CN105230484A - 一种黄精的快速繁殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种黄精的快速繁殖方法，包括以下步骤：选择带有隐藏芽点的黄精块茎作为外植体，洗净消毒后，利用诱导剂对创面进行不定芽的诱导，其创面就会萌发出新芽，在对新芽用营养液进行生根培养和炼苗。本发明过对诱导组织培养，可以产生大量的种苗，一块块茎可以增加4～5倍的出苗量，其出苗率可达到98%以上，从块茎到丛生苗，只需要5～6个月，丛生苗生长旺盛，一般丛生苗的成活率可达到99%以上，不仅大大的缩短了培育的时间和成本，提高了扩繁速度，而且为黄精的商品化和规模化栽培提供了可行的生产技术线路，也为野生黄精的资源利用和快速繁殖技术的研究提供了理想的材料，易于推广使用。
Description
技术领域
本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种黄精的快速繁殖方法。
背景技术
黄精系百合科黄精属多年生草本植物，我国药用的黄精主要分布在北方的大黄精，分布在云贵高原的滇黄精和长江以南的多花黄精三种。黄精中主要含有多糖、聚糖、黄酮、木质素、生物碱和氨基酸等物质，经现代药理研究发现，黄精有补肾益精，滋阴润燥、抗氧化、抗衰老、调节人体免疫力、降脂、降糖、或抑制胆固醇、预防动脉粥样动化、提高学习记忆与再线能力、抗炎、抗病毒等功效，对身体十分有益，黄精的根茎形状如山芋，可以生吃和炖服，既能充饥，又有保健作用。目前，随着黄精药用价值和保健价值越来被人们认识，黄精的需求量也越来越大，致使野生黄精的量急剧减少，导致其资源枯竭加速，采集到的野生黄精不但不能满足市场的供应需求，反而破坏了生态环境和黄精野生资源，同时，现有的野生黄精很难找到，使得黄精的价格也随之水涨床高，这就刺激了人工规模化种植黄精的积极性。近年来，人工规模化黄精，其黄精种植苗的主要来源大致有块茎繁殖、种子繁殖和无性繁殖，种子繁殖的种苗一般需要6年时间才能采挖，大大的增加了种植时间和种植成本，种植户的收益见效慢，适用性不强，而无性繁殖的成本比种子繁殖的成本更高没有可操作性，所以，现在黄精的规模化种植中，一般都采用块茎繁殖的方式，该繁殖方法能减少种植周期，一般3年就可以采挖，但是在用块茎繁殖的过程中，块茎上的芽点是有限的，其成苗量较少，种植后的质量不稳定、繁殖倍数低的问题成了人工规模化中的发展瓶颈。因此，研制开发一种方法简单、成本低、周期短、繁殖系数高、技术稳定、能有效保证黄精优良性状的快速繁殖方法是客观需要的。
发明内容
为了解决背景技术中存在的问题，本发明的目的提供了一种方法简单、成本低、周期短、繁殖系数高、技术稳定、能有效保证黄精优良性状的快速繁殖方法。
本发明的目的是这样实现的，一种黄精的快速繁殖方法，包括以下步骤：
外植体的选择:选择表面光滑、个头大、当年生且带有隐藏芽点的黄精块茎，先洗掉黄精块茎上的泥土，用洗洁精水溶液浸泡3～5分钟，然后用清水冲洗干净，再用浓度为75%的酒精擦拭消毒，最后再放入碘伏中浸泡3～5分钟，并用无菌水冲洗2～4遍后用无菌纸吸干表面的水分；
组织诱导：将步骤中消毒处理后的黄精茎块，切成只保留有一个顶芽的茎段，然后在茎段的结节上侧茎根呈圆盘状的凹入处切有一个8～12×8～12mm的创面，并用滴管将2.5～3.5ml浓度为1～1.5mg/L的6-苄氨基腺嘌呤滴在创面上，滴完后用2.5～3g的草木灰盖住创面，并将其放置在温度为25～28℃，湿度在60%以上的弱光环境中，放置15～20天后创面会有小芽萌动，此时用滴管将2～2.5ml浓度为0.5～1mg/L的赤霉素滴在小芽萌动的创面上，继续放置在温度为25～28℃，湿度在60%以上的弱光环境中，培养20～30天后可观察到淡黄色的新芽；
生根培养：对步骤中所述创面上产生的新芽，每天用营养液浇施3～4次，诱导其生根，所述营养液中各溶质的浓度为硝酸钾850～950mg/L、硝酸铵700～900mg/L、磷酸二氢钾900～1000mg/L、无水氯化钙1.5～3mg/L，硫酸镁2～2.5mg/L，浇施15～20天后，新芽即可发育成10cm以上的丛生苗；
炼苗：将丛生苗移栽至苗床，炼苗40～60天后，待黄精小苗稳定后即可进行移栽。
本发明采用采用块茎作为材料，因其块茎上的胚芽分生组织发达，分生能力强，在诱导剂的作用下，容易诱导形成愈伤组织，且诱导剂的取材简单、价格低廉，使用方便，通过对诱导组织培养，可以产生大量的种苗，一块块茎可以增加4～5倍的出苗量，其出苗率可达到98%以上，从块茎到丛生苗，只需要5～6个月，丛生苗生长旺盛，一般丛生苗的成活率可达到99%以上，不仅大大的缩短了培育的时间和成本，提高了扩繁组度，而且为黄精的商品化和规模化栽培提供了可行的生产技术线路，也为野生黄精的资源利用和快速繁殖技术的研究提供了理想的材料，易于推广使用。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变换或替换，均实施例属于本发明的保护范围。
实施例1：
本实施例的具体步骤如下：
外植体的选择:选择表面光滑、个头大、当年生且带有隐藏芽点的黄精块茎，先洗掉黄精块茎上的泥土，用洗洁精水溶液浸泡3分钟，然后用清水冲洗干净，再用浓度为75%的酒精擦拭消毒，最后再放入碘伏中浸泡4分钟，并用无菌水冲洗2～4遍后用无菌纸吸干表面的水分；
组织诱导：将步骤中消毒处理后的黄精茎块，切成只保留有一个顶芽的茎段，然后在茎段的结节上侧茎根呈圆盘状的凹入处切有一个8×8mm的创面，并用滴管将2.5ml浓度为1mg/L的6-苄氨基腺嘌呤滴在创面上，滴完后用2.5的草木灰盖住创面，并将其放置在温度为25～28℃，湿度在60%以上的弱光环境中，放置15天后创面会有小芽萌动，此时用滴管将2ml浓度为0.5mg/L的赤霉素滴在小芽萌动的创面上，继续放置在温度为25～28℃，湿度在60%以上的弱光环境中，培养20天后可观察到淡黄色的新芽；
生根培养：对步骤中所述创面上产生的新芽，每天用营养液浇施3次，诱导其生根，所述营养液中各溶质的浓度为硝酸钾850mg/L、硝酸铵700mg/L、磷酸二氢钾900mg/L、无水氯化钙1.5mg/L，硫酸镁2mg/L，浇施15～20天后，新芽即可发育成10cm以上的丛生苗；
炼苗：将丛生苗移栽至苗床，炼苗40～60天后，待黄精小苗稳定后即可进行移栽。
采用本实施例1的方法所培养块茎，从愈伤组织到小芽培养，35天后即可长出新芽，其出苗率为98.6%，出苗量相比传统的块茎繁殖提高了4～5倍，经繁殖后的丛生苗茎粗壮、叶色浓绿、生长旺盛，有92.3%的丛生苗都会长出数量不等的根，且经过15天可以长到10cm以上的高度。
实施例2：
本实施例的具体步骤如下：
外植体的选择:选择表面光滑、个头大、当年生且带有隐藏芽点的黄精块茎，先洗掉黄精块茎上的泥土，用洗洁精水溶液浸泡4分钟，然后用清水冲洗干净，再用浓度为75%的酒精擦拭消毒，最后再放入碘伏中浸泡5分钟，并用无菌水冲洗2～4遍后用无菌纸吸干表面的水分；
组织诱导：将步骤中消毒处理后的黄精茎块，切成只保留有一个顶芽的茎段，然后在茎段的结节上侧茎根呈圆盘状的凹入处切有一个10×10mm的创面，并用滴管将3ml浓度为1.25mg/L的6-苄氨基腺嘌呤滴在创面上，滴完后用2.8g的草木灰盖住创面，并将其放置在温度为25～28℃，湿度在60%以上的弱光环境中，放置18天后创面会有小芽萌动，此时用滴管将2.2ml浓度为0.8mg/L的赤霉素滴在小芽萌动的创面上，继续放置在温度为25～28℃，湿度在60%以上的弱光环境中，培养25天后可观察到淡黄色的新芽；
生根培养：对步骤中所述创面上产生的新芽，每天用营养液浇施4次，诱导其生根，所述营养液中各溶质的浓度为硝酸钾900mg/L、硝酸铵800mg/L、磷酸二氢钾960mg/L、无水氯化钙2g/L，硫酸镁2.2mg/L，浇施15～20天后，新芽即可发育成10cm以上的丛生苗；
炼苗：将丛生苗移栽至苗床，炼苗40～60天后，待黄精小苗稳定后即可进行移栽。
采用本实施例2的方法所培养块茎，从愈伤组织到小芽培养，43天后即可长出新芽，其出苗率为99.1%，出苗量相比传统的块茎繁殖提高了4～5倍，经繁殖后的丛生苗茎粗壮、叶色浓绿、生长旺盛，有94.3%的丛生苗都会长出数量不等的根，且经过15天可以长到10cm以上的高度。
实施例3：
本实施例的具体步骤如下：
外植体的选择:选择表面光滑、个头大、当年生且带有隐藏芽点的黄精块茎，先洗掉黄精块茎上的泥土，用洗洁精水溶液浸泡5分钟，然后用清水冲洗干净，再用浓度为75%的酒精擦拭消毒，最后再放入碘伏中浸泡3分钟，并用无菌水冲洗2～4遍后用无菌纸吸干表面的水分；
组织诱导：将步骤中消毒处理后的黄精茎块，切成只保留有一个顶芽的茎段，然后在茎段的结节上侧茎根呈圆盘状的凹入处切有一个12×12mm的创面，并用滴管将3.5ml浓度为1.5mg/L的6-苄氨基腺嘌呤滴在创面上，滴完后用3g的草木灰盖住创面，并将其放置在温度为25～28℃，湿度在60%以上的弱光环境中，放置20天后创面会有小芽萌动，此时用滴管将2.5ml浓度为1mg/L的赤霉素滴在小芽萌动的创面上，继续放置在温度为25～28℃，湿度在60%以上的弱光环境中，培养30天后可观察到淡黄色的新芽；
生根培养：对步骤中所述创面上产生的新芽，每天用营养液浇施4次，诱导其生根，所述营养液中各溶质的浓度为硝酸钾950mg/L、硝酸铵900mg/L、磷酸二氢钾1000mg/L、无水氯化钙3mg/L，硫酸镁2.5mg/L，营养液为将各溶质溶解在水中后制作而成，浇施营养液15～20天后，新芽即可发育成10cm以上的丛生苗；
炼苗：将丛生苗移栽至苗床，炼苗40～60天后，待黄精小苗稳定后即可进行移栽。
采用本实施例3的方法所培养块茎，从愈伤组织到小芽培养，50天后即可长出新芽，其出苗率为98.1%，出苗量相比传统的块茎繁殖提高了4～5倍，经繁殖后的丛生苗茎粗壮、叶色浓绿、生长旺盛，有93.7%的丛生苗都会长出数量不等的根，且经过15天可以长到10cm以上的高度。
Claims (2)
1.一种黄精的快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：
外植体的选择:选择表面光滑、个头大、当年生且带有隐藏芽点的黄精块茎，先洗掉黄精块茎上的泥土，用洗洁精水溶液浸泡3～5分钟，然后用清水冲洗干净，再用浓度为75%的酒精擦拭消毒，最后再放入碘伏中浸泡3～5分钟，并用无菌水冲洗2～4遍后用无菌纸吸干表面的水分；
组织诱导：将步骤中消毒处理后的黄精茎块，切成只保留有一个顶芽的茎段，然后在茎段的结节上侧茎根呈圆盘状的凹入处切有一个8～12×8～12mm的创面，并用滴管将2.5～3.5ml浓度为1～1.5mg/L的6-苄氨基腺嘌呤滴在创面上，滴完后用2.5～3g的草木灰盖住创面，并将其放置在温度为25～28℃，湿度在60%以上的弱光环境中，放置15～20天后创面会有小芽萌动，此时用滴管将2～2.5ml浓度为0.5～1mg/L的赤霉素滴在有小芽萌动的创面上，继续放置在温度为25～28℃，湿度在60%以上的弱光环境中，培养20～30天后可观察到淡黄色的新芽；
生根培养：对步骤中所述创面上产生的新芽，每天用营养液浇施3～4次，诱导其生根，所述营养液中各溶质的浓度为硝酸钾850～950mg/L、硝酸铵700～900mg/L、磷酸二氢钾900～1000mg/L、无水氯化钙1.5～3mg/L，硫酸镁2～2.5mg/L，浇施15～20天后，新芽即可发育成10cm以上的丛生苗；
炼苗：将丛生苗移栽至苗床，炼苗40～60天后，待黄精小苗稳定后即可进行移栽。
2.根据权利要求1所述的一种黄精的快速繁殖方法，其特征在于：步骤中所述营养液中各溶质的浓度为硝酸钾900mg/L、硝酸铵800mg/L、磷酸二氢钾960mg/L、无水氯化钙2mg/L，硫酸镁2.2mg/L。
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