CN111134894A - 一种在体测定犬前列腺组织连续动态游离药物浓度的采样方法 - Google Patents

一种在体测定犬前列腺组织连续动态游离药物浓度的采样方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及医疗评价、检测技术领域，具体是一种在体测定犬前列腺组织连续动态游离药物浓度的采样方法，其包括下列步骤：通过手术操作将同心圆探针植入犬前列腺组织后，再利用微透析系统进行采样，从而获得前列腺组织中的连续的游离药物浓度，研究和评价前列腺组织的局部药代动力学，用于实现药物个体化治疗及靶向给药等研究需求。本发明还包括在体测定犬前列腺组织连续动态游离药物浓度的系统。其优点表现在：操作重复性好，在保证组织在体、完好的条件下，尽可能减少了组织活检采样带来的创伤和对药动学的显著影响，提供了组织中实时动态连续的游离药物浓度，为研究前列腺疾病以及合理制定给药方案提供了依据。

Description

一种在体测定犬前列腺组织连续动态游离药物浓度的采样 方法
技术领域
本发明涉及医疗评价、检测技术领域，具体地说，是一种在体测定犬前列腺组织连续动态游离药物浓度的采样方法。
背景技术
前列腺是维护男性正常生理功能的重要器官，同时也是男性特有疾病的发病部位。随着生活方式的改变和社会的发展，前列腺炎、前列腺增生等良性前列腺疾病或是前列腺癌等恶性前列腺疾病均已成为危害男性身体健康的的常见病和多发病。据报道，一半以上的男人一生中会罹患前列腺相关疾病。药物在前列腺疾病治疗中发挥着重要作用，但有时疗效却往往并不理想，有时疗效差异大。研究药物在前列腺组织动态分布规律的核心难点之一，在于如何在活体动物的前列腺组织中动态取样，达到在体(in vivo)、在线(online)、实时(real time)测定局部组织的药物浓度。
传统的研究药物在前列腺组织分布的技术为组织活检，但是组织活检会造成动物体巨大创伤，导致动物药代动力学发生显著改变，甚至造成动物死亡；且组织活检采样检测出的是游离药物和结合药物的总浓度，而真正起到药效作用的却是游离药物，因此活检采样所测药物浓度无法准确研究其与药物效应的关系。微透析(microdialysis)在体取样新技术能够实现微探针同时在不同组织部位非常精确的植入，并利用极微量(一般若干微升)的透析装置实现活体动态连续采样，不干扰动物的正常生理功能。但是由于前列腺组织特殊的部位、大小和组织致密性，使其应用微透析技术需要非常高的技术要求。如何具体操作和实现，尚无文献报道。
本发明提供一种在体测定犬前列腺组织连续动态游离药物浓度的采样方法和系统，实现了在体对犬的前列腺组织的游离药物浓度的测定。
发明内容
本发明的第一个目的是针对现有技术的不足，提供一种在体测定犬前列腺组织连续动态游离药物浓度的系统。
本发明的第二个目的是针对现有技术的不足，提供如上所述的系统的用途。
本发明的第三个目的是针对现有技术的不足，提供一种在体测定犬前列腺组织连续动态游离药物浓度的采样方法。
本发明的第四个目的是针对现有技术的不足，提供如上所述采样方法的用途。
为实现上述第一个目的，本发明采取的技术方案是：
一种在体测定犬前列腺组织连续动态游离药物浓度的系统，包括装置和试剂，所述试剂包括：硫酸阿托品、盐酸赛拉嗪注射液、注射用盐酸替来他明盐酸唑拉西泮、复方氯化钠注射液、肝素钠注射液；所述装置包括植入同心圆探针的器械和微透析采样装置，所述植入同心圆探针的器械为组织镊、手术剪、手术刀、止血钳、穿刺针、弯圆针、角针、缝合线和纱布；微透析采样装置为微量注射泵、微量收集器、1ml注射器、同心圆探针、导管、连接管。
作为本发明的一个优选实施方案，所述的试剂中的盐酸赛拉嗪注射液与注射用盐酸替来他明盐酸唑拉西泮的质量比为2:3。
作为本发明的一个优选实施方案，其使用方法为：(1)将犬麻醉；(2)打开犬腹腔，找到前列腺组织，植入激活后的同心圆探针，给药于犬的同时收集透析液；(3)高效液相或液质测定微透析液药物浓度；(4)根据校正公式得出组织中游离药物浓度。
为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：
如上所述的在体测定犬前列腺组织连续动态游离药物浓度的系统的用途，所述的系统用于在体测定前列腺组织连续动态游离药物浓度。
如上所述的在体测定犬前列腺组织连续动态游离药物浓度的系统的用途，所述的系统在研究与制定治疗前列腺疾病个体化给药方案中的应用。
为实现上述第三个目的，本发明采取的技术方案是：
一种在体测定犬前列腺组织连续动态游离药物浓度的采样方法，包括两个部分：分别为将同心圆探针植入犬前列腺组织的手术过程和搭建微透析系统进行连续动态采样；
所需动物及器械工具：比格犬，1-2岁，体质量(12±1)kg，雄性；植入同心圆探针的器械工具由组织镊、手术剪、手术刀、止血钳、穿刺针、弯圆针、角针、缝合线、纱布组成；微透析采样系统(瑞典CMA公司)包括CMA4004四通道微量注射泵、CMA820型的4℃微量收集器、1ml注射器、CMA20同心圆探针(10mm的探针透析膜长度、直径0.5mm、分子量截留20kD)、导管、连接管。
活体采样方法：
(一)同心圆探针植入犬前列腺组织的手术过程
(1)术前准备：术前12h禁食，自由饮水，注射硫酸阿托品0.05mg·kg-1，15min后舒泰12mg·kg-1，前肢桡静脉建立静脉通道用于维持麻醉，术部备毛备皮；
(2)刀轻轻划开肌肉层，手术剪剪开脂肪层，止血钳分开腹膜，逐步分离组织，使之暴露膀胱，用纱布裹住膀胱轻轻向外牵拉找到前列腺并人工暂时固定，使用穿刺针在一侧与前列腺纵轴平行做穿刺，穿刺深度为14mm，拔出穿刺针，快速在穿刺部位植入同心圆探针，以弯圆针和缝合线将同心圆探针与周围组织固定，关闭腹腔，逐步缝合组织，最后以蘸有生理盐水的纱布盖住伤口；
(3)术后观察：术后采用混合麻醉来维持(盐酸赛拉嗪注射液与注射用盐酸替来他明盐酸唑拉西泮【舒泰50】质量比为2：3)。
(二)微透析系统进行采样
(1)微透析系统的安装：1ml注射器安装在微量注射泵上，利用连接管将同心圆探针与出、入口导管连接，入口导管与1ml注射器连接，出口导管与微量收集器固定以收集透析液；
(2)同心圆探针的体外激活和平衡：在同心圆探针植入前，将其置于盛有超纯水的校正反应瓶中，1ml注射器吸取适量超纯水，微量注射泵流速调整为2μl/min，时间30min，激活探针；随后1ml注射器和校正反应瓶中溶液均换为复方氯化钠注射液，微量注射泵流速为2μl/min，平衡探针，时间30min；
(3)同心圆探针的体内平衡：同心圆探针植入前列腺后，1ml注射器中换为肝素钠注射液，微量注射泵流速为2μl/min，时间30min；继而1ml注射器中换为复方氯化钠注射液，微量注射泵流速为2μl/min，平衡探针，时间90min；
(4)同心圆探针的体内校正：平衡结束后，进行体内校正，1ml注射器中换为待测药物的标准品溶液，控制适当的流速和时间来收集透析液；
(5)同心圆探针的采样：校正后，1ml注射器中换为复方氯化钠注射液，控制适当的流速和时间来收集透析液，待前列腺组织中的标准品浓度不影响药物浓度测定时，给药于犬，同时按适当时间间隔收集透析液，收集结束后，利用高效液相或液质测定透析液浓度，最后根据校正公式得出前列腺中的药物浓度。
作为本发明的一个优选实施方案，所述的游离药物为分布于前列腺组织的药物。
作为本发明的一个优选实施方案，所述的方法可用于检测分布于前列腺组织的生理性成分。
为实现上述第四个目的，本发明采取的技术方案是：
如上所述在体测定犬前列腺组织连续动态游离药物浓度的采样方法的用途，所述的方法用于在体测定前列腺组织连续动态游离药物浓度。
如上所述在体测定犬前列腺组织连续动态游离药物浓度的采样方法的用途，所述的方法在研究与制定治疗前列腺疾病个体化给药方案中的应用。
本发明优点在于：
1、本发明详细地介绍了同心圆探针植入犬的前列腺组织，避免了动物的不必要损伤和由此造成的生理情况的改变，且运用此操作技术后，犬能维持至少30小时的生命体征，这样最大程度地为在体实验研究争取了时间。
2、操作重复性好，在保证组织在体、完好的条件下，尽可能减少了组织活检采样带来的创伤和对药动学的显著影响，提供了组织中实时动态连续的游离药物浓度，为研究前列腺疾病以及合理制定给药方案提供了依据。
附图说明
附图1是微透析技术用于犬的前列腺组织部位的采样。
附图2是比格犬静脉输注左氧氟沙星后的平均药物浓度-时间曲线
Figure BDA0002372387590000041
附图3是比格犬静脉头孢拉定后的平均药物浓度-时间曲线
Figure BDA0002372387590000042
具体实施方式
下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明记载的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
实施例1在体测定犬前列腺组织连续动态游离药物浓度的系统
包括装置和试剂，所述试剂包括：硫酸阿托品、盐酸赛拉嗪注射液、注射用盐酸替来他明盐酸唑拉西泮、复方氯化钠注射液、肝素钠注射液；所述装置包括植入同心圆探针的器械和微透析采样装置，所述植入同心圆探针的器械为组织镊、手术剪、手术刀、止血钳、穿刺针、弯圆针、角针、缝合线和纱布；微透析采样装置为微量注射泵、微量收集器、1ml注射器、同心圆探针、导管、连接管。
实施例2动物实验(一)
一、实验动物与材料
1、动物
比格犬，1-2岁，体质量(12±1)kg，雄性。来源：由海军军医大学(第二军医大学)实验动物中心提供，动物生产许可证号：SCXK(沪)2015-0005。
2、药物
左氧氟沙星标准品(批号：130455-2016607，中国食品药品检定研究院)；
左氧氟沙星氯化钠注射液[第一三共制药(北京)有限公司，规格：5mg/ml)]；
复方氯化钠注射液(林格液，其成分为140mmol/LNa+、3.0mmol/LCa2+、4.0mmol/L K+)；
盐酸赛拉嗪注射液(速眠新Ⅱ，批号20180601，敦化市圣达动物药品有限公司；
注射用盐酸替来他明盐酸唑拉西泮(舒泰50，批号6VUL，法国维克有限公司)；
水为超纯水(上海长海医院自制)；制备方法：多效蒸馏法
注射用硫酸阿托品(批号180801，三明三药兽药有限公司)；
肝素钠注射液(江苏万邦生化医药股份有限公司)。
3、手术器械工具、仪器
组织镊、手术剪、手术刀、止血钳、穿刺针、弯圆针、角针、缝合线、纱布、留置针(型号规格REF，贝朗梅尔松根股份有限公司)，微透析采样系统(瑞典CMA公司)包括CMA4004四通道微量注射泵、CMA820型的4℃微量收集器、1ml注射器、CMA20同心圆探针(10mm的探针透析膜长度、直径0.5mm、分子量截留20kD)、导管、连接管。
二、实验方法
(1)同心圆探针植入犬前列腺组织的手术过程：
①术前准备：术前12h禁食，自由饮水。注射硫酸阿托品0.05mg·kg-1，15min后舒泰12mg·kg-1，前肢桡静脉建立静脉通道用于维持麻醉，后肢股静脉建立静脉通道给药，术部备毛备皮。
②手术操作：采用仰卧保定，耻骨前缘腹中线做切口，组织镊夹住肌肉，手术刀轻轻划开肌肉层，手术剪剪开脂肪层，止血钳分开腹膜，逐步分离组织，使之暴露膀胱，用纱布裹住膀胱轻轻向外牵拉找到前列腺并人工暂时固定，使用穿刺针在一侧与前列腺纵轴平行做穿刺，穿刺深度为14mm，拔出穿刺针，快速在穿刺部位植入同心圆探针，以弯圆针和缝合线将同心圆探针与周围组织固定，关闭腹腔，逐步缝合组织，最后以蘸有生理盐水的纱布盖住伤口。
③术后观察：术后采用混合麻醉来维持(盐酸赛拉嗪注射液与注射用盐酸替来他明盐酸唑拉西泮【舒泰50】质量比为2：3)。
(2)微透析系统进行采样
①微透析系统的安装：1ml注射器安装在微量注射泵上，利用连接管将同心圆探针与出、入口导管连接，入口导管与1ml注射器连接，出口导管与微量收集器固定以收集透析液。
②同心圆探针的体外激活和平衡：在同心圆探针植入前，将其置于盛有超纯水的校正反应瓶中，1ml注射器吸取适量超纯水，微量注射泵流速调整为2μl/min，时间30min，激活探针；随后1ml注射器和校正反应瓶中溶液均换为复方氯化钠注射液，微量注射泵流速为2μl/min，时间30min，平衡探针。
③同心圆探针的体内平衡：同心圆探针植入前列腺后，1ml注射器中换为肝素钠注射液，微量注射泵流速为2μl/min，时间30min，1ml注射器中换为复方氯化钠注射液，微量注射泵流速为2μl/min，时间90min，开始平衡。
④同心圆探针的体内校正：平衡结束后，进行体内校正，1ml注射器中换为0.25μg/ml标准品溶液，控制流速为1.5μl/min,每隔20min收集一次，共收集5次。
⑤同心圆探针的采样：校正后，1ml注射器中换为复方氯化钠注射液，控制流速为1.5μl/min，待前列腺组织中的标准品浓度不影响药物浓度测定时，按照15.6mg/kg的左氧氟沙星剂量给药于犬，给药速度为120ml/h。采样间隔为20min，收集时间共6h。收集结束后，利用高效液相测定透析液浓度，最后根据校正公式得出前列腺中的药物浓度。
三、实验结果
1、比格犬静脉输注左氧氟沙星后的平均药物浓度-时间曲线见图2。
2、静脉给药后前列腺的药动学参数
Figure BDA0002372387590000061
见表1。
表1、静脉给药后前列腺的药动学参数
Figure BDA0002372387590000062
药物 t<sub>1/2</sub>/min C<sub>max</sub>/(μg/ml) AUC<sub>0-6</sub>/(μg·min/ml) AUC<sub>0-∞</sub>/(μg·min/ml) T<sub>max</sub>
左氧氟沙星 234 22 4515 6867 50
实施例3动物实验(二)
一、实验动物与材料
1、动物
比格犬，1-2岁，体质量(12±1)kg，雄性。来源：由海军军医大学(第二军医大学)实验动物中心提供，动物生产许可证号：SCXK(沪)2015-0005。
2、药物
头孢拉定标准品(纯度88.4％，中国食品药品检定研究院)；
注射用头孢拉定(批号07518012，中化药品工业有限公司)；
复方氯化钠注射液(林格液，其成分为140mmol/L Na+、3.0mmol/L Ca2+、4.0mmol/LK+)；
盐酸赛拉嗪注射液(速眠新Ⅱ，批号20180601，敦化市圣达动物药品有限公司；
注射用盐酸替来他明盐酸唑拉西泮(舒泰50，批号6VUL，法国维克有限公司)；
水为超纯水(上海长海医院自制)，制备方法：多效蒸馏法
注射用硫酸阿托品(批号180801，三明三药兽药有限公司)；
肝素钠注射液(江苏万邦生化医药股份有限公司)。
4、手术器械工具、仪器
组织镊、手术剪、手术刀、止血钳、穿刺针、弯圆针、角针、缝合线、纱布、留置针(型号规格REF，贝朗梅尔松根股份有限公司)，微透析采样系统(瑞典CMA公司)包括CMA4004四通道微量注射泵、CMA820型的4℃微量收集器、1ml注射器、CMA20同心圆探针(10mm的探针透析膜长度、直径0.5mm、分子量截留20kD)、导管、连接管。
二、实验方法
(1)同心圆探针植入犬前列腺组织的手术过程：
①术前准备：术前12h禁食，自由饮水。注射硫酸阿托品0.05mg·kg-1，15min后舒泰12mg·kg-1，前肢桡静脉建立静脉通道用于维持麻醉，后肢股静脉建立静脉通道给药，术部备毛备皮。
②手术操作：采用仰卧保定，耻骨前缘腹中线做切口，组织镊夹住肌肉，手术刀轻轻划开肌肉层，手术剪剪开脂肪层，止血钳分开腹膜，逐步分离组织，使之暴露膀胱，用纱布裹住膀胱轻轻向外牵拉找到前列腺并人工暂时固定，使用穿刺针在一侧与前列腺纵轴平行做穿刺，穿刺深度为14mm，拔出穿刺针，快速在穿刺部位植入同心圆探针，以弯圆针和缝合线将同心圆探针与周围组织固定，关闭腹腔，逐步缝合组织，最后以蘸有生理盐水的纱布盖住伤口。
③术后观察：术后采用混合麻醉来维持(盐酸赛拉嗪注射液与注射用盐酸替来他明盐酸唑拉西泮舒泰50质量比为2：3)。
(2)微透析系统进行采样
①微透析系统的安装：1ml注射器安装在微量注射泵上，利用连接管将同心圆探针与出、入口导管连接，入口导管与1ml注射器连接，出口导管与微量收集器固定以收集透析液。
②同心圆探针的体外激活和平衡：在同心圆探针植入前，将其置于盛有超纯水的校正反应瓶中，1ml注射器吸取适量超纯水，微量注射泵流速调整为2μl/min，时间30min，激活探针；随后1ml注射器和校正反应瓶中溶液均换为复方氯化钠注射液，微量注射泵流速为2μl/min，时间30min，平衡探针。
③同心圆探针的体内平衡：同心圆探针植入前列腺后，1ml注射器中换为肝素钠注射液，微量注射泵流速为2μl/min，时间30min，1ml注射器中换为复方氯化钠注射液，微量注射泵流速为2μl/min，时间90min，开始平衡。
④同心圆探针的体内校正：平衡结束后，进行体内校正，1ml注射器中依次用不同浓度头孢拉定标准品溶液(1、4、20μg/mL)进行灌流换，控制流速为2μl/min,每隔15min收集一次，每种浓度下共收集5次。
⑤同心圆探针的采样：校正后，1ml注射器中换为复方氯化钠注射液，控制流速为1.5μl/min，待前列腺组织中的标准品浓度不影响药物浓度测定时，按照31mg/kg的头孢拉定剂量给药于犬，给药时间为30min。采样间隔为15min，收集时间共5h。收集结束后，利用液质测定透析液浓度，最后根据校正公式得出前列腺中的药物浓度。
三、实验结果
1、比格犬静脉头孢拉定后的平均药物浓度-时间曲线见图3。
2、静脉给药后前列腺的药动学参数
Figure BDA0002372387590000081
见表2.
表2、静脉给药后前列腺的药动学参数
Figure BDA0002372387590000082
药物 t<sub>1/2</sub>/min C<sub>max</sub>/(μg/ml) AUC<sub>0-6</sub>/(μg·min/ml) AUC<sub>0-∞</sub>/(μg·min/ml) T<sub>max</sub>
头孢拉定 107 18 2669 3280 60
四、实验结论
实验结果表明本发明的方法避免了动物的不必要损伤和由此造成的生理情况的改变，且运用此操作技术后，犬能维持至少30小时的生命体征，这样最大程度地为在体实验研究争取了时间。操作重复性好，在保证组织在体、完好的条件下，尽可能减少了组织活检采样带来的创伤和对药动学的显著影响，提供了组织中实时动态连续的游离药物浓度，为研究前列腺疾病以及合理制定给药方案提供了依据，具有很好的应用前景。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种在体测定犬前列腺组织连续动态游离药物浓度的系统，其特征在于，包括装置和试剂，所述试剂包括：硫酸阿托品、盐酸赛拉嗪注射液、注射用盐酸替来他明盐酸唑拉西泮、复方氯化钠注射液、肝素钠注射液；所述装置包括植入同心圆探针的器械和微透析采样装置，所述植入同心圆探针的器械为组织镊、手术剪、手术刀、止血钳、穿刺针、弯圆针、角针、缝合线和纱布；微透析采样装置为微量注射泵、微量收集器、1ml注射器、同心圆探针、导管、连接管。
2.根据权利要求1所述的系统，其特征在于，所述的盐酸赛拉嗪注射液与注射用盐酸替来他明盐酸唑拉西泮的质量比为2:3。
3.根据权利要求1所述的系统，其特征在于，其使用方法为：(1)将犬麻醉；(2)打开犬腹腔，找到前列腺组织，植入激活后的同心圆探针，给药于犬的同时收集透析液；(3)高效液相或液质测定微透析液药物浓度；(4)根据校正公式得出组织中游离药物浓度。
4.权利要求1-3任一所述的系统的用途，其特征在于，所述的系统用于在体测定前列腺组织连续动态游离药物浓度。
5.权利要求1-3任一所述的系统的用途，其特征在于，所述的系统在研究与制定治疗前列腺疾病给药方案中的应用。
6.一种在体测定犬前列腺组织连续动态游离药物浓度的采样方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将犬麻醉；(2)打开犬腹腔，找到前列腺组织，植入激活后的同心圆探针，给药物于犬的同时收集透析液，所用药物包括硫酸阿托品、盐酸赛拉嗪注射液、注射用盐酸替来他明盐酸唑拉西泮、复方氯化钠注射液、肝素钠注射液，其中，盐酸赛拉嗪注射液与注射用盐酸替来他明盐酸唑拉西泮质量比为2:3；(3)高效液相或液质测定微透析液药物浓度；(4)根据校正公式得出组织中游离药物浓度。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的游离药物为分布于前列腺组织的药物。
8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的方法可用于检测分布于前列腺组织的生理性成分。
9.权利要求6-7任一所述的方法的用途，其特征在于，所述的方法用于在体测定前列腺组织连续动态游离药物浓度。
10.权利要求6-7任一所述的方法的用途，其特征在于，所述的方法在研究与制定治疗前列腺疾病给药方案中的应用。
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Citations (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1998030254A2 (en) * 1997-01-10 1998-07-16 Emory University Sample collection and drug delivery apparatus for freely-moving tethered laboratory animals
WO2002056670A2 (en) * 2001-01-05 2002-07-25 The General Hospital Corporation Activatable imaging probes
GB0225908D0 (en) * 2002-11-06 2002-12-11 Pfizer Ltd Treatment of female sexual dysfunction
CN1415299A (zh) * 2002-10-08 2003-05-07 上海市计划生育科学研究所 丙酸睾丸酮引起Beagle犬前列腺增生法
US6602220B1 (en) * 2000-05-26 2003-08-05 The Research Foundation Of State University Of New York Miniature air-controlled drug selector and delivery device portable by small animals
WO2004004802A2 (en) * 2002-07-03 2004-01-15 Bioanalytical Systems, Inc. Device and method for drug delivery to animals
US20040186359A1 (en) * 2001-07-09 2004-09-23 Beaudoin Stephen P. Afinity biosensor for monitoring biological process
CN1592614A (zh) * 2002-02-14 2005-03-09 索尔瓦药物有限公司 加上5－羟色胺和/或去甲肾上腺素抑制活性的部分多巴胺－d2受体激动剂
CN1945331A (zh) * 2006-10-20 2007-04-11 邹明强 同步检测多种小分子化合物的试剂的制备及其使用方法
CN101165183A (zh) * 2006-10-19 2008-04-23 陕西西大北美基因股份有限公司 利用金磁微粒分离mRNA的方法
CN101788484A (zh) * 2010-02-23 2010-07-28 中国人民解放军第四军医大学 基于激光共聚焦扫描显微镜系统的中枢神经系统氯成像方法
CN102757476A (zh) * 2011-04-26 2012-10-31 浙江海洋学院 一种乌贼墨肽聚糖的制备方法和应用
CN102944675A (zh) * 2012-11-07 2013-02-27 浙江省农业科学院 牛日本血吸虫病抗体检测试纸条的制备及其应用方法
CN103977010A (zh) * 2014-05-19 2014-08-13 南京农业大学 一种犬用复方赛拉嗪注射剂及其制备方法
CN104023760A (zh) * 2011-10-28 2014-09-03 普莱萨格生命科学公司 药物递送方法
CN104127887A (zh) * 2014-03-14 2014-11-05 北京大学 Fe5C2纳米颗粒在制备生物成像探针中的应用
CN104958257A (zh) * 2015-06-16 2015-10-07 南方医科大学 一种隐丹参酮皮肤角质类脂体制剂及其制备方法
EP2949759A1 (en) * 2014-05-27 2015-12-02 Universite Paris-Sud 11 Multiplexed homogeneous oligonucleotide detection
CN105606744A (zh) * 2015-11-19 2016-05-25 南京中医药大学 快速测定中药知母口服给药后活性成分药代动力学的方法
CN105596012A (zh) * 2015-12-23 2016-05-25 苏州药明康德新药开发股份有限公司 动物颈静脉微透析方法
CN108339125A (zh) * 2018-03-23 2018-07-31 温州生物材料与工程研究所 一种高效、靶向载药纳米胶束及制备方法与应用
CN108362807A (zh) * 2018-01-15 2018-08-03 嘉兴学院 一种血液透析液检测方法及其在生脉注射液药动学-药效学中的应用
CN109297942A (zh) * 2018-09-18 2019-02-01 曲阜师范大学 采用RhB@MOF-5复合材料测定小鼠脑脊液中AA含量的方法

Patent Citations (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1998030254A2 (en) * 1997-01-10 1998-07-16 Emory University Sample collection and drug delivery apparatus for freely-moving tethered laboratory animals
US6602220B1 (en) * 2000-05-26 2003-08-05 The Research Foundation Of State University Of New York Miniature air-controlled drug selector and delivery device portable by small animals
WO2002056670A2 (en) * 2001-01-05 2002-07-25 The General Hospital Corporation Activatable imaging probes
US20040186359A1 (en) * 2001-07-09 2004-09-23 Beaudoin Stephen P. Afinity biosensor for monitoring biological process
CN1592614A (zh) * 2002-02-14 2005-03-09 索尔瓦药物有限公司 加上5－羟色胺和/或去甲肾上腺素抑制活性的部分多巴胺－d2受体激动剂
WO2004004802A2 (en) * 2002-07-03 2004-01-15 Bioanalytical Systems, Inc. Device and method for drug delivery to animals
CN1415299A (zh) * 2002-10-08 2003-05-07 上海市计划生育科学研究所 丙酸睾丸酮引起Beagle犬前列腺增生法
GB0225908D0 (en) * 2002-11-06 2002-12-11 Pfizer Ltd Treatment of female sexual dysfunction
CN101165183A (zh) * 2006-10-19 2008-04-23 陕西西大北美基因股份有限公司 利用金磁微粒分离mRNA的方法
CN1945331A (zh) * 2006-10-20 2007-04-11 邹明强 同步检测多种小分子化合物的试剂的制备及其使用方法
CN101788484A (zh) * 2010-02-23 2010-07-28 中国人民解放军第四军医大学 基于激光共聚焦扫描显微镜系统的中枢神经系统氯成像方法
CN102757476A (zh) * 2011-04-26 2012-10-31 浙江海洋学院 一种乌贼墨肽聚糖的制备方法和应用
CN104023760A (zh) * 2011-10-28 2014-09-03 普莱萨格生命科学公司 药物递送方法
CN102944675A (zh) * 2012-11-07 2013-02-27 浙江省农业科学院 牛日本血吸虫病抗体检测试纸条的制备及其应用方法
CN104127887A (zh) * 2014-03-14 2014-11-05 北京大学 Fe5C2纳米颗粒在制备生物成像探针中的应用
CN103977010A (zh) * 2014-05-19 2014-08-13 南京农业大学 一种犬用复方赛拉嗪注射剂及其制备方法
EP2949759A1 (en) * 2014-05-27 2015-12-02 Universite Paris-Sud 11 Multiplexed homogeneous oligonucleotide detection
CN104958257A (zh) * 2015-06-16 2015-10-07 南方医科大学 一种隐丹参酮皮肤角质类脂体制剂及其制备方法
CN105606744A (zh) * 2015-11-19 2016-05-25 南京中医药大学 快速测定中药知母口服给药后活性成分药代动力学的方法
CN105596012A (zh) * 2015-12-23 2016-05-25 苏州药明康德新药开发股份有限公司 动物颈静脉微透析方法
CN108362807A (zh) * 2018-01-15 2018-08-03 嘉兴学院 一种血液透析液检测方法及其在生脉注射液药动学-药效学中的应用
CN108339125A (zh) * 2018-03-23 2018-07-31 温州生物材料与工程研究所 一种高效、靶向载药纳米胶束及制备方法与应用
CN109297942A (zh) * 2018-09-18 2019-02-01 曲阜师范大学 采用RhB@MOF-5复合材料测定小鼠脑脊液中AA含量的方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
周国芳: "咪唑安定在重症监护病房机械通气病人中的应用", 《临床和实验医学杂志》 *
李晶晶: "利用微透析技术测定火针对类风湿性关节炎大鼠病变组织中5-羟色胺、组胺和前列腺素E2的影响", 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 *

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Publication number Publication date
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