CN1104844C - 动物用口服组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及动物用的含有枯草芽孢杆菌Kubota的口服组合物。枯草芽孢杆菌Kubota的口服施用可以去除牲畜，家禽，鱼等等的粪便和尿的臭味，也可以抑制腹泻的出现。

Description

动物用口服组合物

发明技术领域

本发明涉及动物用口服组合物；具体地说，本发明涉及动物用的含有枯草芽孢杆菌Kubota的口服组合物。

现有技术

在猪圈，家禽场和各种牲口棚喂养期间，猪，家禽和其它家畜排出大量的粪便和尿，从中释放出强烈的有害的臭气，导致了严重的污染问题。

粪便和尿的有害的臭气不仅产生于牧场，而且也产生于各自家庭的宠物以及动物园和养鱼缸的动物，鱼和贝壳类。因此，去除这种臭气已经是急需的。

发明解决的问题

考虑到上述产业上的需求，本发明的一个目的是研制能够以简单的方式有效地去除各种各样的排泄物的臭气的新系统，所述排泄物不仅来自于家畜而且来自于宠物和其它动物，鸟类。

解决问题的方法

为了达到发明目的本发明人已经从各个角度进行了调查。注意力集中到目前的发展事态，即微生物例如酵母，弧菌和活化的淤泥被用作为处理污水的细菌，本发明人进一步对可有效地用于处理浮渣的细菌和除臭的细菌进行筛选。本发明人已经成功地从土壤中分离出细菌菌株，当用作为处理污水的细菌时可降解浮渣，并且具有显著的除臭效果。

经验证，由此获得的细菌菌株菌学特性属于枯草芽孢杆菌，但是它具有的有用的特性如降解浮渣和除臭功能是在其它常规的枯草芽孢杆菌菌株中没有观察到的。由此，已将所分离到的菌株称作为枯草芽孢杆菌的新菌株，称为枯草芽孢杆菌Kubota。

该细菌菌株已寄存于日本，国家生物科学和人技术研究院，工业科学和技术事务所，登记号为枯草芽孢杆菌Kubota FERM BP-5847。该寄存是于1997年3月3日从1987年10月8日保藏的国家保藏号FERMP-9643转移来的。

当将枯草芽孢杆菌Kubota(下文中有时称作为“细菌菌株”或“BSK细菌”)直接喷洒于粪便和尿上时能够有效地去除粪便和尿的臭味。出人意料的是，已经获得了非常有效的新发现，当将该细菌口服给药时，排泄出的粪便和尿没有有害的臭气。

因此，本发明人已经发现不仅在将BSK细菌直接应用到粪便和尿时具有去除粪便和尿的臭气的直接除臭效果，而且当将该BSK细菌口服给药时具有间接去除粪便和尿的臭气的除臭效果，并且已经进行了继续调查。这样就得出了本发明。

换句话说，本发明基本上是基于动物用的含有枯草芽孢杆菌Kubota的口服组合物的技术构思。

下面将对本发明进行详细描述。

发明的实施方案

在本发明中，将枯草芽孢杆菌Kubota(BSK细菌；FERM BP-5847)用作为除臭微生物。如上文中已经描述的，根据其菌学特性认为BSK细菌属于枯草芽孢杆菌，但是从特性上说该细菌具有良好的用途例如除臭作用。

菌学特性描述如下。

(a)形态学

1.细胞的形状和大小

短和小的芽孢杆菌(1.2-1.4×3.6-3.8μm)。

2.细胞的多态性

没有特定的多态性。细胞周围有细胞膜并且有核。还有芽孢，观察到隔膜。

3.存在或没有运动性

可运动。约十根鞭毛。

4.存在或没有芽孢

存在芽孢。

5.革兰氏染色

革兰氏阳性。用FAVOR-GSET(Nissui Pharmaceutical Co，Ltd.)染色呈蓝色。

6.抗酸特性用Ziehl-Neelsen染色呈红色。抗酸细菌。(b)在单个的培养基上的生长状态将悬浮于生理盐水中的细菌接种到肉汤琼脂平板培养基上，于37℃生长24小时，观察到生长良好。

菌落边缘是R类型，不是圆形。颜色呈不透明的灰白黄色。

在羊血琼脂培养，心浸液琼脂培养和胰胨-大豆-琼脂培养期间，菌落是R类型，呈不透明的灰白黄色，生长良好。在各种培养基上的生长状态如下；

普通琼脂培养基      ：(+)

羊血琼脂培养基      ：(+)

心浸液              ：(+)

胰胨-大豆           ：(+)

Sabouraud           ：(-)

盐蛋琼脂培养基      ：(-)

Drigalski           ：(-)

脑-心浸液培养基     ：(+)

(c)生理特性

[1]还原硝酸盐       ：(+)

[2]VP试验           ：(+)

[3]产生吲哚         ：(-)

[4]产生硫化氢       ：(-)

[5]水解淀粉         ：(+)

[6]柠檬酸的利用     ：(+)

[7]染料的产生       ：水溶性

[8]脲酶             ：(-)

[9]氧化酶           ：(+)

[10]过氧化氢酶      ：(+)

[11]生长           酸性    微弱

               中性    良好

温度           37℃    良好

               30℃    良好

               25℃    良好

[15]在氧中行为             好氧

[16]O-F试验                F

[17]利用糖产生酸和气

                 酸     气

L-阿拉伯糖      (-)    (-)

D-木糖          (-)    (-)

D-葡萄糖        (+)    (-)

D-果糖          (+)    (-)

麦芽糖          (+)    (-)

蔗糖            (-)    (-)

乳酸            (-)    (-)

海藻糖          (±)   (-)

D-山梨醇        (-)    (-)

D-甘露醇        (-)    (-)

肌醇            (-)    (-)

淀粉            (-)    (-)

(d)其它特性

七叶苷分解         (+)

纤维素             (+)

丙二酸的利用       (+)

精氨酸分解         (-)

赖氨酸脱羧基作用   (+)

鸟氨酸脱羧基作用   (-)

苯丙氨酸脱氨基作用 (-)

溶血特性           β-型溶血作用

营养缺陷型         (+)

β-半乳糖苷酶      (-)

本发明分离的枯草芽孢杆菌Kubota新菌株在任何普通营养培养基中生长良好。特别是家禽粪便的提取液，家畜粪便提取液等等可作用极好的培养液。

在用或不用培养箱于20-40℃，优选的是30-38℃培养10-24小时，菌株显示生长良好。

由于培养物本身含有大量的细胞，因此可利用获得的培养物本身。

另外，通过离心等步骤可从培养物中分离细胞，然后将细胞彻底清洗，并且和培养的细胞一样使用它们；所述细胞可以膏状形式使用，如上述情况的湿饼状物或者将细胞进一步冷冻干燥；另一种可选的方法，将细胞稀释并制备成悬浮液，可使用这样的经过处理的产品形式。不用说，同样也可利用所述培养物的经过处理的产品。

可使用口服组合物形式的BSK细菌(包括培养物和其经过处理的产品)本身；另外，在向细胞加入淀粉，云母和其它成份并且混合之后，可将细胞配制成动物用药剂。作为药剂，可适当地选择粉剂，颗粒剂，片剂，液体，膏剂和其它形式。

可将本发明的口服组合物配制成饲料形式，并且在这种情况下，当然可将BSK细菌的细胞加入到饲料中；还有，将细胞初步制备成预混合物形式，其也可使用；或者可将配制成上述药剂形式的细胞加入到饲料中。

也就是说，本发明的口服组合物可以以药剂形式或饲料形式使用；可将BSK细菌细胞(如果需要，在预混合或配制之后)直接口服给药或以饲料添加剂形式加入到饲料或饮用水中并且混合，接着被摄入。对于饮用水，可将BSK细菌的细胞直接加入到饮用水并且混合，另外，将BSK细菌细胞包装于水可渗透性的袋中，将其悬挂于饮用水塔中。此外，可将BSK细菌细胞与饲料或宠物食品或饮料食品混合，制备成最后的食料。食料中微生物的量取决于受体动物的种类，年龄等等，但是作为试验性的标准，符合要求的是，对于体重70公斤的猪，每天应该在喂食的水中随意加入10⁷个细胞的BSK细菌。

在对鼠进行的口服施用试验中，用于本发明的口服组合物中的BSK细菌的LD₅₀几乎是无穷大；在将其包裹于鼠的皮肤上进行的检测试验中，没有观察到变化。因此，没有安全性问题。使用BSK细菌是安全的，在高于前面描述的剂量的其它微生物剂量使用时对动物没有任何不利的影响。

再者，在由国家健康和福利部授权的审查机构，东京食品卫生协会，食品研究院，已经对BSK细菌的安全性进行了检测。根据检测结果，证实了该细菌的安全性。

正如以上已经描述的，本发明的组合物有重要的特性，即除了将其直接应用于粪便和尿时具有除臭作用外，从某种意义上，以该组合物口服给药时间接地去除粪便的臭气。

因此，将该组合物简单地加入到各种各样的饲料，其它的食料或饮用水等等，或单纯供给该组合物作为饲料，宠物食料，饮料等等可以去除粪便和尿的臭味。因此可以省去费力的工作，节约精力和财力；特别是可以减少处理环境中的有害臭气而付出的劳力，这不仅有利于牛场的工人，而且有利于牛场附近的居民，因为它们可以不受有害臭气的影响。因此就控制环境污染而言本发明是非常优异的。

此外根据本发明，可以以简单的方式，去除家庭宠物和宠物商店，动物园和养鱼缸中动物以及宠物旅馆和兽医诊所的动物产生的粪便和尿的臭味，因此可以去除上述环境的有害臭气；即使将粪便和尿单独滞留，有害臭气的产生也得到抑制。基于这一点，本发明是非常优异的。

此外，如果将本发明的组合物本身加入到或与食料一起加入到水塔或鱼塘，可以抑制水中产生有害的臭气。因此，本发明尤其适用于清洁养鱼缸，鱼塘和池塘中的水，以及饲养热带鱼的水塔和其它家庭的宠物和宠物商店中的水，并且可用于抑制有害臭气和鱼气味的产生。

此外，本发明的组合物对治愈肠内失调具有良好的作用，当口服给药时，该组合物可明显地抑制腹泻的出现。特别是，猪是容易腹泻的动物，所以如果在年幼的猪中抑制腹泻的发作，它们能够良好地生长，导致各发育情况改善。另外，鸡和其它动物能够急剧地提高肉和蛋的产生。从这些方面讲，本发明也是非常优异的。

下文中描述了本发明的实施例。

                        实施例1

淀粉           10克

肉浸提液       3克

蛋白胨         10克

氯化钠         5克

水             1000毫升[pH7.0]

将上述组分的培养基置于500毫升的培养瓶中，向其中接种枯草芽孢杆菌Kubota FERM BP-5847，于37℃静止培养20小时。

将得到的培养液离心收集细胞，然后将其与300克的淀粉混合。将得到的混合物定义为微生物制剂。

                          实施例2

给在猪场喂养的生长期的50头年幼的猪供给商业途径获得的适于生长的饲料。将实施例1中收集到的BSK菌株的细胞加入到饮用水中，每天加入10⁵个细胞，由此获得的水立即用于喂养。

一个月以后，测定猪棚中臭气和氨的浓度。利用三点比较方法[大城市环境污染控制颁布令238号公告]测定臭气的浓度，而氨浓度的检测采用氨检测器进行。

结果，臭气的浓度从供给组合物之前的117降低到供给后的74[一个月后]，这意味着臭气降低和去除了37％之多。另一种可选的方法，氨浓度从供给组合物之前的2.3降低到供给后的1.0[一个月后]，这意味着臭气降低和去除了57％之多。在此生长期间，八头年幼猪发生腹泻，但是一个月后，没有观察到发生腹泻的年幼猪。

                          实施例3

将20头奶牛场的奶牛划分为两组，每组十头，然后将作为粗饲料的绿色燕麦与商业上获得的饲料混合。随后，得到的饲料进一步与实施例1中制备的微生物制剂混合；加入的微生物制剂的量为0.1％。将得到的混合物在一个星期内喂养给一个检测组的十头奶牛。相反，给对照组的十头奶牛喂养没有加入微生物制剂的饲料。

一个星期后，在检测组的奶牛场牛舍中没有观察到特别的有害臭气，并且甚至在其中滞留粪便和尿的奶牛场牛舍中牛奶的产生没有受到干扰。相反，在整个星期内，在对照组的奶牛场牛舍中充满了难于忍受的气味。但是对于检测组，在紧接着的一天，停止供给微生物饲料也不产生有害的气味。

                          实施例4

通过将实施例1中制备的含有淀粉的细胞的冷冻干燥产物以0.2％的浓度加入到商品金鱼饲料中而制备一种饲料，将该饲料用于喂养商品园金鱼缸中的金鱼。

尽管一个月没有变换水或者没有清洁金鱼缸，金鱼缸中的水是清洁的，没有产生有害的臭气例如鱼味。

发明效果

通过以BSK细菌口服给药可以去除各种各样的动物包括鱼的有害气味，因此，本发明的组合物可广泛地应用到家庭和牛场、鱼繁殖场的鱼，牛和家禽，而且可应用到宠物，试验动物和动物园和养鱼缸的动物。因此，该组合物可用于控制当今存在的严重的有害气味的污染，以便可在城市的郊区建立牲畜工业，并且也可用于城市的郊区的牲口棚。因此，该组合物对牲畜的繁殖业具有巨大的贡献。

根据条款13-2的规定寄存的微生物的参考资料

1.枯草芽孢杆菌Kubota

a.寄存该微生物的保藏机构的名称和地址；

名称：国际贸易和工业部，工业科学和技术机构，国家生物科学和人技术研究院。

地址：1-3，Higashi 1 chome，Tsukuba-shi，Ibaraki-ken，305，Japan

b在该保藏机构[a]的寄存日期

1987年10月8日

c.由该保藏机构[a]授予的保藏编号

FERM  BP-5847

Claims (4)

1.一种含有枯草芽孢杆菌Kubota，FERM BP-5847的动物用口服组合物在减弱动物粪和尿的恶臭中的应用，所述芽孢杆菌具有下列菌学特性：

(a)形态学

1.细胞的形状和大小

短和小的芽孢杆菌(1.2-1.4×3.6-3.8μm)；

2.细胞的多态性

没有特定的多态性；细胞周围有细胞膜并且有核；还有芽孢，特征地观察到隔膜；

3.存在或没有运动性

可运动；约十根鞭毛；

4.存在或没有芽孢

存在芽孢；

5.革兰氏染色

革兰氏阳性；用FAVOR-GSET(Nissui Pharmaceut cal Co.，Ltd.)染色呈蓝色；

6.抗酸特性

用Ziehl-Neelsen染色呈红色；抗酸细菌；

(b)在单个的培养基上的生长状态

将悬浮于生理盐水中的细菌接种到肉汤琼脂平板培养基上，于37℃生长24小时，观察到生长良好；

菌落边缘是R类型，不是圆形；颜色呈不透明的灰白黄色；

在羊血琼脂培养，心浸液琼脂培养和胰胨-大豆-琼脂培养期间，菌落是R类型，呈不透明的灰白黄色，生长良好；在各种培养基上的生长状态如下：

普通琼脂培养基    ：(+)

羊血琼脂培养基    ：(+)

心浸液           ：(+)

胰胨-大豆(Nissui Pharmaceutical Co.，Ltd.)    ：(+)

Sabouraud        ：(-)

盐蛋琼脂培养基    ：(-)

Drigalski         ：(-)

脑-心浸液培养基    ：(+)

(c)生理特性

[1]还原硝酸盐      ：(+)

[2]VP试验          ：(+)

[3]产生吲哚        ：(-)

[4]产生硫化氢      ：(-)

[5]水解淀粉        ：(+)

[6]柠檬酸的利用    ：(+)

[7]染料的产生      ：水溶性

[8]脲酶           ：(-)

[9]氧化酶         ：(+)

[10]过氧化氢酶    ：(+)

[11]生长    酸性    微弱

            中性    良好

    温度    37℃    良好

            30℃    良好

            25℃    良好

[15]在氧中行为      好氧

[16]O-F试验         F

[17]利用糖产生酸和气

                  酸      气

L-阿拉伯糖        (-)    (-)

D-木糖            (-)    (-)

D-葡萄糖          (+)    (-)

D-果糖            (+)    (-)

麦芽糖            (+)    (-)

蔗糖              (-)    (-)

乳酸              (-)    (-)

海藻糖            (±)   (-)

D-山梨醇          (-)    (-)

D-甘露醇          (-)    (-)

肌醇             (-)    (-)

淀粉             (-)    (-)

(d)其它特性

七叶苷分解          (+)

纤维素              (+)

丙二酸的利用        (+)

精氨酸分解          (-)

赖氨酸脱羧基作用    (+)

鸟氨酸脱羧基作用    (-)

苯丙氨酸脱氨基作用  (-)

溶血特性            β-型溶血作用

营养缺陷型          (+)

β-半乳糖苷酶       (-)

2.权利要求1中描述的组合物在治愈肠内失调的应用。

3.根据权利要求1或2所述的应用，其中枯草芽孢杆菌Kubota，FERM BP-5847，选自如下形式：分离到的细胞，一种含有所述细胞的培养物和/或其经过处理的产品。

4.根据权利要求1-3中任一权项所述的应用，其中该组合物是动物用的饲料型和/或药剂型组合物。