CN110448617B - 一种总酸浆苦素提取物的制备方法及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种总酸浆苦素提取物的制备方法及其应用，属于中药有效成分提取技术领域。本发明公开的一种总酸浆苦素提取物的制备方法，包括提取和富集过程。本发明公开的总酸浆苦素提取物能用于制备治疗湿疹和银屑病的药物。

Description

一种总酸浆苦素提取物的制备方法及其应用

技术领域

本发明涉及中药有效成分提取技术领域，更具体的说是涉及一种总酸浆苦素提取物的制备方法及其应用。

背景技术

锦灯笼(Physalis alkekengi L var.franchetii(Mast.)Makino)为茄科(Solanaceae)酸浆属(Physalis)多年生草本植物的干燥宿萼或带果实的宿萼，又称红姑娘、挂金灯等。宿萼味苦，果实味甘、微酸，性寒。原产于中国，主要分布在东北、西北、内蒙古等地，美洲、韩国和日本等国也有分布。锦灯笼具有清热、解毒、利咽化痰、利尿等作用，用于咽痛、音哑、痰热咳嗽、小便不利，外治天疱疮、湿疹。锦灯笼的化学成分主要包括甾体类、甾醇类、生物碱类、黄酮类、氨基酸类、多糖等。锦灯笼的药用价值在中国的许多医学文献中都有记载，锦灯笼药材始载于《神农本草经》，名酸酱，列为中品。其后历代本草多收载，明李时珍《本草纲目》中记载锦灯笼利湿除热，清肺治咳，利湿化痰，治疽。在锦灯笼中酸浆苦素(physalin)类化合物占据很重要的一部分，其基本结构为13,14-裂环-16,24-环麦角甾烷。

湿疹是临床上常见的、多发的皮肤病之一，是一种由各种内外因素引起的过敏性炎症性皮肤病，临床上以皮肤丘疹、水疱、渗出、糜烂为主，呈多形性改变，易反复发病。其组织学特征为表皮细胞间水肿，伴有不同程度的棘层肥厚及浅表血管周围淋巴组织细胞浸润湿疹。其发病可见于任何年龄，无性别差异，城市多于农村，易复发、病程迁延难愈。近年来，湿疹的发病率呈上升趋势，随着经济的发展，职业及环境接触性致病因子越来越多，产生了许多新的皮炎，严重影响生产和人民健康。

银屑病(又名牛皮癣)是一种常见病，多发病，并随着年龄的増长发病率逐步增高，其发病有地域、种族差异，银屑病在中国的发病率为0.12％-1.49％，严重影响着患者的生活质量。近年来对银屑病发病机制的研究取得了一定成就，但无突破性进展，银屑病的发生与多种因素有关，包括遗传、免疫、环境影响、生活习惯等，其危险因素包括家族史、精神压力、饮酒、抽烟、肥胖、化学接触等。

目前，关于锦灯笼中总酸浆苦素提取物的制备方法研究较少，也没有关于总酸浆苦素用于治疗湿疹和银屑病的相关报道。因此，提供一种总酸浆苦素提取物的制备方法及其应用是本领域技术人员亟需解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种总酸浆苦素提取物的制备方法及其应用，将总酸浆苦素提取物制备成治疗湿疹和银屑病的药物，以及治疗其他皮肤性免疫疾病和炎症的药物。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种总酸浆苦素提取物的制备方法，具体步骤如下：

(1)将锦灯笼用30倍量70％的乙醇提取2次，每次2h，获得锦灯笼提取液；

(2)将浓度为8.338mg/mL～16.675mg/mL的锦灯笼提取液，以1BV/h流速缓慢通过预处理的AB-8型大孔树脂色谱柱，吸附1h，用2BV的蒸馏水以2BV/h的流速冲洗；

(3)在洗脱液Molish反应呈阴性后，用50％的乙醇进行洗脱，流速为2BV/h，收集第0.3～0.8BV间的洗脱液，减压浓缩至干，获得总酸浆苦素提取物。有效部位总酸浆苦素含量均达到70％以上，且总酸浆苦素的回收率达到85％以上。

进一步，所述总酸浆苦素提取物在制备治疗湿疹和银屑病药物中的应用。

进一步，所述药物为凝胶剂或软膏。

凝胶剂的具体组成如下：总酸浆苦素提取物0.4g，卡波姆(940)0.7g，甘油10g，丙二醇5g，薄荷醇0.1g，尼泊金乙酯0.1g，三乙醇胺调节pH至6～7。

凝胶剂的制备方法如下：称取卡波姆(940)2g溶于100mL水中，溶胀过夜，取35g溶胀基质为Ⅰ相；将10g甘油与5g丙二醇均匀混合后，加入Ⅰ相中，形成Ⅱ相；取0.4g总酸浆苦素提取物溶于20mL 30％的乙醇溶液，均匀溶解后将其加入到Ⅱ相中，获得Ⅲ相；称取0.1g薄荷醇与0.1g尼泊金乙酯共同溶于10mL 50％的乙醇溶液中，均匀溶解后加入到Ⅲ相中，形成Ⅳ相；Ⅳ相逐滴加入三乙醇胺，调pH至6～7；最后加蒸馏水至100g，充分搅拌，得凝胶剂成品。

软膏的制备方法如下：取浓缩至相对密度为1.25～1.28(70℃)的清膏(总酸浆苦素提取物)，加入到912g基质(基质制备：取白凡士林和羊毛脂按照1:5的比例60℃加热熔化)中，搅匀，放冷至40℃以下，加入2‰的研磨成细粉的冰片，搅匀，加入2‰的研磨成细粉的尼泊金乙酯，搅匀，制成1000g，即得软膏。

经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明公开提供了一种稳定高效的总酸浆苦素提取物的制备方法及其在治疗湿疹和银屑病方面的医疗用途。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。

图1附图为本发明总酸浆苦素对小鼠急性湿疹模型的HE染色结果；

图2附图为本发明心得安所致豚鼠耳背部银屑病样皮损的HE染色结果；

图3附图为本发明心得安所致豚鼠耳背部银屑病样皮损的PCNA表达的影响；

图4附图为本发明总酸浆苦素对小鼠尾部鳞片颗粒层形成的影响；

图5附图为本发明总酸浆苦素对小鼠阴道上皮有丝分裂的影响；

图6附图为本发明总酸浆苦素对小鼠阴道上皮PCNA表达的影响。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

计量资料均以

表示，用t检验进行统计学处理。P<0.05时两组间差异有显著性。

实施例1

一种总酸浆苦素提取物的制备方法，具体步骤如下：

(1)将锦灯笼用30倍量70％的乙醇提取2次，每次2h，获得锦灯笼提取液；

(2)将浓度为8.338mg/mL～16.675mg/mL的锦灯笼提取液，以1BV/h流速缓慢通过预处理的AB-8型大孔树脂色谱柱，吸附1h，用2BV的蒸馏水以2BV/h的流速冲洗；

(3)在洗脱液Molish反应呈阴性后，用50％的乙醇进行洗脱，流速为2BV/h，收集第0.3～0.8BV间的洗脱液，减压浓缩至干，获得总酸浆苦素提取物。有效部位总酸浆苦素含量均达到70％以上，且总酸浆苦素的回收率达到85％以上。

实施例2凝胶剂的制备

凝胶剂的具体组成如下：总酸浆苦素提取物0.4g，卡波姆(940)0.7g，甘油10g，丙二醇5g，薄荷醇0.1g，尼泊金乙酯0.1g，三乙醇胺调节pH至6～7。

凝胶剂的具体制备方法如下：称取卡波姆(940)2g溶于100mL水中，溶胀过夜，取35g溶胀基质为Ⅰ相；将10g甘油与5g丙二醇均匀混合后，加入Ⅰ相中，形成Ⅱ相；取0.4g总酸浆苦素提取物溶于20mL 30％的乙醇溶液，均匀溶解后将药醇溶液加入到Ⅱ相中，获得Ⅲ相；称取0.1g薄荷醇与0.1g尼泊金乙酯共同溶于10mL 50％的醇溶液中，均匀溶解后加入到Ⅲ相中，形成Ⅳ相；Ⅳ相逐滴加入三乙醇胺，调pH至6～7；最后加蒸馏水至100g，充分搅拌，得凝胶剂成品。

实施例3软膏的制备

软膏的制备方法如下：取浓缩至相对密度为1.25～1.28(70℃)的清膏(总酸浆苦素提取物)，加入到912g基质(基质制备：取白凡士林和羊毛脂按照1:5的比例60℃加热熔化)中，搅匀，放冷至40℃以下，加入2‰的研磨成细粉的冰片，搅匀，加入2‰的研磨成细粉的尼泊金乙酯，搅匀，制成1000g，即得软膏。

实施例4总酸浆苦素对小鼠急性湿疹模型的影响

取昆明小鼠，雄性，体重在22±2g，共60只，随机分为6组，每组10只，分别为空白对照组、模型组、总酸浆苦素软膏(高、中、低剂量组)、复方醋酸地塞米松乳膏阳性对照组。实验前1天只腹部剪毛，面积为2cm×2cm，然后轻涂脱毛膏，8min后用温水将残余脱毛膏洗净，小鼠脱毛后皮肤均未出现损伤，脱毛后第1天和第2天以7％2,4-二硝基氯苯(2,4-dinitrochlorobenzene，DNCB)100μL用移液枪外涂小鼠去毛腹部致敏。实验第1天致敏后24h，将阳性对照组、总酸浆苦素软膏(高、中、低剂量组)分别在右耳正反两面涂药，每日2次，连续7天。实验第7天，在小鼠右耳双侧用移液枪外涂1％DNCB 100μL激发，在激发24h后，颈椎脱臼处死小鼠。小鼠处死后剪下双耳，对齐，用8mm打孔器取下圆形耳片，迅速用分析天平称量双耳，并计算肿胀度(肿胀度＝右耳-左耳)，结果见表1。

表1总酸浆苦素软膏对小鼠急性湿疹模型耳廓肿胀度的影响(

n＝10)

注：vs空白对照组，##P＜0.01；vs模型组，*P＜0.05，**P＜0.01。

称量后耳片用4％多聚甲醛固定，做病理切片，在光镜下观察耳组织病理改变，结果见图1。由小鼠右耳组织病理切片图可以看出，空白对照组(Control)表皮完整，上皮细胞排列整齐，厚薄均匀，角质层薄，上皮下组织无充血水肿，无炎细胞浸润。模型组(Model)表皮增厚，轻度角化过度，呈网状排列，细胞间质疏松，可见明显细胞内水肿及细胞间弥漫性水肿，真皮大量炎性细胞浸润，血管扩张明显，与人的急性湿疹皮肤组织病理改变相一致，表明造模成功。分别给予复方醋酸地塞米松软膏(Dexamethasone)和总酸浆苦素软膏(高(high)、中(middle)、低(low)剂量)后，小鼠右耳组织状况明显改善，炎性细胞显著减少，细胞内水肿及细胞间弥漫性水肿状况减轻。总酸浆苦素高剂量组耳组织病理切片见表皮增厚不明显，真皮内充血水肿明显缓解，炎性细胞浸润少见。总酸浆苦素软膏中、低剂量组耳组织病理切片见表皮增厚不明显，水肿细胞较少，炎性细胞浸润明显减少。

实施例5总酸浆苦素对心得安所致豚鼠耳背部银屑病样皮损模型的作用研究

给药前将豚鼠随机分为7组，每组8只；一组为空白对照，其余6组耳背皮肤涂抹心得安乳剂，3周后建成银屑病模型动物。将锦灯笼总酸浆苦素溶解于水中稀释至适宜浓度(高，中，低剂量组，即配即用)，灌胃给药1天一次，共14次。第一组：阳性对照药阿维A组(acitretin)；第二组：阳性对照药雷公藤组(TWP)；第三组：锦灯笼总酸浆苦素高剂量组；第四组：锦灯笼总酸浆苦素中剂量组；第五组：锦灯笼总酸浆苦素低剂量组。治疗14日后，取豚鼠耳部皮肤分别做石蜡切片，HE染色，蛋白质免疫印迹和免疫组化染色。

(1)HE染色及组织学评分

银屑病模型动物经灌胃给药14天后，取豚鼠双耳部皮肤活检，分成两块，一只耳用10％的福尔马林固定，作石蜡切片HE染色，另一只耳包于锡箔纸内，置-80℃低温冰箱保存，制作冰冻切片保存待检。将用10％福尔马林固定的标本脱水，透明浸蜡后包埋，制作石蜡切片，常规HE染色，在光镜下逐一观察组织学所见。

银屑病模型动物经灌胃给药14天后，各给药组与空白对照组及模型组比较，阳性对照药阿维A组未见明显变化，雷公藤组有所好转，而锦灯笼总酸浆苦素高剂量组效果明显，中剂量组次之，组织学评分如表2和图2所示。

表2改良的Baker评分方法对心得安所致豚鼠耳背部银屑病样皮损的组织学评分(

n＝8)

注：vs模型组，*P＜0.05，**P＜0.01。

各给药组同模型组相比，除阳性对照药阿维A组未见明显变化，其他各组皆有所好转(P<0.01)，而总酸浆苦素高剂量组(3.72±0.78)效果明显，组织学评分已低于Baker评分标准的4-10分，说明总酸浆苦素高剂量组作用后，可以明显改善心得安所致的豚鼠银屑病样皮损症状，也表明锦灯笼总酸浆苦素具有促进豚鼠银屑病样皮炎修复的作用。

(2)采用SABC法进行免疫组织化学法检测PCNA的表达

皮肤切片用4％多聚甲醛固定30min，PBS洗5min。3％Triton，室温作用30min，PBS振洗3次，每次5min。用含0.3％H₂O₂的甲醇抑制内源性过氧化物酶，PBS振洗3次，每次5min。滴加1：50稀释的兔抗鼠单抗，4℃过夜，37℃复温60min，PBS洗3次。滴加1：100稀释的羊抗鼠IgG，37℃30min，PBS振洗3次。用DAB显色5-10min，流水终止反应。复染，脱水，透明，封片。显微镜下观察、拍照，结果见图3。

图3结果显示，增殖细胞核抗原(PCNA)在空白对照组淡染棕色呈弱表达，仅有少量阳性细胞在基底层表达；模型组深染棕色呈强表达，大量阳性细胞在基底层及棘层表达；与模型组相比，阳性对照药阿维A未体现明显的改善作用；阳性对照药雷公藤PCNA呈阳性表达但与模型组比较表达量降低；锦灯笼总酸浆苦素高、中剂量组作用后，明显降低PCNA的表达量，阳性细胞在基底层呈较弱的阳性表达，低剂量组作用较弱。以上结果表明，锦灯笼总酸浆苦素可不同程度地降低PCNA的表达量，这可能与其抑制角质形成细胞过度增殖有关。

实施例6抗炎作用

(1)对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响

取昆明种小白鼠，雄性，体重在22±2g，共60只，随机分为5组，每组12只，分别为模型组、总酸浆苦素(高、中、低剂量组)、阿司匹林阳性对照组。各组分别灌胃给药，模型组给同体积生理盐水。

连续给药7天，末次给药50min后，立即在小鼠左耳前后两面涂抹二甲苯0.2ml，3.5h后将小鼠脱臼处死，剪下左右两耳片，用8mm直径打孔器分别在同一部位打下圆耳片，用分析天平称两耳重量，用每只鼠的左耳重量减去右耳片重量，即为耳肿胀度。比较各组的耳片肿胀度，结果见表3。

表3不同活性成分对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响

注：vs模型组，﹣P<0.1，*P<0.05，**P<0.01。

由表3可知，各给药组同模型组相比，阿司匹林阳性对照组、总酸浆苦素高剂量对二甲苯致小鼠耳肿胀有抑制作用。总酸浆苦素中、低剂量组对二甲苯致小鼠耳肿胀未表现出抑制作用。

(2)对蛋清致大鼠足肿胀的影响

取Wistar大鼠60只。按体重随机分为6组，即空白对照组、模型对照组、总酸浆苦素(高、中、低剂量组)和阿司匹林阳性对照组。各组均口服给药，空白对照组和模型对照组给予同体积水，连续7天。

采用容积测量法。实验前先测量每鼠正常足趾容积，末次给药30min后将大鼠右后肢拉直，自足跖中部皮下注射10％鸡蛋清0.1mL/爪致炎。致炎后分别在0.5h、1h、2h、3h、4h测定其足跖容积，并计算鼠爪肿胀百分率，结果见表4。

表4不同活性成分对蛋清致大鼠足肿胀的影响

注：vs模型组，*P<0.05，**P<0.01。

由表4可知，各给药组同模型组相比，阿司匹林阳性对照组和总酸浆苦素高、中剂量组对蛋清大鼠足肿胀的影响有一定的抑制作用。其中高剂量组抗炎作用明显，分别在1h、2h和3h均体现出较好的抗炎作用。

实施例7总酸浆苦素对小鼠尾部鳞片颗粒层形成的影响

取昆明种小白鼠60只，雌雄各半，体重22±2g，按体重随机分为6组。分别为空白对照组、模型组、总酸浆苦素(高、中、低剂量组)和甲氨喋呤(MTX)阳性对照组。各组分别灌胃给药，每日1次，共7天。各组动物最后一次给药次日脱颈椎处死小鼠，取尾部距离尾根约2cm处背面皮肤一长条。用10％福尔马林固定，制片。

HE染色：石蜡包埋→切片→二甲苯脱蜡→无水乙醇→95％酒精→水洗→苏木素→HCl分化→水洗→伊红染色→95％酒精→无水乙醇→二甲苯→光学树胶封片→烘片。在光学显微镜下，逐一观察鼠尾部鳞片。凡是一个鳞片有连接成行的颗粒层细胞者，为有颗粒层的鳞片。记数每100个鳞片中有颗粒层的鳞片数，结果见表5和图4。

表5不同活性成分对小鼠尾部鳞片颗粒层形成的影响

注：vs模型组，*P<0.05，**P<0.01。

由表5可知，各给药组同模型组相比，总酸浆苦素各剂量组和甲氨喋呤(MTX)阳性对照组对小鼠尾部颗粒层的鳞片数增加有显著性意义。模型组颗粒细胞层少，有缺失。图4显示，甲氨喋吟阳性对照组、总酸浆苦素高、中和低剂量各组颗粒细胞层较多，比较完整。颗粒细胞呈梭形，细胞核、细胞器溶解消失，细胞内有嗜碱性透明角质颗粒。上述结果表明，总酸浆苦素具有一定抗小鼠尾部鳞片颗粒层形成的作用。

实施例8总酸浆苦素抗增殖作用

(1)对小鼠阴道上皮有丝分裂的影响

取昆明种小白鼠60只，雌性，体重在22±2g，按体重随机分为6组。分别为空白对照组、模型组、总酸浆苦素(高、中、低剂量组)和甲氨喋呤(MTX)阳性对照组。各组分别灌胃给药，每日1次，共7天。

各实验组除空白对照组外，自给药前3天开始，给每只小鼠ip已烯雌酚，每次0.2mg，每日1次，连续注射3天，使所有小鼠处于雌激素期。然后各组灌胃给药，均每天1次，连续用药7天。在用药期间，每间隔2天称量体重1次，以调整给药量。为了避免细胞有丝分裂的日夜节律影响，最后1次给药时间统一在上午8时，上午9时每鼠腹腔注射秋水仙碱2mg/kg。使有丝分裂停止于M期的中期以便于计数。完成造模后，下午2时脱颈处死小鼠，取阴道标本，用4％多聚甲醛固定，石蜡包埋，HE染色。

在光学显微镜下观察细胞有丝分裂，先计算出300个基底细胞的有丝分裂数，然后核算出每100个细胞的有丝分裂数，称为有丝分裂指数，见表6和图5。

表6不同活性成分对小鼠阴道上皮细胞有丝分裂的影响

注：vs模型组，*P<0.05，**P<0.01。

从表6可知，各给药组同模型组相比，甲氨喋呤阳性对照组、总酸浆苦素(高、中、低剂量组)对小鼠阴道上皮有丝分裂抑制作用具有显著性。在光学显微镜下观察显示(图5)：有丝分裂细胞主要分布在基底层，氨甲喋吟组表达最弱；基底细胞核浓缩，形态异常，基底膜缺失，模型组表达最强。

(2)对小鼠阴道上皮PCNA表达的影响

取昆明种小白鼠60只，雌雄各半，体重在22±2g，按体重随机分为6组，每组10只。分别为模型组、空白对照组、甲氨喋呤(MTX)阳性对照组、总酸浆苦素高、中、低剂量组。各组分别灌胃给药，每日1次，共10天。

各实验组除空白对照组外，自给药前3天开始，给每只小鼠ip已烯雌酚，每次0.2mg，每日1次，连续注射3天，使所有小鼠处于雌激素期。然后各组灌胃给药，均每天1次，连续用药7天。在用药期间，每间隔2天称量体重1次，以调整给药量。为了避免细胞有丝分裂的日夜节律影响，最后1次给药时间统一在上午8时，上午9时每鼠腹腔注射秋水仙碱2mg/kg。使有丝分裂停止于M期的中期以便于计数。完成造模后，下午2时脱颈处死小鼠，取阴道标本，用4％多聚甲醛固定，石蜡包埋，SABC法染色。

PCNA染色方法(SABC法)

石蜡切包埋→切片—常规脱蜡至水→3％H2O去离子水(无色液体)孵育10min，以消除内源性过氧化物酶活性→蒸馏水冲洗，PBS浸泡5min→热修复抗原，将切片浸入0.01M枸橼酸盐缓冲液(pH6.0)，微波炉加热至沸腾后断电，间隔10min后，反复2次。冷却后0.1MPBS洗涤2次→抗原修复液I进一步暴露抗原增强某些指标染色，滴加在切片上室温5-10min后，用0.1M PBS洗涤2次→滴加试剂A(蓝色液体)室温孵育15min，倾去，不洗→滴加适当比例稀释的一抗PCNA(1：100)→40℃冰箱过夜→PBS冲洗，3min，3次→滴加试剂B(黄色液体)，室温或37℃孵育15分钟→PBS冲洗，3min，3次→滴加试剂C(橙色液体)，室温或37℃孵育15min→PBS冲洗，3min，3次→显色剂显色DAB，取1mL蒸馏水加试剂盒中A，B，C试剂各1滴，混匀后加至切片室温显色，镜下控制反应时间→自来水充分冲洗→脱水、透明→光学树胶封片。

每张切片随机取50个高倍视野，所选视野细胞生长均匀，以细胞核有棕黄色颗粒物质沉积为阳性细胞，阳性细胞数与该视野细胞总数之比即为阳性指数(PI)。阳性细胞<20％为1；20％-50％为2；>50％为3。参照Garcia等评分方法，按染色强度比例将细胞核浅着色定为1，深着色边界清定为2。再将以上两项相加＝2为+；＝3为++；≥4为+++(二级评分法)。用卡方检验进行统计学处理。P<0.05时两组间差异有显著性。染色情况见图6，数据结果见表7。

表7不同活性成分对小鼠阴道上皮细胞PCNA的影响

注：vs模型组，*P<0.05，**P<0.01。

从表7可知，各给药组同模型组相比，甲氨喋呤阳性对照组及总酸浆苦素高、中、低剂量组小鼠阴道上皮PCNA表达均明显减少，且具有显著性。

实施例9总酸浆苦素抗搔痒作用

取豚鼠48只，雌雄各半，体重在300～450g之间，随机分为6组，分别为空白对照组、总酸浆苦素高、中、低三个剂量组、阳性药扑尔敏组和阳性药消银片组。实验前各组动物均剪去后腿部毛，面积约3cm²；次日，用细砂纸擦伤皮肤，1小时后，各组均口服给药，50min后，用0.35％磷酸组织胺30μL涂抹擦伤皮肤，5min内豚鼠如不出现舔擦伤皮肤动作，再涂抹一次组织胺，如此重复操作，直到出现为止，并记录涂抹组织胺次数及累计用量，结果见表8。

表8总酸浆苦素对组织胺所致豚鼠皮肤搔痒的影响(

n＝8)

注：vs空白对照组，*P<0.05，**P<0.01。

由表8结果可知，各给药组与空白对照组比较，除消银片无明显的差异性外，其余各给药组在涂抹组织胺次数、用量上均比空白对照组明显增加，以扑尔敏作用最强，总酸浆苦素效果较明显并呈一定的量效关系，表明锦灯笼总酸浆苦素具有显著的抗组织胺所致动物皮肤搔痒作用。

对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。

Claims (2)

1.总酸浆苦素提取物在制备治疗湿疹和银屑病药物中的应用，其特征在于，所述总酸浆苦素提取物的制备方法如下：

(1)将锦灯笼用30倍量70％的乙醇提取2次，每次2h，获得锦灯笼提取液；

(2)将浓度为8.338mg/mL～16.675mg/mL的锦灯笼提取液，以1BV/h流速缓慢通过预处理的AB-8型大孔树脂色谱柱，吸附1h，用2BV的蒸馏水以2BV/h的流速冲洗；

(3)在洗脱液Molish反应呈阴性后，用50％的乙醇进行洗脱，流速为2BV/h，收集第0.3～0.8BV间的洗脱液，减压浓缩至干，获得总酸浆苦素提取物。

2.根据权利要求1所述的总酸浆苦素提取物在制备治疗湿疹和银屑病药物中的应用，其特征在于，所述药物为凝胶剂或软膏。

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