CN107873524A - 一种珠芽蓼茎段组培快繁方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于珠芽蓼繁殖技术领域，公开了一种珠芽蓼茎段组培快繁方法，包括：外植体采用珠芽蓼当年生茎段，采集珠芽蓼当年新生健壮植株的中部茎段，茎节处的叶片摘除冲洗干净；用75％酒精进行表面消毒处理10‑20s，0.1％升汞溶液浸泡消毒4～5min，无菌水冲洗5次，无菌滤纸吸干表面的水分；用无菌的手术刀将材料切成带茎节的小茎段按极性接种在芽诱导培养基上；诱导萌发的腋芽苗转接于继代增殖培养基上培养；继代增殖培养长成的1.5‑2.0cm高的植株接种于生根培养基上；有生根组培苗的培养瓶放置于室温自然光照条件下炼苗3‑5d；移栽后浇水淋透，保湿遮荫；1周后再浇水1次，15d喷施1次营养液。
Description
技术领域
本发明属于珠芽蓼繁殖技术领域，尤其涉及一种珠芽蓼茎段组培快繁方法。
背景技术
珠芽蓼(Polygonum viviparum L.)多年生草本。根状茎粗壮，弯曲，黑褐色，直径1-2厘米。产中国东北、华北、河南、西北及西南。生山坡林下、高山或亚高山草甸，海拔1200-5100米。朝鲜、日本、蒙古、高加索、哈萨克斯坦、印度、欧洲及北美也有。该物种是优质饲料，根状茎入药，清热解毒，止血散瘀。
综上所述，现有技术存在的问题是：由于珠芽蓼人工繁殖、栽培技术研究较少，主要产品来源于采挖野生植株，自然资源已经匮乏，不能满足市场需求。目前的繁殖方法主要是种子繁殖，但种子繁殖速度慢、周期长(每年只能采一次)，无法满足规模化种植的需要。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种珠芽蓼茎段组培快繁方法。
本发明是这样实现的，一种珠芽蓼茎段组培快繁方法，所述珠芽蓼茎段组培快繁方法包括以下步骤：
步骤一，外植体采用珠芽蓼当年生茎段，采集珠芽蓼当年新生健壮植株的中部茎段，茎节处的叶片摘除冲洗干净；
步骤二，用75％酒精进行表面消毒处理10-20s，0.1％升汞溶液浸泡消毒4～5min，无菌水冲洗5次，无菌滤纸吸干表面的水分；用无菌的手术刀将材料切成带茎节的小茎段按极性接种在芽诱导培养基上；
步骤三，诱导萌发的腋芽苗转接于继代增殖培养基上培养，1个月后，小茎段的腋芽分别长成新的植株，进行继代增殖快繁；每隔1个月转接继代增殖1次；
步骤四，继代增殖培养长成的1.5-2.0cm高的植株接种于生根培养基上；
步骤五，有生根组培苗的培养瓶放置于室温自然光照条件下炼苗3-5d，揭开封口膜，用镊子夹出小苗，在自来水下冲洗干净基部残留的培养基，用0.1％的多菌灵溶液消毒3-5min；再用清水洗净，栽种到预先消毒处理过的基质中，基质用营养钵分装，每钵栽种1株，浇水淋透，保湿遮荫；
步骤六，1周后再浇水1次，15d喷施1次营养液。
进一步，所述步骤二中培养基：MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.5mg/L。
进一步，所述步骤三中增殖培养基配方：MS+6-BA 4.0mg/L。
进一步，所述步骤四中生根培养基配方：1/2MS+NAA0.2mg/L。
进一步，培养基中附加3％蔗糖、0.7％琼脂粉和0.05％活性炭，pH5.8；培养温度为25±2℃，光照时间12h/d，光照强度为1500～2000lx。
进一步，所述步骤六中基质为蛭石∶腐殖土＝1：1。
本发明的另一目的在于提供一种使用所述珠芽蓼茎段组培快繁方法的珠芽蓼。
本发明的优点及积极效果为：
1、本发明方法采用茎段来繁育珠芽蓼，解决了目前仅靠种子和根状茎人工繁殖珠芽蓼的问题
2.茎段作为外殖体，取材简单，几乎用之不竭(取后还会再生)
3.用茎段繁殖，所需材料少，再经过芽诱导增殖，理论上可无限繁殖，不受种子、根状茎少的限制，可使萌发效率在短时间内达到最大值。
2、根据诱导茎段腋芽萌发所用的培养基组分及配比，在茎段具有最大萌发效率和萌发量的前提下，采用相同的培养基进行增殖培养，可在保证具有最大增殖效率的前提下，促使根状茎在增殖培养过程中继续萌发丛生芽和腋芽，提升珠芽蓼苗的成活率和得率，另外，诱导萌发丛生芽和增殖培养基组分相同，无需向增殖培养基中添加新成分，大大降低了培养基的配比成本。
4、采用本发明过程中提及的方法进行炼苗，可使珠芽蓼的炼苗成活率达到93.3％以上。
附图说明
图1是本发明实施例提供的珠芽蓼茎段组培快繁方法流程图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
下面结合附图对本发明的应用原理作详细的描述。
如图1所示，本发明实施例提供的珠芽蓼茎段组培快繁方法包括以下步骤：
S101：外植体采用珠芽蓼当年生茎段，采集珠芽蓼当年新生健壮植株的中部茎段，将茎节处的叶片摘除，用自来水冲洗干净；
S102：消毒处理及芽的诱导，先用75％酒精进行表面消毒处理10-20s，再用0.1％升汞溶液浸泡消毒4～5min，最后用无菌水冲洗5次，无菌滤纸吸干表面的水分，然后用无菌的手术刀将材料切成带茎节的小茎段按极性接种在芽诱导培养基上；
S103：将诱导萌发的腋芽苗转接于继代增殖培养基上培养，1个月后,小茎段的腋芽分别长成新的植株，用芽生芽的方法进行继代增殖快繁；每隔1个月转接继代增殖1次；
S104：继代增殖培养长成的约1.5-2.0cm高的植株接种于生根培养基上；
S105：有生根组培苗的培养瓶放置于室温自然光照条件下炼苗3-5d，揭开封口膜，用镊子轻轻夹出小苗，在自来水下冲洗干净基部残留的培养基，用0.1％的多菌灵溶液消毒3-5min；再用清水洗净，栽种到预先消毒处理过的基质中，基质用营养钵分装，每钵栽种1株，浇水淋透，适当保湿遮荫；
S106：1周后再浇水1次，15d喷施1次营养液，进行常规管理。30d后，苗的成活率达到93.3％，新根发早，根系发达、粗壮，植株生长良好。
下面结合具体实施例对本发明的应用原理作进一步的描述。
实施例1：
本发明实施例提供的珠芽蓼茎段组培快繁方法包括以下步骤：
(1)采样，外植体采用珠芽蓼当年生茎段。采集珠芽蓼当年新生健壮植株的中部茎段，将茎节处的叶片摘除，用自来水冲洗干净。在超净工作台上。
(2)消毒处理及芽的诱导，先用75％酒精进行表面消毒处理10-20s，再用0.1％升汞溶液浸泡消毒4～5min，最后用无菌水冲洗5次,无菌滤纸吸干表面的水分，然后用无菌的手术刀将材料切成带茎节的小茎段按极性接种在芽诱导培养基上。培养基配方：MS+6-BA1.0mg/L+NAA 0.5mg/L，诱导率90％。
(3)继代增殖
将诱导萌发的腋芽苗转接于继代增殖培养基上培养，1个月后,小茎段的腋芽分别长成新的植株，用芽生芽的方法进行继代增殖快繁。每隔1个月转接继代增殖1次。增殖培养基配方：MS+6-BA 4.0mg/L。芽的增殖倍数可达到5.0。
(4)生根培养
将继代增殖培养长成的约1.5-2.0cm高的植株接种于生根培养基上。培养约20d后，苗的生根率可达100％，植株均生长良好。生根培养基配方：1/2MS+NAA0.2mg/L。
(5)培养条件
以上所述培养基中均附加3％蔗糖、0.7％琼脂粉和0.05％活性炭，pH5.8，按植物组织培养常规方法配制和灭菌。培养温度为(25±2)℃，光照时间12h/d，光照强度为1500～2000lx。
(6)炼苗与移栽
将有生根组培苗的培养瓶放置于室温自然光照条件下炼苗3-5d，后揭开封口膜，用镊子轻轻夹出小苗，在自来水下冲洗干净基部残留的培养基，用0.1％的多菌灵溶液消毒3-5min，然后再用清水洗净，栽种到预先消毒处理过的基质中，基质用营养钵分装，每钵栽种1株，浇水淋透，适当保湿遮荫。1周后再浇水1次，15d喷施1次营养液，进行常规管理。30d后，苗的成活率达到93.3％，新根发早，根系发达、粗壮，植株生长良好。基质配方：蛭石∶腐殖土＝1：1。
下面结合试验对本发明的应用效果作详细的描述。
应用本发明，在培养基(配方：MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.5mg/L)上培养，芽诱导率达到90％。在增殖培养基：MS+6-BA 4.0mg/L上培养2个月。芽的增殖倍数可达到5.0。按照本发明炼苗方法，苗的成活率达到93.3％，新根发早，根系发达、粗壮，植株生长良好。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种珠芽蓼茎段组培快繁方法，其特征在于，所述珠芽蓼茎段组培快繁方法包括以下步骤：
步骤一，外植体采用珠芽蓼当年生茎段，采集珠芽蓼当年新生健壮植株的中部茎段，茎节处的叶片摘除冲洗干净；
步骤二，用75％酒精进行表面消毒处理10-20s，0.1％升汞溶液浸泡消毒4～5min，无菌水冲洗5次，无菌滤纸吸干表面的水分；用无菌的手术刀将材料切成带茎节的小茎段按极性接种在芽诱导培养基上；
步骤三，诱导萌发的腋芽苗转接于继代增殖培养基上培养，1个月后，小茎段的腋芽分别长成新的植株，进行继代增殖快繁；每隔1个月转接继代增殖1次；
步骤四，继代增殖培养长成的1.5-2.0cm高的植株接种于生根培养基上；
步骤五，有生根组培苗的培养瓶放置于室温自然光照条件下炼苗3-5d，揭开封口膜，用镊子夹出小苗，在自来水下冲洗干净基部残留的培养基，用0.1％的多菌灵溶液消毒3-5min；再用清水洗净，栽种到预先消毒处理过的基质中，基质用营养钵分装，每钵栽种1株，浇水淋透，保湿遮荫；
步骤六，1周后再浇水1次，15d喷施1次营养液。
2.如权利要求1所述的珠芽蓼茎段组培快繁方法，其特征在于，所述步骤二中培养基：MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.5mg/L。
3.如权利要求1所述的珠芽蓼茎段组培快繁方法，其特征在于，所述步骤三中增殖培养基配方：MS+6-BA 4.0mg/L。
4.如权利要求1所述的珠芽蓼茎段组培快繁方法，其特征在于，所述步骤四中生根培养基配方：1/2MS+NAA0.2mg/L。
5.如权利要求2、3或4所述的珠芽蓼茎段组培快繁方法，其特征在于，培养基中附加3％蔗糖、0.7％琼脂粉和0.05％活性炭，pH5.8；培养温度为25±2℃，光照时间12h/d，光照强度为1500～2000lx。
6.如权利要求1所述的珠芽蓼茎段组培快繁方法，其特征在于，所述步骤六中基质为：蛭石∶腐殖土＝1：1。
7.一种使用权利要求1～6任意一项所述珠芽蓼茎段组培快繁方法的珠芽蓼。
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| 毛堂芬等: "药用植物头花蓼的组织培养快速繁殖", 《贵州农业科学》 * |
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| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
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