CN101889547A - 齿瓣石斛种子无菌快速繁殖方法 - Google Patents

齿瓣石斛种子无菌快速繁殖方法 Download PDF

Info

Publication number
CN101889547A
CN101889547A CN2009101455164A CN200910145516A CN101889547A CN 101889547 A CN101889547 A CN 101889547A CN 2009101455164 A CN2009101455164 A CN 2009101455164A CN 200910145516 A CN200910145516 A CN 200910145516A CN 101889547 A CN101889547 A CN 101889547A
Authority
CN
China
Prior art keywords
grams per
medium
aseptic
seedling
dendrobium devonianum
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN2009101455164A
Other languages
English (en)
Other versions
CN101889547B (zh
Inventor
白燕冰
高燕
李守岭
季丽坤
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Dehong Tropical Agriculture Institute of Yunnan
Original Assignee
Dehong Tropical Agriculture Institute of Yunnan
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Dehong Tropical Agriculture Institute of Yunnan filed Critical Dehong Tropical Agriculture Institute of Yunnan
Priority to CN200910145516A priority Critical patent/CN101889547B/zh
Publication of CN101889547A publication Critical patent/CN101889547A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN101889547B publication Critical patent/CN101889547B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • Y02P60/216—

Landscapes

  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Cultivation Of Plants (AREA)

Abstract

本发明公开了一种齿瓣石斛种子无菌快速繁殖方法，涉及生物工程技术领域。本发明通过下述方案得以实现：以齿瓣石斛成熟未开裂的蒴果为外植体，经消毒处理后，首先切开果皮，对种胚进行萌发培养，形成大量的原球茎；然后对原球茎进行增殖培养，形成大量的丛生芽或类原球茎混合组织；再对丛生芽进行壮苗生根培养，形成大量带根、茎、叶完整植株试管苗；最后通过对试管苗炼苗移栽后获得大量优质种苗。该方法可提高齿瓣石斛的种苗繁殖速度和增值倍数，苗齐、苗壮，利于进行工厂化生产。

Description

齿瓣石斛种子无菌快速繁殖方法
技术领域
本发明涉及药用石斛的种苗培养方法，尤其涉及一种齿瓣石斛种子无菌快速繁殖方法。
背景技术
石斛是我国传统的名贵中药材，齿瓣石斛是石斛类中的佳品，多附生于高山岩石和树上，近年来由于齿瓣石斛市场较好，人们对其进行掠夺式采摘，野生资源濒临枯竭。近年来，人们采用传统分株栽培和扦插对齿瓣石斛进行人工繁殖，但由于母株的丛生依赖性较强，不仅原材料损失大，而且伤口易感染病害，抗逆性下降，导致种苗繁殖速度慢、种苗不整齐，成活率低。
发明内容
为了克服传统齿瓣石斛种苗繁殖方法上的不足，本发明提供一种齿瓣石斛种子无菌快速繁殖方法，该方法可以提高齿瓣石斛的种苗繁殖速度和增值倍数，有利于齿瓣石斛种苗工厂化生产。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：以齿瓣石斛成熟未开裂的蒴果为外植体，经消毒处理后，首先切开果皮，对种胚进行萌发培养，通过培养，形成大量的原球茎；然后对原球茎进行增殖培养，形成大量的丛生芽或类原球茎；再对丛生芽进行壮苗生根培养，可以形成带根、茎、叶完整植株试管苗；最后通过对试管苗炼苗移栽后获得大量优质种苗。
本发明的有益效果是，可提高齿瓣石斛种苗繁殖速度和增值倍数，苗齐、苗壮，利于进行工厂化生产。
具体实施方式
选取齿瓣石斛成熟未开裂的蒴果为外植体，具体方法包括下述步骤：(1)外植体选取与消毒：选取成熟未开裂的蒴果，用75％的酒精浸泡1min后置于0.1％的升汞溶液中消毒15～20min，再用无菌水冲洗5～6次；(2)萌发培养：切开蒴果皮，将金黄色粉末状胚接种到萌发培养基上，萌发培养基为花宝1号(N∶P∶K＝7∶6∶19)3克/升+LH(水解乳蛋白)1克/升+蔗糖25克/升，萌发培养基pH5.8～6.2，培养温度25～27℃，光照强度1500～2000Lx，每天光照12小时，培养时间40～45天，形成直径1mm左右的绿色原球茎；(3)增殖培养：将原球茎接种到增殖培养基上，增殖培养基为MS+6-BA(6-苄基腺嘌呤)0.1～1.0毫克/升+NAA(α-萘乙酸)0.1～1.0毫克/升+红薯汁50～100克/升+CH(水解酪蛋白)1克/升+活性炭0.5～2.0克/升+蔗糖30克/升，增殖培养基pH5.8～6.2，培养温度25～27℃，光照强度1500～2000Lx，每天光照12小时，培养时间50～60天，形成高1～3厘米的丛生芽或类原球茎混合组织；(4)壮苗生根培养：将丛生芽转接到壮苗生根培养基中，壮苗生根培养基为1/2MS+IAA(吲哚乙酸)0.1～1.0毫克/升+NAA0.1～1.0毫克/升+L-半胱氨酸0.01～0.05毫克/升+马铃薯汁50～100克/升+香蕉汁50～150克/升+活性炭1.0～3.0克/升+蔗糖20克/升，壮苗生根培养基pH5.8～6.2，培养温度25～27℃，光照强度1500～2000Lx，每天光照12小时，培养时间50～60天，培育出带根、茎、叶完整植株试管苗；(5)试管苗炼苗移栽：当试管苗长3片伸展叶以上、株高5cm以上、根长3cm以上时，将携苗的试管转移到大棚在自然光下炼苗10～15天，然后将苗从试管中取出，洗净附于根部的培养基，用0.1％的多菌灵溶液浸泡10min后，移栽至移栽基质上，移栽基质先进行杀菌处理，移栽基质由木炭末、椰子壳粉末、锯末从下至上分层排列于大棚苗床上，其厚度分别为1cm、4cm、5cm，移栽时以3株/丛置于锯末上，大棚温度控制在20～32℃，空气相对湿度60～80％，荫蔽度为75～85％，光照度6000～12000Lx，待苗直立时，用低浓度母液或化肥溶液进行叶面喷施，移栽的成活率达90％以上，2～3个月后，可获得大批优质种苗。

Claims (6)

1.一种齿瓣石斛种子无菌快速繁殖方法，其特征是：以齿瓣石斛成熟未开裂的蒴果为外植体，经消毒处理后，首先切开果皮，对种胚进行萌发培养，通过培养，形成大量的原球茎；然后对原球茎进行增殖培养，形成大量的丛生芽或类原球茎；再对丛生芽进行壮苗生根培养，可以形成带根、茎、叶完整植株试管苗；最后通过对试管苗炼苗移栽后获得大量种苗。
2.根据权利要求1所述的齿瓣石斛种子无菌快速繁殖方法，其特征是，外植体选取与消毒：选取成熟未开裂的蒴果，用75％的酒精浸泡1min后置于0.1％的升汞溶液中消毒15～20min，再用无菌水冲洗5～6次。
3.根据权利要求1所述的齿瓣石斛种子无菌快速繁殖方法，其特征是，萌发培养：切开蒴果皮，将金黄色粉末状胚接种到萌发培养基上，萌发培养基为花宝1号(N∶P∶K＝7∶6∶19)3克/升+LH(水解乳蛋白)1克/升+蔗糖25克/升，萌发培养基pH5.8～6.2，培养温度25～27℃，光照强度1500～2000Lx，每天光照12小时，培养时间40～45天，形成直径1mm左右的绿色原球茎。
4.根据权利要求1所述的齿瓣石斛种子无菌快速繁殖方法，其特征是，增殖培养：将原球茎接种到增殖培养基上，增殖培养基为MS+6-BA(6-苄基腺嘌呤)0.1～1.0毫克/升+NAA(α-萘乙酸)0.1～1.0毫克/升+红薯汁50～100克/升+CH(水解酪蛋白)1克/升+活性炭0.5～2.0克/升+蔗糖30克/升，增殖培养基pH5.8～6.2，培养温度25～27℃，光照强度1500～2000Lx，每天光照12小时，培养时间50～60天，形成高1～3厘米的丛生芽或类原球茎混合组织。
5.根据权利要求1所述的齿瓣石斛种子无菌快速繁殖方法，其特征是，壮苗生根培养：将丛生芽转接到壮苗生根培养基中，壮苗生根培养基为1/2MS+IAA(吲哚乙酸)0.1～1.0毫克/升+NAA0.1～1.0毫克/升+L-半胱氨酸0.01～0.05毫克/升+马铃薯汁50～100克/升+香蕉汁50～150克/升+活性炭1.0～3.0克/升+蔗糖20克/升，壮苗生根培养基pH5.8～6.2，培养温度25～27℃，光照强度1500～2000Lx，每天光照12小时，培养时间50～60天，培育出带根、茎、叶完整植株试管苗。
6.根据权利要求1所述的齿瓣石斛种子无菌快速繁殖方法，其特征是，试管苗炼苗移栽：当试管苗长3片伸展叶以上、株高5cm以上、根长3cm以上时，将携苗的试管转移到大棚在自然光下炼苗10～15天，然后将苗从试管中取出，洗净附于根部的培养基，用0.1％的多菌灵溶液浸泡10min后，移栽至移栽基质上，移栽基质先进行杀菌处理，移栽基质由木炭末、椰子壳粉末、锯末从下至上分层排列于大棚苗床上，其厚度分别为1cm、4cm、5cm，移栽时以3株/丛置于锯末上，大棚温度控制在20～32℃，空气相对湿度60～80％，荫蔽度为75～85％，光照强度6000～12000Lx，待苗直立时，用低浓度母液或化肥溶液进行叶面喷施，2～3个月后，可获得大批优质种苗。
CN200910145516A 2009-05-22 2009-05-22 齿瓣石斛种子无菌快速繁殖方法 Expired - Fee Related CN101889547B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN200910145516A CN101889547B (zh) 2009-05-22 2009-05-22 齿瓣石斛种子无菌快速繁殖方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN200910145516A CN101889547B (zh) 2009-05-22 2009-05-22 齿瓣石斛种子无菌快速繁殖方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN101889547A true CN101889547A (zh) 2010-11-24
CN101889547B CN101889547B (zh) 2012-09-26

Family

ID=43099040

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN200910145516A Expired - Fee Related CN101889547B (zh) 2009-05-22 2009-05-22 齿瓣石斛种子无菌快速繁殖方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN101889547B (zh)

Cited By (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103004445A (zh) * 2013-01-06 2013-04-03 戴亚峰 塑料大棚直播石斛实生苗的方法
CN103891614A (zh) * 2014-03-27 2014-07-02 西南林业大学 一种诱导紫皮石斛原球茎分化的培养基
CN104082150A (zh) * 2014-07-31 2014-10-08 张松波 一种铁皮石斛的培养基
CN104304037A (zh) * 2014-11-21 2015-01-28 广西中医药大学 一种流苏石斛种子组织培养快速繁殖方法
CN104920219A (zh) * 2015-06-17 2015-09-23 临沧市云瑞堂生物科技有限公司 齿瓣石斛快速繁殖成苗的培养基系列及组培方法
CN105309301A (zh) * 2014-08-01 2016-02-10 云南省德宏热带农业科学研究所 鼓槌石斛种苗商品化生产方法
CN106856945A (zh) * 2017-03-06 2017-06-20 四川森迪科技发展股份有限公司 一种毛叶山桐子扦插方法
CN107047306A (zh) * 2017-04-26 2017-08-18 福建省农业科学院作物研究所 用于秋石斛兰快速繁殖的培养基组
CN107223446A (zh) * 2017-07-24 2017-10-03 南京仙草堂生物科技有限公司 一种黄石斛种苗扦插快速繁殖方法
CN107466862A (zh) * 2017-09-30 2017-12-15 福建省农业科学院作物研究所 一种快速繁殖鼓槌石斛组培苗的方法
CN109315423A (zh) * 2018-11-16 2019-02-12 赤水市信天中药产业开发有限公司 一种金钗石斛种子萌发剂及其制备方法
CN110100737A (zh) * 2019-06-21 2019-08-09 台州市椒江草之堂生物科技有限公司 一种铁皮石斛组培快速繁殖方法

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1157107C (zh) * 2002-09-17 2004-07-14 华南师范大学 金钗石斛的快速繁殖方法
CN1541518A (zh) * 2003-11-04 2004-11-03 中国科学院华南植物研究所 独角石斛兰无菌播种和试管育苗技术

Cited By (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103004445A (zh) * 2013-01-06 2013-04-03 戴亚峰 塑料大棚直播石斛实生苗的方法
CN103891614A (zh) * 2014-03-27 2014-07-02 西南林业大学 一种诱导紫皮石斛原球茎分化的培养基
CN103891614B (zh) * 2014-03-27 2015-10-21 西南林业大学 一种诱导紫皮石斛原球茎分化的培养基
CN104082150A (zh) * 2014-07-31 2014-10-08 张松波 一种铁皮石斛的培养基
CN105309301B (zh) * 2014-08-01 2018-01-16 云南省德宏热带农业科学研究所 鼓槌石斛种苗商品化生产方法
CN105309301A (zh) * 2014-08-01 2016-02-10 云南省德宏热带农业科学研究所 鼓槌石斛种苗商品化生产方法
CN104304037A (zh) * 2014-11-21 2015-01-28 广西中医药大学 一种流苏石斛种子组织培养快速繁殖方法
CN104304037B (zh) * 2014-11-21 2016-07-06 广西中医药大学 一种流苏石斛种子组织培养快速繁殖方法
CN104920219A (zh) * 2015-06-17 2015-09-23 临沧市云瑞堂生物科技有限公司 齿瓣石斛快速繁殖成苗的培养基系列及组培方法
CN106856945A (zh) * 2017-03-06 2017-06-20 四川森迪科技发展股份有限公司 一种毛叶山桐子扦插方法
CN107047306A (zh) * 2017-04-26 2017-08-18 福建省农业科学院作物研究所 用于秋石斛兰快速繁殖的培养基组
CN107223446A (zh) * 2017-07-24 2017-10-03 南京仙草堂生物科技有限公司 一种黄石斛种苗扦插快速繁殖方法
CN107466862A (zh) * 2017-09-30 2017-12-15 福建省农业科学院作物研究所 一种快速繁殖鼓槌石斛组培苗的方法
CN107466862B (zh) * 2017-09-30 2019-07-05 福建省农业科学院作物研究所 一种快速繁殖鼓槌石斛组培苗的方法
CN109315423A (zh) * 2018-11-16 2019-02-12 赤水市信天中药产业开发有限公司 一种金钗石斛种子萌发剂及其制备方法
CN109315423B (zh) * 2018-11-16 2020-10-16 赤水市信天中药产业开发有限公司 一种金钗石斛种子萌发剂及其制备方法
CN110100737A (zh) * 2019-06-21 2019-08-09 台州市椒江草之堂生物科技有限公司 一种铁皮石斛组培快速繁殖方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN101889547B (zh) 2012-09-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101889547B (zh) 齿瓣石斛种子无菌快速繁殖方法
CN101258835B (zh) 铁皮石斛优质种苗快速繁殖方法
CN101822220B (zh) 一种春兰名品茎尖组织培养快速繁殖方法
CN102499088B (zh) 一种利用广西金线莲蒴果快速繁育其种苗的方法
CN101720670B (zh) 旱半夏组织培养快速繁殖方法
CN111149704B (zh) 一种粉葛单芽茎段增殖及一步成苗培养方法
CN103270952B (zh) 新疆药桑组培快繁培养基
CN102845313A (zh) 狗枣猕猴桃的离体快速繁殖方法
CN101836585B (zh) 一种大花红景天的组培育苗方法
CN108770695B (zh) 一种红心火龙果离体组培快速成苗的方法
CN103766222A (zh) 甜叶菊组织培养方法及其培养基
CN1255022C (zh) 兜兰的无菌播种和组织培养方法
CN104137779A (zh) 一种白木乌桕茎段快速诱导再生植株的方法
CN106613079B (zh) 一种半夏种茎生产方法
CN103004595A (zh) 一种人参果的嫩枝扦插繁育方法
CN112119913A (zh) 一种甘薯的脱毒扩繁方法
CN115581202B (zh) 一种多花黄精新品种再生与体外成苗的方法
CN108112479B (zh) 一种番木瓜组培苗分化芽的茎段悬空植叶促根方法
CN110547194A (zh) 紫花三叉白芨的种子组培快速繁殖方法
CN1631102A (zh) 独蒜兰的试管种球生产技术
CN112806264B (zh) 一种梓叶槭组织培养快速繁殖方法
CN101611698B (zh) 三尖杉离体胚培养及植株再生方法
CN103858768A (zh) 一种鸡蛋花的组织培养方法
CN1541518A (zh) 独角石斛兰无菌播种和试管育苗技术
CN112616663A (zh) 一种大幅度缩短兰州百合种植周期和种苗快速繁殖的方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20120926

Termination date: 20180522

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee