CN107873521B - 一种杜鹃兰种子组培快繁方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于药用草本植物繁殖技术领域，公开了一种杜鹃兰种子组培快繁方法，流水下冲洗10min，剥离出种子；用0.1％升汞10min+70％酒精10s进行消毒；接种到MS+2，4‑D1mg/L+BA 1mg/L愈伤组织诱导；转接到1/2MS+NAA 1mg/L+BA 1mg/L愈伤组织分化成苗；培养于24±1℃、2000～2100lx条件下，光照8～10h/d；将组培苗的培养瓶放置于室温自然光照条件下炼苗，用清水洗净，栽种到预先消毒处理过的基质中，用营养钵分装。50d后诱导率可达到55％；培养40d后成苗；苗成活率达到83％，新根发早，根系发达、粗壮，植株生长良好。
Description
技术领域
本发明属于药用草本植物繁殖技术领域，尤其涉及一种杜鹃兰种子组培快繁方法。
背景技术
杜鹃兰(Cremastra appendiculata)又名算盘七、三道箍、朝天一柱香等，为兰科杜鹃兰属的多年生药用草本植物，以假鳞茎入药，药材称毛慈菇或山慈菇，为重要紧缺中药材。由于人们长期掠夺式的采挖，其野生资源日渐枯竭。杜鹃兰种子种子的胚发育不完全，不易发芽，自然条件下难以繁殖假鳞茎在1年生长期中只能产生1个新的假鳞茎，故繁殖速度极其缓慢，使人工种植难以规模化进行。组培快繁是解决杜鹃兰种苗好途径，假鳞茎的快繁技术能保证种苗遗传性状，但假鳞茎是该植物药用部位，价格昂贵；作为外植体，需要新鲜假鳞茎，运输不便，且取材受季节影响。存在材料稀少昂贵、储存运输不便等问题。杜鹃兰种子由于直接播种难以繁殖，虽然有数量多取材方便、苗适应性更强等优点，但没有利用。
综上所述，现有技术存在的问题是：假鳞茎的快繁技术存在材料稀少昂贵、储存运输不便。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种杜鹃兰种子组培快繁方法。
本发明是这样实现的，一种杜鹃兰种子组培快繁方法，所述杜鹃兰种子组培快繁方法包括以下步骤：
步骤一，采集杜鹃兰当年成熟种子；
步骤二，流水下冲洗10min，剥离出种子；用0.1％升汞10min+70％酒精10s进行消毒；无菌率可以达到95％以上。
步骤三，接种到MS+2，4-D1 mg/L+BA 1mg/L愈伤组织诱导；50d后诱导率可达到55％。
步骤四，转接到1/2MS+NAA 1mg/L+BA 1mg/L愈伤组织分化成苗；培养40d后成苗，成苗率可达到100％。
步骤五，培养于24±1℃、2000～2100lx条件下，光照8～10h/d；
步骤六，将组培苗的培养瓶放置于室温自然光照条件下炼苗3-5d，用清水洗净，栽种到预先消毒处理过的基质中，基质用营养钵分装。30d后，苗的成活率达到83％。
进一步，所述基质用营养钵分装，1周后再浇水1次，15d喷施1次营养液，进行常规管理。
进一步，所述组培苗的培养瓶放置于室温自然光照条件下炼苗3-5d，后揭开封口膜，用镊子轻轻夹出小苗，在自来水下冲洗干净基部残留的培养基，用0.1％的多菌灵溶液消毒3-5min，再用清水洗净，栽种到预先消毒处理过的基质中。
进一步，所述基质用营养钵分装，每钵栽种1株，浇水淋透，保湿遮荫；1周后再浇水1次，15d喷施1次营养液，进行常规管理。
进一步，所述基质按照体积比：蛭石∶腐殖土＝1：1。
本发明的另一目的在于提供一种利用所述杜鹃兰种子组培快繁方法繁殖的杜鹃兰。
本发明的优点及积极效果为：MS+2，4-D1 mg/L+BA 1mg/L利于愈伤组织的诱导，50d后诱导率可达到55％；1/2MS+NAA 1mg/L+BA 1mg/L利于愈伤组织分化成苗。培养40d后成苗；30d后，苗的成活率达到83％，新根发早，根系发达、粗壮，植株生长良好。兰科植物种子小、数量多，本发明方法采用种子来繁育杜鹃兰，取材、运输方便。以往用假鳞茎的快繁技术能保证种苗遗传性状，但假鳞茎是该植物药用部位，价格昂贵；作为外植体，需要新鲜假鳞茎，运输不便，且取材受季节影响。存在材料稀少昂贵、储存运输不便等问题。本发明可在短时间内获得大量种苗。与假鳞茎培养的种苗相比，种子培养的种苗抗逆性更强，苗的成活率达到83％。
附图说明
图1是本发明实施例提供的杜鹃兰种子组培快繁方法流程图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
本发明通过开发杜鹃兰种子的组培方法和培养基配方，解决利用种子繁殖的技术问题。
下面结合附图对本发明的应用原理作详细的描述。
如图1所示，本发明实施例提供的杜鹃兰种子组培快繁方法包括以下步骤：
S101：采集杜鹃兰当年成熟种子；
S102：流水下冲洗10min，在超净工作台上剥离出种子；用0.1％升汞10min+70％酒精10s进行消毒；
S103：接种到MS+2，4-D1 mg/L+BA 1mg/L较利于愈伤组织的诱导，50d后诱导率可达到55％；
S104：转接到1/2MS+NAA 1mg/L+BA 1mg/L较利于愈伤组织分化成苗，培养40d后成苗。
S105：培养于24±1℃、2000～2100lx条件下，光照8～10h/d；
S106：将组培苗的培养瓶放置于室温自然光照条件下炼苗3-5d，用清水洗净，栽种到预先消毒处理过的基质中，基质用营养钵分装，1周后再浇水1次，15d喷施1次营养液，进行常规管理。
本发明实施例提供的杜鹃兰种子组培快繁方法具体包括以下步骤：
(1)采样
采集杜鹃兰当年成熟种子；
(2)消毒：
流水下冲洗10min，在超净工作台上剥离出种子；用0.1％升汞10min+70％酒精10s进行消毒；
(3)愈伤组织诱导
接种到MS+2，4-D1 mg/L+BA 1mg/L较利于愈伤组织的诱导，50d后诱导率可达到55％；
(4)愈伤组织分化
转接到1/2MS+NAA 1mg/L+BA 1mg/L较利于愈伤组织分化成苗。培养40d后成苗；
(5)培养条件
培养于24±1℃、2000～2100lx条件下，光照8～10h/d；
(6)炼苗移栽
将组培苗的培养瓶放置于室温自然光照条件下炼苗3-5d，后揭开封口膜，用镊子轻轻夹出小苗，在自来水下冲洗干净基部残留的培养基，用0.1％的多菌灵溶液消毒3-5min，然后再用清水洗净，栽种到预先消毒处理过的基质中，基质用营养钵分装，每钵栽种1株，浇水淋透，适当保湿遮荫；1周后再浇水1次，15d喷施1次营养液，进行常规管理；30d后，苗的成活率达到83％，新根发早，根系发达、粗壮，植株生长良好；基质配方按照体积比：蛭石∶腐殖土＝1：1。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (1)
1.一种杜鹃兰种子组培快繁方法，其特征在于，所述杜鹃兰种子组培快繁方法包括以下步骤：
步骤一，采集杜鹃兰当年成熟种子；
步骤二，流水下冲洗10min，剥离出种子；用0.1％升汞处理10min+70％酒精10s进行消毒；
步骤三，接种到MS+2，4-D1 mg/L+BA 1mg/L上进行愈伤组织诱导；
步骤四，转接到1/2MS+NAA 1mg/L+BA 1mg/L，愈伤组织分化成苗；
步骤五，将组培苗的培养瓶放置于室温自然光照条件下炼苗3-5d，后揭开封口膜，用镊子轻轻夹出小苗，在自来水下冲洗干净基部残留的培养基，用0.1％的多菌灵溶液消毒3-5min，然后再用清水洗净，栽种到预先消毒处理过的基质中，基质用营养钵分装，每钵栽种1株，浇水淋透，适当保湿遮荫；1周后再浇水1次，15d喷施1次营养液，进行常规管理；30d后，苗的成活率达到83％，新根发早，根系发达、粗壮，植株生长良好；基质配方按照体积比：蛭石∶腐殖土＝1：1；
其中，培养杜鹃兰种子组培快繁的培养条件为24±1℃、2000～2100lx条件下，光照8～10h/d。
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