CN111202764B - 一种提高甘草素含量的工艺 - Google Patents

一种提高甘草素含量的工艺 Download PDF

Info

Publication number
CN111202764B
CN111202764B CN202010027619.7A CN202010027619A CN111202764B CN 111202764 B CN111202764 B CN 111202764B CN 202010027619 A CN202010027619 A CN 202010027619A CN 111202764 B CN111202764 B CN 111202764B
Authority
CN
China
Prior art keywords
glycyrrhizin
fermentation
content
licorice
water
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202010027619.7A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111202764A (zh
Inventor
房春林
吴学渊
韩笑
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Sichuan Wanmuyuan Agricultural Technology Co ltd
Chengdu Vocational College of Agricultural Science and Technology
Original Assignee
Sichuan Wanmuyuan Agricultural Technology Co ltd
Chengdu Vocational College of Agricultural Science and Technology
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sichuan Wanmuyuan Agricultural Technology Co ltd, Chengdu Vocational College of Agricultural Science and Technology filed Critical Sichuan Wanmuyuan Agricultural Technology Co ltd
Priority to CN202010027619.7A priority Critical patent/CN111202764B/zh
Publication of CN111202764A publication Critical patent/CN111202764A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111202764B publication Critical patent/CN111202764B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/48—Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
    • A61K36/484—Glycyrrhiza (licorice)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline 
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/10—Preparation or pretreatment of starting material
    • A61K2236/19—Preparation or pretreatment of starting material involving fermentation using yeast, bacteria or both; enzymatic treatment

Abstract

本发明提供了一种提高甘草素含量的工艺，它是以甘草为原料，经过酵母菌发酵。所述工艺包括以下步骤：取甘草药材，灭菌，加入纤维素酶、水、酵母菌，发酵。实验结果表明，经过本发明的发酵工艺得到的甘草发酵品中甘草素含量显著提高，相同质量的甘草药材经本发明特定工艺发酵后，甘草素的含量提高30倍以上。本发明的发酵工艺成本低、操作简单、易大规模生产，在制备高甘草素含量的甘草产品中具有广阔的应用前景。

Description

一种提高甘草素含量的工艺
技术领域
本发明属于中药提取领域，尤其涉及一种提高甘草素含量的工艺。
背景技术
甘草(Glycyrrhiza)为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.、胀果干草Glycyrrhiza inflata Bat.、或光果干草Glycyrrhiza glabra L.的干燥根及根茎，春秋二季采挖。甘草具有补脾益气、清热解毒、祛痰止咳、缓急止痛、调和诸药等功效，其主要的活性化学成分包括三萜皂苷类、黄酮类及多糖类化合物三大类。其中黄酮类化合物是甘草中最重要的活性物质，具有明显抗肿瘤、抗溃疡、抗炎、抗艾滋病毒等作用。甘草中的黄酮类化合物主要包括甘草素(liquiritigenin)和异甘草(Isoliquiritigenin)。其中，甘草素是二氢黄酮单体化合物，为白色针状晶体，分子式为C15H12O4，分子量256.25，具有广泛的药理作用，具有抗炎、抗病毒、保肝解毒及增强免疫功能等效果，临床上被用于治疗各种慢性肝炎和肝纤维化，而且还能在化妆品中用于美白皮肤。由于甘草素具有上述优异的药理活性，其合成和提取工艺获得了广泛的研究。
杨立等人研究了甘草素的人工合成工艺，但人工合成所得甘草素的总体收率很低，还不宜产业化生产。而且，化学合成产物和天然产物往往存在如旋光异构的差异，很可能直接影响产物的生物活性。另外，研究表明，甘草药材中总黄酮含量约为2～3％，其中甘草素的含量较低，甘草素在甘草药材中的含量仅为0.06％～0.18％。因此，如何从甘草药材中提取得到高含量的甘草素，成为了关注的重点。
中国专利CN102112142A公开了一种提高甘草或甘草提取物中甘草素含量的提取方法，该方法包括：用水、有机溶剂或水和有机溶剂的混合溶剂提取甘草得到含甘草苷的产物；将水、有机溶剂或水和有机溶剂的混合溶剂加入步骤1中提取得到的含甘草苷的产物中，向溶液中加入酸或碱，水解混合物以制备含甘草素的产物。但是这种方法不仅提取效率低，而且产物中甘草素的含量较低。
中国专利CN106916859A公开了一种从甘草废渣中快速提取甘草素的方法，包括以下步骤：以碱提酸沉法提取甘草酸后的剩余废渣为原料，超声提取后，降温酶解；酶解液真空抽滤，滤液浓缩至干后，用乙醇溶解，得到浓缩液；将浓缩液注射于CHEETAH中高压快速制备液相色谱柱，分析色谱检测含甘草素浓度最大的馏分及前、后两侧共三个馏分合并，减压浓缩干燥后，得到高纯度甘草素产品。该方法虽然能够得到较高纯度的甘草素，但是需要通过制备液相色谱柱分离纯化，成本较高，工艺复杂，也不利于大规模生产。
因此，亟需寻找一种成本低、操作简单、易大规模生产的工艺来提高甘草素的含量。
发明内容
本发明的目的在于提供一种提高甘草素含量的工艺。
本发明提供了一种提高甘草素含量的工艺，它是以甘草为原料，经过酵母菌发酵。
进一步地，所述工艺包括以下步骤：取甘草药材，灭菌，加入纤维素酶、水、酵母菌，发酵。
进一步地，所述甘草药材为粉碎后的甘草药材，粒径优选为300-500目。
进一步地，所述灭菌条件为：100～120℃处理20～40min；优选为100℃处理30min。
进一步地，所述甘草药材为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.、胀果干草Glycyrrhiza inflata Bat.、或光果干草Glycyrrhiza glabra L.的干燥根和根茎；
所述水为灭菌后的蒸馏水；
所述酵母菌为酿酒酵母菌。
进一步地，所述甘草药材、纤维素酶、水、酵母菌的质量比为10kg：(7-9)g：(5.5-6.5)kg：(30～40)g；
优选的，所述甘草药材、纤维素酶、水、酵母菌的质量比为10kg：8g：6kg：35g。
进一步地，所述发酵的温度为25-28℃，优选为25℃。
进一步地，所述发酵的时间为2～3天，优选为2天。
进一步地，所述发酵是在呼吸袋中进行的；
所述发酵后还包括干燥步骤。
本发明还提高了上述工艺制备得到的甘草发酵产品。
呼吸袋(Cleansteam Bag)，又称Tyvek/聚乙烯洁净袋，是一种以Tyvek和聚乙烯膜为主要原料，采用热封工艺，在洁净环境下制成的密封袋，常用于需要进行灭菌的医药产品的包装和灭菌。
实验结果表明，经过本发明的发酵工艺得到的甘草发酵品中甘草素含量显著提高，相同质量的甘草药材经本发明特定工艺发酵后，甘草素的含量提高30倍以上。本发明的发酵工艺成本低、操作简单、易大规模生产，在制备高甘草素含量的甘草产品中具有广阔的应用前景。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
附图说明
图1为甘草素对照品的高效液相法测定色谱图。
图2为甘草发酵样品的高效液相法测定色谱图。
图3为甘草药材的高效液相法测定色谱图。
具体实施方式
本发明所用原料与设备均为已知产品，通过购买市售产品所得。
实施例1、本发明提高甘草素含量的工艺
取甘草药材10kg，超微粉碎至300-500目，100℃高温灭菌处理30min，加入纤维素酶8g，灭菌蒸馏水6kg，再加入酿酒酵母菌(购自安琪酵母股份有限公司)35g，混合均匀，装入呼吸袋中，在25℃条件下发酵2天，然后干燥，即得甘草发酵品。
实施例2、本发明提高甘草素含量的工艺
取甘草药材10kg，超微粉碎至300-500目，100℃高温灭菌处理30min，加入纤维素酶7g，灭菌蒸馏水5.5kg，再加入酿酒酵母菌(购自安琪酵母股份有限公司)30g，混合均匀，装入呼吸袋中，在25℃条件下发酵2天，然后干燥，即得甘草发酵品。
实施例3、本发明提高甘草素含量的工艺
取甘草药材10kg，超微粉碎至300-500目，100℃高温灭菌处理30min，加入纤维素酶9g，灭菌蒸馏水6.5kg，再加入酿酒酵母菌(购自安琪酵母股份有限公司)40g，混合均匀，装入呼吸袋中，在28℃条件下发酵3天，然后干燥，即得甘草发酵品。
以下通过实验例证明本发明的有益效果。
实验例1、高效液相法测定甘草素的含量
1实验材料
对照品：甘草素，成都瑞芬思生物科技有限公司提供。
供试品：甘草药材，市售经检验合格；甘草发酵样品，实施例1制得。
2实验方法
2.1色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.05％磷酸溶液为流动相B；按表1中的规定进行梯度洗脱；检测波长为237nm，理论板数按甘草素峰计算不低于5000。
表1梯度洗脱流动相要求
2.2对照品溶液的制备：取甘草素对照品适量，精密称定，加70％乙醇制成每1ml含甘草素20μg的溶液，即得。
2.3供试品溶液的制备：
(1)取甘草发酵样品粉末(过三号筛)约0.2g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入70％乙醇100mL，密塞，称定重量，超声处理(功率250W,频率40kHz)30min，放冷，再称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得甘草发酵样品的供试品溶液。
(2)取甘草药材粉末，按照上述步骤(1)相同的方法，配置甘草药材的供试品溶液。
2.4测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
3实验结果
按照上述测定方法，对甘草药材及甘草发酵样品中甘草素含量进行了测定，结果见图1～3，表2。结果表明，未经处理的甘草药材中，1g甘草药材含0.622mg甘草素；本发明发酵工艺制得的甘草发酵样品中，以甘草药材的原料进行换算，1g甘草药材原料发酵制得的甘草发酵样品中含20.90mg甘草素。所以，本发明制得的甘草发酵样品中甘草素含量显著提高，相同质量的甘草药材经本发明特定工艺发酵后，甘草素的含量提高30倍以上。
表2甘草素含量测定结果
综上，本发明提供了一种提高甘草素含量的发酵工艺，经过本发明的发酵工艺得到的甘草发酵品中甘草素含量显著提高，相同质量的甘草药材经本发明特定工艺发酵后，甘草素的含量提高30倍以上。本发明的发酵工艺成本低、操作简单、易大规模生产，在制备高甘草素含量的甘草产品中具有广阔的应用前景。

Claims (9)

1.一种提高甘草素含量的方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：取甘草药材，灭菌，加入纤维素酶、水、酵母菌，发酵；所述甘草药材、纤维素酶、水、酵母菌的质量比为10kg：(7-9)g：(5.5-6.5)kg：(30～40)g；所述发酵的温度为25-28℃；所述发酵的时间为2～3天。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述甘草药材为粉碎后的甘草药材，粒径为300-500目。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述灭菌条件为：100～120℃处理20～40min。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述灭菌条件为：100℃处理30min。
5.根据权利要求2 所述的方法，其特征在于：所述甘草药材为豆科植物甘草
Glycyrrhiza uralensis Fisch .、胀果干草Glycyrrhiza inflata Bat .或光果干草
Glycyrrhiza glabra L .的干燥根和根茎；
所述水为灭菌后的蒸馏水；
所述酵母菌为酿酒酵母菌。
6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述甘草药材、纤维素酶、水、酵母菌的质量比为10kg：8g：6kg：35g。
7.根据权利要求1-6任一项所述的方法，其特征在于：所述发酵的温度为25℃。
8.根据权利要求1-6任一项所述的方法，其特征在于：所述发酵的时间为2天。
9.根据权利要求1-6任一项所述的方法，其特征在于：所述发酵是在呼吸袋中进行的；
所述发酵后还包括干燥步骤。
CN202010027619.7A 2020-01-10 2020-01-10 一种提高甘草素含量的工艺 Active CN111202764B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010027619.7A CN111202764B (zh) 2020-01-10 2020-01-10 一种提高甘草素含量的工艺

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010027619.7A CN111202764B (zh) 2020-01-10 2020-01-10 一种提高甘草素含量的工艺

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111202764A CN111202764A (zh) 2020-05-29
CN111202764B true CN111202764B (zh) 2023-11-28

Family

ID=70782620

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010027619.7A Active CN111202764B (zh) 2020-01-10 2020-01-10 一种提高甘草素含量的工艺

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111202764B (zh)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114159545B (zh) * 2021-12-29 2022-11-25 天中康元药业集团有限公司 一种含有酵素的美白抗皱组合物及其在药品中的应用
CN115737709B (zh) * 2022-09-08 2024-01-26 高文红 一种生物发酵物及其制备方法和应用
CN116059119B (zh) * 2023-03-03 2023-06-20 花安堂生物科技集团有限公司 含甘草和光甘草定的脂质体溶液、及其制备方法和应用

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102112142A (zh) * 2008-08-01 2011-06-29 大元制药株式会社 用于提高甘草或甘草提取物中甘草素含量的提取方法
CN105325688A (zh) * 2015-10-30 2016-02-17 崇州市隆兴孔学梅家庭农场 中草药与益生菌复合发酵料的混合饲料及其制备方法
CN106916859A (zh) * 2017-02-13 2017-07-04 辽宁科技大学 一种从甘草废渣中快速提取甘草素的方法
CN110090469A (zh) * 2019-04-26 2019-08-06 青岛农业大学 一种从甘草中提取纯化甘草素和甘草次酸的方法
CN110521852A (zh) * 2019-09-19 2019-12-03 辽宁爱普罗斯生物科技有限公司 一种菌酶协同发酵的中药发酵饲料及其制备方法和应用

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102112142A (zh) * 2008-08-01 2011-06-29 大元制药株式会社 用于提高甘草或甘草提取物中甘草素含量的提取方法
CN105325688A (zh) * 2015-10-30 2016-02-17 崇州市隆兴孔学梅家庭农场 中草药与益生菌复合发酵料的混合饲料及其制备方法
CN106916859A (zh) * 2017-02-13 2017-07-04 辽宁科技大学 一种从甘草废渣中快速提取甘草素的方法
CN110090469A (zh) * 2019-04-26 2019-08-06 青岛农业大学 一种从甘草中提取纯化甘草素和甘草次酸的方法
CN110521852A (zh) * 2019-09-19 2019-12-03 辽宁爱普罗斯生物科技有限公司 一种菌酶协同发酵的中药发酵饲料及其制备方法和应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
豆康宁等.酵母菌发酵甘草溶液工艺优化研究.《食品工业》.2018,第第39卷卷(第第8期期),第141页右栏最后1段. *
酵母菌发酵甘草溶液工艺优化研究;豆康宁等;《食品工业》;第第39卷卷(第第8期期);第141页右栏最后1段 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN111202764A (zh) 2020-05-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN111202764B (zh) 一种提高甘草素含量的工艺
CN105037448B (zh) 一种快速大量提取分离薏苡仁低聚糖单体的方法
CN102976909B (zh) 一种从生姜中提取纯化6-姜酚的方法
CN101260131A (zh) 从杜仲中提取环烯醚萜活性部位及单体的方法
CN105131052B (zh) 一种西红花苷i的提取方法
CN106692211A (zh) 一种牛樟芝菌丝体三萜类提取物的制备方法
CN103540640A (zh) 知母皂苷aⅲ的制备方法
CN110964030A (zh) 一种从叶下珠中分离制备鞣花酸的球磨辅助提取方法
CN105385747A (zh) 一种用八角金盘制备酚酸类化合物的方法
CN103467262B (zh) 从樟树植株中制备9-oxonerolidol的方法
Wu et al. Preparation of paeoniflorin from the stems and leaves of Paeonia lactiflora Pall.‘Zhongjiang’through green efficient microwave-assisted extraction and subcritical water extraction
CN115010618B (zh) 一种可降尿酸的金色酰胺醇酯分离纯化方法及其应用
CN112079804A (zh) 一种山莴苣苦素及其作为抗炎成分的应用
CN1634970A (zh) 一种三七总皂苷的制备方法
CN101955507A (zh) 柳穿鱼苷对照品的制备方法
CN106905278A (zh) 一种从镰形棘豆中分离制备5种具有抗炎活性化合物的方法
CN109456163B (zh) 一种具有对称结构的环烯酮类化合物及其制备方法和应用
CN111777657A (zh) 一种皂苷化合物及其制备方法与应用
CN101450962B (zh) 从秋茄叶片中提取齐墩果酸的方法
CN101787004A (zh) 滇瑞香所含的木脂素类化合物及其制备方法和应用
CN101940615A (zh) 尾叶香茶菜总二萜的制备新方法
CN102212002B (zh) 一种高纯度丹酚酸a的批量制备方法
CN110772549A (zh) 一种鸦胆子汇总抗肿瘤新成分的制备方法
CN109938350A (zh) 一种具有降血糖功效的杨梅果渣醇提物及制备方法
CN110452278A (zh) 臭七次生代谢物及其制备方法与其在制药中的应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant