CN111357976A - 一种竹荪提取物及其工业化制备方法和用途 - Google Patents
一种竹荪提取物及其工业化制备方法和用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111357976A CN111357976A CN201910947360.5A CN201910947360A CN111357976A CN 111357976 A CN111357976 A CN 111357976A CN 201910947360 A CN201910947360 A CN 201910947360A CN 111357976 A CN111357976 A CN 111357976A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- extract
- dictyophora indusiata
- drying
- enzyme activity
- equal
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 241001313710 Dictyophora indusiata Species 0.000 title claims abstract description 57
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 15
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 46
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 39
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 39
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 39
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 23
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 16
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 16
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 13
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 claims abstract description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 230000036039 immunity Effects 0.000 claims abstract description 4
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 claims abstract description 3
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 38
- 235000017166 Bambusa arundinacea Nutrition 0.000 claims description 29
- 235000017491 Bambusa tulda Nutrition 0.000 claims description 29
- 241001330002 Bambuseae Species 0.000 claims description 29
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims description 29
- 235000015334 Phyllostachys viridis Nutrition 0.000 claims description 29
- 239000011425 bamboo Substances 0.000 claims description 29
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 28
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 21
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 21
- 241001313708 Dictyophora phalloidea Species 0.000 claims description 17
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 12
- 238000007873 sieving Methods 0.000 claims description 10
- 238000007605 air drying Methods 0.000 claims description 9
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 9
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 claims description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 9
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 9
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims description 8
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 8
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims description 7
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 6
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 4
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 4
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 claims description 4
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 claims description 4
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 claims description 4
- 108090000145 Bacillolysin Proteins 0.000 claims description 3
- 108091005658 Basic proteases Proteins 0.000 claims description 3
- 108010004032 Bromelains Proteins 0.000 claims description 3
- 108091005507 Neutral proteases Proteins 0.000 claims description 3
- 102000035092 Neutral proteases Human genes 0.000 claims description 3
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 claims description 3
- 235000019835 bromelain Nutrition 0.000 claims description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 3
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 3
- 229940055729 papain Drugs 0.000 claims description 3
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 claims description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 claims description 3
- 108091005508 Acid proteases Proteins 0.000 claims description 2
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 claims description 2
- 108090000270 Ficain Proteins 0.000 claims description 2
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 claims description 2
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 claims description 2
- 108010059820 Polygalacturonase Proteins 0.000 claims description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 2
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 claims description 2
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 claims description 2
- 239000006071 cream Substances 0.000 claims description 2
- 239000007919 dispersible tablet Substances 0.000 claims description 2
- 239000008298 dragée Substances 0.000 claims description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims description 2
- 239000002662 enteric coated tablet Substances 0.000 claims description 2
- 108010093305 exopolygalacturonase Proteins 0.000 claims description 2
- 235000019836 ficin Nutrition 0.000 claims description 2
- POTUGHMKJGOKRI-UHFFFAOYSA-N ficin Chemical compound FI=CI=N POTUGHMKJGOKRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000007941 film coated tablet Substances 0.000 claims description 2
- 108010026195 glycanase Proteins 0.000 claims description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 2
- 238000005374 membrane filtration Methods 0.000 claims description 2
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 claims description 2
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 claims description 2
- OQUKIQWCVTZJAF-UHFFFAOYSA-N phenol;sulfuric acid Chemical group OS(O)(=O)=O.OC1=CC=CC=C1 OQUKIQWCVTZJAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000009288 screen filtration Methods 0.000 claims description 2
- 239000007940 sugar coated tablet Substances 0.000 claims description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 claims description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 claims 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 abstract description 6
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 abstract description 3
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 abstract description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 abstract 1
- 241000252212 Danio rerio Species 0.000 description 54
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 26
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 24
- GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L sodium sulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])=O GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 20
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 15
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 15
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 15
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 13
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 11
- OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N azane;(2e)-3-ethyl-2-[(e)-(3-ethyl-6-sulfo-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazinylidene]-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical compound [NH4+].[NH4+].S/1C2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N(CC)C\1=N/N=C1/SC2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N1CC OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N 0.000 description 10
- 235000010265 sodium sulphite Nutrition 0.000 description 10
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 10
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 9
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 9
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 8
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 8
- 230000006870 function Effects 0.000 description 8
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 7
- 230000000242 pagocytic effect Effects 0.000 description 7
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 description 7
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 6
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 6
- HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N dpph Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1[N]N(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 6
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 6
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 6
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 6
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 description 6
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 6
- 230000008736 traumatic injury Effects 0.000 description 6
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 5
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 4
- 230000004720 fertilization Effects 0.000 description 4
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 4
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 4
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- USHAGKDGDHPEEY-UHFFFAOYSA-L potassium persulfate Chemical compound [K+].[K+].[O-]S(=O)(=O)OOS([O-])(=O)=O USHAGKDGDHPEEY-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 3
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 3
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 3
- 238000003815 supercritical carbon dioxide extraction Methods 0.000 description 3
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 description 3
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 2
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- PGSADBUBUOPOJS-UHFFFAOYSA-N neutral red Chemical compound Cl.C1=C(C)C(N)=CC2=NC3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 PGSADBUBUOPOJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 2
- 108010008359 protein kinase C lambda Proteins 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000002000 scavenging effect Effects 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- OCZVHBZNPVABKX-UHFFFAOYSA-N 1,1-diphenyl-2-(2,4,6-trinitrophenyl)hydrazine;ethanol Chemical compound CCO.[O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1NN(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 OCZVHBZNPVABKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 1
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 1
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 1
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001313734 Dictyophora Species 0.000 description 1
- 108010049047 Echinocandins Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 235000009815 Momordica Nutrition 0.000 description 1
- 241000218984 Momordica Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241001527087 Panax vietnamensis Species 0.000 description 1
- 235000017726 Panax vietnamensis Nutrition 0.000 description 1
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 description 1
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 1
- 208000004880 Polyuria Diseases 0.000 description 1
- 230000002292 Radical scavenging effect Effects 0.000 description 1
- 235000009499 Vanilla fragrans Nutrition 0.000 description 1
- 244000263375 Vanilla tahitensis Species 0.000 description 1
- 235000012036 Vanilla tahitensis Nutrition 0.000 description 1
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 230000002929 anti-fatigue Effects 0.000 description 1
- 230000003064 anti-oxidating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 235000021167 banquet Nutrition 0.000 description 1
- 238000010009 beating Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 238000007664 blowing Methods 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 230000003467 diminishing effect Effects 0.000 description 1
- MGJZITXUQXWAKY-UHFFFAOYSA-N diphenyl-(2,4,6-trinitrophenyl)iminoazanium Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1N=[N+](C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 MGJZITXUQXWAKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGLRDKLJZLEJCY-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogenphosphate dodecahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.[Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O DGLRDKLJZLEJCY-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 230000035619 diuresis Effects 0.000 description 1
- 208000001848 dysentery Diseases 0.000 description 1
- 230000000925 erythroid effect Effects 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 230000007760 free radical scavenging Effects 0.000 description 1
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000002398 materia medica Substances 0.000 description 1
- 230000008897 memory decline Effects 0.000 description 1
- 238000001471 micro-filtration Methods 0.000 description 1
- 239000012982 microporous membrane Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 231100000956 nontoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 230000004792 oxidative damage Effects 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 231100000167 toxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 230000002936 tranquilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 229960002166 vinorelbine tartrate Drugs 0.000 description 1
- GBABOYUKABKIAF-IWWDSPBFSA-N vinorelbinetartrate Chemical compound C1N(CC=2C3=CC=CC=C3NC=22)CC(CC)=C[C@H]1C[C@]2(C(=O)OC)C1=CC(C23[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]4(CC)C=CCN([C@H]34)CC2)(O)C(=O)OC)N2C)=C2C=C1OC GBABOYUKABKIAF-IWWDSPBFSA-N 0.000 description 1
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 1
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L31/00—Edible extracts or preparations of fungi; Preparation or treatment thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L5/00—Preparation or treatment of foods or foodstuffs, in general; Food or foodstuffs obtained thereby; Materials therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/06—Fungi, e.g. yeasts
- A61K36/07—Basidiomycota, e.g. Cryptococcus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P39/00—General protective or antinoxious agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/04—Polysaccharides, i.e. compounds containing more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic bonds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/14—Preparation of compounds containing saccharide radicals produced by the action of a carbohydrase (EC 3.2.x), e.g. by alpha-amylase, e.g. by cellulase, hemicellulase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/06—Preparation of peptides or proteins produced by the hydrolysis of a peptide bond, e.g. hydrolysate products
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/10—Preparation or pretreatment of starting material
- A61K2236/19—Preparation or pretreatment of starting material involving fermentation using yeast, bacteria or both; enzymatic treatment
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
- A61K2236/51—Concentration or drying of the extract, e.g. Lyophilisation, freeze-drying or spray-drying
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Zoology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Mycology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Botany (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
本发明涉及一种竹荪提取物及其工业化制备方法和用途，所述竹荪提取物中总糖含量不低于25wt％，肽含量为20～30wt％。本发明将竹荪粉碎、酶提取、过滤、浓缩、干燥后，得到竹荪提取物。制备工序中没有用到任何有机溶剂，较为适合大规模生产。所制备的竹荪提取物具有较好的抗氧化活性，缓解大脑和运动疲劳，增强人体免疫力的功效，对神经具有保护作用，可预防、改善或治疗记忆力衰退引起相关疾病。
Description
技术领域
本发明涉及一种竹荪提取物的产品，富含糖类、肽类等对人体有益的化学成分。本发明还涉及到竹荪提取物的制备工艺，通过酶提取、过滤、浓缩干燥而成，该提取物可用作食品、保健食品或者药品。
背景技术
竹荪又名竹参、竹笙、网纱菌，隶属于担子菌亚门、腹菌纲、鬼笔目、竹荪属，是寄生于枯竹根部的一种隐花菌类，属于珍贵的药食同源大型真菌，长裙、短裙、红托和棘托竹荪是较为常见的品种。竹荪自古被列为“草八珍”之一，《楚辞·九歌》称其为“香草”，历史上列为宫廷贡品，近代常现身国宴名肴中，因此享有“山珍之王”“菌中皇后”等美誉。鲜美的风味、丰富的营养和不菲的经济价值，使得竹荪并在云南、贵州、四川、湖南等地大规模栽培，并一直受到医药和食品界学者与企业的普遍关注。竹荪性凉，味甘微苦，归肺、胃经，《本草纲目》等医著记载其有宁神健体、益气补脑、润肺养阴、消炎止痛、清热利湿等功效，可治肺虚、热咳、咽喉炎、风湿、痢疾等症。现代医学研究表明，竹荪具有降血脂、降血糖、抗衰老等功效。近年来，科学家开始对竹荪的化学成分研究，糖类和蛋白类成分是竹荪的主要化学成分。目前获得竹荪提取物的方法主要是水提取法和有机溶剂提取法，两种方法可以将竹荪中的糖类成分提取出来，但蛋白类成分很难提取彻底，而且两种方法需要高温多次提取，得率也不高，资源利用率低，从而造成成本高。针对这一问题，本发明经过多次试验，成功研究出生物酶提取法。此方法在提取液中添加了少量的生物酶以提高提取效率，同时可将竹荪中的蛋白质转化成较好被人体吸收利用的肽类物质，提取温度温和，提取次数仅为一次，这样大大提高了资源利用率，降低了生产成本，绿色环保，适合大规模生产。
发明内容
本发明的目的是提供了一种富含糖类和肽类竹荪提取物。
本发明的另一目的是提供了一种富含糖类和肽类的竹荪提取物的制备方法。
本发明的另一目的是提供了本发明竹荪提取物用于制备预防或治疗自由基过多引起的症状的食品、保健食品或药品的应用。
本发明的另一目的是提供了本发明竹荪提取物用于制备预防、改善或者治疗神经相关疾病的食品、保健食品或者药品的应用。
本发明的另一目的是提供了本发明竹荪提取物用于制备改善或治疗记忆力衰退的食品、保健食品或者药品的应用。
本发明的另一目的是提供了本发明竹荪提取物用于制备治疗或预防帕金森症和阿尔茨海默症的食品、保健食品或者药品的应用。
本发明的另一目的是提供了含有本发明竹荪提取物的药物和食品组合物。
本发明的目的是通过下述技术方案实现的：
一种竹荪提取物，其特征在于通过下述方法制备得到：将竹荪鲜品或干品与水混合，进行酶提取，提取液经过滤浓缩至30-80℃时的相对密度1.0～1.2g/mL，干燥得到竹荪提取物。
所述的竹荪提取物，其特征在于竹荪选用地上或地下部分。
所述的竹荪提取物，其特征在于通过下述方法制备得到：竹荪干品或鲜品晾干后，加水或醇搅拌，加入生物酶进行酶解提取，提取，经浓缩，得到竹荪提取物，进一步干燥得到竹荪提取粉。
优选地，竹荪干品或鲜品晾干后，粉碎、过筛，加水或醇搅拌，调节温度和pH，加入生物酶进行酶解提取，提取完成后，煮沸，过滤，经浓缩干燥，得到竹荪提取物。
更优选地，所述的竹荪提取物，其特征在于通过下述方法制备得到：
(1)将竹荪晾干并粉碎，过40目以上筛网从而获得竹荪粉。
(2)将一定量的竹荪粉与纯化水按质量比为1:15～1:30混合，加入药粉质量的0.1％～0.5％的生物酶，调节pH至2～10，恒温35～60℃搅拌至少2h；
(3)提取完成后，将步骤(2)中的竹荪提取液煮沸至少2min，待冷却至室温，过滤，滤液待用；
(4)将步骤(3)中的滤液浓缩至30～80℃时的相对密度1.0～1.2g/mL，干燥，得到竹荪提取物；
所述竹荪提取物的收率不低于40wt％。
所述的竹荪提取物，其特征在于：总糖含量不低于25wt％，肽含量为20～30wt％。
优选地，总糖含量的测定方法是苯酚-硫酸法，肽含量的检测方法是参照GB/T22492-2008附录B和GB/T 22729-2008所述的肽含量测定方法。
优选地，所述的生物酶酶解所用的生物酶可以为果胶酶(酶活力≥1万u/g)、聚糖酶(酶活力≥1000u/g)、纤维素酶(酶活力≥1万u/g)、中性蛋白酶(酶活力≥30万u/g)、木瓜蛋白酶(酶活力≥40万u/g)、菠萝蛋白酶(酶活力≥30万u/g)、碱性蛋白酶(酶活力≥20万u/g)、酸性蛋白酶、胃蛋白酶(酶活力≥50万u/g)、胰酶(酶活力≥3000u/g)、无花果蛋白酶(酶活力≥5万u/g)、罗汉果蛋白酶(酶活力≥5万u/g)中的一种或者它们的混合物。
优选地，所述的过滤可以为膜过滤、离心过滤和普通过滤法(如板框过滤法、筛网过滤法)。
优选地，所述的浓缩方法可以为真空浓缩、常压浓缩、膜浓缩法，优选地使用真空浓缩法。
优选地，所述的干燥方法可以为真空干燥、加热干燥、晾干、风干、冷冻干燥和喷雾干燥法。
一种组合物，其含有上述竹荪提取物，和药物或食品上可接受的助剂。
优选地，所述组合物的剂型选自素片、薄膜包衣片、糖衣片、肠衣片、分散片、胶囊、颗粒剂、口服溶液或口服混悬液，以及液体、乳液、膏霜、粉、块状等化妆品剂型。
本发明的竹荪提取物可用于制备预防或治疗自由基过多引起的症状的食品、保健食品或药品；用于制备预防或治疗缓解大脑或者运动疲劳的食品、保健食品或药品；用于制备增强免疫力的食品、保健食品或药品；用于制备预防、改善或者治疗神经相关疾病的食品、保健食品或者药品。
目前现有技术，获得竹荪提取物的方法是水提、或者醇提、或者水提后再醇提、或者醇提后再水提、或者使用超临界二氧化碳提取等方法，缺点在于：
1.无论水提、醇提或者醇水混合提取，或者超临界二氧化碳提取，或者其它有机溶剂提取，无法将竹荪药材中的蛋白成分提取彻底。
2.单单水提、醇提或者醇水混合提取，要想得率提高，必须高温多次数提取，但得率还是不理想，而且资源利用率很低，无法满足绿色环保的生产要求。
3.使用超临界二氧化碳提取，或者其它有机溶剂提取，成本高，其它有机溶剂的使用也不能满足绿色环保，对人体安全无毒的要求。
本发明与现有技术相比，具有如下优点：
1.本发明使用生物酶进行提取，提取温度温和，提取次数仅为一次，且比现有技术的产率高，因而提高了资源利用率，降低了生产成本。
2.本发明的制备工序中没有使用任何有机溶剂或者有毒有害的化学物质、安全、无有毒物质残留、对人体无害、绿色环保。
3.本发明将提取液通过过滤，减少了药渣的残留，提高了其水溶液的澄清度。
附图说明
图1：竹荪提取物对斑马鱼脑部巨噬细胞数量的影响；
图2：竹荪提取物对斑马鱼脑部吞噬墨汁的巨噬细胞数量的影响。
实施例
下面通过实施例对本发明作进一步说明。应该理解的是，本发明实施例所述方法仅仅是用于说明本发明，而不是对本发明的限制，在本发明的构思前提下对本发明制备方法的简单改进都属于本发明要求保护的范围。如无特别说明，实施例中用到的所有原料和溶剂均为市售产品。
制备实施例1
将竹荪晾干后，粉碎，过3号筛。称取100kg，加入3000L水，加入100g酶活力为30万u/g的食品级中性蛋白酶，调整pH为7.0～8.0，升温至50℃，搅拌2h后煮沸5min，冷却后，过200目振荡筛，浓缩至50℃时相对密度为1.2g/mL时，喷雾干燥后得到42.4kg竹荪提取物(S-1)，糖含量为28.2wt％，肽含量为23.3wt％。
制备实施例2
将竹荪晾干后，粉碎，过4号筛。称取100kg，加入2000L水，加入100g酶活力为40万u/g的食品级木瓜蛋白酶，调整pH为7.0～8.0，升温至55℃，搅拌3h后煮沸2min，冷却后，过孔径为10μm微滤膜，浓缩至60℃时相对密度为1.15g/mL时，真空干燥后得到47.4kg竹荪提取物(S-2)，糖含量为29.0wt％，肽含量为23.4wt％。
制备实施例3
将竹荪晾干后，粉碎，过3号筛。称取100kg，加入1500L水，加入100g酶活力为30万u/g的食品级菠萝蛋白酶，调整pH为7.0～8.0，升温至50℃，搅拌2h后煮沸5min，冷却后，离心取上清液，并浓缩至70℃时相对密度为1.1g/mL时，冷冻干燥后得到49.9kg竹荪提取物(S-3)，糖含量为26.1wt％，肽含量为22.2wt％。
制备实施例4
将竹荪晾干后，粉碎，过3号筛。称取100kg，加入3000L水，加入100g酶活力为20万u/g的食品级碱性蛋白酶，调整pH为8.0～9.0，升温至45℃，搅拌3h后煮沸2min，冷却后，过200目振荡筛，浓缩至55℃时相对密度为1.0g/mL时，喷雾干燥后得到44.4kg竹荪提取物(S-4)，糖含量为27.1wt％，肽含量为21.5wt％。
对比实施例(与常规水提方法比较)
将竹荪药材晾干后，粉碎，过3号筛。称取100kg，加入2000L水，回流提取2次，每次3h，合并提取液，过200目筛网，浓缩至50℃时相对密度为1.2g/mL时，真空干燥后得到32.2kg竹荪提取物(S-5)，糖含量为25.8wt％，肽类成分为未检出。
可见无论收率还是化学成分的含量均低于本发明，充分体现了本发明的工艺优势。
生物活性实施例1(抗氧化作用评价)
1.DPPH自由基清除实验
DPPH乙醇溶液的配制：精密称取DPPH 4mg，置于100mL棕色容量瓶中，加入50mL乙醇，超声30s，用乙醇定容至刻度，摇匀，待用。本品须现配现用。
供试品溶液的配制：精密称取竹荪提取物(S-1)适量，置于50mL棕色容量瓶中，加入30mL乙醇，超声5min，用乙醇定容至刻度，摇匀，即得。
操作步骤：准确吸取2mL供试品溶液和2mL DPPH溶液混合均匀；准确吸取2mL供试品溶液和2mL乙醇混合均匀；准确吸取2mL DPPH溶液和2mL乙醇混合均匀，室温放置30min，在515nm波长处测定吸光度，并根据以下计算公式计算自由基清除率：
IR％＝[1-(Ai-Aj)/A0]×100％；
其中，Ai表示待测溶液和DPPH混合后溶液的吸光度；
Aj表示待测溶液和溶剂混合后溶液的吸光度；
A0表示DPPH和溶剂混合后溶液的吸光度。
2.ABTS+自由基清除实验
PBS缓冲液的配制：称取氯化钠8g，氯化钾0.2g，磷酸二氢钾0.24g，十二水合磷酸氢二钠3.62g，置于1000mL烧杯中，加入800mL蒸馏水，搅怑使其溶解，用盐酸或氢氧化钠调节pH至7.4，转移至1000mL容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀，待用。
ABTS+贮存溶液的配制：精密称取ABTS+78mg左右，置于20mL棕色容量瓶中，加入15mL蒸馏水，超声5min，用蒸馏水定容至刻度，摇匀。精密称取过硫酸钾76mg左右，置于2mL棕色容量瓶中，加入1mL蒸馏水，超声使其溶解，用蒸馏水定容至刻度，摇匀。精确吸取352μL过硫酸钾溶液加入至ABTS溶液中，摇匀，静置过夜。
ABTS+工作溶液的配制：精确吸取贮存溶液1mL，加入65mL左右PBS缓冲液，摇匀。
供试品溶液的配制：精密称取竹荪提取物(S-1)适量，置于20mL棕色容量瓶中，加入15mL PBS缓冲液，超声5min，用PBS缓冲液定容至刻度，摇匀，即得。
操作步骤：准确吸取0.5mL供试品溶液和5mL ABTS工作溶液混合均匀；准确吸取0.5mL供试品溶液和5mL PBS缓冲液混合均匀；准确吸取5mL ABTS工作溶液和0.5mL PBS缓冲液混合均匀，立即在734nm处测定吸光度，并根据以下公式计算自由基清除率：
IR％＝[1-(Ai-Aj)/A0]×100％；
其中，Ai表示待测溶液和ABTS混合后溶液的吸光度；
Aj表示待测溶液和溶剂混合后溶液的吸光度；
A0表示ABTS和溶剂混合后溶液的吸光度。
配制竹荪提取物(S-1)浓度为500μg/mL和1000μg/mL，以维生素C为阳性对照(浓度为100μg/mL)，测试结果如表1所示：
表1竹荪提取物清除自由基测试结果
由表1可知，本发明方法所制备的竹荪提取物对DPPH和ABTS自由基显示了较好的清除作用，具有较好的抗氧化活性。
生物活性实施例2(神经细胞的保护作用评价)
使用含10％胎牛血清的高糖DMEM培养基培养PC12细胞，细胞传代时用0.125％的胰酶消化约50s，用含10％血清的DMEM培养基终止消化，加入新鲜的培养基将细胞吹打均匀。以105个/mL的细胞密度传代。每瓶细胞加入4mL含细胞的培养液。在37℃，5％CO2条件下培养。PC12细胞在培养瓶中生长至融合状态，采用0.125％胰蛋白酶溶液消化，并反复吹打至细胞悬液，以含10％FBS的高糖DMEM培养基稀释成1.0×105个/mL，每孔100μL接种于96孔培养板中，每组5-6个复孔，在37℃，5％CO2条件下培养24h，成融合状态。
96孔板于各孔中以一定浓度梯度分别给予药物100μL，培养24h后，MTT法检测细胞活力。50mg MTT溶解于10mL PBS，0.22μm微孔滤膜过滤。临用前稀释到0.5mg/mL。各组细胞弃去培养基，PBS洗两次，每加入0.5mg/mL MTT，37℃，5％CO2条件下孵育3h，除去MTT工作液，每孔加入150μL DMSO溶解结晶，振摇10min，测定每孔的OD值(测定波长570nm，参比波长650nm)。以对照组OD值平均值为100％细胞活力，计算模型组和给药组的细胞活力。
实验分组：1)空白组(高糖DMEM)；2)模型组(高糖DMEM培养3h，再加入H2O2使其终浓度为100μM，刺激1h)；3)阳性药(NAC)组：先加入含一定浓度(500μM)阳性药NAC的高糖DMEM培养3h，再加100μM H2O2刺激1h；4)给药组：先加入含各浓度梯度药物的高糖DMEM培养3h，再加100μM H2O2刺激1h。上述各组于相同条件下培养，随后进行实验，并用MTT法检测细胞活力，测定结果如表2和表3所示。
表2竹荪提取物对正常PC12细胞活力的影响
与对照组比较，**p<0.01，***p<0.001
表3竹荪提取物对H2O2诱导的PC12细胞氧化损伤的影响
与对照组比较，###p<0.001；与模型组比较，***p<0.001
如表2所示，竹荪提取物在浓度为1～10μg/mL时，对正常PC12细胞活力没有显示抑制作用，在浓度为30～500μg/mL时，对PC12细胞活力显示较强的抑制作用，并呈现浓度依赖性。PC12细胞本身是一种肿瘤神经元细胞，由此可见竹荪提取物具有潜在的抗肿瘤活性。
如表3所示，模型组中PC12细胞活力为51.45％，与对照组(细胞活力为100％)相比较，p<0.001，表明模型构建成功。当加入500μM阳性对照药NAC培养后，细胞活力提高到94.23％，显示有明显的保护作用。竹荪提取物在浓度为500μg/mL时，保护作用由51.45％提高至56.15％，保护率在10％左右。总之，竹荪提取物具有潜在神经细胞的保护作用。
生物活性实施例3(增强免疫作用评价)
1.对巨噬细胞减少症的改善作用评价
随机选取150尾受精后2天(2dpf)黑色素等位基因突变型Albino品系斑马鱼，静脉窦注射酒石酸长春瑞滨建立斑马鱼巨噬细胞减少症模型。用水溶给予竹荪提取物(S-1)浓度为250μg/mL，同时设置正常对照组(养鱼用水处理斑马鱼)和模型对照组，每孔(实验组)均处理30尾斑马鱼，每孔容量为3mL。各实验组均置于28℃培养箱孵育过夜，加入2.5μg/mL中性红工作液对斑马鱼进行活体染色，染色结束后每组随机选取10尾斑马鱼在显微镜下观察并统计斑马鱼头部巨噬细胞数量(N)，以巨噬细胞数量的统计学分析结果评价供试品对巨噬细胞减少症的改善作用。统计学处理结果用mean±SE表示。巨噬细胞减少症的改善作用计算公式为：巨噬细胞减少症改善作用(％)＝(N供试品组-N模型对照组)/N模型对照组×100％，用T-test检验进行统计学分析，p<0.05表明具有显著性差异，结果如表4所示。
表4竹荪提取物对斑马鱼巨噬细胞减少症的改善作用实验结果(n＝10)
与模型对照组比较，***p<0.001
由表4可知，模型对照组斑马鱼头部巨噬细胞数量(25个)与正常对照组(47个)比较p<0.001，提示斑马鱼巨噬细胞减少症模型构建成功。竹荪提取物组的斑马鱼头部巨噬细胞数量为39个，与模型对照组比较均p<0.001，改善作用为56％，提示在本实验浓度条件下，竹荪提取物对斑马鱼巨噬细胞减少症具有明显的改善作用。
2.对巨噬细胞吞噬功能的促进作用评价
随机选取120尾受精后3天(3dpf)黑色素等位基因突变型Albino品系斑马鱼，静脉注射墨汁建立斑马鱼巨噬细胞吞噬功能模型。用水溶给予竹荪提取物(S-1)浓度为250μg/mL，同时设置模型对照组，每孔(实验组)均处理30尾斑马鱼，每孔容量为3mL。各组均置于28℃培养箱孵育过夜，加入2.5μg/mL中性红工作液对斑马鱼进行活体染色，染色后每组随机选取10尾斑马鱼在显微镜下观察并统计斑马鱼头部吞噬墨汁的巨噬细胞数量(N)，以吞噬墨汁的巨噬细胞数量的统计学分析结果评价供试品对巨噬细胞吞噬功能的促进作用。统计学处理结果用mean±SE表示。巨噬细胞吞噬功能的促进作用计算公式为：吞噬功能促进作用(％)＝(N供试品组-N模型对照组)/N模型对照组×100％，用T-test检验进行统计学分析，p<0.05表明具有显著性差异，结果如表5所示。
表5竹荪提取物对斑马鱼巨噬细胞吞噬功能的促进作用实验结果(n＝10)
与模型对照组比较，**p<0.01
如表5可知，竹荪提取物浓度组斑马鱼头部吞噬了墨汁信号的巨噬细胞数量为20个，与模型对照组(16个)比较p<0.01，吞噬功能促进作用为25％，提示在本实验浓度条件下，竹荪提取物对斑马鱼巨噬细胞吞噬功能具有明显的促进作用。
生物活性实施例4(抗疲劳作用评价)
1.对斑马鱼运动能力的改善作用
随机选取180尾受精后4天(4dpf)野生型AB品系斑马鱼于六孔板中，每孔(实验组)30尾，用水溶给予竹荪提取物(S-1)浓度为2000μg/mL，阳性对照药中华跌打丸1000μg/mL浓度，同时设置正常对照组(即养鱼用水处理斑马鱼)和模型对照组，每孔(实验组)容量为3mL。预处理24h后，除正常对照组外，其余实验组均同时水溶给予亚硫酸钠以诱发斑马鱼疲劳模型。供试品和亚硫酸钠共同处理斑马鱼一段时间后，每个实验组随机选取10尾斑马鱼，利用行为分析仪，测定斑马鱼的运动总距离(S)，定量评价竹荪提取物对亚硫酸钠诱发的疲劳斑马鱼的运动改善作用。对斑马鱼运动能力改善作用计算公式为：运动能力改善作用(％)＝(S供试品-S模型组)/(S正常对照组-S模型组)×100％，用T-test检验进行统计学分析，p<0.05表明具有显著性差异，结果如表6所示。
表6竹荪提取物对斑马鱼运动能力改善作用评价结果(n＝10)
与模型对照组比较，**p<0.01。
由表6可知，模型对照组斑马鱼总运动距离(4720mm)与正常对照组(8154mm)比较p<0.01，提示模型建立成功；阳性对照药中华跌打丸斑马鱼总运动距离为7704mm，与模型对照组比较p<0.01，其运动改善作用为86.9％，提示中华跌打丸可明显著改善亚硫酸钠诱发的疲劳斑马鱼运动能力。
竹荪提取物浓度组斑马鱼总运动距离为7660mm，其运动改善作用分别为85.6％。与模型对照组比较p<0.01，提示竹荪提取物对亚硫酸钠诱发的疲劳斑马鱼的运动能力有明显的改善作用。
2.对斑马鱼体内乳酸含量的影响
随机选取540尾受精后4天(4dpf)野生型AB品系斑马鱼于六孔板中，每孔(实验组)30尾，用水溶给予竹荪提取物(S-1)浓度为2000μg/mL，阳性对照药中华跌打丸1000μg/mL浓度，同时设置正常对照组(即养鱼用水处理斑马鱼)和模型对照组，每孔(实验组)容量为3mL，每个实验组设置3个平行浓度。预处理24h后，除正常对照组外，其余实验组均同时水溶给予亚硫酸钠以诱发斑马鱼疲劳模型。供试品和亚硫酸钠共同处理斑马鱼一段时间后，每个实验组将3个平行实验组中的斑马鱼汇集在一起(共90尾)，按照乳酸测定试剂盒说明书，利用NanoDrop2000超微量分光光度计间接测定斑马鱼体内乳酸含量，定量评价竹荪提取物对亚硫酸钠诱发的疲劳斑马鱼体内的乳酸含量的影响，并计算乳酸含量减少率。对斑马鱼体内乳酸影响计算公式为：乳酸含量减少率(％)＝(C模型组-C供试品)/(C模型组-C正常对照组)×100％，用T-test检验进行统计学分析，p<0.05表明具有显著性差异，结果如表7所示。
表7竹荪提取物对斑马鱼体内乳酸含量的评价结果
与模型对照组比较，**p<0.01，***p<0.001。
由表7可知，模型对照组斑马鱼体内乳酸含量(0.750mmol/gprot)与正常对照组(0.259mmol/gprot)比较p<0.001，提示模型建立成功；阳性对照药中华跌打丸斑马鱼体内乳酸含量为0.369mmol/gprot，与模型对照组比较p<0.001，其乳酸含量减少率为77.6％，提示中华跌打丸能显著减少亚硫酸钠诱发的疲劳斑马鱼体内的乳酸含量。
竹荪提取物组斑马鱼体内乳酸含量为0.381mmol/gprot，其乳酸含量减少率为75.2％，与模型对照组比较p<0.001，提示竹荪提取物能显著减少亚硫酸钠诱发的疲劳斑马鱼的乳酸。
Claims (8)
1.一种竹荪提取物，其特征在于：总糖含量为25wt％-35wt％，肽含量为20-30wt％；优选地，总糖含量的测定方法是苯酚-硫酸法，肽含量的检测方法是参照GB/T 22492-2008附录B和GB/T 22729-2008所述的肽含量测定方法。
2.权利要求1所述竹荪提取物的制备方法，其特征在于包括下述步骤：将竹荪鲜品或干品与水或醇混合，进行酶提取，提取液经过滤浓缩至30～80℃时的相对密度1.0～1.2g/mL，干燥得到竹荪提取物；优选地，相对密度1.0～1.1g/mL或1.1～1.15g/mL或1.15～1.2g/mL；优选地，醇为乙醇。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于包括下述步骤：
(1)将竹荪晾干并粉碎，过40目以上筛网从而获得竹荪粉；
(2)将一定量的竹荪粉与水或醇按质量比为1:15～1:30混合，加入竹荪粉质量的0.1％～0.5％的生物酶，调节pH至2～10，恒温35～60℃搅拌至少2h；
(3)提取完成后，将步骤(2)中的竹荪提取液煮沸至少2min，待冷却至室温，过滤，滤液待用；
(4)将步骤(3)中的滤液浓缩至30～80℃时的相对密度1.0～1.2g/mL，，干燥，得到竹荪提取物。
4.根据权利要求2所述的竹荪提取物的制备方法，其特征在于：所述的生物酶酶解所用的生物酶可以为果胶酶(酶活力≥1万u/g)、聚糖酶(酶活力≥1000u/g)、纤维素酶(酶活力≥1万u/g)、中性蛋白酶(酶活力≥30万u/g)、木瓜蛋白酶(酶活力≥40万u/g)、菠萝蛋白酶(酶活力≥30万u/g)、碱性蛋白酶(酶活力≥20万u/g)、酸性蛋白酶、胃蛋白酶(酶活力≥50万u/g)、胰酶(酶活力≥3000u/g)、无花果蛋白酶(酶活力≥5万u/g)、罗汉果蛋白酶(酶活力≥5万u/g)中的一种或者它们的混合物。
5.根据权利要求2所述的竹荪提取物的制备方法，其特征在于：所述的过滤选自膜过滤、离心过滤和普通过滤法(如板框过滤法、筛网过滤法)；优选地，所述的浓缩方法选自真空浓缩、常压浓缩、膜浓缩法，优选地使用真空浓缩法；优选地，所述的干燥方法选自真空干燥、加热干燥、晾干、风干、冷冻干燥和喷雾干燥法。
6.一种竹荪提取物，其特征在于：其通过权利要求2-5任一所述的方法制备得到。
7.一种组合物，其特征在于：含有权利要求1或6所述的竹荪提取物，和药物或食品上可接受的助剂；优选地，其剂型选自素片、薄膜包衣片、糖衣片、肠衣片、分散片、胶囊、颗粒剂、口服溶液或口服混悬液，以及液体、乳液、膏霜、粉、块状等化妆品剂型。
8.权利要求1或6所述的竹荪提取物，权利要求7所述的组合物用于制备预防或治疗自由基过多引起的症状的食品、保健食品或药品的应用；用于制备预防或治疗缓解大脑或者运动疲劳的食品、保健食品或药品的应用；用于制备增强免疫力的食品、保健食品或药品的应用；用于制备预防、改善或者治疗神经细胞相关疾病的食品、保健食品或者药品的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910947360.5A CN111357976A (zh) | 2019-10-06 | 2019-10-06 | 一种竹荪提取物及其工业化制备方法和用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910947360.5A CN111357976A (zh) | 2019-10-06 | 2019-10-06 | 一种竹荪提取物及其工业化制备方法和用途 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN111357976A true CN111357976A (zh) | 2020-07-03 |
Family
ID=71198538
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201910947360.5A Pending CN111357976A (zh) | 2019-10-06 | 2019-10-06 | 一种竹荪提取物及其工业化制备方法和用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN111357976A (zh) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112704232A (zh) * | 2020-12-30 | 2021-04-27 | 杭州娃哈哈科技有限公司 | 一种可用于自由基清除的苦瓜籽提取物及制备方法和应用 |
| CN112724272A (zh) * | 2021-01-19 | 2021-04-30 | 吉林大学珠海学院 | 一种竹荪多糖的制备方法 |
| CN112868817A (zh) * | 2021-02-04 | 2021-06-01 | 中南民族大学 | 一种蛋白质为关键的南极磷虾油可食用产品 |
| CN114698831A (zh) * | 2022-04-28 | 2022-07-05 | 贵州省现代农业发展研究所(贵州省现代农村发展研究中心、贵州省农村经济与社会发展科学研究所、贵州省农产品加工研究所) | 降胆固醇的竹荪风味即食营养粉及其制备方法 |
| CN115281336A (zh) * | 2022-08-26 | 2022-11-04 | 贵州省生物研究所 | 一种竹荪茶口服液及其制备方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102512353A (zh) * | 2011-12-27 | 2012-06-27 | 北京工商大学 | 一种竹荪水提取物及其制备方法与应用 |
| CN106389541A (zh) * | 2016-11-02 | 2017-02-15 | 杏辉天力（杭州）药业有限公司 | 一种肉苁蓉提取物及其制备方法和用途 |
| CN107233391A (zh) * | 2017-07-18 | 2017-10-10 | 杏辉天力（杭州）药业有限公司 | 一种肉苁蓉提取物及其工业化制备方法和新用途 |
| CN108948221A (zh) * | 2018-08-03 | 2018-12-07 | 广东药科大学 | 一种具有神经保护功效的长裙竹荪多糖及其制备和应用 |
-
2019
- 2019-10-06 CN CN201910947360.5A patent/CN111357976A/zh active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102512353A (zh) * | 2011-12-27 | 2012-06-27 | 北京工商大学 | 一种竹荪水提取物及其制备方法与应用 |
| CN106389541A (zh) * | 2016-11-02 | 2017-02-15 | 杏辉天力（杭州）药业有限公司 | 一种肉苁蓉提取物及其制备方法和用途 |
| CN107233391A (zh) * | 2017-07-18 | 2017-10-10 | 杏辉天力（杭州）药业有限公司 | 一种肉苁蓉提取物及其工业化制备方法和新用途 |
| CN108948221A (zh) * | 2018-08-03 | 2018-12-07 | 广东药科大学 | 一种具有神经保护功效的长裙竹荪多糖及其制备和应用 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 张春梅等: "竹荪多糖化学结构及其生物活性的研究进展", 《食品研究与开发》 * |
| 王娟娟等: "不同提取方法对竹荪提取液抗氧化活性的影响研究", 《食品科技》 * |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112704232A (zh) * | 2020-12-30 | 2021-04-27 | 杭州娃哈哈科技有限公司 | 一种可用于自由基清除的苦瓜籽提取物及制备方法和应用 |
| CN112724272A (zh) * | 2021-01-19 | 2021-04-30 | 吉林大学珠海学院 | 一种竹荪多糖的制备方法 |
| CN112868817A (zh) * | 2021-02-04 | 2021-06-01 | 中南民族大学 | 一种蛋白质为关键的南极磷虾油可食用产品 |
| CN112868817B (zh) * | 2021-02-04 | 2022-05-17 | 中南民族大学 | 一种蛋白质为关键的南极磷虾油可食用产品 |
| CN114698831A (zh) * | 2022-04-28 | 2022-07-05 | 贵州省现代农业发展研究所(贵州省现代农村发展研究中心、贵州省农村经济与社会发展科学研究所、贵州省农产品加工研究所) | 降胆固醇的竹荪风味即食营养粉及其制备方法 |
| CN115281336A (zh) * | 2022-08-26 | 2022-11-04 | 贵州省生物研究所 | 一种竹荪茶口服液及其制备方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN111357976A (zh) | 一种竹荪提取物及其工业化制备方法和用途 | |
| JP6828054B2 (ja) | ウォールナットオリゴペプチド粉、その調製方法と使用 | |
| CN102711780B (zh) | 包含氨基酸和植物的制剂及其在酒精解毒作用中的活性 | |
| CN107822948B (zh) | 具有晒后修护、抗氧化、美白功效的组合物及其制备方法 | |
| CN111019990B (zh) | 一种南瓜籽肽粉及其制备方法和用途 | |
| CN107550961B (zh) | 一种应用微生物快速发酵制备人参/西洋参提取物的方法 | |
| CN113332354B (zh) | 一种抗糖化抗衰老发酵组合物及其制备方法 | |
| CN108904563B (zh) | 一种全株人参原浆加工方法及用途 | |
| CN111249338A (zh) | 一种苁蓉提取物及其工业化制备方法和用途 | |
| CN111035649A (zh) | 一种nmn+glp复配营养补充剂及其制备方法和应用 | |
| CN1981776B (zh) | 含稀有人参皂甙的组合物及其制备方法以及用途 | |
| CN107233391A (zh) | 一种肉苁蓉提取物及其工业化制备方法和新用途 | |
| CN110663788A (zh) | 一种茶叶提取物及其工业化制备方法和用途 | |
| CN114832022B (zh) | 一种桑黄子实体酚类活性物质的制备及其在调节肠道菌群、尿酸代谢中的应用 | |
| CN113425757A (zh) | 一种蒲公英提取物及其制备方法和应用 | |
| CN110577976A (zh) | 一种绿豆低聚肽粉及其制备方法 | |
| CN107439787B (zh) | 一种具有抗pm 2.5颗粒物功效的核桃低聚肽 | |
| CN106819973B (zh) | 一种具有降血糖和通便功能的桑椹微生物复合制剂的制备方法 | |
| TW201221133A (en) | A medical compositions for inhibition of influenza Hemagglutinin and process for the preparation thereof | |
| CN108567914B (zh) | 一种具有改善睡眠作用的中药制剂及其制备方法和应用 | |
| CN106928376B (zh) | 山茱萸多糖的分离方法及其应用 | |
| CN113694078B (zh) | 醋炙五味子多糖提取物在制备治疗糖尿病的药物中的应用 | |
| CN110251543B (zh) | 变叶树参提取物在制备抗抑郁天然药物中的应用 | |
| CN107961293A (zh) | 一种沙棘番茄片及其制备方法 | |
| CN103599354A (zh) | 一种松花粉组合物及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20200703 |