CN1780557A - 通过地衣芽孢杆菌来提高水产动物健康和/或营养状况 - Google Patents

通过地衣芽孢杆菌来提高水产动物健康和/或营养状况 Download PDF

Info

Publication number
CN1780557A
CN1780557A CNA2004800114933A CN200480011493A CN1780557A CN 1780557 A CN1780557 A CN 1780557A CN A2004800114933 A CNA2004800114933 A CN A2004800114933A CN 200480011493 A CN200480011493 A CN 200480011493A CN 1780557 A CN1780557 A CN 1780557A
Authority
CN
China
Prior art keywords
aquatic
feed
bacillus
aquatic livestock
livestock
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CNA2004800114933A
Other languages
English (en)
Inventor
彼得·苏尔－杰森
迈瑞特·默克简森
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
HANSENS LAB
Original Assignee
HANSENS LAB
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by HANSENS LAB filed Critical HANSENS LAB
Publication of CN1780557A publication Critical patent/CN1780557A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/742—Spore-forming bacteria, e.g. Bacillus coagulans, Bacillus subtilis, clostridium or Lactobacillus sporogenes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K10/00—Animal feeding-stuffs
    • A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
    • A23K10/16—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
    • A23K10/18—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions of live microorganisms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
    • A23K50/80—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for aquatic animals, e.g. fish, crustaceans or molluscs

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Insects & Arthropods (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Marine Sciences & Fisheries (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Fodder In General (AREA)
  • Feed For Specific Animals (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

一种包括有益生的地衣芽孢杆菌的水产动物饲料，以及将该饲料用于水产动物喂养从而提高水产动物对环境如病原微生物影响的抵抗力。

Description

通过地衣芽孢杆菌来提高水产动物健康和/或营养状况
技术领域
本发明涉及一种包括有益生地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformisspores)的水产动物饲料，以及将该饲料用于水产动物喂养从而提高水产动物对环境如病原微生物影响的抵抗力的用途。
背景技术
水产业业已成为一个快速发展的食品生产部门，同时人们越来越关注将传统家畜喂养中的已知方法用于水产业中以便控制疾病促进生长。然而，直接的环境变化对水生动物健康状态的影响比陆地动物要大。因此周围环境中有害生物所引起的疾病爆发被认为是水产养殖业中的最大限制，影响到许多国家水产业的发展。
笼养的水生动物易受周围环境的不利影响。有害的致病微生物可能会在被保护的水产环境中繁殖增生并给水栖动物造成实质性的问题。即使该微生物不是病原体，但如果其大量存在也会给水产养殖带来潜在的问题。
现在人们更多地关注于如何应用并测试陆生动物饲养中所用的方法以控制水产环境中病原体的存在。这些方法包括在环境中加入抗菌剂如抗生素。然而，这些常规的方法的作用有限。除了不太成功之外，人们也越来越关注抗菌剂的使用，在抗生素的使用上有一个世界范围的条约限制。
正如所料，上述方法的开发要考虑疾病的控制，这不同于常规的方法。其中的一种方法包括“益生素”的使用，这些益生素作为拮抗菌菌株例如通过竞争排斥来控制潜在病原体。该技术已用于陆生动物的饲养，并且市场上现已能够买到拮抗产品。口服这些产品能够提高肠胃感染的抵抗力并增强动物的一般免疫力。
当前水产业的现有技术表明现已对许多菌种进行了测试以便对水产环境进行控制。在水产业内，现有文献表明所选的菌种会侵占到水环境中，这包括淡水和咸水中动物的外粘层。细菌侵占的结果是有害微生物被排斥，同时其它的自然生物过程有助于将有机废物分解为二氧化碳和水。值得注意的是，人们还发现采用益生素有助于缓减例如转移压力带来的不利影响，这种压力通常会伴随着某种水产品从一个环境到另一个环境转移而产生。转移压力的特点是水产品的粘膜层会失去天然的保护菌群。显然，曝露于大量的益生菌表明健康菌的恢复。益生菌会通过竞争排斥方式来与水产环境内原有的许多种病原体如气单胞菌(Aeromonas)和弧菌(Vibrio)竞争，因此由该病原菌所引起的疾病的频率大大降低。
WO02/00035公开了一种控制水产动物中细菌病的生物活性食品复合物。该食品复合物被称为一种乳剂，其至少包括有一种益生菌、以及一种抑制剂或调节剂，其中的益生菌用来抗菌。至少的一种抑制剂或调节剂是呋喃酮，其包括一个一般抑制微生物侵占表面的化合基。由于益生菌通常被称为杆菌，因此如果没有提到特别优选的杆菌系，那么后面的实施例就是益生菌。
日本专利文献JP2000217567A描述了一种获得高浓度杆菌孢子的方法，其要求保护这种杆菌孢子在鱼饲料中的使用。其说明书提到任何杆菌均可使用，示例中列出的是短小芽孢杆菌(Bacillus Pumilus)、迟缓芽孢杆菌(Bacillus lentus)，侧胞芽胞杆菌(Bacillus laterosporus)，蜂房芽胞杆菌(Bacillus alvei)。所有示例的结果都证明上述方法提高了孢子的形成。但是在用作鱼的饲料时，则没有提供具体的使用数据。
日本专利文献JP2000103740A描述了一种用于鱼和贝类的药物，其含有代谢产品和废物如苏云金芽孢杆菌和短小芽孢杆菌混合培养产生的缩氨酸作为活性成分。根据该特例可得出混合培养能够提高所培养鱼的免疫力及抗感染力。
专利文献EP287699B1(日本的Calpis)公开的是Bacillus subtilis C-3102在给鱼喂食时具有提高重量以及喂食效率的作用。例5表明的是虹鳟鱼的增重效果。
专利文献JP62138148A公开了一种水产动物的饲料填加剂，其含有用作活性成分的蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)的微生物细胞及其孢子。据说其能加快鱼的生长并能防止细菌病，同时不会污染鱼塘，产生抗药菌等。
专利文献RU2186576公开了一种治疗并预防鱼疾病的方法，其包括给鱼喂食一种含有益生剂的药物饲料，其特征是用作益生剂的是孢子形式的Bacillus subtilisVKPM V-4759，每一吨饲料使用五天以上。
丹麦的Chr.Hansen A/S向市场推出一种商标名为BioPlusTM 2B的产品。包括地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)和枯草芽孢杆菌孢子(Bacillus subtilis spores)的混合物。各种试验均证明加入BioPlus2B对仔猪、母猪、肥猪、肥鸡、肥火鸡以及牛犊的日均增重、饲料消耗、饲料转换和/或死亡率都有好的作用。
对鱼来说，还没有公开或提到BioPlus2B作用的报道。当前，BioPlus2B对上述温血动物的作用机理还不十分清楚，本领域技术人员都清楚鱼有许多方面与上述恒温动物是不同的。
发明内容
本发明所解决的问题是提供一种水产动物(如鱼)的饲料，其能大大提高水产动物(如鱼)对病原性微生物的抵抗力。
技术方案基于本发明人意识到富含益生的地衣芽孢杆菌的鱼饲料能大大提高水产养殖的鱼对病原性微生物的抵抗力。这里的一个示例证明的是富含BioPlus2B(其包括地衣芽孢杆菌)的鱼饲料。其表明在将水产养殖的鱼曝露于鲁氏耶尔森菌时，这种富含地衣杆菌的鱼饲料能大大提高水产养鱼的存活率。鲁氏耶尔森菌是一种病原性微生物，其能引起消化道的红嘴病。
因此，本发明第一个方面涉及一种水产动物饲料，其包括有益生地衣芽孢杆菌。
如上所述，这种饲料非常适用作水产动物的饲料。
本发明的第二个方面涉及水产动物的养殖，其中水产动物与一种包括益生地衣芽孢杆菌的水产动物饲料接触。
本发明的第三个方面涉及一种喂养水产动物的方法，其包括给水产动物喂养一种包括益生地衣芽孢杆菌的水产动物饲料。
不限于该原理，可以相信这种益生地衣芽孢杆菌能够大大提高水产动物体内对病原性微生物如鲁氏耶尔森菌的抗体数量。抗体数量的增加使水产动物对这些病原性微生物具有更高的抵抗力。这里的实施例将给出更详细的说明。我们相信这里第一次表明益生生物通过提高免疫力而不是竞争排斥来获得良好的结果。
包括有地衣芽孢杆菌的饲料的另一个优点是能够加快水产动物长重和长长。这里的实施例将给出更详细的说明。
定义
在讨论本发明的优选实施例前，先对本发明一些主要方面涉及的特定术语进行定义。
术语“水产养殖”根据现有技术应理解为水产动物的水产养殖，其中的动物养在物理定义的空间如笼子中。
术语“益生素”是现有技术的一个术语，其涉及一个微生物，该微生物在与水产动物接触时有利于动物的健康。
术语“地衣孢芽杆菌”是一个公知公用的一种杆菌菌种的术语。详细内容可参见标准参考书Bergeys Manual of Systematic Bacteriology。根据本领域技术人员的普通知识，其能确定相关的杆菌是否是地衣芽孢杆菌。
下面仅以示例的形式来描述本发明的实施例。
具体实施方式
水产动物的饲料
水产动物的饲料应包括合适的水产动物饲料的营养成分。本领域技术人员都清楚对于特定的水产动物来说选择合适的饲料。这里，这种合适的水产动物饲料的营养成分确实为水产动物饲料的营养成分。
这些营养成分优选在浓度上进行调节以适应动物的饮食需要，其可包括下面这些营养成分，如大约0-95％重量的动物蛋白；大约0-95％重量的植物蛋白；大约0-25％重量的禽蛋。
此外，水产动物的饲料还可包括其它的合适成分如Ergosan(藻基的免疫调节剂)，抗生素如0.01-50重量％的沙雷(Sarafin)、罗美(Romet)、土霉素(Terramycin)，大约40-60mg/kg的维生素B12，大约5-20mg/kg的D-生物素，大约250-350mg/kg的D泛酸；大约10-30mg/kg的叶酸，大约1000-4000mg/kg的L-维C-2-多磷酸盐(STAY-C，维C的稳定形态)，大约3000-4000mg/kg的肌肉—纤维醇；大约600-800mg/kg的烟酸，大约350-450mg/kg的p-氨酸—苯甲酸，大约40-60mg/kg的维生素B6的氢氯化物，大约125-175mg/kg的核黄素，大约50-80mg/kg的维生素，大约6500-7500mg/kg的维生素B的氯化物。
水产动物饲料可以是任何合适的形态，如粉态或球状或片状。
水产动物饲料可以是例如两种不同的组合物，其中一种包括合适的水产动物饲料营养成分，另一种包括这里所述的地衣芽孢杆菌。此时，水产动物饲料就由这两种组合物构成，并说明两者是同时还是先后喂食给水产动物。换句话说，在给水产动物喂食合适的水产动物饲料营养成分的同时，还需喂给上述的地衣芽孢杆菌。
作为选择，水产动物饲料可采用组合物的形式，该组合物包括合适的水产动物饲料营养成分以及这里所述的地衣芽孢杆菌。其可采用合适的形态，如粉态或球状或片状。
为了提高益生菌的稳定性，最好给水产动物提供稳定的包油固体乳剂，其包括可溶于油脂的生物活性物质如溶于均质的脂肪中的抑制性呋喃酮，同时干饲料成分和相关益生菌分散到稳定的乳剂中。详细内容例如参见WO02/00035。
此外，水产动物饲料可采用胶囊的形式，如微胶囊。
益生地衣芽孢杆菌
益生地衣芽孢杆菌可以是任何一种益生的地衣芽孢杆菌。根据这里所公开的内容，本领域技术人员均能选择一种具体的地衣芽孢杆菌。
丹麦Chr.Hansen A/S的BioPlusTM 2B产品包括地衣芽孢杆菌DSM5749菌株。如这里示例所示的那样，地衣芽孢杆菌DSM5749菌株在本文中是一种非常合适并优选的地衣芽孢杆菌菌株。该地衣芽孢杆菌DSM5749菌株在这里也被称为CH200。
除了益生地衣芽孢杆菌之外，该水产动物饲料可包括其它合适的微生物。作为优选，其也是益生微生物。作为优选，该益生的微生物是Gram负作用菌，更为优选的是Gram正作用菌。优选的Gram正作用菌选自于下列这组菌种：格氏菌(Lactococcus spp.)、乳酸菌(Lactobacillus spp.)、明串珠菌(Leuconostoe spp.)、酒球菌(Oenococcus spp.)、链球菌(Streptococcus spp.)、更为优选的是杆状菌(Bacillus spp.)。
其它优选的益生地衣芽孢杆菌是一种杆状菌，其包括但不限于：枯草杆菌(Bacillus subtills)、侧胞芽胞杆菌(Bacillus laterosporus)、产氮芽孢杆菌(B.azotoformans)、环状芽胞杆菌(B.circulans)、短小芽孢杆菌(B.pumilus)、豆形杆菌(B.lentus)、蜂房芽胞杆菌(B.alvei)、苏力菌(B.thuringiensis)、蜡样芽孢杆菌(B.cereus)和坚强芽孢杆菌(B.firmus)。
其它最为优选的益生杆菌是枯草杆菌。如这里的示例所示，地衣芽孢杆菌和枯草杆菌的混合物在本文中极为合适。这两种杆菌菌种具有不同的生化特性，其能产生协同的效果。
丹麦的Chr.Hansen A/S的BioPlusTM 2B产品包括估草杆菌DSM5749菌株。如这里示例所示的那样，枯草杆菌DSM5749菌株在本文中是一种非常合适并优选的枯草杆菌菌株。该枯草杆菌DSM5749菌株在这里也被称为CH201。
因此，在一优选实施例中，该水产动物饲料包括益生地衣芽孢杆菌和益生枯草杆菌的混合物。
作为优选，该水产动物饲料包括浓度至少为10 E6 CFU/g饲料的地衣芽孢杆菌，其更为优选的浓度是至少为10 E7 CFU/g饲料，再为优选的浓度是至少为10 E8 CFU/g饲料。通常来讲，该水产动物饲料包括浓度小于为10 E14 CFU/g饲料的益生地衣芽孢杆菌。
当水产动物饲料包括益生地衣芽孢杆菌和另外的一种或多种益生微生物(如枯草杆菌)的混合物时，根据该益生微生物的总量，优选有5到95％的益生地衣芽孢杆菌以及5到95％的其它益生微生物。本领域技术人员都清楚其总量不超过100％。换句话说，如果80％是地衣芽孢杆菌，那么其它的微生物就不超过20％。
当另一微生物是枯草杆菌时，根据该益生微生物的总量，优选有35到65％的益生地衣芽孢杆菌以及35到65％的枯草杆菌。
该枯草杆菌例如可以是细菌孢子的形态、植物性细菌胞体、细菌胞壁或者是其组合。作为优选，该益生的杆菌采用植物性细菌胞体的形式，更为优选的是细菌孢子。
作为优选，益生地衣芽孢杆菌作为干菌(优选为冻干的细菌)包含在水产动物饲料中。然而，它们也可作为细菌的冷冻营养成分包含在饲料中。
水产动物
显然这里所述的水产动物饲料特别适用于养鱼和水产工业，其能减少微生物活动给贝类、软骨类鱼、鳍鱼或者是水产哺乳动物的危害。
贝类可包括：过滤进食型双壳类贝类如蛤、牡蛎、扇贝以及蚌类，此外还可包括龙虾、蟹和虾。
鳍鱼包括但不限于下列的动物：鲑类，其包括大西洋鲑、虹鳟鱼。
优选的水产动物是选自下列这组动物的一种鱼，这组动物包括：鳕科的鱼，这包括鳕鱼(Gadus callarias)、海鳟(Salmo trutta)以及海鲈(Dicentrarchus labrax)以及鳕、鳗以及淡水鳍鱼和鲤鱼。此外，该水产动物还可是海豚或鲸。
作为优选，该水产动物是一种在水中养殖的动物。
该水产动物可以处于早期培育的阶段如幼小的动物，该水产动物可以处于小动物之后的培育阶段。
对病原微生物的抵抗力
如上所述，这里所述的水产动物饲料能够大大提高水产动物对病原微生物的抵抗力。这里的示例用来证明鱼饲料中富含的BioPlus2B(其包括地衣芽孢杆菌孢子)。现已表明在水产鱼曝露于鲁氏耶尔森菌(Yersinisruckeri)时，这种富含地衣芽孢杆菌的鱼饲料能够大大提高水产鱼的存活率。鲁氏耶尔森菌是一种重要的病原性微生物，其能引起消化道的红嘴病。
这里的示例表明，对于水产虹鳟鱼来说，这里所述的水产动物饲料比没有益生杆菌的水产动物饲料能将虹鳟鱼对鲁氏耶尔森菌的存活率至少提高20％。
在本文中，虹鳟鱼是一种具有代表性的水产动物。换句话说，如果证明虹鳟鱼对鲁氏耶尔森菌的抵抗力提高了，那么通常来讲其它动物也是如此。在在不受该原理限制的条件下，我们相信这里第一次表明益生微生物对一种重要的病原性微生物如鲁氏耶尔森菌具有很好的效果。
因此，这里所述涉及水产动物饲料的优选实施例的特征在于，当其用来喂养受鲁氏耶尔森菌危胁的水产虹鳟鱼时，与动物饲料中没有益生的地衣芽孢杆菌的控制组相比，其至少能使虹鳟鱼的相对存活率提高2％。
如上所述，在一优选实施例中，该水产动物饲料包括益生地衣芽孢杆菌和益生的枯草杆菌，这是因为这两种杆菌菌种具有不同的生化特性，并能产生协同的效果。此时相对于该特定实施例，对应的动物饲料应没有益生地衣芽孢杆菌和益生的枯草杆菌。
本文中的示例中提供了一种合适的测试试验来评估虹鳟鱼对鲁氏耶尔森菌的抵抗力。在本文中，这是一项优选的试验。根据该示例的相关信息，本领域的技术人员可基于其基本的知识在正常的测量误差范围内做出相应的足够精确的试验以确定虹鳟鱼相对存活率的提高。
概括地，该试验包括以下步骤：
(i)取两组水产虹鳟鱼，每组100条4月龄的鱼；
(ii)在1m×1m×1m的鱼池中用这里所述的水产动物饲料喂养一组(28天，每天的剂量是单位体积生物数量的3％)，同时另一组用对应的没有益生地衣芽孢杆菌饲料喂食(作为对照组)；
(iii)在喂食28天后，每一组取出10条鱼并运送到一个新的鱼池；
(iv)在适应两天后，每条鱼内腹注入大约2.5E6CFU剂量的鲁氏耶尔森菌；
(v)在分开鱼池中(12-13℃)连续观察28天，每日计算出死亡的情况和相对存活率。
这里所述的水产动物饲料的优选特征是在用来喂养受鲁氏耶尔森菌危胁的虹鳟鱼时，其至少比对应动物饲料中没有益生地衣芽孢杆菌的控制组在虹鳟鱼的相对存活率上提高5％(更为优选的是至少10％，最为优选的是至少15％)。
水产动物与这里所述的水产动物饲料培触的水产养殖
作为优选，其涉及的是一种水产养殖工业，其中的水产动物养殖在一个至少为1m×1m×1m的物理空间如1m×1m×1m的鱼池中。水产养殖的物理空间也可更大，如10m×10m×5m。
术语“水产动物与水产动物饲料接触”表示的是喂食后一个典型的水产动物与水产动物饲料接触的状态，例如水产动物正在吃饲料的状态。
喂食可按现有技术的方式进行，本领域技术人员都清楚如何正确地给水中的水产动物喂食。
在一优选实施例中，水产动物与一定量的水产动物饲料接触，其中的量对应于单位体积内水产动物总量的0.5％到25％。更为优选的是水产动物与一定量的水产动物饲料接触，其中的量对应于单位体积内水产动物总量的1％到10％。
一种给水中水产动物喂食的方法，其包括用这里所述的水产动物饲料 来喂食水产动物
如上所述，可用现有的方法来进行喂食，本领域技术人员都清楚如何正确地给水中的水产动物喂食。
作为优选，水产养殖的水产动物要喂入一定量的水产动物饲料，其对应于单位体积内水产动物总量的0.5％到25％，更为优选的是该一定量的水产动物饲料对应于单位体积内水产动物总量的1％到10％。作为优选，水产动物喂食每日剂量的水产动物饲料。
如这里示例所展示的那样，该水产动物饲料还能提高增重和/或喂食的转换率。
因此，一优选实施例涉及的是一种给水产养殖中水产动物喂食的方法，其包括给水产动物喂食如这里所述的水产动物饲料，其中的增重至少比对应动物饲料中没有益生地衣芽孢杆菌的控制组多2％，如5％、7％、10％、15％、30％、40％、50％或甚至更多。
此外，另一优选实施例涉及的是一种给水产养殖中水产动物喂食的方法，其包括给水产动物喂食如这里所述的水产动物饲料，其中的喂食转换率至少比对应动物饲料中没有益生地衣芽孢杆菌的控制组多2％，如4％、7％、10％、15％、20％、30％或甚至更多。
此外，另一优选实施例涉及的是一种给水产养殖中水产动物喂食的方法，其包括给水产动物喂食如这里所述的水产动物饲料，其中水产动物在鲁氏耶尔森菌危胁下的相对存活率至少比对应动物饲料中没有益生地衣芽孢杆菌的控制组多2％。
如上所述，在一优选实施例中，该水产动物饲料包括益生地衣芽孢杆菌和益生的枯草杆菌，这是因为这两种杆菌菌种具有不同的生化特性，并能产生协同的效果。此时相对于该特定实施例，对应的动物饲料应没有益生地衣芽孢杆菌和益生的枯草杆菌。
如前面在“对病原性微生物抵抗力”中所述，这里的示例中提供了一种合适的测试试验来评估虹鳟鱼对鲁氏耶尔森菌增加的抵抗力。上述部分集中在虹鳟鱼。然而，根据这部分内容以及其它的信息，本领域的技术人员可基于其基本的知识在正常的测量误差范围内对任易一种水产动物做出相应的足够精确的试验以确定相关水产动物相对存活率的提高。
作为优选，在这里所述的给水产动物喂食的方法中，在虹鳟鱼受鲁氏耶尔森菌的危胁时，该方法在虹鳟鱼的相对存活率上至少比对应动物饲料中没有益生地衣芽孢杆菌的控制组提高5％(更为优选的是至少10％，最为优选的是至少15％)。
本发明的各个部分
如上所述，我们相信这里第一次表明益生微生物对一种重要的病原性微生物如鲁氏耶尔森菌具有很好的效果。
不限定于该理论，我们相信根据这里所提供的信息，本领域的技术人员根据其通常的知识能够意识到其它的益生微生物及其组合也能具有很好效果。
因此本发明的一个独特方面涉及一种给水产养殖中水产动物喂食的方法，其包括给水产动物喂食一种水产动物饲料，该饲料包括一种益生微生物，在虹鳟鱼受鲁氏耶尔森菌的危胁时，该方法在虹鳟鱼的相对存活率上至少比对应动物饲料中没有益生微生物的控制组提高2％。
作为优选，该益生微生物是Gram负作用菌，更为优选的是Gram正作用菌。优选的Gram正作用菌选自于下列这组菌种：格氏菌(Lactococcusspp.)、乳酸菌(Lactobacillus spp.)、明串珠菌(Leuconostoc spp.)、酒球菌(Oenococcus spp.)、链球菌(Streptococcus spp.)、更为优选的是杆状菌(Bacillus spp.)。
本发明的其它方面、实施例和信息同时与本发明的本方面相关并包括在其中。
示例
材料和方法
所用虹鳟鱼由鱼卵孵出，该鱼卵由丹麦的Faarup Mφlle Dambrug提供给丹麦的Borhholms Lakseklekkeri。卵在到达后消毒并在循环的7℃淡水中孵出。
虹鳟鱼的鱼苗在2002年3月1日孵出，之后保存在特制托盘所承的10℃冷水中，之后再保存在1m×1m×1m的鱼池中。然后用商场上买来的虹鳟鱼食(丹麦的BioMar)喂养直到其能用于实验。
水产养殖地
水产养殖地丹麦的Borhhloms lakseklkkeri，这里的水是循环的淡水并且没有致病体。其中的水通过机械及生物过滤和紫外线处理并循环。
试验设计
将4个月大的虹鳟鱼分为6组，每组100条。然后将它们放在循环水温为10℃的1m×1m×1m的鱼池中养殖。
其中两组为控制组，其所喂食的是没有加入益生素的BioMar虹鳟鱼饲料。
其中两组喂食同样的饲料，只是其中富含藻基的免疫品AquavacErgosan(Aquaculture Vaccines Ltd.公司生产)。根据生产说明，加入混合饲料的量为0.2％。
剩余两组喂食富含益杆菌的同样饲料。该饲料富含BioPlus2B(Chr.Hansan A/S)。BioPlus2B的含量如下：
地衣芽孢杆菌CH200孢子浓度为       0.5％
枯草杆菌CH201孢子深度             0.5％
硅酸铝钠(E554)              1.0％
渗透乳液                    98.0％
加入BioPlus2B使杆菌浓度达到4 E9 CFU/g的饲料。
所有鱼的每日投料对应于单位体积总重的3％。试验开始于2002年7月2日，终止于2002年8月13日。样本取出并分析的时间为2002年7月2日、2002年7月16日、2002年7月30日和2002年8月13日。
样本分析
血液
在每一项样本分析中均从每一组对象中取出10条鱼的血液样本，但第一个样本取自自然生长的鱼，这里总共取出20条鱼的血液样本。血液样本测试在HH试管(heparinsed heamatocrit tube)(10或20微升)中进行。亥氏(Heamatocrti)分析在1000g的离心处理5分钟后进行。之后将管子切开，计算出体积并将血浆样本保存在-20℃下以备分析。此外，在物镜上进行血细胞平皿培养，其用空气干燥后固定在纯酒精中。用Giemsa对细胞进行染色，并用显微镜计出每1000个血细胞的淋巴细胞数。该血浆样本还可用来进行蛋白质检测，其中需要用到(穿刺的)BCA工具箱。
测试
在取出样本的每一天均从每一组中取出10条鱼。然后将这些活鱼送到其它的鱼池。在适应2天后，每条鱼内腹注入大约2.5E6CFU剂量的鲁氏耶尔森菌。在分开鱼池中(12-13℃)连续观察28天，每日记录死亡的情况和相对存活率。
抗体的确定
为了确定出不同组虹鳟鱼样本是否对鲁氏耶尔森菌产生了抗体，还要对血浆样本进行ELISA测试。在标准状态下，将微量板(96池的免疫板)涂上福尔马林处理过的鲁氏耶尔森菌(每池200微升，1×105cfu/ml)试验采用标准的阻塞和冲洗方法进行。来自的测试样本鱼的血浆(稀释1∶100)用作主抗体，与虹鳟体抗体反应的兔子抗体用作第二抗体，第三抗体采用过氧化物共轭的山羊抗体(Sigma)。显色基片是OPD(Sigma)，吸收率以492nm处测量。
饲料中以及鱼的肠胃中的杆菌孢子
在42天时从不同的测试组采集样本以分析鱼的肠胃中的枯草杆菌和地衣芽孢杆菌。此外还要采集使用BioMar饲料的样本。
增加的长度和重量
在每一天以及每一次采集样本时，都要确定出鱼的长度和重量。
结果
总体情况
任何一组鱼中均没有厌食或其它不良反应的记录。虹鳟鱼令人满意地吃掉了所有的食物。
在受鲁氏耶尔森菌危胁的试验中，Ergosan组相对于对照组在14天和24天之后其存活率没有提高。在用富含Ergosan的饲料喂食42天之后，存活率略有提高。喂食富含BioPlus2B饲料的鱼的存活率在所有测试中均有明显的提高。在喂食富含BioPlus2B饲料的14、28和42天时，相对存活率分别为20％、20％和35％。
血液参数
相对于血浆蛋白，不同测试组之间记亥氏(haematocrit)值和淋巴细胞数不可能出现明显的不同。
然而，相对于鲁氏耶尔森菌的抗体，富含BioPlus2B饲料的组比富含Ergosan饲料的组在鲁氏耶尔森菌抗体的量上有明显的提高。
饲料中以及鱼的肠胃中的杆菌孢子
分析表明：在喂食富含BioPlus2B饲料的鱼中两种杆菌均具有很高的浓度。
增加的长度和重量
在增加的长度和重量方面，BioPlus2B组比Ergosan组和对照组均有明显地提高。
讨论
研究表明，在受到病原性鲁氏耶尔森菌危胁时，富含BioPlus2B的鱼饲料能够大大地提高水产养殖虹鳟鱼的存活率。
数据表明，在鲁氏耶尔森菌抗体量方面，富含BioPlus2B饲料的组比富含Ergosan饲料的组有明显地提高。显然，抗体的提高能够增强虹鳟鱼对病原体鲁氏耶尔森菌的抵抗力。
此外，在增加长度和重量方面，BioPlus2B组比Ergosan组和对照组均有明显地提高。

Claims (10)

1、一种水产动物的饲料，其包括益生地衣芽孢杆菌。
2、如权利要求1所述的水产动物的饲料，其中的饲料包括有已知的水产动物营养成分。
3、如权利要求1或2所述的水产动物的饲料，其中该水产动物饲料包括浓度至少为10E6CFU/g饲料的益生地衣芽孢杆菌。
4、如权利要求1-3任意一项所述的水产动物的饲料，其中所述的饲料包括益生地衣芽孢杆菌和益生枯草杆菌的混合物。
5、如权利要求1-4任意一项所述的水产动物的饲料，其特征在于，当其用来喂养水产虹鳟鱼时，在具有病原体鲁氏耶尔森菌的情况下测试，与动物饲料中没有益生的地衣芽孢杆菌的对照组相比，其至少能使虹鳟鱼的相对存活率提高2％。
6、水产动物的水产养殖，其中的水产动物与权利要求1至5任意一项所述一种包括益生地衣芽孢杆菌的水产动物饲料接触。
7、如权利要求6所述的水产动物的水产养殖，其中水产养殖的水产动物与一定量的水产动物饲料接触，其中的量对应于单位体积内水产养殖的水产动物总量的0.5％到10％。
8、如权利要求6或7所述的水产动物的水产养殖，其中的水产动物为鳍鱼类，如鲑类，其包括大西洋鲑鱼和虹鳟鱼。
9、一种用来喂养水产养殖中水产动物的方法，其包括用权利要求1至5任意一项所述一种包括益生地衣芽孢杆菌的水产动物饲料来喂养。
10、如权利要求9所述的喂养水产动物的方法，其中的水产动物为：鳍鱼类，如鲑类，其包括大西洋鲑鱼和虹鳟鱼。
CNA2004800114933A 2003-05-01 2004-04-30 通过地衣芽孢杆菌来提高水产动物健康和/或营养状况 Pending CN1780557A (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP03076392.4 2003-05-01
EP03076392A EP1472933A1 (en) 2003-05-01 2003-05-01 Improving health and/or nutritional status of an aquatic animal by aid of Bacillus licheniformis

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN1780557A true CN1780557A (zh) 2006-05-31

Family

ID=32981888

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNA2004800114933A Pending CN1780557A (zh) 2003-05-01 2004-04-30 通过地衣芽孢杆菌来提高水产动物健康和/或营养状况

Country Status (7)

Country Link
US (1) US20050031732A1 (zh)
EP (1) EP1472933A1 (zh)
JP (1) JP2006524997A (zh)
CN (1) CN1780557A (zh)
BR (1) BRPI0409971A (zh)
NO (1) NO20055653L (zh)
WO (1) WO2004095939A1 (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103478445A (zh) * 2013-08-22 2014-01-01 福建天马科技集团股份有限公司 虹鳟中成鱼浮性膨化颗粒配合饲料
CN103826476A (zh) * 2011-04-29 2014-05-28 奥本大学 用于治疗和预防水生动物中的感染的芽孢杆菌属细菌
CN113088466A (zh) * 2021-04-06 2021-07-09 江苏祥豪实业股份有限公司 一种具有拮抗产臭菌和除臭功效的地衣芽孢杆菌及其应用

Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PL1863834T3 (pl) * 2005-03-22 2010-12-31 Novozymes As Polipeptydy i kodujące je kwasy nukleinowe
WO2006115430A1 (fr) * 2005-04-28 2006-11-02 Irina Grigorievna Osipova Preparation biologique irilis a base de bacteries du genre bacillus contenant bacillus subtilis et bacillus licheniformis
JP4903447B2 (ja) * 2006-01-30 2012-03-28 財団法人電力中央研究所 水生動物の飼育方法及び飼育キット
JP6084771B2 (ja) * 2008-09-17 2017-02-22 バイエル クロップサイエンス エルピーＢａｙｅｒ Ｃｒｏｐｓｃｉｅｎｃｅ Ｌｐ 動物の健康を向上するためにバチルス・ズブチリス株を使用する方法
JP5830084B2 (ja) 2010-03-17 2015-12-09 バイエル クロップサイエンス エルピーＢａｙｅｒ Ｃｒｏｐｓｃｉｅｎｃｅ Ｌｐ 胃腸状態の予防及び処置にバチルス・ズブチリス菌株を使用する方法
US20130247831A1 (en) * 2012-03-26 2013-09-26 Kyle Clark Howes Method of treating an animal
WO2014169046A1 (en) * 2013-04-09 2014-10-16 Novozymes A/S Compositions and methods for improving the health of aquatic animals
CN103222540B (zh) * 2013-04-28 2014-05-07 河南科技大学 一种复合微生态鱼类饲料添加剂及其制备工艺
US20150050245A1 (en) * 2013-08-14 2015-02-19 Tntgamble, Inc. Methods and delivery system for beneficial additive and subtractive biological agents to promote balanced mammalian gastrointestinal flora
US10716310B2 (en) * 2014-03-13 2020-07-21 Phibro Animal Health Corporation Strains of bacillus for inhibiting foodborne pathogens
JP6452730B2 (ja) * 2015-01-27 2019-01-16 株式会社トーワ 腸管改善用飼料添加剤及び飼料
WO2018045063A1 (en) * 2016-08-31 2018-03-08 Fmc Corporation Nematocidal compositions comprising bacillus licheniformis and bacillus subtilis
BR112020012149A2 (pt) * 2017-12-18 2020-11-24 Integene (Pty) Limited aditivo e composição para a água
FR3075599A1 (fr) 2017-12-22 2019-06-28 Nolivade Composition destinee a l'amelioration de la sante des jeunes ovipares
EP3737240A1 (en) * 2018-01-08 2020-11-18 Previwo AS Probiotic bacteria for fish
CN111690558B (zh) * 2020-05-31 2022-04-08 青岛玛斯特生物技术有限公司 一株枯草芽孢杆菌菌株及其在水产养殖中的应用
CN116267713B (zh) * 2023-02-27 2024-04-26 南方海洋科学与工程广东省实验室(珠海) 一种肉质鲜嫩的石斑鱼养殖方法

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR900003014B1 (ko) * 1986-12-27 1990-05-04 도오아 야꾸힌 고오교오 가부시끼가이샤 양식어(養殖魚)용 사료 첨가제
PT94108A (pt) * 1989-05-24 1991-02-08 Asahi Chemical Ind Preparacao de microorganismos viaveis contendo esporos estabilizada,sua producao e pilulas respectivas
US5186961A (en) * 1991-03-15 1993-02-16 North Carolina State University Method and composition for maintaining animals on a keratin-containing diet
WO1994011492A1 (en) * 1992-11-12 1994-05-26 Chr. Hansen's Laboratory, Inc. Method of favorably modifying poultry intestinal microflora
US5985336A (en) * 1995-06-07 1999-11-16 Novus International, Inc. Nutrient formulation and process for feeding young poultry and other animals
US5698246A (en) * 1996-01-29 1997-12-16 Cargill, Incorporated Foodstuff for and method of feeding crustaceans and fish
EP1382241A1 (en) * 2000-03-10 2004-01-21 Uutech Limited Storage and delivery of micro-organisms
CN100456949C (zh) * 2000-06-23 2009-02-04 阿夸科技生物有限责任公司 生物活性食品复合物,制备生物活性食品复合产品的方法
DE10110431A1 (de) * 2001-03-05 2002-09-19 Nutrinova Gmbh Bacteriocinhaltiges Sorbinsäurepräparat als Futtermittelzusatz in der Nutztieraufzucht
US20020172737A1 (en) * 2001-03-08 2002-11-21 Joseph Pinski Foodstuff for and method of feeding aquatic life
US6878373B2 (en) * 2001-12-03 2005-04-12 Micropure Technologies, Inc. Probiotic composition containing Bacillus cereus RRRL B-30535
AU2003239484A1 (en) * 2002-06-11 2003-12-22 Advanced Bionutrition Corporation Zooplankton enrichment with probionts and prebionts and uses thereof
US7915024B2 (en) * 2002-08-09 2011-03-29 North Carolina State University Methods and compositions for improving growth of meat-type poultry

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103826476A (zh) * 2011-04-29 2014-05-28 奥本大学 用于治疗和预防水生动物中的感染的芽孢杆菌属细菌
US9205116B2 (en) 2011-04-29 2015-12-08 Auburn University Bacillus bacteria for use in treating and preventing infection in aquatic animals
US9603879B2 (en) 2011-04-29 2017-03-28 Auburn University Bacillus bacteria for use in treating and preventing infection in aquatic animals
CN103478445A (zh) * 2013-08-22 2014-01-01 福建天马科技集团股份有限公司 虹鳟中成鱼浮性膨化颗粒配合饲料
CN113088466A (zh) * 2021-04-06 2021-07-09 江苏祥豪实业股份有限公司 一种具有拮抗产臭菌和除臭功效的地衣芽孢杆菌及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
US20050031732A1 (en) 2005-02-10
WO2004095939A1 (en) 2004-11-11
NO20055653L (no) 2006-01-27
EP1472933A1 (en) 2004-11-03
NO20055653D0 (no) 2005-11-30
JP2006524997A (ja) 2006-11-09
BRPI0409971A (pt) 2006-05-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Rohani et al. Probiotics, prebiotics and synbiotics improved the functionality of aquafeed: Upgrading growth, reproduction, immunity and disease resistance in fish
Farzanfar The use of probiotics in shrimp aquaculture
CN1780557A (zh) 通过地衣芽孢杆菌来提高水产动物健康和/或营养状况
Lazado et al. Prospects of host-associated microorganisms in fish and penaeids as probiotics with immunomodulatory functions
Irianto et al. Probiotics in aquaculture
Ringø et al. Intestinal microflora of fish larvae and fry.
Verschuere et al. Probiotic bacteria as biological control agents in aquaculture
Boonthai et al. Probiotic bacteria effects on growth and bacterial composition of black tiger shrimp (Penaeus monodon)
CN1104844C (zh) 动物用口服组合物
CN1475137A (zh) 鸡饲料添加剂
Keysami et al. Probiotic activity of Bacillus subtilis in juvenile freshwater prawn, Macrobrachium rosenbergii (de Man) at different methods of administration to the feed
Caipang et al. Host-derived probiotics for finfish aquaculture
Vázquez-Silva et al. Effect of bacterial probiotics bio-encapsulated into Artemia franciscana on weight and length of the shortfin silverside (Chirostoma humboldtianum), and PCR-DGGE characterization of its intestinal bacterial community
CN110178973A (zh) 一种防治凡纳滨对虾肝肠胞虫的药饵添加剂
JP6783786B2 (ja) 生物活性動物用飼料中における古細菌、その組成物を製造する方法、および前記組成物を用いる方法
KR100857771B1 (ko) 바실러스 폴리퍼멘티쿠스, 바실러스 리케니포르미스 및사카로마이세스 세르비지에를 포함하는 어류사료첨가용조성물
Staykov et al. Influence of dietary Bio-Mos® on growth, survival and immune status of rainbow trout (Salmo gairdneri irideus G.) and common carp (Cyprinus carpio L.).
WO2021144172A1 (en) Bacillus strains with the ability to degrade inorganic nitrogen compounds
CN1268642C (zh) 预防仔猪腹泻的特异性卵黄抗体及其制备方法与应用
Bandyopadhyay et al. Dietary administered Bacillus sp. PP9 enhances growth, nutrition and immunity in Cirrhinus mrigala (Hamilton)
Koca et al. Appropriate usage level of shrimp waste meal as chitin source for feeding young crayfish (Astacus leptodactylus Esch. 1823).
Falaye et al. Influence of Lactobacillus plantarum supplemented diet on growth response, gut morphometry and microbial profile in gut of Clarias gariepinus fingerlings
SAHANDI et al. Effect of possible probiotic strains on suppression of Vibrio and enhancement of growth in rotifer, Brachionus plicatilis
Sahandi et al. Enhancement of growth performance and hematological changes in rainbow trout (Onchorhynchus mykiss) alevins fed with Bifidobacterium bacteria
Hashemi Panah et al. Effects of utilization of Lactococcus lactis and Pediococcus pentosaseus as probiotic to improve quality of west white leg shrimp (Litopenaeus vannamei) postlarvae

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C02 Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication