CN110628424B - 麦芽炭碳量子点(纳米颗粒/纳米粒子)的制备及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及从麦芽炭中提取分离纯化出的量子点(纳米颗粒/纳米粒子)的方法,该方法包括:麦芽炭,经溶剂萃取或者提取,再用分子量大于1000Da的透析袋透析,或者超滤,得到麦芽炭碳量子点,该量子点在紫外灯365nm下呈蓝色荧光、透射电镜测量粒径<100nm,主要由C、H、O和N等元素构成;本发明还涉及此量子点在医药领域的应用,通过注射、口服或外用等途径给药后产生的降糖、降压等。
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域,特别涉及麦芽炭量子点的制备及在医药领域的应用。
背景技术
麦芽炭为生麦芽经过高温炭化后的产物。麦芽在中医临床应用历史悠久,但将其炒焦,炒炭多集中在明清之后,《医学实在易·卷三》记载:“泄泻之症,……如食积,加麦芽、山楂炒黑”;焦树德在《用药心得十讲》中认为麦芽“炒焦用,消食化积的作用最大”。2015年版《中国药典》认为,“焦麦芽消食化滞。”麦芽焦化可增强健胃消食的能力,这也是焦麦芽的主要功效所在。
麦芽炭制备方法:
取干燥后的净生麦芽用武火炒至焦黑色时,取出冷却即可。
发明内容
本发明首次从麦芽炭中提取分离出碳量子点(纳米颗粒/纳米粒子),并首次发现了麦芽炭碳量子点具有很强的降糖的生物效应。
技术方案:本发明提供了从麦芽炭中提取分离出炭量子点的方法。本发明还提供了麦芽炭炭量子点的生物活性及其在医药领域中的应用。
所述制备方法,具体包括以下步骤:炮法制备麦芽炭,用水煎法从麦芽炭中提取出量子点,进一步分离纯化包括透析、超滤、层析等技术方法,得到高纯度的碳量子点。
附图说明
图1.麦芽炭碳量子点透射电镜图
图2.麦芽炭碳量子点表征。(A)低分辨图谱,(B)麦芽炭碳量子点粒径频数分布
图3.麦芽炭碳量子点表征(A)HR-TEM 5nm(B)HR-TEM 1nm(C)晶格间距(D)X射线衍射谱
图4.麦芽炭碳量子点的XPS.(A)C1s(B),N1s(C),O1s(D)为麦芽炭碳量子点的 XPS能谱解析图
图5.麦芽炭碳量子点紫外吸收光谱图
图6麦芽炭碳量子点红外光谱图
图7.麦芽炭碳量子点荧光光谱
图8.麦芽炭碳量子点腹腔注射给药组:口服葡萄糖的不同时间点血糖变化
图9麦芽炭碳量子点腹腔注射给药组:口服蔗糖的不同时间血糖变化
图10麦芽炭碳量子点对α-葡萄糖苷酶活性抑制(A 1g/ml组;B 250mg/ml组;C62.5mg/ml组;PBS组)
具体实施方式
实施例1:麦芽炭碳量子点的制备
称取生麦芽,置坩埚内,锡箔纸密封并加盖,置马弗炉中,升温至300℃,保持恒温1h,待马弗炉自然降温至室温,打开马弗炉取出,即为麦芽炭。
用纯水煎提取麦芽炭3次,合并水溶液,浓缩,用1KD透析袋透析,透析袋内的部分即为高纯度麦芽炭炭量子点的溶液。
实施例2.麦芽炭碳量子点的降糖作用
正常小鼠餐后降糖实验:
实验动物
SPF级昆明小鼠(KM),雄性,体重30.0±2.0g,由北京斯贝福动物中心提供。动物许可证号:SYXK(京)2014-0037。动物均饲养于北京中医药大学动物房,饲养环境无特殊病原(SPF),恒温,恒压,温度为24.0±1.0℃,相对湿度为55-65%,12小时日夜交替环境,保持通风良好,动物自由进食、水。实验的前一晚禁食12小时,正常给水。
实验分组
麦芽炭碳量子点腹腔注射给药组(口服葡萄糖)
将昆明小鼠随机分为2组:即给药组与对照组,每两组动物8只并编1~8 号,给药前,先将给药组与对照组小鼠剪尾取血,用葡糖糖试纸条测出其空腹血糖值并记录。然后,依次按编号进行给药。给药组以浓度为1g/ml的麦芽炭碳量子点200ul,灌胃方式给每只小鼠20%葡萄糖200ul,;对照组的小鼠以同样的方式接受相同体积的0.9%生理盐水和葡萄糖。按编号顺序依次给药,先给麦芽炭碳量子点后给葡萄糖,每分钟一只。在给药后的第8分钟、15分钟、30 分钟、45分钟、1小时、1.5小时、2.5小时,按给药顺序,依次尾尖取血,测量出血糖值并记录。
麦芽炭碳量子点腹腔注射给药组(口服蔗糖)
将昆明小鼠随机分为2组:即给药组与对照组,每两组动物8只并编号,给药前,先将给药组与对照组小鼠剪尾取血,用葡糖糖试纸条测出其空腹血糖值并记录。然后,依次进行给药。给药组灌胃给每只小鼠20%蔗糖200ul,腹腔内注射浓度为1g/ml的麦芽炭碳量子点200ul;对照组的小鼠以同样的方式接受相同体积的0.9%生理盐水和蔗糖。按编号顺序依次给药,先给麦芽炭碳量子点后给蔗糖,每分钟一只。在给药后的第8分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1 小时、1.5小时、2.5小时,按给药顺序,依次尾尖取血,测量出血糖值并记录。结果见表1和表2。
表1麦芽炭碳量子点腹腔注射给药组:口服葡萄糖的不同时间血糖变化
注:A表示麦芽炭碳量子点腹腔注射给药组;B表示生理盐水对照组
*表示与生理盐水对照组比较p<0.05,料表示与生理盐水对照组比较p<0.01
表2麦芽炭碳量子点腹腔注射给药组:口服蔗糖的不同时间血糖变化
注:A表示麦芽炭碳量子点腹腔注射给药组;B表示生理盐水对照组
实施例2结果分析:
表1和图8表示:麦芽炭碳量子点溶液腹腔注射给药组与生理盐水空白对照组,在口服葡萄糖后,两组血糖在前30分钟内明显升高,且在第30分钟时达到最高值血糖;在30分钟后,血糖开始缓慢下降,直至两组相对一致。就整体而言,麦芽炭碳量子点溶液腹腔注射给药组血糖在给葡萄糖后,虽血糖有所升高,但是水平较低,且在血糖下降的过程中趋势较为缓慢。对比两组在各个时间的血糖水平,发现在第8分钟、15分钟、30分钟时,麦芽炭碳量子点给药组血糖水平明显较生理盐水空白对照组血糖水平低,具有显著性差异(p<0.01),有统计学意义;在45分钟时,两者具有差异(p<0.05)。在之后的1 小时(包括1小时)两组血糖水平无明显差异,两组血糖水平随着时间,最后趋于一致,两者无统计学意义。
表2与图9表示:麦芽炭碳量子点溶液腹腔注射给药组与生理盐水空白对照组,在口服蔗糖后,生理盐水空白对照组在前30分钟内明显升高并达到血糖的顶峰水平,而后在45分钟(包括45分钟)血糖水平开始下降;麦芽炭碳量子点溶液腹腔注射给药组,在15分钟内血糖水平升高并达到其顶峰水平,但是升高水平较空白对照组低,而后在第30分钟(包括30分钟)其血糖水平开始缓慢下降。对比两组在各个时间点的血糖水平,发现在第30分钟、45分钟、1 小时,麦芽炭碳量子点给药组血糖水平明显较生理盐水空白对照组血糖水平低,具有显著性差异(p<0.01),有统计学意义;在8分钟和第1.5小时,两者血糖水平具有差异性(p<0.05)。在之后的2.5小时,两组血糖水平无明显差异,两组血糖水平随着时间推移,缓慢下降,两者无统计学意义。
实施例3:麦芽炭碳量子点对α-葡萄糖苷酶有效抑制的测定:
α-葡萄糖苷酶有能力将蔗糖降解为单糖,以蔗糖作为底物,探究麦芽炭碳量子点对α-葡萄糖苷酶的活性影响研究。
实验方法
实验分组
麦芽炭碳量子点设置为三个浓度,分别为1g/ml、250mg/ml、62.5mg/ml和生理盐水空白对照组,共四组,每组各设置5复孔。
葡糖糖值测定
首先,用去离子水和蔗糖溶剂共同配比成为20%蔗糖溶液,并放置在摇床上充分震荡,使蔗糖充分溶解,再用移液枪吸取20%蔗糖溶液,分别加入到1g/ml 组、250mg/m组、62.5mg/ml组和PBS组,每孔80ul;其次,将浓度为1g/ml、250mg/ml、62.5mg/ml的麦芽炭碳量子点溶液和0.9%生理盐水,用移液枪吸取 80ul加入相应的各组中;再次,用去离子水将α-葡萄糖苷酶溶解为浓度是 8.1U/ml的α-葡萄糖苷酶溶液,充分震荡溶解,避光,4摄氏度保存,现用现取。用移液枪吸取80ul的α-葡萄糖苷酶溶液依次按顺序加入各组中,放于摇床上震荡使各组所加溶液充分混匀进行反应,37摄氏度恒温孵育箱反应30分钟。最后,在孵育30分钟后,用葡萄糖测试条对各组的葡萄糖浓度进行检测,记录,统计。
结果见表3和图10。
表3麦芽炭碳量子点对α-葡萄糖苷酶活性抑制
注:A 1g/ml组;B 250mg/ml组;C 62.5mg/ml组;PBS组
**表示与PBS组对比p<0.01
实施例3结果分析:
表3和图10表示,麦芽炭碳量子点(1g/ml)组与PBS对比,p<0.01,有显著性差异,具有统计学意义;麦芽炭碳量子点(250mg/ml)组与PBS对比,p <0.01,有显著性差异,具有统计学意义;麦芽炭碳量子点(62.5mg/ml)组与 PBS对比,p>0.05,无差异,不具有统计学意义。
Claims (2)
1.麦芽炭碳量子点在制备降糖药物中的应用,麦芽炭碳量子点的制备方法为:将麦芽置坩埚内,加盖,置马弗炉中,升温至300℃,保持恒温1h,再自然降温至室温,取出即得麦芽炭;麦芽炭用纯水提取后,再用分子量为1KDa的透析袋透析,收集透析袋内截留的部分;或者用10KD的超滤管超滤,收集滤液部分即得麦芽炭碳量子点;所得碳量子点的特征:在紫外灯365nm下有荧光、透射电镜测量粒径为1-20nm,主要由C和O元素构成。
2.根据权利要求1所述的应用,其剂型为注射剂、口服液体制剂、硬胶囊、软胶囊、片剂、栓剂、水丸、蜜丸、浓缩丸、膏剂、散剂、乳剂、糊剂、涂抹剂。
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