CN110862399A - 一种从汉防己总碱中制取汉防己甲素的方法 - Google Patents
一种从汉防己总碱中制取汉防己甲素的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN110862399A CN110862399A CN201911180373.0A CN201911180373A CN110862399A CN 110862399 A CN110862399 A CN 110862399A CN 201911180373 A CN201911180373 A CN 201911180373A CN 110862399 A CN110862399 A CN 110862399A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- tetrandrine
- extract
- extracting
- total alkali
- sample
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- WVTKBKWTSCPRNU-KYJUHHDHSA-N (+)-Tetrandrine Chemical compound C([C@H]1C=2C=C(C(=CC=2CCN1C)OC)O1)C(C=C2)=CC=C2OC(=C2)C(OC)=CC=C2C[C@@H]2N(C)CCC3=CC(OC)=C(OC)C1=C23 WVTKBKWTSCPRNU-KYJUHHDHSA-N 0.000 title claims abstract description 226
- WVTKBKWTSCPRNU-UHFFFAOYSA-N rac-Tetrandrin Natural products O1C(C(=CC=2CCN3C)OC)=CC=2C3CC(C=C2)=CC=C2OC(=C2)C(OC)=CC=C2CC2N(C)CCC3=CC(OC)=C(OC)C1=C23 WVTKBKWTSCPRNU-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 113
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 48
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims abstract description 27
- NOTFZGFABLVTIG-UHFFFAOYSA-N Cyclohexylethyl acetate Chemical compound CC(=O)OCCC1CCCCC1 NOTFZGFABLVTIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 20
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 19
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims abstract description 19
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 18
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims abstract description 12
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract description 10
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims abstract description 8
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 claims abstract description 6
- 238000012856 packing Methods 0.000 claims abstract description 4
- 238000011068 loading method Methods 0.000 claims abstract description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 38
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 35
- 239000000178 monomer Substances 0.000 claims description 20
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 12
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 12
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 claims description 11
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims description 11
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 10
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 claims description 10
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 8
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 8
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 7
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 7
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 5
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 5
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 claims description 5
- 238000007873 sieving Methods 0.000 claims description 5
- XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N Cyclohexane Chemical compound C1CCCCC1 XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000002481 ethanol extraction Methods 0.000 claims description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 2
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 claims description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 claims description 2
- HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N diethylamine Chemical compound CCNCC HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 abstract description 3
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 abstract description 3
- 239000000945 filler Substances 0.000 abstract 1
- IIQSJHUEZBTSAT-VMPREFPWSA-N fangchinoline Chemical compound C([C@H]1C=2C=C(C(=CC=2CCN1C)OC)O1)C(C=C2)=CC=C2OC(=C2)C(OC)=CC=C2C[C@@H]2N(C)CCC3=CC(OC)=C(O)C1=C23 IIQSJHUEZBTSAT-VMPREFPWSA-N 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 6
- 241001369613 Stephania tetrandra Species 0.000 description 5
- NYCBHYDKBQVJSA-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;n-ethylethanamine;methanol Chemical compound OC.CC#N.CCNCC NYCBHYDKBQVJSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 150000003797 alkaloid derivatives Chemical class 0.000 description 4
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 4
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 3
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 3
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 2
- 241000218164 Menispermaceae Species 0.000 description 2
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HIMXGTXNXJYFGB-UHFFFAOYSA-N alloxan Chemical compound O=C1NC(=O)C(=O)C(=O)N1 HIMXGTXNXJYFGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000202 analgesic effect Effects 0.000 description 2
- 230000006793 arrhythmia Effects 0.000 description 2
- 206010003119 arrhythmia Diseases 0.000 description 2
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 2
- IIQSJHUEZBTSAT-UHFFFAOYSA-N fangchinoline Natural products O1C(C(=CC=2CCN3C)OC)=CC=2C3CC(C=C2)=CC=C2OC(=C2)C(OC)=CC=C2CC2N(C)CCC3=CC(OC)=C(O)C1=C23 IIQSJHUEZBTSAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 2
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 2
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- 241000269417 Bufo Species 0.000 description 1
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000004880 Polyuria Diseases 0.000 description 1
- 201000010001 Silicosis Diseases 0.000 description 1
- 230000003356 anti-rheumatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000003435 antirheumatic agent Substances 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- MSQDVGOEBXMPRF-UHFFFAOYSA-N cyclohexane;propan-2-one Chemical compound CC(C)=O.C1CCCCC1 MSQDVGOEBXMPRF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000003467 diminishing effect Effects 0.000 description 1
- 230000035619 diuresis Effects 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229930182486 flavonoid glycoside Natural products 0.000 description 1
- 150000007955 flavonoid glycosides Chemical class 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000002429 large intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000003859 lipid peroxidation Effects 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000031225 myocardial ischemia Diseases 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 230000002040 relaxant effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 210000003699 striated muscle Anatomy 0.000 description 1
- 150000003512 tertiary amines Chemical class 0.000 description 1
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
- C07D491/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains three hetero rings
- C07D491/18—Bridged systems
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明公开了一种从汉防己总碱提取物中制取汉防己甲素的方法，该方法包括拌样、装柱、上样、分离、纯化等步骤。该方法利用中性氧化铝柱层析，以环己烷‑乙酸乙酯为洗脱剂洗脱，快速获得汉防己总碱提取物中的汉防己甲素，该方法所用的柱层析填料可重复利用，所用的洗脱剂可回收再利用，不仅环保，还具有操作简便、所得汉防己甲素纯度高、适合工业化生产的特点。采用本发明从汉防己总碱提取物出发制备汉防己甲素的方法制备得到的汉防己甲素纯度≥99％。
Description
技术领域
本发明涉及植物有效成分提取领域，具体涉及一种从汉防己总碱中制取汉防己甲素的方法。
背景技术
中药粉防己在中国应用已有上千年的历史，粉坊己(又称汉防己)是防己科千金藤属植物(Stephania tetrandra S.Moore)的干燥根切片，其根种主要有效成分为汉防己碱(汉防己甲素，tetrandrine)和汉防己诺林碱(汉防己乙素，fangehinoline)、汉防己丙素，此外还含有黄酮甙、酚类、有机酸、挥发油等。研究表明汉防己碱、汉防己诺林碱具有镇痛、消炎、降压、抗肿瘤、松弛横纹肌等作用，近年来研究发现汉防己碱还具有抗心律失常的作用。
汉防己的有效成分为生物碱主要是汉防己甲素和汉防己乙素，目前已知汉防己甲素的药理作用有：(1)具有抗肿瘤作用；(2)具有降血压、抗心肌缺血和心律失常作用；(4)具有抗矽肺作用；(6)具有抗脂质过氧化作用；(7)防止四氧嘧啶升高血糖的作用；(8)具有镇痛作用。汉防己甲素能用作抗风湿与镇痛药,用于治疗风湿、高血压、肺癌等病症。目前，汉防己甲素的提取方法一般较为复杂，并且需要进一步的纯化步骤。
汉防己中汉防己甲素的提取分离纯化可采用多种方法来实现，专利申请号为201610366510.X，专利名称为“一种汉防己甲素、乙素的制备方法”的中国专利公开了一种采用中压硅胶色谱柱法分离在结合制备高效液相色谱法纯化汉防己甲素、乙素的制备方法，该方法采用亲脂性叔胺总碱经2个步骤制得，1)中压硅胶色谱柱法分离，以石油醚-乙酸乙酯-二乙胺洗脱；2)结合制备高效液相色谱法纯化，甲醇-水为流动相，最后将洗脱液分别浓缩蒸干即可，该方法具备操作方便、快捷，纯度、提取率高的优点。但是该方法所用的制备高效液相色谱法通常只适合少量样品的制备，不适合大生产制备。
专利申请号为201710034052.4，专利名称为“离子交换和硅胶柱层析法分离制备汉防己甲、乙素的方法”的中国专利公开了运用离子交换树脂和C18键合硅胶柱层析法，快速分离纯化制得高纯度的汉防己甲素和乙素，同时公开了一种利用乙醇进行重结晶纯化汉防己甲素和乙素的方法。该方法虽然可以得到高纯度的汉防己甲素，但离子交换树脂和C18键合硅胶成本较高，工业化生产成本太大，不适合工业化生产。题名为《TLC法分离汉防己中汉防己甲素、乙素》，作者为徐应淑、江波的公开文献亦报道了一种采用硅胶制备薄层色谱法，以环己烷-丙酮(0.5:1)为展开剂分离汉防己甲素、乙素的方法，但是该方法也只适合少量样品的制备，不适合大生产制备；该文献在分离条件摸索曾使用到了环己烷-乙酸乙酯(6:2)为展开剂，但最后未能将该展开剂运用于实际分离纯化中。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术存在的缺陷，提供一种从汉防己总碱中制取汉防己甲素的方法。
为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
本发明的从汉防己总碱中制取汉防己甲素的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)拌样：称取汉防己总碱提取物，加汉防己总碱提取物重量2-5倍量的甲醇或乙醇，搅拌溶解，溶液加2-5重量倍量的中性氧化铝搅拌均匀，蒸干，粉碎，过40-60目筛，得样品，备用；
(2)装柱：取汉防己总碱提取物重量30-100倍量的中性氧化铝，以环己烷-乙酸乙酯溶液为溶剂，湿法装柱；
(3)上样：取步骤(1)拌样粉碎好的样品，加样品重量5-10倍量的环己烷-乙酸乙酯溶液混匀，混合液加到步骤(2)中所得的中性氧化铝色谱柱上；
(4)分离：以环己烷-乙酸乙酯溶液为洗脱剂，洗脱，分段收集洗脱液，0.25-0.5柱体积量为1份，洗脱至2-6倍柱体积；取各份洗脱液，以汉防己甲素为对照品，采用薄层鉴别的方法进行检视，合并洗脱液，回收溶剂，蒸干，即得汉防己甲素单体样品；
(5)纯化：采用高效液相色谱法检查汉防己甲素单体样品纯度，若纯度未≥99％，则可重复步骤(4)的柱层析分离1-3次进行纯化，直至得到的汉防己甲素纯度≥99％。
优选地，所述中性氧化铝的粒径为80-100目。
优选地，所述环己烷-乙酸乙酯溶液中环己烷和乙酸乙酯的体积比为27-7:3。
优选地，所述步骤(5)中，采用高效液相色谱法检查汉防己甲素单体样品纯度时，采用体积比为32-37:32-37:28-32的甲醇-乙腈-体积分数0.1％二乙胺溶液作为流动相。
优选地，所述步骤(5)中，采用高效液相色谱法检查汉防己甲素单体样品纯度时，控制柱温为25℃，流速为0.8-1.2mL/min，检测波长为282nm，进样量为9-11μL。
本发明还提供所述汉防己总碱提取物的提取方法，具体是采用水提或40-70％体积百分浓度的乙醇提取得到的。
方法1：将汉防己粉碎后加水提取2-3次，每次加水量相当于防己重量的8-10倍，每次提取时间为1-3小时，合并提取液，过滤，滤液浓缩至65-75℃时相对密度为1.10-1.20的清膏，得到汉防己总碱提取物。
方法2：将汉防己粉碎后用55-65％乙醇回流提取2-3次，每次乙醇用量为药材总量的6-8倍，提取时间为2-3小时，合并提取液，过滤，滤液浓缩至65-75℃时相对密度为1.05-1.20的清膏，得到汉防己总碱提取物。
方法3：将汉防己粉碎后加水提取2-3次，每次加水量相当于药材总重量的8-10倍，每次提取时间为1-3小时，合并提取液，过滤，滤液浓缩至65-75℃时相对密度为1.10-1.20的清膏，加入乙醇，使含醇量为55-65％，静置12-24小时，过滤，滤液浓缩至65-75℃时相对密度为1.05-1.20的浸膏，得到汉防己总碱提取物。
本发明采用的中药材来源和功效如下：
汉防己，为防己科植物粉防己Stephania tetrandra S.Moore的干燥根。又名粉防己、粉寸己、土防己、石蟾蜍、蟾蜍薯、倒地拱、白木香、猪大肠等。苦，寒。归膀胱、肺经。利水消肿，祛风止痛。用于水肿脚气，小便不利，湿疹疮毒，风湿痹痛；高血压。
本发明由于采用了上述技术方案，具有以下有益效果：
本发明利用中性氧化铝柱层析，以环己烷-乙酸乙酯为洗脱剂洗脱快速制备获得汉防己总碱提取物中的汉防己甲素，该方法所用的柱层析填料可重复利用，所用的洗脱剂可回收再利用，该方法不仅环保，还具有具备操作简便，所得汉防己甲素纯度高，适合工业化生产的特点。采用本发明方法制备得到的汉防己甲素纯度≥99％。
附图说明
图1为实施例1汉防己甲素单体的高效液相色谱图；
图2为实施例2汉防己甲素单体的高效液相色谱图；
图3为实施例3汉防己甲素单体的高效液相色谱图。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下举出优选实施例，对本发明进一步详细说明。然而，需要说明的是，说明书中列出的许多细节仅仅是为了使读者对本发明的一个或多个方面有一个透彻的理解，即便没有这些特定的细节也可以实现本发明的这些方面。除非另有说明，本发明中的乙醇量的百分数是体积百分数，v/v表示溶液的体积比。
实施例1
一种从汉防己总碱中制取汉防己甲素的方法，包括如下步骤：
(1)取汉防己，粉碎后加水提取2次，每次加水量相当于防己重量的10倍、8倍，每次提取时间分别为3小时、1小时，合并提取液，过滤，滤液浓缩至65℃时相对密度为1.10的清膏，得到汉防己总碱提取物；
(2)取汉防己总碱提取物5g，加汉防己总碱提取物重量2倍量的甲醇溶解，溶液加4倍量的中性氧化铝(80目)搅拌均匀，蒸干，粉碎，过40目筛，备用；
(3)取汉防己总碱提取物100倍量的中性氧化铝(80目)，以环己烷-乙酸乙酯(体积比9:1)溶液为溶剂，湿法装柱；
(4)取步骤(2)的样品，加样品重量8倍量的环己烷-乙酸乙酯(体积比9:1)溶液混匀，混合液加到步骤(3)中所得的中性氧化铝色谱柱上；
(5)以环己烷-乙酸乙酯(体积比9:1)溶液为洗脱剂，洗脱，分段收集洗脱液，1/2柱体积量为一份，洗脱至2倍柱体积；取各份洗脱液，以汉防己甲素为对照品，采用薄层鉴别的方法进行检视，收集含有汉防己甲素的洗脱液，回收溶剂，蒸干，即得汉防己甲素单体样品1.30g。
采用高效液相色谱法检测上述汉防己甲素单体的纯度，控制柱温为25℃，色谱柱为Waters
C18，流动相为体积比为32:37:32的甲醇-乙腈-体积分数0.1％二乙胺溶液，流速为0.8mL/min，检测波长为282nm，进样量为9μL，检测结果表明所述汉防己甲素单体样品的纯度为99.42％，结果见表1和图1。
| No. | 保留时间(分钟) | 面积(微伏·秒) | ％面积 | 高度(微伏) | 积分类型 |
| 1 | 1.239 | 2819 | 0.01 | 355 | BB |
| 2 | 1.488 | 5338 | 0.01 | 1659 | BV |
| 3 | 1.590 | 19606 | 0.05 | 3210 | VB |
| 4 | 2.481 | 10494 | 0.03 | 936 | BB |
| 5 | 2.909 | 23105 | 0.06 | 487 | BV |
| 6 | 5.051 | 17790 | 0.05 | 399 | VB |
| 7 | 6.766 | 11405 | 0.03 | 1091 | BB |
| 8 | 15.494 | 32418 | 0.09 | 1697 | BB |
| 9 | 27.225 | 36543386 | 99.66 | 931040 | BB |
表1
实施例2
一种从汉防己总碱中制取汉防己甲素的方法，包括如下步骤：
(1)取汉防己，粉碎后用65％乙醇回流提取3次，每次乙醇用量为药材总量的8倍、7倍、6倍，提取时间为3小时、2小时、2小时，合并提取液，过滤，滤液浓缩至75℃时相对密度为1.20的清膏，得到汉防己总碱提取物；
(2)取汉防己总碱提取物30g，加汉防己总碱提取物重量3.5倍量的乙醇溶解，溶液加2倍量的中性氧化铝(90目)搅拌均匀，蒸干，粉碎，过50目筛，备用；
(3)取汉防己总碱提取物30倍量的中性氧化铝(90目)，以环己烷-乙酸乙酯(体积比8:2)溶液为溶剂，湿法装柱；
(4)取步骤(2)的样品，加样品重量5倍量的环己烷-乙酸乙酯(体积比8:2)溶液混匀，混合液加到步骤(3)中所得的中性氧化铝色谱柱上；
(5)以环己烷-乙酸乙酯(体积比8:2)溶液为洗脱剂，洗脱，分段收集洗脱液，1/3柱体积量为一份，洗脱至4倍柱体积；取各份洗脱液，以汉防己甲素为对照品，采用薄层鉴别的方法进行检视，收集含有汉防己甲素的洗脱液，回收溶剂，蒸干，即得汉防己甲素单体样品7.14g。
采用高效液相色谱法检测上述汉防己甲素单体的纯度，控制柱温为25℃，色谱柱为Waters
C18，流动相为体积比为36:32:29的甲醇-乙腈-体积分数0.1％二乙胺溶液，流速为1.0mL/min，检测波长为282nm，进样量为10μL，检测结果表明所述汉防己甲素单体样品的纯度为99.66％，结果见表2和图2。
| No. | 保留时间(分钟) | 面积(微伏·秒) | ％面积 | 高度(微伏) | 积分类型 |
| 1 | 1.232 | 3023 | 0.01 | 454 | BB |
| 2 | 1.483 | 3882 | 0.02 | 1351 | BV |
| 3 | 1.570 | 17016 | 0.07 | 3173 | VB |
| 4 | 2.479 | 3904 | 0.02 | 792 | BB |
| 5 | 2.897 | 34302 | 0.14 | 509 | BB |
| 6 | 6.797 | 9298 | 0.04 | 876 | BB |
| 7 | 27.420 | 25113346 | 99.72 | 659674 | BB |
表2
实施例3
一种从汉防己总碱中制取汉防己甲素的方法，包括如下步骤：
(1)取汉防己，粉碎后加水提取3次，每次加水量相当于药材总重量的10倍、9倍、8倍，每次提取时间为3小时、2小时、1小时，合并提取液，过滤，滤液浓缩至70℃时相对密度为1.15的清膏，加入乙醇，使含醇量为60％，静置20小时，过滤，滤液浓缩至68℃时相对密度为1.15的浸膏，得到汉防己总碱提取物；
(2)取汉防己总碱提取物50g，加汉防己总碱提取物重量5倍量的乙醇溶解，溶液加5倍量的中性氧化铝(100目)搅拌均匀，蒸干，粉碎，过60目筛，备用；
(3)取汉防己总碱提取物60倍量的中性氧化铝(100目)，以环己烷-乙酸乙酯(体积比7:3)溶液为溶剂，湿法装柱；
(4)取步骤(2)的样品，加样品重量6倍量的环己烷-乙酸乙酯(体积比7:3)溶液混匀，混合液加到步骤(3)中所得的中性氧化铝色谱柱上；
(5)以环己烷-乙酸乙酯(体积比7:3)溶液为洗脱剂，洗脱，分段收集洗脱液，1/4柱体积量为一份，洗脱至4倍柱体积；取各份洗脱液，以汉防己甲素为对照品，采用薄层鉴别的方法进行检视，收集含有汉防己甲素的洗脱液，回收溶剂，蒸干，即得汉防己甲素单体样品11.8g。
采用高效液相色谱法检测上述汉防己甲素单体的纯度，控制柱温为25℃，色谱柱为Waters
C18，流动相为体积比为37:34:32的甲醇-乙腈-体积分数0.1％二乙胺溶液，流速为1.2mL/min，检测波长为282nm，进样量为11μL，检测结果表明所述汉防己甲素单体样品的纯度为99.72％，结果见表3和图3。
| No. | 保留时间(分钟) | 面积(微伏·秒) | ％面积 | 高度(微伏) | 积分类型 |
| 1 | 1.250 | 4350 | 0.05 | 500 | BV |
| 2 | 1.484 | 5853 | 0.07 | 1840 | VV |
| 3 | 1.572 | 16773 | 0.19 | 3005 | VB |
| 4 | 2.479 | 3049 | 0.03 | 720 | BB |
| 5 | 2.892 | 20896 | 0.24 | 469 | BB |
| 6 | 27.619 | 8781363 | 99.42 | 244828 | BB |
表3
Claims (9)
1.一种从汉防己总碱中制取汉防己甲素的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)拌样：称取汉防己总碱提取物，加汉防己总碱提取物重量2-5倍量的甲醇或乙醇，搅拌溶解，溶液加2-5重量倍量的中性氧化铝搅拌均匀，蒸干，粉碎，过40-60目筛，得样品，备用；
(2)装柱：取汉防己总碱提取物重量30-100倍量的中性氧化铝，以环己烷-乙酸乙酯溶液为溶剂，湿法装柱；
(3)上样：取步骤(1)拌样粉碎好的样品，加样品重量5-10倍量的环己烷-乙酸乙酯溶液混匀，混合液加到步骤(2)中所得的中性氧化铝色谱柱上；
(4)分离：以环己烷-乙酸乙酯溶液为洗脱剂，洗脱，分段收集洗脱液，0.25-0.5柱体积量为1份，洗脱至2-6倍柱体积；取各份洗脱液，以汉防己甲素为对照品，采用薄层鉴别的方法进行检视，合并洗脱液，回收溶剂，蒸干，即得汉防己甲素单体样品；
(5)纯化：采用高效液相色谱法检查汉防己甲素单体样品纯度，若纯度未≥99％，则可重复步骤(4)的柱层析分离1-3次进行纯化，直至得到的汉防己甲素纯度≥99％。
2.根据权利要求1所述的从汉防己总碱中制取汉防己甲素的方法，其特征在于，所述中性氧化铝的粒径为80-100目。
3.根据权利要求1所述的从汉防己总碱中制取汉防己甲素的方法，其特征在于，所述环己烷-乙酸乙酯溶液中环己烷和乙酸乙酯的体积比为27-7:3。
4.根据权利要求1所述的从汉防己总碱中制取汉防己甲素的方法，其特征在于，所述步骤(5)中，采用高效液相色谱法检查汉防己甲素单体样品纯度时，采用体积比为32-37:32-37:28-32的甲醇-乙腈-体积分数0.1％二乙胺溶液作为流动相。
5.根据权利要求1所述的从汉防己总碱中制取汉防己甲素的方法，其特征在于，所述步骤(5)中，采用高效液相色谱法检查汉防己甲素单体样品纯度时，控制柱温为25℃，流速为0.8-1.2mL/min，检测波长为282nm，进样量为9-11μL。
6.根据权利要求1所述的从汉防己总碱中制取汉防己甲素的方法，其特征在于，所述汉防己总碱提取物的采用水提或40-70％体积百分浓度的乙醇提取得到的。
7.根据权利要求6所述的从汉防己总碱中制取汉防己甲素的方法，其特征在于，所述汉防己总碱提取物的制备方法如下：将汉防己粉碎后加水提取2-3次，每次加水量相当于防己重量的8-10倍，每次提取时间为1-3小时，合并提取液，过滤，滤液浓缩至65-75℃时相对密度为1.10-1.20的清膏，得到汉防己总碱提取物。
8.根据权利要求6所述的从汉防己总碱中制取汉防己甲素的方法，其特征在于，所述汉防己总碱提取物的制备方法如下：将汉防己粉碎后用55-65％乙醇回流提取2-3次，每次乙醇用量为药材总量的6-8倍，提取时间为2-3小时，合并提取液，过滤，滤液浓缩至65-75℃时相对密度为1.05-1.20的清膏，得到汉防己总碱提取物。
9.根据权利要求6所述的从汉防己总碱中制取汉防己甲素的方法，其特征在于，所述汉防己总碱提取物的制备方法如下：将汉防己粉碎后加水提取2-3次，每次加水量相当于药材总重量的8-10倍，每次提取时间为1-3小时，合并提取液，过滤，滤液浓缩至65-75℃时相对密度为1.10-1.20的清膏，加入乙醇，使含醇量为55-65％，静置12-24小时，过滤，滤液浓缩至65-75℃时相对密度为1.05-1.20的浸膏，得到汉防己总碱提取物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201911180373.0A CN110862399A (zh) | 2019-11-27 | 2019-11-27 | 一种从汉防己总碱中制取汉防己甲素的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201911180373.0A CN110862399A (zh) | 2019-11-27 | 2019-11-27 | 一种从汉防己总碱中制取汉防己甲素的方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN110862399A true CN110862399A (zh) | 2020-03-06 |
Family
ID=69656577
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201911180373.0A Pending CN110862399A (zh) | 2019-11-27 | 2019-11-27 | 一种从汉防己总碱中制取汉防己甲素的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN110862399A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111484500A (zh) * | 2020-05-22 | 2020-08-04 | 瑞阳制药有限公司 | 汉防己甲素的制备方法 |
| CN116925091A (zh) * | 2023-07-07 | 2023-10-24 | 石药集团江西金芙蓉药业股份有限公司 | 一种注射级汉防己甲素的纯化方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101012229A (zh) * | 2007-01-26 | 2007-08-08 | 北海阳光药业有限公司 | 一种不含苯及氯仿的汉防己甲素及其制备方法 |
| CN106831804A (zh) * | 2017-01-18 | 2017-06-13 | 石药集团江西金芙蓉药业股份有限公司 | 离子交换和硅胶柱层析法分离制备汉防己甲、乙素的方法 |
-
2019
- 2019-11-27 CN CN201911180373.0A patent/CN110862399A/zh active Pending
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101012229A (zh) * | 2007-01-26 | 2007-08-08 | 北海阳光药业有限公司 | 一种不含苯及氯仿的汉防己甲素及其制备方法 |
| CN106831804A (zh) * | 2017-01-18 | 2017-06-13 | 石药集团江西金芙蓉药业股份有限公司 | 离子交换和硅胶柱层析法分离制备汉防己甲、乙素的方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 魏晋宝等: ""粉防己中汉防己甲素的提取分离纯化工艺研究"", 《中国药师》, vol. 19, no. 11, pages 2029 - 2031 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111484500A (zh) * | 2020-05-22 | 2020-08-04 | 瑞阳制药有限公司 | 汉防己甲素的制备方法 |
| CN116925091A (zh) * | 2023-07-07 | 2023-10-24 | 石药集团江西金芙蓉药业股份有限公司 | 一种注射级汉防己甲素的纯化方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN104825463B (zh) | 白肉灵芝提取物的代谢调节及抗缺氧的用途 | |
| CN103304613B (zh) | 一种从瓜蒌皮中分离纯化4种核苷类化学成分的方法 | |
| CN101289478B (zh) | 一种红景天苷的分离制备方法 | |
| CN106727806B (zh) | 一种三七叶总皂苷的制备方法 | |
| CN101289480B (zh) | 一种甘草苷的分离制备方法 | |
| CN110862399A (zh) | 一种从汉防己总碱中制取汉防己甲素的方法 | |
| CN110818669B (zh) | 沉香四氢2-（2-苯乙基）色酮类化合物及其分离方法和应用 | |
| CN110194758B (zh) | 一种从关木通中分离纯化马兜铃酸类化合物的方法 | |
| CN105663195A (zh) | 一种人参皂苷的提取方法 | |
| CN113264974B (zh) | 一种乙型强心苷的制备及其抗血管生成应用 | |
| CN103304490A (zh) | 一种从瓜蒌皮中分离纯化5种嘌呤及嘧啶碱基的方法 | |
| CN101084967A (zh) | 红花黄酮类成分的提取纯化工艺 | |
| CN111675741A (zh) | 用制备液相法同时获得四种淫羊藿稀有黄酮的分离方法 | |
| CN113429442B (zh) | 川射干水提药渣中射干苷和鸢尾黄素的分离方法 | |
| CN110522776B (zh) | 一种黄槿中抗肿瘤有效部位的制备方法及应用 | |
| CN110240585B (zh) | 一种沉香四醇的制备方法 | |
| CN110437151B (zh) | 采用蒙药草乌叶提取去甲海罂粟碱和海罂粟碱的方法 | |
| CN114133422A (zh) | 一种葫芦烷三萜类化合物及其制备方法和应用 | |
| CN109627153B (zh) | 一种从地木耳提取分离对羟基苯甲醛的方法 | |
| CN102389456A (zh) | 一种提取蓝萼香茶菜总二萜或蓝萼甲素的方法 | |
| CN108191933B (zh) | 一种以土茯苓为原料制备新落新妇苷的方法 | |
| CN106377523B (zh) | 一种天然活性药物及其制备与应用 | |
| CN110368407B (zh) | 一种钩枝藤枝叶有效部位及其制备方法和应用 | |
| CN109180485A (zh) | 一种分离绿原酸的方法 | |
| CN114456138B (zh) | 一种从佛手提取物中分离三种香豆素类化合物的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |