CN111226912A - 一种细胞保存液及制备方法 - Google Patents

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曾亚平
赖楚明
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Shenzhen Tianda Biological Medical Equipment Co ltd
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Shenzhen Tianda Biological Medical Equipment Co ltd
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    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
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    • A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
    • A01N1/02—Preservation of living parts
    • A01N1/0205—Chemical aspects
    • A01N1/021—Preservation or perfusion media, liquids, solids or gases used in the preservation of cells, tissue, organs or bodily fluids
    • A01N1/0226—Physiologically active agents, i.e. substances affecting physiological processes of cells and tissue to be preserved, e.g. anti-oxidants or nutrients
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    • A01N1/0221—Freeze-process protecting agents, i.e. substances protecting cells from effects of the physical process, e.g. cryoprotectants, osmolarity regulators like oncotic agents

Abstract

本发明公开了一种细胞保存液及制备方法，包括葡萄糖、维生素、氨基酸、氯化钠、甲醇、白蛋白、磷酸盐、甘油、肝素、透明质酸和添加剂，按照质量份数比所述葡萄糖、维生素、氨基酸、氯化钠、甲醇、白蛋白、磷酸盐、甘油、肝素、透明质酸和添加剂的质量份数分别为葡萄糖15％、维生素2％、氨基酸3％、氯化钠60％、甲醇5％、白蛋白3％、磷酸盐3％、甘油3％、肝素3％、透明质酸3％和添加剂1％，按照质量份数比称取葡萄糖、维生素、氨基酸、氯化钠、甲醇、白蛋白、磷酸盐、甘油、肝素、透明质酸和添加剂并加入到烧杯中在磁力搅拌机上搅拌混合30分钟，取搅拌好的混合液在紫外线灯下灭菌15分钟即可获得细胞保存液。本发明能够对细胞进行较长时间的保存，存活率高。

Description

一种细胞保存液及制备方法
技术领域
本发明涉及细胞存储技术领域，具体来说，涉及一种细胞保存液及制备方法。
背景技术
细胞是生物体结构和功能的基本单位，细胞的特殊性决定了个体的特殊性，因此，对细胞的深入研究是揭开生命奥秘、改造生命和征服疾病的关键。细胞生物学已经成为当代生物科学中发展最快的一门尖端学科，是生物、农学、医学、畜牧、水产和许多生物相关专业的一门必修课程。50年代以来诺贝尔生理与医学奖大都授予了从事细胞生物学研究的科学家。
口腔脱落细胞DNA样本采集相对于传统的抽取血液采集DNA的方式来说，是一种对人体无伤害、无痛苦的获取DNA的方法，不易引起被采集者的不适和畏惧心理，该法不会对被收集者造成任何不适，容易被接受，因而能最大限度地扩大基因研究的取样范围，特别适合分子流行病学大规模人群调查。随着二代测序技术在临床检测方面的普及，简便快捷地获取人体DNA，且能长期稳定地保存越发重要。口腔脱落细胞样本是很理想的DNA获取方式，但是不适当的保存液会导致DNA降解或含有某些影响下游基因检测的成分。
针对相关技术中的问题，目前尚未提出有效的解决方案。
发明内容
本发明的目的在于提供一种细胞保存液及制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种细胞保存液及制备方法，包括葡萄糖、维生素、氨基酸、氯化钠、甲醇、白蛋白、磷酸盐、甘油、肝素、透明质酸和添加剂，按照质量份数比所述葡萄糖、维生素、氨基酸、氯化钠、甲醇、白蛋白、磷酸盐、甘油、肝素、透明质酸和添加剂的质量份数分别为葡萄糖15％、维生素2％、氨基酸3％、氯化钠60％、甲醇5％、白蛋白3％、磷酸盐3％、甘油3％、肝素3％、透明质酸3％和添加剂1％。
进一步的，所述维生素为维生素B12和维生素B6，所述维生素B12和维生素B6的质量配比为1:1。
进一步的，所述添加剂为抗氧化剂。
进一步的，一种细胞保存液的制备方法，其具体制备方法如下：
(1)按照质量份数比称取葡萄糖、维生素、氨基酸、氯化钠、甲醇、白蛋白、磷酸盐、甘油、肝素、透明质酸和添加剂并加入到烧杯中放入磁力搅拌磁子在磁力搅拌机上搅拌混合30分钟；
(2)取搅拌好的混合液在紫外线灯照射下灭菌15分钟。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
(1)本发明提供的一种细胞保存液在24小时内口腔细胞破损率小于20％，保存30小时细胞破损率不大于50％，细胞破损率低，便于口腔脱落细胞的后期研究。
具体实施方式
下面，结合具体实施方式，对本发明做出进一步的描述：
根据本发明实施例的一种细胞保存液及制备方法,包括葡萄糖、维生素B12、维生素B6、氨基酸、氯化钠、甲醇、白蛋白、磷酸盐、甘油、肝素、透明质酸和抗氧化剂，按照质量份数比所述葡萄糖、维生素B12、维生素B6、氨基酸、氯化钠、甲醇、白蛋白、磷酸盐、甘油、肝素、透明质酸和抗氧化剂的质量份数分别为葡萄糖15％、维生素B12、维生素B6、氨基酸3％、氯化钠60％、甲醇5％、白蛋白3％、磷酸盐3％、甘油3％、肝素3％、透明质酸3％和抗氧化剂1％。
一种细胞保存液的制备方法，其具体制备方法如下：
(1)按照质量份数比称取葡萄糖、维生素、氨基酸、氯化钠、甲醇、白蛋白、磷酸盐、甘油、肝素、透明质酸和添加剂并加入到烧杯中放入磁力搅拌磁子在磁力搅拌机上搅拌混合30分钟；
(2)取搅拌好的混合液在紫外线灯照射下灭菌15分钟取出备用即可。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限定本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (4)

1.一种细胞保存液，其特征在于，包括葡萄糖、维生素、氨基酸、氯化钠、甲醇、白蛋白、磷酸盐、甘油、肝素、透明质酸和添加剂，按照质量份数比所述葡萄糖、维生素、氨基酸、氯化钠、甲醇、白蛋白、磷酸盐、甘油、肝素、透明质酸和添加剂的质量份数分别为葡萄糖15％、维生素2％、氨基酸3％、氯化钠60％、甲醇5％、白蛋白3％、磷酸盐3％、甘油3％、肝素3％、透明质酸3％和添加剂1％。
2.根据权利要求1所述的一种细胞保存液，其特征在于，所述维生素为维生素B12和维生素B6，所述维生素B12和维生素B6的质量配比为1:1。
3.根据权利要求1所述的一种细胞保存液，其特征在于，所述添加剂为抗氧化剂。
4.根据权利要求1-3所述的一种细胞保存液的制备方法，其具体制备方法如下：
(1)按照质量份数比称取葡萄糖、维生素、氨基酸、氯化钠、甲醇、白蛋白、磷酸盐、甘油、肝素、透明质酸和添加剂并加入到烧杯中放入磁力搅拌磁子在磁力搅拌机上搅拌混合30分钟；
(2)取搅拌好的混合液在紫外线灯照射下灭菌15分钟。
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