CN102786417A - 绿原酸晶iii型表征及制备方法与在药品和保健品中应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了式(I)所示的绿原酸的一种新晶III型物质状态；绿原酸晶III型样品的制备方法；以绿原酸晶III型物质作为活性成分制备的产品，所述产品包括药品和保健品，以及绿原酸晶III型防治疾病和保健中的应用。

Description

绿原酸晶III型表征及制备方法与在药品和保健品中应用

技术领域

本发明涉及绿原酸一种晶III型物质状态，绿原酸晶III型样品的制备方法，采用绿原酸晶III型物质作为活性成分的产品，以及绿原酸晶III型的用途，属于医药技术领域。

背景技术

绿原酸，英文名为Chlorogenic acid，分子结构如式(I)所示

在中国专利CN 1181042C(公开号)中记载了韩鲁加等人发明的“金银花中绿原酸的提取纯化方法”^[1]。其中，涉及了一种中草药功能性成分的提取纯化方法，即将金银花粗碎成小段，在最佳状态下提取，经初步除杂及再纯化，方法简单、易行，绿原酸的损失少，产品收得率和纯度都很高。

在中国专利CN 1168698C(公开号)中记载了刘斌发明的“大孔树脂吸附提取高含量绿原酸的工艺方法”^[2]。其中，涉及了一种由金银花粉碎、绿原酸水提取液提取及大孔树脂吸附高含量绿原酸的分离工艺，本法具有工艺简单、成本低、易操作、制取成品绿原酸含量高、具有显著经济效益等突出优点。

在中国专利CN 1435406A(公开号)中记载了刘世名等人发明的“一种制备绿原酸的方法”^[3]。其中，涉及了一种制备绿原酸的方法，属于一种植物药用成分的提取方法，为绿原酸生产寻找到了一种牛蒡叶新药源，降低了绿原酸的生产成本，且操作简单。

在中国专利CN 1568960A(公开号)中记载了张洁等发明的“高纯度绿原酸制剂”^[4]。其中，涉及了一种高纯度绿原酸为原料制备成药学上可应用于临床的各种剂型的药品，和现有这些中成药相比，一方面能充分发挥绿原酸的药理药效，另一方面绿原酸的纯度和含量高，质量指标的制定和检验容易操作。

在中国专利CN 1616402A(公开号)中记载了汤华钊发明的“一种绿原酸提取分离的方法”^[5]。其中，涉及了一种绿原酸提取分离的方法，特别是从杜仲树叶、元宝枫树叶中提取、分离、纯化绿原酸的方法，包括溶剂浸出、树脂吸附、萃取、干燥、结晶等步骤。本发明与现有技术比较，具有工艺简单、生产成本低、产品质量好、效益高等优势，产品纯度95％以上，本发明已通过工业化试验。

在中国专利CN 100494393C(公开号)中记载了张洁、张亮等人发明的“高纯度绿原酸工业化生产工艺”^[6]。其中，涉及了一种高纯度绿原酸工业化生产的工艺，是在工艺中添加了生物复合酶提高绿原酸的溶出率和还原溶媒保护绿原酸分子基团避免被氧化技术是高纯度绿原酸生产的重大突破，解决了工业化生产过程中绿原酸所含的酚羟基氧化、烯酸酯键水解和相继分子内酯基迁移而发生异构问题。

在中国专利CN 101133015A(公开号)中记载了福田昌弘等人发明的“绿原酸类组合物的制造方法”^[7]。其中，涉及了一种以高收率得到以高浓度含有绿原酸类，且咖啡因减少的绿原酸类组合物的方法，其特征在于使从生咖啡豆或焙煎咖啡豆提取的水溶性组合物吸附在填充有吸附剂的柱中，接着使0.5～20vol％的乙醇水溶液通液，以进行洗脱。

在中国专利CN 101293832A(公开号)中记载了赵昱等人发明的“绿原酸及其衍生物的合成方法”^[8]。其中，涉及了一种绿原酸及其衍生物的合成方法，与传统的酰氯法制备方法相比，本方法操作简单，反应步骤短，后处理简单，产率较好。

在中国专利CN 101302156A(公开号)中记载了曹坳程等人发明的“一种紫茎泽兰中绿原酸的提取工艺”^[9]。其中，涉及了一种紫茎泽兰中绿原酸的提取工艺，该方法弥补以金银花为原料提取绿原酸时资源有限的不足，还可以在将紫茎泽兰变害为宝的同时，高产率地获得绿原酸，且方法简单，成本低廉，适于工业化生产。

在中国专利CN 101314568A(公开号)中记载了卢定强等发明的“一种吸附分离高纯度绿原酸的新方法”^[10]。其中，涉及了一种吸附分离高纯度绿原酸的新方法，包括吸附过程、洗杂过程、洗脱过程，可广泛应用于食品，医药，化妆品等领域中。本方法制得的绿原酸纯溶液直接干燥得到的固体，干燥绿原酸粉无需再加工即可直接应用，便于运输。

在中国专利CN 101324546A(公开号)中记载了李喜凤等人发明的“HPLC法同时测定蒲公英制剂中绿原酸、咖啡酸含量的方法”^[11]。其中，涉及了一种HPLC法同时测定蒲公英制剂中绿原酸、咖啡酸含量的方法，可有效解决以绿原酸和咖啡酸作为指标性成分，同时进行含量测定，对蒲公英制剂的质量标准奠定基础解决的问题。

在中国专利CN 101367729A(公开号)中记载了卢定强、王俊等发明的“一种络合萃取提纯绿原酸的方法”^[12]。其中，涉及了一种利用络合萃取技术提纯绿原酸的方法，可以适用于低浓度植物提取液，络合萃取绿原酸分离工艺可以降低生产成本，减少有机溶剂残留，缓解环境的污染，符合绿色化学工艺的要求。

在中国专利CN 101445456A(公开号)中记载了陈育如等发明的“从一枝黄花中提取分离绿原酸的方法”^[13]。其中，涉及了一种一枝黄花提取绿原酸的方法，可以提高绿原酸的得率，缩短生产周期，得到绿原酸纯品而不是与其他成份的混合物，从一枝黄花提取绿原酸单体，可扩大绿原酸的原料来源；特别是对加拿大一枝黄花的开发利用可变废为宝，化害为利，有着良好的经济效益、社会效益与环境效益。

在中国专利CN 101486651A(公开号)中记载了张东升等发明的“一种杜仲叶中提取绿原酸的方法及其应用”^[14]。其中，涉及了一种杜仲叶中提取绿原酸的方法，本发明还公开了一种绿原酸在鱼病防治物中的应用，方法具有工艺操作简便、成本低、无有害溶剂、得率高、适用于工业化生产等优点，而且绿原酸对水产养殖中常见的病原菌具有良好的抑菌效果，对嗜水气单胞菌的抑菌效果与抗生素类抗菌药物相当，能够增强机体免疫力，对细菌性疾病具有较强的预防作用。

在中国专利CN 101503356A(公开号)中记载了卢定强、赵辉等人发明的“一种制备高纯度绿原酸的新方法”^[15]。其中，涉及了一种制备高纯度绿原酸的新方法，可适用于低浓度绿原酸原液，样品处理量大、操作简单，可以降低生产成本，减少有机溶剂残留，缓解环境的污染。

在中国专利CN 101503357A(公开号)中记载了苏小飞等人发明的“金银花中绿原酸的萃取方法”^[16]。其中，涉及了一种金银花中绿原酸的萃取方法，解决了目前绿原酸提取物在去杂纯化过程中因沉淀量大而导致的过滤困难，提高产品的纯度和得率；并且在提取金银花绿原酸的同时，产生一系列附加值较高的产品，更好的利用金银花的原料资源。

在中国专利CN 101613278A(公开号)中记载了李光锋发明的“一种从红薯叶中快速提取高纯度绿原酸的工业技术”^[17]。其中，涉及了一种从红薯叶中提取绿原酸的生产方法，主要特点为原料不需要干燥直接使用，盐酸溶液浸提，能耗小，有机溶剂使用少，环保安全，生产成本低，得率高。

在中国专利CN 101618016A(公开号)中记载了华宝食用香精香料(上海)有限公司发明的“一种包埋绿原酸的W/O/W型复乳的制备方法、其产品及用途”^[18]。其中，涉及了一种包埋绿原酸的W/O/W型复乳制备方法，该制备方法对绿原酸进行包埋，不仅能对绿原酸起到保护、贮藏作用，还能实现绿原酸在人体内均匀、有效的释放，同时，促进吸收的缓释、控释及靶向效果，充分发挥其作用。

在中国专利CN 101638366A(公开号)中记载了何荣海等人发明的“一种微波辅助回流提取葵花籽粕绿原酸的方法”^[19]。其中，涉及了一种一种微波辅助回流提取葵花籽粕绿原酸的方法，提取过程微波可连续作用，提取时间短、效率高、溶剂用量少，产品中绿原酸得率是传统的乙醇溶剂提取法的1.54倍到2.39倍。

在中国专利CN 101674821A(公开号)中记载了M.J.阿伦斯等人发明的“用槲皮素、杨梅黄酮和绿原酸治疗糖尿病和代谢疾病的组合物”^[20]。其中，涉及了一种提供了用于治疗对象的糖尿病和代谢疾病和用于实现对象体重减轻的组合物，所述组合物包括槲皮素、杨梅黄酮和绿原酸，包括天然产生的化合物的组合。

在中国专利CN 101704748A(公开号)中记载了刘东锋等人发明的“一种绿原酸的提取方法”^[21]。其中，涉及了一种成本低，产量大，周期短，易于实现工业化的分离提纯绿原酸的方法。工艺步骤包括压榨、大孔树脂吸附、膜浓缩、喷雾干燥。采用本发明生产绿原酸，工艺简单、能源消耗少、纯度极高。

现有技术绿原酸中具有抗菌、抗病毒、增高白血球、保肝利胆、抗肿瘤、降血压、降血脂、抗氧化、清除自由基、兴奋中枢神经系统、增加胃肠蠕动、促进胃液分泌的生理活性。

本发明与上述专利或文献存在本质差异，上述专利均是从临床与治疗作用、从不同植物中提取与纯化制备方法，本发明切入点与是从绿原酸固体化学物质存在状态研究入手，通过多晶型筛选技术研究，在药物活性成分的原料层面上寻找、发现绿原酸固体物质的新晶型种类与状态特征，并将晶型研究与临床和保健应用结合，为寻找、发现、开发具有最佳功效的绿原酸状态提供基础科学研究数据；同时，也为从绿原酸固体晶型原料物质基础上申请国家或国际的知识产权发明专利保护提供科学依据。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供式(I)所示的绿原酸的一种新的晶型，即晶III型

本发明要解决的另一个技术问题是提供绿原酸晶III型物质的制备方法。

本发明要解决的又一个技术问题是提供绿原酸晶III型成分作为活性成分的产品。

本发明要解决的再一个技术问题是提供绿原酸晶III型的应用。

具体而言，为解决的技术问题，采用如下的技术方案：

1.绿原酸晶III型样品形态特征：

1.1绿原酸晶III型物质，当使用粉末X射线衍射分析时(CuK_α辐射)，表现为Height％＝100峰位置在2-Theta＝17.8±0.2°或

处并存在有38个衍射峰其位置分别在2-Theta(°)±0.2°值或

值具有如下表示：

且衍射峰相对强度值允许Height％±10％变化范围(图1)。

1.2绿原酸晶III型固体物质，它的红外吸收光谱(图2)在3429、2947、2851、2646、2570、1690、1639、1603、1526、1458、1437、1420、1383、1338、1305、1287、1194、1161、1123、1080、1041、973、956、928、911、885、849、818、806、785、761、741、715、667、601、526、508、449、421cm^-1±2cm^-1的吸收峰为绿原酸晶III型固体物质所呈现的红外光谱特征峰位置。

1.3绿原酸晶III型固体物质，它的DSC图谱(图3)中含有一个Peak吸热峰在212℃±3℃位置。

1.4绿原酸晶III型固体物质，它的熔点值为204℃±2℃。

2.绿原酸晶III型样品的制备方法特征：

本发明提供了一种绿原酸晶III型样品的制备方法，其特征是通过物理温度控制使用绿原酸样品溶化后再经环境温度4℃～80℃、环境湿度10％～75％、常压或真空制备工艺条件获得绿原酸晶III型样品。

3.绿原酸晶III型作为活性物质的使用剂量与用途特征：

3.1本发明的还提供一种产品，以绿原酸晶III型成分作为活性成分并含有其他辅料。本发明所述的产品，包括药品、保健品、食品、化妆品。

所述的产品中绿原酸晶III型的晶型纯度为1％～100％。

所述产品的剂型选自片剂、胶囊、丸剂、针剂、缓释或控释剂、粉剂。

3.2本发明提供了绿原酸晶III型物质作为活性成分开发的各种的产品，包括药品、保健品、食品、化妆品，其特征是以绿原酸晶III型物质作为活性成分，其每日摄取剂量在1mg～30g范围。

3.3本发明提供了绿原酸晶III型物质作为活性成分开发的各种的产品，包括药品、保健品、食品、化妆品，其特征是使用了含有绿原酸晶III型物质作为活性成分保证了其在生物体内的吸收特征、有效生物利用度、有效血药浓度、稳定持续的时间而达到发挥优势的预防、治疗、保健作用和应用。

4.绿原酸晶III型样品口服后的吸收特征：

本发明提供了绿原酸晶III型物质作为活性成分开发的各种的产品经口服后的生物学吸收作用，其特征是使用了绿原酸晶III型物质作为活性成分通过胃肠道在15分钟后在血液中即可达到最大浓度值而发挥作用。附图4给出绿原酸晶III型样品经口服吸收后在大鼠体内的血药浓度曲线。

5.绿原酸晶III型在制药中的应用。

本发明提供了的绿原酸晶III型在制备抗菌、抗病毒、增高白血球、保肝利胆、抗肿瘤、降血压、降血脂、抗氧化、清除自由基、兴奋中枢神经系统、增加胃肠蠕动或促进胃液分泌的药物中的应用。

本发明还提供了绿原酸晶III型在制备防治鱼病的药物中的应用。

附图说明

附图1绿原酸晶III型样品的粉末X射线衍射图谱

附图2绿原酸晶III型样品的红外吸收光谱图

附图3绿原酸晶III型样品的DSC图谱

附图4绿原酸晶III型样品经口服吸收后在大鼠体内的血药浓度曲线

具体实施方式

为更好说明本发明的技术方案，特给出以下实施例，但本发明并不仅限于此。

实施例1

绿原酸晶III型样品的制备方法：

绿原酸晶III型样品的制备方法，其特征是通过温180℃度控制使用绿原酸样品溶化后再经环境温度80℃常压2小时后，可制备获得绿原酸晶型样品。

所得绿原酸晶型样品的粉末X射线衍射图谱如附图1所示

所得绿原酸晶型样品的红外吸收光谱图如附图2所示

所得绿原酸晶型样品的DSC图谱如附图3所示

以上图谱数据结果表明，本实施例所得晶体的晶型为绿原酸晶III型。

实施例2

绿原酸晶III型样品的制备方法：

绿原酸晶III型样品的制备方法，其特征是通过温160℃度控制使用绿原酸样品经环境温度160℃常压4小时后，可制备获得绿原酸晶型样品。

所得绿原酸晶型样品的粉末X射线衍射图谱如附图1所示

所得绿原酸晶型样品的红外吸收光谱图如附图2所示

所得绿原酸晶型样品的DSC图谱如附图3所示

以上图谱数据结果表明，本实施例所得晶体的晶型为绿原酸晶III型。

实施例3

绿原酸晶III型样品在大鼠体内吸收特征和血药浓度特征：

实验动物：SD大鼠，雄性，体重：300g。购于中国医学科学院实验动物所。

实验方法：绿原酸晶III型样品。以4℃娃哈哈纯净水配制成10mg/ml混悬液。大鼠常规饲养条件饲养，自由饮水，禁食12h后，按100mg/kg灌胃给予药物。给药后在0.083，0.25，0.5，1，1.5，2，3，4，6(h)时间点从眼球后静脉取血约0.4ml，5000rpm离心10min。取100μl血浆，加入甲醇200μl，漩涡振荡2min，13400rpm离心10min，取上清层40μl进行HPLC检测。检测仪器及条件：检测系统为Aligent 1200高效液相色谱系统，色谱柱为Agilent ZorbaxEclipse XDB-C₁₈(250×4.6mm，5μm)，流动相为乙腈∶0.05％H₃PO₄缓冲液＝17∶83，进样量为40μl，流速为1ml/min，检测波长为328nm，柱温为25℃。检测结果见下表和图4。

绿原酸晶III型样品血药浓度数据

实验结果表明：绿原酸晶III型化学固体物质可被大鼠吸收，其特征是绿原酸晶III型固体药物经口服给药后可被吸收，在15分钟后可达最大血药浓度。绿原酸晶III型物质作为活性成分保证了其在生物体内的吸收特征、有效生物利用度、有效血药浓度、稳定持续的时间而达到发挥优势的预防、治疗、保健作用和应用。

实施例4

绿原酸晶III型物质作为活性成分的药品给药剂量：

使用绿原酸晶III型样品作为药物活性成分制备开发的药物片剂或其他制剂，其特征是含有绿原酸晶III型作为药物的活性成分，每日给药剂量为300mg，可分别制备成每日3次/每次1片100mg普通片剂，每日2次/每次1片150mg普通片剂或每日1次/每次1片300mg的片剂类型。

需要说明的问题：本发明涉及的绿原酸晶III型药物组合物在有效成分的给药剂量上存在有许多因素影响，例如：用于预防和治疗的用途不同而造成每日用药剂量的不同；患病性质与患病严重程度不同而造成每日用药剂量的不同；患者性别、年龄、体表面积的不同，给药途径、给药次数、治疗目的不同而造成每日用药剂量的不同；此外，晶型样品间存在的吸收和血药浓度不同等，亦造成本发明在使用绿原酸晶III型成分的每日合适剂量范围为0.01～200mg/kg体重，优选为1～100mg/kg体重。使用时应根据实际的预防与治疗不同情况需求制定绿原酸晶III型有效成分总剂量方案，并可分为多次或一次给药方式完成。

实施例5

绿原酸晶III型物质作为活性成分的保健品剂量：

使用绿原酸晶III型物质作为活性成分制备开发的功能性保健品，其特征是保健品中含有绿原酸晶III型作为保健活性成分物质，其用量从1mg～30g。

参考文献

1.中国专利，公开号CN 1181042C。

2.中国专利，公开号CN 1168698C。

3.中国专利，公开号CN 1435406A。

4.中国专利，公开号CN 1568960A。

5.中国专利，公开号CN 1616402A。

6.中国专利，公开号CN 100494393C。

7.中国专利，公开号CN 101133015A。

8.中国专利，公开号CN 101293832A。

9.中国专利，公开号CN 101302156A。

10.中国专利，公开号CN 101314568A。

11.中国专利，公开号CN 101324546A。

12.中国专利，公开号CN 101367729A。

13.中国专利，公开号CN 101445456A。

14.中国专利，公开号CN 101486651A。

15.中国专利，公开号CN 101503356A。

16.中国专利，公开号CN 101503357A。

17.中国专利，公开号CN 101613278A。

18.中国专利，公开号CN 101618016A。

19.中国专利，公开号CN 101638366A。

20.中国专利，公开号CN 101674821A。

21.中国专利，公开号CN 101704748A。

Claims (8)

1.式(I)所示的绿原酸晶III型，

其特征在于，当使用粉末X射线衍射分析时(CuK_α辐射)，表现为Height％＝100峰位置在2-Theta＝17.8±0.2°或

处并存在有38个衍射峰其位置分别在2-Theta(°)±0.2°值或

值具有如下表示：

且衍射峰相对强度值允许Height％±10％变化范围。

2.一种如权利要求1中所述绿原酸晶III型样品的制备方法，其特征是通过物理温度控制使用绿原酸样品溶化后再经环境温度4℃～80℃、环境湿度10％～75％、常压或真空制备工艺条件获得绿原酸晶III型样品。

3.一种产品，其特征在于，以权利要求1所述的绿原酸晶III型成分作为活性成分，并含有其他辅料。

4.根据权利要求3的产品，其特征在于，所述的绿原酸晶III型的晶型纯度为1％～100％。

5.根据权利要求3的产品，其特征在于，所述产品选自药品、保健品、食品、化妆品。

6.根据权利要求3-5中任一项的产品，所述产品的剂型选自片剂、胶囊、丸剂、针剂、缓释或控释剂、粉剂。

7.权利要求1的绿原酸晶III型在制备抗菌、抗病毒、增高白血球、保肝利胆、抗肿瘤、降血压、降血脂、抗氧化、清除自由基、兴奋中枢神经系统、增加胃肠蠕动或促进胃液分泌的药物中的应用。

8.权利要求1的绿原酸晶III型在制备防治鱼病的药物中的应用。

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