CN110988248A - 一种葛根清肠颗粒的快速薄层鉴别方法 - Google Patents

一种葛根清肠颗粒的快速薄层鉴别方法 Download PDF

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Abstract

一种葛根清肠颗粒的快速薄层鉴别方法，属于中药分析技术领域。该方法地对葛根清肠颗粒中关键药材葛根、地榆、黄连、白芍、黄芪进行快速鉴别，能够有效控制葛根清肠颗粒生产质量，建立的薄层法分析其质量标准具有简便、快捷的特点。

Description

一种葛根清肠颗粒的快速薄层鉴别方法
技术领域
本发明属于中药分析技术领域，具体涉及一种葛根清肠颗粒的快速薄层鉴别方法。
背景技术
中药颗粒剂是以传统中药汤剂发展的现代剂型，是在质量控制技术下通过对中药汤剂进行浓缩、干燥、加上辅料制成的。对其进行质量分析成为控制质量关键技术，薄层色谱法作为重要的鉴别手段，广泛被用于中药材、中药饮片、中药制剂中。
葛根清肠颗粒是由葛根、诃子肉、地榆、黄连、秦皮、龙骨、金樱子、五倍子儿茶、香附、白芍、茯苓等药材，通过提取、浓缩后加入辅料制粒而成。主要用于胃肠湿热、气机郁滞所致的泄泻、便溏、腹痛、肠鸣、里急后重、食少倦怠等。其中方中葛根作为君药具有解肌退热，透疹，生津止渴，升阳止泻之功；地榆具有凉血止血，清热解毒，培清养阴，消肿敛疮等功效；芍药具有肝气不调、血气虚弱而见胁痛烦躁、经期腹痛等症；黄芪具有表虚自汗、气虚内伤、脾虚泄泻、浮肿及痈疽等；黄连具有清热燥湿，泻火解毒之功效。上述五味中药对该方的功能主治贡献最大。因此，本实验对方中五味中药进行质量分析，并选择其有效成分作为鉴别对象，葛根中葛根素、地榆中没食子、芍药中的芍药苷、黄芪中黄芪甲苷和黄连中小檗碱。
本方法能够有效控制葛根清肠颗粒生产过程的质量、保证了产品质量的稳定。
发明内容
本发明的目的是通过多成分控制中药制剂质量，避免了不法企业出现偷工减料的现象，进而为葛根清肠颗粒提供了一种快速薄层鉴别方法。
一种葛根清肠颗粒的快速薄层鉴别方法，包括对葛根的鉴别，具体方法如下：(1)供试品溶液的制备：取葛根清肠颗粒2g，加甲醇25ml，超声提取20min，滤过，滤液作为试品溶液，滤液浓缩并用甲醇定容于1ml容量瓶中，备用；
(2)对照品溶液的制备：取葛根素对照品加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液；
(3)薄层层析：吸取上述两种溶液各5～10μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-乙酸(体积比为68：25：1.5)作为展开剂，展开，取出，晾干，254nm紫外光灯下检视。
(4)将供试品色谱中与对照品色谱相应的位置上的斑点与对照品的斑点进行比较。
作为上述发明的进一步改进，还包括对地榆的鉴别，具体方法如下：
(1)供试品溶液的制备：取葛根清肠颗粒2g，加甲醇25ml，超声提取20min，滤过，滤液作为试品溶液，滤液浓缩并用甲醇定容于1ml容量瓶中，备用。
(2)对照品溶液的制备，取没食子酸对照品加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液；
(3)薄层层析：吸取上述两种溶液各5～10μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以乙酸乙酯-石油醚-乙酸(体积比为55：42：2.5)作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以质量百分含量为1％三氯化铁乙醇溶液(三氯化铁与乙醇的质量比例为1:99)，检视。
(4)将供试品色谱中与对照品色谱相应的位置上的斑点与对照品的斑点进行比较。
作为上述发明的进一步改进，还包括对黄连的鉴别，具体方法如下：
(1)供试品溶液的制备：取葛根清肠颗粒2g，加甲醇25ml，超声提取20min，滤过，滤液作为试品溶液，滤液浓缩并用甲醇定容于1ml容量瓶中，备用。
(2)对照品溶液的制备：取盐酸小檗碱对照品加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液；
(3)薄层层析：吸取对照品溶液1μL，供试品溶液2～5μL，点样于同一硅胶GF254薄层板上，以丙酮-石油醚-甲醇-乙酸(体积比为21：19：15：1.5)作为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，显荧光斑点。
(4)将供试品色谱中与对照品色谱相应的位置上的斑点与对照品的斑点进行比较。
作为上述发明的进一步改进，也包括对白芍的鉴别，具体方法如下：
(1)供试品溶液的制备：葛根清肠颗粒2g，加甲醇25ml，超声提取20min，滤过，滤液作为试品溶液，滤液浓缩并用甲醇定容于1ml容量瓶中，备用。
(2)对照品溶液的制备：取芍药苷对照品加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液；
(3)薄层层析：吸取上述两种溶液各5～10μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-乙酸(体积比为27：9.5：2.5)作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸乙醇的混合溶液，其中香草醛：硫酸：无水乙醇的质量比＝5：20：75(硫酸采用质量百分为98％的浓硫酸)，105℃加热至斑点显色清晰，日光下检视检视。
(4)将供试品色谱中与对照品色谱相应的位置上的斑点与对照品的斑点进行比较。
作为上述发明的进一步改进，也包括对黄芪的鉴别，具体方法如下：
(1)供试品溶液的制备：葛根清肠颗粒2g，加甲醇25ml，超声提取20min，滤过，滤液作为试品溶液，滤液浓缩并用甲醇定容于1ml容量瓶中，备用。
(2)对照品溶液的制备：取黄芪甲苷对照品加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液；
(3)薄层层析：吸取上述两种溶液各5～10μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-甲酸(32：9.5：2.0)作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以体积比例为10％的硫酸乙醇(硫酸与乙醇的体积比例为1:10，硫酸采用质量百分为98％的浓硫酸)的溶液，105℃加热至斑点显色清晰，日光下检视检视。
(4)将供试品色谱中与对照品色谱相应的位置上的斑点与对照品的斑点进行比较。
本发明提出的葛根清肠颗粒的薄层色谱鉴别方法能够有效地对葛根、地榆、黄连、白芍、黄芪进行定性鉴别，并且建立质量标准能够有效提高了该颗粒剂的品质，本发明的方法简单直观，准确度比较高。
附图说明
图1是葛根中葛根素的薄层色谱鉴别图；
图2是地榆中没食子酸的薄层色谱鉴别图；
图3是黄连中小檗碱的薄层色谱鉴别图；
图4是白芍中芍药苷的薄层色谱鉴别图；
图5是黄芪中黄芪甲苷的薄层色谱鉴别图。
上述所述的混点为待测液与对照液体积比1:1混合后的点样。
具体实施方式
下面通过具体实施方式对本发明作进一步详细说明。但本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中薄层具体操作方法按照《中国药典》2015年版四部通则0502薄层色谱法(第52页)。本发明所有的试剂和仪器均可从相关市场购买到。
实施例1葛根中葛根素的鉴别
具体方法如下：
(1)供试品溶液的制备：取葛根清肠颗粒2g，加甲醇25ml，超声提取20min，滤过，滤液作为试品溶液，滤液浓缩并用甲醇定容于1ml容量瓶中，备用。
(2)对照品溶液的制备：取葛根素对照品(上海源叶生物科技有限公司，批号：S02M9B54875)加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液；
(3)薄层层析：吸取上述两种溶液各5～10μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-乙酸(体积比为68：25：1.5)作为展开剂，展开，取出，晾干，254nm紫外光灯下检视。
(4)将供试品色谱中与对照品色谱相应的位置上的斑点与对照品的斑点进行比较。
地榆中没食子酸的鉴别
具体方法如下：
(1)供试品溶液的制备：取葛根清肠颗粒2g，加甲醇25ml，超声提取20min，滤过，滤液作为试品溶液，滤液浓缩并用甲醇定容于1ml容量瓶中，备用。
(2)对照品溶液的制备，取没食子酸对照品(上海源叶生物科技有限公司，批号：Y19M8C36143)加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液；
(3)薄层层析：吸取上述两种溶液各5～10μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以乙酸乙酯-石油醚-乙酸(体积比为55：42：2.5)作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铁乙醇溶液(三氯化铁与乙醇的质量比例为1g:99g)，检视。
(4)将供试品色谱中与对照品色谱相应的位置上的斑点与对照品的斑点进行比较。
黄连中小檗碱的鉴别
具体方法如下：
(1)供试品溶液的制备：取葛根清肠颗粒2g，加甲醇25ml，超声提取20min，滤过，滤液作为试品溶液，滤液浓缩并用甲醇定容于1ml容量瓶中，备用。
(2)对照品溶液的制备：取盐酸小檗碱对照品(上海源叶生物科技有限公司，批号：Y31J9H67024)加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液；
(3)薄层层析：吸取对照品溶液1μL，供试品溶液2～5μL，点样于同一硅胶GF254薄层板上，以丙酮-石油醚-甲醇-乙酸(体积比为21：19：15：1.5)作为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，显荧光斑点。
(4)将供试品色谱中与对照品色谱相应的位置上的斑点与对照品的斑点进行比较。
白芍中芍药苷的鉴别
具体方法如下：
(1)供试品溶液的制备：葛根清肠颗粒2g，加甲醇25ml，超声提取20min，滤过，滤液作为试品溶液，滤液浓缩并用甲醇定容于1ml容量瓶中，备用。
(2)对照品溶液的制备：取芍药苷对照品(上海源叶生物科技有限公司，批号：L07M9Q60533)加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液；
(3)薄层层析：吸取上述两种溶液各5～10μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-乙酸(体积比为27：9.5：2.5)作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以香草醛：浓硫酸：无水乙醇＝5g：20g：75g的混合溶液(硫酸采用质量百分为98％的浓硫酸)的溶液，105℃加热至斑点显色清晰，日光下检视检视。(4)将供试品色谱中与对照品色谱相应的位置上的斑点与对照品的斑点进行比较。
黄芪中黄芪甲苷的鉴别
具体方法如下：
(1)供试品溶液的制备：葛根清肠颗粒2g，加甲醇25ml，超声提取20min，滤过，滤液作为试品溶液，滤液浓缩并用甲醇定容于1ml容量瓶中，备用。
(2)对照品溶液的制备：取黄芪甲苷对照品(上海源叶生物科技有限公司，批号：C14J9Q65734)加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液；
(3)薄层层析：吸取上述两种溶液各5～10μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-甲酸(32：9.5：2.0)作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％的硫酸乙醇(硫酸与乙醇的体积比例为1:10，硫酸采用质量百分为98％的浓硫酸)的溶液，105℃加热至斑点显色清晰，日光下检视检视。
(4)将供试品色谱中与对照品色谱相应的位置上的斑点与对照品的斑点进行比较。
根据图1-5所述，当待测样品中采用的原料有对照品所对应的原材料时，待测样品点板走样中含有与对照品一致的走样斑点。

Claims (6)

1.一种葛根清肠颗粒的快速薄层鉴别方法，包括对葛根的鉴别，具体方法如下：
(1)供试品溶液的制备：取葛根清肠颗粒2g，加甲醇25ml，超声提取20min，滤过，滤液作为试品溶液，滤液浓缩并用甲醇定容于1ml容量瓶中，备用；
(2)对照品溶液的制备：取葛根素对照品加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液；
(3)薄层层析：吸取上述两种溶液各5～10μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-乙酸作为展开剂，展开，取出，晾干，254nm紫外光灯下检视；三氯甲烷-甲醇-乙酸体积比为68：25：1.5；
(4)将供试品色谱中与对照品色谱相应的位置上的斑点与对照品的斑点进行比较。
2.按照权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括对地榆的鉴别，具体方法如下：
(1)供试品溶液的制备：取葛根清肠颗粒2g，加甲醇25ml，超声提取20min，滤过，滤液作为试品溶液，滤液浓缩并用甲醇定容于1ml容量瓶中，备用；
(2)对照品溶液的制备，取没食子酸对照品加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液；
(3)薄层层析：吸取上述两种溶液各5～10μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以乙酸乙酯-石油醚-乙酸作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以质量百分含量为1％三氯化铁乙醇溶液，检视；乙酸乙酯-石油醚-乙酸体积比为55：42：2.5；
(4)将供试品色谱中与对照品色谱相应的位置上的斑点与对照品的斑点进行比较。
3.按照权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括对黄连的鉴别，具体方法如下：
(1)供试品溶液的制备：取葛根清肠颗粒2g，加甲醇25ml，超声提取20min，滤过，滤液作为试品溶液，滤液浓缩并用甲醇定容于1ml容量瓶中，备用；
(2)对照品溶液的制备：取盐酸小檗碱对照品加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液；
(3)薄层层析：吸取对照品溶液1μL，供试品溶液2～5μL，点样于同一硅胶GF254薄层板上，以丙酮-石油醚-甲醇-乙酸作为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，显荧光斑点；丙酮-石油醚-甲醇-乙酸体积比为21：19：15：1.5；
(4)将供试品色谱中与对照品色谱相应的位置上的斑点与对照品的斑点进行比较。
4.按照权利要求1所述的方法，其特征在于，包括对白芍的鉴别，具体方法如下：
(1)供试品溶液的制备：葛根清肠颗粒2g，加甲醇25ml，超声提取20min，滤过，滤液作为试品溶液，滤液浓缩并用甲醇定容于1ml容量瓶中，备用；
(2)对照品溶液的制备：取芍药苷对照品加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液；
(3)薄层层析：吸取上述两种溶液各5～10μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-乙酸作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸乙醇的混合溶液，其中香草醛：硫酸：无水乙醇的质量比＝5：20：75，硫酸采用质量百分含量为98％的浓硫酸，105℃加热至斑点显色清晰，日光下检视，三氯甲烷-甲醇-乙酸的体积比为27：9.5：2.5；
(4)将供试品色谱中与对照品色谱相应的位置上的斑点与对照品的斑点进行比较。
5.按照权利要求1所述的方法，其特征在于，包括对黄芪的鉴别，具体方法如下：
(1)供试品溶液的制备：葛根清肠颗粒2g，加甲醇25ml，超声提取20min，滤过，滤液作为试品溶液，滤液浓缩并用甲醇定容于1ml容量瓶中，备用；
(2)对照品溶液的制备：取黄芪甲苷对照品加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液；
(3)薄层层析：吸取上述两种溶液各5～10μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-甲酸作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以体积比例为10％的硫酸乙醇，105℃加热至斑点显色清晰，日光下检视；乙酸乙酯-甲醇-甲酸的体积比为32：9.5：2.0；
(4)将供试品色谱中与对照品色谱相应的位置上的斑点与对照品的斑点进行比较。
6.按照权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于，当待测样品中采用的原料有对照品所对应的原材料时，待测样品点板走样中含有与对照品一致的走样斑点。
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