CN114652663A - 头发生长液及其制备方法 - Google Patents

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Heze Biotechnology Co ltd
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Abstract

本发明提供一种头发生长液，其包含以下组分：以头发生长液的总重量为基准，脐带组织提取物10％～50％、保湿剂5％～15％、溶剂5％‑15％以及余量的去离子水。本发明还提供一种制备本发明的头发生长液的方法，包括如下步骤：将保湿剂与脐带组织提取物、溶剂以及去离子水搅拌至均匀，即制得头发生长液；或者将保湿剂与抗氧化剂和/或螯合剂混合，然后将混合物加热到50～85℃，搅拌至均匀，待降至室温后，加入脐带组织提取物、溶剂以及去离子水，搅拌至均匀，即制得头发生长液。本发明的头发生长液不含激素类成分，能够有效促进头发生长，使得头发坚韧而不易脱落。此外本发明的头发生长液对人体没有副作用，使用方式简单。

Description

头发生长液及其制备方法
技术领域
本发明属于化妆品领域。具体地，本发明涉及一种头发生长液及其制备方法。
背景技术
脱发对机体的影响不大，主要是影响外貌的美观。尤其是爱美的年轻人，或是对外貌有要求的职业，会影响患者的事业发展。适婚年龄也影响患者的择偶。脱发不仅影响人的外表容貌，长期下去会给患者带来心理上的压力，容易出现自卑、焦虑、恐惧、轻生等心理问题，给生活带来烦恼。随着人们生活水平的提高，对脱发的治疗也日益受到人们的重视，国内治疗脱发的手段和药物不少，但是多数治疗时间长、疗效不理想、价格昂贵、使用繁琐。头发生长液对于长头发会有一定的效果，但是具体是因人而异的，而且有很多头发生长液里会含有激素类的成分，长期使用对人体会有一定的危害。
发明内容
本发明的目的是提供一种头发生长液。该头发生长液不含激素类成分，能够有效促进头发生长，使得头发不易脱落。同时，本发明还提供一种制备本发明的头发生长液的方法。
本发明的上述目的是通过如下技术方案实现的。
一方面，本发明提供一种头发生长液，其包含以下组分：
以头发生长液的总重量为基准，脐带组织提取物10％～50％、保湿剂5％～15％、溶剂5％-15％以及余量的去离子水；
所述脐带组织提取物是通过包括如下步骤的方法制备的：
(1)将冷冻的动物脐带组织研磨成粉末；
(2)向步骤(1)得到的粉末加水，然后在第一呼吸压和第一复温下进行搅拌，并以孔径为5-10μm的第一过滤器过滤；其中，所述第一呼吸压和第一复温各自独立地变化，所述第一呼吸压为-30kPa至30kPa，且所述第一复温为1℃至10℃；
(3)向步骤(2)过滤得到的沉积物加水，然后在第二呼吸压和第二复温下进行搅拌，并以孔径为5-10μm的第二过滤器过滤；其中，所述第二呼吸压和第二复温各自独立地变化，所述第二呼吸压为-30kPa至30kPa，且所述第二复温为25℃至39℃；
(4)将步骤(2)和(3)得到的滤液合并，然后过滤去除病原体。
优选地，在本发明所述的头发生长液中，以头发生长液的总重量为基准，所述头发生长液还包含抗氧化剂0.1％-1％和/或螯合剂0.1％～1％。
优选地，在本发明所述的头发生长液中，所述保湿剂选自甘油、丙二醇、甲基丙二醇、1,3-丁二醇、1,2-己二醇、甘油聚醚-26、PEG/PPG-17/6共聚物和PEG/PPG-14/7二甲基醚中的一种或几种；更优选地，所述保湿剂为1,3-丁二醇和1,2-己二醇。
优选地，在本发明所述的头发生长液中，所述溶剂选自二丙二醇、乙醇和戊二醇中的一种或几种；更优选地，所述溶剂为乙醇。
优选地，在本发明所述的头发生长液中，所述抗氧化剂选自羟癸基泛醌、四己基癸醇抗坏血酸酯、生育酚乙酸酯、对羟基苯乙酮和珍珠提取物中的一种或几种；更优选地，所述抗氧化剂为对羟基苯乙酮。本发明对所述珍珠提取物没有特别限定，市售的即可；
优选地，在本发明所述的头发生长液中，所述螯合剂选自馨藓酮、EDTA二钠和辛酰羟肟酸中的一种或几种；更优选地，所述螯合剂为馨藓酮。
优选地，在本发明所述的头发生长液中，以头发生长液的总重量为基准，各组分的重量百分含量为：
脐带组织提取物30％、1,3-丁二醇10％、1,2-己二醇0.5％、乙醇10％、馨藓酮0.5％、对羟基苯乙酮0.5％以及余量的去离子水。
现有技术中通过采用酶解法进行多肽制备时，当酶解反应结束之后，需要对蛋白酶进行灭活处理。在蛋白酶变性失活的同时，也容易导致部分多肽的失活，造成多肽的损失，进而影响多肽的收率。本发明人出乎意料的发现，不需酶解，而是通过将动物脐带组织先低温冷冻，然后经过在呼吸压和复温下进行特殊的孵化搅拌来制备动物脐带组织提取物，可以使得提取物更加稳定且提取物中的蛋白含量更高。由此，本发明的头发生长液不含激素类成分，能够有效促进头发生长，使得头发坚韧而不易脱落。此外本发明的头发生长液对人体没有副作用，使用方式简单。洗头时，在头发上抹匀，3-5分钟后冲洗掉即可。另外，本发明的头发生长液见效时间短，效果显著。
优选地，在本发明所述的头发生长液中，所述动物脐带组织为牛脐带组织。
在本发明所述的头发生长液中，在步骤(1)中，优选地，所述研磨在-30℃至-196℃的温度下进行；优选地，所述冷冻的动物脐带组织粉末小于30μm。
在本发明所述的头发生长液中，在步骤(2)中，优选地，第一呼吸压和第一复温各自独立地变化；所述第一呼吸压在-30kPa至30kPa内以0.1-1kPa/分钟的速率往复升降；优选地，所述第一复温在1℃至10℃内以0.5-1℃/小时的速率往复升降；优选地，所述搅拌进行24-36小时；优选地，所述第一过滤器的孔径为10μm。
在本发明所述的头发生长液中，在步骤(3)中，优选地，第二呼吸压和第二复温各自独立地变化；所述第二呼吸压在-30kPa至30kPa内以0.1-1kPa/分钟的速率往复升降；优选地，所述第二复温在25℃至39℃内以0.5-1℃/小时的速率往复升降；优选地，所述搅拌进行36-48小时；优选地，所述第二过滤器的孔径为10μm。
在本发明所述的头发生长液中，在步骤(2)中，优选地，向步骤(1)得到的粉末加水后调节pH值为7.3-7.5，然后进行搅拌；在步骤(3)中，优选地，向步骤(2)过滤得到的沉积物加水后调节pH值为7.3-7.5，然后进行搅拌。
在本发明所述的头发生长液中，在步骤(2)中，优选地，加入的水的重量是所述粉末的重量的0.5-2倍；在步骤(3)中，优选地，加入的水的重量是所述沉积物的重量的0.5-2倍。
在本发明所述的头发生长液中，优选地，所述步骤(1)包括：将清洗和消毒的动物脐带组织切段后置于保护剂中进行冷冻，并将冷冻的动物脐带组织研磨成小于30μm的粉末。
其中，所述动物脐带组织的清洗和消毒可以包括：将动物脐带组织依次浸泡于PBS缓冲液、碘伏和H2O2水溶液浸泡，再用蒸馏水清洗。优选地，所述碘伏浸泡进行3-5min。优选地，所述H2O2水溶液的质量浓度为3-6％。优选地，所述蒸馏水清洗进行3-8次。优选地，所述切段为切成1-3cm的小段。
其中，按重量比计，所述保护剂中的各成分与所述切段的动物脐带组织之比可以为：
DMSO：甘露醇：山梨醇：吐温-20：PBS：动物脐带组织＝(0.01-0.05):(0.005-0.20)：(0.005-0.10)：(0.0001-0.001):(0.40-0.80)：1。
其中，所述冷冻可以包括：在-10kPa至-20kPa的压力和1-10℃的温度下静置10-60min，然后以0.1～1kPa/min的升压速率升至0kPa，然后转移至-30℃至-196℃中冷冻12-24小时。
在本发明所述的头发生长液中，优选地，所述步骤(4)包括：将步骤(2)和(3)得到的滤液合并，添加抗氧剂、稳定剂和/或抑菌剂，然后过滤去除病原体；更优选地，所述步骤(4)包括：将步骤(2)和(3)得到的滤液合并，调整渗透压为210～400mOsmol/kg，添加抗氧剂、稳定剂和抑菌剂，然后依次通过孔径为10μm、8μm、6μm、4μm、2μm、0.8μm、0.4μm、0.22μm的过滤器过滤去除病原体。
其中，所述抗氧剂可以选自无水亚硫酸钠、亚硫酸氢钠和焦亚硫酸氢钠中的一种或几种。所述稳定剂可以选自甘氨酸、烟酰胺、辛酸钠、无水枸橼酸钠、苹果酸、门冬氨酸和乙酰色氨酸中的一种或几种。所述抑菌剂可以选自苯酚、甲酚和硫柳汞中的一种或几种。
其中，所述抗氧剂、稳定剂、抑菌剂与所述合并的滤液的重量比可以为：
抗氧剂：稳定剂：抑菌剂：合并的滤液＝(0.001-0.002)：(0.0001-0.001)：(0.0001-0.001)：1。
在本发明所述的头发生长液中，动物脐带组织提取物可以采用多种保存方式，比如水剂保存或者干粉剂保存。
水剂保存：取上述制备方法得到的滤液，遵循无菌管理原则和市场的需求的规格，分装至针剂安瓶或西林瓶中，补充惰性气体，灯检后保存入库。
干粉剂保存：取上述制备方法得到的滤液，遵循无菌管理原则和市场的需求规格，分装至西林瓶中，抽真空冻干保存。
在本发明所述的头发生长液中，本发明通过将动物脐带组织先低温冷冻，然后经过在呼吸压和复温下进行特殊的孵化搅拌来制备动物脐带组织提取物。与现有技术相比，本发明具有以下的优点和效果：(1)提取物稳定；(2)提取物中的蛋白含量高；(3)提取物无病原体；(4)提取物无制热原；(5)可以以多种方法保存，比如常温液态和低温液态保存，常温或低温保存冻干粉；(6)提取物的应用广泛。
另一方面，本发明提供一种制备本发明的头发生长液的方法，包括如下步骤：
将保湿剂与脐带组织提取物、溶剂以及去离子水搅拌至均匀，即制得头发生长液；或者
将保湿剂与抗氧化剂和/或螯合剂混合，然后将混合物加热到50～85℃，搅拌至均匀，待降至室温后，加入脐带组织提取物、溶剂以及去离子水，搅拌至均匀，即制得头发生长液。
本发明具有如下有益效果：
本发明的头发生长液不含激素类成分，能够有效促进头发生长，使得头发坚韧而不易脱落。此外本发明的头发生长液对人体没有副作用，使用方式简单。洗头时，在头发上抹匀，3-5分钟后冲洗干净即可。另外，本发明的头发生长液见效时间短，效果显著。
附图说明
以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中：
图1是本发明实施例1制得的动物脐带组织提取物不同保存方式和对比例1制得的动物脐带组织提取物的SDS-PAGE电泳结果对比图；其中，1：分子量对照样品；2：冻干样品；3：低温样品；4：常温样品；5：对比例1的样品。
图2是本发明实施例1制得的动物脐带组织提取物的LC-MS图谱。将本发明实施例1的牛脐带组织提取物采用LC-MS进行检测(天瑞仪器LC-MS 1000)，结果示于图2。图2示出了牛脐带组织提取物的全谱图。
图3是本发明实施例1制得的动物脐带组织提取物肽段长度分布图。图3示出了肽段离子化后大部分电荷数为2或3的肽段长度分布在8-20个氨基酸残基之间。
图4是本发明实施例1制得的动物脐带组织提取物中的蛋白数鉴定图，其中61代表蛋白质数目，512代表可信度≥95去除重复后的肽段数目，2551代表蛋白质对应的二级质谱图数目。图4示出，分析样品中的已知蛋白数量为3124个。
图5是使用本发明实施例1的头发生长液的效果图；其中，左图为使用本发明实施例1的头发生长液前的头发状态图，右图为使用本发明实施例1的头发生长液8周后的效果图。
图6是使用本发明实施例2的头发生长液的效果图；其中，左图为使用本发明实施例2的头发生长液前的头发状态图，右图为使用本发明实施例2的头发生长液6周后的效果图。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。
实施例1
脐带组织提取物的制备：
(1)将牛脐带组织浸泡于PBS中，清洗掉血渍和污渍；转移到碘伏中浸泡3min后取出，用无菌蒸馏水清洗3次，去掉脐带两端，转移浸泡在3％的H2O2中，待无泡沫出现时捞出，用蒸馏水清洗3次。
(2)将步骤(1)处理后的牛脐带组织，通过无菌操作技术，转移到超净台中，用无菌手术刀切成2cm的小段，收集到密闭容器中。根据以下重量比，DMSO:甘露醇:山梨醇:吐温20:PBS:动物脐带组织＝0.02:0.1:0.05:0.001:0.5:1，将DMSO、甘露醇、山梨醇、吐温20、PBS加入到所述密闭容器中。在-10kPa、4℃的环境中静放置30min，然后以1kPa/min升压速率升压至0kPa。然后，转移至-100℃中冷冻20小时。
(3)将步骤(2)处理得到牛脐带组织在-100℃进行反复研磨，反复过30μm的筛网，收集小于30μm的粉末状牛脐带组织。
(4)向步骤(3)获得的粉末中加入蒸馏水，其中蒸馏水的加入重量是所述粉末状牛脐带组织重量的0.5倍，调整pH值至7.3。然后，在压力±30kPa，升降压速率为1kPa/min呼吸压中往复；同时，控制在温度1-10℃，升降温速率为1℃/h的复温下搅拌30h。然后，采用孔径为10μm的筛网过滤收集小于10μm的第一过滤液，同时收集大于10μm的牛脐带沉积组织。
(5)向步骤(4)获得的牛脐带沉积组织中加入蒸馏水，其中蒸馏水的加入重量是所述牛脐带沉积组织重量的1倍，调整pH值至7.3。然后，在压力±30kPa，升降压速率为1kPa/min呼吸压中往复；同时，控制在温度25～39℃，升降温速率为1℃/h的复温下搅拌48h。然后，采用孔径为10μm的筛网过滤收集小于10μm的第二过滤液。
(6)将所述第一过滤液和所述第二过滤液合并得到总过滤液，并向所述总过滤液中添加抗氧剂无水亚硫酸钠，稳定剂甘氨酸、烟酰胺和辛酸钠，抑菌剂苯酚；其中，抗氧剂、稳定剂、抑菌剂与所述总过滤液的重量比为，抗氧剂:稳定剂:抑菌剂:总过滤液＝0.001:0.0005:0.0002:1。然后调整渗透压为210mOsmol/kg，使加入了抗氧剂、稳定剂和抑菌剂的总过滤液依次通过孔径为10μm、8μm、6μm、4μm、2μm、0.8μm、0.4μm、0.22μm的滤器以去除病原体，收集小于0.22μm的第三过滤液，即得到牛脐带组织提取物。
将本实施例的牛脐带组织提取物遵循无菌管理原则和市场的需求规格，分装至西林瓶中，抽真空冻干保存。
头发生长液的制备：
以头发生长液的总重量为基准，各组分及其重量百分含量(wt％)为：
A组分：1,3-丁二醇10％、1,2-己二醇0.5％、馨藓酮0.5％、对羟基苯乙酮0.5％以及余量的去离子水；
B组分：本实施例制备的脐带组织提取物30％；
C组分：乙醇10％；
将A组分按照上述比例混合后，加热到60℃，搅拌20min融合混匀。待降至室温后，加入B组分搅拌混匀，再加入C组分搅拌均匀后得产品。
实施例2
脐带组织提取物的制备：
(1)将牛脐带组织浸泡于PBS中，清洗掉血渍和污渍；转移到碘伏中浸泡5min后取出，用无菌蒸馏水清洗4次，去掉脐带两端，转移浸泡在6％的H2O2中，待无泡沫出现时捞出，用蒸馏水清洗4次。
(2)将步骤(1)处理后的牛脐带组织，通过无菌操作技术，转移到超净台中，用无菌手术刀切成3cm的小段，收集到密闭容器中。根据以下重量比，DMSO:甘露醇:山梨醇:吐温20:PBS:动物脐带组织＝0.05:0.15:0.08:0.0005:0.80:1，将DMSO、甘露醇、山梨醇、吐温20、PBS加入到所述密闭容器中。在-20kPa、4℃的环境中静放置60min，然后以0.1kPa/min升压速率升压至0kPa。然后，转移至-196℃中冷冻12小时。
(3)将步骤(2)处理得到牛脐带组织在-196℃进行反复研磨，反复过30μm的筛网，收集小于30μm的粉末状牛脐带组织。
(4)向步骤(3)获得的粉末中加入蒸馏水，其中蒸馏水的加入重量是所述粉末状牛脐带组织重量的2倍，调整pH值至7.5。然后，在压力±30kPa，升降压速率为0.1kPa/min呼吸压中往复；同时，控制在温度1-10℃，升降温速率为0.5℃/h的复温下搅拌24h。然后，采用孔径为5μm的筛网过滤收集小于5μm的第一过滤液，同时收集大于5μm的牛脐带沉积组织。
(5)向步骤(4)获得的牛脐带沉积组织中加入蒸馏水，其中蒸馏水的加入重量是所述牛脐带沉积组织重量的2倍，调整pH值至7.4。然后，在压力±30kPa，升降压速率为0.5kPa/min呼吸压中往复；同时，控制在温度25～39℃，升降温速率为0.5℃/h的复温下搅拌36h。然后，采用孔径为5μm的筛网过滤收集小于5μm的第二过滤液。
(6)将所述第一过滤液和所述第二过滤液合并得到总过滤液，并向所述总过滤液中添加抗氧剂焦亚硫酸氢钠，稳定剂苹果酸，抑菌剂硫柳汞；其中，抗氧剂、稳定剂、抑菌剂与所述总过滤液的重量比为，抗氧剂:稳定剂:抑菌剂:总过滤液＝0.002:0.0001:0.0008:1。然后调整渗透压为400mOsmol/kg，使加入了抗氧剂、稳定剂和抑菌剂的总过滤液依次通过孔径为10μm、8μm、6μm、4μm、2μm、0.8μm、0.4μm、0.22μm的滤器以去除病原体，收集小于0.22μm的第三过滤液，即得到牛脐带组织提取物。
将本实施例的牛脐带组织提取物遵循无菌管理原则和市场的需求规格，分装至西林瓶中，抽真空冻干保存。
头发生长液的制备：
以头发生长液的总重量为基准，各组分及其重量百分含量(wt％)为：
A组分：PEG/PPG-17/6共聚物2.5％、PEG/PPG-14/7二甲基醚2.5％、EDTA二钠0.1％、四己基癸醇抗坏血酸酯0.5％、生育酚乙酸酯0.5％以及余量的去离子水；
B组分：本实施例制备的脐带组织提取物15％；
C组分：乙醇10％；
将A组分按照上述比例混合后，加热到50℃，搅拌30min融合混匀。待降至室温后，加入B组分搅拌混匀，再加入C组分搅拌均匀后得产品。
实施例3
脐带组织提取物的制备：
(1)将牛脐带组织浸泡于PBS中，清洗掉血渍和污渍；转移到碘伏中浸泡4min后取出，用无菌蒸馏水清洗4次，去掉脐带两端，转移浸泡在5％的H2O2中，待无泡沫出现时捞出，用蒸馏水清洗4次。
(2)将步骤(1)处理后的牛脐带组织，通过无菌操作技术，转移到超净台中，用无菌手术刀切成1cm的小段，收集到密闭容器中。根据以下重量比，DMSO:甘露醇:山梨醇:吐温20:PBS:动物脐带组织＝0.03:0.005:0.005:0.0001:0.40:1，将DMSO、甘露醇、山梨醇、吐温20、PBS加入到所述密闭容器中。在-15kPa、4℃的环境中静放置40min，然后以1kPa/min升压速率升压至0kPa。然后，转移至-30℃中冷冻20小时。
(3)将步骤(2)处理得到牛脐带组织在-30℃进行反复研磨，反复过30μm的筛网，收集小于30μm的粉末状牛脐带组织。
(4)向步骤(3)获得的粉末中加入蒸馏水，其中蒸馏水的加入重量是所述粉末状牛脐带组织重量的1倍，调整pH值至7.4。然后，在压力±30kPa，升降压速率为0.5kPa/min呼吸压中往复；同时，控制在温度1-10℃，升降温速率为0.8℃/h的复温下搅拌36h。然后，采用孔径为8μm的筛网过滤收集小于8μm的第一过滤液，同时收集大于8μm的牛脐带沉积组织。
(5)向步骤(4)获得的牛脐带沉积组织中加入蒸馏水，其中蒸馏水的加入重量是所述牛脐带沉积组织重量的0.5倍，调整pH值至7.5。然后，在压力±30kPa，升降压速率为0.8kPa/min呼吸压中往复；同时，控制在温度25～39℃，升降温速率为0.5℃/h的复温下搅拌48h。然后，采用孔径为8μm的筛网过滤收集小于8μm的第二过滤液。
(6)将所述第一过滤液和所述第二过滤液合并得到总过滤液，并向所述总过滤液中添加抗氧剂焦亚硫酸氢钠，稳定剂苹果酸，抑菌剂硫柳汞；其中，抗氧剂、稳定剂、抑菌剂与所述总过滤液的重量比为，抗氧剂:稳定剂:抑菌剂:总过滤液＝0.0015:0.00015:0.001:1。然后调整渗透压为300mOsmol/kg，使加入了抗氧剂、稳定剂和抑菌剂的总过滤液依次通过孔径为10μm、8μm、6μm、4μm、2μm、0.8μm、0.4μm、0.22μm的滤器以去除病原体，收集小于0.22μm的第三过滤液，即得到牛脐带组织提取物。
将本实施例的牛脐带组织提取物遵循无菌管理原则和市场的需求规格，分装至西林瓶中，抽真空冻干保存。
头发生长液的制备：
以头发生长液的总重量为基准，各组分及其重量百分含量(wt％)为：
A组分：甘油10％、丙二醇5％、辛酰羟肟酸1％、对羟基苯乙酮0.1％以及余量的去离子水；
B组分：本实施例制备的脐带组织提取物40％；
C组分：乙醇10％；
将A组分按照上述比例混合后，加热到85℃，搅拌15min融合混匀。待降至室温后，加入B组分搅拌混匀，再加入C组分搅拌均匀后得产品。
对比例1
采用申请号为201910438348.1中公开的方法制备牛脐带组织提取物。
具体地，该对比例的制备步骤如下：
(1)动物组织的处理：取经检验检疫后的健康母牛自然分娩后的离体脐带组织，用丝线将脐带两头扎紧后，浸泡于生理盐水里中，4℃下运回实验室，用灭菌纯水清洁脐带组织后，用无菌手术剪刀去除脐带两头后，碘伏内浸泡1min后取出用体积比75％的酒精脱碘，用灭菌纯水冲洗3次，并在无菌条件下机械式匀浆。
(2)提取物的富集：在步骤(1)获得的匀浆组织加入30倍体积的灭菌纯水和3倍体积的2.5g/L的胰蛋白酶水溶液，制成混合液，将所述混合液在不添加任何培养基的情况下置于厌氧培养箱中于40℃下孵育35小时，进行饥饿刺激。
(3)提取物的澄清分离：将步骤(2)孵育后的混合液以6000r/min离心15min后，收集上清液8℃保存。同时保留沉积的组织物。
(4)提取物的酶解：在步骤(3)获得的沉积的组织物中加入3倍体积的25g/L的胰蛋白酶水溶液，然后置于搅拌器中搅拌36小时后，加入同等体积的灭菌纯水混匀后，以6000r/min离心15min，收集上清液8℃保存。
(5)合并上清液：将步骤(3)和步骤(4)收集的上清液合并。
(6)微生物和胰蛋白酶灭活：将步骤(5)合并后的上清液在60℃水浴锅中灭活30分钟，收集灭活后的上清液。
(7)提取物的过滤除菌：将步骤(6)灭活后的上清液，依次通过孔径为120μm、70μm、25μm、100nm、50nm、20nm的滤器以去除病原体，过滤条件为：进口压力0.6MPa，温度为8℃，收集过滤液。
(8)提取物的超滤：将步骤(7)收集的过滤液，施加正负压力分别过50000道尔顿和5000道尔顿分子量的滤膜，小于50000道尔顿大于5000道尔顿为细胞因子，小于5000道尔顿为复合多肽，分别收集过滤液，过滤条件为：进口压力0.6MPa，出口压力-0.6MPa。
将对比例1的牛脐带组织提取物遵循无菌管理原则和市场的需求规格，分装至西林瓶中，抽真空冻干保存。
实施例4
将本发明实施例1的牛脐带组织提取物遵循无菌管理原则和市场的需求规格，分装至西林瓶中，抽真空冻干保存。通过NANO-A280测量冷冻干燥保存的牛脐带提取物中的蛋白含量，结果示于表1中。
表1
Figure BDA0002853148360000111
将本发明实施例1的牛脐带组织提取物遵循无菌管理原则和市场的需求的规格，可以分装至针剂安瓶中，补充惰性气体氮气，灯检后于常温(25℃)保存入库。通过NANO-A280测量常温(25℃)保存的牛脐带提取物中的蛋白含量，结果示于表2中。
表2
Figure BDA0002853148360000121
将本发明实施例1的牛脐带组织提取物遵循无菌管理原则和市场的需求的规格，可以分装至针剂安瓶中，补充惰性气体氮气，灯检后于低温(4℃)保存入库。通过NANO-A280测量低温(4℃)保存的牛脐带提取物中的蛋白含量，结果示于表3中。
表3
Figure BDA0002853148360000122
通过NANO-A280测量对比例1保存的牛脐带提取物中的蛋白含量，结果示于表4中。
表4
Figure BDA0002853148360000131
从表1-3中可以看出，本发明的方法制备得到的动物组织提取物可以采用多种方法保存，比如常温液态、低温液态或冻干粉保存。保存180天后，本发明的方法制备得到的动物组织提取物中的蛋白含量几乎没有损失，提取物非常稳定。表4示出，相对于对比例1而言，本发明的制备方法制得的脐带提取物保存稳定性上更高，更容易保存。
实施例5
将本发明实施例1的牛脐带组织提取物分别采用实施例4中记载的方式进行常温液态、低温液态和冻干粉进行保存。将本发明实施例1的牛脐带组织提取物常温液态保存的样品记为常温样品，将本发明实施例1的牛脐带组织提取物低温液态保存的样品记为低温样品，将本发明实施例1的牛脐带组织提取物常温以冻干粉形态保存的样品记为冻干样品。冻干样品、低温样品、常温样品、和对比例1的样品均是新鲜制备的。
通过SDS-PAGE测定常温样品、低温样品、冻干样品和对比例1制得的动物脐带组织提取物的电泳结果图示于图1。
图1示出，本发明的方法的到牛脐带组织提取物不论采用何种方式进行保存，其均能得到比对比例1更高的蛋白质含量。
实施例6
使用效果实验
对头发稀疏、容易掉发的女性使用本发明实施例1制备的头发生长液。图5是使用本发明实施例1的头发生长液的效果图；其中，左图为使用本发明实施例1的头发生长液前的头发状态图，右图为使用本发明实施例1的头发生长液8周后的效果图。图5示出了，本发明实施例1制备的头发生长液能够促进头发生长。
对头发稀疏、容易掉发的男性使用本发明实施例2制备的头发生长液。图6是使用本发明实施例2的头发生长液的效果图；其中，左图为使用本发明实施例2的头发生长液前的头发状态图，右图为使用本发明实施例2的头发生长液6周后的效果图。图6示出了，使用本发明实施例2制备的头发生长液后，能够促进头发生长并且头发不易掉了。
本发明的实施例3制备的头发生长液也具有如同实施例1和实施例2的相同效果。

Claims (9)

1.一种头发生长液，其包含以下组分：
以头发生长液的总重量为基准，脐带组织提取物10％～50％、保湿剂5％～15％、溶剂5％-15％以及余量的去离子水；
所述脐带组织提取物是通过包括如下步骤的方法制备的：
(1)将冷冻的动物脐带组织研磨成粉末；
(2)向步骤(1)得到的粉末加水，然后在第一呼吸压和第一复温下进行搅拌，并以孔径为5-10μm的第一过滤器过滤；其中，所述第一呼吸压和第一复温各自独立地变化，所述第一呼吸压为-30kPa至30kPa，且所述第一复温为1℃至10℃；
(3)向步骤(2)过滤得到的沉积物加水，然后在第二呼吸压和第二复温下进行搅拌，并以孔径为5-10μm的第二过滤器过滤；其中，所述第二呼吸压和第二复温各自独立地变化，所述第二呼吸压为-30kPa至30kPa，且所述第二复温为25℃至39℃；
(4)将步骤(2)和(3)得到的滤液合并，然后过滤去除病原体。
2.根据权利要求1所述的头发生长液，其中，以头发生长液的总重量为基准，所述头发生长液还包含抗氧化剂0.1％-1％和/或螯合剂0.1％～1％。
3.根据权利要求1所述的头发生长液，其中，所述保湿剂选自甘油、丙二醇、甲基丙二醇、1,3-丁二醇、1,2-己二醇、甘油聚醚-26、PEG/PPG-17/6共聚物和PEG/PPG-14/7二甲基醚中的一种或几种；
优选地，所述保湿剂为1,3-丁二醇和1,2-己二醇。
4.根据权利要求1所述的头发生长液，其中，所述溶剂选自二丙二醇、乙醇和戊二醇中的一种或几种；
优选地，所述溶剂为乙醇。
5.根据权利要求2所述的头发生长液，其中，所述抗氧化剂选自羟癸基泛醌、四己基癸醇抗坏血酸酯、生育酚乙酸酯、对羟基苯乙酮和珍珠提取物中的一种或几种；
优选地，所述抗氧化剂为对羟基苯乙酮。
6.根据权利要求2所述的头发生长液，其中，所述螯合剂选自馨藓酮、EDTA二钠和辛酰羟肟酸中的一种或几种。
7.根据权利要求2所述的头发生长液，其中，所述螯合剂为馨藓酮。
8.根据权利要求2所述的头发生长液，其中，以头发生长液的总重量为基准，各组分的重量百分含量为：
脐带组织提取物30％、1,3-丁二醇10％、1,2-己二醇0.5％、乙醇10％、馨藓酮0.5％、对羟基苯乙酮0.5％以及余量的去离子水。
9.一种制备权利要求1-8中任一项所述的头发生长液的方法，包括如下步骤：
将保湿剂与脐带组织提取物、溶剂以及去离子水搅拌至均匀，即制得头发生长液；或者
将保湿剂与抗氧化剂和/或螯合剂混合，然后将混合物加热到50～85℃，搅拌至均匀，待降至室温后，加入脐带组织提取物、溶剂以及去离子水，搅拌至均匀，即制得头发生长液。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117100673A (zh) * 2023-10-23 2023-11-24 广州优特佳生物科技发展有限公司 一种调节毛囊周期的动物脐带提取物及其制备方法和应用

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CH471538A (fr) * 1968-04-18 1969-04-30 Pham Dr Van Huyen Procédé de préparation d'un extrait tissulaire
CN103998048A (zh) * 2011-07-11 2014-08-20 车比奥及戴奥斯泰有限公司 脐带提取物的制备方法和使用方法
CN110693909A (zh) * 2019-10-28 2020-01-17 陕西中鸿科瑞再生医学研究院有限公司 一种具有生发功效的脐带间充质干细胞因子的制备
CN111920828A (zh) * 2020-07-07 2020-11-13 西安世越再生医学研究中心有限公司 基于脐带间充质干细胞用于毛发再生的冻干粉、制备方法、生发营养液及毛发再生方法
CN114652664A (zh) * 2020-12-23 2022-06-24 科索瑞生物科技(天津)有限公司 修复凝胶及其制备方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CH471538A (fr) * 1968-04-18 1969-04-30 Pham Dr Van Huyen Procédé de préparation d'un extrait tissulaire
CN103998048A (zh) * 2011-07-11 2014-08-20 车比奥及戴奥斯泰有限公司 脐带提取物的制备方法和使用方法
CN110693909A (zh) * 2019-10-28 2020-01-17 陕西中鸿科瑞再生医学研究院有限公司 一种具有生发功效的脐带间充质干细胞因子的制备
CN111920828A (zh) * 2020-07-07 2020-11-13 西安世越再生医学研究中心有限公司 基于脐带间充质干细胞用于毛发再生的冻干粉、制备方法、生发营养液及毛发再生方法
CN114652664A (zh) * 2020-12-23 2022-06-24 科索瑞生物科技(天津)有限公司 修复凝胶及其制备方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
国家药典委员会: "中华人民共和国药典二部注释", vol. 1, 华南理工大学出版社, pages: 105 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117100673A (zh) * 2023-10-23 2023-11-24 广州优特佳生物科技发展有限公司 一种调节毛囊周期的动物脐带提取物及其制备方法和应用
CN117100673B (zh) * 2023-10-23 2024-02-23 广州优特佳生物科技发展有限公司 一种调节毛囊周期的动物脐带提取物及其制备方法和应用

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