.实验方法与步骤

3.1细胞培养

人乳腺癌MDA-MB-231_luc细胞体外单层培养，培养条件为RPMI-1640培养基(供应商：Gibco；货号：22400-089；生产批号：4868546)中加10％胎牛血清，100U/ml的盘尼西林和100μg/ml的链霉素37℃5％CO₂培养。一周两次用胰酶-EDTA进行常规消化处理传代。当细胞处于指数生长期时，收取细胞，计数，接种。

3.2肿瘤细胞接种

将0.2mL 10*10⁶个MDA-MB-231_luc细胞皮下接种于每只裸小鼠的右后背(PBS∶Matrigel＝1∶1)。肿瘤平均体积达到100-150mm³时开始分组给药。

3.3肿瘤测量和实验指标

实验指标是考察肿瘤生长是否被抑制、延缓或治愈。每周两次用游标卡尺测量肿瘤直径。肿瘤体积的计算公式为：V＝0.5a×b²，a和b分别表示肿瘤的长径和短径。

化合物的抑瘤疗效用TGI(％)或相对肿瘤增殖率T/C(％)评价。TGI(％)，反映肿瘤生长抑制率。TGI(％)的计算：TGI(％)＝【(1-(某处理组给药结束时平均瘤体积-该处理组开始给药时平均瘤体积))/(溶剂对照组治疗结束时平均瘤体积-溶剂对照组开始治疗时平均瘤体积)】×100％。

相对肿瘤增殖率T/C(％)：计算公式如下：T/C％＝T_RTV/C_RTV×100％(T_RTV：治疗组RTV；C_RTV：阴性对照组RTV)。根据肿瘤测量的结果计算出相对肿瘤体积(relative tumorvolume，RTV)，计算公式为RTV＝V_t/V₀，其中V₀是分组给药时(即d₀)测量所得平均肿瘤体积，V_t为某一次测量时的平均肿瘤体积，T_RTV与C_RTV取同一天数据。

在实验结束后将检测肿瘤重量，并计算T/C_weight百分比，T_weight和C_weight分别表示给药组和溶媒对照组的瘤重。

3.4统计分析

统计分析，包括每个组的每个时间点的肿瘤体积的平均值和标准误(SEM)。治疗组在试验结束时给药后第21天表现出最好的治疗效果，因此基于此数据进行统计学分析评估组间差异。两组间比较用T-test进行分析，三组或多组间比较用one-way ANOVA进行分析，如果F值有显著性差异，应用Games-Howell法进行检验。如果F值无显著性差异，应用Dunnet(2-sided)法进行分析。用SPSS 17.0进行所有数据分析。p＜0.05认为有显著性差异。

4.实验结论

给药21天后，受试化合物32的抑瘤率TGI＝54.85％，T/C＝52.99％，p＝0.200；动物体重无明显变化，具有良好的耐受性。

化合物32人前列腺癌PC-3细胞皮下异种移植肿瘤模型的体内药效学研究

1.实验设计

受试物配制方法同表2，动物分组及给药方案同表3。

2.实验材料

2.1实验动物

种属：小鼠

品系：BALB/c裸小鼠

周龄及体重：6-8周龄，体重18-22克

性别：雄性

供应商：上海西普尔-必凯实验动物有限公司

3.实验方法与步骤

3.1细胞培养

人前列腺癌PC-3细胞体外单层培养，培养条件为F-12K培养基(供应商：Gibco；货号：21127-022；生产批号：1868870)中加10％胎牛血清，100U/mL的盘尼西林和100μg/mL的链霉素37℃ 5％CO₂培养。一周两次用胰酶-EDTA进行常规消化处理传代。当细胞处于指数生长期时，收取细胞，计数，接种。

3.2肿瘤细胞接种

将0.1mL 10*10⁶个PC-3细胞皮下接种于每只裸小鼠的右后背。肿瘤平均体积达到100-150mm³时开始分组给药。

3.3肿瘤测量，实验指标和统计分析同MDA-MB-231模型

4.实验结论

给药21天后，受试化合物32与溶剂对照组相比，具有显著的抑瘤作用(T/C＝44.63％，TGI＝58.4％，p＝0.033)；动物具有良好的耐受性。

化合物32在小鼠体内的药代动力学测试

以雌性Balb/c小鼠为受试动物，应用LC/MS/MS法测定小鼠静脉和灌胃给予化合物32后不同时刻血浆中的药物浓度。研究化合物32在小鼠体内的药代动力学行为，评价其药动学特征。

1.实验方案

1.1试验药品：化合物32

1.2试验动物：健康成年雌性Balb/c小鼠16只，按照体重相近的原则分成4组，每组4只。动物购买自上海灵畅生物科技有限公司实验动物有限公司，动物生产许可证号：SCXK(沪)2013-0018

1.3药物配制

称取适量样品，加入5％终体积的DMSO，再加入95％终体积的20％HP-β-CD，搅拌超声后得到0.5mg/mL的澄清溶液，过滤后用于静脉给药。

称取适量样品，溶于0.5％羧甲基纤维素钠溶液中，搅拌超声后得到0.5mg/mL的均一混悬液，用于灌胃给药。

1.4给药

雌性Balb/c小鼠8只，分成2组，过夜禁食后，第一组进行静脉给药，给药体积为2.5mL/kg，剂量为1mg/kg；第二组进行灌胃给药，给药体积为5mL/kg，剂量为2mg/kg。

2.操作

雌性Balb/c小鼠静脉给药后，分别在0.0833、0.25、0.5、1、2、4、8、及24小时交叉采血30μL，置于含有2μL EDTA-K₂的试管中；灌胃给药组后，分别在0.25、0.5、1、2、4、8及24小时交叉采血30μL，置于含有2μL EDTA-K₂的试管中。试管在3000g离心15分钟分离血浆，并于-60℃保存。给药2小时后动物可进食。

用LC/MS/MS法测定小鼠静脉和灌胃给药后，血浆中待测化合物的含量。方法的线性范围为2.00-6000nmol/L；血浆样品经乙腈沉淀蛋白处理后进行分析。药代动力学参数结果见表4。

表4 药代动力学参数结果

“--”：未测试。

实验结论：化合物32药代清除率低，吸收好。

化合物32对MC38小鼠结肠癌细胞动物移植瘤模型的体内抗肿瘤药效研究

1.实验设计

2.实验材料

2.1实验动物

种属：小鼠

品系：C57BL6小鼠

周龄及体重：6～7周龄，体重16-20克

性别：雌性

供应商：上海斯莱克实验动物有限责任公司

3.实验方法与步骤

3.1细胞培养

小鼠结肠癌MC38细胞(和元生物技术股份有限公司)体外单层培养，培养条件为10％胎牛血清的DMEM培养基(Gibco，货号：12100)，37℃5％CO₂的培养箱中培养。用0.25％胰酶-EDTA进行常规消化处理传代。当细胞处于指数生长期，饱和度为80％～90％时，收取细胞，计数，接种。

3.2肿瘤细胞接种

将0.1mL 2×10⁵个MC38细胞皮下接种于每只小鼠的右后背，待肿瘤平均体积达到～70mm³时，根据肿瘤体积进行随机分组给药。

3.3肿瘤测量

每周两次用游标卡尺测量肿瘤直径。肿瘤体积的计算公式为：V＝0.5×a×b²，a和b分别表示肿瘤的长径和短径。

化合物的抑瘤疗效用TGI(％)或相对肿瘤增殖率T/C(％)评价。相对肿瘤增殖率T/C(％)＝T_RTV/C_RTV×100％(T_RTV：治疗组RTV；C_RTV：阴性对照组RTV)。根据肿瘤测量的结果计算出相对肿瘤体积(relative tumor volume，RTV)，计算公式为RTV＝V_t/V₀，其中V₀是分组给药时(即D0)测量所得平均肿瘤体积，V_t为某一次测量时的平均肿瘤体积，T_RTV与C_RTV取同一天数据。

TGI(％)，反映肿瘤生长抑制率。TGI(％)＝[(1-(某处理组给药结束时平均瘤体积-该处理组开始给药时平均瘤体积))/(溶剂对照组治疗结束时平均瘤体积-溶剂对照组开始治疗时平均瘤体积)]×100％。在实验结束后将检测肿瘤重量，并计算T_weight/C_weight百分比，T_weight和C_weight分别表示给药组和溶媒对照组的瘤重。

3.4统计分析

统计分析基于试验结束时肿瘤体积和肿瘤重量运用SPSS软件进行分析。两组间比较用t-test进行分析，三组或多组间比较用one-way ANOVA进行分析，如果方差齐(F值无显著性差异)，应用LSD法进行分析，如果方差不齐(F值有显著性差异)，应用Games-Howell法进行检验。p＜0.05认为有显著性差异。

4.实验结论

给药20天后，受试化合物32的15mg/kg给药组相对肿瘤增殖率T/C＝33.68％，肿瘤生长抑制率TGI＝68.81％，p＜0.0001；25mg/kg给药组相对肿瘤增殖率T/C＝27.59％，TGI＝75.21％，p＜0.0001；50mg/kg给药组T/C＝10.04％，TGI＝93.46％，p＜0.0001。各给药组动物具有显著的抑瘤作用以及良好的耐受性。

Claims

1.式（Ⅰ）、（Ⅱ）所示化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐，

其中，

T选自CH或N；

R₁选自任选被1、2或3个R取代的：C_1-3烷基或C_1-3烷氧基；

R₂、R₃、R₄分别独立地选自H、F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN，或分别独立地选自任选被1、2或3个R取代的：C_1-6烷基或C_1-6杂烷基；

R₅选自H，或选自任选被1、2或3个R取代的C_1-3烷基；

R₆分别独立地选自H、F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN，或分别独立地选自任选被1、2或3个R取代的：C_1-6烷基或C_1-6杂烷基；

或者，连接在相同C原子上的两个R₆与相连的C原子一起组成C(=O)；

环A选自：C_3-7环烷基、5-12元杂环烷基或5-6元杂芳基；

环B是4-7元杂环烷基；

且结构单元

不选自：

n选自0、1、2、3、4、5或6；

R分别独立地选自F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN，或选自任选被1、2或3个R’取代的：C_1-6烷基或C_1-6杂烷基；

R’分别独立地选自F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN或Me；

带“*”碳原子为手性碳原子，以（R）或（S）单一对映体形式或富含一种对映体形式存在；

所述C_1-6杂烷基、5-12元杂环烷基、5-6元杂芳基、4-7元杂环烷基之“杂”选自N、-O-、-S-、-NH-、-C(=O)NH-、-C(=O)-、-C(=O)O-、-S(=O)₂-、-S(=O)-、-C(=O)S-；

上述杂原子或杂原子团的数目分别独立地选自1、2、3 或4，

其中所述式（Ⅰ）、（Ⅱ）所示化合物不包括以下化合物：

2.根据权利要求1所述化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐，其中，R选自F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN，或选自任选被1、2或3个R’取代的：C_1-3烷基或C_1-3烷氧基。

3.根据权利要求2所述化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐，其中，R选自F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN，或选自任选被1、2或3个R’取代的：Me、Et或

4.根据权利要求3所述化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐，其中，R选自：F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN、Me、CF₃、Et或

Figure 715298DEST_PATH_FDA0002996757760000023

5.式（Ⅰ）、（Ⅱ）所示化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐，

其中，

T选自CH或N；

R₁选自任选被1、2或3个R取代的：C_1-3烷基或C_1-3烷氧基；

R₅选自H，或选自任选被1、2或3个R取代的C_1-3烷基；

环A选自C_4-6环烷基、吡咯烷-2-酮基、嘧啶-4(3H)-酮基、5-氮杂螺[2.4]庚烷-4-酮基、4-氮杂螺[2.4]庚烷-5-酮基、四氢噻吩-1,1-二氧化物基、四氢噻吩-1-氧化物基、四氢呋喃基、吡咯烷基、二氢噻吩-2(3H)-酮基、2-氧杂螺[3.4]辛烷基、二氢呋喃-2(3H)-酮基、1,4,7,10-四氧环十二烷基、1,2,5-恶二唑基、7-氧杂二环[2.2.1]庚烷、吡咯烷-2,5-二酮或5,5-二甲基二氢呋喃-2(3H)-酮基；

环B是4-7元杂环烷基；

且结构单元

不选自：

n选自0、1、2、3、4、5或6；

R’分别独立地选自F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN或Me；

上述杂原子或杂原子团的数目分别独立地选自1、2、3或4。

6.根据权利要求5所述化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐，其中，R选自F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN，或选自任选被1、2或3个R’取代的：C_1-3烷基或C_1-3烷氧基。

7.根据权利要求6所述化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐，其中，R选自F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN，或选自任选被1、2或3个R’取代的：Me、Et或

8.根据权利要求7所述化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐，其中，R选自：F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN、Me、CF₃、Et或

9.式（Ⅰ）、（Ⅱ）所示化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐，

其中，

T选自CH或N；

R₁选自任选被1、2或3个R取代的：C_1-3烷基或C_1-3烷氧基；

R₅选自H，或选自任选被1、2或3个R取代的C_1-3烷基；

环A选自：C_3-7环烷基、5-12元杂环烷基或5-6元杂芳基；

环B是4-7元杂环烷基；

且结构单元

选自

n选自0、1、2、3、4、5或6；

R’分别独立地选自F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN或Me；

上述杂原子或杂原子团的数目分别独立地选自1、2、3或4。

10.根据权利要求9所述化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐，其中，R选自F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN，或选自任选被1、2或3个R’取代的：C_1-3烷基或C_1-3烷氧基。

11.根据权利要求10所述化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐，其中，R选自F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN，或选自任选被1、2或3个R’取代的：Me、Et或

12.根据权利要求11所述化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐，其中，R选自：F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN、Me、CF₃、Et或

13.根据权利要求1-12任意一项所述化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐，其中，R₁选自任选被1、2或3个R取代的：Me、Et或

14.根据权利要求13所述化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐，其中，R₁选自：Me、Et、CF₃或

15.根据权利要求1-12任意一项所述化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐，其中，R₂、R₃、R₄分别独立地选自H、F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN，或分别独立地选自任选被1、2或3个R取代的：C_1-3烷基或C_1-3烷氧基。

16.根据权利要求15所述化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐，其中，R₂、R₃、R₄分别独立地选自H、F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN、Me或

17.根据权利要求1-12任意一项所述化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐，其中，R₅选自H或Me。

18.根据权利要求1-12任意一项所述化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐，其中，R₆分别独立地选自H、F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN，或分别独立地选自任选被1、2或3个R取代的：C_1-3烷基或C_1-3杂烷基。

19.根据权利要求18所述化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐，其中，R₆分别独立地选自H、F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN，或分别独立地选自任选被1、2或3个R取代的：Me、Et、

20.根据权利要求19所述化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐，其中，R₆分别独立地选自H、F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN、Me、Et、

21.根据权利要求9所述化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐，其中，结构单元

选自

22.根据权利要求20或21所述化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐，其中，结构单元

选自

23.根据权利要求1-12任意一项所述化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐，其中，结构单元

选自

24.式（I-1）、（I-2）、（I-3）、（I-4）、（I-5）、（I-6）、（I-7）、（I-8）、（I-9）、（I-10）、或（I-11）所示化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐，其选自

其中，

T₁选自：-S(=O)-、-S(=O)₂-、-N(R₆)-、-O-、-C(R₆)(R₆)- 或

T₂分别独立地选自：-NH-、-O-或-S-；

R₁-R₆如权利要求1-20中任一项所定义；

带“*”碳原子为手性碳原子，以（R）或（S）单一对映体形式或富含一种对映体形式存在。

25.下式化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐，其选自

26.根据权利要求25所述化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐，其选自：

27.一种药物组合物，包括治疗有效量的根据权利要求1-26任意一项所述的化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐作为活性成分以及药学上可接受的载体。

28.根据权利要求1-26任意一项所述的化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐或者权利要求27的组合物在制备用于治疗BET Bromodomain相关疾病的药物中的应用。

29.根据权利要求1-26任意一项所述的化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐或者权利要求27的组合物在制备用于治疗BRD4相关疾病的药物中的应用。

30.根据权利要求1-26任意一项所述的化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐或者权利要求27的组合物在制备用于治疗肿瘤的药物中的应用。

31.根据权利要求1-26任意一项所述的化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐或者权利要求27的组合物在制备用于治疗乳腺癌、结直肠癌或前列腺癌的药物中的应用。

32.根据权利要求1-26任意一项所述的化合物、其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐或者权利要求27的组合物在制备用于治疗三阴性乳腺癌或结肠癌的药物中的应用。