CN110521607B - 一种天冬丛生芽诱导方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种天冬丛生芽诱导方法，包括以下的步骤：(1)取收获了两年的无病害种子作为外植体进行消毒；(2)用无菌种子苗茎段诱导出腋芽；(3)将所得的腋芽连同愈伤组织接到培养基中诱导丛生芽。本发明可在短时间诱导出丛生芽，加快整个快繁过程，从而缩短天冬的生长周期，提高市场供应。

Description

一种天冬丛生芽诱导方法
技术领域
本发明涉及植物组织培养技术领域，具体涉及一种天冬丛生芽诱导方法。
背景技术
天冬是多年生蔓生草本，一般生长在气温温和、湿润的、地质疏松的地方，花期为6-7果期10月，肥厚的块根在中部或接近末端形成纺锤形，一般主根长达40-50厘米。其药用部位主要是块根，用于治疗咽喉肿痛，燥热咳嗽，肠燥便秘，腰膝酸软，骨蒸潮热，内热消渴等病症。
天冬中含有皂甙和甾醇等物质，皂甙和甾醇可以提高人体免疫细胞的活性，进而提高人体免疫力。同时，也可以降低人体内多种病毒的活性，用于预防结节性的红斑，荨麻疹和红斑狼疮等多种由自身免疫过强或过低引起的免疫疾病。由于天冬的药用价值不断被挖掘，天冬的需求量增大。但是受到天冬自身生长年限的限制，在种植三年后才可进行收获，导致市场天冬的陈年存货不足，供应不求。
目前，天冬的来源主要靠人工栽培的种子繁殖和分株繁殖。人工栽培由于受许多自然条件的限制，种子繁殖萌发率低，发育周期长，分株繁殖的繁殖系数低。利用天冬组织繁殖技术可以缩短天冬的生长周期，受到自然环境的影响小。
发明内容
本发明目的在于克服现有技术存在的不足，以解决种子繁殖萌发率低、发育周期长的问题，从而在短时间诱导出丛生芽，加快整个快繁过程，缩短天冬的生长周期，提高市场供应。
为达到上述目的，本发明是通过如下手段实现的：
本发明提供了一种天冬丛生芽诱导方法，包括如下步骤：
(1)选择天冬种子作为外植体；
(2)对外植体进行预处理和消毒；
(3)种子诱导：将消毒后的种子吸干水分后在种子诱芽培养基中进行诱导发芽；
(4)幼芽诱导：待步骤(3)诱导发芽长至5-6cm的无菌苗后剪成1.5cm左右、带有2个以上芽体的茎段在诱芽诱导培养基进行诱芽；
(5)丛生芽诱导：待步骤(4)得到带有黄色愈伤组织的翠绿色幼芽后，剪成带有2-3个幼芽的小团在丛生芽诱导培养基中进行诱导。
优选地，步骤(1)所述天冬种子为收获了两年、无病害、完整的天冬种子。
优选地，步骤(2)所述预处理和消毒的方法具体为：用洗衣粉清洗种子表面，然后用流水冲洗，在超净工作台上用酒精消毒，无菌水冲洗，然后用升汞消毒，再用无菌水冲洗。
优选地，步骤(3)中所述种子诱芽培养基为不含任何激素的MS 培养基。
优选地，步骤(4)中所述诱芽诱导培养基包括MS、6-BA、NAA、蔗糖、琼脂。
优选地，步骤(4)中所述诱芽诱导培养基中各成分浓度为：6-BA 2.0mg/L，NAA0.5mg/L，蔗糖30g/L，琼脂6g/L。
优选地，步骤(4)中所述诱芽诱导培养基pH为5.8。
优选地，步骤(5)中所述丛生芽诱导培养基包括MS、6-BA、NAA、蔗糖、琼脂。
优选地，步骤(5)中所述丛生芽诱导培养基中各成分浓度为： 6-BA 2.0mg/L，NAA0.05mg/L，蔗糖30g/L，琼脂7g/L。
优选地，步骤(5)中所述丛生芽培养基pH为5.8。
优选地，步骤(5)中丛生芽诱导条件为：温度25±2℃，光照强度1500-2000lx，光照时间12h/d。
与现有技术相比，本发明具有的有益效果为：
(1)现有技术中，天冬的快繁基本要经历从愈伤组织到丛生芽的过程，本发明包括种子预处理和消毒、诱导无菌茎段的幼芽、丛生芽的诱导，而省略了愈伤组织这一过程，使天冬的快繁进一步简单化。
(2)与人工栽培相比，本发明可在短时间诱导出丛生芽，加快整个快繁过程，从而缩短天冬的生长周期，提高市场供应。
附图说明
图1为本发明外植体种子。
图2为本发明茎段诱导的幼芽。
图3为本发明茎段诱导的诱芽。
图4为现有技术诱导的诱芽。
图5为本发明诱导的丛生芽。
图6为现有技术诱导的丛生芽。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案及效果更加清楚、明确，以下参照实施例对本发明作进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1
一种天冬丛生芽诱导方法，包括如下步骤：
(1)外植体种子的预处理和消毒：用洗衣粉清洗种子表面，然后用流水冲洗2h，在超净工作台上用75％酒精消毒30s，无菌水冲洗 3次，然后用0.1％升汞消毒20分钟，再用无菌水冲洗5次，用无菌吸水纸吸干表面水分，接进诱芽培养基中；30d天后种子萌发；其中外植体种子如图1所示。
(2)种子诱芽萌发：将消毒后的外植体种子用无菌吸水纸吸干表面水分后置于培养温度控制在(25±2)℃，光照强度为 1500-2000lx，光照时间为12h/d的条件下培养；所述种子诱导萌发培养基为不添加任何激素的MS培养基。
(3)茎段幼芽诱导：将步骤(2)得到长至5-6cm的无菌苗在超净工作台上用无菌剪刀剪成1.5cm左右并带有2个芽体的茎段接入诱芽培养基中置于培养温度控制在(25±2)℃，光照强度为 1500-2000lx，光照时间为12h/d条件下进行培养；所述的茎段幼芽培养基为：MS+2.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+30g/L蔗糖+6g/L琼脂 pH为5.8；幼芽诱导率为：66.67％；其中茎段诱导的幼芽和诱芽分别如图2和图3所示。
(4)丛生芽诱导：将步骤(3)得到的带有黄色愈伤组织的翠绿色幼芽，在超净工作台上用无菌剪刀连同愈伤组织剪切成带有2-3个幼芽的小团接进诱导丛生芽培养基中置于培养温度控制在(25±2)℃，光照强度为1500-2000lx，光照时间为12h/d条件下进行诱导，所述的丛生芽诱导培养基为：MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.0 5mg/L+30g/L 蔗糖+琼脂7g/L，pH为5.8；其中茎段诱导的丛生芽如图5所示。
通过上述诱导方法，丛生芽芽数较多，长势较均匀。
对比例1
一种天冬丛生芽诱导方法，包括如下步骤：
(1)外植体种子的预处理和消毒：用洗衣粉清洗种子表面，然后用流水冲洗2h，在超净工作台上用75％酒精消毒30s，无菌水冲洗 3次，然后用0.1％升汞消毒20分钟，再用无菌水冲洗5次，用无菌吸水纸吸干表面水分，接进诱芽培养基中。
(2)种子诱芽萌发：将消毒后的外植体种子用无菌吸水纸吸干表面水分后置于培养温度控制在(25±2)℃，光照强度为 1500-2000lx，光照时间为12h/d的条件下培养；所述种子诱导萌发培养基为不添加任何激素的MS培养基。
(3)茎段幼芽诱导：将步骤(2)得到长至5-6cm的无菌苗在超净工作台上用无菌剪刀剪成1.5cm左右并带有2个芽体的茎段接入诱芽培养基中置于培养温度控制在(25±2)℃，光照强度为 1500-2000lx，光照时间为12h/d条件下进行培养；所述的茎段幼芽培养基为：MS+1.5mg/L 6-BA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂，pH为5.8；幼芽诱导率为：41.67％；其中所诱导的诱芽如图4所示。
(4)丛生芽诱导：将步骤(3)得到的带有黄色愈伤组织的翠绿色幼芽，在超净工作台上用无菌剪刀连同愈伤组织剪切成带有2-3个幼芽的小团接进诱导丛生芽培养基中置于培养温度控制在(25±2)℃，光照强度为1500-2000lx，光照时间为12h/d条件下进行诱导，所述的丛生芽诱导培养基为：MS+6-BA3.0 mg/L+NAA 0 .5mg/L+30g/L蔗糖+琼脂7g/L，pH为5.8；其中所诱导的丛生芽如图6所示。
通过上述诱导方法，芽数较少，且部分丛生芽的愈伤组织长出白色幼根，长势不均匀。
对比例2
一种天冬丛生芽诱导方法，包括如下步骤：
(1)外植体种子的预处理和消毒：用洗衣粉清洗种子表面，然后用流水冲洗2h，在超净工作台上用75％酒精消毒30s，无菌水冲洗 3次，然后用0.1％升汞消毒20分钟，再用无菌水冲洗5次，用无菌吸水纸吸干表面水分，接进诱芽培养基中。
(2)种子诱芽萌发：将消毒后的外植体种子用无菌吸水纸吸干表面水分后置于培养温度控制在(25±2)℃，光照强度为1500-2000lx，光照时间为12h/d的条件下培养。所述种子诱导萌发培养基为不添加任何激素的MS培养基。
(3)茎段幼芽诱导：将步骤(2)得到长至5-6cm的无菌苗在超净工作台上用无菌剪刀剪成1.5cm左右并带有2个芽体的茎段接入诱芽培养基中置于培养温度控制在(25±2)℃，光照强度为 1500-2000lx，光照时间为12h/d条件下进行培养；所述的茎段幼芽培养基为：MS+2.0mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA+30g/L蔗糖+6g/L琼脂 pH为5.8；幼芽诱导率为：33.3％。
(4)丛生芽诱导：将步骤(3)得到的带有黄色愈伤组织的翠绿色幼芽，在超净工作台上用无菌剪刀连同愈伤组织剪切成带有2-3个幼芽的小团接进诱导丛生芽培养基中置于培养温度控制在(25±2)℃，光照强度为1500-2000lx，光照时间为12h/d条件下进行诱导，所述的丛生芽诱导培养基为：MS+6-BA1.0mg/L+30g/L蔗糖+琼脂7g/L， pH为5.8。
通过上述诱导方法，长出较多愈伤组织，而芽生长较实施例1生长缓慢。
以上具体实施方式部分对本发明所涉及的分析方法进行了具体的介绍。应当注意的是，上述介绍仅是为了帮助本领域技术人员更好地理解本发明的方法及思路，而不是对相关内容的限制。在不脱离本发明原理的情况下，本领域技术人员还可以对本发明进行适当的调整或修改，上述调整和修改也应当属于本发明的保护范围。

Claims (4)

1.一种天冬丛生芽诱导方法，包括如下步骤：
(1)选择天冬种子作为外植体；
(2)对外植体进行预处理和消毒；
(3)种子诱导：将消毒后的种子吸干水分后在种子诱芽培养基中进行诱导发芽；所述种子诱芽培养基为不含任何激素的MS培养基；
(4)幼芽诱导：待步骤(3)诱导发芽长至5-6cm的无菌苗后剪成1.5cm左右、带有2个以上芽体的茎段在诱芽诱导培养基进行诱芽；所述的茎段幼芽培养基为：MS+2.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+30g/L蔗糖+6g/L琼脂，pH为5.8；
(5)丛生芽诱导：待步骤(4)得到带有黄色愈伤组织的翠绿色幼芽后，剪成带有2-3个幼芽的小团在丛生芽诱导培养基中进行诱导；所述的丛生芽诱导培养基为：MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.05mg/L+30g/L蔗糖+琼脂7g/L，pH为5.8。
2.根据权利要求1所述的天冬丛生芽诱导方法，其特征在于，步骤(1)所述天冬种子为收获了两年、无病害、完整的天冬种子。
3.根据权利要求1所述的天冬丛生芽诱导方法，其特征在于，步骤(2)所述预处理和消毒的方法具体为：用洗衣粉清洗种子表面，然后用流水冲洗，在超净工作台上用酒精消毒，无菌水冲洗，然后用升汞消毒，再用无菌水冲洗。
4.根据权利要求1所述的天冬丛生芽诱导方法，其特征在于，步骤(5)中丛生芽诱导条件为：温度25±2℃，光照强度1500-2000lx，光照时间12h/d。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111616048B (zh) * 2020-04-27 2021-08-20 云南省农业科学院药用植物研究所 一种天冬组培快繁新方法
CN112273231A (zh) * 2020-10-30 2021-01-29 贵州大学 一种诱导天门冬丛生芽增殖与植株再生的方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101946705A (zh) * 2010-08-18 2011-01-19 怀化学院 一种简单高效的天门冬快繁方法
CN104304013A (zh) * 2014-10-14 2015-01-28 南京帝道农业科技有限公司 一种天冬诱变育种的快速繁殖方法
CN105145359A (zh) * 2015-09-15 2015-12-16 广西壮族自治区药用植物园 一种羊齿天冬组织培养快速繁殖方法
CN107980634A (zh) * 2017-12-15 2018-05-04 贵州大学 一种获得天门冬组培快繁适宜外植体的方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101946705A (zh) * 2010-08-18 2011-01-19 怀化学院 一种简单高效的天门冬快繁方法
CN104304013A (zh) * 2014-10-14 2015-01-28 南京帝道农业科技有限公司 一种天冬诱变育种的快速繁殖方法
CN105145359A (zh) * 2015-09-15 2015-12-16 广西壮族自治区药用植物园 一种羊齿天冬组织培养快速繁殖方法
CN107980634A (zh) * 2017-12-15 2018-05-04 贵州大学 一种获得天门冬组培快繁适宜外植体的方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
天门冬组培快繁体系研究;全妙华等;《中草药》;20120812;第43卷(第08期);第1599-1603页 *
天门冬组织培养条件的优化;潘丽梅等;《湖北农业科学》;20121005;第51卷(第19期);第4396-4398页 *
天门冬组织培养研究;杨平飞等;《种子》;20190531;第38卷(第5期);第100-102页 *
芦笋组培快繁技术优化的研究;董静等;《河南科技大学学报(自然科学版)》;20081215;第29卷(第06期);第57-59页 *

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