CN110496161A - 一种陈皮的炮制方法及其炮制品的质量检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种陈皮的炮制方法及其炮制品的质量检测方法,包括以下步骤:称取陈皮药材100g,麦麸10g,将锅加热至70℃左右后撒入麦麸,见麦麸冒烟时,迅速将陈皮倾入锅中,后以120‑150℃中火将陈皮和麦麸快速地拌炒均匀,至将陈皮表面炒成棕黄色时即可,取出摊放,筛去麦麸以及碎屑。本发明通过大量对比实验筛选不同的炮制工艺,筛选出陈皮最佳的炮制方法。且本发明通过大量实验筛选出陈皮炮制品的质量检测方法,特别是通过大量实验筛选出最佳的流动相组成、流速、检测波长、色谱柱、柱温等分析条件,经方法学验证表明,本发明提供的陈皮的质量检测方法,具有方法简便、稳定性好、精密度高、重现性好等优点。
Description
技术领域
本发明涉及一种中药的炮制方法,具体涉及陈皮的炮制方法及其炮制品的质量检测方法。
背景技术
陈皮为芸香科植物橘Citrus reticulataBlanco及其栽培变种的干燥成熟果皮,有理气健脾、燥湿化痰的功效,临床用于脘腹胀满、食少吐泻、咳嗽痰多的治疗。现代药理学表明,陈皮具有抗炎、抗氧化、抗心血管疾病等作用,其有效成分主要为挥发油以及黄酮。
2015版《中国药典》中陈皮的质量控制标准规定了橙皮苷的含量测定,同时,研究表明二氢黄酮类是陈皮中所含黄酮主要类别之一,其中包括芸香柚皮苷、橙皮苷等,,发现目前有关陈皮炮制的研究较少,药典中更是仅仅收录切制一法目前还没有关于陈皮的系统炮制工艺筛选,目前炮制工艺不统一,没有科学方法可循,且目前关于陈皮炮制品的质量检测方法报道很少。
发明内容
发明目的:本发明的目的是解决现有技术的补足,提供一种炮制工艺合理,炮制工艺稳定,特别是可以提高有效成分芸香柚皮苷和橙皮苷的陈皮炮制方法。本发明另一个目的是提供陈皮炮制品的质量检测方法。该检测方法可以客观、准确的评价陈皮及其炮制品的质量,为保证临床疗效具有重要意义。
技术方案:为了实现上述目的,本发明采取的技术方案为:
一种陈皮的炮制方法,它包括以下步骤:
称取陈皮药材100g,麦麸10g,将锅加热至70℃左右后撒入麦麸,见麦麸冒烟时,迅速将陈皮倾入锅中,后以120-150℃中火将陈皮和麦麸快速地拌炒均匀,至将陈皮表面炒成棕黄色时即可,取出摊放,筛去麦麸以及碎屑。
作为另一优选方案,本发明所述的陈皮的炮制方法,其包括以下步骤:
取陈皮原药材100g,加入黄酒150ml,闷润30min,在220℃下炒制35min,放冷,既得。
本发明所述的陈皮的炮制品的质量检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)混合对照品的制备
精密称取芸香柚皮苷对照品2.0mg和橙皮苷对照品2.0mg,用甲醇定容于10ml容量瓶中,混匀,得到浓度为0.20mg·mL-1的芸香柚皮苷和浓度为0.20mg·mL-1的橙皮苷混合对照品溶液;
(2)陈皮供试品的制备
称取炮制后的陈皮药材100g,打粉,过3号筛,精密称取2.00g粉末于50ml锥形瓶中,加入甲醇40ml,室温下,200W,40KHz的超声仪中超声提取30min,过滤,精密移取1ml续滤液于10ml容量瓶中,加上述甲醇定容,摇匀,注射器吸取1.5ml,0.45μm微孔滤膜滤过,贮于液相小瓶,为供试品,备用;
(3)标准曲线的制备
取步骤(1)混合对照品溶液依次稀释成浓度为0.02mg/ml、0.04mg/ml、0.08mg/ml、0.16mg/ml、0.2mg/ml的芸香柚皮苷和橙皮苷的系列混合对照品溶液,然后分别取10μL,注入高效液相色谱仪进行分析,以峰面积为纵坐标,以浓度为横坐标,绘制芸香柚皮苷和橙皮苷的标准曲线;
(4)含量测定
取步骤(2)陈皮供试品溶液10μL,注入高效液相色谱仪进行分析,根据芸香柚皮苷和橙皮苷的保留时间,将芸香柚皮苷和橙皮苷的峰面积代入步骤(3)制得的线性回归方程,计算供试品溶液中芸香柚皮苷和橙皮苷的含量。
作为优选方案,以上所述的陈皮的炮制品的质量检测方法,步骤(3)和步骤(4)的高效液相色谱仪的色谱条件为:
色谱柱为YMC-Pack ODS-A,规格为250×4.6mmL.D.S-5μm,12nm;流动相为0.1%甲酸水为A相,乙腈为B相,梯度洗脱,在285nm波长下检测芸香柚皮苷及橙皮苷;流速:0.8ml/min;柱温:30℃;进样量:10μL。
作为优选方案,以上所述的苓桂术甘汤的质量检测方法,梯度洗脱条件为0-20min,25%B;20-28min,25%-100%B;28-38min,100%-5%B;38-58min,5%-25%B;58-63min,25%-25%B。
作为优选方案,以上所述的苓桂术甘汤的质量检测方法,步骤(3)制得的芸香柚皮苷的标准曲线为Y=8585.9X+88933,R2=0.9995;橙皮苷的标准曲线为Y=9542.8X+37798,R2=0.9992。
一、炮制工艺的筛选实验:
1.1材料
1.1.1仪器
HPLC高效液相色谱仪(型号规格:IC-20AD;制造商:Shimadzu;仪器编号:QC-04);十万分之一精度电子分析天平(产品型号:FA1004N型;制造商:Sedoris);万分之一精度天平(制造商:Sedoris),数控超声波清洗器(产品型号:KQ5200DE;制造商:昆山市超声仪器有限公司);500g密封摇摆式粉碎机(产品型号:XL-10B;制造商:广州市旭朗机械设备有限公司);炒锅(产品型号:CKN7630J 30CM;制造商:浙江炊大王炊具有限公司);铲子为购买炒锅时赠送,厂家相同;移液器(产品型号:YE187AL1168351;制造商:大龙星创实验仪器(北京)有限公司)。
1.1.2药材
陈皮药材取于南京海源中药饮片有限公司,批号181006,产地浙江,收录日期为2018年10月18日,按《中国药典》2015年版第一部及第四部标准检验,结果符合规定。
1.1.3试药
芸香柚皮苷对照品(纯度≥98%;制造商:成都瑞芬思生物科技有限公司);橙皮苷对照品(纯度≥98%;制造商:南京森贝伽生物科技有限公司;批号:CAS:520-26-3,Lot:161231);试验用纯水为南京海昌中药集团有限公司制剂车间所制备的纯化水;乙腈为色谱纯;甲酸等其余试剂均为分析纯;陈醋(总酸≥4.00g/100ml;产地:山西太原;制造商:山西水塔醋业股份有限公司);蜂蜜(生产批号:GB 14963;产地:山东菏泽;制造商:山东省归农养蜂股份有限公司);麦麸(产地:浙江金华;购于晨曦饲料二部);灶心土(产地:河北保定;购于康德瑞琪旗舰店);花雕酒(酒精度:≥12%vol;产地:浙江绍兴;制造商:浙江古越龙山绍兴股份有限公司)。
1.2.炮制方法
1.2.1醋制陈皮
称取陈皮药材100g,加入陈醋337.5ml,拌匀,稍闷润30min后转移至炒锅内,用文火(240℃)炒制30min,取出摊放,并筛去碎屑。
1.2.2麸炒陈皮
称取陈皮药材100g,麦麸10g,将锅加热至70℃左右后撒入麦麸,见麦麸冒烟时,迅速将陈皮倾入锅中,后以中火(120-150℃)将陈皮和麦麸快速地拌炒均匀,至将陈皮表面炒成棕黄色时即可,取出摊放,筛去麦麸以及碎屑。
1.2.3蜜制陈皮
(1)配置辅料称取生蜜40g,炼蜜20g,花雕酒10g,水20g,生蜜、酒和水混合备用。
(2)辅料浸润称取陈皮100g至闷润容器中,加入上述混合辅料拌匀、浸润;闷润至混合辅料被吸收殆尽。
(3)炙炒将闷润后的陈皮转移到炒锅内,以文火炒至手按觉硬度为宜,约八分干时,将炼蜜倒至陈皮上进行拌炒,炒至陈皮表面呈蜜样光泽,触之不粘手,以握之成团,撒手即散为度,取出摊放,并筛去碎屑。
1.2.4土炒陈皮
称取陈皮药材100g,灶心土30g,在加热至100℃左右的热锅中均匀地撒入灶心土,不断转动炒锅,至其呈流化状态,此时锅温约220℃,将称好的100g陈皮倒入炒锅内,待陈皮表面被炒成焦黄色时,取出药材,放凉,筛去灶心土。
供试品溶液的制备
称取以上醋制陈皮、麸炒陈皮、蜜制陈皮和土炒陈皮药材各100g,打粉,过3号筛(50目),精密称取各炮制品2.00g粉末于50ml锥形瓶中,分别加入甲醇40ml,室温下超声提取30min(200W,40KHz),过滤,精密移取1ml续滤液于10ml容量瓶中,加上述甲醇定容,摇匀,注射器吸取1.5ml,0.45μm微孔滤膜滤过,贮于液相小瓶,制得醋制陈皮、麸炒陈皮、蜜制陈皮和土炒陈皮供试品溶液。
分别精密吸取以上个陈皮炮制品供试品溶液10μL,注入高效液相色谱仪进行分析,按以下标准曲线方程芸香柚皮苷Y=8585.9X+88933,R2=0.9995;橙皮苷的标准曲线为Y=9542.8X+37798,R2=0.9992,计算供试品溶液中芸香柚皮苷和橙皮苷的含量。
实验结果表明,四种炮制陈皮中芸香柚皮苷含量多少依次为麸炒陈皮>蜜制陈皮>醋制陈皮>土炒陈皮;橙皮苷含量多少依次为麸炒陈皮>土炒陈皮>蜜制陈皮>醋制陈皮;说明炮制对陈皮中黄酮类有效成分的含量具有明显的影响;四种炮制陈皮中芸香柚皮苷含量0.68%~2.44%,橙皮苷含量4.48%~10.67%;其中,麸炒陈皮中的芸香柚皮苷含量为最高,为2.42%;麸炒陈皮和土炒陈皮的橙皮苷含量均较高,其平均含量分别在10.57%和9.58%。含量结果如表1和图1和图2。表明麸炒陈皮炮制工艺所得的有效成分含量最高,因此,本发明优选麸炒陈皮为炮制工艺。
表1含量测定结果(n=3)
有益效果:
1、本发明通过大量对比实验筛选不同的炮制工艺,筛选出陈皮最佳的炮制方法。
2、另外本发明通过大量实验筛选出陈皮炮制品的质量检测方法,特别是通过大量实验筛选出最佳的流动相组成、流速、检测波长、色谱柱、柱温等分析条件,经方法学验证表明,本发明提供的陈皮的质量检测方法,具有方法简便、稳定性好、精密度高、重现性好等优点。
3、本发明提供的陈皮炮制品的质量检测方法可以较全面、客观、准确的检测和评价陈皮的质量,为保证其临床疗效具有重要意义。
附图说明
图1为4种炮制陈皮样品中芸香柚皮苷的百分含量柱状图。
图2为4种炮制陈皮样品中橙皮苷的百分含量柱状图。
图3为本发明的陈皮的HPLC色谱图。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述,实施例中未注明具体条件者,按照常规条件或制造商建议的条件进行。所述试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1
1、一种陈皮的炮制方法,其包括以下步骤:
取陈皮原药材100g,加入黄酒150ml,闷润30min,在220℃下炒制35min,放冷,既得。
实施例2
1、一种陈皮的炮制方法,其特征在于,包括以下步骤:
称取陈皮药材100g,麦麸10g,将锅加热至70℃后撒入麦麸,见麦麸冒烟时,迅速将陈皮倾入锅中,后以120-150℃中火将陈皮和麦麸快速地拌炒均匀,至将陈皮表面炒成棕黄色时即可,取出摊放,筛去麦麸以及碎屑,制得麦麸炒陈皮。
2、一种陈皮的炮制品的质量检测方法,其包括以下步骤:
(1)混合对照品的制备
精密称取芸香柚皮苷对照品2.0mg和橙皮苷对照品2.0mg,用甲醇定容于10ml容量瓶中,混匀,得到浓度为0.20mg·mL-1的芸香柚皮苷和浓度为0.20mg·mL-1的橙皮苷混合对照品溶液;
(2)陈皮供试品的制备
称取上述1中的麦麸炒陈皮药材100g,打粉,过3号筛,精密称取2.00g粉末于50ml锥形瓶中,加入甲醇40ml,室温下,200W,40KHz的超声仪中超声提取30min,过滤,精密移取1ml续滤液于10ml容量瓶中,加上述甲醇定容,摇匀,注射器吸取1.5ml,0.45μm微孔滤膜滤过,贮于液相小瓶,为供试品,备用;
(3)标准曲线的制备
取步骤(1)混合对照品溶液依次稀释成浓度为0.02mg/ml、0.04mg/ml、0.08mg/ml、0.16mg/ml、0.2mg/ml的芸香柚皮苷和橙皮苷的系列混合对照品溶液,然后分别取10μL,注入高效液相色谱仪进行分析,以峰面积为纵坐标,以浓度为横坐标,绘制芸香柚皮苷的标准曲线为Y=8585.9X+88933,R2=0.9995;橙皮苷的标准曲线为Y=9542.8X+37798,R2=0.9992;
(4)含量测定
取步骤(2)陈皮供试品溶液10μL,注入高效液相色谱仪进行分析,如图3,根据芸香柚皮苷和橙皮苷的保留时间,将芸香柚皮苷和橙皮苷的峰面积代入步骤(3)制得的线性回归方程,计算供试品溶液中芸香柚皮苷和橙皮苷的百分含量分别为2.43%和10.59%。
步骤(3)和步骤(4)的高效液相色谱仪的色谱条件为:
色谱柱为YMC-Pack ODS-A,规格为250×4.6mmL.D.S-5μm,12nm;流动相为0.1%甲酸水为A相,乙腈为B相,梯度洗脱(0-20min,25%B;20-28min,25%-100%B;28-38min,100%-5%B;38-58min,5%-25%B;58-63min,25%-25%B),在285nm波长下检测芸香柚皮苷及橙皮苷;流速:0.8ml/min;柱温:30℃;进样量:10μL。
实施例3方法学考察
1、精密度考察
取实施例1制备得陈皮供试品溶液,连续进样6次,按实施例2的色谱条件进行测定其峰面积。结果表明芸香柚皮苷平均峰面积为744428.5,峰面积RSD为1.16%;橙皮苷平均峰面积为3439804,峰面积RSD为0.61%,表明仪器的精密度良好。
2、稳定性考察
精密吸取实施例2制备得陈皮供试品溶液,于0、2、4、6、8、12、24h分别进样一次,测定其峰面积,结果表明芸香柚皮苷峰面积的RSD为1.31%,橙皮苷峰面积的RSD为1.43%,表明供试品溶液在24h内稳定性比较好。
3、重复性考察
精密称取按实施例2方法制备得到的陈皮供试品溶液6份,注入高效液相色谱仪,按实施例2下色谱条件进行含量测定,结果表明芸香柚皮苷平均峰面积为788719.3,RSD为0.85%;橙皮苷平均峰面积为2177840,RSD为0.46%,表明该方法重复性良好。
4、加样回收考察
取实施例2陈皮炮制品药材粉末(过3号筛)约2.00g,精密称定12份,6份为一组分别精密加入芸香柚皮苷和橙皮苷对照品溶液10ml(芸香柚皮苷对照品和橙皮苷对照品溶液浓度分别为0.00125,0.03603mg·ml-1,溶剂为甲醇),按实施例2方法平行制备供试品溶液12份,测定其芸香柚皮苷和橙皮苷峰面积,计算加样回收率和RSD。结果显示,芸香柚皮苷和橙皮苷的平均加样回收率分别为99.14%和98.42%,RSD值分别为2.20%,2.21%,见下表2。
表2芸香柚皮苷和橙皮苷加样回收考察
以上实验结果表明,本发明提供的陈皮质量检测方法,稳定性好、精密度高、重复性好,能全面客观评价陈皮的质量,为保证临床疗效具有重要的意义。
以上实施例仅为本发明的示例性实施例,不用于限制本发明,本发明的保护范围由权利要求书限定。本发明技术人员可以在本发明的实质和保护范围内,对本发明做出各种修改或等同替换,这种修改或等同替换也应视为落在本发明的保护范围内。
Claims (6)
1.一种陈皮的炮制方法,其特征在于,包括以下步骤:
称取陈皮药材100g,麦麸10g,将锅加热至70℃左右后撒入麦麸,见麦麸冒烟时,迅速将陈皮倾入锅中,后以120-150℃中火将陈皮和麦麸快速地拌炒均匀,至将陈皮表面炒成棕黄色时即可,取出摊放,筛去麦麸以及碎屑。
2.根据权利要求1所述的陈皮的炮制方法,其特征在于,包括以下步骤:
取陈皮原药材100g,加入黄酒150ml,闷润30min,在220℃下炒制35min,放冷,既得。
3.权利要求1或2所述的陈皮的炮制品的质量检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)混合对照品的制备
精密称取芸香柚皮苷对照品2.0mg和橙皮苷对照品2.0mg,用甲醇定容于10ml容量瓶中,混匀,得到浓度为0.20mg·mL-1的芸香柚皮苷和浓度为0.20mg·mL-1的橙皮苷混合对照品溶液;
(2)陈皮供试品的制备
称取炮制后的陈皮药材100g,打粉,过3号筛,精密称取2.00g粉末于50ml锥形瓶中,加入甲醇40ml,室温下,200W,40KHz的超声仪中超声提取30min,过滤,精密移取1ml续滤液于10ml容量瓶中,加上述甲醇定容,摇匀,注射器吸取1.5ml,0.45μm微孔滤膜滤过,贮于液相小瓶,为供试品,备用;
(3)标准曲线的制备
取步骤(1)混合对照品溶液依次稀释成浓度为0.02mg/ml、0.04mg/ml、0.08mg/ml、0.16mg/ml、0.2mg/ml的芸香柚皮苷和橙皮苷的系列混合对照品溶液,然后分别取10μL,注入高效液相色谱仪进行分析,以峰面积为纵坐标,以浓度为横坐标,绘制芸香柚皮苷和橙皮苷的标准曲线;
(4)含量测定
取步骤(2)陈皮供试品溶液10μL,注入高效液相色谱仪进行分析,根据芸香柚皮苷和橙皮苷的保留时间,将芸香柚皮苷和橙皮苷的峰面积代入步骤(3)制得的线性回归方程,计算供试品溶液中芸香柚皮苷和橙皮苷的含量。
4.根据权利要求3所述的陈皮的炮制品的质量检测方法,其特征在于,步骤(3)和步骤(4)的高效液相色谱仪的色谱条件为:
色谱柱为YMC-Pack ODS-A,规格为250×4.6mmL.D.S-5μm,12nm;流动相为0.1%甲酸水为A相,乙腈为B相,梯度洗脱,在285nm波长下检测芸香柚皮苷及橙皮苷;流速:0.8ml/min;柱温:30℃;进样量:10μL。
5.根据权利要求4所述的苓桂术甘汤的质量检测方法,其特征在于,梯度洗脱条件为0-20min,25%B;20-28min,25%-100%B;28-38min,100%-5%B;38-58min,5%-25%B;58-63min,25%-25%B。
6.根据权利要求3所述的苓桂术甘汤的质量检测方法,其特征在于,步骤(3)制得的芸香柚皮苷的标准曲线为Y=8585.9X+88933,R2=0.9995;橙皮苷的标准曲线为Y=9542.8X+37798,R2=0.9992。
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN112618622A (zh) * | 2021-01-29 | 2021-04-09 | 吉林化工学院 | 一种具有抗氧化功能的陈皮饮片清炒炮制加工方法 |
CN112619723A (zh) * | 2020-12-16 | 2021-04-09 | 吉林大学珠海学院 | 一种用于陈皮药材检测的移液器 |
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2019
- 2019-07-23 CN CN201910664667.4A patent/CN110496161A/zh active Pending
Non-Patent Citations (4)
Title |
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