CN110780019A - 一种消炎癣湿药膏的检测方法 - Google Patents

一种消炎癣湿药膏的检测方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种消炎癣湿药膏的检测方法，该检测方法包括：性状：本品为黄褐色软膏，具有特异臭气和清凉感；鉴别：通过薄层色谱法对蛇床子和冰片进行成分鉴别，通过高效气相色谱法对樟脑进行成分鉴别；该检测方法还包括苯酚和升华硫的含量测定，含量测定均采用高效液相色谱法进行。该方法可以对消炎癣湿药膏的主要药物成分进行更有效控制，可使产品的有效性和安全性得到有力的保障，弥补目前质量控制过程的不足，提高产品的质量监控水平，也有利于管理部门对产品的监测。

Description

一种消炎癣湿药膏的检测方法
技术领域
本发明属于制药技术领域，具体涉及一种药膏的检测方法，特别涉及一种消炎癣湿药膏的检测方法。
背景技术
消炎癣湿药膏具有杀菌、收湿、止痒的功效，临床适用于头癣、体癣、足癣、慢性湿疹、滋水瘙痒和疥疮等的治疗，是临床上一种较好的皮肤病治疗中成药。
蛇床子、冰片及樟脑分别是消炎癣湿药膏的特征性指标成分。在现有的消炎癣湿药膏生产过程中，由于缺少有效的鉴别方法，对于消炎癣湿药膏成品中的蛇床子、冰片及樟脑是不做成分鉴别的，这样消炎癣湿药膏成品主要药物成分会不确定，使得产品质量差异比较大，势必造成疗效的不稳定，另外，消炎癣湿药膏成品中苯酚和升华硫的多少是影响疗效的主要因素，而在现有技术中未对苯酚和升华硫进行定量检查，既不利于生产厂家和管理部门对产品的控制，产品的有效性和安全性得不到有力的保障，也影响产品在医疗部门和患者中的声誉。
为了更进一步保证消炎癣湿药膏的质量及更有利于对其质量的监督、管理，所应对其中的有效成分蛇床子、冰片及樟脑进行鉴别检测及苯酚和升华硫的含量测定检测，从而更进一步保证消炎癣湿药膏的质量和疗效，将不良反应降到最低，保证患者的用药安全。
发明内容
本发明的目的在于提供一种消炎癣湿药膏的检测方法，该方法可以对消炎癣湿药膏的主要药物成分进行更有效控制，可使产品的有效性和安全性得到有力的保障，弥补目前质量控制过程的不足，提高产品的质量监控水平，也有利于管理部门对产品的监测。
为实现上述目的，本发明提供了一种消炎癣湿药膏的检测方法，所述检测方法包括以下步骤：
性状：本品为黄褐色软膏，具有特异臭气和清凉感；
鉴别：(1)取本软膏成品3.0g，加无水乙醇20mL，在50℃的水浴下加热熔化，超声处理30min，滤过，得滤液作为供试品溶液；另取一定量的对照品蛇床子素，加无水乙醇制成1mg/mL的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以3∶2∶2的甲苯-乙酸乙酯-正己烷为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm波长的紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
(2)取本软膏成品3.0g，加无水乙醇20mL，在50℃的水浴下加热熔化，超声处理30min，滤过，得滤液作为供试品溶液；另取一定量的对照品冰片，加无水乙醇制成2mg/mL的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以17∶4的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，再喷以1％香草醛硫酸溶液，在105℃下加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(3)樟脑采用高效气相色谱色谱法鉴别
色谱条件：色谱柱：HP-50+的毛细管柱采用50％-苯基-甲基聚硅氧烷固定相，30m×0.25mm，0.25μm；程序升温：初始温度85℃，以2℃/min的速率升温至95℃，再以1℃/min的速率升温至110℃，再以8℃/min的速率升温至200℃，保持2min；进样口温度为200℃；FID检测；检测器温度为200℃；载气为氮气，流速为0.7mL/min，分流进样，分流比为5:1；氢气流速为50mL/min；空气流速为400mL/min；
溶液制备：取本软膏成品0.5g，加无水乙醇40mL，在50℃的水浴下加热熔化，超声处理20min，冷却，于4℃下冷藏过夜，滤过，得滤液作为供试品溶液；另取一定量的对照品樟脑，加无水乙醇制成0.5mg/mL的溶液，作为对照品溶液；
操作步骤：照气相色谱法试验，在上述色谱条件下，分别吸取上述两种溶液各1μL，注入气相色谱仪，供试品溶液色谱中，在与对照品色谱峰相同保留时间位置处，出现一致的色谱峰。
前述的消炎癣湿药膏的检测方法还包括：
检查应符合软膏项下有关的各项规定：
(1)苯酚含量测定，照高效液相色谱法测定：
色谱条件：色谱柱：Agilent TC-C18，250×4.6mm，5μm；流动相：62∶38的甲醇-水；流速：1.0mL/min；检测波长：271nm；柱温：45℃；
溶液制备：精密称取本软膏成品0.2g，置具塞锥形瓶中，精密加入无水乙醇溶液50mL，称定重量，在50℃的水浴下加热30min，热水浴超声处理30min，冷却后再称定重量，用无水乙醇溶液补足减失的重量，摇匀，于4℃下冷藏2h，滤过，得滤液作为供试品溶液；另精密称取一定量的对照品苯酚，加流动相制成36μg/mL的溶液，作为对照品溶液；
测定法：分别精密吸取上述供试品溶液和对照品溶液各5μl，注入液相色谱仪，分别记录色谱图，按外标法以峰面积计算供试品溶液中苯酚的含量；本品含苯酚为30.29～37.02mg/g；
(2)升华硫含量测定，照高效液相色谱法测定：
色谱条件：色谱柱：Agilent TC-C18，250×4.6mm，5μm；流动相：甲醇；流速：1.0mL/min；检测波长：240nm；柱温：30℃；
溶液制备：精密称取本软膏成品0.8g，置具塞锥形瓶中，加入乙酸乙酯50mL，在60℃的水浴下加热50min，冷却后转移至100mL的容量瓶中，加乙酸乙酯稀释定容，摇匀，于4℃下冷藏2h；从100mL的容量瓶中精密量取2mL稀释溶液至10mL的容量瓶中，加乙酸乙酯稀释定容，摇匀，滤过，得滤液作为供试品溶液；另精密称取一定量的对照品升华硫，加乙酸乙酯制成40μg/mL的溶液，作为对照品溶液；
测定法：分别精密吸取上述供试品溶液和对照品溶液各5μl，注入液相色谱仪，分别记录色谱图，按外标法以峰面积计算供试品溶液中升华硫的含量；本品含升华硫为35.35～43.21mg/g。
与现有技术相比，本发明在现有的产品生产过程中增加了对蛇床子和冰片的薄层色谱法的鉴别，增加了樟脑的高效气相色谱法的鉴别，增加了苯酚和升华硫的高效液相色谱法的含量测定，从而实现对消炎癣湿药膏的主要药物成分进行更有效检测，使得消炎癣湿药膏成品中的主要药物成分比较确定，产品质量的监控水平有很大的提高；通过对苯酚和升华硫的含量进行定量控制，对减少产品的不良反应起到有积极的作用，进一步明确了给药剂量的准确性，使产品的有效性和安全性得到有力的保障。本发明的应用，既有利于生产厂家和管理部门对产品的检测，也可以为医疗部门和患者的治疗提供较好的保障。
附图说明
图1是本发明实施例中蛇床子的TLC鉴别色谱图；图中，1、2为供试品溶液，3对照品溶液，4为阴性对照溶液；
图2是本发明实施例中冰片的TLC鉴别色谱图；图中，1、2为供试品溶液，3对照品溶液，4为阴性对照溶液；
图3是本发明实施例中樟脑的GC鉴别色谱图；图中，a为供试品溶液，b对照品溶液，c为阴性对照溶液；
图4是本发明实施例中苯酚的HPLC检测色谱图；图中，a为供试品溶液，b对照品溶液，c为阴性对照溶液；
图5是本发明实施例中苯酚的HPLC检测线性关系曲线图；
图6是本发明实施例中升华硫的HPLC检测线性关系曲线图；
图7是本发明实施例中升华硫的HPLC检测色谱图；图中，a为供试品溶液，b对照品溶液，c为阴性对照溶液。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步详细说明。
本消炎癣湿药膏的检测方法，按照重量份计，所述消炎癣湿药膏是用升药底50g、蛇床子50g、升华硫50g、樟脑50g、冰片30g和苯酚40ml，按下述方法制备成药膏；按配比将升药底、蛇床子、升华硫、樟脑、冰片五种药材分别研磨后过筛，待用，再取1000g凡士林加热熔化，滤过，加入过筛后的升药底、蛇床子、升华硫和苯酚，搅匀，冷却后加入樟脑和冰片，搅匀既得消炎癣湿药膏；所述检测方法包括以下步骤：
性状：本品为黄褐色软膏，具有特异臭气和清凉感；
鉴别：(1)取本软膏成品3.0g，加无水乙醇20mL，在50℃的水浴下加热熔化，超声处理30min，滤过，得滤液作为供试品溶液；另取一定量的对照品蛇床子素(批号110822-201609，质量分数99.0％，由中国药品生物制品检定所提供)，加无水乙醇制成1mg/mL的溶液，作为对照品溶液；另取不含蛇床子的阴性制剂3.0g，按供试品溶液制备方法处理，作为阴性对照溶液；照薄层色谱法(《中国药典》2015年版四部通则0502)试验，吸取上述三种溶液各4μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以3∶2∶2的甲苯-乙酸乙酯-正己烷为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm波长的紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰，薄层图谱如图1所示；
实验中，对供试品溶液的提取方式进行考察，考察了水浴加热后超声和直接超声两种方式，结果发现水浴加热使软膏熔化后超声分解效果较好；对展开剂的比例和点样量进行了调整，考察了不同比例的展开剂甲苯-乙酸乙酯-正己烷(3:3:2、3:2:1、3:2:2)和不同的点样量(2μL、4μL、6μL)，最后确定当展开剂甲苯-乙酸乙酯-正己烷的比例为3:2:2，点样量为4μL时，斑点较为清晰圆整。
(2)取本软膏成品3.0g，加无水乙醇20mL，在50℃的水浴下加热熔化，超声处理30min，滤过，得滤液作为供试品溶液；另取一定量的对照品冰片(批号110881-201508，质量分数99.0％，由中国药品生物制品检定所提供)，加无水乙醇制成2mg/mL的溶液，作为对照品溶液；另取不含冰片的阴性制剂3.0g，按供试品溶液制备方法处理，作为阴性对照溶液；照薄层色谱法(《中国药典》2015年版四部通则0502)试验，吸取上述三种溶液各4μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以17∶4的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，再喷以1％香草醛硫酸溶液，在105℃下加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；阴性对照无干扰，薄层图谱如图2所示；
实验中，对冰片(合成龙脑)的鉴别方式进行了考察，先后考察了理化鉴别和薄层鉴别，发现薄层鉴别斑点清晰，结果较好。后对薄层鉴别展开剂正己烷-乙酸乙酯的比例(17:3、17:4)、点样量(2μL、4μL)和显色剂(1％香草醛硫酸溶液、10％磷钼酸乙醇溶液)的选择进行了考察，结果发现展开剂正己烷-乙酸乙酯的比例为17:4，点样量为4μL，1％香草醛硫酸溶液作为显色剂时，斑点较为清晰。
(3)樟脑采用高效气相色谱色谱法鉴别
色谱条件：Agilent 7890B气相色谱仪，色谱柱：HP-50+的毛细管柱采用50％-苯基-甲基聚硅氧烷固定相，30m×0.25mm，0.25μm；程序升温：初始温度85℃，以2℃/min的速率升温至95℃，以1℃/min的速率升温至110℃，以8℃/min的速率升温至200℃，保持2min；进样口温度为200℃；FID检测；检测器温度为200℃；载气为氮气，流速为0.7mL/min，分流进样，分流比为5:1；氢气流速为50mL/min；空气流速为400mL/min；
溶液制备：取本软膏成品0.5g，加无水乙醇40mL，在50℃的水浴下加热熔化，超声处理20min，冷却，于4℃下冷藏过夜，滤过，得滤液作为供试品溶液；另取一定量的对照品樟脑(批号110747-170502S，质量分数99.0％，由南京道斯夫生物科技有限公司提供)，加无水乙醇制成0.5mg/mL的溶液，作为对照品溶液；另取不含樟脑的阴性制剂0.5g，按供试品溶液制备方法处理，作为阴性对照溶液；
操作步骤：照气相色谱法(《中国药典》2015年版四部通则0521)试验，在上述色谱条件下，分别吸取上述三种溶液各1μL，注入气相色谱仪，供试品溶液色谱中，在与对照品色谱峰相同保留时间位置处，出现一致的色谱峰；阴性制剂无干扰，气相色谱图谱如图3所示；
实验过程中，对色谱条件进行了优化，先后考察了不同的程序升温方式，进行比较，最后确定如上程序升温方式，各个色谱峰分离度较好，可以用来鉴别樟脑。
前述的消炎癣湿药膏的检测方法还包括：
检查应符合软膏项下有关的各项规定：
(1)苯酚含量测定，照高效液相色谱法(《中国药典》2015年版四部通则0512)测定：
色谱条件：Agilent1260高效液相色谱仪，四元泵，DAD检测器；色谱柱：AgilentTC-C18，250×4.6mm，5μm；流动相：62∶38的甲醇-水；流速：1.0mL/min；检测波长：271nm；柱温：45℃；
溶液制备：精密称取本软膏成品0.2g，置具塞锥形瓶中，精密加入无水乙醇溶液50mL，称定重量，在50℃的水浴下加热30min，热水浴超声处理30min，冷却后再称定重量，用无水乙醇溶液补足减失的重量，摇匀，于4℃下冷藏2h，滤过，得滤液作为供试品溶液；另精密称取一定量的对照品苯酚(批号100509-170610D，质量分数99.0％，由南京道斯夫生物科技有限公司提供)，加流动相制成36μg/mL的溶液，作为对照品溶液；另取不含苯酚的阴性制剂0.2g，按供试品溶液制备方法处理，作为阴性对照溶液；
测定法：分别精密吸取上述供试品溶液和对照品溶液各5μl，注入液相色谱仪，分别记录色谱图，按外标法以峰面积计算供试品溶液中苯酚的含量；本品含苯酚为30.29～37.02mg/g；
实验中，对供试品制备的提取溶剂进行考察，先后考察了甲醇、流动相、无水乙醇做提取溶剂，结果发现甲醇和流动相做提取溶剂时分散性不好，无水乙醇的分散效果较好，最后确定以无水乙醇做提取溶剂。
在苯酚含量的测定中，进行了如下方法学考察：
(1-1)专属性考察：在上述色谱条件下，样品HPLC色谱图中苯酚与其它峰呈良好分离，阴性对照无干扰，气相色谱图谱如图4所示；
(1-2)线性关系考察：取苯酚对照品适量，精密称定，加流动相配成4.51μg/mL、9.02μg/mL、18.03μg/mL、36.06μg/mL、72.13μg/mL、180.32μg/mL、360.64μg/mL的系列苯酚对照品溶液，精密吸取上述不同浓度的苯酚对照品溶液各5μL，按上述色谱条件测定峰面积。以峰面积A为纵坐标，苯酚对照品浓度C为横坐标，计算得线性回归方程：Y＝4.4586X+3.5377，R2＝0.9990，线性范围：4.51～360.64μg/mL，实验结果见下表1，线性关系曲线如图5所示。
表1苯酚线性关系考察
Figure BDA0002302445830000071
实验结果显示，苯酚在4.51～360.64μg/mL浓度范围内，峰面积与进样量呈现良好的线性关系。
(1-3)精密度试验：取同一苯酚对照品溶液，分别进样测定6次，峰面积积分值RSD为0.16％，实验结果见下表2。结果表明检测仪器精密度良好。
表2精密度试验检测结果(n＝6)
Figure BDA0002302445830000072
(1-4)重复性试验：精密称取同一批样品，同法处理测定6次，苯酚含量的RSD为2.07％，实验结果见下表3。结果表明该方法重现性良好。
表3重复性试验检测结果(n＝6)
Figure BDA0002302445830000081
(1-5)稳定性试验：取同一供试品溶液，分别于0h、2h、4h、8h、12h、24h、48h进样测定，苯酚峰面积积分值RSD为0.37％，实验结果见下表4。结果表明供试品溶液在48h内稳定，峰面积积分值前后无明显变化。
表4稳定性试验检测结果
Figure BDA0002302445830000082
(1-6)回收率试验：精密称取已知含量的同一批样品约0.1g(苯酚含量32.050mg/g)，共6份，每份分别加入3.538mg/mL的苯酚对照品溶液1mL，照供试品溶液制备方法制备，滤过，取续滤液，既得供试品溶液；分别精密吸取上述供试品溶液各5μL，按上述色谱条件测定苯酚含量，计算回收率，结果见表5，苯酚的平均回收率为101.00％，RSD为0.64％。结果表明，本方法具有很好的回收率。
表5回收率试验检测结果
(1-7)样品测定：按上述测定方法和条件，对已生产的6批样品进行了测定，测定结果见下表6。
表6苯酚含量测定结果(n＝6)
根据表6中六批样品测定结果，本品中含苯酚处于30.29～37.02mg/g范围之内为合格标准。
(2)升华硫含量测定，照高效液相色谱法(《中国药典》2015年版四部通则0512)测定：
色谱条件：Agilent1260高效液相色谱仪，四元泵，DAD检测器；色谱柱：AgilentTC-C18，250×4.6mm，5μm；流动相：甲醇；流速：1.0mL/min；检测波长：240nm；柱温：30℃；
溶液制备：精密称取本软膏成品0.8g，置具塞锥形瓶中，加入乙酸乙酯50mL，在60℃的水浴下加热50min，冷却后转移至100mL的容量瓶中，加乙酸乙酯稀释定容，摇匀，于4℃下冷藏2h；从100mL的容量瓶中精密量取2mL稀释溶液至10mL的容量瓶中，加乙酸乙酯稀释定容，摇匀，滤过，得滤液作为供试品溶液；另精密称取一定量的对照品升华硫(批号7704349-L1609054，质量分数99.95％，由上海阿拉丁生化科技有限公司提供)，加乙酸乙酯制成40μg/mL的溶液，作为对照品溶液；另取不含升华硫的阴性制剂0.8g，按供试品溶液制备方法处理，作为阴性对照溶液；
测定法：分别精密吸取上述供试品溶液和对照品溶液各5μl，注入液相色谱仪，分别记录色谱图，按外标法以峰面积计算供试品溶液中升华硫的含量；本品含升华硫为35.35～43.21mg/g。
实验过程中，对供试品制备的提取溶剂进行了考察，先后考察了氯仿、氢氧化钠-稀乙醇、乙酸乙酯为提取溶剂，结果发现以乙酸乙酯为提取溶剂时，提取效果较好，峰形较优。对色谱条件流动相的选择进行的考察，先后考察了异丙醇和甲醇，结果甲醇为流动相时分离效果较好，故选用甲醇为流动相。
在升华硫含量的测定中，可进行如下方法学考察：
(2-1)专属性考察：在上述色谱条件下，样品HPLC色谱图中升华硫与其它峰呈良好分离，阴性对照无干扰，气相色谱图谱如图7所示；
(2-2)线性关系考察：取升华硫对照品适量，精密称定，加乙酸乙酯制成10.23μg/mL、20.46μg/mL、40.92μg/mL、81.85μg/mL、163.70μg/mL、327.40μg/mL的系列升华硫对照品溶液，精密吸取上述不同浓度的升华硫对照溶液各5μL，按上述色谱条件测定峰面积。以峰面积A为纵坐标，升华硫对照品浓度C为横坐标，计算得回归方程：Y＝8.4237X+1.4652，R2＝0.9999，线性范围：10.23～327.40μg/mL，实验结果见下表7，线性关系曲线如图6所示。
表7升华硫线性关系考察
Figure BDA0002302445830000101
实验结果显示，升华硫在10.23～327.40μg/mL浓度范围内，峰面积与进样量呈现良好的线性关系。
(3-3)精密度试验：取同一升华硫对照品溶液，分别进样测定6次，峰面积积分值RSD为0.20％，实验结果见下表8。结果表明检测仪器精密度良好。
表8精密度试验检测结果(n＝6)
Figure BDA0002302445830000111
(2-4)重复性试验：精密称取同一批样品，同法处理测定6次，升华硫含量的RSD为1.01％，实验结果见下表9。结果表明该方法重现性良好。
表9重复性试验检测结果(n＝6)
(2-5)稳定性试验：取同一供试品溶液，分别于0h、2h、4h、8h、12h、24h、48h进样测定，升华硫峰面积积分值RSD为0.70％，实验结果见下表10。结果表明供试品溶液在48h内稳定，峰面积积分值前后无明显变化。
表10稳定性试验检测结果
Figure BDA0002302445830000113
(2-6)回收率试验：精密称取已知含量的同一批样品约0.4g(升华硫含量39.015mg/g)，共6份，每份分别加入1.040mg/mL的升华硫对照品溶液15mL，照供试品溶液制备方法制备，滤过，取续滤液，既得供试品溶液；分别精密吸取上述供试品溶液各5μL，按上述色谱条件测定升华硫含量，计算回收率，结果见表11，升华硫的平均回收率为100.37％，RSD为2.63％。结果表明，本方法具有很好的回收率。
表11回收率试验检测结果
Figure BDA0002302445830000121
(2-7)样品测定：按上述测定方法和条件，对已生产的6批样品进行了测定，测定结果见下表12。
表12升华硫含量测定结果(n＝6)
Figure BDA0002302445830000122
根据表6中六批样品测定结果，本品中含升华硫处于35.35～43.21mg/g范围之内为合格标准。
总结：通过我们对苯酚和升华硫含量测定的修订方法进行分析方法学验证(专属性、线性关系考察、重复性试验、精密度试验、稳定性试验、回收率试验、样品测定)考察后，此方法简便、灵敏、精密度好，可为消炎癣湿药膏中苯酚和升华硫的测定方法。

Claims (2)

1.一种消炎癣湿药膏的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：
性状：本品为黄褐色软膏，具有特异臭气和清凉感；
鉴别：(1)取本软膏成品3.0g，加无水乙醇20mL，在50℃的水浴下加热熔化，超声处理30min，滤过，得滤液作为供试品溶液；另取一定量的对照品蛇床子素，加无水乙醇制成1mg/mL的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以3∶2∶2的甲苯-乙酸乙酯-正己烷为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm波长的紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
(2)取本软膏成品3.0g，加无水乙醇20mL，在50℃的水浴下加热熔化，超声处理30min，滤过，得滤液作为供试品溶液；另取一定量的对照品冰片，加无水乙醇制成2mg/mL的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以17∶4的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，再喷以1％香草醛硫酸溶液，在105℃下加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(3)樟脑采用高效气相色谱色谱法鉴别
色谱条件：色谱柱：HP-50+的毛细管柱采用50％-苯基-甲基聚硅氧烷固定相，30m×0.25mm，0.25μm；程序升温：初始温度85℃，以2℃/min的速率升温至95℃，再以1℃/min的速率升温至110℃，再以8℃/min的速率升温至200℃，保持2min；进样口温度为200℃；FID检测；检测器温度为200℃；载气为氮气，流速为0.7mL/min，分流进样，分流比为5:1；氢气流速为50mL/min；空气流速为400mL/min；
溶液制备：取本软膏成品0.5g，加无水乙醇40mL，在50℃的水浴下加热熔化，超声处理20min，冷却，于4℃下冷藏过夜，滤过，得滤液作为供试品溶液；另取一定量的对照品樟脑，加无水乙醇制成0.5mg/mL的溶液，作为对照品溶液；
操作步骤：照气相色谱法试验，在上述色谱条件下，分别吸取上述两种溶液各1μL，注入气相色谱仪，供试品溶液色谱中，在与对照品色谱峰相同保留时间位置处，出现一致的色谱峰。
2.根据权利要求1所述的一种消炎癣湿药膏的检测方法，其特征在于，该检测方法还包括：
检查应符合软膏项下有关的各项规定：
(1)苯酚含量测定，照高效液相色谱法测定：
色谱条件：色谱柱：Agilent TC-C18，250×4.6mm，5μm；流动相：62∶38的甲醇-水；流速：1.0mL/min；检测波长：271nm；柱温：45℃；
溶液制备：精密称取本软膏成品0.2g，置具塞锥形瓶中，精密加入无水乙醇溶液50mL，称定重量，在50℃的水浴下加热30min，热水浴超声处理30min，冷却后再称定重量，用无水乙醇溶液补足减失的重量，摇匀，于4℃下冷藏2h，滤过，得滤液作为供试品溶液；另精密称取一定量的对照品苯酚，加流动相制成36μg/mL的溶液，作为对照品溶液；
测定法：分别精密吸取上述供试品溶液和对照品溶液各5μl，注入液相色谱仪，分别记录色谱图，按外标法以峰面积计算供试品溶液中苯酚的含量；本品含苯酚为30.29～37.02mg/g；
(2)升华硫含量测定，照高效液相色谱法测定：
色谱条件：色谱柱：Agilent TC-C18，250×4.6mm，5μm；流动相：甲醇；流速：1.0mL/min；检测波长：240nm；柱温：30℃；
溶液制备：精密称取本软膏成品0.8g，置具塞锥形瓶中，加入乙酸乙酯50mL，在60℃的水浴下加热50min，冷却后转移至100mL的容量瓶中，加乙酸乙酯稀释定容，摇匀，于4℃下冷藏2h；从100mL的容量瓶中精密量取2mL稀释溶液至10mL的容量瓶中，加乙酸乙酯稀释定容，摇匀，滤过，得滤液作为供试品溶液；另精密称取一定量的对照品升华硫，加乙酸乙酯制成40μg/mL的溶液，作为对照品溶液；
测定法：分别精密吸取上述供试品溶液和对照品溶液各5μl，注入液相色谱仪，分别记录色谱图，按外标法以峰面积计算供试品溶液中升华硫的含量；本品含升华硫为35.35～43.21mg/g。
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Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101183091A (zh) * 2007-12-18 2008-05-21 天津中新药业集团股份有限公司达仁堂制药厂 一种藿香正气软胶囊指纹图谱的测定方法
CN101558768A (zh) * 2009-05-27 2009-10-21 东北林业大学 牡蒿植物杀虫剂的提取方法
CN104132891A (zh) * 2014-07-11 2014-11-05 江苏七○七天然制药有限公司 一种镇江膏药的质量检测方法
CN106278823A (zh) * 2016-08-24 2017-01-04 江西井冈源天然药物有限公司 一种天然冰片的制备方法
CN107607652A (zh) * 2017-10-18 2018-01-19 北京理工大学 一种测定金花葵花硫含量的方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101183091A (zh) * 2007-12-18 2008-05-21 天津中新药业集团股份有限公司达仁堂制药厂 一种藿香正气软胶囊指纹图谱的测定方法
CN101558768A (zh) * 2009-05-27 2009-10-21 东北林业大学 牡蒿植物杀虫剂的提取方法
CN104132891A (zh) * 2014-07-11 2014-11-05 江苏七○七天然制药有限公司 一种镇江膏药的质量检测方法
CN106278823A (zh) * 2016-08-24 2017-01-04 江西井冈源天然药物有限公司 一种天然冰片的制备方法
CN107607652A (zh) * 2017-10-18 2018-01-19 北京理工大学 一种测定金花葵花硫含量的方法

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
国家药典委员会 编: "《中华人民共和国药典2015年版一部》", 30 June 2015, 中国医药科技出版社 *
崔宇宏 等: "高效液相色谱法测定硫黄中硫的含量", 《药物分析杂志》 *
林升得 等: "6种藏香和印度香挥发油成分的GC-MS比较分析", 《中国民族医药杂志》 *
王金观 等: "气相色谱法同时测定复方醋酸地塞米松乳膏中樟脑和薄荷脑的含量", 《中成药》 *
蔡乐 等: "HPLC法测定薄荷苯酚软膏中苯酚的含量", 《中国药物应用与监测》 *
黄佳 等: "气相色谱测定樟脑薄荷脑柳酯软膏中3种药效成分的含量", 《海峡药学》 *

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