CN111235178B - BpVND1基因的应用 - Google Patents

BpVND1基因的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN111235178B
CN111235178B CN202010084968.2A CN202010084968A CN111235178B CN 111235178 B CN111235178 B CN 111235178B CN 202010084968 A CN202010084968 A CN 202010084968A CN 111235178 B CN111235178 B CN 111235178B
Authority
CN
China
Prior art keywords
bpvnd1
gene
application
birch
seq
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202010084968.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111235178A (zh
Inventor
李红艳
王丙锋
马盈
王艳敏
温爱亭
谷维
苏雅迪
罗旭
罗玉亮
赵越
兰士波
张玲
张海峰
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
PLANT PROTECTION INSTITUTE OF HEILONGJIANG PROV AGRICULTURAL SCIENCES ACADEMY
FORESTRY RESEARCH INSTITUTE OF HEILONGJIANG PROVINCE
Original Assignee
PLANT PROTECTION INSTITUTE OF HEILONGJIANG PROV AGRICULTURAL SCIENCES ACADEMY
FORESTRY RESEARCH INSTITUTE OF HEILONGJIANG PROVINCE
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by PLANT PROTECTION INSTITUTE OF HEILONGJIANG PROV AGRICULTURAL SCIENCES ACADEMY, FORESTRY RESEARCH INSTITUTE OF HEILONGJIANG PROVINCE filed Critical PLANT PROTECTION INSTITUTE OF HEILONGJIANG PROV AGRICULTURAL SCIENCES ACADEMY
Priority to CN202010084968.2A priority Critical patent/CN111235178B/zh
Publication of CN111235178A publication Critical patent/CN111235178A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111235178B publication Critical patent/CN111235178B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/415—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from plants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8201—Methods for introducing genetic material into plant cells, e.g. DNA, RNA, stable or transient incorporation, tissue culture methods adapted for transformation
    • C12N15/8202—Methods for introducing genetic material into plant cells, e.g. DNA, RNA, stable or transient incorporation, tissue culture methods adapted for transformation by biological means, e.g. cell mediated or natural vector
    • C12N15/8205—Agrobacterium mediated transformation

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)

Abstract

本发明涉及BpVND1基因的应用，属于白桦培育技术领域。本发明提供了BpVND1基因在提高白桦生长量中的应用，所述BpVND1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述BpVND1基因的应用能够使白桦比野生型白桦生长量和生物量增加，纤维素含量和纤维长度增加，木质素含量减少，适合纸浆材和燃料材的培育。

Description

BpVND1基因的应用
技术领域
本发明涉及白桦培育技术领域，具体涉及BpVND1基因的应用。
背景技术
木材是国民经济建设发展中不可或缺的重要工业原料，随着经济社会的飞速发展，木材的使用纷繁变化，无论在其用量还是在其材质方面的要求都不断提高。因此，提高木材产量，改善木材品质是林业工作者任重道远的责任，在林业蓬勃发展的历程中，老一辈林学家利用常规育种的方法手段为林木改良工作做出了卓越的贡献，取得了瞩目的成就，但是，采用常规的种源选择和杂交育种方式，育种周期长，工序复杂，受外界影响较大，难以控制，难以取得突破性的成果，难以培育出生长速度且适合不同材性要求的林木新品种。随着科学技术深入发展，转基因技术已经成为林木定向遗传改良的重要途径之一，应用转基因技术进行林木材性改良不仅可以缩短育种周期，还可以提高育种的目的性和可操作性。
白桦(Betula platyphylla Suk.)是北温带的一个广布种，生长迅速，适应性和抗逆性较强，在生物燃料和纸浆工业中具有重要应用价值，在我国，自上世纪九十年代初白桦被列为国家科技攻关研究对象之一以来，在常规育种和分子育种方面均已进行了大量的试验研究。然而，目前现有的白桦林木资源还无法满足市场的巨大需求，优质的白桦苗木是白桦育种的基础，尽可能缩短白桦的生长周期也仍是我国白桦育种工作者当前研究的重要课题之一。
发明内容
本发明的目的在于提供BpVND1基因的应用。本发明所述BpVND1基因的应用能够使白桦比野生型白桦生长量和生物量增加，纤维素含量和纤维长度增加，木质素含量减少，适合纸浆材和燃料材的培育。
本发明提供了BpVND1基因在提高白桦生长量中的应用，所述BpVND1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
本发明还提供了BpVND1基因在提高白桦生长速度中的应用，所述BpVND1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
本发明还提供了BpVND1基因在提高白桦综纤维素含量中的应用，所述BpVND1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
本发明还提供了BpVND1基因在提高白桦纤维长度中的应用，所述BpVND1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
本发明还提供了BpVND1基因在提高白桦纤维长宽比中的应用，所述BpVND1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
本发明还提供了BpVND1基因在减少白桦木质素含量中的应用，所述BpVND1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
本发明还提供了BpVND1基因在培育纸浆材白桦中的应用，所述BpVND1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
本发明还提供了BpVND1基因在培育燃料材白桦中的应用，所述BpVND1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
优选的是，所述应用中，对BpVND1基因进行敲除和/或抑制BpVND1基因表达。
优选的是，所述应用中，敲除BpVND1基因的白桦的获得方法，包括以下步骤：
构建BpVND1基因的RNAi载体，采用农杆菌介导的叶盘转化法，将BpVND1基因的RNAi载体转入到白桦基因组中，通过卡那霉素筛选阳性植株，获得敲除BpVND1基因的白桦；所述BpVND1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
本发明提供了BpVND1基因的应用。本发明所述BpVND1基因的应用能够使白桦比野生型白桦生长量和生物量增加，纤维素含量和纤维长度增加，木质素含量减少，适合纸浆材和燃料材的培育。试验结果表明，在白桦中敲除BpVND1基因，可使白桦生长量增加21％，综纤维素含量增加2.97％，纤维长度增加20.28％，长宽比增加20.57％，木质素含量减少6.81％，这些指标正是白桦纸浆材和燃料材所需要的。
附图说明
图1为本发明提供的转基因白桦的相对表达量；
图2为本发明提供的转基因白桦和对照的生长表型分析结果；
图3为本发明提供的纤维长度测定结果。
具体实施方式
本发明提供了BpVND1基因在提高白桦生长量中的应用，所述BpVND1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述BpVND1基因已在genebank登录，序列号为：MN815929，BpVND1的CDS为1047bp，编码348个氨基酸。本发明所述BpVND1基因的核苷酸序列为：
ATGATGGAGTCGATGGAGTCATCTGTCCCACCCGGTTTCCGGTTTCATCCGACGGACGAGGAGCTCGTTGGTTATTACCTGAGGAAGAAGGTCGCGTCACAAAAGATCGATCTTGACGTCATCAGAGATATCGACCTCTACAGGATCGAACCATGGGATCTCCAAGAGAGATGCCGGATCGGGTATGAAGAGCAAAATGAGTGGTATTTCTTCAGCCACAAGGATAAGAAGTATCCAACAGGGACGAGGACTAATAGAGCAACCATGGCTGGGTTTTGGAAGGCGACAGGCAGGGACAAGGCAGTGTATGACAAGGCCAAACTCATTGGCATGAGGAAAACCCTCGTCTTCTACAAGGGCCGGGCACCCAATGGGCAGAAAACTGACTGGATCATGCATGAATACAGGCTTGAATCTGAGGAAAATGGACCTCCACAGGAAGAAGGATGGGTGGTATGCAGAGCATTCAAGAAGCGAACGACGAGCCAAAGCAAGAGCATTGAAGGGTGGGAGTCAGGGTACTTCTATGACGAAGCGAGTGGGGTAAGCTCGGTCGTGGATCCCATTGATTTCATATCAAGGCAGCCCCAAAACTTTTTATCACAGAATTTCATGTGTAAGCAAGAGATAGAAGCGGATAACATGGGTACTTTCATGCACGCGCACTCTGATCATCAGTTTGTTCAGCTTCCTCAACTAGAGAGCCCATCTCTGCCGTTAATAAAGAGGCCGCCAAGCTCAATATCTCTGATATCAGAAAATAATGAAGAAGAAGAGCAAATTATGAATAGAGGGTGCAACAACACCCAGAAAGTGACTGATTGGAGGGCCCTTGACAAGTTTGTTGCTTCTCAATTGAGTCAAGAAGATAGATTTGAGGGTGATGGAGAATCAAGCTTTGGCGCCGCACAGGATCAGAACTCGGATATGTCGTCATTGCTGTTATTGCAGAGTAGTACTAGGGTCGACGATGAAGACAAGTTTAATGGGTTCTTGAATTCAAGCTCAGACTGTGACAATATTGGGATATGCATATTTGAGAAATGA。
对应的氨基酸序列(SEQ ID NO.2)为：
MMESMESSVPPGFRFHPTDEELVGYYLRKKVASQKIDLDVIRDIDLYRIEPWDLQERCRIGYEEQNEWYFFSHKDKKYPTGTRTNRATMAGFWKATGRDKAVYDKAKLIGMRKTLVFYKGRAPNGQKTDWIMHEYRLESEENGPPQEEGWVVCRAFKKRTTSQSKSIEGWESGYFYDEASGVSSVVDPIDFISRQPQNFLSQNFMCKQEIEADNMGTFMHAHSDHQFVQLPQLESPSLPLIKRPPSSISLISENNEEEEQIMNRGCNNTQKVTDWRALDKFVASQLSQEDRFEGDGESSFGAAQDQNSDMSSLLLLQSSTRVDDEDKFNGFLNSSSDCDNIGICIFEK*。
本发明还提供了BpVND1基因在提高白桦生长速度中的应用，所述BpVND1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
本发明还提供了BpVND1基因在提高白桦综纤维素含量中的应用，所述BpVND1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
本发明还提供了BpVND1基因在提高白桦纤维长度中的应用，所述BpVND1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
本发明还提供了BpVND1基因在提高白桦纤维长宽比中的应用，所述BpVND1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
本发明还提供了BpVND1基因在减少白桦木质素含量中的应用，所述BpVND1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
本发明还提供了BpVND1基因在培育纸浆材白桦中的应用，所述BpVND1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
本发明还提供了BpVND1基因在培育燃料材白桦中的应用，所述BpVND1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
在本发明所述应用中，对BpVND1基因进行敲除和/或抑制BpVND1基因表达。本发明对所述基因的敲除方法没有特殊限定，采用本领域技术人员熟知的常规基因敲除方法即可。
在本发明所述应用中，敲除BpVND1基因的白桦的获得方法，优选包括以下步骤：
构建BpVND1基因的RNAi载体，采用农杆菌介导的叶盘转化法，将BpVND1基因的RNAi载体转入到白桦基因组中，通过卡那霉素筛选阳性植株，获得敲除BpVND1基因的白桦；所述BpVND1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
下面结合具体实施例对本发明所述的BpVND1基因的应用做进一步详细的介绍，本发明的技术方案包括但不限于以下实施例。
实施例1
白桦转基因植株的产生：
载体构建：在BpVND1基因编码区内选取一段长为256bp的序列(SEQ ID NO.3)：
GTTCAGCTTCCTCAACTAGAGAGCCCATCTCTGCCGTTAATAAAGAGGCCGCCAAGCTCAATATCTCTGATATCAGAAAATAATGAAGAAGAAGAGCAAATTATGAATAGAGGGTGCAACAACACCCAGAAAGTGACTGATTGGAGGGCCCTTGACAAGTTTGTTGCTTCTCAATTGAGTCAAGAAGATAGATTTGAGGGTGATGGAGAATCAAGCTTTGGCGCCGCACAGGATCAGAACTCGGATATGTCGTCAT。
分别引入酶切位点设计引物扩增正向和反向序列，然后将这两段序列分别定向插入到pFGC5941载体中，构建BpVND1基因的RNAi载体pFGC5941-ProBpVND1。
表1pFGC5941-ProBpVND1载体构建所用引物
Figure BDA0002381713820000051
白桦转基因：利用农杆菌介导的叶盘转化法将构建好的RNAi载体转入到白桦基因组中。具体方法如下：活化RNAi载体的农杆菌菌株，摇菌至OD值为0.4～0.6，将白桦外植体在在农杆菌溶液中浸泡5分钟，然后平铺在共培养培养基(WPM+1mg·L-16-BA+150μM乙酰丁香酮+2％(w/v)蔗糖，pH5.8)上培养3d，共培养后将外植体转移到含抗生素的分化培养基上(WPM+1mg·L-16-BA+2mg·L-1草甘膦+600mg·L-1羧苄青霉素，pH 5.8)。筛选4-5周后，出现抗性愈伤组织，将愈伤组织转移到新的选择培养基中。待愈伤组织分化出抗性再生芽，将再生芽转移至生根培养基(WPM+0.2mg·L-1NAA+2mg·L-1草甘膦)中，使其壮苗生根，即得到转基因白桦阳性植株。
BpVND1基因在转基因白桦中的表达量分析：提取转基因白桦各株系及野生型白桦的RNA，反转录成cDNA，以白桦各株系的cDNA为模板，用BpVND1基因的定量引物(BpVND1-F和BpVND1-R，表2)进行实时荧光定量PCR，白桦UBQ和Tublin基因作为内参，RT-qPCR反应体系和程序如下：
RT-qPCR反应体系：
Figure BDA0002381713820000061
反应程序：94℃预变性30s；(94℃，12s；58℃，30s；72℃，45s；79℃读板1s)45个循环。
表2实时荧光定量PCR的引物
Figure BDA0002381713820000062
生长表型比较及生长量测定：将转基因白桦和野生型白桦的组培苗移栽到土壤中，一年后拍照比较表型，统计树高，地径，鲜重。
细胞壁组分含量测定：使用自动纤维分析仪器(Ankom 2000i，Ankom，USA)，取1年生白桦土培苗的茎段部分，测定木质素和综纤维素的含量，对于每个白桦株系进行了6次独立的生物学重复。
纤维长宽测定：取一年生白桦转基因土培苗茎基部的一小段，用10％硝酸(10ml硝酸+90ml水)和10％铬酸(10g三氧化铬+90ml水)1:1混合溶液浸泡12小时后用玻璃棒涂片，在体式显微镜下观察并测量。每个植株测量50个数据。
BpVND1基因在转基因白桦中的表达量分析如下，图1为转基因白桦的相对表达量。本发明实施例共获得9个白桦BpVND1基因敲除的转基因株系，用QRT-PCR法测定了每个转基因株系中BpVND1的转录水平，选择两个BpVND1基因敲除程度最大(表达量最低)的转基因系(SE8和SE9)进行后续研究。
生长表型比较及生长量测定，结果如图2所示，图2为转基因白桦和对照的生长表型分析结果，其中，WT：野生型白桦；OE3，OE4：过表达植株；SE8，SE9：基因敲除(抑制表达)植株；A：刚挪到室外对照苗；B：对照苗树高C：生长一年后白桦苗；D：生长一年后白桦苗鲜重；E：生长一年后白桦苗树高；F：生长一年后白桦苗地径。
从图2中可以明显看出，这些白桦苗木在刚从温室挪到室外时具有相似的高度和鲜重。但生长一年后，与WT相比，BpVND1基因敲除显著提高了生长速率。测定其高度、鲜重和地径。与生长表型一致，BpVND1基因敲除植株的树高、地径和重量显著高于WT植株。由于各树种含水量相近，鲜重可以反映植物生物量。这些结果表明，BpVND1基因敲除能显著促进植物生长，增加其生物量。
细胞壁组分含量测定结果
野生型和转基因白桦次生壁各组分含量测定结果如表3所示：
表3野生型和转基因白桦次生壁各组分含量测定结果
Figure BDA0002381713820000071
Figure BDA0002381713820000081
细胞壁的化学成分分析表明，与野生植物相比，BpVND1敲除植株(SE)木质素含量降低6.81％，但全纤维素含量提高2.97％。纤维长宽测定结果如图3和表4所示，其中，图3为纤维长宽测定结果，OE：过表达植株；SE：基因敲除(抑制表达)植株；WT：野生型白桦。A：纤维表型；B：纤维长；C：纤维宽；D：纤维长宽比。
表4野生型和转基因白桦纤维长宽测定
Figure BDA0002381713820000082
BpVND1敲除植株(SE)纤维变长，纤维长度增加20.28％，长宽比增加20.57％。
构建BpVND1基因的RNAi抑制表达载体，用农杆菌介导的遗传转化方法将其转入白桦基因组中，获得白桦转基因植株，对野生型白桦和转基因白桦进行生长表型比较、生长量、细胞壁组分含量测定及纤维素长宽测定。结果显示与野生型白桦相比，BpVND1基因敲除转基因白桦降低了木质素含量，但显著提高了白桦的生长和生物量积累，显著增加了综纤维素含量和纤维长度。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
序列表
<110> 黑龙江省林业科学研究所
黑龙江省农业科学院植物保护研究所
<120> BpVND1基因的应用
<160> 13
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1047
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
atgatggagt cgatggagtc atctgtccca cccggtttcc ggtttcatcc gacggacgag 60
gagctcgttg gttattacct gaggaagaag gtcgcgtcac aaaagatcga tcttgacgtc 120
atcagagata tcgacctcta caggatcgaa ccatgggatc tccaagagag atgccggatc 180
gggtatgaag agcaaaatga gtggtatttc ttcagccaca aggataagaa gtatccaaca 240
gggacgagga ctaatagagc aaccatggct gggttttgga aggcgacagg cagggacaag 300
gcagtgtatg acaaggccaa actcattggc atgaggaaaa ccctcgtctt ctacaagggc 360
cgggcaccca atgggcagaa aactgactgg atcatgcatg aatacaggct tgaatctgag 420
gaaaatggac ctccacagga agaaggatgg gtggtatgca gagcattcaa gaagcgaacg 480
acgagccaaa gcaagagcat tgaagggtgg gagtcagggt acttctatga cgaagcgagt 540
ggggtaagct cggtcgtgga tcccattgat ttcatatcaa ggcagcccca aaacttttta 600
tcacagaatt tcatgtgtaa gcaagagata gaagcggata acatgggtac tttcatgcac 660
gcgcactctg atcatcagtt tgttcagctt cctcaactag agagcccatc tctgccgtta 720
ataaagaggc cgccaagctc aatatctctg atatcagaaa ataatgaaga agaagagcaa 780
attatgaata gagggtgcaa caacacccag aaagtgactg attggagggc ccttgacaag 840
tttgttgctt ctcaattgag tcaagaagat agatttgagg gtgatggaga atcaagcttt 900
ggcgccgcac aggatcagaa ctcggatatg tcgtcattgc tgttattgca gagtagtact 960
agggtcgacg atgaagacaa gtttaatggg ttcttgaatt caagctcaga ctgtgacaat 1020
attgggatat gcatatttga gaaatga 1047
<210> 2
<211> 348
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
Met Met Glu Ser Met Glu Ser Ser Val Pro Pro Gly Phe Arg Phe His
1 5 10 15
Pro Thr Asp Glu Glu Leu Val Gly Tyr Tyr Leu Arg Lys Lys Val Ala
20 25 30
Ser Gln Lys Ile Asp Leu Asp Val Ile Arg Asp Ile Asp Leu Tyr Arg
35 40 45
Ile Glu Pro Trp Asp Leu Gln Glu Arg Cys Arg Ile Gly Tyr Glu Glu
50 55 60
Gln Asn Glu Trp Tyr Phe Phe Ser His Lys Asp Lys Lys Tyr Pro Thr
65 70 75 80
Gly Thr Arg Thr Asn Arg Ala Thr Met Ala Gly Phe Trp Lys Ala Thr
85 90 95
Gly Arg Asp Lys Ala Val Tyr Asp Lys Ala Lys Leu Ile Gly Met Arg
100 105 110
Lys Thr Leu Val Phe Tyr Lys Gly Arg Ala Pro Asn Gly Gln Lys Thr
115 120 125
Asp Trp Ile Met His Glu Tyr Arg Leu Glu Ser Glu Glu Asn Gly Pro
130 135 140
Pro Gln Glu Glu Gly Trp Val Val Cys Arg Ala Phe Lys Lys Arg Thr
145 150 155 160
Thr Ser Gln Ser Lys Ser Ile Glu Gly Trp Glu Ser Gly Tyr Phe Tyr
165 170 175
Asp Glu Ala Ser Gly Val Ser Ser Val Val Asp Pro Ile Asp Phe Ile
180 185 190
Ser Arg Gln Pro Gln Asn Phe Leu Ser Gln Asn Phe Met Cys Lys Gln
195 200 205
Glu Ile Glu Ala Asp Asn Met Gly Thr Phe Met His Ala His Ser Asp
210 215 220
His Gln Phe Val Gln Leu Pro Gln Leu Glu Ser Pro Ser Leu Pro Leu
225 230 235 240
Ile Lys Arg Pro Pro Ser Ser Ile Ser Leu Ile Ser Glu Asn Asn Glu
245 250 255
Glu Glu Glu Gln Ile Met Asn Arg Gly Cys Asn Asn Thr Gln Lys Val
260 265 270
Thr Asp Trp Arg Ala Leu Asp Lys Phe Val Ala Ser Gln Leu Ser Gln
275 280 285
Glu Asp Arg Phe Glu Gly Asp Gly Glu Ser Ser Phe Gly Ala Ala Gln
290 295 300
Asp Gln Asn Ser Asp Met Ser Ser Leu Leu Leu Leu Gln Ser Ser Thr
305 310 315 320
Arg Val Asp Asp Glu Asp Lys Phe Asn Gly Phe Leu Asn Ser Ser Ser
325 330 335
Asp Cys Asp Asn Ile Gly Ile Cys Ile Phe Glu Lys
340 345
<210> 3
<211> 256
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 3
gttcagcttc ctcaactaga gagcccatct ctgccgttaa taaagaggcc gccaagctca 60
atatctctga tatcagaaaa taatgaagaa gaagagcaaa ttatgaatag agggtgcaac 120
aacacccaga aagtgactga ttggagggcc cttgacaagt ttgttgcttc tcaattgagt 180
caagaagata gatttgaggg tgatggagaa tcaagctttg gcgccgcaca ggatcagaac 240
tcggatatgt cgtcat 256
<210> 4
<211> 30
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 4
gctctagagc gttcagcttc ctcaactaga 30
<210> 5
<211> 30
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 5
cgggatcccg atgacgacat atccgagttc 30
<210> 6
<211> 30
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 6
cagtgagctc gttcagcttc ctcaactaga 30
<210> 7
<211> 30
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 7
ggactagtcc atgacgacat atccgagttc 30
<210> 8
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 8
gagatatcga cctctacag 19
<210> 9
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 9
gccttgtcat acactgcct 19
<210> 10
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 10
tcaaccgcct tgtctctcag g 21
<210> 11
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 11
tggctcgaat gcactgttgg 20
<210> 12
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 12
gattgagggg agggatgctg 20
<210> 13
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 13
ggaggacaag gtggagggtg 20

Claims (9)

1. BpVND1基因在提高白桦生长量中的应用，所述BpVND1基因的核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示；所述应用中，对BpVND1基因进行敲除和/或抑制BpVND1基因表达。
2. BpVND1基因在提高白桦生长速度中的应用，所述BpVND1基因的核苷酸序列如SEQID NO.1所示；所述应用中，对BpVND1基因进行敲除和/或抑制BpVND1基因表达。
3. BpVND1基因在提高白桦综纤维素含量中的应用，所述BpVND1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述应用中，对BpVND1基因进行敲除和/或抑制BpVND1基因表达。
4. BpVND1基因在提高白桦纤维长度中的应用，所述BpVND1基因的核苷酸序列如SEQID NO.1所示；所述应用中，对BpVND1基因进行敲除和/或抑制BpVND1基因表达。
5.BpVND1基因在提高白桦纤维长宽比中的应用，所述BpVND1基因的核苷酸序列如SEQID NO.1所示；所述应用中，对BpVND1基因进行敲除和/或抑制BpVND1基因表达。
6.BpVND1基因在减少白桦木质素含量中的应用，所述BpVND1基因的核苷酸序列如SEQID NO.1所示；所述应用中，对BpVND1基因进行敲除和/或抑制BpVND1基因表达。
7.BpVND1基因在培育纸浆材白桦中的应用，所述BpVND1基因的核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示；所述应用中，对BpVND1基因进行敲除和/或抑制BpVND1基因表达。
8.BpVND1基因在培育燃料材白桦中的应用，所述BpVND1基因的核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示；所述应用中，对BpVND1基因进行敲除和/或抑制BpVND1基因表达。
9.根据权利要求1~8任一项所述的应用，其特征在于，所述应用中，敲除BpVND1基因的白桦的获得方法，包括以下步骤：
构建BpVND1基因的RNAi载体，采用农杆菌介导的叶盘转化法，将BpVND1基因的RNAi载体转入到白桦基因组中，通过卡那霉素筛选阳性植株，获得敲除BpVND1基因的白桦；所述BpVND1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
CN202010084968.2A 2020-02-10 2020-02-10 BpVND1基因的应用 Active CN111235178B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010084968.2A CN111235178B (zh) 2020-02-10 2020-02-10 BpVND1基因的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010084968.2A CN111235178B (zh) 2020-02-10 2020-02-10 BpVND1基因的应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111235178A CN111235178A (zh) 2020-06-05
CN111235178B true CN111235178B (zh) 2021-10-01

Family

ID=70876364

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010084968.2A Active CN111235178B (zh) 2020-02-10 2020-02-10 BpVND1基因的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111235178B (zh)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2009143124A (ru) * 2009-11-24 2011-05-27 Российская Федерация в лице Федерального агентства по науке и инновациям (RU) БИНАРНЫЙ ВЕКТОР pBI-4CL, БИНАРНЫЙ ВЕКТОР pBI-Xeg, БИНАРНЫЙ ВЕКТОР pGS, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТРАНСГЕННЫХ РАСТЕНИЙ, СОДЕРЖАЩИХ ПОНИЖЕННОЕ КОЛИЧЕСТВО ЛИГНИНА, ПОВЫШЕННОЕ КОЛИЧЕСТВО ЦЕЛЛЮЛОЗЫ И ПОВЫШЕННУЮ СКОРОСТЬ РОСТА
CN103014031A (zh) * 2013-01-17 2013-04-03 东北林业大学 白桦GA20ox1基因BpGA20ox1及其应用
CN104962563A (zh) * 2015-06-15 2015-10-07 东北林业大学 白桦BpMYB106基因、其氨基酸序列及应用
CN105624129A (zh) * 2016-01-13 2016-06-01 东北林业大学 下调木质素的白桦CCoAOMT基因及其编码蛋白

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2009143124A (ru) * 2009-11-24 2011-05-27 Российская Федерация в лице Федерального агентства по науке и инновациям (RU) БИНАРНЫЙ ВЕКТОР pBI-4CL, БИНАРНЫЙ ВЕКТОР pBI-Xeg, БИНАРНЫЙ ВЕКТОР pGS, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТРАНСГЕННЫХ РАСТЕНИЙ, СОДЕРЖАЩИХ ПОНИЖЕННОЕ КОЛИЧЕСТВО ЛИГНИНА, ПОВЫШЕННОЕ КОЛИЧЕСТВО ЦЕЛЛЮЛОЗЫ И ПОВЫШЕННУЮ СКОРОСТЬ РОСТА
CN103014031A (zh) * 2013-01-17 2013-04-03 东北林业大学 白桦GA20ox1基因BpGA20ox1及其应用
CN104962563A (zh) * 2015-06-15 2015-10-07 东北林业大学 白桦BpMYB106基因、其氨基酸序列及应用
CN105624129A (zh) * 2016-01-13 2016-06-01 东北林业大学 下调木质素的白桦CCoAOMT基因及其编码蛋白

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ACCESSION NO.MN815929.1;LI,H.;《GENBANK》;20200923;1 *
转TabZIP基因白桦的获得及耐盐性分析;李园园等;《南京林业大学学报(自然科学版)》;20130915;第37卷(第05期);6-12 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN111235178A (zh) 2020-06-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101489375A (zh) 沉默赤霉素2-氧化酶的表达的组合物及其用途
CN114195873B (zh) 毛果杨PtrbHLH186基因在调控树木次生木质部发育中的应用
CN109384837B (zh) 一种杨树抗旱基因及其应用
CN107937411A (zh) 毛白杨PtoWRKY40基因、其表达载体和构建方法以及应用
CN116004653B (zh) 一种调控杨树木质素合成的PagERF81基因及其应用
CN110066774A (zh) 玉米类受体激酶基因ZmRLK7及其应用
CN112063631A (zh) 毛果杨PtrLBD4-3基因及其编码蛋白和应用
CN109609514B (zh) 梨转录因子PbrMYB169及其应用
CN102399792A (zh) 棉纤维细胞次生壁发育相关的GhNAC1基因克隆鉴定
CN108588098A (zh) 尾叶桉cad基因及其应用
CN105907733B (zh) 一种苦豆子肌醇甲基转移酶及其编码基因及应用
CN111235178B (zh) BpVND1基因的应用
CN113817745B (zh) 一种促进木材形成的基因OreFLA11及其应用
CN111518803B (zh) 一种RNAi片段及其用于调控木质素合成的应用
CN102344927B (zh) 水稻茎秆机械强度和粒重控制基因bc14及其应用
CN114214333A (zh) 一种调控植物叶表皮毛发育和次生壁厚度的基因及其应用
CN101434937B (zh) 一种泡桐4-香豆酸：辅酶a连接酶基因及其应用
CN115369121A (zh) 一种促进棉花纤维发育的基因GhPAS1及其应用
CN114292862A (zh) OsCEN2基因在调控水稻种子萌发速率中的应用
CN113831398A (zh) 一种PagARGOS蛋白、其编码基因及其应用
CN113462687B (zh) miR408及其相关的生物材料的应用
CN116103306B (zh) OsAC37基因及编码蛋白在调控水稻直播适宜性中的应用
CN112251445B (zh) 调控棉花纤维伸长的基因GhZFP8及其应用
CN117247440A (zh) 一种改良植物性状的蛋白PalFLA11、核酸及其应用
CN108795973B (zh) 拟南芥糖基转移酶基因ugt79b8在提高植物光合效率中的应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant