CN110914263A - 作为nadph氧化酶抑制剂的取代的双环杂环化合物 - Google Patents

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Abstract

本申请涉及用作烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶抑制剂(NADPH氧化酶抑制剂)的取代的稠合杂芳基和杂环化合物、它们的制备方法、包含所述化合物的药物组合物以及所述化合物或所述组合物在治疗或预防由NADPH氧化酶介导的各种疾病、疾患和/或病症中的用途。(式I)

Description

作为NADPH氧化酶抑制剂的取代的双环杂环化合物
相关申请
本申请要求2017年5月4日提交的第201721015787号印度临时申请的权益；该申请的内容特此以全文引用的方式并入。
技术领域
本申请涉及用作烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶抑制剂(NADPH氧化酶抑制剂)的取代的稠合杂芳基和杂环化合物、它们的制备方法、包含所述化合物的药物组合物以及所述化合物或所述组合物在治疗或预防由NADPH氧化酶介导的各种疾病、疾患和/或病症中的用途。
背景技术
NOX家族NADPH氧化酶(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶)包括产生活性氧物质(ROS)的酶家族，其在许多疾病背景下越发被认为是氧化应激的来源。尽管NOX2(也称为gp91phox)即吞噬细胞氧化酶被认为是引起氧化进发及相关杀微生物活性的酶已有几十年的历史，但直到最近才确认了该基因家族的其它成员。NOX家族目前由七个成员(NOX1、NOX2、NOX3、NOX4、NOX5、DUOX1和DUOX2)组成，每一成员具有不同的组织分布。自从发现NOX酶不局限于白细胞以来，描述NOX酶如何在很多病理状态(如炎症、高血压、局部缺血/再灌注、糖尿病、心血管疾病和神经变性)下引起ROS产生增加的科学报告呈指数增长(Lambeth等人，Semin Immunopathol 30：339-363，2008)。ROS产生增多与许多这些疾患的病理生物学有关联(Lambeth等人，Semin Immunopathol 30：339-363，2008)。
NADPH氧化酶通过从细胞内的NADPH跨膜转移电子并使这些电子与分子氧偶联以生成超氧阴离子(活性自由基)而产生超氧化物。超氧化物可在含有摄入的细菌和真菌的吞噬体中生成，或者其可在细胞外生成。在吞噬体中，超氧化物可自发地形成过氧化氢，后者将经历进一步的反应而产生活性氧物质(ROS)。
活性氧物质是氧衍生的小分子，包括氧自由基[超氧化物(O2·-)、羟基(·OH)、过氧基(RO2 ·)和烷氧基(RO·)]以及作为氧化剂和/或容易转化成自由基的某些非自由基，如次氯酸(HOCl)、臭氧(O3)、单线态氧(1O2)和过氧化氢(H2O2)。含氮的氧化剂(如一氧化氮)被称为活性氮物质(RNS)。ROS产生通常是以生成超氧化物开始的级联反应。超氧化物快速歧化为过氧化氢要么是自发的，特别是在低pH下，要么是由超氧化物歧化酶催化的。ROS产生的级联中的其它要素包括超氧化物与一氧化氮反应形成过氧亚硝酸盐，由过氧化氢经过氧化物酶催化形成次氯酸，以及导致产生羟基自由基的铁催化芬顿(Fenton)反应(Klebanoff等人，Ann Intern Med，1980，93：480-489；Thannickal等人，Am J Physiol Lung Cell MolPhysiol，2000，279：L1005-L1028)。ROS与包括其它小的无机分子以及DNA、蛋白质、脂质、碳水化合物及核酸在内的大量分子强劲地相互作用。这个初始反应可产生第二种自由基，从而使潜在的损害倍增。ROS不仅参与细胞损伤及病原体的杀灭，而且还参与几乎所有细胞和组织中的大量可逆调节过程。然而，尽管ROS在基本生理过程的调节中很重要，但ROS产生也可能不可逆地破坏或改变靶分子的功能。因此，ROS已越来越多地被确认为是对生物机体造成损害即所谓“氧化应激”的主要原因。
在炎症期间，NADPH氧化酶是炎症条件下血管细胞中的ROS生成的最重要的来源之一(Thabut等人，J.Biol.Chem.，2002，277：22814-22821)。在肺中，组织不断地暴露于通过代谢反应(例如通过线粒体呼吸或募集的炎症细胞的激活)内源性产生或者在空气中(例如香烟烟雾或空气污染物)外源性产生的氧化剂。进一步地，与其它组织相比而言不断暴露于高氧张力的肺具有相当大的表面积和血液供给，并且特别容易受到ROS介导的损伤的影响(Brigham，Chest，1986，89(6)：859-863)。已描述了肺内皮细胞和平滑肌细胞中的NADPH氧化酶依赖性ROS产生。响应于刺激的NADPH氧化酶激活已被认为参与了呼吸病症如肺高压的发展以及肺血管收缩的增强(Djordjevic等人，Arterioscler.Thromb.Vase.Biol，2005，25，519-525；Liua等人，Am.J.Physiol.Lung，Cell.MoI.Physiol，2004，287：L111-118)。进一步地，肺纤维化的特征是肺部炎症和ROS的过度产生。破骨细胞是在骨转换(例如骨再吸收)中起关键作用的巨噬细胞样细胞，其通过NADPH氧化酶依赖性机制产生ROS(Yang等人，J.Cell.Chem.，2002，84，645-654)。已知糖尿病会增加人和动物体内的氧化应激(例如通过葡萄糖的自氧化增加ROS的产生)，并且据认为氧化应激的增加在糖尿病并发症的发展中起重要作用。已表明糖尿病大鼠中央视网膜中增加的过氧化物定位和内皮细胞功能障碍与视网膜内皮细胞中的NADPH氧化酶活性的区域一致(Ellis等人，Free Rad.Biol.Med.，2000，28：91-101)。进一步地，已经提出控制线粒体和/或炎症中的氧化应激(ROS)可能是治疗糖尿病的有益方法(Pillarisetti等人，Expert Opin.Ther.Targets，2004，8(5)：401-408)。
ROS通常也与动脉粥样硬化、细胞增殖、高血压和再灌注损伤心血管疾病的发病机制密切相关(Cai等人，Trends Pharmacol.ScL，2003，24：471-478)。不仅动脉粥样硬化的所有风险因素都增加例如动脉壁中的超氧化物生成，而且ROS也诱导许多“促动脉粥样硬化的”体外细胞反应。已报道了球囊损伤后的血管壁中NADPH氧化酶活性提高(Shi等人，2001，Throm.Vase.Biol，2001，21，739-745)。
据信氧化应激或自由基损伤也是神经变性疾病的主要病因。这类损伤可包括线粒体异常、神经元脱髓鞘、细胞凋亡、神经元死亡和认知能力降低，这些都潜在地导致进行性神经变性病症的发展(Nunomura等人，J.Neuropathol Exp.Neurol，2001，60：759-767；Girouard，J.Appl Physiol.，2006，100：328-335)。
因此，源自NADPH氧化酶的ROS促成了很多疾病的发病机制，特别是心血管疾病或病症、呼吸病症或疾病、影响代谢的疾病或病症、骨病症、神经变性疾病、炎性疾病、生殖病症或疾病、疼痛、癌症和胃肠系统的疾病或病症。因此，非常需要开发专注于ROS信号传导级联、特别是专注于NADPH氧化酶(NOX)的新型活性剂。
若干专利申请涉及用作NADPH氧化酶抑制剂的各种支架物质及化合物。WO2008113856、WO2010035217、WO2010035219、WO2010035220和WO2010035221号PCT公布公开了在治疗心血管疾病、呼吸病症和影响代谢的病症、皮肤和/或骨疾病、神经变性疾病、肾脏疾病、生殖病症、炎性病症和癌症中作为NADPH氧化酶抑制剂的吡唑并吡啶衍生物。
本发明的目的还在于提供作为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶抑制剂(NADPH氧化酶抑制剂)的化合物以及使用这类化合物治疗或改善其中需要抑制NADPH氧化酶的疾病或病症的方法。
发明内容
一方面，本发明涉及式(I)的化合物
Figure BDA0002350595300000041
或其药学上可接受的盐，
其中，
环内的虚线[----]表示任选的单键；
X是NH或O；
R选自氢、C1-8烷基和-C(O)R7；
Z1是CH或S；
Z2是CH；
Z3是CH或N；
Z4是CH；
Z5是CH或不存在；
环A选自
Figure BDA0002350595300000051
Figure BDA0002350595300000052
其中x和y表示连接点；
在每次出现时，R1独立地选自卤素、氨基、羟基、C1-8烷基、C1-8烷氧基、C1-8烷氧基C1-8烷氧基、卤代C1-8烷基、卤代C1-8烷氧基、-(CH2)mNR5C(O)R6、-(CH2)mOR5、-(CH2)mNR7S(O)PR8、C6-14芳基和5至14元杂芳基；其中C6-14芳基任选地被一个或多个选自卤素和C1-8烷基的取代基取代；
在每次出现时，R2独立地选自氢、C1-8烷基、卤代C1-8烷基、羟基C1-8烷基、-(CH2)mNR5C(O)NR6、-(CH2)mOR5、3至15元杂环基、3至15元杂环基C1-8烷基、C6-14芳基和C6-14芳基C1-8烷基；其中3至15元杂环基、3至15元杂环基C1-8烷基、C6-14芳基和C6-14芳基C1-8烷基任选地被一个或多个选自卤素、C1-8烷基、卤代C1-8烷基、-(CH2)mS(O)PR8、C3-12环烷基和3至15元杂环基的取代基取代；
在每次出现时，R3独立地选自氢、C1-8烷基、卤代C1-8烷基、羟基C1-8烷基、-(CH2)mOR5、-(CH)2N(R5)2、-(CH2)mS(O)PR8、C3-12环烷基、3至15元杂环基、3至15元杂环基C1-8烷基、C6-14芳基、C6-14芳基C1-8烷基、5至14元杂芳基和5至14元杂芳基C1-8烷基；其中C3-12环烷基、3至15元杂环基C1-8烷基、C6-14芳基和C6-14芳基C1-8烷基任选地被一个或多个选自卤素、氧代基、C1-8烷基和C1-8烷氧基的取代基取代；
在每次出现时，R4独立地选自氢和C1-8烷基；
在每次出现时，R5独立地选自氢和C1-8烷基；
在每次出现时，R6独立地选自氢和C1-8烷基；
在每次出现时，R7独立地选自氢和C1-8烷基；
在每次出现时，R8独立地选自氢和C1-8烷基；
‘m’是0至4范围的整数，包括两个端值；
‘n’是0至5范围的整数，包括两个端值；且
‘p’是0至2范围的整数，包括两个端值。
式(I)的化合物可涉及一个或多个实施方案。式(I)的实施方案包括如下文所述式(II)的化合物。要理解的是，下面的实施方案是对本发明的说明，并不旨在将权利要求限定于所例示的具体实施方案。还要理解的是，可独立地或者与任何限定、本文限定的任何其它实施方案相结合采用本文限定的实施方案。因此本发明设想了各种独立描述的实施方案的所有可能的组合及置换。例如，本发明提供如上所定义的式(I)的化合物，其中R是氢、甲基或-C(O)CH3(根据下面限定的实施方案)，X是NH或O(根据下面限定的另一实施方案)，R1是F、Cl、NH2、OH、甲基、甲氧基、-OCH2CH2OCH3、CF3、OCF3、
Figure BDA0002350595300000061
Figure BDA0002350595300000071
或1H-咪唑-1-基(根据下面限定的又一实施方案)。
根据一个实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中R是氢、C1-8烷基或-C(O)R7。
根据另一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中R是氢、C1-8烷基(例如甲基)或-C(O)R7。在此实施方案中，R7是C1-8烷基(例如甲基)。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中R是氢、甲基或-C(O)R7。在此实施方案中，R7是甲基。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中R是氢、甲基或-C(O)CH3。
根据另一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中R是氢。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中R是C1-8烷基(例如甲基)。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中R是甲基。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中R是-C(O)R7。在此实施方案中，R7是C1-8烷基(例如甲基)。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中R是-C(O)R7。在此实施方案中，R7是甲基。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中R是-C(O)CH3。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中X是NH或O。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中X是NH。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中X是O。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中Z1是CH或S，Z2是CH，Z3是CH或N，Z4是CH，且Z5是CH或不存在。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中Z1是CH，Z2是CH，Z3是CH或N，Z4是CH，且Z5是CH。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中Z1是CH，Z2是CH，Z3是CH，Z4是CH，且Z5是CH。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中Z1是CH，Z2是CH，Z3是N，Z4是CH，且Z5是CH。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中Z1是S，Z2是CH，Z3是N，Z4是CH，且Z5不存在。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中Z1是CH。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中Z1是S。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中Z3是CH。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中Z5是CH。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中Z3是N。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中Z5不存在。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中R1是卤素(例如F、Cl或Br)、氨基(例如NH2)、羟基(例如OH)、C1-8烷基(例如甲基)、C1-8烷氧基(例如甲氧基)、C1-8烷氧基C1-8烷氧基(例如-OCH2CH2OCH3)、卤代C1-8烷基(例如CF3)、卤代C1-8烷氧基(例如OCF3)、-(CH2)mOR5(例如
Figure BDA0002350595300000091
)、-(CH2)mNR5C(O)R6(例如
Figure BDA0002350595300000092
)、-(CH2)mNR7S(O)PR8(例如
Figure BDA0002350595300000093
)、任选地被一个或多个选自卤素(例如Cl、F或Br)和5至14元杂芳基(例如1H-咪唑-1-基)的取代基取代的C6-14芳基(例如苯基)。在此实施方案中，R5是氢或C3-12环烷基C1-8烷基(例如
Figure BDA0002350595300000094
)，R6是C1-8烷基(例如
Figure BDA0002350595300000095
)，R7是氢，R8是C1-8烷基(例如甲基)，‘p’是2，且‘m’是0或1。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中R1是卤素(例如F、Cl或Br)、氨基(例如NH2)、羟基(例如OH)、C1-8烷基(例如甲基)、C1-8烷氧基(例如甲氧基)、C1-8烷氧基C1-8烷氧基(例如-OCH2CH2OCH3)、卤代C1-8烷基(例如CF3)、卤代C1-8烷氧基(例如OCF3)、-(CH2)mOR5(例如
Figure BDA0002350595300000096
)、-(CH2)mNR5C(O)R6(例如
Figure BDA0002350595300000097
)、-(CH2)mNR7S(O)PR8(例如
Figure BDA0002350595300000098
)、C6-14芳基(例如
Figure BDA0002350595300000099
)或5至14元杂芳基(例如1H-咪唑-1-基)。在此实施方案中，R5是氢或
Figure BDA00023505953000000910
R6是
Figure BDA00023505953000000911
R7是氢，R8是甲基，‘p’是2，且‘m’是0或1。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中R1是F、Cl、NH2、OH、甲基、甲氧基、-OCH2CH2OCH3、CF3、OCF3、
Figure BDA0002350595300000101
或1H-咪唑-1-基。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中‘n’是0、1、2或3。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中‘n’是0。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中‘n’是1。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中‘n’是2。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中‘n’是3。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中R1是F、Cl、NH2、OH、甲基、甲氧基、-OCH2CH2OCH3、CF3、OCF3、
Figure BDA0002350595300000102
或1H-咪唑-1-基，且‘n’是0、1、2或3。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中环A是
Figure BDA0002350595300000103
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中R2是氢、C1-8烷基(例如甲基、乙基、异丙基或异丁基)、卤代C1-8烷基(例如三氟甲基或二氟甲基)、羟基C1-8烷基(例如-CH2OH)、-(CH2)mOR5(例如-CH2OCH3)、-(CH2)mC(O)NR5R6(例如-C(O)NH2)、3至15元杂环基(例如
Figure BDA0002350595300000111
)、3至15元杂环基C1-8烷基(例如
Figure BDA0002350595300000112
Figure BDA0002350595300000117
Figure BDA0002350595300000118
)、C6-14芳基(例如
Figure BDA0002350595300000114
)或C6-14芳基C1-8烷基(例如
Figure BDA0002350595300000115
或
Figure BDA0002350595300000116
)；其中3至15元杂环基、3至15元杂环基C1-8烷基、C6-14芳基和C6-14芳基C1-8烷基任选地被一个或多个选自卤素(例如Cl、F或Br)、C1-8烷基(例如甲基、2-甲基丙基或丙-2-基)、卤代C1-8烷基(例如三氟甲基、三氟乙基或氟乙基)、-(CH2)mS(O)PR8(例如-S(O)2CH3)、C3-12环烷基(例如环丙基)和3至15元杂环基(例如氧杂环丁烷)的取代基取代。在此实施方案中，R5是氢或C1-8烷基(例如甲基)；R6是氢；‘p’是2，且‘m’是0或1。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中R2是氢、C1-8烷基(例如甲基、乙基、异丙基或异丁基)、卤代C1-8烷基(例如三氟甲基或二氟甲基)、羟基C1-8烷基(例如-CH2OH)、-(CH2)mOR5(例如-CH2OCH3)、-(CH2)mC(O)NR5R6(例如-C(O)NH2)、3至15元杂环基(例如
Figure BDA0002350595300000121
)、3至15元杂环基C1-8烷基(例如
Figure BDA0002350595300000122
Figure BDA0002350595300000123
)、C6-14芳基(例如
Figure BDA0002350595300000124
)或C6-14芳基C1-8烷基(例如
Figure BDA0002350595300000125
或
Figure BDA0002350595300000126
)；其中3至15元杂环基、3至15元杂环基C1-8烷基、C6-14芳基和C6-14芳基C1-8烷基任选地被一个或多个选自Cl、F、甲基、2-甲基丙基、三氟甲基、三氟乙基、氟乙基、-S(O)2CH3)、环丙基和氧杂环丁烷的取代基取代。在此实施方案中，R5是氢或甲基；R6是氢；‘p’是2，且‘m’是0或1。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中R2是氢、甲基、乙基、异丙基、异丁基、三氟甲基、二氟甲基、-CH2OH、-CH2OCH3、-C(O)NH2)、
Figure BDA0002350595300000127
Figure BDA0002350595300000131
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中R3是氢、C1-8烷基(例如甲基、乙基、丙基、异丙基、异丁基或异戊基)、卤代C1-8烷基(例如三氟乙基)、-(CH2)mOR5(例如-CH2CH2OCH3或-CH2CH2CH2OCH3)、羟基C1-8烷基(例如-CH2CH2OH或-CH2CH2CH2OH)、-(CH)2N(R5)2(例如-CH2CH2N(CH3)2)、C3-12环烷基(例如
Figure BDA0002350595300000132
)、3至15元杂环基(例如
Figure BDA0002350595300000133
)、3至15元杂环基C1-8烷基(例如
Figure BDA0002350595300000134
Figure BDA0002350595300000135
Figure BDA0002350595300000141
Figure BDA0002350595300000142
)、C6-14芳基(例如
Figure BDA0002350595300000143
Figure BDA0002350595300000144
)、C6-14芳基C1-8烷基(例如
Figure BDA00023505953000001412
Figure BDA0002350595300000146
)、5至14元杂芳基(例如
Figure BDA0002350595300000147
)、5至14元杂芳基C1-8烷基(例如
Figure BDA0002350595300000148
)或-(CH2)mS(O)PR8(例如
Figure BDA0002350595300000149
)，其中C3-12环烷基、3至15元杂环基C1-8烷基、C6-14芳基和C6-14芳基C1-8烷基任选地被一个或多个选自卤素(例如Cl、F或Br)、氧代基(例如＝O)、C1-8烷基(例如甲基或乙基)和C1-8烷氧基(例如甲氧基)的取代基取代。在此实施方案中，R5是C1-8烷基(例如甲基)；R8是C1-8烷基(例如甲基)；m’是2或3，且‘p’是2。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中R3是氢、C1-8烷基(例如甲基、乙基、丙基、异丙基、异丁基或异戊基)、卤代C1-8烷基(例如三氟乙基)、-(CH2)mOR5(例如-CH2CH2OCH3或-CH2CH2CH2OCH3)、羟基C1-8烷基(例如-CH2CH2OH或-CH2CH2CH2OH)、-(CH)2N(R5)2(例如-CH2CH2N(CH3)2)、C3-12环烷基(例如
Figure BDA00023505953000001410
)、3至15元杂环基(例如
Figure BDA00023505953000001411
)、3至15元杂环基C1-8烷基(例如
Figure BDA0002350595300000151
Figure BDA0002350595300000152
Figure BDA0002350595300000153
)、C6-14芳基(例如
Figure BDA0002350595300000154
Figure BDA0002350595300000155
)、C6-14芳基C1-8烷基(例如
Figure BDA0002350595300000157
或
Figure BDA0002350595300000158
)、5至14元杂芳基(例如
Figure BDA0002350595300000159
)、5至14元杂芳基C1-8烷基(例如
Figure BDA00023505953000001510
)或-(CH2)mS(O)PR8(例如
Figure BDA00023505953000001511
)，其中C3-12环烷基、3至15元杂环基C1-8烷基、C6-14芳基和C6-14芳基C1-8烷基任选地被一个或多个选自Cl、F、＝O、甲基、乙基和甲氧基的取代基取代。在此实施方案中，R5是甲基；R8是甲基；m’是2或3，且‘p’是2。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中R3是氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、异丁基、异戊基、三氟乙基、-CH2CH2OCH3、-CH2CH2CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2CH2CH2OH、-CH2CH2N(CH3)2、
Figure BDA0002350595300000161
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中R4是氢。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中环A是
Figure BDA0002350595300000162
Figure BDA0002350595300000171
在此实施方案中，R2是氢、C1-8烷基(例如甲基、乙基、异丙基或异丁基)、卤代C1-8烷基(例如三氟甲基或二氟甲基)、羟基C1-8烷基(例如-CH2OH)、-(CH2)mOR5(例如-CH2OCH3)、-(CH2)mC(O)NR5R6(例如-C(O)NH2)、3至15元杂环基(例如
Figure BDA0002350595300000172
)、3至15元杂环基C1-8烷基(例如
Figure BDA0002350595300000173
Figure BDA0002350595300000174
Figure BDA0002350595300000175
)、C6-14芳基(例如
Figure BDA0002350595300000176
)或C6-14芳基C1-8烷基(例如
Figure BDA0002350595300000177
)；R3是氢、C1-8烷基(例如甲基、乙基、丙基、异丙基、异丁基或异戊基)、卤代C1-8烷基(例如三氟乙基)、-(CH2)mOR5(例如-CH2CH2OCH3或-CH2CH2CH2OCH3)、羟基C1-8烷基(例如-CH2CH2OH或-CH2CH2CH2OH)、-(CH)2N(R5)2(例如-CH2CH2N(CH3)2)、C3-12环烷基(例如
Figure BDA0002350595300000181
)、3至15元杂环基(例如
Figure BDA0002350595300000182
)、3至15元杂环基C1-8烷基(例如
Figure BDA0002350595300000183
Figure BDA0002350595300000184
Figure BDA0002350595300000185
)、C6-14芳基(例如
Figure BDA0002350595300000186
)、C6-14芳基C1-8烷基(例如
Figure BDA0002350595300000187
)、5至14元杂芳基(例如
Figure BDA0002350595300000188
)、5至14元杂芳基C1-8烷基(例如
Figure BDA0002350595300000189
)或-(CH2)mS(O)PR8(例如
Figure BDA0002350595300000191
)；R4是氢；‘m’是0、1、2或3，且‘p’是2。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中环A是
Figure BDA0002350595300000192
Figure BDA0002350595300000193
在此实施方案中，R2是氢、甲基、乙基、异丙基、异丁基、三氟甲基、二氟甲基、-CH2OH、-CH2OCH3、-C(O)NH2、
Figure BDA0002350595300000194
Figure BDA0002350595300000195
Figure BDA0002350595300000201
R3是氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、异丁基、异戊基、三氟乙基、-CH2CH2OCH3、-CH2CH2CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2CH2CH2OH、-CH2CH2N(CH3)2、
Figure BDA0002350595300000202
Figure BDA0002350595300000203
Figure BDA0002350595300000211
R4是氢；‘m’是0、1、2或3，且‘p’是2。
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中环A是
Figure BDA0002350595300000212
Figure BDA0002350595300000221
Figure BDA0002350595300000231
Figure BDA0002350595300000241
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中
R是氢、甲基或-C(O)CH3；
X是NH或O；
Z1是CH或S，Z2是CH，Z3是CH或N，Z4是CH，且Z5是CH或不存在；
R1是F、Cl、NH2、OH、甲基、甲氧基、-OCH2CH2OCH3、CF3、OCF3、
Figure BDA0002350595300000242
或1H-咪唑-1-基；
环A是
Figure BDA0002350595300000251
Figure BDA0002350595300000261
Figure BDA0002350595300000271
Figure BDA0002350595300000281
‘n’是0、1、2或3；
根据又一实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其中
R是氢；
X是NH；
Z1是CH，Z2是CH，Z3是CH或N，Z4是CH，且Z5是CH；
R1是F、Cl、NH2、OH、甲基、甲氧基、-OCH2CH2OCH3、CF3、OCF3、
Figure BDA0002350595300000282
或1H-咪唑-1-基；
环A是
Figure BDA0002350595300000283
Figure BDA0002350595300000291
Figure BDA0002350595300000301
Figure BDA0002350595300000311
‘n’是0、1、2或3；
根据实施方案，具体提供了式(I)的化合物，其关于NADPH氧化酶抑制剂活性的IC50值小于1100nM，优选小于100nM，更优选小于50nM。
下文就式(II)的化合物描述与基团X、R1、R2、R3、Z1、Z2、Z3、Z4、Z5、环A和n(及其中定义的基团)有关的进一步的实施方案。要理解的是，这些实施方案不限于结合式(II)使用，而是独立地和单独地适用于式(I)的化合物。例如，在下文描述的实施方案中，本发明具体提供了式(II)的化合物，其中X是NH，并且因此还提供了式(I)的化合物，其中X是NH。
本发明还提供作为式(I)的化合物的实施方案的式(II)的化合物。
因此，本发明提供式(II)的化合物
Figure BDA0002350595300000321
或其药学上可接受的盐，
其中，
Z3是CH或N；
在每次出现时，R1独立地选自卤素、氨基、羟基、C1-8烷基、C1-8烷氧基、C1-8烷氧基C1-8烷氧基、卤代C1-8烷基、卤代C1-8烷氧基、-(CH2)mNR5C(O)R6、-(CH2)mOR5、-(CH2)mNR7S(O)PR8、C6-14芳基和5至14元杂芳基；其中C6-14芳基任选地被一个或多个选自卤素和C1-8烷基的取代基取代；
在每次出现时，R2独立地选自氢、C1-8烷基、卤代C1-8烷基、羟基C1-8烷基、-(CH2)mNR5C(O)NR6、-(CH2)mOR5、3至15元杂环基、3至15元杂环基C1-8烷基、C6-14芳基和C6-14芳基C1-8烷基；其中3至15元杂环基、3至15元杂环基C1-8烷基、C6-14芳基和C6-14芳基C1-8烷基任选地被一个或多个选自卤素、C1-8烷基、卤代C1-8烷基、-(CH2)mS(O)PR8、C3-12环烷基和3至15元杂环基的取代基取代；
在每次出现时，R3独立地选自氢、C1-8烷基、卤代C1-8烷基、羟基C1-8烷基、-(CH2)mOR5、-(CH)2N(R5)2、-(CH2)mS(O)PR8、C3-12环烷基、3至15元杂环基、3至15元杂环基C1-8烷基、C6-14芳基、C6-14芳基C1-8烷基、5至14元杂芳基和5至14元杂芳基C1-8烷基；其中C3-12环烷基、3至15元杂环基C1-8烷基、C6-14芳基和C6-14芳基C1-8烷基任选地被一个或多个选自卤素、氧代基、C1-8烷基和C1-8烷氧基的取代基取代；
在每次出现时，R5独立地选自氢和C1-8烷基；
在每次出现时，R6独立地选自氢和C1-8烷基；
在每次出现时，R7独立地选自氢和C1-8烷基；
在每次出现时，R8独立地选自氢和C1-8烷基；
‘m’是0至4范围的整数，包括两个端值；
‘n’是0至5范围的整数，包括两个端值；且
‘p’是0至2范围的整数，包括两个端值。
式(II)的化合物可涉及一个或多个实施方案。要理解的是，下面的实施方案是对本发明的说明，并不旨在将权利要求限定于所例示的具体实施方案。还要理解的是，可独立地或者与本文限定的任何其它实施方案的任何限定相结合采用本文限定的实施方案。因此本发明设想了各种独立描述的实施方案的所有可能的组合及置换。例如，本发明提供如上所定义的式(II)的化合物，其中Z3是CH(根据下面限定的实施方案)，Z3是N(根据下面限定的另一实施方案)。‘n’是0、1、2或3(根据下面限定的又一实施方案)。
根据一个实施方案，具体提供了式(II)的化合物，其中Z3是CH。
根据另一实施方案，具体提供了式(II)的化合物，其中Z3是N。
根据又一实施方案，具体提供了式(II)的化合物，其中R1是卤素(例如F、Cl或Br)、氨基(例如NH2)、羟基(例如OH)、C1-8烷基(例如甲基)、C1-8烷氧基(例如甲氧基)、C1-8烷氧基C1-8烷氧基(例如-OCH2CH2OCH3)、卤代C1-8烷基(例如CF3)、卤代C1-8烷氧基(例如OCF3)、-(CH2)mOR5(例如
Figure BDA0002350595300000341
)、-(CH2)mNR5C(O)R6(例如
Figure BDA0002350595300000342
)、-(CH2)mNR7S(O)PR8(例如
Figure BDA0002350595300000343
)、任选地被一个或多个选自卤素(例如Cl、F或Br)和5至14元杂芳基(例如1H-咪唑-1-基)的取代基取代的C6-14芳基(例如苯基)。在此实施方案中，R5是氢或C3-12环烷基C1-8烷基(例如
Figure BDA0002350595300000344
)，R6是C1-8烷基(例如
Figure BDA0002350595300000345
)，R7是氢，R8是C1-8烷基(例如甲基)，‘p’是2，且‘m’是0或1。
根据又一实施方案，具体提供了式(II)的化合物，其中R1是卤素(例如F、Cl或Br)、氨基(例如NH2)、羟基(例如OH)、C1-8烷基(例如甲基)、C1-8烷氧基(例如甲氧基)、C1-8烷氧基C1-8烷氧基(例如-OCH2CH2OCH3)、卤代C1-8烷基(例如CF3)、卤代C1-8烷氧基(例如OCF3)、-(CH2)mOR5(例如
Figure BDA0002350595300000346
)、-(CH2)mNR5C(O)R6(例如
Figure BDA0002350595300000347
)、-(CH2)mNR7S(O)PR8(例如
Figure BDA0002350595300000348
)、C6-14芳基(例如
Figure BDA0002350595300000349
)或5至14元杂芳基(例如1H-咪唑-1-基)。在此实施方案中，R5是氢或
Figure BDA00023505953000003410
R6是
Figure BDA00023505953000003411
R7是氢，R8是甲基，‘p’是2，且‘m’是0或1。
根据又一实施方案，具体提供了式(II)的化合物，其中R1是F、Cl、NH2、OH、甲基、甲氧基、-OCH2CH2OCH3、CF3、OCF3、
Figure BDA00023505953000003412
Figure BDA00023505953000003413
或1H-咪唑-1-基。
根据又一实施方案，具体提供了式(II)的化合物，其中‘n’是0、1、2或3。
根据又一实施方案，具体提供了式(II)的化合物，其中‘n’是0。
根据又一实施方案，具体提供了式(II)的化合物，其中‘n’是1。
根据又一实施方案，具体提供了式(II)的化合物，其中‘n’是2。
根据又一实施方案，具体提供了式(II)的化合物，其中‘n’是3。
根据又一实施方案，具体提供了式(II)的化合物，其中R1是F、Cl、NH2、OH、甲基、甲氧基、-OCH2CH2OCH3、CF3、OCF3、
Figure BDA0002350595300000351
Figure BDA0002350595300000352
或1H-咪唑-1-基，且‘n’是0、1、2或3。
根据又一实施方案，具体提供了式(II)的化合物，其中R2是氢、C1-8烷基(例如甲基、乙基、异丙基或异丁基)、卤代C1-8烷基(例如三氟甲基或二氟甲基)、羟基C1-8烷基(例如-CH2OH)、-(CH2)mOR5(例如-CH2OCH3)、-(CH2)mC(O)NR5R6(例如-C(O)NH2)、3至15元杂环基(例如
Figure BDA0002350595300000353
)、3至15元杂环基C1-8烷基(例如
Figure BDA0002350595300000354
Figure BDA0002350595300000355
Figure BDA0002350595300000356
)、C6-14芳基(例如
Figure BDA0002350595300000357
)或C6-14芳基C1-8烷基(例如
Figure BDA0002350595300000361
)；其中3至15元杂环基、3至15元杂环基C1-8烷基、C6-14芳基和C6-14芳基C1-8烷基任选地被一个或多个选自卤素(例如Cl、F或Br)、C1-8烷基(例如甲基、2-甲基丙基或丙-2-基)、卤代C1-8烷基(例如三氟甲基、三氟乙基或氟乙基)、-(CH2)mS(O)PR8(例如-S(O)2CH3)、C3-12环烷基(例如环丙基)和3至15元杂环基(例如氧杂环丁烷)的取代基取代。在此实施方案中，R5是氢或C1-8烷基(例如甲基)；R6是氢；‘p’是2，且‘m’是0或1。
根据又一实施方案，具体提供了式(II)的化合物，其中R2是氢、C1-8烷基(例如甲基、乙基、异丙基或异丁基)、卤代C1-8烷基(例如三氟甲基或二氟甲基)、羟基C1-8烷基(例如-CH2OH)、-(CH2)mOR5(例如-CH2OCH3)、-(CH2)mC(O)NR5R6(例如-C(O)NH2)、3至15元杂环基(例如
Figure BDA0002350595300000362
)、3至15元杂环基C1-8烷基(例如
Figure BDA0002350595300000363
Figure BDA0002350595300000364
Figure BDA0002350595300000365
)、C6-14芳基(例如
Figure BDA0002350595300000366
)或C6-14芳基C1-8烷基(例如
Figure BDA0002350595300000367
)；其中3至15元杂环基、3至15元杂环基C1-8烷基、C6-14芳基和C6-14芳基C1-8烷基任选地被一个或多个选自Cl、甲基、2-甲基丙基、三氟甲基、三氟乙基、氟乙基、-S(O)2CH3、环丙基和氧杂环丁烷的取代基取代。在此实施方案中，R5是氢或甲基；R6是氢；‘p’是2，且‘m’是0或1。
根据又一实施方案，具体提供了式(II)的化合物，其中R2是氢、甲基、乙基、异丙基、异丁基、三氟甲基、二氟甲基、-CH2OH、-CH2OCH3、-C(O)NH2)、
Figure BDA0002350595300000371
Figure BDA0002350595300000372
根据又一实施方案，具体提供了式(II)的化合物，其中R3是氢、C1-8烷基(例如甲基、乙基、丙基、异丙基、异丁基或异戊基)、卤代C1-8烷基(例如三氟乙基)、-(CH2)mOR5(例如-CH2CH2OCH3或-CH2CH2CH2OCH3)、羟基C1-8烷基(例如-CH2CH2OH或-CH2CH2CH2OH)、-(CH)2N(R5)2(例如-CH2CH2N(CH3)2)、C3-12环烷基(例如
Figure BDA0002350595300000373
)、3至15元杂环基(例如
Figure BDA0002350595300000374
)、3至15元杂环基C1-8烷基(例如
Figure BDA0002350595300000381
Figure BDA0002350595300000382
Figure BDA0002350595300000383
)、C6-14芳基(例如
Figure BDA0002350595300000384
)、C6-14芳基C1-8烷基(例如
Figure BDA0002350595300000385
)、5至14元杂芳基(例如
Figure BDA0002350595300000386
)、5至14元杂芳基C1-8烷基(例如
Figure BDA0002350595300000387
)或-(CH2)mS(O)PR8(例如
Figure BDA0002350595300000388
)，其中C3-12环烷基、3至15元杂环基C1-8烷基、C6-14芳基和C6-14芳基C1-8烷基任选地被一个或多个选自卤素(例如Cl、F或Br)、氧代基(例如＝O)、C1-8烷基(例如甲基或乙基)和C1-8烷氧基(例如甲氧基)的取代基取代。在此实施方案中，R5是C1-8烷基(例如甲基)；R8是C1-8烷基(例如甲基)；m’是2或3，且‘p’是2。
根据又一实施方案，具体提供了式(II)的化合物，其中R3是氢、C1-8烷基(例如甲基、乙基、丙基、异丙基、异丁基或异戊基)、卤代C1-8烷基(例如三氟乙基)、-(CH2)mOR5(例如-CH2CH2OCH3或-CH2CH2CH2OCH3)、羟基C1-8烷基(例如-CH2CH2OH或-CH2CH2CH2OH)、-(CH)2N(R5)2(例如-CH2CH2N(CH3)2)、C3-12环烷基(例如
Figure BDA0002350595300000391
)、3至15元杂环基(例如
Figure BDA0002350595300000392
)、3至15元杂环基C1-8烷基(例如
Figure BDA0002350595300000393
Figure BDA0002350595300000394
Figure BDA0002350595300000395
)、C6-14芳基(例如
Figure BDA0002350595300000396
Figure BDA0002350595300000397
)、C6-14芳基C1-8烷基(例如
Figure BDA0002350595300000398
或
Figure BDA0002350595300000399
)、5至14元杂芳基(例如
Figure BDA00023505953000003910
)、5至14元杂芳基C1-8烷基(例如
Figure BDA0002350595300000401
)或-(CH2)mS(O)PR8(例如
Figure BDA0002350595300000402
)，其中C3-12环烷基、3至15元杂环基C1-8烷基、C6-14芳基和C6-14芳基C1-8烷基任选地被一个或多个选自Cl、F、＝O、甲基、乙基和甲氧基的取代基取代。在此实施方案中，R5是甲基；R8是甲基；m’是2或3，且‘p’是2。
根据又一实施方案，具体提供了式(II)的化合物，其中R3是氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、异丁基、异戊基、三氟乙基、-CH2CH2OCH3、-CH2CH2CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2CH2CH2OH、-CH2CH2N(CH3)2、
Figure BDA0002350595300000403
根据又一实施方案，具体提供了式(II)的化合物，其中
Z3是CH或N；
R1是F、Cl、NH2、OH、甲基、甲氧基、-OCH2CH2OCH3、CF3、OCF3、
Figure BDA0002350595300000411
或1H-咪唑-1-基；
R2是氢、甲基、乙基、异丙基、异丁基、三氟甲基、二氟甲基、-CH2OH、-CH2OCH3、-C(O)NH2)、
Figure BDA0002350595300000412
Figure BDA0002350595300000413
R3是氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、异丁基或异戊基、三氟乙基、-CH2CH2OCH3、-CH2CH2CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2CH2CH2OH、-CH2CH2N(CH3)2、
Figure BDA0002350595300000414
Figure BDA0002350595300000421
Figure BDA0002350595300000422
且
‘n’是0、1、2或3。
根据又一实施方案，具体提供了式(II)的化合物，其中
Z3是CH；
R1是F、Cl、NH2、OH、甲基、甲氧基、-OCH2CH2OCH3、CF3、OCF3、
Figure BDA0002350595300000423
或1H-咪唑-1-基；
R2是氢、甲基、乙基、异丙基、异丁基、三氟甲基、二氟甲基、-CH2OH、-CH2OCH3、-C(O)NH2)、
Figure BDA0002350595300000431
Figure BDA0002350595300000432
R3是氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、异丁基、异戊基、三氟乙基、-CH2CH2OCH3、-CH2CH2CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2CH2CH2OH、-CH2CH2N(CH3)2、
Figure BDA0002350595300000433
Figure BDA0002350595300000434
Figure BDA0002350595300000441
Figure BDA0002350595300000442
且
‘n’是1、2或3。
根据实施方案，具体提供了式(II)的化合物，其关于NADPH氧化酶抑制剂活性的IC50值小于1100nM，优选小于100nM，更优选小于50nM。
应该理解的是，式(I)和(II)在结构上涵盖了可由本文所述种类的化学结构设想的所有几何异构体、立体异构体、对映异构体和非对映异构体、N-氧化物及药学上可接受的盐。
根据实施方案，式(I)(其中X是NH)或式(II)(其中X是NH)的化合物在结构上涵盖所有互变异构形式，无论这种互变异构体是平衡存在的还是主要以一种形式存在的。当化合物与NADPH氧化酶结合时，这种互变异构形式可以是不同的或相同的。
Figure BDA0002350595300000443
本发明还提供包括至少一种本文所述的化合物或其药学上可接受的盐和至少一种药学上可接受的赋形剂(如药学上可接受的载体或稀释剂)的药物组合物。优选地，药物组合物包含治疗有效量的至少一种本文所述的化合物。本专利申请中所述的化合物可与药学上可接受的赋形剂(如载体或稀释剂)缔合，或者被载体稀释，或者被封在载体内，所述载体可呈胶囊、小药囊、纸或其它包套(container)的形式。
本发明的化合物和药物组合物可用于抑制与多种疾病状态有关的NADPH的活性。
本发明进一步提供通过以有效引起NADPH抑制的量对所述受试者施用一种或多种本文所述的化合物来在有需要的受试者中抑制NADPH氧化酶的方法。
具体实施方式
定义
术语“卤素”或“卤代”意指氟(氟代)、氯(氯代)、溴(溴代)或碘(碘代)。
术语“烷基”是指这样的直链或支链的烃链基团，其在主链中仅包括碳和氢原子，不含有不饱和度，具有一至八个碳原子(即C1-8烷基)，并且通过单键与分子的其余部分连接。“C1-6烷基”具有1至6个碳原子的烷基。烷基的非限制性实例包括甲基、乙基、正丙基、1-甲基乙基(异丙基)、正丁基、2-甲基丙基(异丁基)、正戊基、1，1-二甲基乙基(叔丁基)和2，2-二甲基丙基。
术语“烷氧基”表示经由氧键与分子的其余部分连接的烷基(即C1-8烷氧基)。这类基团的代表性实例有-OCH3和-OC2H5。
术语“烷氧基烷氧基”表示经由氧键与分子的其余部分连接的烷氧基(即C1-8烷氧基)。这种烷氧基烷氧基部分的实例包括但不限于-OCH2-CH2OCH3和-OCH2CH2OC2H5。
术语“卤代烷基”是指至少一个卤代基团(选自F、Cl、Br或I)与如上所定义的烷基连接(即卤代C1-8烷基)。这种卤代烷基部分的实例包括但不限于三氟甲基、三氟乙基、二氟甲基和氟甲基。
术语“卤代烷氧基”是指被一个或多个卤素原子取代的烷氧基(即卤代C1-8烷氧基)。“卤代烷氧基”的实例包括但不限于氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、2，2，2-三氟乙氧基、五氟乙氧基、五氯乙氧基、氯甲氧基、二氯甲氧基、三氯甲氧基和1-溴乙氧基。
术语“羟烷基”是指如上所定义的烷基，其中不同碳原子上的一至三个氢原子被羟基置换(即羟基C1-8烷基)。羟烷基部分的实例包括但不限于-CH2OH、-C2H4OH和-CH(OH)C2H4OH。
术语“环烷基”表示3至约12个碳原子的非芳族单环或多环状环体系，例如C3-12环烷基，如环丙基、环丁基、环戊基和环己基。多环状环烷基的实例包括但不限于全氢萘基、金刚烷基和降冰片基、桥接的环状基团或螺双环基团，例如螺(4，4)壬-2-基。
术语“环烷基烷基”是指具有3至约8个碳原子的含有环状环的基团，其与烷基直接连接，例如C3-8环烷基C1-8烷基。环烷基烷基可在烷基中能产生稳定结构的任何碳原子上与主结构连接。这类基团的非限制性实例包括环丙基甲基、环丁基乙基和环戊基乙基。
术语“芳基”是指具有6至14个碳原子的芳族基团(即C6-14芳基)，包括单环、双环和三环芳族体系，如苯基、萘基、四氢萘基、茚满基和联苯基。
术语“芳基烷基”是指与如上所定义的烷基直接键合的如上所定义的芳基，即C6-14芳基C1-8烷基，如-CH2C6H5和-C2H4C6H5。
除非另有说明，否则术语“杂环基”或“杂环状环”是指取代或未取代的非芳族3至15元环基团，其由碳原子和一至五个选自氮、磷、氧和硫的杂原子组成。杂环状环基团可以是单环、双环或三环体系，其可包括稠合、桥接或螺环体系，并且杂环状环基团中的氮、磷、碳、氧或硫原子可任选地被氧化成各种氧化态。此外，氮原子可任选地被季铵化；另外，除非定义另有限制，否则杂环状环或杂环基可任选地含有一个或多个烯键。这类杂环状环基团的实例包括但不限于氮杂环庚三烯基、氮杂环丁烷基、苯并二氧杂环戊烯基(benzodioxolyl)、苯并二噁烷基、色满基、二氧戊环基、二氧杂磷杂环戊烷基、十氢异喹啉基、茚满基、吲哚啉基、异吲哚啉基、异色满基、异噻唑烷基、异噁唑烷基、吗啉基、噁唑啉基、噁唑烷基、噁二唑基、2-氧代哌嗪基、2-氧代哌啶基、2-氧代吡咯烷基、2-氧代氮杂环庚三烯基、八氢吲哚基、八氢异吲哚基、全氢氮杂环庚三烯基、哌嗪基、4-哌啶酮基、吡咯烷基、哌啶基、吩噻嗪基、吩噁嗪基、奎宁环基、四氢异喹啉基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、噻唑啉基、噻唑烷基、硫吗啉基、硫吗啉基亚砜和硫吗啉基砜。杂环状环基团可在能产生稳定结构的任何杂原子或碳原子上与主结构连接。
术语“杂环基烷基”是指与烷基直接键合的杂环状环基团(即杂环基C1-8烷基)。杂环基烷基可在烷基中能产生稳定结构的任何碳原子上与主结构连接。
除非另有说明，否则术语“杂芳基”是指具有一个或多个独立地选自N、O或S的杂原子的取代或未取代的5至14元芳族杂环状环基团。杂芳基可以是单环、双环或三环状环体系。杂芳基环基团可在能产生稳定结构的任何杂原子或碳原子上与主结构连接。这类杂芳基环基团的实例包括但不限于噁唑基、异噁唑基、咪唑基、呋喃基、吲哚基、异吲哚基、吡咯基、吡唑基、三唑基、三嗪基、四唑基、噻吩基、噻唑基、异噻唑基、吡啶基(pyridyl)、吡啶基(pyridinyl)、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、苯并呋喃基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、苯并吡喃基、咔唑基、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、噌啉基、萘啶基、蝶啶基、嘌呤基、喹喔啉基、喹啉基、异喹啉基、噻二唑基、吲唑基、吲哚嗪基、吖啶基、吩嗪基和酞嗪基。
术语“杂芳基烷基”是指与烷基直接键合的杂芳基环基团(即杂芳基C1-8烷基)。杂芳基烷基可在烷基中能产生稳定结构的任何碳原子上与主结构连接。
术语“药学上可接受的盐”包括由药学上可接受的碱或酸(包括无机或有机碱以及无机或有机酸)制备的盐。这类盐的实例包括但不限于乙酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、碳酸氢盐、硫酸氢盐、酒石酸氢盐、硼酸盐、溴化物、樟脑磺酸盐、碳酸盐、氯化物、克拉维酸盐、柠檬酸盐、二盐酸盐、依地酸盐、乙二磺酸盐(edisylate)、依托酸盐(estolate)、乙磺酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、谷氨酸盐、甘苯胂酸盐(glycollylarsanilate)、己基间苯二酚酸盐、海巴明(hydrabamine)、氢溴酸盐、盐酸盐、羟基萘甲酸盐、碘化物、异硫磺酸盐(isothionate)、乳酸盐、乳糖醛酸盐、月桂酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基溴化物、甲基硝酸盐、甲基硫酸盐、粘酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、N-甲基葡糖胺铵盐、油酸盐、草酸盐、扑酸盐(双羟萘酸盐)、棕榈酸盐、泛酸盐、磷酸盐、磷酸氢盐(diphosphate)、聚半乳糖醛酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、硫酸盐、次醋酸盐、琥珀酸盐、鞣酸盐、酒石酸盐、茶氯酸盐(teoclate)、甲苯磺酸盐、三乙基碘和戊酸盐。衍生自无机碱的盐的实例包括但不限于铝、铵、钙、铜、铁、亚铁、锂、镁、三价锰(manganic)、二价锰(mangamous)、钾、钠和锌盐。
术语状态、病症或疾患的“治疗(treating/treatment)”包括：(a)预防或延迟在受试者中发生的状态、病症或疾患的临床症状的出现，所述受试者可能患有或倾向于罹患所述状态、病症或疾患，但尚未经历或显示出所述状态、病症或疾患的临床或亚临床症状；(b)抑制状态、病症或疾患，即阻止或减少疾病或其至少一种临床或亚临床症状的发生；或(c)减轻疾病，即，使状态、病症或疾患或者其临床或亚临床症状中的至少一种消退。
术语“受试者”包括哺乳动物(特别是人)及其他动物，如家畜(例如家养宠物，包括猫和狗)和非家畜(如野生动物)。
“治疗有效量”意指当为治疗状态、病症或疾患而对受试者施用时足以实现这种治疗的化合物的量。“治疗有效量”将根据化合物、疾病及其严重程度以及所治疗的受试者的年龄、体重、身体状况和反应性而变化。
本专利申请中所述的化合物可形成盐。构成本专利申请的一部分的药学上可接受的盐的非限制性实例包括衍生自无机碱的盐、有机碱的盐、手性碱的盐、天然氨基酸的盐和非天然氨基酸的盐。
本专利申请的某些化合物能够以立体异构形式(例如非对映异构体和对映异构体)存在。关于由通式(I)描述的全体化合物，本专利申请延伸到这些立体异构形式并且延伸到它们的混合物。就现有技术教导合成或分离特定立体异构体的程度而言，可通过本领域中已知的方法将本专利申请的不同立体异构形式彼此分离，或者可通过立体定向或不对称合成获得给定的异构体。也可设想本文所述的化合物的互变异构形式及混合物。还要理解的是，本发明的化合物可以溶剂化形式(如水合物)以及非溶剂化形式存在，并且本发明涵盖所有这类形式。
药物组合物
通常以药物组合物的形式施用本发明的化合物。可采用制药领域中熟知的程序制备这类组合物，并且这类组合物包含至少一种本发明的化合物。本专利申请的药物组合物包含一种或多种本文所述的化合物和一种或多种药学上可接受的赋形剂。通常，药学上可接受的赋形剂经监管机构批准，或者通常被认为对人或动物使用是安全的。药学上可接受的赋形剂包括但不限于载体、稀释剂、助流剂和润滑剂、防腐剂、缓冲剂、螯合剂、聚合物、胶凝剂、增粘剂、溶剂等。
合适载体的实例包括但不限于水、盐溶液、醇、聚乙二醇、花生油、橄榄油、明胶、乳糖、白土、蔗糖、糊精、碳酸镁、糖、直链淀粉、硬脂酸镁、滑石、明胶、琼脂、果胶、阿拉伯胶、硬脂酸、纤维素的低级烷基醚、硅酸、脂肪酸、脂肪酸胺、脂肪酸甘油单酯和甘油二酯、脂肪酸酯和聚氧乙烯。
药物组合物还可包括一种或多种药学上可接受的助剂、润湿剂、悬浮剂、防腐剂、缓冲剂、甜味剂、调味剂、着色剂或前述物质的任意组合。
药物组合物可呈常规形式，例如胶囊、片剂、溶液、悬浮液、注射剂或用于局部施加的产品。进一步地，可配制本发明的药物组合物以便提供所需的释放曲线。
可采用药物组合物的任何可接受的施用途径来实施以纯的形式或适当的药物组合物施用本发明的化合物。施用途径可以是将专利申请的活性化合物有效运送到适当或所需作用部位的任意途径。合适的施用途径包括但不限于口服、经鼻、经颊、皮肤、皮内、透皮、肠胃外、直肠、皮下、静脉内、尿道内、肌内或局部施用。
固体口服制剂包括但不限于片剂、胶囊(软或硬明胶)、糖衣丸(含有粉末或丸粒形式的活性成分)、糖锭和锭剂。
液体制剂包括但不限于糖浆、乳液和无菌注射液，如悬浮液或溶液。
所述化合物的局部剂型包括软膏、糊剂、乳膏、洗液、粉末、溶液、滴眼剂或滴耳剂、浸渍敷料，并且可含有适当的常规添加剂(如防腐剂、溶剂)以有助于药物渗透。
可通过常规技术制备本专利申请的药物组合物，例如Remington：The Scienceand Practice of Pharmacy，第20版，2003(Lippincott Williams&Wilkins)中所述。
可由相关领域的技术人员确定用于治疗本文所述的疾病和病症的化合物的合适剂量。通常是基于来自动物研究的初步证据，通过人体的剂量范围研究来确认治疗剂量。剂量必须足以产生所需的治疗益处而不会引起不良的副作用。本领域技术人员也能很好地采用并调整各种施用方式、剂型及合适的药物赋形剂。所有的变化和修改都预期在本专利申请的范围内。
治疗方法
本专利申请的化合物抑制NADPH氧化酶(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶)的活性，即它们阻止或抑制NADPH氧化的作用，和/或引发NADPH氧化酶调节作用，从而减少活性氧物质(ROS)的产生。因此本发明的化合物可用于治疗由来源于NADPH氧化酶的ROS介导的许多疾病和病症。
因此预期本专利申请的化合物可用于治疗疼痛、炎性病症、骨病症、自身免疫性疾病、心血管病症、内分泌病症、呼吸病症、代谢病症、皮肤病症、神经炎性和/或神经变性病症、肾脏疾病、生殖病症、内分泌病症、影响眼睛和/或晶状体的疾病和/或影响内耳的疾患、肝脏疾病、癌症、过敏性病症、创伤、脓毒性、出血性和过敏性休克、胃肠系统的疾病或病症、血管生成、血管生成依赖性疾患以及肺部感染、急性肺损伤、肺动脉高压、阻塞性肺病症、纤维化肺疾病和癌症。
术语“疼痛”包括但不限于伤害性疼痛、牙痛、由局部缺血心肌引起的心脏疼痛、偏头痛引起的疼痛、急性疼痛、慢性疼痛、神经病性疼痛、术后疼痛、神经痛(例如，疱疹后神经痛或三叉神经痛)引起的疼痛、糖尿病神经病变引起的疼痛、下背部和颈部疼痛、痛经、头痛、偏头痛(急性和预防性治疗)、牙痛、扭伤和拉伤、急性、亚急性和慢性肌肉骨骼疼痛综合征如滑囊炎、烧伤、受伤、外科手术(术后疼痛)和牙科手术之后的疼痛以及外科手术疼痛、癌症疼痛和炎性疼痛疾患如肌炎、滑膜炎、急性痛风和强直性脊柱炎及关节炎(包括类风湿性关节炎、幼年型类风湿性关节炎和骨关节炎)的抢先治疗。
术语“炎性病症”包括但不限于炎性肠病、脓毒症、脓毒性休克、成人呼吸窘迫综合征、胰腺炎、创伤引起的休克、哮喘、支气管哮喘、过敏性鼻炎、类风湿性关节炎、慢性类风湿性关节炎、动脉粥样硬化、脑内出血、脑梗塞、心力衰竭、心肌梗塞、银屑病、囊性纤维化、肝纤维化、中风、急性支气管炎、慢性支气管炎、急性细支气管炎、慢性细支气管炎、骨关节炎、痛风、脊髓炎、强直性脊柱炎、Reuter综合征、银屑病性关节炎、脊椎关节炎、幼年型关节炎或幼年型强直性脊柱炎、反应性关节炎、感染性关节炎或感染后关节炎、淋病性关节炎、梅毒性关节炎、莱姆病、“脉管炎综合征”引起的关节炎、结节性多动脉炎、过敏性脉管炎、Luegenec肉芽肿病、类风湿性多肌痛、关节细胞风湿病、钙结晶沉积性关节炎、假痛风、非关节炎性风湿病、滑囊炎、腱鞘炎、上髁炎症(网球肘)、腕管综合症、重复使用(打字)引起的病症、混合型关节炎、神经病变性关节病变、出血性关节炎、血管性紫癜、肥大性骨关节病、多中心网状组织细胞增生症、特定疾病引起的关节炎、血色素沉着、镰状细胞疾病及其它血红蛋白异常、高脂蛋白血症、异常丙种球蛋白血症、甲状旁腺机能亢进、肢端肥大症、家族性地中海热、白塞氏病、全身性自身免疫性疾病红斑狼疮、多发性硬化症和克罗恩氏病或类似复发性多软骨炎或慢性炎性肠病(IBD)的疾病。
本领域技术人员理解的术语“自身免疫性疾病”是指当免疫系统错误地攻击和破坏健康身体组织时出现的疾患。自身免疫性病症可导致一种或多种类型的身体组织破坏、器官的异常生长以及器官功能的变化。自身免疫性病症可影响一种或多种器官或组织类型，包括但不限于血管、结缔组织、内分泌腺如甲状腺或胰腺、关节、肌肉、红细胞和皮肤。自身免疫性(或自身免疫性相关)病症的实例包括多发性硬化症、关节炎、硬皮病、类风湿性关节炎、银屑病、克罗恩氏病、胃肠病症、炎性肠病、肠易激综合征、结肠炎、溃疡性结肠炎、舍格伦综合征、特应性皮炎、视神经炎、呼吸病症、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、哮喘、I型糖尿病、视神经脊髓炎、重症肌无力、葡萄膜炎、格林-巴利综合征、银屑病性关节炎、格雷夫氏病(Gaves′disease)、过敏症、骨关节炎、川崎病、粘膜利什曼病、桥本氏甲状腺炎、恶性贫血、阿狄森氏病、全身性红斑狼疮、皮肌炎、舍格伦综合征、红斑狼疮、重症肌无力、反应性关节炎、乳糜泻-口炎性腹泻(谷蛋白敏感性肠病)、格雷夫氏病、血小板生成(thymopoiesis)和狼疮。
术语“骨病症”包括但不限于骨质疏松症、骨硬化症、牙周炎和甲状旁腺功能亢进。
术语“心血管病症”包括动脉粥样硬化，特别是与内皮功能障碍相关的疾病或病症，包括但不限于高血压、I型或II型糖尿病的心血管并发症、内膜增生、冠心病、脑血管痉挛、冠状血管痉挛或动脉血管痉挛、内皮功能障碍、心力衰竭(包括充血性心力衰竭)、外周动脉疾病、再狭窄、支架引起的创伤、中风、局部缺血发作、血管并发症(如器官移植后)、心肌梗塞、高血压、动脉粥样硬化斑块的形成、血小板聚集、心绞痛、动脉瘤、主动脉夹层、局部缺血性心脏病、心脏肥大、肺栓塞、血栓形成事件(包括深静脉血栓形成)；如在器官移植、开心手术、血管成形术、出血性休克、局部缺血器官(包括心脏、脑、肝脏、肾脏、视网膜和肠)的血管成形术中局部缺血后由血流或氧输送的恢复引起的损伤。
术语“呼吸病症”包括但不限于哮喘、咳嗽、支气管哮喘、支气管炎、过敏性鼻炎、急性呼吸窘迫综合征、囊性纤维化、肺病毒感染(流感)、肺高压、特发性肺纤维化、慢性阻塞性肺疾病(COPD)和COPD恶化。
“过敏性病症”包括但不限于咳嗽、花粉热和哮喘。“代谢病症”包括但不限于肥胖症、代谢综合征和II型糖尿病。“皮肤病症”包括但不限于银屑病、湿疹、皮炎、伤口愈合及疤痕形成。
“神经变性病症”包括以中枢神经系统(CNS)变性或改变(特别是在神经元水平上)为特征的疾病或状态，如阿尔茨海默氏病、帕金森氏病、亨廷顿氏病、肌萎缩性侧索硬化、癫痫和肌营养不良。其进一步包括神经炎性和脱髓鞘状态或疾病，如脑白质病变和脑白质营养不良。术语“脱髓鞘”是指CNS的包括轴突周围的髓磷脂降解的状态或疾病。在本发明的上下文中，术语脱髓鞘疾病旨在包括如下的疾患，所述疾患包括使细胞脱髓鞘的过程，如多发性硬化症、进行性多灶性脑白质病变(PML)、血管性脊髓病、涉及CNS内的自体反应白细胞的任何神经炎性疾患、先天性代谢病症、具有异常髓鞘形成的神经病变、药物引起的脱髓鞘、辐射引起的脱髓鞘、遗传性脱髓鞘疾患、朊病毒引起的脱髓鞘疾患、脑炎引起的脱髓鞘或脊髓损伤。优选地，所述疾患是多发性硬化症。
“肾脏疾病”包括但不限于糖尿病性肾病、肾衰竭、肾小球肾炎、氨基糖苷类和铂化合物的肾毒性以及膀胱过度活跃。在特定的实施方案中，根据本发明的该术语包括慢性肾脏疾病或病症。“生殖病症”包括但不限于勃起功能障碍、生育病症、前列腺肥大和良性前列腺肥大。
“影响眼睛和/或晶状体的疾病”包括但不限于白内障，包括糖尿病性白内障、白内障手术后晶状体的再混浊、糖尿病视网膜病变及视网膜病变的其它形式。“影响内耳的疾患”包括老年聋、耳鸣、美尼尔氏病及其它平衡问题、椭圆囊性结石病(utriculolithiasis)、前庭性偏头痛和噪音引起的听力损失及药物引起的听力损失(耳毒性)。
术语“癌症”包括但不限于癌(例如，纤维肉瘤、粘液肉瘤、脂肪肉瘤、软骨肉瘤、成骨肉瘤、脊索瘤、血管肉瘤、内皮肉瘤、淋巴管肉瘤、淋巴管内皮瘤、骨膜瘤、间皮瘤、尤因瘤、平滑肌肉瘤、横纹肌肉瘤、结肠癌、胰腺癌、乳腺癌、肺癌、非小细胞肺癌、前列腺癌、卵巢癌、肾癌、前列腺癌、鳞状细胞癌、基底细胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌，乳头状癌、乳头状腺癌、囊腺癌、髓样癌、支气管癌、肾细胞癌或肝细胞癌。
术语“肝脏疾病”包括但不限于肝炎、肝纤维化、酒精性肝病、脂肪性肝病、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、原发性胆汁性肝硬化或肝硬化。
本申请的化合物可用于治疗由来源于NADPH氧化酶的ROS介导的疾病或病症。
本专利申请的化合物可用于治疗疼痛、炎性病症、骨病症、心血管病症、内分泌病症、呼吸病症、代谢病症、皮肤病症、神经炎性和/或神经变性病症、肾脏疾病、生殖病症、内分泌病症、影响眼睛和/或晶状体的疾病和/或影响内耳的疾患、肝脏疾病、癌症、过敏性病症、创伤、脓毒性、出血性和过敏性休克、胃肠系统的疾病或病症、血管生成、血管生成依赖性疾患以及肺部感染、急性肺损伤、肺动脉高压、阻塞性肺病症、纤维化疾病、纤维化肺病和癌症。
在一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗疼痛，特别是伤害性疼痛、牙痛、由局部缺血心肌引起的心脏疼痛、偏头痛引起的疼痛、急性疼痛、慢性疼痛、神经病性疼痛、术后疼痛、神经痛(例如，疱疹后神经痛或三叉神经痛)引起的疼痛、糖尿病神经病变引起的疼痛、牙痛、下背部和颈部疼痛、痛经、头痛、偏头痛(急性和预防性治疗)、牙痛、扭伤和拉伤、急性、亚急性和慢性肌肉骨骼疼痛综合征如滑囊炎、烧伤、受伤、外科手术(术后疼痛)和牙科手术之后的疼痛以及外科手术疼痛、癌症疼痛和炎性疼痛疾患如肌炎、滑膜炎、急性痛风和强直性脊柱炎和关节炎(包括类风湿性关节炎、幼年型类风湿性关节炎和骨关节炎)的抢先治疗。
在另一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗疼痛、炎性病症、自身免疫性疾病、心血管病症、呼吸病症、代谢病症、皮肤病症、肾脏疾病、肝脏疾病或过敏性病症。
在另一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗疼痛或炎症。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗疼痛。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗慢性疼痛、急性疼痛或神经性疼痛。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗炎性疼痛疾患。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗炎性病症。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗代谢病症。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗糖尿病。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗II型糖尿病。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗呼吸病症。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗囊性纤维化、咳嗽、哮喘、特发性肺纤维化、慢性阻塞性肺疾病(COPD)或COPD恶化。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗囊性纤维化或特发性肺纤维化。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗特发性肺纤维化。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗过敏性病症。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗哮喘。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗咳嗽。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗自身免疫性疾病。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗硬皮病。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗肾病症。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗糖尿病性肾病。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗糖尿病性肾病引起的疼痛。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗骨病症。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗骨质疏松症。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗诸如疼痛、糖尿病、囊性纤维化骨质疏松症、哮喘、咳嗽、慢性阻塞性肺疾病、COPD恶化、非小细胞肺癌、乳腺癌、前列腺癌、非酒精性脂肪性肝病、非酒精性脂肪性肝炎、原发性胆汁性肝硬化或肝硬化的疾病或疾病病状。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗囊性纤维化、咳嗽、哮喘、特发性肺纤维化、慢性阻塞性肺疾病或COPD恶化。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗非酒精性脂肪性肝病、非酒精性脂肪性肝炎、原发性胆汁性肝硬化或肝硬化。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗非酒精性脂肪性肝病。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗非酒精性脂肪性肝炎。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗原发性胆汁性肝硬化。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗肝硬化。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗非小细胞肺癌、乳腺癌或前列腺癌。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗肺癌。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗非小细胞肺癌。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗乳腺癌。
在又一实施方案中，本专利申请的化合物可用于治疗前列腺癌。
本专利申请涉及所述化合物在制备用于治疗由来源于NADPH氧化酶的ROS介导的疾病药物中的用途。
本专利申请的化合物在上面提到的疾患的治疗性和/或预防性治疗中均有需要。对于上面提到的治疗用途，施用的剂量当然会随所用的化合物、施用方式、所需的治疗及所适应的病症而变化。本发明的化合物的日剂量可在0.05mg/kg至100mg/kg的范围内。
一般制备方法
采用本领域技术人员已知的技术通过方案1-20中描述的反应顺序以及通过其它方法制备本文所述的化合物，包括通式(I)、(II)的化合物及具体实例。此外，在其中提到了具体的酸、碱、试剂、偶联剂、溶剂等的以下合成方案中要理解的是，可以使用其它合适的酸、碱、试剂、偶联剂等，并且它们包括在本发明的范围内。通过采用一般反应顺序得到的化合物纯度可能不足。可通过采用本领域技术人员已知的纯化有机化合物的任何方法来纯化这些化合物，例如以合适的比例使用不同的溶剂进行结晶或硅胶或氧化铝柱色谱法。
合成方案1中描述合成通式(IIa)的吡唑并[3，4-b]吡啶酮[其中Z3、R、R1、R2、R3和‘n’如关于式(II)的化合物所定义]的一般方法。
合成方案1
Figure BDA0002350595300000591
式(1)的氰基乙酸烷基酯与式(2)的适当缩醛在合适的溶剂中在升高的温度下反应，得到相应的式(3)的烯胺。在一实施方案中，可在合适的溶剂存在下进行反应。在一实施方案中，合适的溶剂可选自乙醇、甲醇和DMF。在一实施方案中，式(2)的适当缩醛化合物可选自N，N’-二甲基甲酰胺二甲基缩醛和N，N’-二甲基乙酰胺二甲基缩醛。在一实施方案中，可在升高的温度下进行反应。在一实施方案中，升高的温度可在50℃至150℃的范围内。式(3)的烯胺与式(4)的适当取代的肼在合适的溶剂中进行分子间环化，得到式(6)的氨基吡唑酯。在一实施方案中，可在合适的溶剂存在下进行反应。在一实施方案中，合适的溶剂是乙醇。在一实施方案中，适当取代的肼是甲肼。或者可通过式(3)的烯胺与式(5)的合适取代的肼盐在合适的碱存在下进行分子间环化来制备式(6)的氨基吡唑酯。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱可选自N，N-二异丙基乙胺、三乙胺、氢氧化钠和氢氧化钾。在一实施方案中，可在合适的溶剂存在下进行反应。在一实施方案中，合适的溶剂可选自无水乙醇和无水甲醇。在一实施方案中，合适的溶剂是无水乙醇。在一实施方案中，适当取代的肼盐是硫酸甲肼。使用合适溶剂的混合物中的合适的碱进行式(6)的氨基吡唑酯的酯水解，得到相应的式(7)的氨基吡唑羧酸。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱可以是氢氧化钾或氢氧化钠。在一实施方案中，可在合适溶剂的混合物存在下进行反应。在一实施方案中，合适溶剂的混合物是水和乙醇或水和甲醇。在一实施方案中，合适溶剂的混合物呈适当比例。在一实施方案中，适当比例是1∶3。使用合适的碱在合适的溶剂存在下进行式(7)的氨基吡唑羧酸与式(8)的适当取代的苯酰甲基卤的偶联反应，得到式(9)的化合物。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱可以是氟化钾。在一实施方案中，可在合适的溶剂存在下进行反应。在一实施方案中，合适的溶剂可以是N，N’-二甲基甲酰胺。使用合适的脱水剂进行式(9)的化合物的分子内环化，得到通式(IIa)的吡唑并[3，4-b]吡啶酮化合物。在一实施方案中，合适的脱水剂可选自多磷酸、五氧化二磷、氯化锌和硫酸。
合成方案2中描述合成通式(IIa)[其中Z3、R、R1、R2、R3和‘n’如关于式(II)的化合物所定义]的吡唑并[3，4-b]吡啶酮化合物的另一种方法。
合成方案2
Figure BDA0002350595300000601
使用合适的碱将式(10)的适当取代的酯和式(1)的氰基乙酸烷基酯缩合，得到相应的式(11)的不饱和羟基酯的钠盐。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱是乙醇钠或甲醇钠。式(11)的化合物与式(5)的适当取代的肼盐在三氟乙酸及合适的溶剂存在下进行分子间环化，得到式(6)的氨基吡唑酯。在一实施方案中，适当取代的肼盐是硫酸甲肼。在一实施方案中，可在合适的溶剂存在下进行反应。在一实施方案中，合适的溶剂可以是碳酸二乙酯或碳酸二甲酯。使用在合适溶剂的混合物中的合适的碱进行式(6)的氨基吡唑酯的酯水解，得到相应的式(7)的氨基吡唑羧酸。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱是氢氧化钠或氢氧化钾。在一实施方案中，可在合适溶剂的混合物存在下进行反应。在一实施方案中，合适溶剂的混合物是水和乙醇或水和甲醇。在一实施方案中，合适溶剂的混合物呈适当比例。在一实施方案中，适当比例是1∶3。使用合适的碱在合适溶剂中进行式(7)的氨基吡唑羧酸与式(8)的适当取代的苯酰甲基卤的偶联反应，得到式(9)的化合物。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱可以是氟化钾。在一实施方案中，可在合适的溶剂存在下进行反应。在一实施方案中，合适的溶剂可以是N，N’-二甲基甲酰胺。使用合适的脱水剂进行式(9)的化合物的分子内环化，得到通式(IIa)的化合物。在一实施方案中，合适的脱水剂可选自多磷酸、五氧化二磷、氯化锌和硫酸。
合成方案3中描述合成通式(IIa)的吡唑并[3，4-b]吡啶酮化合物的另一种方法[其中Z3、R、R1、R2、R3和‘n’如关于式(II)的化合物所定义]。
合成方案3
Figure BDA0002350595300000611
使用合适的试剂进行式(1)的氰基乙酸烷基酯与式(12)的三烷基邻位衍生物[其中R’是C1-4烷基]反应，得到式(13)的2-氰基-3-烷氧基丙烯酸烷基酯。在一实施方案中，在合适的试剂中进行反应。在一实施方案中，合适的试剂是乙酸酐。在合适的碱存在下进行式(13)的化合物与式(5)的烷基或芳基肼或其盐如硫酸盐或盐酸盐的分子间环化，得到式(6)的氨基吡唑酯。在一实施方案中，可在合适的溶剂存在下进行反应。在一实施方案中，合适的溶剂是乙醇。在一实施方案中，合适取代的肼是甲肼。使用合适的碱进行式(6)的氨基吡唑酯的酯水解，得到相应的式(7)的氨基吡唑羧酸。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱是氢氧化钠或氢氧化钾。使用合适的碱进行式(7)的氨基吡唑羧酸与式(8)的适当取代的苯酰甲基卤的偶联反应，得到式(9)的化合物。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱可以是氟化钾。在一实施方案中，可在合适的溶剂存在下进行反应。在一实施方案中，合适的溶剂可以是N，N’-二甲基甲酰胺。使用合适的脱水剂进行式(9)的化合物的分子内环化，得到通式(IIa)的化合物。在一实施方案中，合适的脱水剂可选自多磷酸、五氧化二磷、氯化锌和硫酸。
合成方案4中描述合成通式(IIa)的吡唑并[3，4-b]吡啶酮化合物的替代方法[其中Z3、R1、R2、R3和‘n’如关于式(II)的化合物所定义]。
合成方案4
Figure BDA0002350595300000621
可通过已知的方法使用在合适的溶剂中的合适的碱由丙二腈与适当取代的酰氯反应来制备起始物(14)。在合适的碱存在下使用硫酸二甲酯或甲基碘将羟基二氰基(14)甲基化，得到相应的式(15)的甲氧基二氰基衍生物化合物。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱可以是氢氧化钠。在合适的碱及合适溶剂存在下进行式(15)的化合物与式(5)的适当取代的肼盐的分子间环化，得到式(16)的5-氨基-4-氰基吡唑化合物。在一实施方案中，可在合适的溶剂存在下进行反应。在一实施方案中，合适的溶剂是乙醇。在一实施方案中，用于反应的合适碱可选自N，N-二异丙基乙胺或三乙胺。在一实施方案中，合适取代的肼是甲肼。使用合适的碱进行式(16)的化合物的水溶液水解，得到式(7)的吡唑羧酸。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱是氢氧化钠或氢氧化钾。使用在合适的溶剂中的合适的碱进行吡唑羧酸(7)与式(8)的适当取代的卤化物化合物的偶联反应，得到式(9)的化合物。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱可以是氟化钾。在一实施方案中，可在合适的溶剂存在下进行反应。在一实施方案中，合适的溶剂可以是N，N’-二甲基甲酰胺。在合适的脱水剂存在下进行式(9)的化合物的分子内环化，得到通式(IIa)的化合物。在一实施方案中，合适的脱水剂可选自多磷酸、五氧化二磷、氯化锌和硫酸。
合成方案5中描述合成通式(IIa)的吡唑并[3，4-b]吡啶酮化合物的另一种方法[其中Z3、R1、R2、R3和‘n’如关于式(II)的化合物所定义]。
合成方案5
Figure BDA0002350595300000631
使用合适的碱进行式(17)的适当取代的醛与丙二腈的反应，接着在碘存在下使用式(5)的适当取代的肼盐进行分子间环化，得到5-氨基-4-氰基吡唑(16)。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱是氢氧化钠或氢氧化钾。在一实施方案中，合适取代的肼是甲肼。采用碱性或酸性条件进行5氨基吡唑腈(16)的水溶液水解，得到式(7)的吡唑羧酸。使用合适的碱进行吡唑羧酸(7)与式(8)的适当取代的卤化物化合物的偶联反应，得到式(9)的化合物。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱可以是氟化钾。在一实施方案中，可在合适的溶剂存在下进行反应。在一实施方案中，合适的溶剂可以是N，N’-二甲基甲酰胺。在合适的脱水剂存在下进行式(9)的化合物的分子内环化，得到通式(IIa)的化合物。在一实施方案中，合适的脱水剂可选自多磷酸、五氧化二磷、氯化锌和硫酸。
合成方案6中描述合成通式(Ia)[其中R1、R2、R3和‘n’如关于式(I)的化合物所定义]的取代的5-羟基-6-芳基吡喃并[2，3-c]吡唑-4(1H)-酮的方法。
合成方案6
Figure BDA0002350595300000641
在合适的碱存在下进行式(18)的β-酮酯衍生物与式(4)的适当取代的肼化合物的反应，得到式(19)的吡唑啉酮衍生物。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱是氢氧化钠或氢氧化钾。在一实施方案中，可在合适取代的肼存在下进行反应。在一实施方案中，合适取代的肼是甲肼。在合适的碱存在下进行式(19)的吡唑啉酮衍生物与甲氧基乙酰氯的反应，得到吡唑并-2-甲氧基乙酮衍生物(20)。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱是氢氧化钙。在合适的碱存在下进行吡唑并-2-甲氧基乙酮(20)与式(21)的芳基羧酸酯的克莱森缩合，得到式(22)的5-羟基-吡唑并-2-甲氧基-3-芳基丙烷-1，3-二酮。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱是氢化钠。使用合适的试剂进行(22)的分子内环化，得到5-甲氧基-6-芳基吡喃并[2，3-c]吡唑-4(1H)-酮衍生物(23)。在一实施方案中，可在合适的试剂存在下进行反应。在一实施方案中，合适的试剂可以是硫酸和乙酸的混合物。使用合适的试剂进行式(23)的化合物的去甲基化，得到通式(Ia)的5-羟基-6-芳基吡喃并[2，3-c]吡唑。在一实施方案中，可在合适的试剂存在下进行反应。在一实施方案中，合适的试剂可以是三溴化硼或氢溴酸水溶液。
合成方案7中描述合成通式(IIb)[其中Z3、R1、R3和‘n’如关于式(II)的化合物所定义，且其中R”是H、F、Cl、C1-8烷基等]的取代的吡唑并[3，4-b]吡啶酮化合物的一般方法。
合成方案7
Figure BDA0002350595300000651
通过在合适的碱存在下进行氰基乙酸乙酯与式(24)的适当取代的酯的反应可以很容易地制备式(25)的羟基氰基中间体。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱可以是氢氧化钠或三乙胺。(25)与氧氯化磷反应，得到相应的式(26)的氯化物化合物。在合适的碱存在下进行式(26)的化合物与式(5)的烷基或芳基肼或其盐如硫酸盐或盐酸盐的分子间环化，得到式(27)的氨基吡唑酯。在一实施方案中，可在合适的溶剂存在下进行反应。在一实施方案中，合适的溶剂是乙醇。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，用于反应的合适碱可选自N，N-二异丙基乙胺或三乙胺。在一实施方案中，可在合适取代的肼存在下进行反应。在一实施方案中，合适取代的肼是甲肼。使用合适的碱进行氨基吡唑酯(27)的酯水解，得到式(28)的氨基吡唑羧酸衍生物。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱是氢氧化钠或氢氧化钾。使用合适的碱进行式(28)的氨基吡唑羧酸衍生物与式(8)的合适取代的苯酰甲基卤的偶联，得到式(29)的化合物。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱是氟化钾。在一实施方案中，可在合适的溶剂存在下进行反应。在一实施方案中，合适的溶剂是N，N’-二甲基甲酰胺。使用合适的脱水剂进行式(29)的化合物的分子内环化，得到通式(IIb)的化合物。在一实施方案中，合适的脱水剂可选自多磷酸、五氧化二磷、氯化锌或硫酸。
合成方案8中描述合成通式(IIc)[其中Z3、R1、R3和‘n’如关于式(II)的化合物所定义]的吡唑并[3，4-b]吡啶酮化合物的另一种方法。
合成方案8
Figure BDA0002350595300000661
通过使用在无水DMF中的氟化钾作为碱，使丙二腈与二硫化碳和甲基碘反应，可以很容易地制备2-[双(甲硫基)亚甲基]丙二腈。使用合适的碱和溶剂进行2-[双(甲硫基)亚甲基]丙二腈与式(30)的胺的置换反应，得到式(31)的双腈化合物。在合适的碱及合适的溶剂存在下进行式(31)的化合物与式(5)的适当取代的肼盐的分子间环化，得到式(32)的5-氨基-4-氰基吡唑化合物。在一实施方案中，可在合适的溶剂存在下进行反应。在一实施方案中，合适的溶剂是乙醇。在一实施方案中，用于反应的合适碱可选自N，N-二异丙基乙胺或三乙胺。在一实施方案中，合适取代的肼是甲肼。在合适溶剂的混合物中合适碱的存在下，式(31)的化合物的氰基水解，得到式(33)的羧酸化合物。在一实施方案中，用于反应的合适碱可以是氢氧化钠或氢氧化钾。在一实施方案中，可在合适溶剂的混合物存在下进行反应。在一实施方案中，合适溶剂的混合物是水和乙醇或水和甲醇。在一实施方案中，合适溶剂的混合物呈适当比例。在一实施方案中，适当比例是1∶3。使用合适的碱进行吡唑羧酸(33)与式(8)的适当取代的卤化物化合物的偶联反应，得到式(34)的化合物。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱可以是氟化钾。在一实施方案中，可在合适的溶剂存在下进行反应。在一实施方案中，合适的溶剂可以是N，N’-二甲基甲酰胺。在合适的脱水剂存在下进行式(34)的化合物的分子内环化，得到通式(IIc)的化合物。在一实施方案中，合适的脱水剂可选自多磷酸、五氧化二磷、氯化锌和硫酸。
合成方案9中描述合成通式(Ib)的吡唑并[3，4-b]吡啶酮化合物的另一种方法[其中Z3、R、R1、R2、R3和‘n’如关于式(I)的化合物所定义]。
合成方案9
Figure BDA0002350595300000671
在合适的溶剂中合适碱的存在下，式(IIa)的化合物中的胺基团与二碳酸二叔丁酯(BOC酸酐)反应后得到式(35)的被保护的胺化合物。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱是DMAP。在一实施方案中，可在合适的溶剂存在下进行反应。在一实施方案中，合适的溶剂是THF。在合适的溶剂中合适碱的存在下，使用式(36)[其中R是C1-8烷基，且X是Cl、F或I]的合适烷基卤进行化合物(35)的O-烷基化，得到式(37)的化合物。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱是碳酸钾。在一实施方案中，可在合适的溶剂存在下进行反应。在一实施方案中，合适的溶剂是N，N’-二甲基甲酰胺。在酸性条件下使用合适溶剂中的三氟乙酸进行式(37)的化合物的去保护，得到式(Ib)的化合物。在一实施方案中，可在合适的溶剂存在下进行反应。在一实施方案中，合适的溶剂是二氯甲烷。
合成方案10中描述合成通式(Ic)[其中Z3、R1、R2、R3和‘n’如关于式(I)的化合物所定义]的取代的吡唑并[3，4-b]吡啶酮化合物的一般方法。
合成方案10
Figure BDA0002350595300000681
可通过使用在合适的溶剂中的合适的碱使氰基乙酸乙酯与适当取代的酰氯反应来制备起始物(38)。在一实施方案中，可在合适的溶剂存在下进行反应。在一实施方案中，合适的溶剂可以是N，N’-二-甲基甲酰胺或THF。羟基氰基酯(38)与氧氯化磷反应得到相应的式(39)的氯化物化合物。在合适的碱存在下进行式(39)的化合物与式(5)的烷基或芳基肼或其盐如硫酸盐或盐酸盐的分子间环化，得到式(40)的氨基吡唑酯。在一实施方案中，可在合适的溶剂存在下进行反应。在一实施方案中，合适的溶剂是乙醇。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱可以是三乙胺或N，N-二异丙基乙胺。在一实施方案中，可在合适取代的肼存在下进行反应。在一实施方案中，合适取代的肼是甲肼。使用在合适溶剂的混合物中的合适的碱进行氨基吡唑酯(40)的酯水解，得到式(41)的氨基吡唑羧酸衍生物。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱可以是氢氧化钾或氢氧化钠。在一实施方案中，可在合适溶剂的混合物存在下进行反应。在一实施方案中，合适溶剂的混合物是水和乙醇或水和甲醇。在一实施方案中，合适溶剂的混合物呈适当比例。在一实施方案中，适当比例是1∶3。使用合适的碱进行式(41)的氨基吡唑羧酸衍生物与式(8)的适当取代的苯酰甲基卤的偶联，得到式(42)的化合物。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱是氟化钾。在一实施方案中，可在合适的溶剂存在下进行反应。在一实施方案中，合适的溶剂是N，N’-二甲基甲酰胺。使用合适的脱水剂进行式(42)的化合物的分子内环化，得到通式(Ic)的化合物。在一实施方案中，合适的脱水剂可选自多磷酸、五氧化二磷、氯化锌和硫酸。
合成方案11中描述合成通式(Ic)[其中Z3、R1、R2、R3和‘n’如关于式(I)的化合物所定义]的取代的吡唑并[3，4-b]吡啶酮化合物的替代方法。
合成方案11
Figure BDA0002350595300000691
式(13)[其中R’是C1-8烷基]的2-氰基-3-烷氧基丙烯酸乙酯与式(43)的适当取代的腙化合物反应得到式(44)的化合物。(44)在酸性条件下环化得到氨基吡唑酯(40)，其在如方案10中所述进行酯水解后得到氨基吡唑羧酸衍生物(41)。使用合适的进行吡唑羧酸(41)与式(8)的适当取代的苯酰甲基卤的偶联反应，得到式(42)的化合物。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱可以是氟化钾。在一实施方案中，可在合适的溶剂存在下进行反应。在一实施方案中，合适的溶剂可以是N，N’-二甲基甲酰胺。使用合适的脱水剂进行式(42)的化合物的分子内环化，得到通式(Ic)的化合物。在一实施方案中，合适的脱水剂可选自多磷酸、五氧化二磷、氯化锌和硫酸。
合成方案12中描述合成通式(Id)[其中Z3、R1、R2、R4和‘n’如关于式(I)的化合物所定义]的噻吩并[2，3-b]吡啶酮的一般方法。
合成方案12
Figure BDA0002350595300000701
使用式(45)的化合物用氰基乙酸乙酯使用硫磺粉制备式(46)的2-氨基-噻吩酯。使用合适的碱进行式(46)的2-氨基噻吩酯化合物的酯水解，得到式(47)的氨基噻吩羧酸化合物。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱可以是氢氧化锂、氢氧化钾或氢氧化钠。在一实施方案中，可在诸如乙醇、异丙醇等的溶剂存在下进行反应。使用合适的碱进行噻吩羧酸(47)与式(8)的适当取代的苯酰甲基卤化合物的偶联反应，得到式(48)的化合物。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱可以是氟化钾。在一实施方案中，可在合适的溶剂存在下进行反应。在一实施方案中，合适的溶剂可以是N，N’-二甲基甲酰胺。使用合适的脱水剂进行式(48)的化合物的分子内环化，得到通式(Id)的噻吩并[2，3-b]吡啶酮化合物。在一实施方案中，合适的脱水剂可选自多磷酸、五氧化二磷、氯化锌和硫酸。
合成方案13中描述合成通式(Ie)[其中Z3、R1、R2、R3和‘n’如关于式(I)的化合物所定义]的取代的吡唑并[3，4-b]吡啶酮化合物的一般方法。
合成方案13
Figure BDA0002350595300000711
式(49)的二酮酯与式(4)的适当取代的肼化合物进行环化，得到式(50)的吡唑-5-羧酸酯化合物。使用合适的碱进行吡唑-5-羧酸酯(50)的酯水解，得到相应的式(51)的吡唑羧酸。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱是氢氧化钠或氢氧化钾。使用浓硫酸和发烟硝酸进行式(51)的化合物的硝化，导致形成相应的4-硝基-1H-吡唑-5-羧酸衍生物(52)。使用合适的碱进行硝基吡唑酸(52)与式(8)的适当取代的苯酰甲基卤的偶联反应，得到式(53)的硝基吡唑衍生物。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱可以是氟化钾。硝基吡唑酯衍生物(53)在适当的溶剂中进行催化氢化还原后得到式(54)的氨基吡唑酯衍生物。在一实施方案中，可在诸如乙醇、甲醇、乙酸乙酯等的溶剂存在下进行反应。使用合适的脱水剂进行氨基吡唑酯(54)的分子内环化，得到通式(Ie)的吡唑并[4，3-b]吡啶酮。在一实施方案中，合适的脱水剂可选自多磷酸、五氧化二磷、氯化锌和硫酸。
合成方案14中描述合成通式(If)[其中Z3、R1、R2和‘n’如关于式(I)的化合物所定义]的噻唑并[5，4-b]吡啶酮的一般方法。
合成方案14
Figure BDA0002350595300000721
在碱存在下用式(55)的合适酸酐对2-氨基-2-氰基乙酸乙酯进行酰化，得到2-氨基-2-氰基乙酸酯的酰基衍生物(56)。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱可以是无水吡啶。使用劳森试剂进行式(56)的酰基氨基衍生物的环化，得到5-氨基-2-烷基噻唑-4-羧酸酯(57)。在一实施方案中，可在溶剂存在下进行反应。在一实施方案中，合适的溶剂可选自吡啶、甲苯、THF等。通过使用合适的碱进行化合物(57)的酯水解，得到5-氨基-2-烷基噻唑-4-羧酸(58)。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱可以是氢氧化锂、氢氧化钾或氢氧化钠。使用合适的碱进行氨基噻唑羧酸(58)与式(8)的适当取代的苯酰甲基卤化合物的偶联反应，得到式(59)的化合物。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱可以是氟化钾。使用合适的脱水剂进行式(59)的化合物的分子内环化，得到通式(If)的噻唑并[5，4-b]吡啶-7(4H)-酮。在一实施方案中，合适的脱水剂可选自多磷酸、五氧化二磷、氯化锌或硫酸。
合成方案15中描述合成通式(Ig)[其中R1、R3和‘n’如关于式(I)的化合物所定义]的取代的6-羟基-3-甲基-5-芳基吡喃并[3，2-c]吡唑-7-酮化合物的方法。
合成方案15
Figure BDA0002350595300000731
可通过甲基乙二醛与式(4)的适当取代的肼化合物在乙酸存在下反应来制备式(60)的4-羟基-3-乙酰基吡唑衍生物。4-羟基-3-乙酰基吡唑(60)与取代的芳族醛(61)在合适的碱存在下反应，得到式(62)的取代的吡唑并查尔酮衍生物。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱可以是氢氧化钾或氢氧化钠。在一实施方案中，可在诸如乙醇、甲醇、THF、异丙醇等的溶剂存在下进行反应。使用过氧化氢及合适的碱进行式(62)的化合物的分子内环化，得到通式(Ig)的6-羟基-3-甲基-5-芳基吡喃并[3，2-c]吡唑-7-酮。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱可以是氢氧化钾或氢氧化钠。
合成方案16中描述合成通式(Ih)[其中z3、R1、R2和‘n’如关于式(I)的化合物所定义]的5-羟基-噁唑并[5，4-b]吡啶-4-酮的一般方法。
合成方案16
Figure BDA0002350595300000741
可通过使用合适的碱和溶剂使2-氰基-3-乙氧基烷基-2-烯酸酯衍生物(13)与盐酸羟胺反应来制备式(63)的5-氨基-3-烷基异噁唑-4-羧酸乙酯。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱是氟化钾。在一实施方案中，可在合适的溶剂存在下进行反应。在一实施方案中，合适的溶剂是N，N’-二甲基甲酰胺。式(63)的化合物的碱介导水溶液水解得到相应的式(64)的氨基异噁唑羧酸化合物。使用合适的碱进行式(64)的氨基异噁唑酸化合物与式(8)的适当取代的苯酰甲基卤化合物的偶联反应，得到式(65)的化合物。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱是氟化钾。使用合适的脱水剂进行式(65)的化合物的分子内环化，得到通式(Ih)的5-羟基-噁唑并[5，4-b]吡啶-4-酮。在一实施方案中，合适的脱水剂可选自多磷酸、五氧化二磷、氯化锌和硫酸。
合成方案17中描述合成通式(Ii)的咪唑并[4，5-b]吡啶-7-酮的一般方法[其中Z3、R1、R2、R3和‘n’如关于式(I)的化合物所定义]。
合成方案17
Figure BDA0002350595300000742
通过使用合适的溶剂在回流条件下进行2-氨基-2-氰基乙酸乙酯与式(66)的胺和式(12)的三烷基邻位衍生物的偶联反应来制备式(67)的5-氨基-咪唑-4-羧酸酯。在一实施方案中，可在合适的溶剂存在下进行反应。在一实施方案中，合适的溶剂是乙腈。使用合适的碱进行化合物(67)的酯水解，得到相应的式(68)的羧酸化合物。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱可以是氢氧化钾或氢氧化钠。使用合适的碱进行式(68)的羧酸化合物与式(8)的适当取代的卤化物化合物的偶联反应，得到式(69)的化合物。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱是氟化钾。使用合适的脱水剂进行式(69)的化合物的分子内环化，得到通式(Ii)的咪唑并[4，5-b]吡啶-7-酮化合物。在一实施方案中，合适的脱水剂可选自多磷酸、五氧化二磷、氯化锌和硫酸。
合成方案18中描述合成通式(Ij)[其中Z3、R1和‘n’如关于式(I)的化合物所定义]的噻唑并[4，5-b]吡啶-3-甲酰胺化合物的方法。
合成方案18
Figure BDA0002350595300000751
可由2-氰基-N-环丙基乙酰胺与NaNO2在乙酸和水存在下反应、接着在合适的碱存在下使用对甲苯磺酰氯进行甲苯磺酰化来制备2-(环丙基氨基)-2-氧代-N-(甲苯磺酰氧基)乙酰亚胺酰基氰化物(70)。2-(环丙基氨基)-2-氧代-N-(甲苯磺酰氧基)乙酰亚胺酰基氰化物(70)与2-巯基乙酸乙酯在合适的碱存在下反应，得到4-氨基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1，2-噻唑-5-羧酸乙氧基甲酯(71)。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱可以是哌啶或吗啉。在一实施方案中，可在诸如乙醇、甲醇或THF等的合适溶剂存在下进行反应。使用合适的碱进行化合物(71)的酯水解得到相应的式(72)的羧酸化合物。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱可以是氢氧化钾或氢氧化钠。在一实施方案中，可在诸如乙醇、异丙醇等的溶剂存在下进行反应。使用合适的碱进行式(72)的羧酸化合物与式(8)的适当取代的卤化物化合物的偶联反应，得到式(73)的化合物。在一实施方案中，可在合适的碱存在下进行反应。在一实施方案中，合适的碱是氟化钾。使用合适的脱水剂进行式(73)的化合物的分子内环化，得到通式(Ij)的噻唑并[4，5-b]吡啶-3-甲酰胺化合物。在一实施方案中，合适的脱水剂可选自多磷酸、五氧化二磷、氯化锌和硫酸。
合成方案19中描述合成式(IIe)[其中Z3、R1、R3和‘n’如关于式(II)的化合物所定义]的吡唑并[3，4-b]吡啶酮的一般方法。
合成方案19
Figure BDA0002350595300000761
可通过已知的方法使用在合适的溶剂中的合适的碱由丙二腈与甲氧基乙酰氯反应制备起始物(74)。使用硫酸二甲酯或甲基碘在合适的碱存在下进行羟基二氰基(74)的甲基化，得到2-(1，2-二甲氧基亚乙基)丙二腈(75)。在一实施方案中，合适的碱可以是氢化钠或叔丁醇钾或叔丁醇钠。在合适的碱及合适的溶剂存在下进行(75)与式(5)的合适取代的肼或其盐的环化，得到式(76)的5-氨基-4-氰基吡唑化合物。在一实施方案中，可在合适的溶剂存在下进行反应。在一实施方案中，合适的溶剂是乙醇。在一实施方案中，用于反应的合适碱可选自N，N-二异丙基乙胺或三乙胺。在一实施方案中，合适取代的肼是甲肼。采用方案4中所述的程序进行式(76)的化合物的水溶液水解，得到式(77)的吡唑羧酸。使用在合适的溶剂中的合适的碱进行吡唑羧酸(77)与式(8)的适当取代的卤化物化合物的偶联反应，得到式(78)的化合物。在合适的脱水剂存在下进行式(78)的化合物的环化，得到通式(IId)的化合物。在一实施方案中，合适的脱水剂可选自多磷酸、五氧化二磷、氯化锌和硫酸。式(IId)的化合物与式(79)[其中环B是任选地被一个或多个独立地选自卤素、C1-8烷基、卤代C1-8烷基、-S(O)2CH3、C3-12环烷基和3至15元杂环基的取代基取代的3至15元杂环基C1-8烷基]的化合物进行光延反应，得到式(IIe)的吡唑并[3，4-b]吡啶酮。在一实施方案中，用于反应的合适试剂可选自三苯基膦和偶氮二羧酸二乙酯(DEAD)或偶氮二羧酸二异丙酯(DIAD)。在一实施方案中，可选择用于反应的合适溶剂，如THF、DMF或二噁烷等。
合成方案20中描述合成通式(II)[其中Z3、R、R1、R2、R3和‘n’如关于式(II)的化合物所定义]的吡唑并[3，4-b]吡啶酮的一般方法。
合成方案20
Figure BDA0002350595300000771
制备式(II)的化合物或其药学上可接受的盐的方法，所述方法包括：
(i)将式(6’)的化合物水解，得到式(7’)的化合物；
Figure BDA0002350595300000781
(ii)使式(7’)的化合物与式(8’)的化合物反应，得到式(9’)的化合物
Figure BDA0002350595300000782
(iii)转化式(9’)的化合物，得到通式(IIa)的化合物；
Figure BDA0002350595300000783
(iv)任选地将通式(II)的化合物转化为其药学上可接受的盐。
在一实施方案中，在合适的碱存在下进行式(6’)的化合物的反应。
在另一实施方案中，合适的碱是氢氧化钾或氢氧化钠。
在又一实施方案中，在合适溶剂的混合物存在下进行式(6’)的化合物的反应。
在又一实施方案中，合适溶剂的混合物是水和乙醇或水和甲醇。
在又一实施方案中，合适溶剂的混合物呈适当比例。
在又一实施方案中，适当比例是1∶3。
在又一实施方案中，在合适的碱存在下进行式(7’)的化合物的反应。
在又一实施方案中，合适的碱是氟化钾。
在又一实施方案中，在合适的溶剂存在下进行式(7’)的化合物的反应。
在又一实施方案中，合适的溶剂是N，N’--二甲基甲酰胺。
在又一实施方案中，在合适的脱水剂存在下进行式(9’)的化合物的反应。
在又一实施方案中，合适的脱水剂是多磷酸、五氧化二磷、氯化锌或硫酸。
实验
除非另有说明，否则后处理意指以下操作：将反应混合物分配在有机相与水相之间，分离各层，经硫酸钠干燥有机层，过滤并蒸发有机溶剂。除非另外提到，否则纯化意指通过硅胶色谱技术进行的纯化，通常使用合适极性的乙酸乙酯/石油醚混合物作为流动相。文中使用了以下缩写：DMSO-d6：六氘代二甲亚砜；DMF：N，N-二甲基甲酰胺，1H NMR：质子核磁共振；MS：质谱；Ex.：实施例；CDCl3：氘代氯仿；CD3COCD3：氘代丙酮；THF：四氢呋喃；J：耦合常数，单位Hz；RT或rt：室温(22-26℃)；h：小时；min：分钟；本文使用的起始物是市售的，或者是通过本领域普通技术人员已知的方法或通过本文公开的方法制备的。
采用上文描述的合成方案1至20制备下文所述的中间体。
中间体
中间体1
5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300000801
步骤1：2-氰基-3-(二甲基氨基)丙-2-烯酸乙酯
将氰基乙酸乙酯(10.0g，88.40mmol)和N，N’-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(15.31mL，114.92mmol)的混合物在无水甲醇(100mL)中回流3h。将反应混合物冷却到室温并在减压下浓缩。将得到的残留物用水稀释，用乙酸乙酯(2 x 250mL)萃取，并将有机层经无水硫酸钠干燥。将溶液在减压下浓缩，并将得到的残留物通过快速硅胶柱色谱法纯化，得到15.2g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.30(t，J＝7.5Hz，3H)，3.21(s，3H)，3.38(s，3H)，4.22(q，J＝6.9Hz，2H)，7.69(s，1H)。
步骤2：5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
将步骤1中间体(6.0g，35.670mmol)和甲肼(1.9mL，35.670mmol)的混合物在无水乙醇(60mL)中回流过夜。将反应混合物冷却到室温，在减压下浓缩，并用水(150mL)稀释如此得到的残留物。将水层用乙酸乙酯(3 x 150mL)萃取。将合并的有机萃取物用水(150ml)洗涤，并经无水硫酸钠干燥。将溶液在减压下浓缩，并通过快速硅胶柱色谱法纯化如此得到的残留物，得到4.82g呈固体的标题产物。1H NMR(300MHz DMSO-d6)：δ1.23(t，J＝7.5Hz，3H)，3.52(s，3H)，4.15(q，J＝6.6Hz，2H)，6.19(br s，2H)，7.41(s，1H)。
步骤3：5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
向步骤2中间体(4.8g，28.37mmol)在乙醇(28mL)中的搅拌溶液中添加氢氧化钾的水溶液(2.0M，28mL，42.555mmol)，并将反应混合物回流过夜。将反应混合物冷却到RT，在减压下浓缩。将残留物在1.0N柠檬酸(80mL)中搅拌。过滤沉淀的固体并干燥，得到3.59g标题产物。1H NMR(300MHz DMSO-d6)：δ3.51(s，3H)，6.13(br s，2H)，7.38(s，1H)，11.74(s，1H)。
步骤４：5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
在室温下向步骤3中间体(800mg，5.666mmol)在无水DMF(8ml)中的搅拌溶液中添加2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(1.32g，5.666mmol)，接着添加氟化钾(500mg，8.499mmol)，并将所得反应混合物搅拌过夜。将混合物用水(75mL)和乙酸乙酯(30mL)淬灭。分离各层，并将水层用乙酸乙酯(3 x 100mL)萃取。将合并的有机层用水(2 x 100mL)洗涤，并经无水硫酸钠干燥。在减压下蒸馏出溶剂，并通过快速硅胶柱色谱法纯化得到的残留物，得到912mg呈固体的所需产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.54(s，3H)，5.31(s，2H)，6.31(s，2H)，7.43-7.53(m，1H)，7.55(d，J＝4.8Hz，1H)，7.77(d，J＝7.5Hz，2H)，7.95(s，1H)。
中间体2
5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(3-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300000811
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(7.0mL)中的氟化钾(430mg，7.40mmol)，通过5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(700mg，4.93mmol)与2-溴-1-(3-氯苯基)乙酮(1.38g，5.92mmol)反应制备标题中间体，得到680mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ3.64(s，3H)，5.08(br s，2H)，5.42(s，2H)，7.45(t，J＝7.8Hz，1H)，7.60(d，J＝8.7Hz，1H)，7.71(s，1H)，7.83(d，J＝7.8Hz，1H)，7.93(s，1H)。
中间体3
5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，4-二氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300000821
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(8.0mL)中的氟化钾(494mg，8.49mmol)，通过5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(800mg，5.66mmol)与2-溴-1-(2，4-二氯苯基)乙酮(1.81g，6.77mmol)反应制备标题中间体，得到1.18g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ3.54(s，3H)，5.30(s，2H)，6.32(s，2H)，7.47(s，1H)，7.61(d，J＝8.4Hz，1H)，7.81(t，J＝8.7Hz，1H)，7.95(s，1H)，7.95(s，1H)。
中间体4
5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300000822
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(5.0mL)中的氟化钾(309mg，5.31mmol)，通过5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(500mg，3.54mmol)与2-溴-1-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]乙酮(1.21g，4.24mmol)反应制备标题中间体，得到597mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.55(s，3H)，5.57(s，2H)，6.31(s，2H)，7.52(s，1H)，7.74(t，J＝9.6Hz，1H)，8.31(d，J＝7.5Hz，1H)，8.35-8.43(m，1H)。
中间体5
5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯-6-氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300000823
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(6.5mL)中的氟化钾(401mg，6.90mmol)，通过5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(650mg，4.60mmol)与2-溴-1-(2-氯-6-氟苯基)乙酮(1.3g，5.52mmol)反应制备标题中间体，得到670mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ3.63(s，3H)，5.17(br s，2H)，5.51(s，2H)，7.08(t，J＝8.7Hz，1H)，7.21-7.28(m，1H)，7.30-7.45(m，1H)，7.62(s，1H)。
中间体6
5-氨基-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300000831
步骤1：5-氨基-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体1的步骤2中所述的程序，通过2-氰基-3-(二甲基氨基)丙-2-烯酸乙酯(2.5g，14.86mmol)和(2，2，2-三氟乙基)肼(1.69g，14.86mmol)在无水乙醇(25mL)中反应制备标题中间体，得到1.42g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.34(t，J＝7.5Hz，3H)，4.28(q，J＝6.6Hz，2H)，4.56(q，J＝8.7Hz，2H)，6.20(br s，2H)，7.70(s，1H)。
步骤2：5-氨基-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用氢氧化钾的水溶液(2.0M，6mL，8.853mmol)，通过步骤1中间体(1.4g，5.902mmol)的酯水解制备标题中间体，得到680mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ4.90(q，J＝8.7Hz，2H)，6.56(s，2H)，7.51(s，1H)，11.90(s，1H)。
步骤3：5-氨基-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(6.5mL)中的氟化钾(270mg，4.66mmol)，通过步骤2中间体(650mg，3.10mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(724mg，3.10mmol)反应制备标题中间体，得到410mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ4.93(q，J＝8.7Hz，2H)，5.34(s，2H)，6.75(s，2H)，7.44-7.52(m，1H)，7.55-7.63(m，3H)，7.79(d，J＝7.2Hz，1H)。
中间体7
5-氨基-1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300000841
步骤1：(2E)-2-氰基-3-乙氧基丙-2-烯酸乙酯
在RT下向氰基乙酸乙酯(10.0g，88.40mmol)在乙酸酐(100mL)中的搅拌溶液中添加原甲酸三乙酯(16.7mL，97.24mmol)。将反应混合物加热到90℃保持18h。将反应混合物冷却到RT，在减压下蒸发溶剂，并通过硅胶柱色谱法纯化得到的产物，得到8.0g呈固体的标题产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.30(t，J＝7.2Hz，3H)，1.42(t，J＝7.2Hz，3H)，4.20-4.36(m，4H)，7.99(s，1H)。
步骤2：5-氨基-1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
在RT下向步骤1中间体(2.0g，10.14mmol)在乙醇(20mL)中的搅拌溶液中添加4-氟苯基肼盐酸盐(1.97g，12.17mmol)，并将反应混合物在110℃下搅拌过夜。将反应混合物冷却到RT，在减压下蒸发溶剂，并将残留物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化，直到pH 9-10。将混合物用乙酸乙酯(100mL x 2)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，并在减压下浓缩。通过硅胶柱色谱法纯化得到的产物，得到2.65g呈固体的标题产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.26(t，J＝7.2Hz，3H)，4.21(q，J＝7.2Hz，2H)，6.31(s，2H)，7.37(t，J＝8.1Hz，2H)，7.54-7.57(m，2H)，7.69(s，1H)；APCI(m/z)250(M+H)+。
步骤3：5-氨基-1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-羧酸
在RT下向步骤2中间体(2.6g，10.42mmol)在异丙醇(35mL)中的搅拌溶液中添加氢氧化钾(880mg，15.62mmol)。将混合物在80℃下搅拌5h。在减压下蒸发溶剂，并将残留物用硝酸进行酸化，直到pH2-3。过滤沉淀的固体，用水(40mL x 2)洗涤并在真空下干燥，得到1.80g呈固体的标题产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ6.27(s，2H)，7.36(t，J＝8.4Hz，2H)，7.54-7.60(m，2H)，7.66(s，1H)，12.07(br s，1H)；APCI(m/z)220(M-H)-。
步骤4：5-氨基-1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(8mL)中的氟化钾(316mg，5.42mmol)进行步骤3中间体(800mg，3.62mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(1.02g，4.34mmol)的反应，得到1.05mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ5.27(s，2H)，6.43(s，2H)，7.28(t，J＝7.8Hz，4H)，7.38(t，J＝8.1Hz，2H)，7.56-7.75(m，2H)；ESI(m/z)374(M-H)-。
中间体8
5-氨基-1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300000861
按照中间体1的步骤4中所述的程序，在无水DMF(8mL)中通过5-氨基-1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-羧酸(800mg，3.62mmol)和2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(1.0g，4.29mmol)在氟化钾(315mg，5.41mmol)存在下反应制备标题化合物，得到1.05g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ5.39(s，2H)，6.43(s，2H)，7.38(t，J＝8.7Hz，2H)，7.50-7.60(m，5H)，7.76-7.83(m，2H)；APCI(m/z)372(M-H)-。
中间体9
5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300000862
方法-I：
步骤1：2-氰基-3-(二甲基氨基)丁-2-烯酸乙酯
按照中间体1的步骤1中所述的程序，通过氰基乙酸乙酯(3.0g，26.52mmol)与N，N’-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(5.0mL，34.47mmol)在甲醇(30mL)存在下反应制备标题中间体，得到5.1g呈油状的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.32(t，J＝6.9Hz，3H)，2.49(s，3H)，3.11(s，3H)，3.26(s，3H)，4.18(q，J＝7.2Hz，2H)。
步骤2：5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体1的步骤2中所述的程序，使用无水乙醇(50mL)通过步骤1中间体(5.0g，27.43mmol)与甲肼(1.5mL，27.43mmol)反应制备标题中间体，得到1.66g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.34(t，J＝7.2Hz，3H)，2.33(s，3H)，3.56(s，3H)，4.27(q，J＝7.2Hz，2H)，5.07(s，2H)。
步骤3：5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在乙醇(9.0mL)中的氢氧化钾的水溶液(2M，8.7mL，13.10mmol)，通过步骤2中间体(1.6g，8.73mmol)的酯水解制备标题中间体，得到563mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ2.12(s，3H)，3.43(s，3H)，6.09(s，2H)，11.69(s，1H)。
步骤４：5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(6.0mL)中的氟化钾(308mg，5.31mmol)，通过步骤3中间体(550mg，3.54mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(826mg，3.54mmol)反应制备标题中间体，得到604mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.12(s，3H)，3.46(s，3H)，5.30(s，2H)，6.25(s，2H)，7.45-7.53(m，1H)，7.55-7.64(m，2H)，7.77(d，J＝7.8Hz，1H)。
方法-II：
步骤1：(E)-2-氰基-3-乙氧基丁-2-烯酸乙酯
通过在110℃下加热氰基乙酸乙酯(50.0g，442mmol)和原乙酸三乙酯(86.0g，530mmol)的混合物2h来制备标题中间体。在减压下蒸馏出反应中形成的乙醇，添加原乙酸三乙酯(86.0g，530mmol)，并将混合物在130℃下加热4h。使用石油醚-乙酸乙酯(90：10)，通过柱色谱法纯化得到的产物，得到40g呈油状的标题产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.32(t，J＝6.9Hz，3H)，1.43(t，J＝7.2Hz，3H)，2.61(s，3H)，3.11(s，3H)，4.15-4.35(m，4H)。
步骤2：5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
通过使用在无水乙醇(175mL)中的N，N’二异丙基乙胺(31.7ml，185.53mmol)将步骤1中间体(17.0g，92.79mmol)与硫酸甲肼(13.3g，92.79mmol)的混合物在回流温度下加热过夜来制备标题中间体。在减压下蒸发过量的乙醇。将残留物用饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)碱化，并用乙酸乙酯(150mL x 3)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥并在减压下浓缩。通过硅胶柱色谱法纯化残留物，得到14.1呈固体的产物；1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.34(t，J＝7.2Hz，3H)，2.33(s，3H)，3.56(s，3H)，4.27(q，J＝7.2Hz，2H)，5.07(s，2H)。
步骤3：5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸
向步骤2中间体(1.6g，8.734mmol)在乙醇(8.7mL)中的搅拌溶液中添加氢氧化钾的水溶液(2.0M，8.7mL，13.101mmol)，并将反应混合物回流过夜。将反应混合物冷却到RT，在减压下浓缩。将残留物在1.0N柠檬酸(80mL)中搅拌。过滤沉淀的固体并干燥，得到560mg所需产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ2.12(s，3H)，3.43(s，3H)，6.09(s，2H)，11.69(s，1H)。
步骤４：5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(6.0mL)中的氟化钾(308mg，5.31mmol)，通过步骤3中间体(550mg，3.54mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(826mg，3.54mmol)反应制备标题中间体，得到604mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.12(s，3H)，3.46(s，3H)，5.30(s，2H)，6.25(s，2H)，7.45-7.53(m，1H)，7.55-7.64(m，2H)，7.77(d，J＝7.8Hz，1H)。
中间体10
5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，4-二氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300000891
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(7.0mL)中的氟化钾(393mg，6.76mmol)，通过5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸(700mg，4.51mmol)与2-溴-1-(2，4-二氯苯基)乙酮(1.2g，4.51mmol)反应制备标题化合物，得到716mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.12(s，3H)，3.46(s，3H)，5.29(s，2H)，6.25(s，2H)，7.60(d，J＝8.1Hz，1H)，7.75-7.86(m，2H)。
中间体11
5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯-4-氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300000892
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(6.0mL)中的氟化钾(336mg，5.79mmol)，通过5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸(600mg，3.86mmol)与2-溴-1-(2-氯-4-氟苯基)乙酮(1.16g，4.63mmol)反应制备标题化合物，得到743mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ2.31(s，3H)，3.57(s，3H)，5.13(br s，2H)，5.32(s，2H)，7.09(t，J＝9.0Hz，1H)7.19(d，J＝8.1Hz，1H)，7.74(t，J＝8.7Hz，1H)。
中间体12
5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300000893
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(6.0mL)中的氟化钾(337mg，5.80mmol)，通过5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸(600mg，3.86mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(1.09g，4.63mmol)反应制备标题化合物，得到825mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.11(s，3H)，3.45(s，3H)，5.18(s，2H)，6.25(s，2H)，7.26(t，J＝8.4Hz，2H)，7.64-7.69(m，1H)。
中间体13
5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，4-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300000901
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(5.0mL)中的氟化钾(280mg，4.81mmol)，通过5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸(500mg，3.22mmol)与1-[(溴氧基)羰基]-2，4-二氟苯(757mg，3.22mmol)反应制备标题化合物，得到520mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.17(s，3H)，3.47(s，3H)，5.33(s，2H)，6.25(s，2H)，7.29(t，J＝8.1Hz，1H)，7.49(t，J＝8.7Hz，1H)，7.95-8.03(m，1H)。
中间体14
5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(3，4-二甲基苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300000902
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(6.0mL)中的氟化钾(337mg，5.80mmol)，通过5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸(600mg，3.86mmol)与2-溴-1-(3，4-二甲基苯基)乙酮(1.05g，4.64mmol)反应制备标题化合物，得到730mg呈固体的产物。1HNMR(300MHz，CDCl3)：δ2.38(s，9H)，3.57(s，3H)，5.23(br s，2H)，5.46(s，2H)，7.23(s，1H)，7.67-7.72(m，2H)。
中间体15
5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-[3-氟-4-(三氟甲氧基)苯基]-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300000911
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(5.0mL)中的氟化钾(280mg，4.81mmol)，通过5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸(500mg，3.22mmol)与2-溴-1-[3-氟-4-(三氟甲氧基)苯基]乙酮(878mg，2.91mmol)反应制备标题化合物，得到710mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.17(s，3H)，3.50(s，3H)，5.53(s，2H)，6.26(s，2H)，7.71-7.77(m，1H)，8.13(d，J＝7.2Hz，2H)。
中间体16
5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(3，4-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300000912
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(6.0mL)中的氟化钾(336mg，5.79mmol)，通过5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸(600mg，3.86mmol)与2-溴-1-(3，4-二氟苯基)乙酮(1.1g，4.63mmol)反应制备标题化合物，得到698mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.17(s，3H)，3.47(s，3H)，5.50(s，2H)，6.26(s，2H)，7.60-7.70(m，1H)，7.85-7.90(m，1H)，8.07(t，J＝9.3Hz，1H)；ESI(m/z)310(M+H)+。
中间体17
5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300000921
按照中间体1的步骤4中所述的程序，通过向无水DMF(5mL)中的5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸(500mg，3.22mmol)中添加氟化钾(280mg，4.82mmol)和2-溴-1-(2-氯-4-甲氧基苯基)乙酮(847mg，3.22mmol)进行反应来制备标题化合物，得到690mg固体化合物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.14(s，3H)，3.46(s，3H)，3.95(s，3H)，5.31(s，2H)，6.25(brs，2H)，7.05(d，J＝8.1Hz，1H)，7.15(s，1H)，7.85(d，J＝8.4Hz，1H)。
中间体18
5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氟-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300000922
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(8.0mL)中的氟化钾(449mg，7.73mmol)，通过2-溴-1-(2-氟-4-甲氧基苯基)乙酮(1.52g，6.18mmol)与5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸(800mg，5.15mmol)反应制备标题中间体，得到670mg呈固体的产物。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.17(s，3H)，3.47(s，3H)，3.87(s，3H)，5.29(brs，2H)，6.26(br s，2H)，6.92-7.05(m，2H)，7.86(t，J＝8.1Hz，1H)；ESI(m/z)322(M+H)+。
中间体19
5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，5-二氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300000931
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(5.0mL)中的氟化钾(280mg，4.82mmol)，通过2-溴-1-(2，5-二氯苯基)乙酮(860mg，3.22mmol)与5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸(500mg，3.22mmol)反应制备标题中间体，得到510mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.12(s，3H)，3.45(s，3H)，5.29(s，2H)，6.26(br s，2H)，7.60-7.66(m，2H)，7.87(s，1H)；ESI(m/z)342(M)+。
中间体20
5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-[2-氟-4-(三氟甲基)苯基]-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300000932
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(4.0mL)中的氟化钾(224mg，3.86mmol)，通过2-溴-1-[2-氟-4-(三氟甲基)苯基]乙酮(881mg，3.09mmol)与5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸(400mg，2.57mmol)反应制备标题化合物，得到485mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.16(s，3H)，3.47(s，3H)，5.38(s，2H)，6.28(br s，2H)，7.77(d，J＝8.4Hz，1H)，7.96(d，J＝10.8Hz，1H)，8.05-8.10(m，1H)；ESI(m/z)360(M+H)+。
中间体21
5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-[3-氟-4-(三氟甲基)苯基]-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300000941
按照中间体1的步骤4中所述的程序，在RT下使用在无水DMF(5.0mL)中的氟化钾(280mg，4.83mmol)，通过5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸(500mg，3.22mmol和2-溴-1-[3-氟-4-(三氟甲基)苯基]乙酮(912mg，3.22mmol)的反应制备标题化合物，得到613mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.17(s，3H)，3.47(s，3H)，5.55(s，2H)，6.28(br s，2H)，7.95-8.00(m，2H)，8.02-8.12(m，1H)；ESI(m/z)360(M+H)+。
中间体22
5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯-5-甲氧基苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300000942
按照中间体1的步骤4中所述的程序，在RT下通过2-溴-1-(2-氯-5-甲氧基苯基)乙酮(843mg，3.20mmol)和5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸(350mg，2.25mmol)在无水DMF(3.5mL)中在氟化钾(280mg，4.83mmol)存在下反应制备标题化合物，得到387mg固体化合物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.12(s，3H)，3.45(s，3H)，3.80(s，3H)，5.29(s，2H)，6.25(brs，2H)，7.13-7.17(m，1H)，7.28(s，1H)，7.47(d，J＝8.7Hz，1H)。
中间体23
5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300000951
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(4.0mL)中的氟化钾(231mg，3.99mmol)，通过5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸(413mg，2.66mmol)与2-溴-1-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]乙酮(800mg，2.66mmol)反应制备标题中间体，得到513mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.17(s，3H)，3.46(s，3H)，5.56(s，2H)，6.26(s，2H)，7.95(d，J＝8.1Hz，1H)，8.25-8.31(m，2H)；ESI(m/z)376(M+H)+。
中间体24
5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(4-氯-2-氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300000952
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(6.0mL)中的氟化钾(335mg，0.33mmol)，通过5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸(600mg，3.86mmol)与2-溴-1-(4-氯-2-氟苯基)乙酮(1.16g，4.63mmol)反应制备标题中间体，得到850mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ2.36(s，3H)，3.56(s，3H)，5.09(s，2H)，5.34(d，J＝3.9Hz，2H)，7.26(t，J＝8.7Hz，2H)，7.95(t，J＝7.8Hz，1H)。
中间体25
5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300000961
步骤1：5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体1的步骤2中所述的程序，使用在无水乙醇(25mL)中的三乙胺(3.8mL，27.42mmol)，通过2-氰基-3-(二甲基氨基)丁-2-烯酸乙酯(2.5g，13.71mmol)与草酸乙肼(2.0g，13.71mmol)反应制备标题化合物，得到980mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.35(t，J＝7.2Hz，6H)，2.34(s，3H)，3.86(q，J＝7.2Hz，2H)，4.26(q，J＝7.2Hz，2H)，5.08(s，2H)。
步骤2：5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在乙醇(16mL)中的氢氧化钾的水溶液(1.25M，7.30mmol)，通过步骤1中间体(960mg，4.86mmol)的酯水解制备标题化合物，得到720mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.18(t，J＝7.2Hz，3H)，2.14(s，3H)，3.83(q，J＝7.2Hz，2H)，6.12(br s，2H)，11.69(br s，1H)。
步骤3：5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(5.0mL)中的氟化钾(243mg，4.17mmol)，通过步骤2中间体(470mg，2.78mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(779mg，3.33mmol)反应制备标题化合物，得到720mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.38(t，J＝7.2Hz，3H)，2.30(s，3H)，3.88(q，J＝7.2Hz，2H)，5.08(br s，2H)，5.34(s，2H)，7.39-7.40(m，1H)，7.45-7.46(m，2H)，7.65(d，J＝7.2Hz，1H)。
中间体26
5-氨基-3-甲基-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300000971
步骤1：5-氨基-3-甲基-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体1的步骤2中所述的程序，通过2-氰基-3-(二甲基氨基)丁-2-烯酸乙酯(2.5g，13.71mmol)和(2，2，2-三氟乙基)肼(在水中70％，2.2g，13.71mmol)在乙醇(25mL)中反应制备标题化合物，得到1.12g呈无色油状的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.34(t，J＝7.5Hz，3H)，2.34(s，3H)，4.25(q，J＝6.6Hz，2H)，4.50(q，J＝8.7Hz，2H)，5.31(br s，2H)。
步骤2：5-氨基-3-甲基-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在水和乙醇(1∶1，9.0mL)中的氢氧化钾(367mg，6.56mmol)，通过步骤1中间体(1.1g，4.37mmol)的酯水解制备标题化合物，得到720mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ2.35(s，3H)，4.28-4.35(m，2H)，5.28(br s，2H)。
步骤3：5-氨基-3-甲基-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯。
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(7.0mL)中的氟化钾(273mg，4.69mmol)，步骤2中间体(700mg，3.13mmol)与2-氯苯基溴化物(731mg，3.13mmol)反应得到319mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.16(s，3H)，4.80-4.87(m，2H)，5.32(s，2H)，6.55(br s，1H)，6.69(br s，1H)，7.49-7.52(m，1H)，7.55-7.60(m，2H)，7.75-7.78(m，1H)。
中间体27
5-氨基-3-甲基-1-(丙-2-基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300000981
步骤1：5-氨基-3-甲基-1-(丙-2-基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体1的步骤2中所述的程序，使用在无水乙醇(50mL)中的三乙胺(3.82mL，27.42mmol)，通过2-氰基-3-(二甲基氨基)丁-2-烯酸乙酯(2.5g，13.71mmol)与异丙基肼盐酸盐(1.51g，13.71mmol)反应制备标题化合物，得到1.87g呈油状的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.34(t，J＝7.2Hz，3H)，1.45(d，J＝6.9Hz，6H)，2.04(s，3H)，4.11-4.17(m，1H)，4.27(q，J＝7.2Hz，2H)，5.05(s，2H)。
步骤2：5-氨基-3-甲基-1-(丙-2-基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在乙醇(8.5mL)中的氢氧化钾的水溶液(2.0M，8.5mL，10.21mmol)，通过步骤1中间体(1.8g，8.520mmol)的酯水解制备标题化合物，得到812mg呈固体的产物。δ1.25(d，J＝6.9Hz，6H)，2.15(s，3H)，4.33-4.38(m，1H)，6.12(s，2H)，11.66(br s，1H)。
步骤４：5-氨基-3-甲基-1-(丙-2-基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯。
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(8.0mL)中的氟化钾(380mg，6.54mmol)，通过步骤2中间体(800mg，4.36mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(1.01g，4.36mmol)反应制备标题化合物，得到1.03g呈粘稠油状的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.27(d，J＝6.3Hz，6H)，2.14(s，3H)，4.36-4.42(m，1H)，5.30(s，2H)，6.25(s，2H)，7.49-7.51(m，1H)，7.55-7.60(m，2H)，7.77(d，J＝7.2Hz，1H)。
中间体28
5-氨基-1-(4-甲氧基苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300000991
步骤1：5-氨基-1-(4-甲氧基苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体1的步骤2中所述的程序，使用在无水乙醇(20mL)中的三乙胺(1.84mL，13.05mmol)，通过2-氰基-3-乙氧基丁-2-烯酸乙酯(2.0g，10.14mmol)和4-甲氧基苯基)肼盐酸盐(2.28g，13.05mmol)的反应制备标题化合物，得到2.70g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.36(t，J＝7.2Hz，3H)，2.40(s，3H)，3.84(s，3H)，4.30(q，J＝6.9Hz，2H)，5.23(brs，2H)，6.98(d，J＝9.3Hz，2H)，7.40(t，J＝8.7Hz，2H)。
步骤2：5-氨基-1-(4-甲氧基苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在水(12mL)和乙醇(36mL)中的氢氧化钾(808mg，14.43mmol)，通过步骤1中间体(2.65g，9.62mmol)的酯水解制备标题化合物，得到1.81g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.22(s，3H)，3.79(s，3H)，6.12(s，2H)，7.04(d，J＝8.7Hz，2H)，7.40(d，J＝8.7Hz，2H)，11.98(br s，1H)。
步骤3：5-氨基-1-(4-甲氧基苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(6.0mL)中的氟化钾(211mg，3.63mmol)，步骤2中间体(600mg，3.61mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(685mg，2.91mmol)反应得到710mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.21(s，3H)，3.80(s，3H)，5.25(s，2H)，6.25(s，2H)，7.06(d，J＝8.7Hz，2H)，7.28(t，J＝8.4Hz，2H)，7.40(d，J＝8.7Hz，2H)，7.62-7.73(m，1H)。
中间体29
5-氨基-1-(吡啶-2-基))-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯。
Figure BDA0002350595300001001
步骤1：5-氨基-3-甲基-1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体1的步骤2中所述的程序，使用在无水乙醇(15mL)中的三乙胺(1.15mL，8.19mmol)，通过2-氰基-3-乙氧基丁-2-烯酸乙酯(1.5g，8.19mmol)和2-肼基吡啶(1.07g，9.82mmol)的反应制备标题化合物，得到2.02g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.28(t，J＝7.2Hz，3H)，2.29(s，3H)，4.20(q，J＝7.2Hz，2H)，7.28(t，J＝6.9Hz，1H)，7.62(br s，2H)，7.81(d，J＝8.4Hz，1H)，7.94-7.99(m，1H)，8.42-8.44(m，1H)；APCI(m/z)247(M+H)+。
步骤2：5-氨基-3-甲基-1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在水(6.5mL)和乙醇(27mL)中的氢氧化钾(682mg，12.18mmol)，通过步骤1中间体(2.0g，8.12mmol)的酯水解制备标题化合物，得到1.30g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.28(s，3H)，7.28(br s，1H)，7.57(brs，2H)，7.80-7.85(m，1H)，7.95-7.97(m，1H)，8.44(br s，1H)，12.07(br s，1H)；APCI(m/z)219(M+H)+。
步骤3：5-氨基-3-甲基-1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(8.0mL)中的氟化钾(318mg，5.49mmol)，步骤2中间体(800mg，3.66mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(1.02g，4.39mmol)反应得到780mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.27(s，3H)，5.41(br s，2H)，7.29-7.33(m，1H)，7.51-7.55(m，1H)，7.56-7.60(m，2H)，7.75-7.85(m，2H)，7.95-8.00(m，1H)，8.44-8.46(m，1H)；APCI(m/z)371(M+H)+。
中间体30
5-氨基-1-(3，4-二氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001011
步骤1：5-氨基-1-(3，4-二氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体1的步骤2中所述的程序，使用在无水乙醇(20mL)中的三乙胺(1.87mL，27.42mmol)，通过(3，4-二氟苯基)肼(1.7g，13.64mmol)(2Z)-2-氰基-3-甲氧基丁-2-烯酸乙酯(1.9g，10.37mmol)反应制备标题化合物，得到1.83g呈油状的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.37(t，J＝7.5Hz，3H)，2.39(s，3H)，4.31(q，J＝7.5Hz，2H)，5.39(br s，2H)，7.27-7.32(m，2H)，7.42(t，J＝9.3Hz，1H)；ESI(m/z)282(M+H)+。
步骤2：5-氨基-1-(3，4-二氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在水(9.0mL)中的氢氧化钾的水溶液(626mg，11.18mmol)，通过步骤1中间体(1.8g，6.40mmol)的酯水解制备标题中间体，得到1.5g呈固体的产物。ESI(m/z)254(M+H)+。
步骤3：5-氨基-1-(3，4-二氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(6.0mL)中的氟化钾(206mg，3.55mmol)，步骤2中间体(600mg，2.37mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(553mg，2.35mmol)反应得到626mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.23(s，3H)，5.38(s，2H)，6.53(s，2H)，7.35-7.40(m，1H)，7.51-7.65(m，5H)，7.80(d，J＝7.2Hz，1H)；ESI(m/z)406(M+H)+。
中间体31
5-氨基-1-(4-氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001021
步骤1：5-氨基-1-(4-氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体1的步骤2中所述的程序，使用在无水乙醇(20mL)中的三乙胺(1.9mL，14.18mmol)，通过2-氰基-3-乙氧基丁-2-烯酸乙酯(2.0g，10.91mmol)和(4-氟苯基)肼盐酸盐(2.13g，13.09mmol)反应制备标题化合物，得到2.68g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.37(t，J＝7.5Hz，3H)，2.39(s，3H)，4.31(q，J＝7.5Hz，2H)，5.28(br s，2H)，7.18(t，J＝8.7Hz，2H)，7.46-7.52(m，2H)；ESI(m/z)264(M+H)+。
步骤2：5-氨基-1-(4-氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在水(12mL)和乙醇(32mL)中的氢氧化钾(829mg，14.80mmol)，通过步骤1中间体(2.6g，9.87mmol)的酯水解制备标题化合物，得到2.01g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.24(s，3H)，6.26(s，2H)，7.33(t，J＝9.0Hz，2H)，7.52-7.57(m，2H)，12.03(br s，1H)；APCI(m/z)236(M+H)+。
步骤3：5-氨基-1-(4-氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯。
按照中间体1的步骤4中所述的程序，通过步骤2中间体(700mg，2.97mmol)与2，6-二氟苯酰甲基溴(701mg，3.36mmol)在DMF(7.0mL)中在氟化钾(259mg，4.46mmol)存在下反应制备标题化合物，得到756mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.22(s，3H)，5.26(s，2H)，6.40(s，2H)，7.25-7.39(m，4H)，7.52-7.56(m，2H)，7.65-7.72(m，1H)；ESI(m/z)390(M+H)+。
中间体32
5-氨基-1-(4-氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001031
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(8mL)中的氟化钾(296mg，5.11mmol)，通过5-氨基-1-(4-氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(800mg，3.40mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(793mg，3.40mmol)反应制备标题化合物，得到965mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.23(s，3H)，5.38(s，2H)，6.40(s，2H)，7.36(t，J＝9.3Hz，2H)，7.50-7.60(m，4H)，7.80(d，J＝7.5Hz，2H)；ESI(m/z)388(M)+。
中间体
5-氨基-1-(3-氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯。
Figure BDA0002350595300001041
步骤1：5-氨基-1-(3-氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
在RT下向(2Z)-2-氰基-3-甲氧基丁-2-烯酸乙酯(1.5g，8.18mmol)在乙醇(15mL)中的搅拌溶液中添加3-氟苯基肼(1.6g，9.82mmol)和三乙胺(1.5mL，10.64mmol)。将反应混合物回流18h。将反应混合物冷却到RT并用冷水(100mL)稀释。过滤沉淀的固体并在真空下干燥，得到1.82g标题化合物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.37(t，J＝7.5Hz，3H)，2.40(s，3H)，4.31(q，J＝7.5Hz，2H)，5.41(br s，2H)，7.02-7.08(m，1H)，7.30-7.36(m，2H)，7.40-7.48(m，1H)。
步骤2：5-氨基-1-(3-氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
在RT下向步骤1中间体(1.8g，6.83mmol)在乙醇(22mL)中的搅拌溶液中添加氢氧化钾(574mg，10.25mmol)在水(8.0mL)中的溶液。将反应混合物回流过夜。将混合物冷却到RT，并在减压下回收乙醇。将浓缩的含水混合物用1N柠檬酸进行酸化，直到pH 2-3。过滤沉淀的固体并在真空下干燥，得到1.31g标题产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.23(s，3H)，6.43(s，2H)，7.20(br s，1H)，7.39-7.42(m，2H)，7.50-7.54(m，1H)，12.12(br s，1H)；ESI(m/z)236(M+H)+。
步骤3：5-氨基-1-(3-氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(8.0mL)中的氟化钾(296mg，5.10mmol)，通过步骤2中间体(800mg，3.40mmol)与2-氯苯酰甲基溴(935mg，4.08mmol)反应制备标题化合物，得到1.1g呈油状的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ2.38(s，3H)，5.39(s，2H)，5.48(br s，2H)，7.10(t，J＝8.7Hz，1H)，7.32-7.41(m，3H)，7.42-7.48(m，3H)，7.67(d，J＝7.8Hz，1H)；ESI(m/z)388(M)+。
中间体34
5-氨基-1-(3-氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001051
按照中间体1的步骤4中所述的程序，在RT下通过5-氨基-1-(3-氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(500mg，1.97mmol)与2，6-二氟苯酰甲基溴(557mg，2.36mmol)在DMF(5.0mL)中在氟化钾(172mg，2.96mmol)存在下反应制备标题化合物，得到660mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ2.38(s，3H)，5.25(s，2H)，5.50(br s，2H)，7.01(t，J＝8.4Hz，2H)，7.05-7.13(m，1H)，7.31-7.36(m，2H)，7.43-7.51(m，2H)；ESI(m/z)390(M+H)+。
中间体35
5-氨基-3-甲基-1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001061
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(8.5mL)中的氟化钾(340mg，5.83mmol)，通过5-氨基-3-甲基-1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-羧酸与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(1.1g，4.67mmol)反应制备标题中间体，得到1.08g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.65(s，3H)，5.26(s，2H)，5.51(br s，2H)，7.24-7.29(m，3H)，7.67-7.83(m，4H)。
中间体36
5-氨基-1-(3，4-二氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001062
按照中间体1的步骤4中所述的程序，在RT下通过5-氨基-1-(3，4-二氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(800mg，3.16mmol)与2，6-二氟苯酰甲基溴(743mg，3.16mmol)在无水DMF(8.0mL)中在氟化钾(275mg，4.73mmol)存在下反应制备标题化合物，得到767mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.22(s，3H)，5.27(s，2H)，6.53(s，2H)，7.28(t，J＝7.8Hz，2H)，7.35-7.40(m，1H)，7.55-7.72(m，3H)；ESI(m/z)408(M+H)+。
中间体37
5-氨基-1-(4-氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氟-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001071
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(370mg，6.37mmol)，通过2-溴-1-(2-氟-4-甲氧基苯基)乙酮(1.05g，4.25mmol)与5-氨基-1-(4-氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(1.0g，4.25mmol)反应制备标题化合物，得到866mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.28(s，3H)，3.88(s，3H)，5.36(s，2H)，6.40(s，2H)，6.95-7.05(m，2H)，7.36(t，J＝9.0Hz，2H)，7.54-7.59(m，2H)，7.88(t，J＝8.7Hz，1H)；ESI(m/z)402(M+H)+。
中间体38
5-氨基-1-(3，4-二氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氟-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001072
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(327mg，5.63mmol)，通过2-溴-1-(2-氟-4-甲氧基苯基)乙酮(927mg，3.75mmol)与5-氨基-1-(3，4-二氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(950mg，3.75mmol)反应制备标题中间体，得到879mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.28(s，3H)，3.88(s，3H)，5.36(s，2H)，6.53(s，2H)，6.94-7.05(m，2H)，7.39-7.42(m，1H)，7.59-7.65(m，2H)，7.88(t，J＝8.4Hz，1H)。
中间体39
5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001081
步骤1：3-氰基-4-乙氧基-1，1，1-三氟-4-氧代丁-2-烯-2-醇酸钠。
在RT下向钠金属(1.18g，51.72mmol)在乙醇(19mL)中的搅拌悬浮液中缓慢添加氰基乙酸乙酯(5.2mL，49.26mmol)，并将混合物搅拌1h。将三氟乙酸乙酯(7.0g，49.26mmol)添加到反应混合物中，并在RT下搅拌3h。将混合物在减压下浓缩，并将残留物与己烷(20mL)一起研磨。在真空下蒸发溶剂，得到11.3g呈油状的标题产物。1H NMR(300MHz，CD3COCD3)：δ1.23(t，J＝6.9Hz，3H)，4.11(q，J＝6.9Hz，2H)。
步骤2：5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
在RT下向步骤1中间体(11.0g，47.59mmol)在碳酸二甲酯(90mL)中的搅拌溶液中添加硫酸甲肼(13.72g，95.19mmol)、分子筛(12g)和三氟乙酸(3.64mL，47.59mmol)。将反应混合物回流过夜。将混合物冷却到室温并过滤出分子筛。在减压下浓缩滤液，得到3.87g呈固体的标题产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.32(t，J＝6.6Hz，3H)，3.64(s，3H)，4.27(q，J＝6.9Hz，2H)，5.19(br s，2H)。
步骤3：5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸
向步骤2中间体(3.8g，16.02mmol)在乙醇(16mL)中的搅拌溶液中添加氢氧化钾的水溶液(2.0M，16mL，24.03mmol)，并将混合物回流过夜。将反应混合物冷却到RT，在减压下浓缩，并将残留物用水(5.0mL)稀释。将含水混合物用1N柠檬酸进行酸化，直到pH 3-4。过滤沉淀的固体并干燥，得到2.3g所需产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.60(s，3H)，6.53(s，2H)，12.40(s，1H)。
步骤4：5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
在RT下向步骤3中间体(900mg，4.30mmol)在DMF(9.0mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(1.2g，5.16mmol)和氟化钾(375mg，6.45mmol)。将混合物在RT下搅拌过夜。将反应混合物用水(20mL)淬灭。过滤沉淀的固体并在真空下干燥。通过硅胶柱色谱法纯化粗化合物，得到1.03g呈固体的标题中间体。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.63(s，3H)，5.38(s，2H)，6.72(s，2H)，7.44-7.55(m，1H)，7.59(d，J＝3.9Hz，2H)，7.80(d，J＝7.8Hz，1H)。
中间体40
5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001091
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(5.0mL)中的氟化钾(208mg，4.30mmol)，通过5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸(500mg，2.39mmol)与2-溴-1-(2-氟苯基)乙酮(622mg，2.86mmol)反应制备标题化合物，得到642mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.64(s，3H)，5.40(s，2H)，6.72(s，2H)，7.35-7.47(m，2H)，7.67-7.75(m，1H)，7.90(t，J＝7.2Hz，1H)。
中间体41
5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(4-氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001101
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(5.0mL)中的氟化钾(208mg，3.58mmol)，通过5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸(500mg，2.39mmol)与2-溴-1-(4-氟苯基)乙酮(622mg，2.86mmol)反应制备标题化合物，得到622mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.64(s，3H)，5.58(s，2H)，6.71(s，2H)，7.41(t，J＝8.7Hz，2H)，8.04-8.10(m，2H)。
中间体42
5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(4-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001102
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(5.0mL)中的氟化钾(208mg，3.58mmol)，通过5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸(500mg，2.39mmol)与2-溴-1-(4-氯苯基)乙酮(669mg，2.86mmol)反应制备标题化合物，得到760mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.63(s，3H)，5.57(s，2H)，6.71(s，2H)，7.64(d，J＝8.4Hz，2H)，8.00(d，J＝8.7Hz，2H)。
中间体43
5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯-4-氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001111
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(6.0mL)中的氟化钾(250mg，4.30mmol)，通过5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸(600mg，2.86mmol)与2-溴-1-(2-氯-4-氟苯基)乙酮(866mg，3.44mmol)反应制备标题化合物，得到722mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.63(s，3H)，5.38(s，2H)，6.72(s，2H)，7.40(t，J＝6.3Hz，1H)，7.62(d，J＝6.6Hz，1H)，7.93(t，J＝6.6Hz，1H)。
中间体44
5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯-6-氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001112
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(7.0mL)中的氟化钾(291mg，5.02mmol)，通过5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸(700mg，3.34mmol)与2-溴-1-(2-氯-6-氟苯基)乙酮(1.0g，4.01mmol)反应制备标题化合物，得到567mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.62(s，3H)，5.26(s，2H)，6.73(s，2H)，7.32-7.50(m，1H)，7.55-7.65(m，2H)。
中间体45
5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(3-氯吡啶-4-基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001121
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在乙腈(24mL)中的三乙胺(2.0mL，14.34mmol)，通过5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸(1.0g，4.78mmol)与2-溴-1-(3-氯吡啶-4-基)乙酮(2.12g，4.78mmol)反应制备标题化合物，得到1.06g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.62(s，3H)，5.40(s，2H)，6.73(s，2H)，7.75-7.78(m，1H)，8.70-8.72(m，1H)，8.81(s，1H)。
中间体46
5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氟-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001122
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10.0mL)中的氟化钾(396mg，6.81mmol)，通过5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸(950mg，4.54mmol)与2-溴-1-(2-氟-4-甲氧基苯基)乙酮(1.34g，5.45mmol)反应制备标题化合物，得到1.01g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.64(s，3H)，3.87(s，3H)，5.41(s，2H)，6.72(br s，2H)，6.94-7.04(m，2H)，7.88(t，J＝8.7Hz，1H)；ESI(m/z)377(M+H)+。
中间体47
5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001131
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(9.0mL)中的氟化钾(375mg，6.44mmol)，通过5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸(900mg，4.30mmol)与2-溴-1-(2-氯-4-甲氧基苯基)乙酮(1.13g，4.29mmol)反应制备标题化合物，得到256mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.63(s，3H)，3.82(s，3H)，5.40(s，2H)，6.71(s，2H)，7.04-7.07(m，1H)，7.16(s，1H)，7.89(d，J＝8.4Hz，1H)；APCI(m/z)392(M+H)+。
中间体48
5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯-5-甲氧基苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001132
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(416mg，7.17mmol)，通过5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸(1.0g，4.78mmol)与2-溴-1-(2-氯-5-甲氧基苯基)乙酮(1.8g，4.78mmol)反应制备标题中间体，得到1.2g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.63(s，3H)，3.81(s，3H)，5.39(s，2H)，6.72(br s，2H)，7.14-7.18(m，1H)，7.30-7.32(m，1H)，7.48(d，J＝8.7Hz，1H)。
中间体49
5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，5-二氯苯基)-2-氧代乙酯。
Figure BDA0002350595300001141
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10.0mL)中的氟化钾(416mg，7.16mmol)，通过2-溴-1-(2，5-二氯苯基)乙酮(1.27g，4.76mmol)与5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸(1.0g，4.78mmol)反应制备标题化合物，得到1.12g呈固体的产物。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.63(s，3H)，5.38(s，2H)，6.73(s，2H)，7.60-7.67(m，2H)，7.89(s，1H)。
中间体50
5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，4-二甲氧基苯基)-2-氧代乙酯。
Figure BDA0002350595300001142
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在乙腈(10mL)中的三乙胺(545mg，5.38mmol)，通过5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸(750mg，3.58mmol)与2-溴-1-(2，4-二甲氧基苯基)乙酮(1.11g，4.30mmol)反应制备标题化合物，得到940mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.63(s，3H)，3.87(s，3H)，3.96(s，3H)，5.28(s，2H)，6.68-6.71(m，4H)，7.80(d，J＝9.0Hz，1H)；ESI(m/z)388(M)+。
中间体51
5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(4-氯-2-氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001151
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(416mg，7.17mmol)，通过(5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸(1.0g，4.78mmol)与2-溴-1-(4-氯-2-氟苯基)乙酮(1.2g，4.78mmol)反应制备标题中间体，得到1.3g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.63(s，3H)，5.39(s，2H)，6.72(s，2H)，7.50(d，J＝8.4Hz，1H)，7.72(d，J＝9.0Hz，1H)，7.92(t，J＝8.4Hz，1H)；ESI(m/z)402(M+H)+。
中间体52
5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(4-甲氧基苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001152
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(20mL)中的氟化钾(833mg，14.34mmol)，通过5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸(2.0g，9.56mmol)与2-溴-1-(4-甲氧基苯基)乙酮(2.2g，9.56mmol)反应制备标题中间体，得到2.31g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.64(s，3H)，3.86(s，3H)，5.53(s，2H)，6.72(s，2H)，7.09(d，J＝9.0Hz，2H)，7.97(d，J＝9.0Hz，2H)。
中间体53
5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-[4-(1H-咪唑-1-基)苯基]-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001161
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在乙腈(24mL)中的三乙胺(5.33mL，38.24mmol)，通过5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸(1g，4.78mmol)与2-溴-1-[4-(1H-咪唑-1-基)苯基]乙酮氢溴酸盐(1.65g，4.78mmol)反应制备标题化合物，得到286mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.64(s，3H)，5.62(s，2H)，6.73(s，2H)，7.16(s，1H)，7.88-7.93(m，3H)，8.13(d，J＝8.7Hz，2H)，8.47(s，1H)。
中间体54
5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-氧代-2-(吡啶-4-基)乙酯
Figure BDA0002350595300001162
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在乙腈(15mL)中的三乙胺(3.2mL，22.95mmol)，通过5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸(600mg，2.86mmol)与2-溴-1-(吡啶-4-基)乙酮(803mg，2.86mmol)反应制备标题化合物，得到358mg呈固体的产物。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.63(s，3H)，5.61(s，2H)，6.73(s，2H)，7.85(d，J＝5.7Hz，2H)，8.85(d，J＝6.0Hz，2H)。
中间体55
5-氨基-3-乙基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001171
步骤1：2-氰基-3-乙氧基戊-2-烯酸乙酯
在RT下向氰基乙酸乙酯(6.0g，53.04mmol)在乙酸酐(60mL)中的搅拌溶液中添加原丙酸三乙酯(11.73mL，58.34mm0l)，并将反应混合物加热到140℃过夜。将混合物在减压下浓缩。通过硅胶柱色谱法纯化如此得到的残留物，得到5.1g呈粘稠液体的标题产物。1HNMR(300MHz，CDCl3)：δ1.19(t，J＝7.8Hz，2H)，1.30(t，J＝7.2Hz，2H)，1.42(t，J＝7.2Hz，2H)，2.99(q，J＝7.8Hz，2H)，4.21(q，J＝7.2Hz，2H)，4.31(q，J＝7.8Hz，2H)。
步骤2：5-氨基-3-乙基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体1的步骤2中所述的程序，通过步骤1中间体(2.7g，13.68mmol)与甲肼(742μL，13.68mmol)在无水乙醇(27mL)中反应制备标题化合物，得到1.71g呈油状的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.21(t，J＝7.8Hz，2H)，1.35(t，J＝7.2Hz，2H)，2.75(q，J＝7.8Hz，2H)，3.58(s，3H)，4.28(q，J＝7.8Hz，2H)，5.04(br s，2H)。
步骤3：5-氨基-3-乙基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在乙醇(17mL)中的氢氧化钾的水溶液(2.0M，6mL，17.23mmol)，通过步骤2中间体(1.7g，8.61mmol)的酯水解制备标题化合物，得到1.51g呈油状的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.18(t，J＝7.8Hz，2H)，2.51(q，J＝7.8Hz，2H)，3.60(s，3H)，5.86(br s，1H)，12.40(s，1H)。
步骤4：5-氨基-3-乙基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(15.0mL)中的氟化钾(780mg，13.30mmol)，通过步骤3中间体(1.5g，4.30mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(2.48g，10.61mmol)反应制备标题化合物，得到650mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.24(t，J＝9.0Hz，3H)，2.70(q，J＝9.0Hz，2H)，3.55(s，3H)，5.09(s，2H)，5.33(s，2H)，7.30-7.50(m，2H)，7.64(d，J＝7.8Hz，2H)。
中间体56
3-氨基-5-(2-氟苄基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯。
Figure BDA0002350595300001181
步骤1：(2Z)-2-氰基-4-(2-氟苯基)-3-羟基丁-2-烯酸乙酯
在0℃下向(2-氟苯基)乙酸(5.0g，32.44mmol)在二氯甲烷(50mL)中的搅拌溶液中添加草酰氯(4.2mL，48.61mmol)，并将反应混合物在室温下搅拌3h。在减压下浓缩反应物，得到(2-氟苯基)乙酰氯(5.6g，32.45mmol)。将氰基乙酸乙酯(3.46mL，32.53mmol)添加到氢化钠(60％w/w，2.6g，64.88mmol)在THF(15mL)中的搅拌悬浮液中，并将混合物在室温下搅拌1h。将混合物冷却到0℃，并将(2-氟苯基)乙酰氯(5.6g，32.45mmol)添加到反应混合物中。将混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物用2N硫酸淬灭，直到pH 2-3。将含水混合物用乙酸乙酯(2 x 300mL)萃取，并将合并的有机层经硫酸钠干燥。将溶液在减压下浓缩，并通过硅胶柱色谱法纯化，得到7.02g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.37(t，J＝6.9Hz，3H)，3.98(s，2H)，4.36(q，J＝6.9Hz，2H)，7.09-7.16(m，2H)，7.26-7.33(m，2H)，13.74(s，1H)。
步骤2：3-氯-2-氰基-4-[2-(氟甲基)苯基]丁-2-烯酸乙酯
在室温下向2-氰基-4-(2-氟苯基)-3-羟基丁-2-烯酸乙酯(5.7g，22.88mmol)在二氯甲烷(57mL)中的搅拌溶液中添加氧氯化磷(2.3mL，25.16mmol)和三乙胺4.78mL，34.32mmol)。将反应混合物加热到50℃并搅拌18h。将反应混合物冷却到RT，并用饱和碳酸氢钠溶液(200mL)淬灭。将层分离，并用二氯甲烷(3x250mL)萃取水层。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。通过硅胶柱色谱法纯化如此得到的残留物，得到1.96g呈粘稠液体的标题产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.39(t，J＝6.9Hz，3H)，4.38(q，J＝6.9Hz，2H)，4.56(s，2H)，7.08-7.15(m，2H)，7.21-7.32(m，2H)。
步骤3：3-氨基-5-(2-氟苄基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体1的步骤2中所述的程序，通过步骤1中间体(1.0g，3.73mmol)与甲肼水溶液(86％，800μL，3.73mmol)在10％氢氧化钠水溶液(10mL)中反应制备标题化合物，得到1.2g呈油状的产物。该化合物不经纯化或表征即进入下一步。
步骤4：3-氨基-5-(2-氟苄基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在乙醇(4.0mL)中的氢氧化钾水溶液(4.0mL，6.38mmol)，通过步骤3中间体(1.18g，4.25mmol)的酯水解制备标题化合物，得到730mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.60(s，3H)，4.27(s，2H)，6.90(t，J＝7.2Hz，1H)，7.08-7.26(m，5H)。
步骤5：3-氨基-5-(2-氟苄基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(7.0mL)中的氟化钾(255mg，4.39mmol)，通过步骤4中间体(730mg，2.92mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(683mg，2.92mmol)反应制备标题化合物，得到446mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ3.63(s，3H)，4.32(s，2H)，5.37(s，2H)，7.04-7.23(m，3H)，7.22-7.25(m，1H)，7.33-7.42(m，3H)，7.63(d，J＝7.2Hz，1H)。
中间体57
3-氨基-5-(4-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001201
步骤1：2-氰基-3-(4-氟苯基)-3-羟基丙-2-烯酸乙酯
在0℃下向4-氟苯甲酸(20g，142.73mmol)在DMF(5.0mL)和二氯甲烷(200mL)中的搅拌溶液中添加草酰氯(25mL，285.46mmol)，并将反应混合物在RT下搅拌5h。在减压下蒸发溶剂。将残留物用甲苯(300mL)稀释。在室温下将氰基乙酸乙酯(8.07g，71.30mmol)和三乙胺(20mL，142.73mmol)添加到混合物中。将混合物在RT下搅拌过夜。将反应混合物用水(300mL)稀释，并用乙酸乙酯(2x300mL)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，并在减压下浓缩，得到17.25g呈油状的标题产物。该中间体直接用于下一步。
步骤2：3-氯-2-氰基-3-(4-氟苯基)丙-2-烯酸乙酯
在RT下向步骤1中间体(17.22g，73.21mmol)在无水二氯甲烷(173mL)中的搅拌溶液中添加磷酰氯(phosphoryl oxychloride)(7.4mL，80.53mmol)和三乙胺(15.5mL，109.81mmol)。将反应混合物加热到45℃，并在相同温度下搅拌过夜。将混合物冷却到室温，并用5.0NHCl(100mL)酸化。将混合物用二氯甲烷(2 x 200mL)萃取。将有机层用碳酸氢钠(200mL)洗涤，并经无水硫酸钠干燥。溶剂完全蒸发，得到7.0g呈油状的标题产物。该中间体原样用于下一步。
步骤3：3-氨基-5-(4-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
向步骤2中间体(6.7g，26.41mmol)在1.0N氢氧化钠水溶液(67mL)中的搅拌溶液中添加硫酸甲肼(3.8g，26.41mmol)，并将反应混合物在室温下搅拌16h。将混合物用水稀释，并用乙酸乙酯(3 x 150mL)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥。将溶液在减压下浓缩，并通过快速硅胶柱色谱法纯化得到的产物，得到880mg呈固体的标题产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.97(t，J＝6.9Hz，3H)，3.42(s，3H)，3.96(q，J＝6.9Hz，2H)，5.45(s，2H)，7.30(t，J＝8.7Hz，2H)，7.45(t，J＝8.4Hz，2H)。
步骤４：3-氨基-5-(4-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在乙醇(3.3mL)中的氢氧化钾的水溶液(2.0M，3.3mL，4.95mmol)，通过步骤3中间体(870mg，3.30mmol)的酯水解制备标题化合物，得到699mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.62(s，3H)，5.41(s，2H)，7.44(t，J＝8.7Hz，2H)，7.66(t，J＝8.4Hz，2H)，11.42(br s，1H)。
步骤5：3-氨基-5-(4-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(7mL)中的氟化钾(255mg，4.40mmol)，通过步骤4中间体(690mg，2.933mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(821mg，3.52mmol)反应制备标题化合物，得到560mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.44(s，3H)，5.17(s，2H)，5.55(s，2H)，7.29(t，J＝8.7Hz，2H)，7.39-7.50(m，3H)，7.56(d，J＝3.9Hz，2H)，7.68(d，J＝7.2Hz，1H)。
中间体58
3-氨基-1，5-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001221
步骤1：1-亚苄基-2-甲肼
在室温下向苯甲醛(4.0g，37.68mmol)在无水乙醇(6.3mL)中的搅拌溶液中添加甲肼(2.0mL，37.68mmol)，并将混合物回流1h。将反应混合物在减压下浓缩，并将残留物用水(300mL)稀释。将含水混合物用乙酸乙酯(2 x 200mL)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，并在减压下浓缩，得到3.5g呈无色油状的标题产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ2.98(s，3H)，4.98(s，IH，)7.20-7.38(m，3H)，7.51-7.60(m，3H)。
步骤2：2-氰基-3-乙氧基丁-2-烯酸乙酯
将氰基乙酸乙酯(10.0g，88.40mmol)和原乙酸三乙酯(17.90mL，96.77mmol)在乙酸酐(100mL)中的搅拌混合物回流24h。在真空下除去过量的乙酸酐，并将残留物通过硅胶柱色谱法纯化，得到2.7g呈油状的标题产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.30(t，J＝7.5Hz，3H)，1.42(t，J＝6.9Hz，3H)，2.60(s，3H)，4.15-4.35(m，4H)。
步骤3：3-氨基-1，5-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
在RT下向步骤2中间体(2.7g，12.85mmol)在无水甲苯(11mL)中的搅拌溶液中添加步骤1中间体(1.5g，11.17mmol)，并将反应混合物回流过夜。将反应混合物冷却到室温并在减压下浓缩。将残留物在乙醇(15mL)和浓盐酸(1.5mL)的混合物中回流1h。将反应混合物冷却到室温并在减压下浓缩。将残留物用1.0N HCl(50mL)处理，并用氯仿(3 x 75mL)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，并在减压下浓缩，得到730mg呈固体的标题产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.25(d，J＝6.6Hz，3H)，2.35(s，3H)，3.51(s，3H)，4.16(q，J＝6.9Hz，2H)，5.22(s，2H)。
步骤4：3-氨基-1，5-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在乙醇(4.0mL)中的氢氧化钾的水溶液(2.0M，3.9mL，5.89mmol)，通过步骤3中间体(720mg，3.93mmol)的酯水解制备标题化合物，得到515mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.34(s，3H)，3.50(s，3H)，5.42(s，2H)，11.38(br s，1H)。
步骤5：3-氨基-1，5-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(5.0mL)中的氟化钾(280mg，4.81mmol)，通过步骤4中间体(500mg，3.22mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(902mg，3.86mmol)反应制备标题化合物，得到260mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.33(s，3H)，3.53(s，3H)，5.34(br s，4H)，7.41-7.50(m，1H)，7.58(d，J＝3.9Hz，2H)，7.79(d，J＝7.8Hz，1H)。
中间体59
3-(2-氯苯基)-1-(4-羟基-1，5-二甲基-1H-吡唑-3-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0002350595300001231
步骤1：1-(4-羟基-1，5-二甲基-1H-吡唑-3-基)乙酮
将硫酸甲肼(2.0g，13.87mmol)添加到丙酮醛(在水中40％，14.9mL，83.24mmol)、乙酸(1.2mL，20.80mmol)和水(22mL)的搅拌混合物中。将反应混合物回流3h。将混合物冷却到RT并用水(100mL)稀释。将层分离，并将水溶液用乙酸乙酯(2x250mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在减压下浓缩，得到1.70g呈固体的标题产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ2.19(s，3H)，2.51(s，3H)，3.79(s，3H)，7.83(br s，1H)。
步骤2：3-(2-氯苯基)-1-(4-羟基-1，5-二甲基-1H-吡唑-3-基)丙-2-烯-1-酮
向2-氯苯甲醛(380μL，3.24mmol)在无水乙醇(5.0mL)中的搅拌溶液中添加步骤1中间体(500mg，3.24mmol)以及氢氧化钠(557mg，13.93mmol)在乙醇(5.0mL)中的溶液。将反应混合物在RT下搅拌18h。在减压下回收溶剂，并将残留物用水(100mL)稀释。将水溶液用乙酸乙酯(2 x 100mL)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到455mg呈固体的标题产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ2.23(s，3H)，3.83(s，3H)，7.29-7.32(m，2H)，7.41-7.44(m，1H)，7.57-7.62(m，1H)，7.82-7.85(m，1H)，8.19(s，1H)，8.32-8.38(m，1H)。
中间体60
2-氨基-5-甲基噻吩-3-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001241
步骤1：2-氨基-5-甲基噻吩-3-羧酸乙酯
在室温下向氰基乙酸乙酯(10.0g，88.40mmol)、硫(2.83g，88.40mmol)和三乙胺(12.5mL)在无水DMF(18mL)中的搅拌混合物中缓慢添加丙醛(7.0mL，97.10mmol)在乙醇(3.2mL)中的溶液。将反应混合物加热到60℃保持1h。将混合物冷却到室温并用水(100mL)淬灭。将含水混合物用乙酸乙酯(2 x 250mL)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥。将溶液在减压下浓缩，得到12g呈固体的标题产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.33(t，J＝6.6Hz，3H)，2.26(s，3H)，4.25(q，J＝6.9Hz，2H)，4.61(br s，2H)，6.62(s，1H)。
步骤2：2-氨基-5-甲基噻吩-3-羧酸
在室温下向步骤1中间体(2.5g，13.50mmol)在THF(25mL)、水(8.0mL)和甲醇(16.5mL)中的搅拌溶液中添加氢氧化锂的水溶液[通过将氢氧化锂(2.83g，67.54mmol)溶解在水(42.5mL)中制备]。将反应混合物在85℃下搅拌3h。将混合物在减压下浓缩以除去有机溶剂。将残留物用乙酸乙酯(100mL)稀释。将层分离，并将水层用1.0NHCl酸化，直到pH4.0。过滤沉淀的固体并干燥，得到1.4g标题产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ2.16(s，3H)，6.45(s，1H)，7.02(br s，2H)，11.74(s，1H)。
步骤3：2-氨基-5-甲基噻吩-3-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(20mL)中的氟化钾(1.1g，19.08mmol)，通过步骤2中间体(2.0g，12.72mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(3.56g，15.26mmol)反应制备标题化合物，得到3.05g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.26(s，3H)，4.62(br s，2H)，5.32(s，2H)，6.66(s，1H)，7.30-7.39(m，1H)，7.41-7.50(m，2H)，7.65(d，J＝7.2Hz，1H)。
中间体61
2-氨基-5-甲基噻吩-3-羧酸2-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001251
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(6.0mL)中的氟化钾(305mg，5.24mmol)，通过2-氨基-5-甲基噻吩-3-羧酸(550mg，3.49mmol)与2-溴-1-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]乙酮(998mg，3.49mmol)反应制备标题化合物，得到817mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.20(s，3H)，5.57(s，2H)，6.56(s，2H)，7.20(s，2H)，7.74(d，J＝9.3Hz，1H)，8.31(d，J＝6.3Hz，1H)。
中间体62
(2E)-3-(2-氯苯基)-1-[4-羟基-5-甲基-1-(丙-2-基)-1H-吡唑-3-基]丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0002350595300001261
步骤1：1-[4-羟基-5-甲基-1-(丙-2-基)-1H-吡唑-3-基]乙酮
在RT下向异丙基肼盐酸盐(1.0g，9.04mmol)在水(11mL)中的搅拌溶液中添加丙酮醛水溶液(40％，10mL，54.29mmol)，接着添加乙酸(776μL，13.57mmol)。将反应混合物在110℃下搅拌3h。将混合物冷却到RT，并用乙酸乙酯(100mL x 2)萃取。收集有机层，经无水硫酸钠干燥，并在减压下浓缩，得到715mg呈油状的标题产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.47(d，J＝6.3Hz，6H)，2.20(s，3H)，2.52(s，3H)，4.39-4.46(m，1H)，7.81(s，1H)；APCI(m/z)182(M)+。
步骤2：(2E)-3-(2-氯苯基)-1-[4-羟基-5-甲基-1-(丙-2-基)-1H-吡唑-3-基]丙-2-烯-1-酮
向步骤1中间体(360mg，1.97mmol)在乙醇(3.5mL)中的搅拌溶液中添加2-氯苯甲醛(277mg，1.97mmol)以及氢氧化钠(339mg，8.49mmol)在乙醇(3.5mL)中的溶液。将反应混合物在RT下搅拌18h。在减压下蒸发溶剂。将残留物用水(10mL)稀释，并用乙酸乙酯(50mLx2)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到340mg呈油状的标题产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.52(d，J＝6.3Hz，6H)，2.24(s，3H)，4.43-4.48(m，1H)，7.26(s，2H)，7.30-7.33(m，1H)，7.60(s，1H)，7.83-7.87(m，1H)，8.48(s，1H)。
中间体63
(2E)-3-(2-氯苯基)-1-(1-乙基-4-羟基-5-甲基-1H-吡唑-3-基)丙-2-烯-1-酮
Figure BDA0002350595300001271
在RT下向1-(1-乙基-4-羟基-5-甲基-1H-吡唑-3-基)乙酮(500mg，2.97mmol)和2-氯苯甲醛(350μL，2.97mmol)在乙醇(5.0mL)中的搅拌溶液中添加氢氧化钠(511mg，12.79mmol)在乙醇(5.0mL)中的溶液，并将混合物搅拌过夜。在减压下蒸发溶剂，并将残留物用HCl酸化，直到pH 3。将含水混合物用乙酸乙酯(50mLx2)萃取，并将有机层用水(100mLx 2)洗涤。将有机溶液在减压下浓缩，并通过硅胶柱色谱法纯化得到的残留物，得到541mg呈固体的标题产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.46(t，J＝7.5Hz，3H)，2.24(s，3H)，4.12(q，J＝7.5Hz，2H)，7.30-7.32(m，2H)，7.40-7.45(m，1H)，7.63-7.75(m，1H)，7.82-7.87(m，1H)，8.20(br s，1H)，8.35-8.40(m，1H)。
中间体64
6-(2-氯苯基)-5-甲氧基-1，3-二甲基吡喃并[2，3-c]吡唑-4(1H)-酮
Figure BDA0002350595300001272
步骤1：1-(5-羟基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-甲氧基乙酮
在RT下向2，5-二甲基-2，4-二氢-3H-吡唑-3-酮(2.6g，23.18mmol)和氢氧化钙(6.9g，92.74mmol)在无水1，4二噁烷(60mL)中的搅拌混合物中添加甲氧基乙酰氯(2.13ml，23.187mmol)。将反应混合物在100℃下搅拌18h。将混合物冷却到RT，并用1N HCl酸化，直到pH2-3。将混合物在乙酸乙酯(200mLx2)中萃取，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的固体用乙酸乙酯(10mL)和正己烷(5.0mL)结晶，得到2.2g标题产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ2.36(s，3H)，3.52(s，3H)，3.59(s，3H)，4.36(s，2H)。
步骤2：2-氯苯甲酸乙酯
在RT下向2-氯苯甲酸(6.0g，38.32mmol)在乙醇(60mL)中的搅拌溶液中添加催化量的硫酸，并将反应混合物搅拌过夜。在减压下回收溶剂，并将残留物用饱和碳酸氢钠水溶液(60mL)碱化。将混合物用乙酸乙酯(200mL x 3)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到6.4g呈油状的标题化合物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.40(t，J＝7.5Hz，3H)，4.40(q，J＝6.6Hz，2H)，7.26-7.34(m，1H)，7.42(q，J＝9.3Hz，2H)，7.81(d，J＝7.2Hz，1H)。
步骤3：1-(2-氯苯基)-3-(5-羟基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-甲氧基丙烷-1，3-二酮
在RT下向氢化钠(60％w/w，800mg，20.01mmol)在THF(10mL)中的搅拌悬浮液中添加步骤1中间体(920mg，5.00mmol)在THF(10mL)中的溶液，并将混合物在50℃下搅拌30分钟。将步骤2中间体(1.28g，7.02mmol)添加到反应混合物中，并在60℃下搅拌过夜。将混合物冷却到RT，用1N HCl酸化，直到pH 2-3，并用氯仿(100mL x 4)萃取。将有机萃取物经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过硅胶柱色谱法纯化得到的产物，得到447mg呈固体的标题化合物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ2.32(s，3H)，3.59(s，3H)，3.62(s，3H)，5.47(s，1H)，7.34-7.38(m，1H)，7.40-7.45(m，2H)，7.50(d，J＝7.8Hz，1H)。
步骤4：6-(2-氯苯基)-5-甲氧基-1，3-二甲基吡喃并[2，3-c]吡唑-4(1H)-酮
将步骤3中间体(435mg，1.35mmol)在硫酸和乙酸的混合物(5.5mL，1∶10)中的溶液在120℃下搅拌过夜。将混合物冷却到RT并用水(30mL)稀释。将产物用乙酸乙酯(50mL x 3)萃取，并将合并的有机萃取物经无水硫酸钠干燥。将溶液过滤，浓缩，并通过硅胶柱色谱法纯化得到的残留物，得到207mg呈固体的标题化合物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ2.58(s，3H)，3.77-3.82(m，6H)，7.40-7.56(m，4H)；ESI(m/z)305(M+H)+。
中间体65
6-(2-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-5-甲氧基-3-甲基吡喃并[2，3-c]吡唑-4(1H)-酮
Figure BDA0002350595300001291
步骤1：2-(4-氟苯基)-5-甲基-2，4-二氢-3H-吡唑-3-酮
按照中间体1的步骤2中所述的程序，在RT下通过乙酰乙酸乙酯(6.3g，48.40mmol)与N，N’-二异丙基乙胺(8.0mL，49.12mmol)和4-氟苯基肼(7.87g，48.40mmol)在乙醇(35mL)中反应制备标题化合物，得到4.83g呈固体的标题化合物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.08(s，3H)，5.33(s，1H)，7.24(t，J＝9.3Hz，2H)，7.69-7.72(m，2H)，11.50(br s，1H)；ESI(m/z)193(M+H)+。
步骤2：1-[1-(4-氟苯基)-5-羟基-3-甲基-1H-吡唑-4-基]-2-甲氧基乙酮
按照中间体64的步骤1中所述的程序，通过步骤1中间体(4.3g，22.37mmol)与甲氧基乙酰氯(2.0mL)在无水1，4二噁烷(60mL)中在氢氧化钙(6.63g，89.49mmol)存在下反应制备标题化合物，得到3.8g呈固体的所需产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ2.44(s，3H)，3.55(s，3H)，4.43(s，3H)，7.14(t，J＝8.7Hz，2H)，7.74-7.78(m，2H)。
步骤3：1-(2-氯苯基)-3-[1-(4-氟苯基)-5-羟基-3-甲基-1H-吡唑-4-基]-2-甲氧基丙烷-1，3-二酮
在RT下向氢化钠(60％w/w，1.21g，50.42mmol)在THF(38mL)中的搅拌悬浮液中添加步骤2中间体(2.0g，7.56mmol)在THF(10mL)中的溶液，并将反应混合物在50℃下搅拌30分钟。将2-氯苯甲酸乙酯(1.94g，10.54mmol)添加到混合物中，并将反应物在60℃下搅拌过夜。将反应混合物冷却到RT，用1NHCl酸化，直到pH 2-3，并用乙酸乙酯(150mL x 3)萃取。将有机萃取物由无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过硅胶柱色谱法纯化得到的残留物，得到1.44g呈固体的标题化合物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ2.54(s，3H)，3.64(s，3H)，7.14(t，J＝8.7Hz，2H)，7.35-7.58(m，4H)，7.72-7.78(m，2H)，15.26(br s，1H)；ESI(m/z)401(M-H)-。
步骤４：6-(2-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-5-甲氧基-3-甲基吡喃并[2，3-c]吡唑-4(1H)-酮
在RT下向步骤3中间体(1.4g，3.47mmol)中添加硫酸和乙酸的混合物(14mL，1∶10)。将反应混合物在120℃下搅拌过夜。将混合物用水(100mL)稀释，并用乙酸乙酯(250mLx 3)萃取。将有机萃取物经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到278mg呈固体的标题产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ2.67(s，3H)，3.80(s，3H)，7.15(t，J＝8.7Hz，2H)，7.40-7.58(m，4H)，7.78-7.81(m，2H)；ESI(m/z)385(M)+。
中间体66
5-氨基-2-甲基-1，3-噻唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001301
步骤1：2-乙酰氨基-2-氰基乙酸乙酯
向氰基乙醛酸乙酯-2-肟(10g，70.37mmol)在冰乙酸(50mL)中的搅拌溶液中添加乙酸酐(18mL，190mmol)，接着添加锌粉(14.8g，225.8mmol)，并将反应混合物在RT下搅拌2h。将混合物在减压下浓缩，用碳酸氢钠饱和溶液中和，并用乙酸乙酯(100mL x 3)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，并在减压下浓缩。将得到的残留物与己烷一起搅拌并过滤，得到2.3g呈固体的标题产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.21(t，J＝6.9Hz，3H)，1.92(s，3H)，4.19(q，J＝7.2Hz，2H)，5.71(d，J＝7.2Hz，1H)，9.18(d，J＝7.2Hz，1H)；APCI(m/z)171(M+H)+。
步骤2：5-氨基-2-甲基-1，3-噻唑-4-羧酸乙酯
在RT下将劳森试剂(2.85g，7.05mmol)添加到步骤1中间体(2.0g，11.75mmol)在无水甲苯(25mL)中的搅拌溶液中，并将混合物加热到120℃过夜。将混合物冷却到RT并在减压下浓缩。通过快速硅胶柱色谱法纯化得到的残留物，得到1.01g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.24(t，J＝7.2Hz，3H)，2.38(s，3H)，4.18(q，J＝7.2Hz，2H)，7.19(brs，2H)；APCI(m/z)187(M+H)+。
步骤3：5-氨基-2-甲基-1，3-噻唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在乙醇(18mL)中的氢氧化钾的水溶液(2.0M，6.4mL，8.05mmol)，通过步骤2中间体(1.0g，5.36mmol)的酯水解制备标题化合物，得到532mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.38(s，3H)，7.14(brs，2H)；APCI(m/z)159(M+H)+。
步骤4：5-氨基-2-甲基-1，3-噻唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(3.0mL)中的氟化钾(275mg，4.74mmol)，通过步骤3中间体(500mg，3.16mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(885mg，3.79mmol)反应制备标题化合物，得到483mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.39(s，3H)，5.35(s，2H)，7.31(s，2H)，7.49-7.59(m，3H)，7.78(t，J＝9.3Hz，1H)；APCI(m/z)311(M+H)+。
中间体67
5-氨基-2-(三氟甲基)-1，3-噻唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001321
步骤1：氨基(氰基)乙酸乙酯
在RT下向氰基乙醛酸乙酯-2-肟(10g，70.37mmol)在水(60mL)中的悬浮液中添加饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)，接着添加连二硫酸钠(34.30g，97.01mmol)，并将混合物搅拌30分钟。将混合物用氯仿(200mL x 3)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，并在减压下浓缩，得到3.85g呈油状的标题产物。将得到的产物立即用于下一步。
步骤2：氰基[(三氟乙酰基)氨基]乙酸乙酯
在RT下向步骤1中间体(3.75g，29.26mmol)在无水THF(38mL)中的搅拌溶液中滴加无水吡啶(4.71mL，58.52mmol)和三氟乙酸酐(4.3mL，30.73mmol)。将混合物在RT下搅拌过夜。使用饱和碳酸氢钠水溶液将混合物碱化，并用乙酸乙酯(2 x 300mL)萃取。将有机层用盐水(200mL)洗涤并经无水硫酸钠干燥。将混合物在减压下浓缩，得到4.01g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.22(t，J＝7.2Hz，3H)，4.25(q，J＝7.5Hz，2H)，6.10(d，J＝7.2Hz，1H)，10.99(d，J＝6.9Hz，1H)。
步骤3：5-氨基-2-(三氟甲基)-1，3-噻唑-4-羧酸乙酯
在RT下向步骤2中间体(4.9g，21.87mmol)在甲苯(60mL)中的搅拌溶液中添加劳森试剂(5.30g，13.12mmol)，并将混合物加热到120℃过夜。将混合物冷却到RT并在减压下浓缩。通过快速硅胶柱色谱法纯化残留物，得到1.20g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.28(t，J＝7.2Hz，3H)，4.26(q，J＝7.5Hz，2H)，7.89(s，2H)。
步骤4：5-氨基-2-(三氟甲基)-1，3-噻唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在乙醇(16mL)中的氢氧化钾的水溶液(2.0M，5.7mL，7.18mmol)，通过步骤3中间体(1.15g，4.79mmol)的酯水解制备标题化合物，得到630mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.39(br s，2H)，7.81(br s，1H)。
步骤5：5-氨基-2-(三氟甲基)-1，3-噻唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(6.0mL)中的氟化钾(255mg，4.38mmol)，通过步骤4中间体(620mg，2.92mmol)与2-溴-1-(3-氯苯基)乙酮(820mg，3.50mmol)反应制备标题化合物，得到470mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ5.48(s，2H)，7.45-7.56(m，1H)，7.61(d，J＝4.5Hz，2H)，7.84(d，J＝7.8Hz，1H)，8.02(s，2H)。
中间体68
5-氨基-3-甲基-1，2-噁唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001331
步骤1：5-氨基-3-甲基-1，2-噁唑-4-羧酸
在RT下向5-氨基-3-甲基-1，2-噁唑-4-羧酸乙酯(1.66g，9.76mmol)在乙醇(30mL)中的搅拌溶液中添加1.25M氢氧化钾水溶液(8mL，14.64mmol)。将混合物在90℃下搅拌过夜。在减压下回收有机溶剂，并将残留物用1NHCl酸化，直到pH-2。过滤沉淀的固体，用水(100mL)洗涤，并在真空下干燥，得到850mg呈固体的标题化合物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.16(s，3H)，7.58(br s，2H)；APCI(m/z)143(M+H)+。
步骤2：5-氨基-3-甲基-1，2-噁唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
在RT下向步骤1中间体(840mg，5.91mmol)在DMF(9.0mL)中的充分搅拌的溶液中添加氟化钾(516mg，8.86mmol)和2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(1.66g，7.09mmol)。将混合物在相同温度下搅拌过夜。用饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)淬灭反应。过滤沉淀的固体，用水(50mL)洗涤并在真空下干燥，得到1.35g呈固体的标题化合物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.17(s，3H)，5.33(s，2H)，7.51-7.60(m，3H)，7.78(d，J＝7.2Hz，1H)，7.85-7.88(m，2H)；APCI(m/z)295(M+H)+。
中间体69
5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-[2-氯-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基]-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001341
在RT下向中间体9(250mg，1.61mmol)在无水DMF(3ml)中的步骤3的搅拌溶液中添加2-溴-1-[2-氯-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基]乙酮(490mg，1.61mmol)，接着添加氟化钾(140mg，2.42mmol)，并将反应混合物在RT下搅拌过夜。将反应混合物用乙酸乙酯(30mL)稀释，并用水(75mL)淬灭。将混合物用乙酸乙酯(3 x 100mL)萃取。将有机层用水(2 x 100mL)洗涤，并经无水硫酸钠干燥。在真空下蒸馏出溶剂，并通过快速硅胶柱色谱法纯化残留物，得到360mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.14(s，3H)，3.30(s，3H)，3.46(s，3H)，3.66(t，J＝4.5Hz，2H)，4.21(t，J＝4.8Hz，2H)，5.29(s，2H)，6.24(s，2H)，7.05(d，J＝8.1Hz，1H)，7.16(s，1H)，7.84(d，J＝9.0Hz，1H)；APCI(m/z)380(M-H)-。
中间体70
5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-[2-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基]-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001351
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在DMF(8.0mL)中的氟化钾(333mg，5.73mmol)，通过5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸(800mg，3.82mmol)与2-溴-1-[2-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基]乙酮(1.11g，3.82mmol)反应制备标题化合物，得到1.18g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.32(s，3H)，3.66-3.70(m，5H)，4.23(t，J＝4.5Hz，2H)，5.33(s，2H)，6.71(s，2H)，6.93-7.06(m，2H)，7.86(t，J＝7.6Hz，1H)。
中间体71
5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001352
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(6.0mL)中的氟化钾(336mg，5.79mmol)，通过5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸(600mg，3.86mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟-4-甲氧基苯基)乙酮(1.02g，3.86mmol)反应制备标题中间体，得到579mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.13(s，3H)，3.46(s，3H)，3.85(s，3H)，5.14(s，2H)，6.25(s，2H)，6.90(d，J＝8.4Hz，2H)。
中间体72
5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001361
在RT下向5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(500mg，2.95mmol)在无水DMF(5.0ml)中的搅拌溶液中添加2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(693mg，2.95mmol)和氟化钾(257mg，4.42mmol)。将混合物在RT下搅拌过夜。将反应混合物用水(75mL)淬灭，并用乙酸乙酯(3x100mL)萃取。将有机层用水(2 x 100mL)洗涤，并经无水硫酸钠干燥。在真空下蒸馏出溶剂，并通过快速硅胶柱色谱法纯化得到的残留物，得到912mg呈固体的所需产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.17(t，J＝4.8Hz，3H)，2.10(s，3H)，3.82(q，J＝6.9Hz，2H)，5.17(s，2H)，6.25(s，2H)，7.24(t，J＝8.4Hz，2H)，7.62-7.69(m，1H)；APCI(m/z)322(M-H)-。
中间体73
5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氟-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001362
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(6.0mL)中的氟化钾(309mg，5.31mmol)，通过5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(600mg，3.54mmol)与2-溴-1-(2-氟-4-甲氧基苯基)乙酮(875mg，3.54mmol)反应制备标题化合物，得到630mg呈固体的产物。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.20(t，J＝4.5Hz，3H)，2.18(s，3H)，3.81-3.89(m，5H)，5.29(s，2H)，6.28(s，2H)，6.93-7.05(m，2H)，7.86(t，J＝8.1Hz，1H)。
中间体74
5-氨基-3-甲基-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氟-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001371
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(13mL)中的氟化钾(507mg，8.73mmol)，通过5-氨基-3-甲基-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-羧酸(1.3g，5.82mmol)与2-溴-1-(2-氟-4-甲氧基苯基)乙酮(1.43g，5.82mmol)反应制备标题化合物，得到910mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.19(s，3H)，3.87(s，3H)，4.81-4.89(m，2H)，5.31(s，2H)，6.69(s，2H)，6.94-7.04(m，2H)，7.85-7.89(m，1H)；APCI(m/z)388(M-H)-。
中间体75
5-氨基-3-乙基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001372
步骤1：5-氨基-3-乙基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
在RT下向(2Z)-2-氰基-3-乙氧基戊-2-烯酸乙酯(3.8g，19.3mmol)在乙醇(38mL)中的搅拌溶液中添加硫酸甲肼(2.8g，19.3mmol)，接着添加N，N-二异丙基乙胺(6.6mL，38.6mmol)。将混合物在90℃下搅拌过夜。在减压下蒸发乙醇，并将残留物用饱和碳酸氢钠水溶液(40mL)碱化。将含水混合物用乙酸乙酯(75mL x 2)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，并在减压下浓缩。通过硅胶柱色谱法纯化得到的残留物，得到1.68g呈固体的产物。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.09(t，J＝4.5Hz，3H)，1.24(t，J＝4.8Hz，3H)，2.57(q，J＝7.2Hz，2H)，3.45(s，3H)，4.15(q，J＝6.9Hz，2H)，6.14(s，2H)。
步骤2：5-氨基-3-乙基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在乙醇(17mL)中的氢氧化钾的水溶液(2.0M，6mL，16.73mmol)，通过步骤2中间体(1.65g，8.36mmol)的酯水解制备标题化合物，得到3.1g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.06(t，J＝7.2Hz，3H)，2.30(q，J＝7.5Hz，2H)，3.40(s，3H)，4.99(s，2H)，5.07(s，1H)。
步骤3：5-氨基-3-乙基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(525mg，8.87mmol)，通过步骤2中间体(1.0g，5.91mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(1.39g，5.91mmol)反应制备标题化合物，得到840mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.06(t，J＝6.6Hz，3H)，2.53(q，J＝6.6Hz，2H)，3.46(s，3H)，5.18(s，2H)，6.25(s，2H)，7.25(t，J＝8.1Hz，2H)，7.63-7.68(m，1H)。
中间体76
5-氨基-3-乙基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氟-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001381
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(15mL)中的氟化钾(775mg，13.30mmol)，通过5-氨基-3-乙基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(1.5g，8.87mmol)与2-溴-1-(2-氟-4-甲氧基苯基)乙酮(2.2g，8.87mmol)反应制备标题化合物，得到1.7g呈固体的产物。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.11(t，J＝6.6Hz，3H)，2.60(q，J＝6.6Hz，2H)，3.48(s，3H)，3.87(s，3H)，5.29(s，2H)，6.27(s，2H)，6.92-7.03(m，2H)，7.87(t，J＝8.1Hz，1H)；ESI(m/z)336(M+H)+。
中间体77
5-氨基-3-乙基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001391
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(7.0mL)中的氟化钾(360mg，6.21mmol)，通过5-氨基-3-乙基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(700mg，4.14mmol)与2-溴-1-(2-氯-4-甲氧基苯基)乙酮(1.1g，4.14mmol)反应制备标题化合物，得到900mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.07(t，J＝6.6Hz，3H)，2.55(q，J＝6.6Hz，2H)，3.46(s，3H)，3.83(s，3H)，5.30(s，2H)，6.24(s，2H)，6.99-7.04(m，2H)，7.83(d，J＝8.1Hz，1H)；ESI(m/z)352(M)+。
中间体78
5-氨基-3-甲基-1-(丙-2-基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001392
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(8.0mL)中的氟化钾(380mg，6.54mmol)，通过5-氨基-3-甲基-1-(丙-2-基)-1H-吡唑-4-羧酸(800mg，4.36mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(1.02g，4.36mmol)反应制备标题化合物，得到252mg呈固体的产物。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.27(d，J＝6.3Hz，6H)，2.13(s，3H)，4.36-4.42(m，1H)，5.19(s，2H)，6.28(s，2H)，7.23-7.30(m，2H)，7.63-7.70(m，1H)。
中间体79
3-氨基-5-异丙基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001401
步骤1：(2Z)-2-氰基-3-羟基-4-甲基戊-2-烯酸乙酯
在0℃下向氢化钠(60％w/w，3.75g，93.84mmol)在无水THF(78mL)中的悬浮液中添加氰基乙酸乙酯(5mL，46.92mmol)。将反应混合物在RT下搅拌1h。将反应混合物冷却到0℃，并向其中添加异丁酰氯(5.0g，46.92mmol)。将反应混合物在RT下搅拌18h。将混合物用2N硫酸淬灭，并用乙酸乙酯(250mL x 3)萃取。将有机萃取物由无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过硅胶柱色谱法纯化得到的产物，得到8.9g呈油状的标题化合物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.24(d，J＝6.6Hz，6H)，1.37(t，J＝6.6Hz，3H)，3.08-3.17(m，1H)，4.34(q，J＝6.6Hz，2H)，13.78(s，1H)。
步骤2：(2Z)-3-氯-2-氰基-4-甲基戊-2-烯酸乙酯
在RT下向步骤1中间体(8.9g，48.58mmol)在二氯甲烷(90mL)中反应的搅拌溶液中添加氧氯化磷(4.8mL，53.43mmol)和三乙胺(10.15mL，72.87mmol)。将反应混合物加热到50℃，并在50℃下搅拌18h。将反应混合物冷却到RT，并用饱和碳酸氢钠溶液(200mL)淬灭。将层分离，并将水层用二氯甲烷(3x250mL)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。通过硅胶柱色谱法纯化得到的产物，得到4.1g呈油状的标题产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.25(d，J＝6.6Hz，6H)，1.38(t，J＝6.6Hz，3H)，3.08-3.16(m，1H)，4.34(q，J＝6.6Hz，2H)。
步骤3：3-氨基-5-异丙基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
将步骤2中间体(4g，19.83mmol)和甲肼(913μL，19.83mmol)在10％NaOH(40ml)中的混合物在RT下搅拌过夜。将反应混合物用冰冷却，用1N HCl酸化，并通过过滤收集得到的固体，得到1.3产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.27(d，J＝6.0Hz，6H)，3.10-3.19(m，1H)，3.60(s，3H)，11.11(br s，1H)；APCI(m/z)184(M+H)+。
步骤４：3-氨基-5-异丙基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(6.0mL)中的氟化钾(285mg，4.91mmol)，通过步骤3中间体(600mg，3.27mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(761mg，3.27mmol)反应制备标题化合物，得到545mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.27(d，J＝6.2Hz，6H)，3.11-3.23(m，1H)，3.63(s，3H)，5.40(s，2H)，7.45-7.52(m，1H)，7.57(s，2H)，7.76(d，J＝7.2Hz，1H)；ESI(m/z)335(M)+。
中间体80
5-氨基-1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001411
步骤1：5-氨基-1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
在RT下向(2Z)-2-氰基-3-乙氧基丁-2-烯酸乙酯(5.0g，27.3mmol)在乙醇(50mL)中的搅拌溶液中添加苄基肼二盐酸盐(5.3g，27.3mmol)，接着添加N，N-二异丙基乙胺(14mL，81.9mmol)。将反应混合物在90℃下搅拌过夜。通过蒸发除去乙醇，并将得到的残留物用饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)碱化。将含水混合物用乙酸乙酯(100mL x 2)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，并在减压下浓缩。通过硅胶柱色谱法纯化得到的残留物，得到4.45g呈固体的标题产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.25(t，J＝6.6Hz，3H)，2.16(s，3H)，4.16(q，J＝6.6Hz，2H)，5.09(s，2H)，6.32(s，2H)，7.14(d，J＝8.1Hz，2H)，7.23-7.35(m，3H)。
步骤2：5-氨基-1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用氢氧化钾的水溶液(2.0M，20mL，33.96mmol)，通过步骤1中间体(4.4g，16.9mmol)的酯水解制备标题中间体，得到3.3g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.15(s，3H)，5.07(s，2H)，6.30(s，2H)，7.15(d，J＝7.8Hz，2H)，7.23-7.36(m，3H)，11.77(br s，1H)；ESI(m/z)232(M+H)+。
步骤3：5-氨基-1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(380mg，6.48mmol)，通过步骤2中间体(1.0g，4.32mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(1.05g，4.32mmol)反应制备标题化合物，得到1.45g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.13(s，3H)，5.10(s，2H)，5.20(s，2H)，6.45(s，2H)，7.14(d，J＝8.1Hz，2H)，7.22-7.35(m，5H)，7.64-7.69(m，1H)；ESI(m/z)386(M+H)+。
中间体81
5-氨基-1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氟-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001431
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(380mg，6.48mmol)，通过5-氨基-1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(1.0g，4.32mmol)与2-溴-1-(2-氟-4-甲氧基苯基)乙酮(1.07g，4.32mmol)反应制备标题化合物，得到1.4g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.19(s，3H)，3.87(s，3H)，5.11(s，2H)，5.30(s，2H)，6.46(s，2H)，6.94-7.04(m，2H)，7.17(d，J＝8.7Hz，2H)，7.25-7.37(m，3H)，7.87(t，J＝8.7Hz，1H)；ESI(m/z)398(M)+。
中间体82
4-氨基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1，2-噻唑-5-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001432
步骤1：(2E)-2-氰基-N-环丙基-2-(羟基亚氨基)乙酰胺
在5-10℃下向亚硝酸钠(6.94g，100.6mmol)在水(70mL)中的溶液中滴加2-氰基-N-环丙基乙酰胺(5.0g，40.27mmol)在乙酸(10mL)中的搅拌溶液。将反应物在10℃下搅拌8h，然后在RT下过夜。过滤沉淀的固体并充分干燥，得到1.53g标题产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.56-0.68(m，4H)，2.71-2.75(m，1H)，8.59(s，1H)，14.64(brs，1H)。
步骤2：(2E)-2-氰基-N-环丙基-2-({[(4-甲基苯基)磺酰基]氧基}亚氨基乙酰胺
在5℃下向步骤1中间体(1.5g，9.79mmol)在吡啶(4.0mL)中的搅拌溶液中分次添加甲苯磺酰氯(2.01g，10.57mmol)，并将所得混合物在RT下搅拌过夜。将乙醇(15mL)添加到上述混合物中，过滤沉淀的固体并充分干燥，得到1.69g呈固体的所需产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.60-0.72(m，4H)，2.44(s，3H)，2.70-2.75(m，1H)，7.54(d，J＝8.7Hz，2H)，7.99(d，J＝8.7Hz，2H)，8.98(s，1H)。
步骤3：4-氨基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1，2-噻唑-5-羧酸乙酯
在0℃下向步骤2中间体(700mg，2.27mmol)和2-巯基乙酸乙酯(300μL，2.73mmol)在乙醇(3.0mL)中的搅拌溶液中添加吗啉(300μL，3.41mmol)。将所得混合物搅拌30分钟。将混合物用水(10mL)稀释，并用乙酸乙酯(150mL x 4)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，并在减压下浓缩。通过硅胶柱色谱法纯化残留物，得到678mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ0.66(q，J＝6.0Hz，2H)，0.85(q，J＝6.0Hz，2H)，1.34(t，J＝6.8Hz，3H)，2.81-2.88(m，1H)，4.34(q，J＝7.2Hz，2H)，7.26(s，2H)；ESI(m/z)256(M+H)+。
步骤4：4-氨基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1，2-噻唑-5-羧酸
向步骤3中间体(650mg，2.54mmol)在乙醇(2.5mL)中的搅拌溶液中添加在水(2.5mL)中的氢氧化钾溶液(213mg，3.81mmol)。将所得混合物回流3h。将混合物在减压下浓缩，冷却到0℃，并用1N HCl酸化，直到pH 2。过滤沉淀的固体并充分干燥，得到462mg呈固体的标题产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.61-0.67(m，4H)，2.79-2.83(m，1H)，3.61(br s，2H)，7.59-7.64(m，1H)，8.77(s，1H)；ESI(m/z)226(M-H)-。
步骤5：4-氨基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1，2-噻唑-5-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(5.0mL)中的氟化钾(172mg，2.97mmol)，通过步骤4中间体(450mg，1.98mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(552mg，2.37mmol)反应制备标题化合物，得到565mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ0.67(q，J＝6.0Hz，2H)，0.85(q，J＝6.0Hz，2H)，2.81-2.86(m，1H)，5.41(s，2H)，6.74(br s，2H)，7.26(s，1H)，7.36-7.46(m，2H)，7.66(t，J＝8.7Hz，1H)；ESI(m/z)380(M+H)+。
中间体83
5-氨基-3-甲基-1-丙基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001451
步骤1：5-氨基-3-甲基-1-丙基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在乙醇(30mL)中的N，N’-DIPEA(5.5mL，31.2mmol)，通过(2E)-2-氰基-3-乙氧基丁-2-烯酸乙酯(2.85g，15.6mmol)与丙基肼(1.38g，18.68mmol)反应制备标题化合物，得到3.15g呈油状的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ0.94(t，J＝7.2Hz，3H)，1.32(t，J＝6.9Hz，3H)，1.82(q，J＝7.2Hz，2H)，2.36(s，3H)，3.82(t，J＝8.4Hz，2H)，4.27(q，J＝7.5Hz，2H)，5.15(br s，2H)；ESI(m/z)212(M+H)+。
步骤2：5-氨基-3-甲基-1-丙基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用氢氧化钾的水溶液(2.0M，20mL，29.44mmol)，通过步骤1中间体(3.1g，14.7mmol)的酯水解制备标题中间体，得到1.25g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.81(t，J＝7.2Hz，3H)，1.63(q，J＝6.9Hz，2H)，2.13(s，3H)，3.73(t，J＝7.2Hz，2H)，6.12(br s，2H)。
步骤3：5-氨基-3-甲基-1-丙基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(12mL)中的氟化钾(570mg，9.80mmol)，通过步骤2中间体(1.2g，6.55mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(1.85g，7.85mmol)反应制备标题化合物，得到1.75g呈油状的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.82(t，J＝7.2Hz，3H)，1.63(q，J＝6.9Hz，2H)，2.12(s，3H)，3.76(t，J＝7.2Hz，2H)，5.19(s，2H)，6.28(br s，2H)，7.26(t，J＝8.4Hz，2H)，7.62-7.68(m，1H)；ESI(m/z)338(M+H)+。
中间体84
5-氨基-1-[2-(二甲基氨基)乙基]-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001461
步骤1：5-氨基-1-[2-(二甲基氨基)乙基]-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体1的步骤2中所述的程序，使用在无水乙醇(70mL)中的N，N-二异丙基乙胺(13mL，76.41mmol)，通过(2E)-2-氰基-3-乙氧基丁-2-烯酸乙酯(7.0g，38.20mmol)与2-肼基-N，N-二甲基乙胺(4.73g，45.85mmol)反应制备标题化合物，得到7.0g呈油状的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.34(t，J＝6.9Hz，3H)，2.31(s，3H)，2.39(s，6H)，2.81(br s，2H)，4.11(br s，2H)，4.26(q，J＝7.5Hz，2H)，6.34(s，2H)；ESI(m/z)241(M+H)+。
步骤2：5-氨基-1-[2-(二甲基氨基)乙基]-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用氢氧化钾的水溶液(2.0M，5mL，9.82mmol)，通过步骤1中间体(1.2g，4.91mmol)的酯水解制备标题中间体，得到1.04g呈液体的产物。该中间体不经任何进一步的纯化及表征原样用于下一步。
步骤3：5-氨基-1-[2-(二甲基氨基)乙基]-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(12mL)中的氟化钾(820mg，14.12mmol)，通过步骤2中间体(1.2g，5.65mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(1.3g，5.65mmol)反应制备标题化合物，得到890mg呈浓稠液体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ2.28(s，3H)，2.44(s，6H)，2.86-2.97(m，2H)，4.17(br s，2H)，5.32(s，2H)，6.46(brs，2H)，7.37-7.39(m，1H)，7.42-7.48(m，2H)，7.64(d，J＝7.8Hz，1H。
中间体85
5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，5-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001471
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(7.0mL)中的氟化钾(360mg，6.20mmol)，通过5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(700mg，4.13mmol)与2-溴-1-(2，5-二氟苯基)乙酮(972mg，4.13mmol)反应制备标题化合物，得到660mg呈固体的产物。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.20(t，J＝6.9Hz，3H)，2.18(s，3H)，3.85(q，J＝7.2Hz，2H)，5.34(s，2H)，6.28(s，2H)，7.48-7.54(m，1H)，7.61-7.68(m，2H)；APCI(m/z)322(M-H)-。
中间体86
5-氨基-3-甲基-1-丙基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氟-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001481
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(480mg，8.19mmol)，通过5-氨基-3-甲基-1-丙基-1H-吡唑-4-羧酸(1.0g，5.46mmol)与2-溴-1-(2-氟-4-甲氧基苯基)乙酮(1.62g，6.55mmol)反应制备标题化合物，得到1.75g呈固体的产物。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.84(t，J＝7.2Hz，3H)，1.65(q，J＝7.2Hz，2H)，2.18(s，3H)，3.77(t，J＝6.9Hz，2H)，3.87(s，3H)，5.29(s，2H)，6.28(s，2H)，6.93-7.05(m，2H)，7.86(t，J＝8.7Hz，1H)。APCI(m/z)350(M+H)+。
中间体87
4-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-5-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001482
步骤1：1，3-二甲基-1H-吡唑-5-羧酸乙酯
在0℃下持续1h向2，4-二氧代戊酸乙酯(5.0g，31.61mmol)在二氯甲烷(50mL)中的搅拌溶液中滴加甲肼(85％，1.45g，31.61mmol)。将反应混合物在RT下搅拌24h并再回流24h。将混合物浓缩，用水(50mL)稀释，并用乙酸乙酯(250mL x 3)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，并在减压下浓缩，得到5.3g呈油状的产物。将产物不经任何纯化及表征原样用于下一步。
步骤2：1，3-二甲基-1H-吡唑-5-羧酸
将步骤1中间体(5.3g，31.52mmol)在氢氧化钠水溶液(5％，32mL)中的悬浮液回流4h。将反应混合物冷却到0℃，并用浓HCl酸化，直到pH2-3。过滤沉淀的固体并充分干燥，得到3.67g所需产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ3.87(s，3H)，4.13(s，3H)，6.61(s，1H)，6.71(s，1H)。
步骤3：1，3-二甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-羧酸
在-5℃下向步骤2中间体(3.6g，25.68mmol)在浓硫酸(26mL)中的搅拌溶液中添加浓硝酸(2.3mL)。将混合物在0℃下搅拌15分钟，并在RT下搅拌30分钟。将混合物在80℃下加热4h。将混合物冷却到RT，并用冰冷的水(30mL)淬灭。过滤沉淀的固体并充分干燥，得到3.2g混合产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ2.57(s，3H)，4.18(s，3H)，7.07(br s，1H)。
步骤４：1，3-二甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(12mL)中的氟化钾(564mg，9.72mmol)，通过步骤3中得到的混合物中间体(1.2g，6.48mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(1.8g，7.77mmol)反应制备标题化合物，得到4.19g固体混合产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ2.52(s，3H)，4.08(s，3H)，5.57(s，2H)，7.40-7.45(m，1H)，7.49(s，1H)，7.73(d，J＝7.8Hz，1H)。
步骤5：4-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-5-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
向步骤4中间体(2.5g，7.40mmol)在乙酸乙酯(25mL)中的搅拌溶液中添加钯/碳(10％，250mg)，并将混合物在氢气氛下搅拌24h。将混合物过滤，浓缩滤液并通过硅胶柱色谱法纯化，得到569mg呈固体的标题产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ2.20(s，3H)，3.98(s，3H)，5.48(s，2H)，7.34-7.40(m，2H)，7.46(d，J＝3.3Hz，3H)，7.68(d，J＝7.5Hz，1H)；APCI(m/z)308(M+H)+。
中间体88
5-氨基-1-(4-氟苄基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001501
步骤1：5-氨基-1-(4-氟苄基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体1的步骤2中所述的程序，使用在无水乙醇(20mL)中的N，N-二异丙基乙胺(3.1mL，18.03mmol)，通过(2Z)-2-氰基-3-乙氧基丁-2-烯酸乙酯(1.65g，9.01mmol)与(4-氟苄基)肼(1.5g，10.8mmol)反应制备标题化合物，得到2.40g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.34(t，J＝6.9Hz，3H)，2.36(s，3H)，4.26(q，J＝6.9Hz，2H)，4.89(s，2H)，5.06(s，2H)，7.00-7.13(m，2H)，7.15-7.27(m，2H)。
步骤2：5-氨基-1-(4-氟苄基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用氢氧化钾的水溶液(2.0M，5mL，19.94mmol)和乙醇(15mL)，通过步骤1中间体(2.35g，8.47mmol)的酯水解制备标题中间体，得到1.5g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.12(s，3H)，5.04(s，2H)，6.29(s，2H)，7.08-7.22(m，4H)，11.65(br s，1H)；ESI(m/z)278(M+H)+。
步骤3：5-氨基-1-(4-氟苄基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(350mg，6.01mmol)，通过步骤2中间体(1.0g，4.01mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(1.15g，4.81mmol)反应制备标题化合物，得到1.45g呈油状的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.34(s，3H)，5.08(s，4H)，5.20(s，2H)，6.95-7.08(m，4H)，7.14-7.27(m，2H)，7.43-7.48(m，1H)；ESI(m/z)404(M+H)+。
中间体89
5-氨基-3-(二氟甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001511
步骤1：(Z)-3-氰基-4-乙氧基-1，1-二氟-4-氧代丁-2-烯-2-醇酸钠
在RT下向钠(2.85g，124.01mmol)在乙醇(26mL)中的搅拌溶液中缓慢添加氰基乙酸乙酯(12.6mL，118.11mmol)，并将反应混合物在RT下搅拌1h。在RT下向此混合物中添加二氟乙酸甲酯(13.0g，118.11mmol)，并将反应混合物再搅拌3h。在减压下浓缩反应混合物，并将得到的残留物与己烷(75mL)一起研磨。在真空下蒸发溶剂，得到25.3g呈油状的标题产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.14(t，J＝6.9Hz，3H)，3.96(q，J＝6.9Hz，2H)，6.83(t，J＝55Hz，1H)。
步骤2：5-氨基-3-(二氟甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
在RT下向步骤1中间体(25.0g，117.30mmol)在碳酸二甲酯(25mL)中的搅拌溶液中添加硫酸甲肼(33.8g，234.62mmol)、分子筛(25g)和三氟乙酸(9.0mL，117.3mmol)。将反应混合物回流过夜。将混合物冷却到RT并过滤。在减压下浓缩滤液，得到8.1g呈固体的标题产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.23(t，J＝7.2Hz，3H)，3.58(s，3H)，4.21(q，J＝6.9Hz，2H)，6.47(br s，2H)，6.96(t，J＝54Hz，1H)。
步骤3：5-氨基-3-(二氟甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在乙醇(120mL)中的氢氧化钾的水溶液(2.0M，43mL，54.79mmol)，通过步骤2中间体(8.0g，36.52mmol)的酯水解制备标题化合物，得到4.3g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.56(s，3H)，6.36(s，2H)，6.96(t，J＝55Hz，1H)，12.40(s，1H)。
步骤4：4-氨基-1-(二氟甲基)-3-甲基-1H-吡唑-5-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(20mL)中的氟化钾(912mg，15.70mmol)，通过步骤3中间体(2g，10.47mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(2.4g，10.47mmol)反应制备标题化合物，得到3.31g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.60(s，3H)，5.37(s，2H)，6.55(s，2H)，6.97(t，J＝54Hz，1H)，7.48-7.60(m，3H)，7.80(d，J＝8.0Hz，1H)。
中间体90
5-氨基-3-(二氟甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001521
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(12mL)中的氟化钾(547mg，9.42mmol)，通过5-氨基-3-(二氟甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(1.2g，6.28mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(1.47g，6.28mmol)反应制备标题化合物，得到1.41g呈固体的产物。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.59(s，3H)，5.25(s，2H)，6.57(s，2H)，6.96(s，1H)，7.23-7.30(m，2H)，7.63-7.73(m，1H)；APCI(m/z)344(M-H)-。
中间体91
5-氨基-3-甲基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001531
步骤1：5-氨基-3-甲基-1-[2-(吗啉-4-基)乙基]-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(185mL)中的N，N-二异丙基乙胺(34.8mL，0.20mmol)，通过(2E)-2-氰基-3-乙氧基丁-2-烯酸乙酯(18.5g，0.10mmol)与4-(2-肼基乙基)吗啉(17.58g，0.12mmol)反应制备标题化合物，得到22.2g呈液体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.24(t，J＝7.2Hz，3H)，2.14(s，3H)，2.40-2.48(m，4H)，2.57(t，J＝6.9Hz，3H)，3.50-3.63(m，4H)，3.92(t，J＝6.3Hz，2H)，4.15(q，J＝7.2Hz，2H)，6.25(s，2H)；ESI(m/z)283(M+H)+。
步骤2：5-氨基-3-甲基-1-[2-(吗啉-4-基)乙基]-1H-吡唑-4-羧酸
在RT下向步骤1中间体(22g，0.07mmol)在乙醇(155ml)中的溶液中添加氢氧化钾的水溶液(2.0M，77mL，0.311mmol)，并将混合物加热至回流过夜，再添加氢氧化钾的水溶液(2.0M，77mL，0.311mmol)，并在回流温度下继续再反应24h。将溶剂完全蒸发，在冰浴中冷却，用2N柠檬酸进行酸化(PH 6-7)，用乙酸乙酯(3x 300mL)萃取并蒸发溶剂，得到13.1g粘性呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.11(s，3H)，2.37-2.48(m，4H)，2.55(t，J＝6.3Hz，2H)，3.89(t，J＝6.6Hz，2H)，6.20(s，2H)，11.89(br s，1H)。
步骤3：5-氨基-3-甲基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(130mL)中的氟化钾(4.46g，0.076mmol)，通过步骤2中间体(13g，0.051mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(13.14g，0.056mmol)反应制备标题化合物，得到15.1g呈浓稠液体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.13(s，3H)，2.37-2.48(m，4H)，2.58(t，J＝6.3Hz，2H)，3.48-3.61(m，4H)，3.94(t，J＝6.3Hz，2H)，5.30(s，2H)，6.37(s，2H)，7.46-7.54(m，1H)，7.58(d，J＝3.9Hz，1H)，7.77(d，J＝7.8Hz，1H)；ESI(m/z)407(M+H)+。
中间体92
5-氨基-1-环丙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001541
步骤1：5-氨基-1-环丙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
在RT下将环丙基肼盐酸盐(3.0g，27.32mmol)添加到(2E)-2-氰基-3-乙氧基丁-2-烯酸乙酯(5.0g，27.32mmol)在无水乙醇(50mL)中的搅拌溶液中，接着添加在乙醇(50mL)中的DIPEA(14mL，81.96mmol)。将反应混合物加热到90℃，并在RT下搅拌过夜。在减压下除去乙醇，并将得到的残留物用饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)稀释。将含水混合物用乙酸乙酯(2x 100mL)萃取，并将有机萃取物经无水硫酸钠干燥。在减压下除去溶剂，并通过硅胶柱色谱法纯化得到的化合物，得到4.0g呈油状的标题产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.05-1.09(m，4H)，1.33(t，J＝7.5Hz，3H)，2.31(s，3H)，2.99-3.06(m，1H)，4.19-4.30(m，2H)，5.27(br s，2H)；ESI(m/z)210(M+H)+。
步骤2：5-氨基-1-环丙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
在RT下向步骤1中间体(3.9g，18.85mmol)在乙醇(30mL)中的搅拌溶液中添加氢氧化钾的水溶液(3.0M，10mL，37.70mmol)。将混合物回流过夜。在减压下除去乙醇，并将得到的残留物用水(25mL)稀释。将含水混合物用乙酸乙酯(2 x 100mL)洗涤。将水层用1N柠檬酸进行酸化，直到pH 3-4。通过过滤收集沉淀的固体，得到2.0g标题产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.86-0.91(m，4H)，2.10(s，3H)，3.12-3.17(m，1H)，6.12(s，2H)，11.71(s，1H)；ESI(m/z)182(M+H)+。
步骤3：5-氨基-1-环丙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
在RT下向步骤2中间体(1.0g，5.52mmol)在无水DMF(10mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(1.55g，6.62mmol)和氟化钾(480mg，8.28mmol)。将反应混合物在RT下搅拌过夜。将混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化，直到pH 9，并过滤沉淀的固体。将固体用水(2 x 10mL)洗涤，干燥并通过硅胶柱色谱法纯化，得到1.15g呈固体的所需产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.86-0.92(m，4H)，2.09(s，3H)，3.13-3.18(m，1H)，5.19(s，2H)，6.29(s，2H)，7.26(t，J＝8.7Hz，2H)，7.62(t，J＝6.3Hz，1H)；ESI(m/z)336(M+H)+。
中间体93
5-氨基-3-甲基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001561
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(15mL)中的氟化钾(502mg，8.64mmol)，通过5-氨基-3-甲基-1-[2-(吗啉-4-基)乙基]-1H-吡唑-4-羧酸(2.0g，7.86mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(2.2g，9.43mmol)反应制备标题化合物，得到1.3g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ2.28(s，3H)，2.79-2.84(m，4H)，3.06-3.10(m，2H)，3.87-3.90(m，4H)，4.31-4.33(m，2H)，5.20(s，2H)，6.38(s，2H)，7.00(t，J＝9.0Hz，2H)，7.47(t，J＝6.3Hz，2H)；ESI(m/z)409(M+H)+。
中间体94
5-氨基-1-[2-(二甲基氨基)乙基]-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001562
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(14mL)中的氟化钾(420mg，7.25mmol)，通过5-氨基-1-[2-(二甲基氨基)乙基]-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(1.4g，6.65mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(1.8g，7.91mmol)反应制备标题化合物，得到2.5g呈油状的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.12(s，3H)，2.17(s，3H)，2.50(s，3H，与DMSO重叠)，2.52(t，J＝7.5Hz，2H)，3.90(t，J＝6.3Hz，2H)，5.19(s，2H)，6.36(s，2H)，7.26(t，J＝8.1Hz，2H)，7.62-7.71(m，1H)；APCI(m/z)367(M+H)+。
中间体95
5-氨基-1-(2-甲氧基乙基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001571
步骤1：5-氨基-1-(2-甲氧基乙基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在乙醇(20mL)中的DIPEA(3.8mL，21.85mmol)，通过(2E)-2-氰基-3-乙氧基丁-2-烯酸乙酯(2.0g，10.9mmol)与(2-甲氧基乙基)肼(1.08g，12.02mmol)反应制备标题化合物，得到1.35g呈液体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.24(t，J＝6.9Hz，3H)，2.15(s，3H)，3.22(s，3H)，3.57(t，J＝5.7Hz，2H)，3.97(t，J＝5.7Hz，2H)，4.16(q，J＝6.9Hz，2H)，6.11(s，2H)。
步骤2：5-氨基-1-(2-甲氧基乙基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在乙醇(13mL)中的氢氧化钾的水溶液(2M，4.0mL，11.40mmol)，通过步骤1中间体(1.3g，5.78mmol)的酯水解制备标题中间体，得到690mg呈粘性固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.08(s，3H)，3.22(s，3H)，3.57(t，J＝5.4Hz，2H)，3.89-3.98(m，2H)，6.08(s，2H)。
步骤3：5-氨基-1-(2-甲氧基乙基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(6.5mL)中的氟化钾(284mg，4.89mmol)，通过步骤2中间体(650mg，3.26mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(920mg，3.91mmol)反应制备标题化合物，得到260mg呈油状的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ2.35(s，3H)，3.37(s，3H)，3.73(t，J＝4.5Hz，2H)，4.16(t，J＝4.5Hz，2H)，5.22(s，2H)，5.74(brs，1H)，7.00(t，J＝8.4Hz，1H)，7.46-7.49(m，1H)，8.01(s，1H)；APCI(m/z)354(M+H)+。
中间体96
5-氨基-1-甲基-3-(丙-2-基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001581
步骤1：5-氨基-1-甲基-3-(丙-2-基)-1H-吡唑-4-甲腈
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在乙醇(20mL)中的DIPEA(4.6mL，26.32mmol)，通过(1-甲氧基-2-甲基亚丙基)丙二腈(2.0g，13.3mmol)与硫酸甲肼(1.91g，13.3mmol)反应制备标题化合物，得到1.35g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.16(d，J＝6.9Hz，6H)，2.74-2.82(m，1H)，3.44(s，3H)，6.43(s，2H)。
步骤2：5-氨基-1-甲基-3-(丙-2-基)-1H-吡唑-4-羧酸
向步骤1中间体(1.3g，7.92mmol)中添加氢氧化钠(3.16g，79.2mmol)在水(10mL)中的溶液，并将混合物在100℃下搅拌过夜。再添加同一批氢氧化钠，并将混合物再搅拌18h。将混合物冷却到RT并用水(10mL)稀释。将含水混合物用乙酸乙酯(30mL)洗涤，并用1N柠檬酸进行酸化，直到pH 2-3。将水层用乙酸乙酯(75mL x 2)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，并在减压下浓缩，得到725mg呈粘性固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.10(d，J＝6.6Hz，6H)，3.19-3.35(m，1H)，3.43(s，3H)，6.07(s，2H)，11.70(br s，1H)。
步骤3：5-氨基-1-甲基-3-(丙-2-基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(7.0mL)中的氟化钾(335mg，5.73mmol)，通过步骤2中间体(700mg，3.82mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(990mg，4.20mmol)反应制备标题化合物，得到625mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.09(d，J＝6.9Hz，6H)，3.12-3.20(m，1H)，3.47(s，3H)，5.19(s，2H)，6.26(s，2H)，7.25(t，J＝8.4Hz，2H)，7.63-7.70(m，1H)。
中间体97
5-氨基-1-(3-甲氧基丙基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001591
步骤1：5-氨基-1-(3-甲氧基丙基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在乙醇(35mL)中的DIPEA(6.5mL，38.25mmol)，通过(2E)-2-氰基-3-乙氧基丁-2-烯酸乙酯(3.5g，19.12mmol)与(2-甲氧基丙基)肼(1.99g，19.12mmol)反应制备标题化合物，得到2.70g呈液体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.35(t，J＝6.9Hz，3H)，2.00-2.06(m，2H)，2.34(s，3H)，3.30(t，J＝5.4Hz，2H)，3.35(s，3H)，3.96(t，J＝5.7Hz，2H)，4.27(q，J＝6.9Hz，2H)，5.45(br s，2H)。
步骤2：5-氨基-1-(3-甲氧基丙基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在乙醇(27mL)中的氢氧化钾的水溶液(2M，12.5mL，22.38mmol)，通过步骤1中间体(2.70g，11.23mmol)的酯水解制备标题中间体，得到1.85g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.84(t，J＝6.9Hz，2H)，2.13(s，3H)，3.21(s，3H)，3.25-3.34(m，5H)，3.82(t，J＝6.9Hz，2H)，6.09(s，2H)，11.75(s，1H)。
步骤3：5-氨基-1-(3-甲氧基丙基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(410mg，7.05mmol)，通过步骤2中间体(1.0g，4.78mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(1.1g，4.78mmol)反应制备标题化合物，得到1.18g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ2.02(t，J＝6.3Hz，2H)，2.29(s，3H)，3.31(t，J＝5.7Hz，2H)，3.36(s，3H)，3.94(t，J＝6.3Hz，2H)，5.20(s，2H)，5.51(s，2H)，6.99(t，J＝9.0Hz，2H)，7.40-7.50(m，1H)。
中间体98
5-氨基-1-环丙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟-3-甲基苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001601
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(5.0mL)中的氟化钾(240mg，4.14mmol)，通过5-氨基-1-环丙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(500mg，2.76mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟-3-甲基苯基)乙酮(826mg，3.31mmol)反应制备标题化合物，得到775mg粘性呈油状的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.07-1.12(m，4H)，2.26(s，3H)，2.29(s，3H)，2.95-3.07(m，1H)，5.19(s，2H)，5.38(s，2H)，6.88(t，J＝9.9Hz，1H)，7.27-7.34(m，1H)；APCI(m/z)350(M+H)+。
中间体99
5-氨基-1-环丙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-氧代-2-(2，4，6-三氟苯基)乙酯
Figure BDA0002350595300001611
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(6.0mL)中的氟化钾(290mg，4.96mmol)，通过5-氨基-1-环丙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(600mg，3.31mmol)与2-溴-1-(2，4，6-三氟-苯基)乙酮(1.0g，3.97mmol)反应制备标题化合物，得到880mg呈粘性油状的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.06-1.13(m，4H)，2.29(s，3H)，3.01-3.07(m，1H)，5.16(s，2H)，5.36(s，2H)，6.76(t，J＝8.4Hz，2H)。
中间体100
5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，3-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001612
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(4.0mL)中的氟化钾(210mg，3.55mmol)，通过5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(400mg，2.37mmol)与2-溴-1-(2，3-二氟苯基)乙酮(680mg，2.85mmol)反应制备标题化合物，得到635mg呈固体的产物。1HNMR(300MHz，CDCl3)：δ1.38(t，J＝7.2Hz，3H)，2.38(s，3H)，3.88(q，J＝7.2Hz，2H)，5.10(brs，2H)，5.37(s，2H)，7.23-7.28(m，1H)，7.40-7.45(m，1H)，7.70-7.78(m，1H)；ESI(m/z)324(M+H)+。
中间体101
5-氨基-1-环丙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，3-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001621
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(5.0mL)中的氟化钾(240mg，4.14mmol)，通过5-氨基-1-环丙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(500mg，2.76mmol)与2-溴-1-(2，3-二氟苯基)乙酮(880mg，3.31mmol)反应制备标题化合物，得到696mg呈油状的产物。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.84-0.98(m，4H)，2.13(s，3H)，3.13-3.20(m，1H)，5.35(s，2H)，6.28(s，2H)，7.33-7.44(m，1H)，7.67-7.78(m，2H)。
中间体102
5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-氧代-2-(2，4，6-三氟苯基)乙酯
Figure BDA0002350595300001622
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(5.0mL)中的氟化钾(260mg，4.45mmol)，通过5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(500mg，2.97mmol)与2-溴-1-(2，4，6-三氟苯基)乙酮(910mg，3.56mmol)反应制备标题化合物，得到880mg呈固体的产物。1HNMR(300MHz，CDCl3)：δ1.37(t，J＝7.2Hz，3H)，2.31(s，3H)，3.88(q，J＝7.2Hz，2H)，5.14(s，2H)，5.16(s，2H)，6.75(t，J＝8.4Hz，2H)。ESI(m/z)342.26(M+H)+。
中间体103
5-氨基-1-环丙基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001631
步骤1：5-氨基-1-环丙基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(45mL)中的三乙胺(5.5ml，39.56mmol)，通过(2E)-3-氯-2-氰基-4，4，4-三氟丁-2-烯酸乙酯(4.5g，19.78mmol)与环丙基肼盐酸盐(3.0g，27.69mmol)反应制备标题化合物，得到1.62g呈油状的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.09-1.18(m，4H)，1.31(t，J＝6.6Hz，3H)，3.11-3.17(m，1H)，4.28(q，J＝6.6Hz，2H)，5.46(br s，2H)。
步骤2：5-氨基-1-环丙基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在乙醇(27mL)中的氢氧化钾的水溶液(2.0M，4.2mL，12.68mmol)，通过步骤1中间体(1.67g，6.34mmol)的酯水解制备标题中间体，得到1.18g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.95-1.03(m，4H)，3.33-3.36(m，1H)，6.57(s，2H)，12.42(br s，1H)。
步骤3：5-氨基-1-环丙基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(426mg，7.33mmol)，通过步骤2中间体(1.15g，4.89mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(1.38g，5.86mmol)反应制备标题化合物，得到1.34g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.93-1.04(m，4H)，3.29-3.35(m，1H)，5.24(s，2H)，6.76(s，2H)，7.24(t，J＝8.7Hz，2H)，7.61-7.73(m，1H)。
中间体104
5-氨基-3-(二氟甲基)-1-乙基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001641
步骤1：(2E)-3-氯-2-氰基-4，4-二氟丁-2-烯酸乙酯
按照中间体39的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(25mL)中的钠金属(1.0g，44.25mmol)，通过氰基乙酸乙酯(5.0g，44.25mmol)与二氟乙酸乙酯(5.7mL，54.31mmol)反应，接着用在二氯甲烷(50mL)中的五氯化磷(9.2g，44.25mmol)进行处理，由此制备标题化合物，得到3.2g呈油状的所需产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.39(t，J＝7.2Hz，3H)，4.38(q，J＝7.2Hz，2H)，6.68(t，J＝53Hz，1H)。
步骤2：5-氨基-3-(二氟甲基)-1-乙基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(25mL)中的三乙胺(3.2mL，22.91mmol)，通过步骤1中间体(2.4g，11.45mmol)与草酸乙肼(1.7g，11.45mmol)反应制备标题化合物，得到1.5g呈油状的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.24(t，J＝6.6Hz，6H)，3.97(q，J＝7.5Hz，2H)，4.18(q，J＝6.9Hz，2H)，6.43(s，2H)，6.94(t，J＝54Hz，1H)。
步骤3：4-氨基-1-(二氟甲基)-3-乙基-1H-吡唑-5-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在乙醇(10mL)中的氢氧化钾的水溶液(2M，5.0mL，13.71mmol)，通过步骤2中间体(1.67g，6.84mmol)的酯水解制备标题中间体，得到660mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.22(t，J＝6.9Hz，3H)，3.96(q，J＝6.9Hz，2H)，6.40(s，2H)，6.97(t，J＝54.3Hz，1H)，12.31(br s，1H)。
步骤４：5-氨基-3-(二氟甲基)-1-乙基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(7.0mL)中的氟化钾(275mg，4.74mmol)，通过步骤3中间体(650mg，3.16mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(745mg，3.16mmol)反应制备标题化合物，得到750mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.24(t，J＝6.6Hz，3H)，3.99(q，J＝7.2Hz，2H)，5.25(s，2H)，6.59(s，2H)，6.78-7.14(m，1H)，6.96(t，J＝54Hz，1H)，7.26(t，J＝8.7Hz，2H)，7.63-7.70(m，1H)。
中间体105
5-氨基-1-乙基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001651
步骤1：5-氨基-1-乙基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(30mL)中的三乙胺(3.8mL，26.37mmol)，通过(2E)-3-氯-2-氰基-4，4，4-三氟丁-2-烯酸乙酯(3.0g，13.18mmol)与草酸乙肼(1.97g，13.18mmol)反应制备标题化合物，得到900mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.23(t，J＝7.2Hz，6H)，4.00(q，J＝7.2Hz，2H)，4.19(q，J＝6.9Hz，2H)，6.60(s，2H)。
步骤2：5-氨基-1-乙基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在乙醇(9.0mL)中的氢氧化钾的水溶液(2M，3.0mL，7.16mmol)，通过步骤1中间体(900mg，3.58mmol)的酯水解制备标题中间体，得到565mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.23(t，J＝6.9Hz，3H)，3.98(q，J＝6.9Hz，2H)，6.57(s，2H)，12.38(br s，1H)。
步骤3：5-氨基-1-乙基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(5.0mL)中的氟化钾(214mg，3.69mmol)，通过步骤2中间体(550mg，2.46mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(695mg，2.95mmol)反应制备标题化合物，得到275mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.24(t，J＝6.9Hz，3H)，4.01(q，J＝6.9Hz，2H)，5.25(s，2H)，6.76(s，2H)，7.26(t，J＝8.7Hz，2H)，7.60-7.74(m，1H)。
中间体106
5-氨基-1-乙基-1H-咪唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001661
步骤1：5-氨基-1-乙基-1H-咪唑-4-羧酸乙酯
按照中间体7的步骤1中所述的程序，使用在甲基氰(70mL)中的乙胺(在MeOH中2M，14.5mL，28.09mmol)，通过氨基(氰基)乙酸乙酯(3.6g，28.09mmol)与原甲酸三乙酯(4.7mL，28.09mmol)反应制备标题化合物，得到1.15g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.22(t，J＝6.9Hz，6H)，3.82(q，J＝6.9Hz，2H)，4.14(q，J＝6.9Hz，2H)，6.00(s，2H)，7.15(s，1H)。
步骤2：5-氨基-1-乙基-1H-咪唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在乙醇(6.0mL)中的氢氧化钾的水溶液(2M，3.0mL，9.00mmol)，通过步骤1中间体(1.1g，6.00mmol)的酯水解制备标题中间体，得到950mg呈固体的产物。将产物不经表征原样用于下一步。
步骤3：5-氨基-1-乙基-1H-咪唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(9.0mL)中的氟化钾(420mg，7.18mmol)，通过步骤2中间体(930mg，4.79mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(1.35g，5.75mmol)反应制备标题化合物，得到920mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.23(t，J＝6.9Hz，3H)，3.82(q，J＝7.2Hz，2H)，5.18(s，2H)，6.14(s，2H)，7.17-7.30(m，3H)，7.60-7.78(m，1H)。
中间体107
5-氨基-3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001671
步骤1：5-氨基-3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲腈
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在乙醇(20mL)中的DIPEA(4.4mL，25.6mmol)，通过(1，2-二甲氧基亚乙基)丙二腈(1.95g，12.85mmol)与硫酸甲肼(1.84g，12.18mmol)反应制备标题化合物，得到980mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ3.43(s，3H)，3.63(s，3H)，4.40(s，2H)。
步骤2：5-氨基-3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
将步骤1中间体(980mg，5.89mmol)和氢氧化钠(3.0g，75.0mmol)在水(10mL)中的悬浮液在90℃下加热72h。将混合物冷却到RT，并用1N柠檬酸进行酸化，直到pH 2-3。将水层用乙酸乙酯(75mL x 2)萃取，并将有机层经无水硫酸钠干燥。将溶液在减压下浓缩，得到450mg呈固体的标题产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.21(s，3H)，3.50(s，3H)，4.34(s，2H)，6.17(s，2H)，11.84(br s，1H)。
步骤3：5-氨基-3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(4.5mL)中的氟化钾(210mg，3.48mmol)，通过步骤2中间体(430mg，2.32mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(660mg，2.78mmol)反应制备标题化合物，得到380mg呈粘性固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ3.43(s，3H)，3.60(s，3H)，4.55(s，2H)，5.10(br s，2H)，5.21(s，2H)，6.99(t，J＝10.5Hz，2H)，7.44-7.47(m，1H)。
中间体108
5-氨基-1，3-二乙基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001681
步骤1：5-氨基-1，3-二乙基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在乙醇(100mL)中的三乙胺(14.5mL，101.40mmol)，通过(2Z)-2-氰基-3-乙氧基戊-2-烯酸乙酯(10g，50.74mmol)与草酸乙肼(7.61g，50.78mmol)反应制备标题化合物，得到7.4g呈油状的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.23(t，J＝7.2Hz，3H)，1.25-1.40(m，6H)，2.74(q，J＝7.2Hz，2H)，3.89(q，J＝7.5Hz，2H)，4.26(q，J＝7.5Hz，2H)，5.09(s，2H)。
步骤2：5-氨基-1，3-二乙基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在乙醇(40mL)中的氢氧化钾的水溶液(2M，20mL，69.19mmol)，通过步骤1中间体(7.3g，34.6mmol)的酯水解制备标题中间体，得到2.8g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.03-1.22(m，6H)，2.58(q，J＝7.8Hz，2H)，3.34-3.89(m，2H)，6.12(s，2H)，11.69(br s，1H)。
步骤3：5-氨基-1，3-二乙基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(7.5mL)中的氟化钾(360mg，6.14mmol)，通过步骤2中间体(750mg，4.09mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(1.15g，4.91mmol)反应制备标题化合物，得到820mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.19(t，J＝7.5Hz，3H)，1.36(t，J＝7.5Hz，3H)，2.72(q，J＝7.2Hz，2H)，3.89(q，J＝7.2Hz，2H)，5.16(s，2H)，5.20(s，2H)，6.98(t，J＝8.4Hz，2H)，7.40-7.50(m，1H)。
中间体109
5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001691
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(5.0mL)中的氟化钾(257mg，4.43mmol)，通过5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(500mg，2.95mmol)与2-溴-1-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]乙酮(1.0g，3.54mmol)反应制备标题化合物，得到745mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.20(t，J＝6.9Hz，3H)，2.18(s，3H)，3.85(q，J＝6.6Hz，2H)，5.37(s，2H)，6.29(s，2H)，7.58(t，J＝7.8Hz，1H)，8.09(t，J＝6.9Hz，1H)，8.19(t，J＝6.9Hz，1H)。
中间体110
5-氨基-1-乙基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001701
步骤1：5-氨基-1-乙基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(20mL)中的N，N’-二异丙基乙胺(4.0mL，23.78mmol)，通过(2Z)-2-氰基-3-(二甲基氨基)丙-2-烯酸乙酯(2.0g，11.85mmol)与草酸乙肼(2.14g，14.26mmol)反应制备标题化合物，得到2.1g呈固体的产物。1HNMR(300MHz，CDCl3)：δ1.25-1.49(m，6H)，3.94(q，J＝7.2Hz，2H)，4.17-4.30(m，2H)，5.04(br s，2H)，7.62(s，1H)。
步骤2：5-氨基-1-乙基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在乙醇(20mL)中的氢氧化钾的水溶液(2.0M，7.0mL，23.66mmol)，通过步骤1中间体(2.0g，1.18mmol)的酯水解制备标题中间体，得到820mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.20(t，J＝7.2Hz，3H)，3.89(q，J＝7.2Hz，2H)，6.15(s，2H)，7.40(s，1H)，11.67(br s，1H)。
步骤3：5-氨基-1-乙基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(5.0mL)中的氟化钾(500mg，5.31mmol)，通过步骤2中间体(500mg，3.54mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(1.6g，4.25mmol)反应制备标题化合物，得到810mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.41(t，J＝7.2Hz，3H)，3.97(q，J＝7.2Hz，2H)，5.19(s，2H)，7.00(t，J＝8.1Hz，2H)，7.40-7.50(m，1H)，7.68(s，1H)。
中间体111
5-氨基-1-叔丁基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001711
步骤1：5-氨基-1-叔丁基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在乙醇(50mL)中的N，N’-二异丙基乙胺(14mL，81.96mmol)，通过(2E)-2-氰基-3-乙氧基丁-2-烯酸乙酯(5.0g，27.32mmol)与叔丁基肼盐酸盐(3.45g，27.32mmol)反应制备标题化合物，得到5.56g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.13(s，9H)，1.30-1.40(m，3H)，2.38(s，3H)，4.20(q，J＝7.2Hz，2H)。
步骤2：5-氨基-1-叔丁基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在乙醇(60mL)中的氢氧化钾的水溶液(2.0M，18mL，36.61mmol)，通过步骤1中间体(5.5g，24.41mmol)的酯水解制备标题中间体，得到2.07g白色呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.49(s，9H)，2.12(s，3H)，6.05(s，2H)，11.76(s，1H)。
步骤3：5-氨基-1-叔丁基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(5.0mL)中的氟化钾(220mg，3.80mmol)，通过步骤2中间体(500mg，2.53mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(715mg，3.04mmol)反应制备标题化合物，得到695mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.60(s，9H)，2.26(s，3H)，5.18(s，2H)，5.35(br s，2H)，6.98(t，J＝8.4Hz，2H)，7.42-7.50(m，1H)。
中间体112
5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001721
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(5.0mL)中的氟化钾(260mg，4.43mmol)，通过5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(500mg，2.95mmol)与2-溴-1-[2-氟-苯基]乙酮(770mg，3.54mmol)反应制备标题化合物，得到510mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.20(t，J＝7.2Hz，3H)，2.18(s，3H)，3.85(q，J＝7.2Hz，2H)，5.34(s，2H)，6.28(s，2H)，7.37-7.46(m，2H)，7.69-7.74(m，1H)，7.91(t，J＝7.2Hz，1H)。
中间体113
5-氨基-3-甲基-1-(2-甲基丙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001722
步骤1：5-氨基-3-甲基-1-(2-甲基丙基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在乙醇(20mL)中的三乙胺(3.0mL，21.85mmol)，通过(2E)-2-氰基-3-乙氧基丁-2-烯酸乙酯(2.00g，10.92mmol)与(2-甲基丙基)肼(1.15g，13.11mmol)反应制备标题化合物，得到1.17g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ0.94(d，J＝6.6Hz，6H)，1.34(t，J＝6.9Hz，3H)，2.15-2.25(m，1H)，2.35(s，3H)，3.63(d，J＝7.2Hz，2H)，4.27(q，J＝6.9Hz，2H)，5.10(br s，1H)。
步骤2：5-氨基-3-甲基-1-(2-甲基丙基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在乙醇(11mL)中的氢氧化钾的水溶液(2.0M，4.0mL，7.32mmol)，通过步骤1中间体(1.1g，4.88mmol)的酯水解制备标题中间体，得到336mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.82(d，J＝6.9Hz，6H)，2.00-2.10(m，1H)，2.13(s，3H)，3.59(d，J＝6.9Hz，2H)，6.12(s，2H)，11.71(br s，1H)。
步骤3：5-氨基-3-甲基-1-(2-甲基丙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(3.5mL)中的氟化钾(145mg，2.51mmol)，通过步骤2中间体(330mg，1.67mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(472mg，2.00mmol)反应制备标题化合物，得到275mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.82(d，J＝6.9Hz，6H)，1.95-2.10(m，1H)，2.12(s，3H)，3.61(d，J＝6.9Hz，2H)，5.18(s，2H)，6.27(s，2H)，7.25(t，J＝8.7Hz，2H)，7.60-7.70(m，1H)。
中间体114
5-氨基-1-乙基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001741
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(6.0mL)中的氟化钾(235mg，4.03mmol)，通过5-氨基-1-乙基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸(600mg，2.68mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(755mg，3.22mmol)反应制备标题化合物，得到653mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.25(t，J＝7.2Hz，3H)，4.02(q，J＝7.5Hz，2H)，5.38(s，2H)，6.75(s，2H)，7.45-7.54(m，1H)，7.58(s，2H)，7.80(d，J＝7.8Hz，1H)。
中间体115
5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-甲氧基苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001742
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(5.0mL)中的氟化钾(257mg，4.43mmol)，通过5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(500mg，2.95mmol)与2-溴-1-(2-甲氧基苯基)乙酮(812mg，3.54mmol)反应制备标题化合物，得到656mg呈固体的产物。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.20(t，J＝7.2Hz，3H)，2.17(s，3H)，3.85(q，J＝7.2Hz，2H)，3.94(s，3H)，5.28(s，2H)，6.26(s，2H)，7.09(t，J＝7.8Hz，1H)，7.24(d，J＝8.4Hz，1H)，7.63(t，J＝7.5Hz，1H)，7.75(d，J＝7.5Hz，1H)。
中间体116
5-氨基-1-(2-甲基丙基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001751
步骤1：5-氨基-1-(2-甲基丙基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在乙醇(60mL)中的三乙胺(8.0mL，56.72mmol)，通过(2E)-3-氯-2-氰基-4，4，4-三氟丁-2-烯酸乙酯(6.45g，28.36mmol)与(2-甲基丙基)肼(2.5g，28.36mmol)反应制备标题化合物，得到1.31g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ0.94(d，J＝6.9Hz，6H)，1.33(t，J＝6.9Hz，3H)，2.15-2.34(m，1H)，3.70(d，J＝7.2Hz，2H)，4.26(q，J＝6.9Hz，2H)。
步骤2：5-氨基-1-(2-甲基丙基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在乙醇(15mL)中的氢氧化钾的水溶液(2M，5.0mL，7.51mmol)，通过步骤1中间体(1.4g，5.01mmol)的酯水解制备标题中间体，得到730mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.84(d，J＝6.3Hz，6H)，2.00-2.09(m，1H)，3.79(d，J＝7.2Hz，2H)，6.58(s，2H)，12.40(br s，1H)。
步骤3：5-氨基-1-(2-甲基丙基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(5.0mL)中的氟化钾(173mg，2.98mmol)，通过步骤2中间体(500mg，1.99mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(561mg，2.38mmol)反应制备标题化合物，得到435mg呈粘性油状的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.84(d，J＝6.3Hz，6H)，2.00-2.10(m，1H)，3.81(d，J＝7.2Hz，2H)，5.25(s，2H)，6.76(s，2H)，7.26(t，J＝8.7Hz，2H)，7.60-7.70(m，1H)。
中间体117
5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(4-氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001761
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(5.0mL)中的氟化钾(257mg，4.43mmol)，通过5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(500mg，2.95mmol)与2-溴-1-[4-氟苯基]乙酮(770mg，3.54mmol)反应制备标题化合物，得到650mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.41(t，J＝7.2Hz，3H)，2.44(s，3H)，4.00(q，J＝7.2Hz，2H)，5.47(s，2H)，7.19(t，J＝8.7Hz，2H)，7.92-8.05(m，2H)。
中间体118
5-氨基-3-(4-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-氧代-2-苯基乙酯
Figure BDA0002350595300001762
步骤1：5-氨基-3-(4-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲腈
在RT下向4-氟苯甲醛(2.0g，16.11mmol)在甲醇(80mL)中的搅拌溶液中添加碘(820mg，3.22mmol)，接着添加丙二腈(1.1g，16.11mmol)，并将混合物搅拌15分钟。向此混合物中添加硫酸甲肼(2.35g，16.11mmol)和N，N’-二异丙基乙胺(2.75mL，16.11mmol)，并在60℃下搅拌过夜。在真空下除去溶剂，并将残留物用饱和硫代硫酸钠溶液(30mL)稀释。将混合物用乙酸乙酯(100mL x 2)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，并在减压下浓缩。通过硅胶柱色谱法纯化如此得到的残留物，得到470mg呈固体的标题产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.58(s，3H)，6.70(s，2H)，7.30(t，J＝8.7Hz，2H)，7.79(t，J＝5.8Hz，2H)。
步骤2：5-氨基-3-(4-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体96的步骤2中所述的程序，通过步骤1中间体(2.4g，11.10mmol)与氢氧化钠(5.0g，125mmol)在水(50mL)中反应制备标题化合物，得到2.1g呈固体的所需产物。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.57(s，3H)，6.32(s，2H)，7.16(t，J＝9.0Hz，2H)，7.57(t，J＝6.0Hz，2H)，11.85(br s，1H)。
步骤3：5-氨基-3-(4-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-氧代-2-苯基乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(7.0mL)中的氟化钾(260mg，4.46mmol)，通过步骤2中间体(700mg，2.97mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(770mg，3.27mmol)反应制备标题化合物，得到490mg呈粘性油状的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ3.70(s，3H)，5.15(s，2H)，6.94-7.08(m，4H)，7.47(t，J＝8.4Hz，1H)，7.66(t，J＝6.0Hz，2H)。
中间体119
5-氨基-1-环丙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氟-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001771
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(2.0mL)中的氟化钾(96mg，1.65mmol)，通过5-氨基-1-环丙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(200mg，1.10mmol)与2-溴-1-(2-氟-4-甲氧基苯基)乙酮(327mg，1.32mmol)反应制备标题化合物，得到256mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.90-1.12(m，4H)，2.15(s，3H)，3.13-3.22(m，1H)，3.87(s，3H)，5.28(s，2H)，6.30(s，2H)，6.93-7.06(m，2H)，7.87(t，J＝8.7Hz，1H)。
中间体120
5-氨基-3-苄基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001781
步骤1：5-氨基-3-苄基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲腈
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(65mL)中的DIPEA(1.1mL，6.52mmol)，通过(1-甲氧基-2-苯基亚乙基)丙二腈(6.5g，3.26mmol)与硫酸甲肼(4.70g，3.26mmol)反应制备标题化合物，得到2.45g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.46(s，3H)，3.74(s，2H)，6.49(s，2H)，7.15-7.38(m，5H)。
步骤2：5-氨基-3-苄基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体96的步骤2中所述的程序，通过步骤1中间体(2.4g，11.30mmol)与氢氧化钠(5.0g，125mmol)在水(50mL)中反应制备标题化合物，得到2.1g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.47(s，3H)，3.93(s，2H)，6.14(s，2H)，7.10-7.30(m，5H)，11.82(brs，1H)。
步骤3：5-氨基-3-苄基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(8.0mL)中的氟化钾(300mg，5.17mmol)，通过步骤2中间体(800mg，3.45mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(900mg，3.80mmol)反应制备标题化合物，得到900mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.48(s，3H)，3.91(s，2H)，5.17(s，2H)，6.31(s，2H)，7.16-7.30(m，6H)，7.64-7.70(m，2H)。
中间体121
5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-[2，4-二氟-3-(三氟甲基)苯基]-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001791
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(5.0mL)中的氟化钾(257mg，4.43mmol)，通过5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(500mg，2.95mmol)与2-溴-1-[2，4-二氟-3-(三氟甲基)苯基]乙酮(1.07g，3.54mmol)反应制备标题化合物，得到338mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.20(t，J＝7.2Hz，3H)，2.18(s，3H)，3.85(q，J＝7.2Hz，2H)，5.35(s，2H)，6.28(s，2H)，7.57(t，J＝10.2Hz，1H)，8.23-8.29(m，1H)。
中间体122
5-氨基-1-甲基-3-(吗啉-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001792
步骤1：[(甲基硫烷基)(吗啉-4-基)亚甲基]丙二腈
向2-[双(甲硫基)亚甲基]丙二腈(7.3g，42.87mmol)在异丙醇(50mL)中的搅拌溶液中添加吗啉(3.8mL，42.87mmol)，并将反应混合物回流2h。在减压下蒸发溶剂，并将残留物在乙醚(50mL)中搅拌30分钟。过滤得到的固体并用乙醚洗涤，得到8.23g所需产物。1HNMR(300MHz，CDCl3)：δ2.62(s，3H)，3.75-3.95(m，8H)。
步骤2：5-氨基-1-甲基-3-(吗啉-4-基)-1H-吡唑-4-甲腈
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在异丙醇(40mL)中的三乙胺(5.1mL，36.3mmol)，通过步骤1中间体(3.8g，18.15mmol)与硫酸甲肼(2.6g，18.15mmol)反应制备标题化合物，得到630mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.00-3.15(m，4H)，3.41(s，3H)，3.65-3.75(m，4H)，5.36(s，2H)。
步骤3：5-氨基-1-甲基-3-(吗啉-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体96的步骤2中所述的程序，通过步骤2中间体(1.4g，6.75mmol)与氢氧化钠(3.0g，75mmol)在水(30mL)中反应制备标题化合物，得到342mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.00-3.15(m，4H)，3.58(s，3H)，3.60-3.75(m，4H)，5.22(s，2H)。
步骤４：5-氨基-1-甲基-3-(吗啉-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(4.0mL)中的氟化钾(130mg，2.25mmol)，通过步骤3中间体(340mg，1.50mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(424mg，1.80mmol)反应制备标题化合物，得到120mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ3.00-3.15(m，4H)，3.59(s，3H)，3.65-3.75(m，4H)，4.41(d，J＝6.0Hz，2H)，6.45-6.48(m，1H)，7.15-7.25(m，3H)，7.59-7.65(m，1H)。
中间体123
5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001811
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(6.0mL)中的氟化钾(412mg，7.09mmol)，通过5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(800mg，4.73mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟-4-甲氧基苯基)乙酮(1.25g，4.73mmol)反应制备标题化合物，得到1.25g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.17(t，J＝7.2Hz，3H)，2.12(s，3H)，3.79-3.95(m，5H)，5.11(s，2H)，6.24(s，2H)，6.87(d，J＝11.7Hz，2H)。
中间体124
5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-{2-氟-4-[(甲基磺酰基)氨基]苯基}-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001812
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(7.0mL)中的氟化钾(360mg，6.20mmol)，通过5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(700mg，4.13mmol)与N-[4-(溴乙酰基)-3-氟苯基]甲磺酰胺(1.40g，4.55mmol)反应制备标题化合物，得到1.10g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.20(t，J＝7.2Hz，3H)，2.18(s，3H)，3.19(s，3H)，3.85(q，J＝7.2Hz，2H)，5.29(s，2H)，6.28(s，2H)，7.09-7.18(m，2H)，7.85-7.95(m，1H)，10.71(s，1H)。
中间体125
5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-{2，6-二氟-4-[(甲基磺酰基)氨基]苯基}-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001821
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(7.0mL)中的氟化钾(360mg，6.20mmol)，通过5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(700mg，4.13mmol)与N-[4-(溴乙酰基)-3，5-二氟苯基]甲磺酰胺(1.6g，4.97mmol)反应制备标题化合物，得到610mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.37(t，J＝6.9Hz，3H)，2.31(s，3H)，3.13(s，3H)，3.86(q，J＝7.8Hz，2H)，5.08(br s，2H)，5.17(s，2H)，6.84(d，J＝10.2Hz，2H)。
中间体126
5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-{2-氟-4-[(甲基磺酰基)氨基]苯基}-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001822
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(7.0mL)中的氟化钾(275mg，4.66mmol)，通过5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸(650mg，3.11mmol)与N-[4-(溴乙酰基)-3-氟苯基]甲磺酰胺(1.06g，3.42mmol)反应制备标题化合物，得到760mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ3.19(s，3H)，3.64(s，3H)，5.34(s，2H)，6.72(s，2H)，7.10-7.20(m，2H)，7.86-7.92(m，1H)，10.71(s，1H)。
中间体127
5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-[2-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基]-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001831
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(8.0mL)中的氟化钾(309mg，5.32mmol)，通过5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(600mg，3.54mmol)与2-溴-1-[2-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基]乙酮(1.00g，3.54mmol)反应制备标题化合物，得到1.05g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.20(t，J＝7.2Hz，3H)，2.18(s，3H)，3.30(s，3H)，3.67(t，J＝7.2Hz，2H)，3.85(q，J＝7.2Hz，2H)，4.23(t，J＝7.2Hz，2H)，5.29(s，2H)，6.29(s，2H)，6.95(d，J＝9.0Hz，1H)，7.03(d，J＝13.2Hz，1H)，7.85(t，J＝9.0Hz，1H)；APCI(m/z)380(M+H)+。
中间体128
5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-[4-(环丙基甲氧基)-2-氟苯基]-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001832
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(6.0mL)中的氟化钾(308mg，5.31mmol)，通过5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(600mg，3.54mmol)与2-溴-1-[4-(环丙基甲氧基)-2-氟苯基]乙酮(1.00g，3.54mmol)反应制备标题化合物，得到1.02g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.30-0.35(m，2H)，0.54-0.59(m，2H)，1.18(t，J＝7.2Hz，3H)，1.21-1.25(m，1H)，2.15(s，3H)，3.83(q，J＝7.2Hz，2H)，3.92(d，J＝7.2Hz，2H)，5.26(s，2H)，6.25(s，2H)，6.85-7.00(m，2H)，7.82(t，J＝8.7Hz，1H)；APCI(m/z)375(M+H)+。
中间体129
5-氨基-1-乙基-3-(2-甲基丙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001841
步骤1：5-氨基-1-乙基-3-(2-甲基丙基)-1H-吡唑-4-甲腈
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在乙醇(70mL)中的三乙胺(11.5mL，81.7mmol)，通过2-(1-甲氧基-3-甲基亚丁基)丙二腈(6.7g，40.85mmol)与草酸乙肼(6.1g，40.85mmol)反应制备标题化合物，得到5.67g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.87(d，J＝6.3Hz，6H)，1.16(t，J＝7.2Hz，3H)，1.85-1.93(m，1H)，2.28(d，J＝7.5Hz，2H)，3.82(q，J＝6.9Hz，2H)，6.44(br s，2H)。
步骤2：5-氨基-1-乙基-3-(2-甲基丙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺
将步骤1中间体(5.6g，29.13mmol)在氢氧化钠水溶液(60mL，11.6g，291.3mmol)中的溶液在100℃下搅拌3天。将混合物冷却到RT，并用乙酸乙酯(200mLx2)洗涤。将有机层用水(200mL洗涤，并在减压下浓缩，得到4.3g呈固体的标题产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.84(d，J＝6.9Hz，6H)，1.16(t，J＝6.9Hz，3H)，1.84-2.00(m，1H)，2.48(d，J＝7.2Hz，2H)，3.82(q，J＝6.9Hz，2H)，6.11(s，2H)，6.45(br s，2H)。
步骤3：5-氨基-1-乙基-3-(2-甲基丙基)-1H-吡唑-4-羧酸
将步骤2中间体(4.3g，20.50mmol)在氢氧化钠水溶液(60mL，8.0g，205.0mmol)中的溶液在100℃下搅拌2天。将混合物冷却到RT，并用乙酸乙酯(100mL x 3)洗涤。将水层用1N柠檬酸进行酸化，直到pH 3-4。将含水混合物用乙酸乙酯(100mL x 3)萃取，并将有机层经无水硫酸钠干燥。将溶液过滤，并在减压下浓缩，得到3.2g呈油状的标题产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.83(d，J＝6.9Hz，6H)，1.16(t，J＝6.9Hz，3H)，1.74-1.80(m，1H)，2.43(d，J＝6.9Hz，2H)，3.82(q，J＝6.9Hz，2H)，4.97(s，2H)，11.90(br s，1H)。
步骤4：5-氨基-1-乙基-3-(2-甲基丙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(6.0mL)中的氟化钾(248mg，4.26mmol)，通过步骤3中间体(600mg，2.84mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(801mg，3.41mmol)反应制备标题化合物，得到251mg呈粘性油状的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.82(d，J＝6.9Hz，6H)，1.17(t，J＝6.9Hz，3H)，1.86-1.92(m，1H)，2.40(d，J＝7.2Hz，2H)，3.85(q，J＝6.9Hz，2H)，5.17(s，2H)，6.28(s，2H)，7.25(t，J＝9.0Hz，2H)，7.65-7.70(m，1H)；APCI(m/z)366(M+H)+。
中间体130
5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯-6-氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001851
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(5.0mL)中的氟化钾(260mg，4.42mmol)，通过5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(500mg，2.95mmol)与2-溴-1-(2-氯-6-氟苯基)乙酮(820mg，3.25mmol)反应制备标题化合物，得到560mg呈固体的产物。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.18(t，J＝7.2Hz，3H)，2.07(s，3H)，3.83(q，J＝7.2Hz，2H)，5.20(s，2H)，6.29(s，2H)，7.37(d，J＝8.7Hz，1H)，7.45(d，J＝8.4Hz，1H)，7.59(t，J＝8.4Hz，1H)；APCI(m/z)340(M+H)+。
中间体131
5-氨基-1-环丙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯-6-氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001861
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(3.0mL)中的氟化钾(145mg，2.47mmol)，通过5-氨基-1-环丙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(300mg，1.65mmol)与2-溴-1-(2-氯-6-氟苯基)乙酮(416mg，1.65mmol)反应制备标题化合物，得到240mg呈粘性固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.85-0.98(m，4H)，2.05(s，3H)，3.13-3.21(m，1H)，5.20(s，2H)，6.29(br s，2H)，7.42-7.50(m，2H)，7.53-7.60(m，1H)。
中间体132
5-氨基-1-环丙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001862
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(5.0mL)中的氟化钾(245mg，4.17mmol)，通过5-氨基-1-环丙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(500mg，2.78mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(645mg，2.78mmol)反应制备标题化合物，得到880mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.86-0.97(m，4H)，2.11(s，3H)，3.15-3.25(m，1H)，5.31(s，2H)，6.30(br s，2H)，7.49-7.55(m，1H)，7.59(d，J＝3.3Hz，2H)，7.78(d，J＝7.5Hz，1H)。
中间体133
5-氨基-1-(4-氟-2-甲基苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001871
步骤1：5-氨基-1-(4-氟-2-甲基苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(20mL)中的三乙胺(3.4mL，24.04mmol)，通过(2E)-2-氰基-3-乙氧基丁-2-烯酸乙酯(2.0g，10.92mmol)与(4-氟-2-甲基苯基)肼盐酸盐(2.2g，12.01 mmol)反应制备标题化合物，得到2.93g呈固体的产物。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.27(t，J＝7.2Hz，3H)，2.04(s，3H)，2.23(s，3H)，4.19(q，J＝7.2Hz，2H)，6.05(br s，2H)，7.16(t，J＝8.4Hz，1H)，7.24-7.35(m，2H)。
步骤2：5-氨基-1-(4-氟-2-甲基苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在乙醇(30mL)中的氢氧化钾的水溶液(2M，15mL，20.9mmol)，通过步骤1中间体(1.4g，5.01mmol)的酯水解制备标题中间体，得到1.7g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.04(s，3H)，2.22(s，3H)，6.02(s，2H)，7.16(t，J＝8.4Hz，1H)，7.20-7.40(m，2H)，11.85(br s，1H)。
步骤3：5-氨基-1-(4-氟-2-甲基苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(6.0mL)中的氟化钾(210mg，3.60mmol)，通过步骤2中间体(600mg，2.40mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(620mg，2.64mmol)反应制备标题化合物，得到800mg呈油状的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.05(s，3H)，2.22(s，3H)，5.36(s，2H)，6.18(s，2H)，7.16(t，J＝8.4Hz，1H)，7.30-7.40(m，2H)，7.45-7.57(m，1H)，7.58-7.62(m，2H)，7.80(d，J＝7.2Hz，1H)。
中间体134
5-氨基-1-环戊基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001881
步骤1：5-氨基-1-环戊基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(42mL)中的N，N-二异丙基乙胺(7.9mL，45.76mmol)，通过2-氰基-3-乙氧基丁-2-烯酸乙酯(4.20g，22.87mmol)与环戊基肼盐酸盐(3.1g，22.87mmol)反应制备标题化合物，得到4.08g呈油状的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.24(t，J＝7.5Hz，3H)，1.46-1.62(m，2H)，1.67-1.98(m，6H)，2.16(s，3H)，4.14(q，J＝7.5Hz，2H)，4.42-4.58(m，1H)，6.15(s，2H)。
步骤2：5-氨基-1-环戊基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在水(20mL)和乙醇(55mL)中的氢氧化钾(1.4g，25.32mmol)，通过步骤1中间体(4.0g，16.87mmol)的酯水解制备标题中间体，得到1.72g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.48-1.62(m，2H)，1.66-1.95(m，6H)，2.14(s，3H)，4.45-4.52(m，1H)，6.12(s，2H)，11.67(s，1H)。
步骤3：5-氨基-1-环戊基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(417mg，7.18mmol)，通过步骤2中间体(1.0g，4.78mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(1.1g，4.78mmol)反应制备标题化合物，得到1.25g呈粘性固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.47-1.64(m，2H)，1.67-2.00(m，6H)，2.12(s，3H)，4.48-4.58(m，1H)，5.19(s，2H)，6.28(s，2H)，7.26(t，J＝8.4Hz，2H)，7.60-7.70(m，1H)。
中间体135
5-氨基-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001891
步骤1：5-氨基-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(25mL)中的N，N-二异丙基乙胺(5.8mL，34.15mmol)，通过(2E)-2-氰基-3-乙氧基丁-2-烯酸乙酯(2.5g，13.66mmol)与四氢-2H-吡喃-4-基肼盐酸盐(2.5g，16.39mmol)反应制备标题化合物，得到2.7g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.24(t，J＝6.9Hz，3H)，1.64-1.72(m，2H)，1.80-2.00(m，2H)，2.16(s，3H)，3.35-3.45(m，2H)，3.90-3.98(m，2H)，4.15(q，J＝6.9Hz，2H)，4.20-4.34(m，1H)，6.23(s，2H)。
步骤2：5-氨基-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在水(13mL)和乙醇(25mL)中的氢氧化钾(1.20g，20.52mmol)，通过步骤1中间体(2.6g，10.26mmol)的酯水解制备标题中间体，得到1.2g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.63-1.74(m，2H)，1.80-2.00(m，2H)，2.15(s，3H)，3.30-3.44(m，2H)，3.90-3.98(m，2H)，4.18-4.30(m，1H)，6.20(s，2H)，11.72(br s，1H)。
步骤3：5-氨基-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(6.0mL)中的氟化钾(235mg，3.99mmol)，通过步骤2中间体(600mg，2.66mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(630mg，2.66mmol)反应制备标题化合物，得到730mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.62-1.74(m，2H)，1.82-2.00(m，2H)，2.13(s，3H)，3.35-3.48(m，2H)，3.90-4.00(m，2H)，4.20-4.36(m，1H)，5.19(s，2H)，6.35(s，2H)，7.26(t，J＝8.4Hz，2H)，7.65-7.68(m，1H)。
中间体136
5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯-5-(新戊酰氨基甲基)苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001901
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(3.0mL)中的氟化钾(138mg，2.38mmol)，通过5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(268mg，1.58mmol)与N-[3-(溴乙酰基)-4-氯苄基]-2，2-二甲基丙酰胺(550mg，1.58mmol)反应制备标题化合物，得到520mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.12(s，9H)，1.19(t，J＝6.9Hz，3H)，2.14(s，3H)，3.84(q，J＝6.9Hz，2H)，4.27(d，J＝5.7Hz，2H)，5.28(s，2H)，6.28(br s，2H)，7.40(d，J＝8.4Hz，1H)，7.52(d，J＝8.4Hz，1H)，7.61(s，1H)，8.17(br s，1H)。
中间体137
5-氨基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001911
步骤1：5-氨基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(80mL)中的三乙胺(12.5mL，87.0mmol)，通过3-氯-2-氰基-4，4，4-三氟丁-2-烯酸乙酯(8.0g，35.2mmol)与四氢-2H-吡喃-4-基肼盐酸盐(5.3g，35.2mmol)反应制备标题化合物，得到3.3g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.23(t，J＝6.9Hz，3H)，1.70-1.94(m，4H)，3.35-3.46(m，2H)，3.90-4.04(m，2H)，4.17(q，J＝6.9Hz，2H)，4.38-4.50(m，1H)，6.70(s，2H)；APCI(m/z)308(M+H)+。
步骤2：5-氨基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在水(10mL)和乙醇(20mL)中的氢氧化钾(1.15g，20.82mmol)，通过步骤1中间体(3.2g，10.41mmol)的酯水解制备标题中间体，得到1.5g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.70-1.95(m，4H)，3.30-3.45(m，2H)，3.90-4.00(m，2H)，4.38-4.50(m，1H)，6.66(s，2H)，12.42(br s，1H)；APCI(m/z)278(M-H)-。
步骤3：5-氨基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(6.0mL)中的氟化钾(190mg，3.21mmol)，通过步骤2中间体(600mg，2.14mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(500mg，2.14mmol)反应制备标题化合物，得到1.1g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.74-2.00(m，4H)，3.41(t，J＝9.6Hz，2H)，3.90-4.01(m，2H)，4.38-4.50(m，1H)，5.39(s，2H)，6.83(s，2H)，7.48-7.55(m，1H)，7.60(d，J＝3.9Hz，2H)，7.81(d，J＝7.8Hz，1H)；APCI(m/z)432(M+H)+。
中间体138
5-氨基-1-环丁基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001921
步骤1：5-氨基-1-环丁基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(65mL)中的N，N-二异丙基乙胺(19mL，109.17mmol)，通过乙基-2-氰基-3-乙氧基丁-2-烯酸乙酯(10.0g，54.58mmol)与环丁基肼盐酸盐(6.55g，54.58mmol)反应制备标题化合物，得到2.79g呈固体的产物。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.23(t，J＝7.2Hz，3H)，1.60-1.80(m，2H)，2.19(s，3H)，2.18-2.30(m，2H)，2.35-2.56(m，2H)，4.14(q，J＝7.2Hz，2H)，4.65-4.73(m，1H)，6.16(s，2H)。
步骤2：5-氨基-1-环丁基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在水(20mL)和乙醇(40mL)中的氢氧化钾(1.40g，24.66mmol)，通过步骤1中间体(2.75g，12.33mmol)的酯水解制备标题中间体，得到1.72g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.60-1.80(m，2H)，2.17(s，3H)，2.15-2.30(m，2H)，2.38-2.54(m，2H)，4.60-4.74(m，1H)，6.13(s，2H)，11.72(s，1H)。
步骤3：5-氨基-1-环丁基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(17mL)中的氟化钾(760mg，13.06mmol)，通过步骤2中间体(1.7g，8.71mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(2.05g，8.71mmol)反应制备标题化合物，得到1.97g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.62-1.80(m，2H)，2.15(s，3H)，2.16-2.35(m，2H)，2.38-2.57(m，2H)，4.65-4.76(m，1H)，5.18(s，2H)，6.27(s，2H)，7.26(t，J＝8.7Hz，2H)，7.62-7.73(m，1H)。
中间体139
5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯-5-(新戊酰氨基甲基)苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001931
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(5.0mL)中的氟化钾(201mg，3.46mmol)，通过5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸(482mg，2.30mmol)与N-[3-(溴乙酰基)-4-氯苄基]-2，2-二甲基丙酰胺(800mg，2.30mmol)反应制备标题化合物，得到780mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.12(s，9H)，3.63(s，3H)，4.28(d，J＝5.7Hz，2H)，5.36(s，2H)，6.73(br s，2H)，7.40(d，J＝7.8Hz，1H)，7.54(d，J＝7.8Hz，1H)，7.63(s，1H)，8.17(br s，1H)；APCI(m/z)474(M+H)+。
中间体140
5-氨基-1-环丙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯-5-(新戊酰氨基甲基)苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001941
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(5.0mL)中的氟化钾(203mg，3.50mmol)，通过5-氨基-1-环丙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(423mg，2.33mmol)与N-[3-(溴乙酰基)-4-氯苄基]-2，2-二甲基丙酰胺(810mg，2.33mmol)反应制备标题化合物，得到730mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.87-0.96(m，4H)，1.12(s，9H)，2.11(s，3H)，3.16-3.20(m，1H)，4.28(d，J＝5.7Hz，2H)，5.28(s，2H)，6.30(br s，2H)，7.39(d，J＝8.7Hz，1H)，7.53(d，J＝8.1Hz，1H)，7.61(s，1H)，8.17(br s，1H)。
中间体141
5-氨基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001942
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(7.5mL)中的氟化钾(235mg，4.02mmol)，通过5-氨基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸(750mg，2.68mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(635mg，2.68mmol)反应制备标题化合物，得到855mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.75-1.95(m，4H)，3.34-3.48(m，2H)，3.90-4.02(m，2H)，4.40-4.52(m，1H)，5.26(s，2H)，6.83(s，2H)，7.26(t，J＝8.7Hz，2H)，7.62-7.78(m，1H)；APCI(m/z)434(M+H)+。
中间体142
5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氟-5-(新戊酰氨基甲基)苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001951
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(396mg，6.82mmol)，通过5-氨基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸(950mg，4.54mmol)与N-[3-(溴乙酰基)-4-氟苄基]-2，2-二甲基丙酰胺(1.5g，4.54mmol)反应制备标题化合物，得到1.57g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.12(s，9H)，3.64(s，3H)，4.28(d，J＝5.7Hz，2H)，5.37(s，2H)，6.73(br s，2H)，7.37(t，J＝9.3Hz，1H)，7.50-7.60(m，1H)，7.73(d，J＝7.8Hz，1H)，8.17(br s，1H)。
中间体143
5-氨基-1-环己基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001952
步骤1：5-氨基-1-环己基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在乙醇(56mL)中的N，N-二异丙基乙胺(13mL，75.37mmol)，通过(2E)-2-氰基-3-乙氧基丁-2-烯酸乙酯(5.60g，37.60mmol)与环己基肼盐酸盐(6.9g，37.60mmol)反应制备标题化合物，得到7.1g呈油状的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.10-1.40(m，2H)，1.23(t，J＝6.9Hz，3H)，1.42-1.85(m，8H)，2.15(s，3H)，3.95-4.00(m，1H)，4.14(q，J＝6.9Hz，2H)，6.15(s，2H)；APCI(m/z)252(M+H)+。
步骤2：5-氨基-1-环己基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在水(35mL)和乙醇(90mL)中的氢氧化钾(2.4g，41.78mmol)，通过步骤1中间体(7.0g，27.85mmol)的酯水解制备标题中间体，得到2.97g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.11-1.42(m，3H)，1.58-1.82(m，7H)，2.13(s，3H)，3.90-4.07(m，1H)，6.13(s，2H)，11.67(s，1H)。
步骤3：5-氨基-1-环己基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(390mg，6.79mmol)，通过步骤2中间体(1.0g，4.47mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(1.05g，4.47mmol)反应制备标题化合物，得到1.12g呈粘性油状的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.10-1.45(m，3H)，1.57-1.82(m，7H)，2.12(s，3H)，3.96-4.15(m，1H)，5.18(s，2H)，6.27(s，2H)，7.26(t，J＝8.4Hz，2H)，7.62-7.72(m，1H)；APCI(m/z)378(M+H)+。
中间体144
5-氨基-1-(4，4-二氟环己基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001961
步骤1：5-氨基-1-(4，4-二氟环己基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在乙醇(28mL)中的N，N-二异丙基乙胺(5.2mL，30.42mmol)，通过2-氰基-3-乙氧基丁-2-烯酸乙酯(2.78g，15.21mmol)与(4，4-二氟环己基)肼盐酸盐(2.8g，15.21mmol)反应制备标题化合物，得到4.3g呈油状的产物。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.24(t，J＝7.2Hz，3H)，1.90-2.01(m，4H)，2.08-2.20(m，4H)，2.16(s，3H)，3.95-4.00(m，1H)，4.15(q，J＝6.9Hz，3H)，6.22(s，2H)。
步骤2：5-氨基-1-(4，4-二氟环己基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在水(18mL)和乙醇(50mL)中的氢氧化钾(2.6g，46.42mmol)，通过步骤1中间体(4.3g，15.00mmol)的酯水解制备标题中间体，得到1.9g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.75-2.02(m，6H)，2.10-2.20(m，2H)，2.12(s，3H)，4.14-4.17(m，1H)，6.16(s，2H)，11.71(s，1H)。
步骤3：5-氨基-1-(4，4-二氟环己基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(336mg，5.79mmol)，通过步骤2中间体(1.0g，3.86mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(907mg，3.86mmol)反应制备标题化合物，得到1.23g呈粘性固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.78-2.05(m，6H)，2.09-2.12(m，2H)，2.11(s，3H)，4.17-4.21(m，1H)，5.17(s，2H)，6.32(s，2H)，7.24(t，J＝8.7Hz，2H)，7.63-7.67(m，1H)。
中间体145
5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氟-5-(新戊酰氨基甲基)苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001981
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(5.0mL)中的氟化钾(210mg，3.63mmol)，通过5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(410mg，2.42mmol)与N-[3-(溴乙酰基)-4-氟苄基]-2，2-二甲基丙酰胺(800mg，2.42mmol)反应制备标题化合物，得到730mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.12(s，9H)，1.23(t，J＝6.9Hz，3H)，2.18(s，3H)，3.85(q，J＝6.9Hz，2H)，4.28(d，J＝5.4Hz，2H)，5.32(s，2H)，6.28(s，2H)，7.36(t，J＝9.3Hz，1H)，7.53-7.58(m，1H)，7.73-7.76(m，1H)，8.16(brs，1H)。
中间体146
5-氨基-1-(2-氯-4-氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001982
步骤1：5-氨基-1-(2-氯-4-氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在乙醇(25mL)中的三乙胺(3.9mL，27.89mmol)，通过(2E)-2-氰基-3-乙氧基丁-2-烯酸乙酯(2.32g，12.68mmol)与(2-氯-4-氟苯基)肼盐酸盐(2.5g，12.68mmol)反应制备标题化合物，得到3.57g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.27(t，J＝6.9Hz，3H)，2.22(s，3H)，4.19(q，J＝6.9Hz，2H)，6.24(s，2H)，7.37(t，J＝8.4Hz，1H)，7.50-7.62(m，1H)，7.67-7.74(m，1H)。
步骤2：5-氨基-1-(2-氯-4-氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在水(17.5mL)和乙醇(35mL)中的氢氧化钾(1.31g，23.51mmol)，通过步骤1中间体(3.5g，11.75mmol)的酯水解制备标题中间体，得到2.8g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.21(s，3H)，6.20(s，2H)，7.37(t，J＝8.4Hz，1H)，7.50-7.60(m，1H)，7.65-7.74(m，1H)，11.95(br s，1H)。
步骤3：5-氨基-1-(2-氯-4-氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(323mg，5.56mmol)，通过步骤2中间体(1.0g，3.70mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(871mg，3.70mmol)反应制备标题化合物，得到980mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.20(s，3H)，5.25(s，2H)，6.38(s，2H)，7.28(t，J＝8.4Hz，2H)，7.33-7.44(m，1H)，7.54-7.76(m，3H)；APCI(m/z)424(M+H)+。
中间体147
5-氨基-1-环丙基-3-乙基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300001991
步骤1：5-氨基-1-环丙基-3-乙基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(32mL)中的N，N-二异丙基乙胺(5.6mL，32.44mmol)，通过乙基-2-氰基-3-乙氧基戊-2-烯酸乙酯(3.2g，16.22mmol)与环丙基肼盐酸盐(2.11g，19.46mmol)反应制备标题化合物，得到2.35g呈油状的产物。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.87-0.93(m，2H)，1.07(t，J＝7.5Hz，3H)，1.23(t，J＝6.9Hz，3H)，1.35-1.44(m，2H)，2.56(q，J＝7.5Hz，2H)，3.13-3.17(m，1H)，4.15(q，J＝6.9Hz，2H)，6.16(s，2H)；APCI(m/z)224(M+H)+。
步骤2：5-氨基-1-环丙基-3-乙基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在水(3.0mL)和乙醇(23mL)中的氢氧化钾(1.15g，20.6mmol)，通过步骤1中间体(2.3g，10.30mmol)的酯水解制备标题中间体，得到1.10g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.87-0.94(m，4H)，1.07(t，J＝7.8Hz，3H)，2.55(q，J＝7.8Hz，2H)，3.13-3.17(m，1H)，6.12(s，2H)，11.80(br s，1H)。
步骤3：5-氨基-1-环丙基-3-乙基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(430mg，7.3mmol)，通过步骤2中间体(950mg，4.36mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(1.15g，4.86mmol)反应制备标题化合物，得到1.05g呈粘性油状的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.88-1.09(m，4H)，1.05(t，J＝7.8Hz，3H)，2.55(q，J＝7.8Hz，2H)，3.15-3.19(m，1H)，5.19(s，2H)，6.30(s，2H)，7.26(t，J＝8.7Hz，2H)，7.62-7.72(m，1H)；APCI(m/z)350(M+H)+。
中间体148
5-氨基-1-(2-氯-4-氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002001
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(323mg，5.56mmol)，通过5-氨基-1-(2-氯-4-氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(1.0g，3.70mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(866mg，3.70mmol)反应制备标题化合物，得到1.01g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.21(s，3H)，5.36(s，2H)，6.39(s，2H)，7.38(t，J＝8.4Hz，1H)，7.52-7.61(m，4H)，7.69-7.74(m，1H)，7.80(d，J＝7.8Hz，1H)；APCI(m/z)424(M+H)+。
中间体149
5-氨基-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯-5-(新戊酰氨基甲基)苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002011
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(5.0mL)中的氟化钾(181mg，3.13mmol)，通过5-氨基-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸(470mg，2.08mmol)与N-[3-(溴乙酰基)-4-氯苄基]-2，2-二甲基丙酰胺(723mg，2.08mmol)反应制备标题化合物，得到705mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.12(s，9H)，1.67-1.73(m，2H)，1.80-2.00(m，3H)，2.16(s，3H)，3.35-3.48(m，2H)，3.91-3.98(m，2H)，4.28(d，J＝6.0Hz，2H)，5.28(s，2H)，6.35(s，2H)，7.40(d，J＝8.7Hz，1H)，7.53(d，J＝7.8Hz，1H)，7.61(s，1H)，8.17(s，1H)；APCI(m/z)491(M+H)+。
中间体150
5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-氧代-2-(2-(三氟甲基)苯基)乙酯
Figure BDA0002350595300002021
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(8.0mL)中的氟化钾(411mg，7.08mmol)，通过5-氨基-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(800mg，4.72mmol)与2-溴-1-[2-(三氟甲基)苯基]乙酮(1.11g，4.72mmol)反应制备标题化合物，得到1.23g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.19(t，J＝6.9Hz，3H)，2.10(s，3H)，3.84(q，J＝6.9Hz，2H)，5.31(s，2H)，6.29(s，2H)，7.79-7.95(m，4H)。
中间体151
5-氨基-1-环丁基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002022
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(15mL)中的氟化钾(830mg，14.23mmol)，通过5-氨基-1-环丁基-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(1.85g，9.48mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(2.45g，10.43mmol)反应制备标题化合物，得到2.06g呈固体的产物。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.62-2.00(m，2H)，2.17(s，3H)，2.18-2.34(m，2H)，2.37-2.56(m，2H)，4.65-4.72(m，1H)，5.30(s，2H)，6.27(s，2H)，7.46-7.62(m，3H)，7.76(d，J＝7.2Hz，1H)。
中间体152
5-氨基-3-(2-氯苄基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002031
步骤1：5-氨基-3-(2-氯苄基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲腈
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(30mL)中的N，N-二异丙基乙胺(4.2mL，24.07mmol)，通过[2-(2-氯苯基)-1-甲氧基亚乙基]丙二腈(2.8g，12.03mmol)与硫酸甲肼(1.73g，12.03mmol)反应制备标题化合物，得到1.55g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：□3.44(s，3H)，3.88(s，2H)，6.53(s，2H)，7.27(s，3H)，7.39-7.42(m，1H)；APCI(m/z)245(M-H)-。
步骤2：5-氨基-3-(2-氯苄基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
将步骤1中间体(2.35g，9.52mmol)和氢氧化钠(3.85g，95.2mmol)在水(40mL)中的混合物回流72h。将混合物冷却到RT，并用乙酸乙酯(2 x 75mL)洗涤。收集水层并用1N柠檬酸进行酸化。过滤沉淀的固体并用水(20mL)洗涤。将固体在真空下干燥，得到2.06g标题产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：□3.45(s，3H)，4.04(s，2H)，6.19(s，2H)，7.08(s，1H)，7.18-7.22(m，2H)，7.35-7.40(m，1H)，11.08(br s，1H)；APCI(m/z)264(M-H)-。
步骤3：5-氨基-3-(2-氯苄基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(330mg，5.04mmol)，通过步骤2中间体(1.0g，3.76mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(970mg，4.14mmol)反应制备标题化合物，得到1.3g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：□3.47(s，3H)，4.05(s，2H)，5.27(s，2H)，6.34(s，2H)，7.11-7.14(m，1H)，7.15-7.25(m，2H)，7.32-7.52(m，2H)，7.54-7.57(m，2H)，7.73(d，J＝7.8Hz，1H)；APCI(m/z)418(M)+。
中间体153
5-氨基-3-乙基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002041
步骤1：5-氨基-3-乙基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在乙醇(45mL)中的N，N-二异丙基乙胺(6.9mL，40.60mmol)，通过2-氰基-3-乙氧基戊-2-烯酸乙酯(4.0g，20.304mmol)与4-(2-肼基乙基)吗啉(3.5g，24.36mmol)反应制备标题化合物，得到2.85g呈液体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.08(t，J＝7.2Hz，3H)，1.24(t，J＝6.3Hz，3H)，2.37-2.45(m，4H)，2.47-2.64(m，4H)，3.53-3.59(m，4H)，3.94(t，J＝6.3Hz，2H)，4.15(q，J＝7.2Hz，2H)，6.26(s，2H)。
步骤2：5-氨基-3-乙基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体91的步骤2中所述的程序，使用氢氧化钾的水溶液(2.0M，20mL，37.918mmol)和乙醇(20mL)，通过步骤1中间体(2.8g，9.45mmol)的酯水解制备标题中间体，得到2.05g呈粘性固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.08(t，J＝7.8Hz，3H)，2.28-2.34(m，4H)，2.48-2.62(m，4H)，3.51-3.58(m，4H)，3.84-3.97(m，2H)，6.23(s，2H)，11.74(br.S，1H)。
步骤3：5-氨基-3-乙基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(20mL)中的氟化钾(650mg，11.19mmol)，通过步骤2中间体(2.0g，7.46mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(1.9g，8.20mmol)反应制备标题化合物，得到2.24g呈浓稠液体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.05(t，J＝7.2Hz，3H)，2.38-2.47(m，4H)，2.49-2.63(m，4H)，3.52-3.59(m，4H)，3.94(t，J＝7.2Hz，2H)，5.29(s，2H)，6.37(s，2H)，7.40-7.52(m，1H)，7.56(s，2H)，7.76(d，J＝7.2Hz，1H)，8.29(s，1H)。
中间体154
5-氨基-3-甲基-1-(3-吗啉代丙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002051
步骤1：5-氨基-3-甲基-1-(3-吗啉代丙基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(57mL)中的N，N-二异丙基乙胺(21.4mL，12.40mmol)，通过(2E)-2-氰基-3-乙氧基丁-2-烯酸乙酯(5.7g，31.10mmol)与4-(3-肼基丙基)吗啉(6.0g，37.70mmol)反应制备标题化合物，得到3.12g产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.34(t，J＝7.2Hz，3H)，1.98(t，J＝7.2Hz，2H)，2.18-2.30(m，2H)，2.32(s，3H)，2.38-2.50(m，4H)，3.65-3.78(m，4H)，3.93(t，J＝5.7Hz，2H)，4.27(q，J＝7.2Hz，2H)，6.14(s，2H)。
步骤2：5-氨基-3-甲基-1-(3-吗啉代丙基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在乙醇(20mL)中的氢氧化钾的水溶液(2M，2.34g，41.70mmol，在20mL水中)，通过步骤1中间体(3.10g，10.46mmol)的酯水解制备标题中间体，得到740mg呈白色固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.68-1.86(m，2H)，2.14(s，3H)，2.16-2.27(m，2H)，2.28-2.40(m，4H)，3.50-3.63(m，4H)，3.80(t，J＝6.3Hz，2H)，6.15(br s，2H)。
步骤3：5-氨基-3-甲基-1-(3-吗啉代丙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(9.5mL)中的氟化钾(234mg，4.02mmol)，通过步骤2中间体(720mg，2.68mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(690mg，2.95mmol)反应制备标题化合物，得到537mg产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.75-1.87(m，2H)，2.13(s，3H)，2.20-2.38(m，6H)，3.54-3.60(m，4H)，3.82(t，J＝6.5Hz，2H)，5.30(s，2H)，6.31(s，2H)，7.43-7.63(m，3H)，7.77(d，J＝6.6Hz，1H)。
中间体155
5-氨基-1-(2-((2R，6S)-2，6-二甲基吗啉代)乙基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002061
步骤1-：5-氨基-1-(2-((2S，6R)-2，6-二甲基吗啉代)乙基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(37mL)中的N，N-二异丙基乙胺(7mL，40.38mmol)，通过(2E)-2-氰基-3-乙氧基丁-2-烯酸乙酯(3.70g，20.19mmol)与(2S，6R)-4-(2-肼基乙基)-2，6-二甲基吗啉(4.2g，24.23mmol)反应制备标题化合物，得到3.0g呈油状的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.03(d，J＝5.7Hz，6H)，1.24(t，J＝7.2Hz，3H)，1.66(t，J＝10.8Hz，2H)，2.14(s，3H)，2.50-2.58(m，2H)，2.75-2.83(m，2H)，3.42-3.49(m，2H)，3.92(t，J＝6.6Hz，2H)，4.14(q，J＝6.3Hz，2H)，6.25(s，2H)。
步骤2：5-氨基-1-(2-((2S，6R)-2，6-二甲基吗啉代)乙基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在乙醇(20mL)中的氢氧化钾的水溶液(2M，2.2g，39.28mmol，在10mL水中)，通过步骤1中间体(2.9g，9.35mmol)的酯水解制备标题中间体，得到1.75g呈粘性固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.01(d，J＝9.0Hz，6H)，1.58-1.78(m，2H)，2.11(s，3H)，2.43-2.50(m，2H)，2.72-2.83(m，，2H)，3.42-3.59(m，2H)，3.82-3.96(m，2H)，6.19(s，2H)；ESI(m/z)281(M-H)-
步骤3：5-氨基-1-(2-((2S，6R)-2，6-二甲基吗啉代)乙基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(15mL)中的氟化钾(525mg，525mmol)，通过步骤2中间体(1.70g，6.02mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(1.70g，7.23mmol)反应制备标题化合物，得到1.72g呈粘性固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.03(t，J＝6.6Hz，6H)，1.65(t，J＝11.1Hz，2H)，2.13(s，3H)，2.49-2.2.60(m，2H)，2.73-2.84(m，2H)，3.43-3.3.59(m，2H)，3.89-3.99(m，2H)，5.30(s，2H)，6.36(s，2H)，7.44-7.60(m，3H)，，7.77(d，J＝6.6Hz，1H)。
中间体156
5-氨基-3-甲基-1-(2-(哌啶-1-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002081
步骤1：5-氨基-3-甲基-1-(2-(哌啶-1-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸苄酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(15mL)中的N，N-二异丙基乙胺(2.1mL，12.24mmol)，通过(E)-2-氰基-3-乙氧基丁-2-烯酸苄酯(1.5g，6.12mmol)与1-(2-肼基乙基)哌啶(1.1g，7.34mmol)反应制备标题化合物，得到1.05g呈油状的产物。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.30-1.57(m，6H)，，2.13(s，3H)，2.26-2.44(m，4H)，3.30-3.42(m，2H)，3.89(t，J＝6.6Hz，2H)，5.18(s，2H)，6.35(s，2H)，7.24-7.42(m，5H)。步骤2：5-氨基-3-甲基-1-(2-(哌啶-1-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体87的步骤5中所述的程序，使用在甲醇(10mL)中的钯/碳(10％，300mg)，通过步骤1中间体(1.0g，2.92mmol)的去保护制备标题中间体，得到740mg呈粘性固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.68-1.85(m，6H)，2.16(s，3H)，2.80-3.00(m，2H)，3.30-3.50(m，2H)，4.32(t，J＝6.6Hz，2H)，6.39(br s，2H)，10.47(br s，1H)。
步骤3：5-氨基-3-甲基-1-(2-(哌啶-1-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(8.0mL)中的氟化钾(252mg，4.33mmol)，通过步骤2中间体(730mg，2.89mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(812mg，3.47mmol)反应制备标题化合物，得到310mg呈粘性油状的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.28-1.53(m，6H)，，2.11(s，3H)，2.25-2.60(m，4H)，3.12-3.17(m，2H)，3.91(t，J＝6.6Hz，2H)，5.28(s，2H)，6.41(br s，2H)，7.42-7.59(m，3H)，7.80(d，J＝6.6Hz，1H)；ESI(m/z)405(M+H)+。
中间体157
5-氨基-1-(2-吗啉代乙基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002091
步骤1：(E)-3-氯-2-氰基-4，4，4-三氟丁-2-烯酸乙酯
按照中间体39的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(50mL)中的钠金属(2.1g，88.40mmol)，通过氰基乙酸乙酯(10.0g，88.40mmol)与三氟乙酸乙酯(15.5g，108.73mmol)进行反应，接着用在二氯甲烷(100mL)中的五氯化磷(18.4g，88.40mmol)进行处理，由此制备标题化合物，得到5.0g呈油状的所需产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.33-1.49(m，3H)。4.37-4.53(m，2H)。
步骤2：5-氨基-1-(2-吗啉代乙基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(50mL)中的三乙胺(7.6mL，53.84mmol)，通过步骤1中间体(4.9g，21.53mmol)与4-(2-肼基乙基)吗啉(3.5g，21.53mmol)反应制备标题化合物，得到1.35g呈油状的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.34(t，J＝7.5Hz，3H)，2.57-2.68(m，4H)，2.73-2.81(m，2H)，3.68-3.97(m，4H)，4.14-4.20(m，2H)，4.30(q，J＝6.9Hz，2H)，6.65(br s，2H)。
步骤3：5-氨基-1-(2-吗啉代乙基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在乙醇(10mL)中的氢氧化钾的水溶液(2M，0.440g，7.73mmol，在6.5mL水中)，通过步骤2中间体(1.30g，3.86mmol)的酯水解制备标题中间体，得到960mg呈白色固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.47-2.82(m，6H)，3.55-3.64(m，4H)，4.14(t，J＝6.6Hz，2H)，6.70(br s，2H)，12.12-13.28(m，1H)；ESI(m/z)309(M+H)+。
步骤４：5-氨基-1-(2-吗啉代乙基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(9.5mL)中的氟化钾(265mg，4.57mmol)，通过步骤3中间体(940mg，3.04mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(790mg，3.35mmol)反应制备标题化合物，得到720mg呈粘性油状的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.60-2.74(m，4H)，2.78-2.85(m，2H)，3.70-3.80(m，4H)，4.17-4.24(sm 2H)，5.38(s，2H)，6.80(br s，2H)，7.36-7.48(m，3H)，，7.66(d，J＝6.6Hz，1H)。
中间体158
5-氨基-3-甲基-1-(2-(吡咯烷-1-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002101
步骤1：5-氨基-3-甲基-1-(2-(吡咯烷-1-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸苄酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在乙醇(40mL)中的N，N-二异丙基乙胺(5.58mL，32.65mmol)，通过(E)-2-氰基-3-乙氧基丁-2-烯酸苄酯(4.0g，16.32mmol)与1-(2-肼基乙基)吡咯烷(2.52g，19.59mmol)反应制备标题化合物，得到1.95g产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.60-1.75(m，4H)，2.14(s，3H)，2.44-2.58(m，4H)，2.70-2.79(m，2H)，3.92(t，J＝6.6Hz，2H)，5.19(s，2H)，6.30(s，2H)，7.24-7.40(m，5H)。
步骤2：5-氨基-3-甲基-1-(2-(吡咯烷-1-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体87的步骤5中所述的程序，使用在甲醇(20mL)中的钯/碳(10％，600mg)，通过步骤1中间体(1.90g，5.79mmol)的去保护制备标题中间体，得到1.21g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.84-1.93(m，4H)，2.17(s，3H)，2.44-2.56(m，6H)，4.17-4.24(m，2H)，6.37(s，2H)。
步骤3：5-氨基-3-甲基-1-(2-(吡咯烷-1-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(6.0mL)中的氟化钾(219mg，3.78mmol)，通过步骤2中间体(600mg，2.52mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(653mg，2.77mmol)反应制备标题化合物，得到289mg产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.63-1.75(m，4H)，2.11(s，3H)，2.40-2.64(m，4H)，2.67-2.76(m，2H)，3.89-4.00(m，2H)，5.29(s，2H)，6.36(s，2H)，7.45-7.59(m，2H)，7.73(d，J＝6.9Hz，1H)。
中间体159
5-氨基-3-甲基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-氧代-2-(2-(三氟甲基)苯基)乙酯
Figure BDA0002350595300002111
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(8.0mL)中的氟化钾(257mg，4.42mmol)，通过步骤2的中间体91(750mg，2.95mmol)与2-溴-1-(2-(三氟甲基)苯基)乙酮(768mg，3.24mmol)反应制备标题化合物，得到940mg呈粘性固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.10(s，3H)，2.40-2.64(m，6H)，3.52-3.60(m，4H)，3.94(t，J＝6.6Hz，2H)，5.31(s，2H)，6.38(s，2H)，7.78-7.95(m，4H)。
中间体160
5-氨基-3-甲基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002121
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(8.0mL)中的氟化钾(274mg，4.72mmol)，通过5-氨基-3-甲基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑-4-羧酸步骤2中间体91(800mg，3.14mmol)与2-溴-1-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙酮(987mg，3.46mmol)反应制备标题化合物，得到1.01g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.17(s，3H)，2.40-2.56(m，4H)，2.59(t，J＝6.8Hz，2H)，3.50-3.60(m，4H)，3.95(t，J＝6.6Hz，2H)，5.38(s，2H)，6.38(s，2H)，7.60(t，J＝8.1Hz，1H)，8.09(t，J＝7.2Hz，1H)，8.19(t，J＝6.9Hz，1H)。
中间体161
5-氨基-1-(2-(二甲基氨基)乙基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002122
步骤1：5-氨基-1-(2-(二甲基氨基)乙基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水甲醇(100mL)中的三乙胺(11.5mL，81.96mmol)，通过(E)-3-氯-2-氰基-4，4，4-三氟丁-2-烯酸乙基乙酯(10g，40.98mmol)与2-肼基-N，N-二甲基乙胺(4.3g，40.98mmol)反应制备标题化合物，得到1.68g呈油状的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.23(t，J＝7.2Hz，3H)，2.17(s，6H)，2.57(t，J＝6.3Hz，2H)，4.07(t，J＝6.3Hz，2H)，4.18(q，J＝7.2Hz，2H)，6.72(s，2H)。
步骤2：5-氨基-1-(2-(二甲基氨基)乙基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在乙醇(16mL)中的氢氧化钾的水溶液(609mg，10.88mmol，在6.0mL水中)，通过步骤1中间体(1.6g，5.44mmol)的酯水解制备标题中间体，得到745mg呈白色固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.18(s，6H)，2.58(t，J＝6.3Hz，3H)，4.06(t，J＝6.6Hz，2H)，6.65(br s，2H)；APCI(m/z)267(M+H)+。
步骤3：5-氨基-1-(2-(二甲基氨基)乙基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(7.0mL)中的氟化钾(240mg，4.14mmol)，通过步骤2中间体(735mg，2.76mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(645mg，2.76mmol)反应制备标题化合物，得到533mg呈油状的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.19(s，6H)，2.60(t，J＝6.6Hz，2H)，4.10(t，J＝6.6Hz，2H)，5.38(s，2H)，6.85(s，2H)，7.47-7.55(m，1H)，7.59(d，J＝3.9Hz，2H)，7.80(d，J＝7.2Hz，1H)。
中间体162
5-氨基-3-甲基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002141
步骤1：5-氨基-3-甲基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在乙醇(15mL)中的N，N-二异丙基乙胺(2.80mL，16.34mmol)，通过(2E)-2-氰基-3-乙氧基丁-2-烯酸乙酯(1.50g，8.17mmol)与1-(2-肼基乙基)-4-甲基哌嗪(1.55g，9.80mmol)反应制备标题化合物，得到1.5g呈油状的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.35(t，J＝6.9Hz，3H)，2.31(s，6H)，2.35-2.80(m，10H)，4.02(t，J＝5.1Hz，2H)，4.27(q，J＝6.9Hz，2H)，6.30(s，2H)。
步骤2：5-氨基-3-甲基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在IPA(15mL)中的氢氧化钾的水溶液(550mg，9.8mmol，在6mL水中)，通过步骤1中间体(1.45g，4.90mmol)的酯水解制备标题中间体。然后在减压下蒸发溶剂，接着与异丙醇(3 x 75mL)共蒸馏，得到粗产物，粗产物直接用于下一步。
步骤3：5-氨基-3-甲基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(12.0mL)中的氟化钾(390mg，6.73mmol)，通过步骤2中间体(1.20g，4.4mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(1.11g，4.93mmol)反应制备标题化合物，得到910mg呈白色固体的产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ2.27(s，3H)，2.33(s，3H)，2.40-2.77(m，10H)，4.00-4.08(m，2H)，5.32(s，2H)，6.37(br s，2H)，7.35-7.42(m，1H)，7.44(d，J＝3.3Hz，2H)，7.65(d，J＝6.9Hz，1H)。
中间体163
5-氨基-3-乙基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑-4-羧酸3-(2，6-二氟苯基)-2-氧代丙酯
Figure BDA0002350595300002151
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(20.0mL)中的氟化钾(560mg，9.62mmol)，通过步骤2中间体153(1.9g，6.41mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(1.51g，6.41mmol)反应制备标题化合物，得到1.94g产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.07(t，J＝7.2Hz，3H)，2.38-2.63(m，8H)，3.51-3.60(m，4H)，3.94-4.00(m，2H)，5.19(s，2H)，6.38(s，2H)，7.27(t，J＝8.7Hz，2H)，7.60-7.69(m，1H)。
中间体164
1-(2-(1H-吡唑-1-基)乙基)-5-氨基-3-乙基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002152
步骤1：1-(2-(1H-吡唑-1-基)乙基)-5-氨基-3-乙基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在IPA(40mL)中的N，N-二异丙基乙胺(6.94，40.59mmol)，通过(E)-2-氰基-3-乙氧基戊-2-烯酸乙酯(4.0g，20.30mmol)与1-(2-肼基乙基)-1H-吡唑(3.0g，23.77mmol)反应制备标题化合物，得到2.88g呈油状的产物。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.09(t，J＝7.5Hz，3H)，1.23(t，J＝6.9Hz，3H)，2.59(q，J＝7.8Hz，2H)，4.14(q，J＝7.2Hz，2H)，4.19-4.28(m，2H)，4.37-4.44(m，2H)，6.11(s，2H)，6.19(s，1H)，7.44(s，1H)，7.51(s，1H)
步骤2：1-(2-(1H-吡唑-1-基)乙基)-5-氨基-3-乙基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在IPA(28mL)中的氢氧化钾的水溶液(2M，1.19g，21.25mmol，在12mL水中)，通过步骤1中间体(2.8g，10.63mmol)的酯水解制备标题中间体，得到2.0g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.09(t，J＝7.5Hz，2H)，2.58(t，J＝7.2Hz，3H)，4.21(t，J＝6.3Hz，2H)，4.41(t，J＝6.0Hz，2H)，6.10(br，s，2H)，6.19(s，1H)，7.44(s，1H)，7.51(s，1H)。
步骤3：1-(2-(1H-吡唑-1-基)乙基)-5-氨基-3-乙基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(350mg，6.03mmol)，通过步骤2中间体(1.00g，4.01mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(940mg，4.01mmol)反应制备标题化合物，得到1.19g产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.07(t，J＝7.2Hz，3H)，2.47-2.60(m，2H)，4.23(t，J＝6.3Hz，2H)，4.42(t，J＝6.8Hz，2H)，5.18(s，2H)，6.15-6.25(m，3H)，7.25(t，J＝8.7Hz，2H)，7.44(s，1H)，7.52(s，1H)，7.65-7.70(m，1H)。
中间体165
1-(2-(1H-吡唑-1-基)乙基)-5-氨基-3-乙基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002171
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(350mg，6.02mmol)，通过步骤2的中间体164(1.0g，4.01mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(936mg，4.00mmol)反应制备标题化合物，得到1.41g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.07(t，J＝7.2Hz，3H)，2.57(q，J＝7.8Hz，2H)，4.20-4.37(m，2H)，4.39-4.45(m，2H)，5.30(s，2H)，6.20(br，s，2H)，6.24(s，1H)，7.44-7.62(m，5H)，7.77(d，J＝7.2Hz，1H)。
中间体166
5-氨基-3-乙基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002172
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(520mg，8.8mmol)，通过步骤2的中间体75(1.0g，5.9mmol)与2-溴-1-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙酮(1.85g，6.5mmol)反应制备标题化合物，得到1.30g呈粘性固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.11(t，J＝7.2Hz，3H)，2.61(q，J＝7.2Hz，2H)，3.49(s，3H)，5.58(s，2H)，6.27(s，2H)，7.74(t，J＝9.6Hz，1H)，8.31(d，J＝6.9Hz，1H)，8.36-8.44(m，1H)
中间体167
5-氨基-3-乙基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002181
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(15mL)中的氟化钾(440mg，7.54mmol)，通过步骤2的中间体75(850mg，5.02mmol)与2-溴-1-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙酮(1.6g，5.53mmol)反应制备标题化合物，得到1.15g呈白色固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.09(t，J＝7.5Hz，3H)，2.60(q，J＝7.2Hz，2H)，3.48(s，3H)，5.38(s，2H)，6.27(s，2H)，7.58(t，J＝6.9Hz，1H)，8.09(t，J＝7.2Hz，1H)，8.19(t，J＝6.9Hz，1H)。
中间体168
5-氨基-3-乙基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，4-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002182
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(15mL)中的氟化钾(515mg，8.87mmol)，通过步骤2的中间体75(1.00g，5.91mmol)与2-溴-1-(2，4-二氟苯基)乙酮(1.40g，5.91mmol)反应制备标题化合物，得到1.45g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.10(t，J＝7.2Hz，3H)，2.61(q，J＝6.3Hz，2H)，3.48(s，3H)，5.33(s，2H)，6.26(s，2H)，7.29(t，J＝7.2Hz，1H)，7.50(t，J＝6.9Hz，1H)，7.98(t，J＝7.2Hz，1H)。
中间体169
5-氨基-3-乙基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(3，5-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002192
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(525mg，8.87mmol)，通过步骤2中间体75(1.0g，5.91mmol)与2-溴-1-(3，5-二氟苯基)乙酮(1.40g，5.91mmol)反应制备标题化合物，得到1.06g呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.09(t，J＝7.5Hz，3H)，2.59(t，J＝7.5Hz，2H)，3.47(s，3H)，5.50(s，2H)，6.25(s，2H)，7.58-7.76(m，3H)；ESI(m/z)324(M+H)。
中间体170
5-氨基-3-乙基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，5-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002191
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(525mg，8.87mmol)，通过步骤2中间体75(1.0g，5.91mmol)与2-溴-1-(2，5-二氟苯基)乙酮(1.40g，5.91mmol)反应制备标题化合物，得到420mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.10(t，J＝7.8Hz，3H)，2.61(q，J＝7.2Hz，2H)，3.48(s，3H)，5.35(s，2H)，6.27(br s，2H)，7.40-7.75(m，3H)。
中间体171
5-氨基-3-乙基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002201
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(18mL)中的氟化钾(569mg，9.79mmol)，通过步骤2的中间体153(1.75g，6.52mmol)与2-溴-1-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙酮(2.04g，7.18mmol)反应制备标题化合物，得到1.54g产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.09(t，J＝6.9Hz，3H)，2.38-2.49(m，4H)，2.57-2.64(m，4H)，3.52-3.64(m，4H)，3.97(t，J＝6.9Hz，2H)，5.38(s，2H)，6.39(s，2H)，7.57(t，J＝7.2Hz，1H)，8.09(t，J＝6.9Hz，1H)，8.20(t，J＝7.2Hz，1H)。
中间体172
5-氨基-3-乙基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002202
步骤1：5-氨基-3-乙基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在乙醇(40mL)中的N，N-二异丙基乙胺(7.0mL，4056mmol)，通过2-氰基-3-乙氧基戊-2-烯酸乙酯(4.0g，20.28mmol)与1-(2-肼基乙基)-4-甲基哌嗪(3.85g，24.30mmol)反应制备标题化合物，得到1.65g呈粘性油状的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.08(t，J＝7.2Hz，3H)，1.24(t，J＝6.9Hz，3H)，2.19(s，3H)，2.24-2.64(m，12H)，3.92(t，J＝6.9Hz，2H)，4.14(q，J＝7.2Hz，2H)，6.26(s，2H)。
步骤2：5-氨基-3-乙基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在EtOH(15mL)中的氢氧化钾的水溶液(760mg，13.58mmol，在2.5mL水中)，通过步骤1中间体(2.10g，6.78mmol)的酯水解制备标题中间体。然后在减压下蒸发溶剂，接着与异丙醇(3 x 75ml)共蒸馏，得到粗产物，粗产物直接用于下一步。
步骤3：5-氨基-3-乙基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(16.0mL)中的氟化钾(510mg，8.80mmol)，通过步骤2中间体(1.65g，5.86mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(1.50g，6.44mmol)反应制备标题化合物，得到1.30g呈粘性油状的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.07(t，J＝7.2Hz，3H)，2.17(s，3H)，2.23-2.64(m，12H)，3.94(t，J＝6.6Hz，2H)，5.31(s，2H)，6.39(br s，2H)，7.45-7.55(m，1H)，7.58(d，J＝7.8Hz，2H)，7.78(d，J＝8.4Hz，1H)；ESI(m/z)434(M+H)+。
中间体173
5-氨基-3-乙基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002211
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(20.0mL)中的氟化钾(620mg，10.67mmol)，通过步骤2中间体172(2.0g，7.10mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(1.67g，7.10mmol)反应制备标题化合物，得到1.10g产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.06(t，J＝7.2Hz，3H)，2.19(s，3H)，2.24-2.64(m，12H)，3.92-4.04(m，2H)，5.19(s，2H)，6.39(br s，2H)，7.27(d，J＝9.0Hz，2H)，7.64-7.69(m，1H)。
中间体174
5-氨基-3-乙基-1-(2-(3-氧代吗啉代)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002221
步骤1：5-氨基-3-乙基-1-(2-(3-氧代吗啉代)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在乙醇(25mL)中的N，N-二异丙基乙胺(2.30mL，13.36mmol)，通过(E)-2-氰基-3-乙氧基戊-2-烯酸乙酯(1.30g，6.68mmol)与4-(2-肼基乙基)吗啉-3-酮(2.50g，6.68mmol)反应制备标题化合物，得到1.10g呈油状的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.09(t，J＝7.2Hz，3H)，1.24(t，J＝6.9Hz，3H)，2.60(q，J＝7.2Hz，2H)，3.10-3.18(m，2H)，3.54(t，J＝6.6Hz，2H)，3.72(t，J＝6.6Hz，2H)，3.96(s，2H)，4.02(q，J＝6.3Hz，2H)，4.15(q，J＝7.2Hz，2H)，6.22(s，2H)。
步骤2：5-氨基-3-乙基-1-(2-(3-氧代吗啉代)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在EtOH(10mL)中的氢氧化钾的水溶液(543mg，9.70mmol，在5.5mL水中)，通过步骤1中间体(1.50g，4.85mmol)的酯水解制备标题中间体。然后在减压下蒸发溶剂，并冻干或与异丙醇(3 x 75ml)共蒸馏，得到粗产物，使所得到的物质进入下一反应。
步骤3：5-氨基-3-乙基-1-(2-(3-氧代吗啉代)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(12mL)中的氟化钾(372mg，6.40mmol)，通过步骤2中间体(1.20g，4.27mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(1.20g，5.12mmol)反应制备标题化合物，得到560mg呈油状的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.07(t，J＝7.5Hz，3H)，2.55(q，J＝7.2Hz，2H)，3.10-3.20(m，2H)，3.55(t，J＝6.6Hz，2H)，3.72(t，J＝6.6Hz，2H)，3.97(s，2H)，4.04(t，J＝6.8Hz，2H)，5.31(s，2H)，6.35(s，2H)，7.48-7.59(m，2H)，7.78(d，J＝7.2Hz，1H)，7.95(s，1H)；ESI(m/z)434(M+H)+。
中间体175
5-氨基-3-乙基-1-(2-(3-氧代吗啉代)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002231
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(15mL)中的氟化钾(463mg，7.99mmol)，通过步骤2中间体174(1.5g，5.33mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(1.4g，5.87mmol)反应制备标题化合物，得到240mg呈粘性油状的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.07(t，J＝7.5Hz，3H)，2.55(q，J＝7.2Hz，2H)，3.10-3.20(m，2H)，3.53(t，J＝6.6Hz，2H)，3.71(t，J＝6.6Hz，2H)，3.95(s，2H)，4.01(t，J＝6.8Hz，2H)，5.17(s，2H)，6.32(s，2H)，7.26(t，J＝8.7Hz，2H)，7.62-7.69(m，1H)。
中间体176
5-氨基-3-甲基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002241
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(330mg，5.61mmol)，通过步骤2中间体162(1.0g，3.74mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(965mg，4.11mmol)反应制备标题化合物，得到770mg呈粘性油状的产物。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)：δ2.11(s，3H)，2.16(s，3H)，2.29-2.31(m，4H)，2.40-2.54(m，4H)，2.57(t，J＝7.0Hz，2H)，3.92(t，J＝6.5Hz，2H)，5.19(s，2H)，6.38(s，2H)，7.26(t，J＝8.5Hz，2H)，7.64-7.71(m，1H)；ESI(m/z)421.96(M+H)+。
中间体177
5-氨基-3-乙基-1-丙基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，4-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002242
步骤1：5-氨基-3-乙基-1-丙基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在乙醇(250mL)中的N，N-二异丙基乙胺(44mL，245mmol)，通过(E)-2-氰基-3-乙氧基戊-2-烯酸乙酯(25.0g，127mmol)与丙基肼(9.5g，127mmol)反应制备标题化合物，得到19.0g呈油状的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.80(t，J＝7.2Hz，3H)，1.07(t，J＝7.8Hz，3H)，1.22(t，J＝7.2Hz，3H)，1.61(q，J＝7.5Hz，2H)，2.56(q，J＝7.2Hz，2H)，3.74(t，J＝7.2Hz，2H)，4.13(q，J＝7.2Hz，2H)，6.14(s，2H)。
步骤2：5-氨基-3-乙基-1-丙基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在EtOH(190mL)中的氢氧化钾的水溶液(9.5g，168.8mmol，在140mL水中)，通过步骤1中间体(19.0g，84.44mmol)的酯水解制备标题中间体。然后在减压下蒸发溶剂，使得到的粗物质进入下一步。
步骤3：5-氨基-3-乙基-1-丙基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，4-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(20mL)中的氟化钾(884mg，15.23mmol)，通过步骤2中间体(2.0g，10.15mmol)与2-溴-1-(2，4-二氟苯基)乙酮(2.6g，11.17mmol)反应制备标题化合物，得到1.4g呈固体的产物。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)：δ0.84(t，J＝7.5Hz，3H)，1.11(t，J＝7.5Hz，3H)，1.66(q，J＝7.5Hz，2H)，2.61(t，J＝7.5Hz，2H)，3.79(t，J＝7.0Hz，2H)，5.34(s，2H)，6.29(s，2H)，7.26-7.32(m，2H)，7.47-7.53(m，2H)，7.96-8.03(m，2H)。
中间体178
5-氨基-3-乙基-1-丙基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002251
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(20mL)中的氟化钾(884mg，15.23mmol)，通过步骤2的中间体177(2.0g，10.15mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(2.6g，11.17mmol)反应制备标题化合物，得到1.9g呈固体的产物。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)：δ0.83(t，J＝7.5Hz，3H)，1.07(t，J＝7.5Hz，3H)，1.63(q，J＝7.0Hz，2H)，2.55(q，J＝8.0Hz，2H)，3.77(t，J＝7.0Hz，2H)，5.19(s，2H)，6.28(s，2H)，7.26(t，J＝8.5Hz，2H)，7.63-7.71(m，1H)。
中间体179
5-氨基-3-乙基-1-(2-(4-乙基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002261
步骤1：5-氨基-3-乙基-1-(4-乙基哌嗪-1-基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在乙醇(67mL)中的N，N-二异丙基乙胺(11.70mL，67.83mmol)，通过(E)-2-氰基-3-乙氧基戊-2-烯酸乙酯(6.7g，33.92mmol)与1-乙基-4-(2-肼基乙基)哌嗪(7.0g，40.70mmol)反应制备标题化合物，得到1.05g呈油状的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.91-1.21(m，6H)，1.25(t，J＝6.9Hz，3H)，2.48-2.64(m，10H)，2.58(t，J＝6.9Hz，2H)，3.90-4.15(m，4H)，4.17(t，J＝6.8Hz，2H)，6.27(s，2H)。
步骤2：5-氨基-3-乙基-1-(4-乙基哌嗪-1-基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在EtOH(20mL)中的氢氧化钾的水溶液(346mg，6.18mmol，在2mL水中)，通过步骤1中间体(1.00g，3.09mmol)的酯水解制备标题中间体。然后在减压下蒸发溶剂，得到混合物，使该混合物进入下一反应。
步骤3：5-氨基-3-乙基-1-(4-乙基哌嗪-1-基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(9mL)中的氟化钾(266mg，4.59mmol)，通过步骤2中间体(300g，3.06mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(863g，3.97mmol)反应制备标题化合物，得到420mg呈固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.99(t，J＝7.2Hz，3H)，1.07(q，J＝7.6Hz，3H)，2.41-2.6(m，10H)，3.95(t，J＝6.8Hz，2H)，5.20(s，2H)，6.41(s，2H)，7.27(t，J＝8.8Hz，2H)，7.68(q，J＝8.4Hz 1H)。
中间体180
5-氨基-3-乙基-1-(2-(4-乙基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002271
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(12mL)中的氟化钾(355mg，6.12mmol)，通过步骤2中间体179(1.2g，4.08mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(1.1g，4.89mmol)反应制备标题化合物，得到615mg呈液体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.89-1.34(m，6H)，2.53-2.84(m，12H)，2.79(t，J＝4.8Hz，3H)，4.06(t，J＝4.4Hz，2H)，5.36(s，2H)，6.40(s，2H)，7.39(t，J＝7.6Hz，1H)，7.45-7.48(m，2H)，7.65-7.69(m，1H)。
中间体181
5-氨基-3-乙基-1-(3-吗啉代丙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002281
步骤1：5-氨基-3-乙基-1-(3-吗啉代丙基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(90mL)中的N，N-二异丙基乙胺(15.6mL，9.12mmol)，通过(E)-2-氰基-3-乙氧基戊-2-烯酸乙酯(9.0g，45.6mmol)与4-(3-肼基丙基)吗啉(8.8g，54.75mmol)反应制备标题化合物，得到5.15g呈粘性油状的产物。1HNMR(400MHz，DMSO-d6))：δ1.23(t，J＝7.2Hz，3H)，1.36(t，J＝7.2Hz，3H)，2.00-2.08(m，2H)，2.33(t，J＝6.0Hz，2H)，2.41-2.58(m，4H)，2.75(q，J＝7.6Hz，2H)，3.78(t，J＝4.8Hz，4H)，3.97(t，J＝6.0Hz，2H)，4.29(q，J＝7.2Hz，2H)，6.16(br s，2H)。APCI(m/z)312(M+H)+。
步骤2：5-氨基-3-乙基-1-(3-吗啉代丙基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在EtOH(50mL)中的氢氧化钾的水溶液(1.84g，32.89mmol，9.0mL水)，通过步骤1中间体(5.1g，16.4mmol)的酯水解制备标题中间体。然后蒸发溶剂，并与异丙醇(4 x 25ml)共蒸馏，得到2.15g呈粘性油状的产物，将其直接用于下一步。
步骤3：5-氨基-3-乙基-1-(3-吗啉代丙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(20mL)中的氟化钾(401mg，6.9mmol)，通过步骤2中间体(1.3g，4.0mmol)与2-溴-1-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙酮(1.45g，5.0mmol)反应制备标题化合物，得到730mg呈固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.11(t，J＝7.2Hz，3H)，1.82(t，J＝6.8Hz，2H)，2.25(t，J＝6.8Hz，2H)，2.28-2.36(m，4H)，2.62(q，J＝7.6Hz，2H)，3.58(t，J＝4.8Hz，4H)，3.86(t，J＝6.8Hz，2H)，5.39(s，2H)，6.34(s，2H)，7.60(t，J＝7.6Hz，1H)，8.11(t，J＝6.4Hz，1H)，8.19(t，J＝6.8Hz，1H)；APCI(m/z)487(M+H)+。
中间体182
5-氨基-3-乙基-1-(3-吗啉代丙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002291
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(20mL)中的氟化钾(280mg，4.78mmol)，通过步骤2的中间体181(900mg，3.19mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(825g，3.50mmol)反应制备标题化合物，得到350mg产物。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ1.19-1.43(m，3H)，2.03-2.10(m，2H)，2.32-2.46(m，2H)，2.50-2.68(m，4H)，2.73(t，J＝7.2Hz，2H)，3.75-3.90(m，4H)，4.01(t，J＝6.0Hz，2H)，5.22(s，1H)，7.01(t，J＝8.4Hz，2H)，7.44-7.49(m，1H)。
中间体183
5-氨基-3-乙基-1-(3-吗啉代丙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，4-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002292
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(8mL)中的氟化钾(250mg，4.25mmol)，通过步骤2的中间体181(800mg，3.19mmol)与2-溴-1-(2，4-二氟苯基)乙酮(735g，3.11mmol)反应制备标题化合物，得到395mg产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.12(t，J＝7.2Hz，3H)，1.83(t，J＝6.8Hz，2H)，2.25(t，J＝7.2Hz，2H)，2.29-2.37(m，4H)，2.63(q，J＝7.6Hz，2H)，3.58(t，J＝4.8Hz，4H)，3.86(t，J＝6.8Hz，2H)，5.33(s，2H)，6.33(s，2H)，7.30(t，J＝8.4Hz，1H)，7.51(t，J＝6.8Hz，1H)，8.0(q，J＝6.8Hz，1H)。
中间体184
5-氨基-3-甲基-1-(2-(哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002301
步骤1：4-(2-肼基乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
向4-(2-氯乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(9.7g，38.9mmol)在乙醇(25ml)中的搅拌溶液中添加水合肼(19.5mL，38.9mmol)，并将所得反应混合物加热到60℃保持3h。在减压下蒸发溶剂，用水稀释，用乙醚(75ml x 4)萃取，将有机萃取物经Na2SO4干燥，并在减压下浓缩，得到9.6g呈无色油状的所需产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.45(s，9H)，2.38-2.45(m，4H)，2.52(t，J＝6.0Hz，2H)，2.88(t，J＝6.0Hz，2H)，3.04(br，s，3H)，3.39-3.69(m，4H)。
步骤2：4-(2-(5-氨基-4-(乙氧基羰基)-3-甲基-1H-吡唑-1-基)乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(65mL)中的N，N-二异丙基乙胺(15mL，87.4mmol)，通过(E)-2-氰基-3-乙氧基戊-2-烯酸乙酯(8.5g，43.7mmol)与4-(2-肼基乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(步骤1中间体，11.7g，48.07mmol)反应制备标题化合物，得到13g呈粘性油状的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6))：δ1.36(t，J＝7.2Hz，3H)，1.47(s，9H)，2.32(s，3H)，2.50-2.57(m，4H)，2.78(t，J＝4.4Hz，2H)，3.47(t，J＝4.8Hz，4H)，4.07(t，J＝4.8Hz，2H)，4.28(q，J＝7.2Hz，2H)，6.17(s，2H)。
步骤3：5-氨基-1-(2-(4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)乙基)-3-甲基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在EtOH(95mL)中的氢氧化钾的水溶液(2.8g，49.8mmol，20mL水)，通过步骤2中间体(9.5g，24.9mmol)的酯水解制备标题中间体。然后蒸发溶剂，并与异丙醇(4x25ml)共蒸馏，得到8.7g呈粘性油状的产物，将其直接用于下一步。
步骤4：4-(2-(5-氨基-4-((2-(2-氯苯基)-2-氧代乙氧基)羰基)-3-甲基-1H-吡唑-1-基)乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(85mL)中的氟化钾(2.2g，36.92mmol)，通过步骤3中间体(8.7g，24.6mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(6.4g，27.07mmol)反应制备标题化合物，得到8.9g呈液体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.48(s，9H)，2.30(s，3H)，2.59-2.64(m，4H)，2.87-2.98(m，2H)，3.50-3.57(m，4H)，4.12-4.17(m，2H)，5.35(s，2H)，6.31(s，2H)，7.27-7.42(m，17.45-7.48(m，2H)，7.64-7.69(m，1H)。
步骤5：5-氨基-3-甲基-1-(2-(哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
在0℃下向步骤4中间体(11.3g，22.37mmol)在无水乙酸乙酯(50ml)中的搅拌溶液中添加在乙酸乙酯(200ml)中的无水饱和盐酸，并将所得混合物在室温下搅拌过夜。在减压下蒸发溶剂，用NaHCO3饱和溶液碱化，用乙酸乙酯(150mlx3)萃取，并将合并的有机层经Na2SO4干燥并浓缩，得到8.9呈油状的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ2.13(s，3H)，2.58-2.67(m，6H)，2.98(t，J＝4.8Hz，4H)，3.94(t，J＝6.4Hz，2H)，5.31(s，2H)，6.37(s，2H)，7.47-7.53(m，1H)，7.57-7.61(m，2H)，7.76-7.80(m，1H)，8.12(br，s，1H)。ESI(m/z)406(M+H)+。
中间体185
5-氨基-3-甲基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002321
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(326mg，5.61mmol)，通过步骤2中间体162(1.0g，3.74mmol)与2-溴-1-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙酮(1.17g，4.11mmol)反应持续3h制备标题化合物，得到330mg呈粘性油状的产物。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)：δ1.98(s，3H)，2.17(s，3H)，2.21-2.52(m，8H)，2.59(t，J＝8.0Hz，2H)，3.94(t，J＝6.5Hz，2H)，5.38(s，2H)，6.39(s，2H)，7.59(t，J＝8.0Hz，2H)，8.10(t，J＝8.0Hz，1H)，8.19(t，J＝8.0Hz)。
中间体186
5-氨基-3-乙基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002322
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(20.0mL)中的氟化钾(620mg，10.67mmol)，通过步骤2中间体172(1.8g，6.39mmol)与2-溴-1-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙酮(2.00g，7.03mmol)反应持续4h制备标题化合物，得到800mg产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.10(t，J＝7.6Hz，3H)，2.16(s，3H)，2.20-2.65(m，12H)，3.95(t，J＝6.4Hz，2H)，5.38(s，2H)，6.42(br s，2H)，7.59(t，J＝7.6Hz，1H)，8.10(t，J＝6.8Hz，1H)，8.20(t，J＝6.4Hz，1H)。ESI(m/z)486(M+H)+。
中间体187
5-氨基-3-乙基-1-异戊基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002331
步骤1：5-氨基-3-乙基-1-异戊基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在IPA(60mL)中的N，N-二异丙基乙胺(11.0mL，65.38mmol)，通过(E)-2-氰基-3-乙氧基戊-2-烯酸乙酯(6.0g，32.69mmol)与异戊基肼(2.9g，39.23mmol)反应制备标题化合物，得到1.61g呈粘性油状的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6))：δ0.89(d，J＝6.0Hz，6H)，1.09(t，J＝7.6Hz，3H)，1.23(t，J＝7.2Hz，3H)，1.50-1.54(m，2H)，2.50(br s，2H)，2.54(q，J＝7.2Hz，2H)，3.82(t，J＝7.2Hz，1H)，4.15(q，J＝6.8Hz，2H)，6.16(s，2H)。
步骤2：5-氨基-3-乙基-1-异戊基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在EtOH(16mL)中的氢氧化钾的水溶液(719mg，12.85mmol，1.0mL水)，通过步骤1中间体(1.6g，6.42mmol)的酯水解制备标题中间体，得到1.10g呈灰白色固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6))：δ0.89(t，J＝6.4Hz，6H)，1.09(t，J＝7.6Hz，3H)，1.52(br s，3H)，2.58(q，J＝7.60Hz，2H)，3.80(t，J＝6.8Hz，2H)，6.13(s，2H)，11.69(br s，1H)。
步骤3：5-氨基-3-乙基-1-异戊基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(432mg，7.46mmol)，通过步骤2中间体(1.1g，4.97mmol)与2-溴-1-(2，4-二氟苯基)乙酮(1.28g，5.47mmol)反应制备标题化合物，得到1.25g呈棕色油状的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.88(d，J＝6.8Hz，6H)，1.05(t，J＝4.8Hz，3H)，1.51-1.54(m，3H)，2.49(q，J＝7.6Hz，2H)，3.83(d，J＝7.2Hz，2H)，5.20(s，2H)，6.28(s，2H)，7.26(t，J＝8.4Hz，2H)，7.65-7.69(m，1H)。
中间体188
5-氨基-3-乙基-1-异戊基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002341
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10.0mL)中的氟化钾(394mg，6.78mmol)，通过步骤2中间体1875-氨基-3-乙基-1-异戊基-1H-吡唑-4-羧酸(1.0g，4.52mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(1.16g，4.97mmol)反应持续4h制备标题化合物，得到950mg产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.90(d，J＝6.0Hz，6H)，1.05-1.09(m，3H)，1.49-1.51(m，2H)，2.49-2.51(m，3H)，3.83(t，J＝7.2Hz，2H)，5.31(s，2H)，6.28(s，2H)，7.50-7.56(m，1H)，7.58-7.60(m，2H)，7.79(t，J＝1.2Hz，1H)。
中间体189
5-氨基-3-(甲氧基甲基)-1-丙基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002351
步骤1：5-氨基-3-(甲氧基甲基)-1-丙基-1H-吡唑-4-甲腈
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(80mL)中的N，N-二异丙基乙胺(18.6mL，107.9mmol)，通过2-(1，2-二甲氧基亚乙基)丙二腈(8.2g，53.96mmol)与丙基肼(4.0g，53.96mmol)反应制备标题化合物，得到7.30g呈粘性油状的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6))：δ0.81(t，J＝7.6Hz，3H)，3.21(d，J＝3.2Hz，3H)，3.33(s，2H)，3.80(t，J＝7.20Hz，2H)，4.21(s，2H)，6.75(s，2H)；ESI(m/z)195(M+H)+。
步骤2：5-氨基-3-(甲氧基甲基)-1-丙基-1H-吡唑-4-羧酸
将步骤1中间体(7.3g，37.62mmol)和氢氧化钠(9.0g，225.7mmol)在水(90mL)中的悬浮液在90℃下加热72h。将混合物冷却到RT，并用1N柠檬酸进行酸化，直到pH 2-3。将水层用乙酸乙酯(75mL x 2)萃取，并将有机层经无水硫酸钠干燥。将溶液在减压下浓缩，得到3.8g呈固体的标题产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.82(t，J＝4.40Hz，3H)，1.63-1.68(m，2H)，3.18(d，J＝5.20Hz，3H)，3.79(t，J＝7.20Hz，2H)，4.35(s，2H)，6.21(s，2H)，11.91(brs，1H)。
步骤3：5-氨基-3-(甲氧基甲基)-1-丙基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(20mL)中的氟化钾(735mg，12.67mmol)，通过步骤2中间体(1.8g，8.45mmol)与2-溴-1-(2，4-二氟苯基)乙酮(2.2g，9.29mmol)反应制备标题化合物，得到2.2g呈固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.84(t，J＝7.2Hz，3H)，1.14-1.69(m，2H)，3.17(d，J＝5.2Hz，3H)，3.84(t，J＝6.8Hz，2H)，4.32(s，2H)，5.21(s，2H)，6.37(s，2H)，7.24(t，J＝8.4Hz，2H)，7.66-7.740(m，1H)。
中间体190
5-氨基-1-环丙基-3-(甲氧基甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002361
步骤1：5-氨基-1-环丙基-3-(甲氧基甲基)-1H-吡唑-4-甲腈
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(83mL)中的N，N-二异丙基乙胺(18.0mL，105mmol)，通过2-(1，2-二甲氧基亚乙基)丙二腈(8.0g，52.59mmol)与环丙基肼(6.85g，63.06mmol)反应制备标题化合物，得到4.9g呈粘性油状的产物。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ1.13-1.15(m，2)，1.68-1.70(m，2H)，3.10-3.12(m，1H)，3.44(s，3H)，4.39(s，2H)，4.60-4.70(brs，2H)。
步骤2：5-氨基-1-环丙基-3-(甲氧基甲基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体96的步骤2中所述的程序，通过步骤1中间体(4.9g，25.49mmol)与氢氧化钠(6.19g，152.9mmol)在水(50mL)中反应制备标题化合物，得到2.1g呈固体的所需产物。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.95-0.96(m，4H)，3.22-3.31(m，1H)，3.32(s，3H)，4.32(s，2H)，6.21(s，2H)，11.94(br s，1H)。
步骤3：5-氨基-1-环丙基-3-(甲氧基甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(20mL)中的氟化钾(866mg，14.91mmol)，通过步骤2中间体(2.1g，9.94mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(2.57g，10.33mmol)反应制备标题化合物，得到1.12g呈固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.93-0.98(m，4H)，3.28-3.30(m，1H)，3.33(s，3H)，4.30(s，2H)，5.21(s，2H)，6.39(s，2H)，7.27(td，J1＝2.0Hz，J2＝8.8Hz，2H)，7.66-7.698(m，1H)。
中间体191
5-氨基-1-(2-(2，2-二甲基-3-氧代吗啉代)乙基)-3-乙基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002371
步骤1：5-氨基-1-(2-(2，2-二甲基-3-氧代吗啉代)乙基)-3-乙基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(77mL)中的N，N-二异丙基乙胺(14.4mL，83.9mmol)，通过2-(1，2-二甲氧基亚乙基)丙二腈(7.7g，41.9mmol)与4-(2-肼基乙基)-2，2-二甲基吗啉-3-酮(9.5g，50.35mmol)反应制备标题化合物，得到2.74g呈粘性油状的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6))：δ1.10(t，J＝7.6Hz，3H)，1.23-1.26(m，9H)，2.59(q，J＝7.2Hz，2H)，3.07(t，J＝5.2Hz，2H)，3.51(t，J＝6.0Hz，2H)，3.67(t，J＝4.8Hz，2H)，4.02(t，J＝5.6Hz，2H)，4.15(q，J＝7.2Hz，2H)，6.22(s，2H)；APCI(m/z)312(M+H)+。
步骤2：5-氨基-1-(2-(2，2-二甲基-3-氧代吗啉代)乙基)-3-乙基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，使用在EtOH(30mL)中的氢氧化钾的水溶液(1.99g，35.6mmol，6.0mL水)，通过步骤1中间体(3.0g，8.90mmol)的酯水解制备标题中间体，得到2.4g粗产物，原样进入下一步。
步骤3：5-氨基-1-(2-(2，2-二甲基-3-氧代吗啉代)乙基)-3-乙基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(25mL)中的氟化钾(1.98g，8.43mmol)，通过步骤2中间体(2.37g，7.66mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(667mg，11.50mmol)反应制备标题化合物，得到1.02g呈固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：d1.08(t，J＝7.6Hz，3H)，1.23(s，6H)，2.54(q，J＝7.6Hz，2H)，3.08(t，J＝4.8Hz，2H)，3.52(t，J＝5.6Hz，2H)，3.67(t，J＝5.2Hz，2H)，4.03(t，J＝5.6Hz，2H)，5.20(s，2H)，6.35(s，2H)，7.23-7.29(m，2H)，7.64-7.71(m，1H)。
中间体191
5-氨基-1-甲基-3-(1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002381
步骤1：5-氨基-1-甲基-3-(1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-甲腈
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(50mL)中的N，N-二异丙基乙胺(6.0mL，0.034mol)，通过2-(甲氧基(1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)亚甲基)丙二腈(4.7g，0.017mol)与硫酸甲肼(2.52g，0.017mol)反应制备标题化合物，得到1.83g呈粘性油状的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6))：δ1.62-1.72(m，2H)，1.89-1.93(m，2H)，2.60-2.67(m，1H)，2.78-2.87(m，2H)，2.92(s，3H)，3.47(s，3H)，3.52-3.61(m，2H)，6.52(s，2H)。
步骤2：5-氨基-1-甲基-3-(1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体96的步骤2中所述的程序，通过步骤1中间体(1.9g，6.70mmol)与氢氧化钠(1.60g，40.23mmol)在水(20mL)中反应制备标题化合物，得到1.37g呈固体的所需产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.63-1.67(m，2H)，1.91-1.99(m，2H)，2.48(s，2H)，2.86(s，3H)，3.17-3.84(m，6H)，6.08-6.15(br s，2H)，11.78-12.00(br s，1H)。
步骤3：5-氨基-1-甲基-3-(1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(374mg，6.44mmol)，通过步骤2中间体(1.3g，4.29mmol)与2-溴-1-(2，4-二氟苯基)乙酮(1.11g，4.72mmol)反应制备标题化合物，得到1.06g呈固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.57-1.61(m，2H)，1.89-1.99(m，2H)，2.71-2.77(m，2H)，2.87(s，3H)，2.98-3.34(m，1H)，3.50(s，3H)，3.58-3.61(m，2H)，5.20(s，2H)，6.32(s，2H)，7.28(t，J＝0.8Hz，2H)，7.67-7.71(m，1H)。
中间体193
5-氨基-1-环丙基-3-(1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002401
步骤1：5-氨基-1-环丙基-3-(1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-甲腈
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(40mL)中的N，N-二异丙基乙胺(5.1mL，0.029mol)，通过2-(甲氧基(1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)亚甲基)丙二腈(4.0g，0.014mol)与环丙基肼盐酸盐(2.14g，0.014mol)反应制备标题化合物，得到1.41g呈粘性油状的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6))：δ0.93-0.96(m，4H)，1.62-1.87(m，2H)，1.87-1.93(m，2H)，2.59-2.65(m，1H)，2.77-2.86(m，3H)，3.13-3.20(m，1H)，3.33-3.46(m，2H)，3.61(d，J＝10.0Hz，2H)，6.60(s，2H)。
步骤2：5-氨基-1-环丙基-3-(1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体96的步骤2中所述的程序，通过步骤1中间体(1.4g，4.520mmol)与氢氧化钠(1.08g，27.14mmol)在水(15mL)中反应制备标题化合物，得到430mg呈固体的所需产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.93-1.17(m，4H)，1.57-1.66(m，2H)，1.89-1.99(m，2H)，2.72-3.35(m，7H)，3.57(d，J＝11.6Hz，2H)，6.10-6.16(br s，2H)，11.76-11.92(br s，1H)。
步骤3：5-氨基-1-环丙基-3-(1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(112mg，1.91mmol)，通过步骤2中间体(420mg，1.27mmol)与2-溴-1-(2，4-二氟苯基)乙酮(330mg，1.40mmol)反应制备标题化合物，得到420mg呈固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.96-0.98(m，4H)，1.54-1.87(m，2H)，1.89-1.91(m，2H)，2.70-2.99(m，5H)，3.16-3.20(m，2H)，3.45(d，J＝11.6Hz，2H)，5.20(s，2H)，6.35(s，2H)，7.25(t，J＝8.4Hz，2H)，7.65-7.72(m，1H)。
中间体194
5-氨基-3-乙基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-(2，4-二氟苯基)噻唑-5-基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002411
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(497mg，8.56mmol)，通过步骤2中间体55(880mg，5.71mmol)与2-溴-1-(2-(2，4-二氟苯基)噻唑-5-基)乙酮(2.0g，6.28mmol)反应制备标题化合物，得到1.81g呈固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.12(t，J＝7.6Hz，3H)，2.61(q，J＝7.6Hz，2H)，3.49(s，3H)，5.48(s，2H)，6.30(s，2H)，7.34(t，J＝2.4Hz，1H)，7.58-7.63(m，1H)，8.37(q，J＝2.4Hz，1H)，8.92(s，1H)；ESI(m/z)407(M+H)+。
中间体195
5-氨基-3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002412
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(230mg，3.96mmol)，通过步骤2中间体107(490mg，2.64mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(746mg，3.17mmol)反应制备标题化合物，得到310mg呈固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ3.21(s，3H)，3.52(s，3H)，4.32(s，2H)，5.21(s，2H)，6.34(s，2H)，7.26(t，J＝8.8Hz，2H)，7.65-7.70(m，1H)。
中间体196
5-氨基-1-甲基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002421
步骤1：5-氨基-1-甲基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-甲腈
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(50mL)中的N，N-二异丙基乙胺(8.3mL，47.9mmol)，通过2-(甲氧基(四氢-2H-吡喃-4-基)亚甲基)丙二腈(4.6g，23.95mmol)与硫酸甲肼(3.7g，23.95mmol)反应制备标题化合物，得到2.81g呈黄色固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.42-1.73(m，4H)，2.71-2.77(m，1H)，3.21-3.46(m，5H)，3.86-3.90(m，2H)，6.47(s，2H)。
步骤2：5-氨基-1-甲基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体96的步骤2中所述的程序，通过步骤1中间体(2.8g，13.59mmol)与氢氧化钠(3.3g，81.54mmol)在水(33mL)中反应制备标题化合物，得到1.30g呈白色固体的所需产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.57-1.70(m，4H)，2.55-2.67(m，1H)，3.11-3.32(m，2H)，3.52(s，3H)，3.88-3.89(m，2H)，6.13(s，2H)，11.91-11.94(br s，1H)。
步骤3：5-氨基-1-甲基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(7.0mL)中的氟化钾(255mg，4.39mmol)，通过步骤2中间体(660mg，2.93mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(758mg，3.22mmol)反应制备标题化合物，得到503mg呈粘性固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.57-1.70(m，4H)，3.08-3.15(m，1H)，3.17(d，J＝5.2Hz，2H)，3.35(s，3H)，3.85-3.88(m，2H)，5.19(s，2H)，6.30(s，2H)，7.24-7.28(m，2H)，7.65-7.69(m，1H)。
中间体197
5-氨基-1-环丙基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002431
步骤1：5-氨基-1-环丙基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-甲腈
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(40mL)中的N，N-二异丙基乙胺(7.2mL，41.66mmol)，通过2-(甲氧基(四氢-2H-吡喃-4-基)亚甲基)丙二腈(4.0g，20.83mmol)与环丙基肼盐酸盐(3.0g，20.83mmol)反应制备标题化合物，得到2.31g呈黄色固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.90-1.0(m，4H)，1.49-1.70(m，4H)，2.70-2.73(m，1H)，3.13-3.40(m，3H)，3.85-3.90(m，2H)，6.56(s，2H)；ESI(m/z)233(M+H)+。
步骤2：5-氨基-1-环丙基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体96的步骤2中所述的程序，通过步骤1中间体(2.0g，8.62mmol)与氢氧化钠(2.06g，51.72mmol)在水(20mL)中反应制备标题化合物，得到1.07g呈淡黄色固体的所需产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ0.90-1.0(m，4H)，1.61-1.91(m，4H)，3.12-3.17(m，1H)，3.28-3.44(m，2H)，3.82-3.88(m，2H)，12.16(br s，2H)；ESI(m/z)251(M+H)+。
步骤3：5-氨基-1-环丙基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(5.0mL)中的氟化钾(173mg，2.98mmol)，通过步骤2中间体(500mg，1.99mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(561mg，2.39mmol)反应制备标题化合物，得到551mg呈棕色油状的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.91-0.96(m，4H)，1.56-1.65(m，4H)，3.06-3.19(m，2H)，3.28-3.33(m，2H)，3.84-3.87(m，2H)，5.19(s，2H)，6.32(s，2H)，7.26(dt，J1＝2.0Hz，J2＝10.4Hz，2H)，7.64-7.71(m，1H)；ESI(m/z)406(M+H)+。
中间体198
5-氨基-1-甲基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002441
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10.0mL)中的氟化钾(315mg，5.4mmol)，通过步骤2中间体1965-氨基-3-乙基-1-异戊基-1H-吡唑-4-羧酸(810mg，3.60mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(930mg，3.96mmol)反应制备标题化合物，得到850mg呈粘性固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.58-1.71(m，4H)，3.08-3.14(m，1H)，3.30-3.49(m，2H)，3.51(s，3H)，3.85-3.88(m，2H)，5.31(s，2H)，6.30(s，2H)，7.47-7.51(m，1H)，7.58-7.59(m，2H)，7.68-7.79(m，1H)。
中间体199
5-氨基-1-甲基-3-(1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002451
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10.0mL)中的氟化钾(274mg，4.71mmol)，通过步骤2中间体192(950mg，3.14mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(806g，3.46mmol)反应制备标题化合物，得到630mg呈黄色固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.57-1.63(m，2H)，1.89-1.99(m，2H)，2.50-2.51(m，2H)，2.94(s，3H)，2.95-3.01(m，1H)，3.51(m，3H)，3.57-3.60(m，2H)，5.32(s，2H)，6.31(s，2H)，7.49-7.52(m，1H)，7.59-7.60(m，2H)，7.28(d，J＝7.6Hz，1H)。
中间体200
5-氨基-3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002452
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(470mg，8.1mmol)，通过步骤2中间体107(1.0g，5.40mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(1.4g，5.94mmol)反应制备标题化合物，得到870mg呈固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ3.19(s，3H)，3.55(s，3H)，4.34(s，2H)，5.32(s，2H)，6.33(s，2H)，7.47-7.51(m，1H)，7.57-7.59(m，2H)，7.79(d，J＝7.2Hz，1H)。
中间体201
5-氨基-1-(2-((2R，6S)-2，6-二甲基吗啉代)乙基)-3-乙基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002461
步骤1：5-氨基-1-(2-((2R，6S)-2，6-二甲基吗啉代)乙基)-3-乙基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(55mL)中的N，N-二异丙基乙胺(9.26mL，0.053mol)，通过(E)-2-氰基-3-乙氧基戊-2-烯酸乙酯(5.3g，0.026mmol)与(2R，6S)-4-(肼基甲基)-2，6-二甲基吗啉(5.57g，0.032mmol)反应制备标题化合物，得到4.7g呈粘性油状的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.03(d，J＝6.4Hz，2H)，1.09(t，J＝7.6Hz，6H)，1.23(t，J＝6.8Hz，4H)，1.67(t，J＝10.8Hz，2H)，2.50-2.62(m，4H)，2.79(d，J＝10.8Hz，2H)，3.51-3.54(m，2H)，3.94(t，J＝6.8Hz，2H)，4.16(q，J＝7.2Hz，2H)，6.27(s，2H)。
步骤2：5-氨基-1-(2-((2R，6S)-2，6-二甲基吗啉代)乙基)-3-乙基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，通过步骤1中间体(4.6g，0.014mmol)与氢氧化钾(1.67g，0.029mmol)在水(17mL)和乙醇(34mL)中反应制备标题化合物，得到2.83g呈固体的所需产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6))：δ1.04(d，J＝6.4Hz，3H)，1.09(t，J＝7.6Hz，6H)，1.68(t，J＝10.8Hz，2H)，1.99(s，2H)，2.49-2.61(m，2H)，2.79(d，J＝10.4Hz，2H)，3.50-3.55(m，2H)，3.93(t，J＝6.8Hz，2H)，6.23(s，2H)，11.76(br s，1H)。
步骤3：5-氨基-1-(2-((2R，6S)-2，6-二甲基吗啉代)乙基)-3-乙基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(15mL)中的氟化钾(441mg，7.60mmol)，通过步骤2中间体(1.50g，5.06mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(1.42g，6.08mmol)反应制备标题化合物，得到1.03g呈固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6))：δ1.03-1.09(m，9H)，1.68(t，J＝10.4Hz，2H)，2.49-2.58(m，4H)，2.80(d，J＝10.8Hz，2H)，3.51-3.54(m，2H)，3.96(t，J＝6.4Hz，2H)，5.20(s，2H)，5.76(s，2H)，7.24-7.29(m，2H)，7.65-7.69(m，1H)。
中间体202
5-氨基-1-(2-((2R，6S)-2，6-二甲基吗啉代)乙基)-3-乙基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002471
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(13mL)中的氟化钾(382mg，6.58mmol)，通过步骤2中间体201(1.30g，4.39mol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(1.23g，5.27mol)反应制备标题化合物，得到1.1g呈固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.03-1.09(m，9H)，1.67(t，J＝10.8Hz，2H)，2.50-2.59(m，4H)，2.80(t，J＝10.8Hz，2H)，3.51-3.54(m，2H)，3.96(t，J＝10.8Hz，2H)，5.76(s，2H)，6.39(s，2H)，7.47-7.51(m，1H)，7.58-7.59(m，2H)，7.78(d，J＝7.2Hz，1H)。
中间体203
5-氨基-3-乙基-1-(2-羟乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002481
步骤1：5-氨基-3-乙基-1-(2-羟乙基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(50mL)中的N，N-二异丙基乙胺(8.6mL，0.050mol)，通过(E)-2-氰基-3-乙氧基戊-2-烯酸乙酯(5.0g，0.025mol)与2-羟基乙肼(2.31g，0.030mol)反应制备标题化合物，得到4.46g呈粘性油状的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6))：δ1.11(dt，J1＝1.2Hz，J2＝5.4Hz，3H)，1.25(dt，J1＝1.2Hz，J2＝6.8Hz，3H)，2.60(q，J＝6.4Hz，2H)，3.88(t，J＝6.0Hz，2H)，4.14(t，J＝5.6Hz，2H)，4.18(q，J＝6.0Hz，2H)，4.92(br s，1H)，6.07(s，2H)。
步骤2：5-氨基-3-乙基-1-(2-羟乙基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，通过步骤1中间体(4.4g，0.019mol)与氢氧化钾(2.1g，0.029mol)在水(15mL)和乙醇(30mL)中反应制备标题化合物，得到2.73g呈固体的所需产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.10(t，J＝7.2Hz，3H)，2.59(q，J＝5.2Hz，2H)，3.64(q，J＝5.2Hz，2H)，3.87(t，J＝6.0Hz，2H)，4.92(t，J＝5.2Hz，1H)，6.04(s，2H)，11.80(s，1H)。
步骤3：5-氨基-3-乙基-1-(2-羟乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(27mL)中的氟化钾(1.18g，0.020mol)，通过步骤2中间体(2.70g，0.013mol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(3.82g，0.016mol)反应制备标题化合物，得到1.78g呈固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.08(t，J＝7.2Hz，3H)，2.56(q，J＝7.2Hz，2H)，3.66(q，J＝5.6Hz，2H)，3.89(t，J＝4.8Hz，2H)，4.93(t，J＝5.2Hz，1H)，5.20(s，2H)，6.20(s，2H)，7.26(t，J＝8.4Hz，2H)，7.65-7.69(m，1H)
中间体204
5-氨基-1-(4-氟苯基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002491
步骤1：5-氨基-1-(4-氟苯基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-甲腈
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(32mL)中的N，N-二异丙基乙胺(5.7mL，33.2mmol)，通过2-(甲氧基(四氢-2H-吡喃-4-基)亚甲基)丙二腈(3.2g，16.6mmol)与4-氟苯基肼盐酸盐(2.7g，16.6mmol)反应制备标题化合物，得到3.58g呈粘性油状的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6))：δ1.70-1.81(m，2H)，2.81-2.89(m，1H)，3.28-3.62(m，4H)，3.90-3.92(m，2H)，6.65(m，2H)，7.32-7.37(m，2H)，7.49-7.53(m，2H)。
步骤2：5-氨基-1-(4-氟苯基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体96的步骤2中所述的程序，通过步骤1中间体(3.5g，12.2mnmol)与氢氧化钠(2.9g，73.3mmol)在水(29mL)中反应制备标题化合物，得到2.73g呈固体的所需产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.67-1.73(m，3H)，3.24-3.41(m，4H)，3.89(m，2H)，6.30(brs，2H)，7.35(t，J＝8.8Hz，2H)，7.54-7.57(m，2H)，12.17(br s，1H)。
步骤3：5-氨基-1-(4-氟苯基)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(285mg，4.90mmol)，通过步骤2中间体(1.0g，3.27mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(924mg，3.93mmol)反应制备标题化合物，得到905mg呈固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.64-1.68(m，2H)，1.70-1.79(m，2H)，3.16-3.20(m，1H)，3.34-3.39(m，2H)，3.88-3.91(m，2H)，5.27(s，2H)，6.44(s，2H)，7.26-7.35(m，2H)，7.35-7.39(m，2H)，7.54-7.58(m，2H)，7.67-7.72(m，1H)。
中间体205
5-氨基-1-(2-(4，4-二氟哌啶-1-基)乙基)-3-乙基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002501
步骤1：5-氨基-1-(2-(4，4-二氟哌啶-1-基)乙基)-3-乙基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(25mL)中的N，N-二异丙基乙胺(4.4mL，25.3mmol)，通过(E)-2-氰基-3-甲氧基戊-2-烯酸乙酯(2.5g，12.67mmol)与4，4-二氟-1-(2-肼基乙基)哌啶(2.72g，15.2mmol)反应制备标题化合物，得到1.55g呈粘性油状的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6))：δ1.21-1.41(m，6H)，2.03-2.12(m，4H)，2.72-2.84(m，6H)，2.93-2.96(m，2H)，4.16-4.20(m，2H)，4.30(q，J＝7.2Hz，2H)，6.15(s，2H)；ESI(m/z)331(M+H)+。
步骤2：5-氨基-1-(2-(4，4-二氟哌啶-1-基)乙基)-3-乙基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，通过步骤1中间体(1.5g，4.5mnmol)与氢氧化钾(510mg，6.08mmol)在水(50mL)和乙醇(15mL)中反应制备标题化合物，得到190mg呈固体的所需产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.09(t，J＝7.6Hz，3H)，1.88-1.99(m，4H)，2.50-2.61(m，6H)，2.67(t，J＝6.4Hz，2H)，3.93(t，J＝6.8Hz，2H)，6.22(s，2H)，11.72(s，1H)；ESI(m/z)303(M+H)+。
步骤3：5-氨基-1-(2-(4，4-二氟哌啶-1-基)乙基)-3-乙基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(9mL)中的氟化钾(250mg，4.31mmol)，通过步骤2中间体(870mg，2.87mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(820mg，3.45mmol)反应制备标题化合物，得到340mg呈固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.07(t，J＝7.6Hz，3H)，1.88-1.98(m，4H)，2.50-2.68(m，4H)，2.73(s，2H)，2.89(s，2H)，3.96(t，J＝6.8Hz，2H)，5.20(s，2H)，6.38(s，2H)，7.26(t，J＝8.4Hz，2H)，7.64-7.71(m，1H)；ESI(m/z)457(M+H)+。
中间体206
5-氨基-1-(3-((2R，6S)-2，6-二甲基吗啉代)丙基)-3-乙基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002511
步骤1：5-氨基-1-(3-((2R，6S)-2，6-二甲基吗啉代)丙基)-3-乙基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(70mL)中的N，N-二异丙基乙胺(12.3mL，0.070mol)，通过(E)-2-氰基-3-甲氧基戊-2-烯酸乙酯(7.0g，0.035mol)与(2R，6S)-4-(3-肼基丙基)-2，6-二甲基吗啉(7.96g，0.042mol)反应制备标题化合物，得到3.0g呈粘性油状的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.02-1.06(m，8H)，1.10(t，J＝7.6Hz，2H)，1.25(t，J＝7.2Hz，2H)，1.53(t，J＝10.4Hz，2H)，1.78-1.81(m，2H)，2.20(t，J＝6.8Hz，2H)，2.59(q，J＝7.6Hz，2H)，2.69(d，J＝10.8Hz，2H)，3.51-3.56(m，2H)，3.82(t，J＝6.8Hz，2H)，4.16(q，J＝6.8Hz，2H)，6.19(s，2H)。
步骤2：5-氨基-1-(3-((2R，6S)-2，6-二甲基吗啉代)丙基)-3-乙基-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，通过步骤1中间体(3.0g，9.25mnmol)与氢氧化钾(1.03g，18.51mmol)在水(12mL)和乙醇(23mL)中反应制备标题化合物，得到1.32g呈固体的所需产物。
步骤3：5-氨基-1-(2-((2S，6R)-2，6-二甲基吗啉代)乙基)-3-乙基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(365mg，6.29mmol)，通过步骤2中间体(1.30g，4.19mol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(1.18g，5.03mol)反应制备标题化合物，得到314mg呈固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.84-1.10(m，9H)，1.54(t，J＝10.0Hz，2H)，1.79-1.91(m，2H)，2.15-2.21(m，2H)，2.70(d，J＝10.4Hz，2H)，3.53-3.56(m，2H)，3.82-3.85(m，2H)，5.20(s，2H)，5.76(s，2H)，6.32(s，2H)，7.26(t，J＝8.4Hz，2H)，7.66-7.69(m，1H)。
中间体207
5-氨基-3-乙基-1-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002531
步骤1：5-氨基-3-乙基-1-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(732mL)中的N，N-二异丙基乙胺(5.6mL，32.44mmol)，通过(E)-2-氰基-3-甲氧基戊-2-烯酸乙酯(3.2g，16.22mmol)与((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)肼(2.53g，19.47mmol)反应制备标题化合物，得到3.02g呈粘性油状的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6))：δ1.18-1.57(m，10H)，1.99-2.02(m，1H)，2.59(q，J＝7.6Hz，2H)，3.17-3.29(m，4H)，3.73(d，J＝7.2Hz，2H)，3.80-3.83(m，2H)，6.20(s，2H)。
步骤2：5-氨基-3-乙基-1-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，通过步骤1中间体(3.50g，12.45mnmol)与氢氧化钾(1.7g，24.91mmol)在水(20mL)和乙醇(35mL)中反应制备标题化合物，得到3.05g呈固体的所需产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.21(t，J＝7.6Hz，3H)，1.24-1.42(m，4H)，1.98-1.99(m，1H)，2.59(q，J＝7.6Hz，2H)，3.16-3.28(m，2H)，3.70-3.82(m，4H)，6.17(s，2H)，11.86(br s，1H)。
步骤3：5-氨基-3-乙基-1-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(344mg，5.92mmol)，通过步骤2中间体(1.0g，3.95mol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(1.10g，4.74mol)反应制备标题化合物，得到462mg呈固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.07(t，J＝4.8Hz，3H)，1.09-1.33(m，2H)，1.38-1.42(m，2H)，1.97-2.01(m，1H)，2.54(q，J＝7.6Hz，2H)，3.23(t，J＝10Hz，2H)，3.73(d，J＝7.2Hz，2H)，3.80-3.84(m，2H)，5.19(s，2H)，6.32(s，2H)，7.23-7.29(m，2H)，7.65-7.69(m，1H)。
中间体208
5-氨基-3-乙基-1-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002541
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(13mL)中的氟化钾(344mg，5.95mmol)，通过步骤2中间体207(1.0g，3.95mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(1.23g，4.74mmol)反应制备标题化合物，得到583mg呈固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.06(t，J＝5.6Hz，3H)，1.23-1.29(m，2H)，1.40-1.43(m，2H)，1.99-2.0(m，1H)，2.57(q，J＝7.6Hz，2H)，3.24(t，J＝10.0Hz，2H)，3.74(d，J＝7.2Hz，2H)，3.81-4.12(m，2H)，5.31(s，2H)，6.33(s，2H)，7.48-7.51(m，1H)，7.58-7.59(m，2H)，7.77-7.80(m，1H)。
中间体209
5-氨基-1-甲基-3-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002542
步骤1：5-氨基-1-甲基-3-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-甲腈
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(20mL)中的N，N-二异丙基乙胺(3.0mL，17.47mmol)，通过2-(1-甲氧基-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)亚乙基)丙二腈(1.8g，8.73mmol)与硫酸甲肼(1.3g，8.73mmol)反应制备标题化合物，得到1.12g呈黄色固体的产物。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ1.26-1.51(m，2H)，1.63(dd，J1＝2.0Hz，J2＝10.4Hz，2H)，1.89-2.0(m，1H)，2.54(d，J＝7.6Hz，2H)，3.39(dt，J1＝2.0Hz，J2＝12.0Hz，2H)，3.39(s，3H)，3.96(dd，J1＝2.8Hz，J2＝9.6Hz，2H)，4.35-4.40(br s，2H)。
步骤2：5-氨基-1-甲基-3-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体96的步骤2中所述的程序，通过步骤1中间体(1.10g，4.99mnmol)与氢氧化钠(1.2g，29.90mmol)在水(12mL)中反应制备标题化合物，得到870mg呈固体的所需产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.10-1.54(m，6H)，1.91-1.99(m，1H)，2.71-2.75(m，2H)，3.17-3.54(m，6H)，3.81(d，J＝9.6Hz，3H)，6.12(s，2H)，11.88(br s，1H)。
步骤3：5-氨基-1-甲基-3-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(9mL)中的氟化钾(310mg，5.33mmol)，通过步骤2中间体(850mg，3.55mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(1.0g，4.26mmol)反应制备标题化合物，得到506mg呈黄色固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.13-1.23(m，2H)，1.47-1.50(m，2H)，1.79-1.85(m，1H)，2.47-2.51(m，2H)，3.20(t，J＝10.4Hz，2H)，3.47(t，J＝9.6Hz，3H)，3.79(dd，J1＝2.4Hz，J2＝7.2Hz，2H)，5.19(s，2H)，6.28(s，2H)，7.26(t，J＝8.8Hz，2H)，7.65-7.70(m，1H)。
中间体210
5-氨基-1-(2-(4，4-二氟哌啶-1-基)乙基)-3-乙基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002561
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(3.5mL)中的氟化钾(90mg，1.49mmol)，通过步骤2中间体205(330mg，0.99mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(280mg，1.19mmol)反应制备标题化合物，得到330mg呈固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.21(t，J＝7.6Hz，3H)，1.27-1.43(m，4H)，2.15(br s，2H)，2.73(t，J＝7.6Hz，2H)，2.83(br s，2H)，2.97(s，2H)，4.20(br s，2H)，5.36(s，2H)，6.27(s，2H)，7.37-7.41(m，1H)，7.48-7.50(m，2H)，7.67-7.69(m，1H)。
中间体211
5-氨基-3-乙基-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002562
步骤1：5-氨基-3-乙基-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(32mL)中的N，N-二异丙基乙胺(5.6mL，32.44mmol)，通过(E)-2-氰基-3-甲氧基戊-2-烯酸乙酯(3.2g，16.22mmol)与((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)肼(2.80g，19.47mmol)反应制备标题化合物，得到4.03g呈粘性油状的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6))：δ1.09(t，J＝7.2Hz，4H)，1.25(t，J＝7.6Hz，4H)，1.34-1.36(m，1H)，1.55-1.60(m，4H)，2.59(q，J＝7.2Hz，2H)，3.23(t，J＝11.6Hz，2H)，3.80-3.87(m，4H)，4.16(q，J＝7.2Hz，2H)，6.17(s，2H)。
步骤2：5-氨基-3-乙基-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，通过步骤1中间体(4.0g，13.60mnmol)与氢氧化钾(1.8g，27.10mmol)在水(10mL)和乙醇(40mL)中反应制备标题化合物，得到2.42g呈固体的所需产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.07-1.24(m，5H)，1.44-1.60(m，5H)，2.58(q，J＝7.6Hz，2H)，3.21(t，J＝10.0Hz，2H)，3.82-3.85(m，4H)，6.14(s，2H)，11.68(br s，1H)。
步骤3：5-氨基-3-乙基-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(325mg，5.61mmol)，通过步骤2中间体207(1.0g，3.74mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(1.05g，4.49mmol)反应制备标题化合物，得到1.32g呈固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.07(t，J＝7.6Hz，3H)，1.15-1.61(m，7H)，2.56(q，J＝7.2Hz，2H)，3.16-3.28(m，2H)，3.79-3.89(m，4H)，5.20(s，2H)，6.29(s，2H)，7.26(t，J＝8.8Hz，2H)，7.64-7.71(m，1H)。
中间体212
5-氨基-3-乙基-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002581
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(12mL)中的氟化钾(520mg，8.98mmol)，通过步骤2中间体211(1.20g，4.49mmol)与2-溴-1-(2-氯苯基)乙酮(1.60g，6.74mmol)反应制备标题化合物，得到980mg呈固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.09(t，J＝3.2Hz，3H)，1.15-1.62(m，7H)，2.57(q，J＝7.6Hz，2H)，3.19-3.29(m，2H)，3.80-3.90(m，4H)，5.32(s，2H)，6.30(s，2H)，7.47-7.52(m，1H)，7.58-7.60(m，2H)，7.77-7.80(m，1H)。
中间体213
5-氨基-3-乙基-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002582
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(10mL)中的氟化钾(434mg，7.49mmol)，通过步骤2中间体211(1.0g，3.74mmol)与2-溴-1-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙酮(1.6g，5.61mmol)反应制备标题化合物，得到1.35g呈黄色固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.10(t，J＝7.2Hz，3H)，1.13-1.63(m，7H)，2.61(q，J＝7.2Hz，2H)，3.16-3.28(m，2H)，3.79-3.90(m，4H)，5.39(s，2H)，6.31(s，2H)，7.59(t，J＝8.0Hz，1H)，8.10(t，J＝7.6Hz，1H)，8.20(t，J＝6.8Hz，1H)。
中间体214
5-氨基-3-(甲氧基甲基)-1-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002591
步骤1：5-氨基-3-(甲氧基甲基)-1-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-甲腈
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(30mL)中的N，N-二异丙基乙胺(3.5mL，20.5mmol)，通过2-(1-(4-羟基丁氧基)-2-甲氧基亚乙基)丙二腈(2.14g，10.25mmol)与((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)肼(1.6g，12.30mmol)反应制备标题化合物，得到1.72g呈棕色油状的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6))：δ1.20-1.28(m，2H)，1.38-1.41(m，2H)，1.95-2.01(m，1H)，3.17(t，J＝5.2Hz，2H)，3.22(s，3H)，3.75(d，J＝7.2Hz，2H)，3.81(dd，J1＝2.8Hz，J2＝11.2Hz，2H)，4.21(s，2H)，6.60(s，2H)。
步骤2：5-氨基-3-(甲氧基甲基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体96的步骤2中所述的程序，通过步骤1中间体(2.2g，8.80mnmol)与氢氧化钠(3.52g，88.0mmol)在水(44mL)中反应制备标题化合物，得到1.92mg呈棕色粘性油状的所需产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.17-1.27(m，2H)，1.39-1.42(m，2H)，1.91-2.01(m，1H)，3.16-3.26(m，2H)，3.35(s，3H)，3.76-3.84(m，4H)，4.35(s，2H)，6.26(s，2H)，11.94(s，1H)；ESI(m/z)269(M)+。
步骤3：5-氨基-3-(甲氧基甲基)-1-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(20mL)中的氟化钾(615mg，10.59mmol)，通过步骤2中间体(1.9g，7.06mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(2.0g，8.47mmol)反应制备标题化合物，得到836mg呈固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.20-1.30(m，2H)，1.40-1.42(m，2H)，1.91-2.01(m，1H)，3.17-3.26(m，5H)，3.78-4.14(m，4H)，4.35(s，2H)，5.21(s，2H)，6.41(s，2H)，7.24-7.29(m.2H)，7.64-7.71(m，1H)；ESI(m/z)424(M)+。
中间体215
5-氨基-3-(甲氧基甲基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002601
步骤1：5-氨基-3-(甲氧基甲基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-甲腈
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(30mL)中的N，N-二异丙基乙胺(6.8mL，39.46mmol)，通过2-(1，2-二甲氧基亚乙基)丙二腈(2.8g，19.73mmol)与(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)肼(2.8g，19.73mmol)反应制备标题化合物，得到2.0g呈棕色油状的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6))：δ1.12-1.16(m，7H)，3.16-3.21(m，5H)，3.79-3.89(m，4H)，4.21(s，2H)，6.58(s，2H)。
步骤2：5-氨基-3-(甲氧基甲基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体96的步骤2中所述的程序，通过步骤1中间体(2.0g，7.93mnmol)与氢氧化钠(3.17g，79.3mmol)在水(20mL)中反应制备标题化合物，得到353mg呈棕色粘性油状的所需产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.15-1.60(m，7H)，1.91(s，3H)，3.17-3.28(m，4H)，3.80-3.89(m，2H)，4.35(s，2H)，6.22(s，2H)，11.94(s，1H)。
步骤3：5-氨基-3-(甲氧基甲基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(11mL)中的氟化钾(450mg，7.77mmol)，通过步骤2中间体(1.1g，3.88mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(1.37g，5.83mmol)反应制备标题化合物，得到353mg呈固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.15-1.61(m，7H)，3.16-3.27(m，5H)，3.82(dd，J＝2.8Hz，11.6Hz，2H)，3.92(t，J＝7.2Hz，2H)，4.33(s，2H)，5.21(s，2H)，6.38(s，2H)，7.27(t，J＝8.8Hz，2H)，7.64-7.72(m，1H)。
中间体216
5-氨基-3-乙基-1-(2-(甲基磺酰基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
Figure BDA0002350595300002611
步骤1：5-氨基-3-乙基-1-(2-(甲基磺酰基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
按照中间体75的步骤1中所述的程序，使用在无水乙醇(30mL)中的N，N-二异丙基乙胺(5.24mL，30.40mmol)，通过(Z)-2-氰基-3-甲氧基戊-2-烯酸乙酯(3.0g，15.21mmol)与(2-(甲基磺酰基)乙基)肼(2.5g，18.10mmol)反应制备标题化合物，得到1.0g呈棕色油状的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6))：δ1.11(t，J＝7.6Hz，3H)，1.25(t，J＝7.2Hz，3H)，2.61(q，J＝7.6Hz，2H)，2.97(d，J＝7.2Hz，3H)，3.53(t，J＝7.2Hz，2H)，4.17(q，J＝7.2Hz，2H)，4.26(t，J＝6.8Hz，2H)，6.34(s，2H)。
步骤2：5-氨基-3-乙基-1-(2-(甲基磺酰基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸
按照中间体1的步骤3中所述的程序，通过步骤1中间体(1.0g，3.46mnmol)与氢氧化钾(0.387g，6.91mmol)在水(5mL)和乙醇(10mL)中反应制备标题化合物，得到430mg呈固体的所需产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.10(t，J＝7.6Hz，3H)，2.60(q，J＝7.6Hz，2H)，2.96(s，3H)，3.53(t，J＝7.2Hz，2H)，4.25(t，J＝6.8Hz，2H)，6.30(s，2H)，12.01(br s，1H)。
步骤3：5-氨基-3-乙基-1-(2-(甲基磺酰基)乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2，6-二氟苯基)-2-氧代乙酯
按照中间体1的步骤4中所述的程序，使用在无水DMF(2mL)中的氟化钾(67mg，1.14mmol)，通过步骤2中间体(200mg，0.765mmol)与2-溴-1-(2，6-二氟苯基)乙酮(215mg，0.918mmol)反应制备标题化合物，得到220mg呈固体的产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.09(t，J＝7.6Hz，3H)，2.58(q，J＝7.6Hz，2H)，2.97(s，3H)，3.54(t，J＝7.2Hz，2H)，4.28(t，J＝6.8Hz，2H)，5.21(s，2H)，6.47(s，2H)，7.24-7.29(m，2H)，7.64-7.72(m，1H)。
实施例
采用合成方案1至20由上述中间体制备以下所示本发明的化合物。下面给出制备本发明的化合物的一般程序。
方法A：
实施例1
6-(2-氯苯基)-5-羟基-1，3-二甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮的合成
Figure BDA0002350595300002631
将5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯(590mg，1.91mmol)和多磷酸(6.0mL)的混合物加热到120℃保持3h。将反应混合物冷却到RT，并用1N氢氧化钠中和。将反应混合物用乙酸乙酯(3 x 100mL)萃取，并将有机层用水(100mL)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥并在减压下浓缩。通过快速硅胶柱色谱法纯化得到的残留物，得到112mg呈固体的标题产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.52(s，3H)，3.80(s，3H)，7.45-7.60(m，4H)，7.89(s，1H)，11.62(br s，1H)；APCI(m/z)290(M+H)+。
方法B：
实施例2
6-(2-氯苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮的合成
Figure BDA0002350595300002632
将5-氨基-3-甲基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑-4-羧酸2-(2-氯苯基)-2-氧代乙酯(中间体-91，4.0g，9.85mmol)在浓硫酸(30mL)中的溶液在80℃下搅拌2h。将反应混合物冷却到RT，并用冰冷的水(35mL)淬灭。过滤沉淀的固体并充分干燥，得到1.56g所需产物。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.39-2.52(m，7H)，2.69(t，J＝7.0Hz，2H)，3.16-3.41(m，4H)，4.27(s，2H)，7.49-7.63(m，4H)，7.91(br s，1H)，11.89(br s，1H)；ESI(m/z)389(M+H)+。
按上面提到的程序中的任一者进行表1中给出的实施例3-190、193-194、198、200、202-213、215和217-218的制备。表1中提供了结构式、化学名称、1H NMR和MS数据。
表-1：实施例3-190、193-194、198、200、202-213、215和217-218的结构、化学名称、1H NMR和MS数据。
Figure BDA0002350595300002641
Figure BDA0002350595300002651
Figure BDA0002350595300002661
Figure BDA0002350595300002671
Figure BDA0002350595300002681
Figure BDA0002350595300002691
Figure BDA0002350595300002701
Figure BDA0002350595300002711
Figure BDA0002350595300002721
Figure BDA0002350595300002731
Figure BDA0002350595300002741
Figure BDA0002350595300002751
Figure BDA0002350595300002761
Figure BDA0002350595300002771
Figure BDA0002350595300002781
Figure BDA0002350595300002791
Figure BDA0002350595300002801
Figure BDA0002350595300002811
Figure BDA0002350595300002821
Figure BDA0002350595300002831
Figure BDA0002350595300002841
Figure BDA0002350595300002851
Figure BDA0002350595300002861
Figure BDA0002350595300002871
Figure BDA0002350595300002881
Figure BDA0002350595300002891
Figure BDA0002350595300002901
Figure BDA0002350595300002911
Figure BDA0002350595300002921
Figure BDA0002350595300002931
Figure BDA0002350595300002941
Figure BDA0002350595300002951
Figure BDA0002350595300002961
Figure BDA0002350595300002971
Figure BDA0002350595300002981
Figure BDA0002350595300002991
Figure BDA0002350595300003001
Figure BDA0002350595300003011
Figure BDA0002350595300003021
Figure BDA0002350595300003031
方法P：
实施例191
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-1-甲基-3-(吗啉代甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮
Figure BDA0002350595300003032
向吗啉(28.3mg，0.325mmol)在无水THF(2mL)中的溶液中添加(6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-3-(羟甲基)-1-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮)(50mg，0.162mmol)和三苯基膦(61.8mg，0.23mmol)。然后在0℃下冷却反应物，并向其中滴加偶氮二羧酸二异丙酯(DIAD)(46.8μL，0.236mmol)。将反应混合物在RT下搅拌18h。将混合物用水(2滴)淬灭，然后蒸发并通过柱纯化，得到18mg标题产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ2.77-2.81(m，4H)，3.72-3.76(m，4H)，3.80(s，3H)，4.00(s，2H)，7.14-7.20(m，2H)，7.47-7.53(m，1H)，8.58(brs，1H)；ESI(m/z)377(M+H)+。
按上面提到的程序中的任一者进行表2中给出的实施例192、195-197、199、201、214、216和219-224的制备。表2中提供了结构式、化学名称、1H NMR和MS数据。
表2：实施例192、195-197、199、201、214、216和219-224的结构、化学名称、1H NMR和MS数据。
Figure BDA0002350595300003041
Figure BDA0002350595300003051
Figure BDA0002350595300003061
方法C：
实施例225
5-羟基-6-(4-羟苯基)-1-甲基-3-(三氟甲基)-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮的合成
Figure BDA0002350595300003071
将5-羟基-6-(4-甲氧基苯基)-1-甲基-3-(三氟甲基)-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮(100mg，0.29mmol)在溴化氢水溶液(3.0mL)中的悬浮液加热到100℃保持48h。将反应混合物冷却到RT，并用饱和碳酸氢钠溶液(100mL)淬灭。将产物在乙酸乙酯(50mL x3)中萃取。由无水硫酸钠干燥合并的有机萃取物，过滤并浓缩。通过硅胶柱色谱法纯化得到的产物，得到14mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ4.01(s，3H)，6.85-6.90(m，2H)，7.70-7.75(m，2H)，8.52(brs，1H)，9.77(br s，1H)；ESI(m/z)326(M+H)+。
方法D：
实施例226
碳酸6-(2，6-二氟苯基)-1，3-二甲基-4-氧代-4，7-二氢-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-基甲酯的合成
Figure BDA0002350595300003072
在RT下向6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-1，3-二甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮(25mg，0.08mmol)在THF(3.0mL)中的搅拌溶液中添加吡啶(8.3μL，0.10mmol)和乙酸酐(9.7μL，0.10mmol)。将反应混合物在RT下搅拌过夜。将反应混合物用1N HCl(5.0mL)淬灭，并用乙酸乙酯(2 x 10mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在减压下浓缩。通过硅胶柱色谱法纯化得到的产物，得到22mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.05(s，3H)，2.46(s，3H)，3.97(s，3H)，7.26(d，J＝7.8Hz，2H)，7.62(br s，1H)；APCI(m/z)334(M+H)+。
方法E：
实施例227
5-(2-氯苯基)-6-羟基-2，3-二甲基吡喃并[3，2-c]吡唑-7(2H)-酮的合成
Figure BDA0002350595300003081
向3-(2-氯苯基)-1-(4-羟基-1，5-二甲基-1H-吡唑-3-基)丙-2-烯-1-酮(中间体-59，440mg，1.59mmol)在乙醇(5.0mL)中的搅拌溶液中添加氢氧化钠(127mg，3.18mmol)在水(1.2mL)中的溶液。将反应混合物冷却到0℃，并在相同温度下缓慢添加过氧化氢(35％，339μL，3.49mmol)。将反应混合物在RT下搅拌18h。在减压下蒸发溶剂，并将1NHCl(20mL)添加到残留物中。过滤得到的沉淀并在真空下干燥，得到190mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.39(s，3H)，3.98(s，3H)，7.48-7.57(m，2H)，7.62(d，J＝7.5Hz，2H)，8.92(brs，1H)；APCI(m/z)291(M+H)+。
按上面提到的程序进行实施例228-229的制备。表3中提供了实施例228-229的结构式、化学名称、1H NMR和MS数据。
表3：实施例228-229的结构、化学名称、1H NMR和MS数据。
Figure BDA0002350595300003082
Figure BDA0002350595300003091
方法F：
实施例230
6-(2-氯苯基)-5-羟基-1，3-二甲基吡喃并[2，3-c]吡唑-4(1H)-酮的合成
Figure BDA0002350595300003092
在RT下向6-(2-氯苯基)-5-甲氧基-1，3-二甲基吡喃并[2，3-c]吡唑-4(1H)-酮(200mg，0.65mmol)在二氯甲烷(1.0mL)中的搅拌溶液中添加在二氯甲烷(1M，2.6mL，2.62mmol)中的三溴化硼。将混合物在相同温度下搅拌过夜。将反应物在减压下浓缩，并用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭。过滤沉淀的固体并充分干燥。通过硅胶柱色谱法纯化得到的产物，得到118mg呈固体的标题产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ2.44(s，3H)，3.72(s，3H)，7.49-7.56(m，2H)，7.63-7.68(m，2H)，9.13(s，1H)；ESI(m/z)291(M+H)+。
按上面提到的程序进行实施例231-232的制备。表4中提供了实施例231-232的结构式、化学名称、1H NMR和MS数据。
表4：实施例231-232的结构、化学名称、1H NMR和MS数据。
Figure BDA0002350595300003093
Figure BDA0002350595300003101
方法G：
实施例233
6-(2-氯苯基)-5-甲氧基-1，3-二甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮的合成
Figure BDA0002350595300003102
步骤1：6-(2-氯苯基)-5-羟基-1，3-二甲基-4-氧代-1，4-二氢-7H-吡唑并[3，4-b]吡啶-7-羧酸叔丁酯
在RT下向6-(2-氯苯基)-5-羟基-1，3-二甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮(100mg，0.34mmol)在THF(2.0mL)中的搅拌悬浮液中添加BOC酸酐(75mg，0.34mmol)，接着添加DMAP(5.0mg，0.03mmol)，并将反应混合物搅拌2h。在减压下蒸发溶剂，并通过硅胶柱色谱法纯化残留物，得到270mg呈固体的产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.31(s，9H)，2.49(s，3H)，3.82(s，3H)，7.30-7.70(m，4H)，8.31(s，1H)，12.24(br s，1H)。
步骤2：6-(2-氯苯基)-5-甲氧基-1，3-二甲基-4-氧代-1，4-二氢-7H-吡唑并[3，4-b]吡啶-7-羧酸叔丁酯
在RT下向步骤1中间体(150mg，0.38mmol)在无水DMF(1.5mL)中的搅拌溶液中添加碳酸钾(63.7mg，0.46mmol)，接着添加甲基碘(26.5μL，0.42mmol)，并将所得反应混合物搅拌1h。将混合物用1N柠檬酸进行酸化，直到pH 2-3。过滤沉淀的固体并充分干燥，得到112mg所需产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.29(s，9H)，2.64(s，3H)，4.03(s，3H)，4.19(s，3H)，7.26-7.52(m，4H)。
步骤3：6-(2-氯苯基)-5-甲氧基-1，3-二甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮
在RT下向步骤2中间体(135mg，0.33mmol)在二氯甲烷(2.0mL)中的搅拌溶液中添加三氟乙酸(123μL，1.67mmol)，并将反应混合物搅拌1h。将反应混合物浓缩，用饱和NaHCO3水溶液碱化，直到pH8，并用乙酸乙酯(10mL x 2)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥，并在减压下浓缩。通过硅胶柱色谱法纯化得到的化合物，得到31mg呈固体的所需产物。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ2.67(s，3H)，4.00(s，3H)，4.15(s，3H)，5.09(br s，1H)，7.35-7.54(m，4H)；ESI(m/z)304(M)+。
按上面提到的程序进行表5中给出的实施例的制备。下表5中提供了该实施例的结构式、化学名称、1H NMR和MS数据。
按上面提到的程序进行实施例234的制备。表5中提供了实施例234的结构式、化学名称、1H NMR和MS数据。
表5：实施例234的结构、化学名称、1H NMR和MS数据。
Figure BDA0002350595300003111
Figure BDA0002350595300003121
方法H：
实施例235
N-[4-(1-乙基-5-羟基-3-甲基-4-氧代-4，7-二氢-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基)-3-氟苯基]甲磺酰胺的合成
Figure BDA0002350595300003122
在0℃下向6-(4-氨基-2-氟苯基)-1-乙基-5-羟基-3-甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮(110mg，0.36mmol)在二氯甲烷(2.0mL)中的搅拌溶液中添加吡啶(40μL，0.50mmol)和甲磺酰氯(30μL，0.36mmol)。将反应混合物RT搅拌过夜。将反应混合物在减压下浓缩，并将残留物用水(10mL)稀释。将含水混合物用1NHCl酸化，直到pH3-4。通过过滤收集沉淀的固体，并通过硅胶柱色谱法纯化。将如此得到的固体化合物在甲醇中搅拌，过滤并干燥，得到45mg标题产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.28(t，J＝7.2Hz，3H)，2.47(s，3H)，3.13(s，3H)，4.17(q，J＝7.2Hz，2H)，7.14(d，J＝9.3Hz，2H)，7.46-7.58(m，1H)，7.96(br s，1H)，10.27(br s，1H)，11.48(s，1H)；APCI(m/z)381(M+H)+。
按上面提到的程序进行实施例236-237的制备。表6中提供了实施例236-237的结构式、化学名称、1H NMR和MS数据。
表6：实施例236-237的结构、化学名称、1H NMR和MS数据。
Figure BDA0002350595300003123
Figure BDA0002350595300003131
方法I：
实施例238
6-(2-氯苯基)-3-乙基-5-羟基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮盐酸盐的合成
Figure BDA0002350595300003132
向6-(2-氯苯基)-3-乙基-5-羟基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮(100mg，0.248mmol)在无水乙酸乙酯(0.5ml)中的溶液的搅拌溶液中添加无水盐酸在乙酸乙酯(3ml)中的饱和溶液，并将所得悬浮液搅拌过夜。通过过滤收集得到的固体，并与无水二异丙基醚一起搅拌，过滤并干燥，得到90mg所需产物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.29(t，J＝7.5Hz，3H)，2.92(q，J＝7.8Hz，2H)，3.00-3.20(m，2H)，3.40-3.56(m，4H)，3.60-4.00(m，4H)，4.60-4.68(m，2H)，7.40-7.55(m，3H)，7.56-7.64(m，1H)，11.13(br s，1H)；ESI(m/z)403(M)+。
按上面提到的程序进行实施例239-242的制备。表7中提供了实施例239-242的结构式、化学名称、1H NMR和MS数据。
表7：实施例239-242的结构、化学名称、1H NMR和MS数据。
Figure BDA0002350595300003141
Figure BDA0002350595300003151
方法J：
实施例243
6-(2-氯苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮富马酸盐的合成
Figure BDA0002350595300003152
向6-(2-氯苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮(100mg，0.249mmol)在丙酮(2.0ml)中的溶液的搅拌溶液中添加富马酸(28.8mg，0.240mmol)，并将所得悬浮液搅拌过夜。通过过滤收集得到的固体，用丙酮洗涤并干燥，得到125mg所需产物。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)：δ2.14(s，3H)，2.20-2.29(m，2H)，2.48(s，3H)，2.40-2.57(m，6H)，2.72(t，J＝4.8Hz，2H)，4.28(t，J＝6.0Hz，2H)，6.58(s，2H)，7.45-7.54(m，3H)，7.62(d，J＝7.5Hz，1H)。
按上面提到的程序进行实施例244-245的制备。表8中提供了实施例244-245的结构式、化学名称、1H NMR和MS数据。
表8：实施例244-245的结构、化学名称、1H NMR和MS数据。
Figure BDA0002350595300003153
Figure BDA0002350595300003161
方法K：
实施例246
6-(2-氯苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮半富马酸盐的合成
Figure BDA0002350595300003162
向6-(2-氯苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮(150mg，0.374mmol)在丙酮(4.0ml)中的溶液的搅拌溶液中添加富马酸(26mg，0.224mmol)，并将所得悬浮液搅拌过夜。通过过滤收集得到的固体，用丙酮洗涤并充分干燥，得到153mg标题产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ2.12(s，3H)，2.21-2.30(m，2H)，2.48(s，3H)，2.39-2.58(m，6H)，2.73(t，J＝6.0Hz，2H)，4.28(t，J＝6.0Hz，2H)，6.57(s，1H)，7.47-7.54(m，3H)，7.62(d，J＝8.0Hz，1H)。
按上面提到的程序进行实施例247-248的制备。表9中提供了实施例247-248的结构式、化学名称、1H NMR和MS数据。
表9：实施例247-248的结构、化学名称、1H NMR和MS数据。
Figure BDA0002350595300003171
方法L：
实施例249
6-(2-氯苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮三甲磺酸盐的合成
Figure BDA0002350595300003172
在0℃下向6-(2-氯苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮(300mg，0.748mmol)在丙酮(4ml)中的搅拌溶液中添加甲磺酸(160μL，2.40mmol)，并将所得悬浮液搅拌过夜。通过过滤收集得到的固体，用丙酮洗涤并干燥，得到440mg所需产物。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)：δ2.38(s，9H)，2.53(s，3H)，2.86(s，3H)，3.12-3.30(m，4H)，3.47-3.54(m，2H)，3.64-3.74(m，4H)，4.54(t，J＝6.0Hz，2H)，7.45-7.54(m，3H)，7.60(d，J＝8.0Hz，1H)，10.08(brs，1H)。
按上面提到的程序进行实施例250-251的制备。表10中提供了实施例250-251的结构式、化学名称、1H NMR和MS数据。
表10：实施例250-251的结构、化学名称、1H NMR和MS数据。
Figure BDA0002350595300003181
方法M：
实施例252
6-(2-氯苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮半2-羟基丙烷-1，2，3-三羧酸盐的合成
Figure BDA0002350595300003182
在RT下将柠檬酸(72mg，0.370mmol)在水(0.5mL)中的溶液添加到丙酮(3ml)中。将6-(2-氯苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮(225mg，0.560mmol)在丙酮(3ml)中的悬浮液添加到上述溶液中，并将所得悬浮液搅拌过夜。通过过滤收集得到的固体，用丙酮洗涤并干燥，得到230mg所需产物。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)：δ2.59(s，3H)，2.61-3.50(m，13H)，2.96(t，J＝4.4Hz，2H)，4.36(t，J＝4.4Hz，2H)，7.51-7.62(m，3H)，7.68(d，J＝8.0Hz，1H)。
按上面提到的程序进行实施例253-254的制备。表11中提供了实施例253-254的结构式、化学名称、1H NMR和MS数据。
表11：实施例253-254的结构、化学名称、1H NMR和MS数据。
Figure BDA0002350595300003191
方法N：
实施例255
6-(2-氯苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮2-羟基丙烷-1，2，3-三羧酸盐的合成
Figure BDA0002350595300003201
在RT下将柠檬酸(48mg，0.249mmol)在水(0.25mL)中的溶液添加到丙酮(2ml)中。将6-(2-氯苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮(100mg，0.560mmol)在丙酮(2mL)中的悬浮液添加到上述溶液中，并将所得悬浮液搅拌过夜。通过过滤收集得到的固体，用丙酮洗涤并充分干燥，得到129mg所需产物。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)：δ2.43(s，3H)，2.48-2.65(m，15H)，2.76(t，J＝4.4Hz，2H)，4.28(t，J＝4.4Hz，2H)，7.47-7.53(m，3H)，7.63(d，J＝7.6Hz，1H)，10.72-10.96(m，1H)。
按上面提到的程序进行实施例256-257的制备。表12中提供了实施例256-257的结构式、化学名称、1H NMR和MS数据。
表12：实施例256-257的结构、化学名称、1H NMR和MS数据。
Figure BDA0002350595300003202
Figure BDA0002350595300003211
药理学活性
在无细胞测定中，将NOX4活性的抑制测量为对由氧形成活性氧物质(ROS)的抑制。由于超氧化物的不稳定性和反应性原因，读出技术涉及检测H2O2，其是更稳定的产物。通过由稳定过表达人NOX4的细胞制备膜开发了基于无细胞的膜的体外测定法。为此目的，内部产生hNOX4/HEK稳定细胞系。通过如下方式制备来自过表达人NOX4的稳定转染细胞的膜：将细胞在缓冲液(20mM HEPES、1mM EGTA、0.5mM DTT、0.5％蛋白酶抑制剂混合物、1mM PMSF，pH 7.6)中均化，接着以160000g离心30分钟。将膜级分(丸粒)重新悬浮在储存缓冲液(具有10％甘油和100mM NaCl的均化缓冲液)中并储存在-80℃下。通过Bradford试剂测定蛋白质浓度。使用Amplex Red(Invitrogen)按制造商的使用说明书稍加修改测量表达人NOX4的膜的H2O2产生量。简言之，将膜在具有辣根过氧化物酶(HRP)和Amplex Red的测定缓冲液(25mMHEPES、0.12M NaCl、3mM KCl、1mM MgCl2，pH 7.4)中温育。通过将NADPH氧化酶添加到膜混合物中来使反应开始。NOX4抑制剂的拮抗作用是通过在添加NADPH之前在平板摇床上将膜与浓度递增的抑制剂一起温育20分钟来测量的。在激发和发射波长分别为544nm和590nm的BMG Fluostar微板读取器中持续10分钟测量H2O2水平。将浓度响应曲线绘制为在没有抑制剂的情况下获得的最大响应的％。使用GraphPad PRISM软件通过非线性回归分析由浓度响应曲线计算IC50值。
采用上述测定程序对制备的化合物进行测试，表13中给出了获得的结果。对于选定的实施例，表中给出了在1.0μM和10.0μM浓度下的抑制百分比连同IC50(nM)详情。采用上述测定程序对制备的化合物进行测试，发现IC50小于1100nM，优选小于100nM，更优选小于50nM。
一些化合物的IC50(nM)值列于表13中，其中“A”是指小于50nM的IC50值，“B”是指50.01至100.0nM范围内的IC50值，“C”是指100.01至150.0nM范围内的IC50值，且“D”是指大于150nM的IC50值。
表13：
Figure BDA0002350595300003221
Figure BDA0002350595300003231
Figure BDA0002350595300003241
Figure BDA0002350595300003251
Figure BDA0002350595300003261
Figure BDA0002350595300003271
Figure BDA0002350595300003281
(-)：未测定

Claims (37)

1.一种式(I)的化合物
Figure FDA0002350595290000011
或其药学上可接受的盐，
其中，
环内的虚线[----]表示任选的单键；
X是NH或O；
R选自氢、C1-8烷基和-C(O)R7；
Z1是CH或S；
Z2是CH；
Z3是CH或N；
Z4是CH；
Z5是CH或不存在；
环A选自
Figure FDA0002350595290000021
Figure FDA0002350595290000022
其中x和y表示连接点；
在每次出现时，R1独立地选自卤素、氨基、羟基、C1-8烷基、C1-8烷氧基、C1-8烷氧基C1-8烷氧基、卤代C1-8烷基、卤代C1-8烷氧基、-(CH2)mNRwC(O)R6、-(CH2)mOR5、-(CH2)mNR7S(O)PR8、C6-14芳基和5至14元杂芳基；其中C6-14芳基任选地被一个或多个选自卤素和C1-8烷基的取代基取代；
在每次出现时，R2独立地选自氢、C1-8烷基、卤代C1-8烷基、羟基C1-8烷基、-(CH2)mNR5C(O)NR6、-(CH2)mOR5、3至15元杂环基、3至15元杂环基C1-8烷基、C6-14芳基和C6-14芳基C1-8烷基；其中3至15元杂环基、3至15元杂环基C1-8烷基、C6-14芳基和C6-14芳基C1-8烷基任选地被一个或多个选自卤素、C1-8烷基、卤代C1-8烷基、-(CH2)mS(O)PR8、C3-12环烷基和3至15元杂环基的取代基取代；
在每次出现时，R3独立地选自氢、C1-8烷基、卤代C1-8烷基、羟基C1-8烷基、-(CH2)mOR5、-(CH)2N(R5)2、-(CH2)mS(O)PR8、C3-12环烷基、3至15元杂环基、3至15元杂环基C1-8烷基、C6-14芳基、C6-14芳基C1-8烷基、5至14元杂芳基和5至14元杂芳基C1-8烷基；其中C3-12环烷基、3至15元杂环基C1-8烷基、C6-14芳基和C6-14芳基C1-8烷基任选地被一个或多个选自卤素、氧代基、C1-8烷基和C1-8烷氧基的取代基取代；
在每次出现时，R4独立地选自氢和C1-8烷基；
在每次出现时，R5独立地选自氢和C1-8烷基；
在每次出现时，R6独立地选自氢和C1-8烷基；
在每次出现时，R7独立地选自氢和C1-8烷基；
在每次出现时，R8独立地选自氢和C1-8烷基；
‘m’是0至4范围的整数，包括两个端值；
‘n’是0至5范围的整数，包括两个端值；且
‘p’是0至2范围的整数，包括两个端值。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中
R是氢、甲基或-C(O)CH3；
X是NH或O；
Z1是CH或S，Z2是CH，Z3是CH或N，Z4是CH，且Z5是CH或不存在；
R1是F、Cl、NH2、OH、甲基、甲氧基、-OCH2CH2OCH3、CF3、OCF3、
Figure FDA0002350595290000031
或1H-咪唑-1-基；
环A是
Figure FDA0002350595290000041
Figure FDA0002350595290000051
Figure FDA0002350595290000061
Figure FDA0002350595290000071
Figure FDA0002350595290000072
且
‘n’是0、1、2或3。
3.一种式(II)的化合物
Figure FDA0002350595290000073
或其药学上可接受的盐，
其中，
Z3是CH或N；
在每次出现时，R1独立地选自卤素、氨基、羟基、C1-8烷基、C1-8烷氧基、C1-8烷氧基C1-8烷氧基、卤代C1-8烷基、卤代C1-8烷氧基、-(CH2)mNR5C(O)R6、-(CH2)mOR5、-(CH2)mNR7S(O)PR8、C6-14芳基和5至14元杂芳基；其中C6-14芳基任选地被一个或多个选自卤素和C1-8烷基的取代基取代；
在每次出现时，R2独立地选自氢、C1-8烷基、卤代C1-8烷基、羟基C1-8烷基、-(CH2)mNR5C(O)NR6、-(CH2)mOR5、3至15元杂环基、3至15元杂环基C1-8烷基、C6-14芳基和C6-14芳基C1-8烷基；其中3至15元杂环基、3至15元杂环基C1-8烷基、C6-14芳基和C6-14芳基C1-8烷基任选地被一个或多个选自卤素、C1-8烷基、卤代C1-8烷基、-(CH2)mS(O)PR8、C3-12环烷基和3至15元杂环基的取代基取代；
在每次出现时，R3独立地选自氢、C1-8烷基、卤代C1-8烷基、羟基C1-8烷基、-(CH2)mOR5、-(CH)2N(R5)2、-(CH2)mS(O)PR8、C3-12环烷基、3至15元杂环基、3至15元杂环基C1-8烷基、C6-14芳基、C6-14芳基C1-8烷基、5至14元杂芳基和5至14元杂芳基C1-8烷基；其中C3-12环烷基、3至15元杂环基C1-8烷基、C6-14芳基和C6-14芳基C1-8烷基任选地被一个或多个选自卤素、氧代基、C1-8烷基和C1-8烷氧基的取代基取代；
在每次出现时，R5独立地选自氢和C1-8烷基；
在每次出现时，R6独立地选自氢和C1-8烷基；
在每次出现时，R7独立地选自氢和C1-8烷基；
在每次出现时，R8独立地选自氢和C1-8烷基；
‘m’是0至4范围的整数，包括两个端值；
‘n’是0至5范围的整数，包括两个端值；且
‘p’是0至2范围的整数，包括两个端值。
4.根据权利要求3所述的化合物，其中Z3是CH。
5.根据权利要求3或4所述的化合物，其中Z3是N。
6.根据权利要求3至5中任一项所述的化合物，其中R1是F、Cl、NH2、OH、甲基、甲氧基、-OCH2CH2OCH3、CF3、OCF3、
Figure FDA0002350595290000081
Figure FDA0002350595290000082
或IH-咪唑-1-基。
7.根据权利要求3至6中任一项所述的化合物，其中‘n’是0、1、2或3。
8.根据权利要求3至7中任一项所述的化合物，其中R1是F、Cl、NH2、OH、甲基、甲氧基、-OCH2CH2OCH3、CF3、OCF3、
Figure FDA0002350595290000091
Figure FDA0002350595290000092
或1H-咪唑-1-基，且‘n’是0、1、2或3。
9.根据权利要求3至8中任一项所述的化合物，其中R2是氢、甲基、乙基、异丙基、异丁基、三氟甲基、二氟甲基、-CH2OH、-CH2OCH3、-C(O)NH2)、
Figure FDA0002350595290000093
Figure FDA0002350595290000094
10.根据权利要求3至9中任一项所述的化合物，其中R3是氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、异丁基、异戊基、三氟乙基、-CH2CH2OCH3、-CH2CH2CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2CH2CH2OH、-CH2CH2N(CH3)2、
Figure FDA0002350595290000095
Figure FDA0002350595290000101
11.根据权利要求3至10中任一项所述的化合物，其中
Z3是CH或N；
R1是F、Cl、NH2、OH、甲基、甲氧基、-OCH2CH2OCH3、CF3、OCF3、
Figure FDA0002350595290000102
或1H-咪唑-1-基；
R2是氢、甲基、乙基、异丙基、异丁基、三氟甲基、二氟甲基、-CH2OH、-CH2OCH3、-C(O)NH2)、
Figure FDA0002350595290000103
Figure FDA0002350595290000111
R3是氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、异丁基或异戊基、三氟乙基、-CH2CH2OCH3、-CH2CH2CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2CH2CH2OH、-CH2CH2N(CH3)2、
Figure FDA0002350595290000112
Figure FDA0002350595290000113
Figure FDA0002350595290000121
Figure FDA0002350595290000122
且
‘n’是0、1、2或3。
12.根据权利要求3至11中任一项所述的化合物，其中
Z3是CH；
R1是F、Cl、NH2、OH、甲基、甲氧基、-OCH2CH2OCH3、CF3、OCF3、
Figure FDA0002350595290000123
或1H-咪唑-1-基；
R2是氢、甲基、乙基、异丙基、异丁基、三氟甲基、二氟甲基、-CH2OH、-CH2OCH3、-C(O)NH2)、
Figure FDA0002350595290000124
Figure FDA0002350595290000131
R3是氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、异丁基、异戊基、三氟乙基、-CH2CH2OCH3、-CH2CH2CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2CH2CH2OH、-CH2CH2N(CH3)2、
Figure FDA0002350595290000132
Figure FDA0002350595290000133
Figure FDA0002350595290000141
Figure FDA0002350595290000142
且
‘n’是1、2或3。
13.一种化合物，其选自：
6-(2-氯苯基)-5-羟基-1，3-二甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氯苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氯苯基)-5-羟基-1-甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(3-氯苯基)-5-羟基-1-甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2，4-二氯苯基)-5-羟基-1-甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]-5-羟基-1-甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-5-羟基-1-甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氯苯基)-5-羟基-1-(2，2，2-三氟乙基)-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-1-(4-氟苯基)-5-羟基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-5-羟基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2，4-二氯苯基)-5-羟基-1，3-二甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氯-4-氟苯基)-5-羟基-1，3-二甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-1，3-二甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2，4-二氟苯基)-5-羟基-1，3-二甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(3，4-二甲基苯基)-5-羟基-1，3-二甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-[3-氟-4-(三氟甲氧基)苯基]-5-羟基-1，3-二甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(3，4-二氟苯基)-5-羟基-1，3-二甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氯-4-甲氧基苯基)-5-羟基-1，3-二甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氟-4-甲氧基苯基)-5-羟基-1，3-二甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2，5-二氯苯基)-5-羟基-1，3-二甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-[2-氟-4-(三氟甲基)苯基]-5-羟基-1，3-二甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-[3-氟-4-(三氟甲基)苯基]-5-羟基-1，3-二甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氯-5-甲氧基苯基)-5-羟基-1，3-二甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-5-羟基-1，3-二甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(4-氯-2-氟苯基)-5-羟基-1，3-二甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氯苯基)-1-乙基-5-羟基-3-甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氯苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(2，2，2-三氟乙基)-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氯苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(丙-2-基)-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-1-(4-甲氧基苯基)-3-甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氯苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(吡啶-2-基)-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氯苯基)-1-(3，4-二氟苯基)-5-羟基-3-甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-1-(4-氟苯基)-5-羟基-3-甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-5-羟基-3-甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氯苯基)-1-(3-氟苯基)-5-羟基-3-甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-1-(3-氟苯基)-5-羟基-3-甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(吡啶-2-基)-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-1-(3，4-二氟苯基)-5-羟基-3-甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氟-4-甲氧基苯基)-1-(4-氟苯基)-5-羟基-3-甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
1-(3，4-二氟苯基)-6-(2-氟-4-甲氧基苯基)-5-羟基-3-甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氯苯基)-5-羟基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氟苯基)-5-羟基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(4-氟苯基)-5-羟基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(4-氯苯基)-5-羟基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氯-4-氟苯基)-5-羟基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1，7-二氢-4H吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-5-羟基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(3-氯吡啶-4-基)-5-羟基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮盐酸盐；
6-(2-氟-4-甲氧基苯基)-5-羟基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氯-4-甲氧基苯基)-5-羟基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氯-5-甲氧基苯基)-5-羟基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2，5-二氯苯基)-5-羟基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2，4-二甲氧基苯基)-5-羟基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(4-氯-2-氟苯基)-5-羟基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
5-羟基-6-(4-甲氧基苯基)-1-甲基-3-(三氟甲基)-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
5-羟基-6-[4-(1H-咪唑-1-基)苯基]-1-甲基-3-(三氟甲基)-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
5-羟基-1-甲基-6-(吡啶-4-基)-3-(三氟甲基)-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氯苯基)-3-乙基-5-羟基-1-甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氯苯基)-3-(2-氟苄基)-5-羟基-2-甲基-2，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氯苯基)-3-(4-氟苯基)-5-羟基-2-甲基-2，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氯苯基)-5-羟基-2，3-二甲基-2，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氯苯基)-5-羟基-2-甲基噻吩并[2，3-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]-5-羟基-2-甲基噻吩并[2，3-b]吡啶-4(7H)-酮；
5-(2-氯苯基)-6-羟基-2-甲基[1，3]噻唑并[5，4-b]吡啶-7(4H)-酮；
5-(2-氯苯基)-6-羟基-2-三氟甲基[1，3]噻唑并[5，4-b]吡啶-7(4H)-酮；
6-(2-氯苯基)-5-羟基-3-甲基[1，2]噁唑并[5，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氯-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-5-羟基-1，3-二甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-5-羟基-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟-4-甲氧基苯基)-5-羟基-1，3-二甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-1-乙基-5-羟基-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
1-乙基-6-(2-氟-4-甲氧基苯基)-5-羟基-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氟-4-甲氧基苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-3-乙基-5-羟基-1-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
3-乙基-6-(2-氟-4-甲氧基苯基)-5-羟基-1-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氯-4-甲氧基苯基)-3-乙基-5-羟基-1-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-1-异丙基-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氯苯基)-5-羟基-3-异丙基-2-甲基-2H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
1-苄基-6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
1-苄基-6-(2-氟-4-甲氧基苯基)-5-羟基-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
5-(2-氯苯基)-6-羟基-7-氧代-4，7-二氢异噻唑并[4，5-b]吡啶-3-甲酰胺；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-3-甲基-1-丙基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氯苯基)-1-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-羟基-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，5-二氟苯基)-1-乙基-5-羟基-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氟-4-甲氧基苯基)-5-羟基-3-甲基-1-丙基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
5-(2-氯苯基)-6-羟基-1，3-二甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-7(4H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-1-(4-氟苄基)-5-羟基-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氯苯基)-3-(二氟甲基)-5-羟基-1-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
3-(二氟甲基)-6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-1-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
1-环丙基-6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-1-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-羟基-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-1-(2-甲氧基乙基)-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-3-异丙基-1-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)酮；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-1-(3-甲氧基丙基)-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
1-环丙基-6-(2，6-二氟-3-甲基苯基)-5-羟基-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
1-环丙基-5-羟基-3-甲基-6-(2，4，6-三氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，3-二氟苯基)-1-乙基-5-羟基-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
1-环丙基-6-(2，3-二氟苯基)-5-羟基-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
1-乙基-5-羟基-3-甲基-6-(2，4，6-三氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
3-(二氟甲基)-6-(2，6-二氟苯基)-1-乙基-5-羟基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-1-乙基-5-羟基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
5-(2，6-二氟苯基)-3-乙基-6-羟基-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-7(4H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-1，3-二乙基-5-羟基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
1-乙基-6-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-5-羟基-3-甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-1-乙基-5-羟基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-3-甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
1-乙基-6-(2-氟苯基)-5-羟基-3-甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-1-异丁基-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氯苯基)-1-乙基-5-羟基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
1-乙基-5-羟基-6-(2-甲氧基苯基)-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-1-异丁基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
1-乙基-6-(4-氟苯基)-5-羟基-3-甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-3-(4-氟苯基)-5-羟基-1-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
1-环丙基-6-(2-氟-4-甲氧基苯基)-5-羟基-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
3-苄基-6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-1-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，4-二氟-3-(三氟甲基)苯基)-1-乙基-5-羟基-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-1-甲基-3-吗啉代-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟-4-甲氧基苯基)-1-乙基-5-羟基-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(4-氨基-2-氟苯基)-1-乙基-5-羟基-3-甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
1-乙基-6-[2-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基]-5-羟基-3-甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-[4-(环丙基甲氧基)-2-氟苯基]-1-乙基-5-羟基-3-甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-1-乙基-5-羟基-3-(2-甲基丙基)-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-1-乙基-5-羟基-3-甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-1-环丙基-5-羟基-3-甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氯苯基)-1-环丙基-5-羟基-3-甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2-氯苯基)-1-(4-氟-2-甲基苯基)-5-羟基-3-甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
1-环戊基-6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-3-甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
N-(4-氯-3-(1-乙基-5-羟基-3-甲基-4-氧代-4，7-二氢-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基)苄基)新戊酰胺；
6-(2-氯苯基)-5-羟基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
1-环丁基-6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
N-(4-氯-3-(5-羟基-1-甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4，7-二氢-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基)苄基)新戊酰胺；
N-(4-氯-3-(1-环丙基-5-羟基-3-甲基-4-氧代-4，7-二氢-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基)苄基)新戊酰胺；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-3-(三氟甲基)-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
N-(4-氟-3-(5-羟基-1-甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4，7-二氢-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基)苄基)新戊酰胺；
1-环己基-6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-3-甲基-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
1-(4，4-二氟环己基)-6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
N-(3-(1-乙基-5-羟基-3-甲基-4-氧代-4，7-二氢-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基)-4-氟苄基)新戊酰胺；
1-(2-氯-4-氟苯基)-6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
1-环丙基-6-(2，6-二氟苯基)-3-乙基-5-羟基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
1-(2-氯-4-氟苯基)-6-(2-氯苯基)-5-羟基-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
N-(4-氯-3-(5-羟基-3-甲基-4-氧代-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4，7-二氢-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基)苄基)新戊酰胺；
1-乙基-5-羟基-3-甲基-6-(2-(三氟甲基)苯基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氯苯基)-1-环丁基-5-羟基-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
3-(2-氯苄基)-6-(2-氯苯基)-5-羟基-1-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氯苯基)-3-乙基-5-羟基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氯苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(3-吗啉代丙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氯苯基)-1-(2-((2S，6R)-2，6-二甲基吗啉代)乙基)-5-羟基-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氯苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(2-(哌啶-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氯苯基)-5-羟基-1-(2-吗啉代乙基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氯苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(2-(吡咯烷-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
5-羟基-3-甲基-1-(2-吗啉代乙基)-6-(2-(三氟甲基)苯基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氯苯基)-1-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-羟基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氯苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-3-乙基-5-羟基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
1-(2-(1H-吡唑-1-基)乙基)-6-(2-氯苯基)-3-乙基-5-羟基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
1-(2-(1H-吡唑-1-基)乙基)-6-(2，6-二氟苯基)-3-乙基-5-羟基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
3-乙基-6-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-5-羟基-1-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
3-乙基-6-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)-5-羟基-1-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，4-二氟苯基)-3-乙基-5-羟基-1-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(3，5-二氟苯基)-3-乙基-5-羟基-1-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，5-二氟苯基)-3-乙基-5-羟基-1-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
3-乙基-6-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)-5-羟基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氯苯基)-3-乙基-5-羟基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-3-乙基-5-羟基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
4-(2-(6-(2-氯苯基)-3-乙基-5-羟基-4-氧代-4，7-二氢-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-1-基)乙基)吗啉-3-酮；
4-(2-(6-(2，6-二氟苯基)-3-乙基-5-羟基-4-氧代-4，7-二氢-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-1-基)乙基)吗啉-3-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，4-二氟苯基)-3-乙基-5-羟基-1-丙基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，4-二氟苯基)-3-乙基-5-羟基-1-丙基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-3-乙基-1-(2-(4-乙基哌嗪-1-基)乙基)-5-羟基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氯苯基)-3-乙基-1-(2-(4-乙基哌嗪-1-基)乙基)-5-羟基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
3-乙基-6-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)-5-羟基-1-(3-吗啉代丙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-3-乙基-5-羟基-1-(3-吗啉代丙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，4-二氟苯基)-3-乙基-5-羟基-1-(3-吗啉代丙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氯苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(2-(哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
3-乙基-6-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)-5-羟基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-3-乙基-5-羟基-1-异戊基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氯苯基)-3-乙基-5-羟基-1-异戊基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-3-(羟甲基)-1-丙基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
1-环丙基-6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-3-(羟甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
4-(2-(6-(2，6-二氟苯基)-3-乙基-5-羟基-4-氧代-4，7-二氢-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-1-基)乙基)-2，2-二甲基吗啉-3-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-1-甲基-3-(1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
1-环丙基-6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-3-(1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-(2，4-二氟苯基)噻唑-5-基)-3-乙基-5-羟基-1-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-3-(羟甲基)-1-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-1-甲基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
1-环丙基-6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-1-甲基-3-(吗啉代甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-3-((4-异丙基哌嗪-1-基)甲基)-1-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氯苯基)-5-羟基-1-甲基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氯苯基)-5-羟基-1-甲基-3-(1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
(S)-6-(2，6-二氟苯基)-3-((3-氟吡咯烷-1-基)甲基)-5-羟基-1-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-3-((4，4-二氟哌啶-1-基)甲基)-5-羟基-1-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-3-((2，6-二甲基吗啉代)甲基)-5-羟基-1-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氯苯基)-5-羟基-3-(羟甲基)-1-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氯苯基)-5-羟基-1-甲基-3-(吗啉代甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-1-(2-((2R，6S)-2，6-二甲基吗啉代)乙基)-3-乙基-5-羟基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
1-环丙基-6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-3-(吗啉代甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氯苯基)-1-(2-((2R，6S)-2，6-二甲基吗啉代)乙基)-3-乙基-5-羟基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-3-乙基-5-羟基-1-(2-羟乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-1-(4-氟苯基)-5-羟基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-1-(2-(4，4-二氟哌啶-1-基)乙基)-3-乙基-5-羟基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-1-(3-((2R，6S)-2，6-二甲基吗啉代)丙基)-3-乙基-5-羟基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-3-乙基-5-羟基-1-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氯苯基)-3-乙基-5-羟基-1-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-1-甲基-3-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氯苯基)-1-(2-(4，4-二氟哌啶-1-基)乙基)-3-乙基-5-羟基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-3-乙基-5-氟-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氯苯基)-3-乙基-5-羟基-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
3-乙基-6-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)-5-羟基-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-3-((4-异丁基哌嗪-1-基)甲基)-1-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-3-(羟甲基)-1-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
3-((4-环丙基哌嗪-1-基)甲基)-6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-1-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-3-(羟甲基)-1-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-3-乙基-5-羟基-1-(2-(甲基磺酰基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-1-甲基-3-((4-(氧杂环丁-3-基)哌嗪-1-基)甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-1-甲基-3-((4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-基)甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-3-((4-(2-氟乙基)哌嗪-1-基)甲基)-5-羟基-1-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
(S)-6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-3-((4-异丙基-3-甲基哌嗪-1-基)甲基)-1-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
(R)-6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-3-((4-异丙基-3-甲基哌嗪-1-基)甲基)-1-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-1-甲基-3-((3-(三氟甲基)-5，6-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡嗪-7(8H)-基)甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
5-羟基-6-(4-羟苯基)-1-甲基-3-(三氟甲基)-1，7-二氢-4H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4-酮；
碳酸6-(2，6-二氟苯基)-1，3-二甲基-4-氧代-4，7-二氢-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-基甲基酯；
5-(2-氯苯基)-6-羟基-2，3-二甲基吡喃并[3，2-c]吡唑-7(2H)-酮；
5-(2-氯苯基)-6-羟基-3-甲基-2-(丙-2-基)吡喃并[3，2-c]吡唑-7(2H)-酮；
5-(2-氯苯基)-2-乙基-6-羟基-3-甲基吡喃并[3，2-c]吡唑-7(2H)-酮；
6-(2-氯苯基)-5-羟基-1，3-二甲基吡喃并[2，3-c]吡唑-4(1H)-酮；
6-(2-氯苯基)-1-(4-氟苯基)-5-羟基-3-甲基吡喃并[2，3-c]吡唑-4(1H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-5-羟基-1-(3-羟丙基)-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2-氯苯基)-5-甲氧基-1，3-二甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
6-(2，6-二氟苯基)-1-乙基-5-甲氧基-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮；
N-[4-(1-乙基-5-羟基-3-甲基-4-氧代-4，7-二氢-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基)-3-氟苯基]甲磺酰胺；
N-[4-(1-乙基-5-羟基-3-甲基-4-氧代-4，7-二氢-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基)-3，5-二氟苯基]甲磺酰胺；
N-{3-氟-4-[5-羟基-1-甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-4，7-二氢-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基]苯基}甲磺酰胺；
6-(2-氯苯基)-3-乙基-5-羟基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮盐酸盐；
6-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮二盐酸盐；
6-(2-氯苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮三盐酸盐；
6-(2，6-二氟苯基)-3-乙基-5-羟基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮三盐酸盐；
6-(2，6-二氟苯基)-3-乙基-5-羟基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮二盐酸盐；
6-(2-氯苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮富马酸盐；
6-(2，6-二氟苯基)-3-乙基-5-羟基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮富马酸盐；
6-(2-氯苯基)-3-乙基-5-羟基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮富马酸盐；
6-(2-氯苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮半富马酸盐；
6-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮半富马酸盐；
6-(2-氯苯基)-3-乙基-5-羟基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮半富马酸盐；
6-(2-氯苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮三甲磺酸盐；
6-(2，6-二氟苯基)-3-乙基-5-羟基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮三甲磺酸盐；
3-乙基-6-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)-5-羟基-1-(2-吗啉代乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮三甲磺酸盐；
6-(2-氯苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮半2-羟基丙烷-1，2，3-三羧酸盐；
6-(2-氯苯基)-3-乙基-5-羟基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮半2-羟基丙烷-1，2，3-三羧酸盐；
6-(2，6-二氟苯基)-3-乙基-5-羟基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮半2-羟基丙烷-1，2，3-三羧酸盐；
6-(2-氯苯基)-5-羟基-3-甲基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮2-羟基丙烷-1，2，3-三羧酸盐；
6-(2，6-二氟苯基)-3-乙基-5-羟基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮2-羟基丙烷-1，2，3-三羧酸盐；或
6-(2-氯苯基)-3-乙基-5-羟基-1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-4(7H)-酮2-羟基丙烷-1，2，3-三羧酸盐；
及其药学上可接受的盐。
14.一种具有下式的化合物
Figure FDA0002350595290000361
或其药学上可接受的盐。
15.一种具有下式的化合物
Figure FDA0002350595290000362
或其药学上可接受的盐。
16.一种具有下式的化合物
Figure FDA0002350595290000363
或其药学上可接受的盐。
17.一种具有下式的化合物
Figure FDA0002350595290000371
或其药学上可接受的盐。
18.一种药物组合物，其包含根据权利要求1至17中任一项所述的化合物和药学上可接受的赋形剂。
19.根据权利要求18所述的药物组合物，其中所述药学上可接受的赋形剂是载体或稀释剂。
20.一种治疗受试者的NADPH氧化酶介导的疾病、病症、综合征或疾患的方法，所述方法包括施用有效量的根据权利要求1至17中任一项所述的化合物。
21.根据权利要求20所述的方法，其中所述疾病、病症、综合征或疾患是疼痛、糖尿病、囊性纤维化骨质疏松症、哮喘、咳嗽、慢性阻塞性肺疾病、COPD恶化、非小细胞肺癌、乳腺癌、前列腺癌、非酒精性脂肪性肝病、非酒精性脂肪性肝炎、原发性胆汁性肝硬化或肝硬化。
22.根据权利要求21所述的方法，其中所述疾病、病症、综合征或疾患是囊性纤维化、咳嗽、哮喘、特发性肺纤维化、慢性阻塞性肺疾病或COPD恶化。
23.根据权利要求21所述的方法，其中所述疾病、病症、综合征或疾患是非酒精性脂肪性肝病、非酒精性脂肪性肝炎、原发性胆汁性肝硬化或肝硬化。
24.根据权利要求21所述的方法，其中所述疾病、病症、综合征或疾患是非小细胞肺癌、乳腺癌或前列腺癌。
25.一种制备式(II)的化合物或其药学上可接受的盐的方法
Figure FDA0002350595290000381
所述方法包括：
(i)使式(6’)的化合物水解，得到式(7’)的化合物；
Figure FDA0002350595290000382
(ii)使式(7’)的化合物与式(8’)的化合物反应，得到式(9’)的化合物
Figure FDA0002350595290000383
(iii)转化式(9’)的化合物，得到通式(IIa)的化合物；
Figure FDA0002350595290000384
(iv)任选地将通式(II)的化合物转化为其药学上可接受的盐；
其中，
Z3是CH或N；
在每次出现时，R1独立地选自卤素、氨基、羟基、C1-8烷基、C1-8烷氧基、C1-8烷氧基C1-8烷氧基、卤代C1-8烷基、卤代C1-8烷氧基、-(CH2)mNR5C(O)R6、-(CH2)mOR5、-(CH2)mNR7S(O)PR8、C6-14芳基和5至14元杂芳基；其中C6-14芳基任选地被一个或多个选自卤素和C1-8烷基的取代基取代；
在每次出现时，R2独立地选自氢、C1-8烷基、卤代C1-8烷基、羟基C1-8烷基、-(CH2)mNR5C(O)NR6、-(CH2)mOR5、3至15元杂环基、3至15元杂环基C1-8烷基、C6-14芳基和C6-14芳基C1-8烷基；其中3至15元杂环基、3至15元杂环基C1-8烷基、C6-14芳基和C6-14芳基C1-8烷基任选地被一个或多个选自卤素、C1-8烷基、卤代C1-8烷基、-(CH2)mS(O)PR8、C3-12环烷基和3至15元杂环基的取代基取代；
在每次出现时，R3独立地选自氢、C1-8烷基、卤代C1-8烷基、羟基C1-8烷基、-(CH2)mOR5、-(CH)2N(R5)2、-(CH2)mS(O)PR8、C3-12环烷基、3至15元杂环基、3至15元杂环基C1-8烷基、C6-14芳基、C6-14芳基C1-8烷基、5至14元杂芳基和5至14元杂芳基C1-8烷基；其中C3-12环烷基、3至15元杂环基C1-8烷基、C6-14芳基和C6-14芳基C1-8烷基任选地被一个或多个选自卤素、氧代基、C1-8烷基和C1-8烷氧基的取代基取代；
在每次出现时，R5独立地选自氢和C1-8烷基；
在每次出现时，R6独立地选自氢和C1-8烷基；
在每次出现时，R7独立地选自氢和C1-8烷基；
在每次出现时，R8独立地选自氢和C1-8烷基；
‘m’是0至4范围的整数，包括两个端值；
‘n’是0至5范围的整数，包括两个端值；且
‘p’是0至2范围的整数，包括两个端值。
26.根据权利要求25所述的方法，其中在合适的碱存在下进行式(6’)的化合物的反应。
27.根据权利要求26所述的方法，其中所述合适的碱是氢氧化钾或氢氧化钠。
28.根据权利要求25所述的方法，其中在合适溶剂的混合物存在下进行式(6’)的化合物的反应。
29.根据权利要求28所述的方法，其中所述合适溶剂的混合物是水和乙醇或水和甲醇。
30.根据权利要求29所述的方法，其中所述合适溶剂的混合物呈适当比例。
31.根据权利要求30所述的方法，其中适当比例是1∶3。
32.根据权利要求25所述的方法，其中在合适的碱存在下进行式(7’)的化合物的反应。
33.根据权利要求32所述的方法，其中所述合适的碱是氟化钾。
34.根据权利要求25所述的方法，其中在合适溶剂存在下进行式(7’)的化合物的反应。
35.根据权利要求34所述的方法，其中所述合适溶剂是N，N’-二甲基甲酰胺。
36.根据权利要求25所述的方法，其中在合适的脱水剂存在下进行式(9’)的化合物的反应。
37.根据权利要求36所述的方法，其中所述合适的脱水剂是多磷酸、五氧化二磷、氯化锌或硫酸。
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