CN110381918B

CN110381918B - 化妆品组合物

Info

Publication number: CN110381918B
Application number: CN201780086609.7A
Authority: CN
Inventors: S.沙; 汪桦; 徐哲权; M.A.斯迈尔; M.F.索卡; D.布拉特斯库
Original assignee: ELC Management LLC
Current assignee: ELC Management LLC
Priority date: 2016-12-15
Filing date: 2017-12-05
Publication date: 2022-08-30
Anticipated expiration: 2037-12-05
Also published as: US20180168316A1; WO2018111626A3; AU2017376508B2; KR102251562B1; US20200329844A1; EP3554310A1; AU2017376678B2; CA3047265C; KR102228302B1; JP2020501731A; EP3554470A4; JP6982076B2; EP3554310B1; CN110381775B; EP3554470B1; AU2017376508A1; JP6934942B2; CN110381775A; WO2018111629A1; CA3047265A1

Abstract

局部组合物，包含聚合物、高分子量透明质酸（HWM HA）和/或其盐、低分子量透明质酸（LWM HA）和/或其盐、以及聚氨基酸和/或其盐；和水，以及鉴别与此类成分组合时形成微网结构的测试聚合物的方法。

Description

化妆品组合物

技术领域

本发明属于用于局部施用于角蛋白表面以便提供诸如改善角质层的完整性与厚度和促进皮肤卫生与健康的益处的化妆品组合物的领域。

发明背景

皮肤具有两个主要层：表皮和真皮。表皮是皮肤的最外层。真皮是皮肤的下一层，含有向皮肤提供强度的胶原和弹性蛋白纤维，并且其中存在皮肤脉管系统和神经。表皮有五层。最外层是角质层，接着是透明层、颗粒层、棘细胞层，最后是作为紧挨着真皮层的最深层的基底层。基底层含有连续分裂并形成新的角质形成细胞以替代正在脱落的那些角质形成细胞的细胞。基底层还含有产生皮肤颜色的黑素细胞。棘细胞层含有在基底层中形成的角蛋白产生细胞。颗粒层中产生角蛋白和其它生物材料并有助于皮肤防水。透明层存在于较厚的皮肤中，并由扁平的死细胞形成。其减少了角质层与颗粒层之间的摩擦。

角质层主要负责皮肤的屏障功能。曾经一度认为角质层是生物惰性的。但是，现在人们认识到，尽管构成角质层的角质细胞（已经角化的角质形成细胞）是死细胞，其仍具有复杂的化学与物理生物性。保持健康的角质层对获得健康皮肤及其相关的富有吸引力的外观至关重要。

角质层的结构通常类似于“砖浆”类型的构造，其中角质细胞形成砖。大约12至16层的角质细胞与由角蛋白线体组成的组织化基质一起形成蛋白复合物，该组织化基质可以在线体之间保留相当量的水。通常，各角质细胞具有大约1微米的直径，该直径可能根据个体的年龄、暴露于环境条件或其它因素而变化。角质形成细胞在基底层中增殖并穿过表皮层迁移至皮肤表面，替代变得角化的角质形成细胞。当角质形成细胞迁移穿过棘细胞层和颗粒层时，在其中形成层状体。当它们成熟为角质层时，酶降解层状体的外包膜以释放游离脂肪酸和神经酰胺并在角质层中融合在一起以形成含有连续脂质层的角化包膜。由于存在两种类型的脂质，该层被称为层状脂质双层。这种双层在保持皮肤的屏障性能方面起主要作用，并且通常在砖浆类比中指代为灰浆组分。角质细胞被细胞包膜包围，该细胞包膜主要由蛋白质兜甲蛋白和内披蛋白组成，其含有大规模的键以生成不溶性屏障。与细胞包膜接合的是排斥水的一层神经酰胺脂质。由于层状脂质双层也排斥水，水分子保持在细胞包膜脂质与脂质双层之间。这有助于通过捕获水分子而不是让它们吸收到表皮的下层中来保持角质层中的水平衡。这些蛋白含有彼此之间的大规模的键，使得细胞包膜成为角质细胞的最不可溶的结构。使角质细胞保持在一起的“铆钉”是称为角质桥粒的特殊的蛋白结构，其是在称为脱屑的过程中必须降解以使皮肤脱落的主要结构。天然保湿因子（NMF）是仅存在于角质层中的水溶性化合物的集合。这些化合物占角质细胞干重量的大约20至30%。NMF组分从大气中吸收水并使其与它们自身的水含量结合，使得尽管暴露于元件（elements），角质层的最外层仍保持水合。由于NMF组分是水溶性的，它们容易从与水接触的细胞中浸出，这就是为什么反复接触水实际上会令皮肤更干燥的原因。包围角质细胞的脂质层有助于密封角质细胞以防止NMF损失。

角质层的脱屑或剥落过程实际上非常复杂，并且仅为充分理解的该过程的一部分。已知的是，几种酶以特定模式降解角质桥粒。虽然已知水和pH在启动剥落过程所需的酶的活化中起重要作用，但启动剥落过程所需的酶和活化的确切属性仍然未知。

因此，人们对配制局部施用于皮肤的产品非常感兴趣，该产品将修正、补充和维持皮肤屏障功能，尽量减少NMF的损失，并补充皮肤的角质形成细胞生成和角质化的自然生物过程以优化健康皮肤的外观。

已经发现，通过配制含有特定成分的局部产品，可以显著增强和增厚表皮的角质层和下方的层，所述成分彼此相互作用以便以彼此相连形成网络的互锁球的三维结构形式形成微网状结构。

发明概述

本发明涉及一种局部组合物，其包含：

- 聚合物（如下文第II节中所定义），

- 高分子量透明质酸（HWM HA）和/或其盐，

- 低分子量透明质酸（LWM HA）和/或其盐，和

- 聚氨基酸和/或其盐；和

- 水。

本发明还涉及配制含有微网（如下文中所定义）的局部组合物的方法，其包括以下步骤：

将测试聚合物与至少一种LWM HA、至少一种HWM HA、聚氨基酸盐和水组合；

使用SEM确定是否形成微网；

选择形成微网的聚合物；和

配制含有相同成分组合的局部产品，其以与当测试聚合物、LMW HA、HMW HA、聚氨基酸和水单独组合时所获得的相同的比率和百分比形成微网。

附图说明

图1A：显示了实施例1中制得的微网水凝胶的SEM图像。

图1B：显示了实施例1中制得的微网水凝胶的SEM图像，用于更近地观察微网结构。

图2A：显示了实施例2中制得的组合物2的SEM图像。

图2B：显示了实施例2中制得的组合物2的SEM图像，用于更近地观察其结构。

图3A：显示了实施例2中制得的组合物3的SEM图像。

图3B：显示了实施例2中制得的组合物3的SEM图像，用于更近地观察其结构。

图4A：显示了实施例2中制得的组合物4的SEM图像。

图4B：显示了实施例2中制得的组合物4的SEM图像，用于更近地观察其结构。

图5A：显示了实施例2中制得的组合物5的SEM图像。

图5B：显示了实施例2中制得的组合物5的SEM图像，用于更近地观察其结构。

图6A：显示了实施例2中制得的组合物6的SEM图像。

图6B：显示了实施例2中制得的组合物6的SEM图像，用于更近地观察其结构。

图7A：显示了实施例2中制得的组合物7的SEM图像。

图7B：显示了实施例2中制得的组合物7的SEM图像，用于更近地观察其结构。

图8A：显示了实施例2中制得的组合物8的SEM图像。

图8B：显示了实施例2中制得的组合物8的SEM图像，用于更近地观察其结构。

图9A：显示了实施例2中制得的组合物9的SEM图像。

图9B：显示了实施例2中制得的组合物9的SEM图像，用于更近地观察其结构。

图10A：显示了实施例2中制得的组合物10的SEM图像。

图10B：显示了实施例2中制得的组合物10的SEM图像，用于更近地观察其结构。

图11A：显示了实施例2中制得的组合物11的SEM图像。

图11B：显示了实施例2中制得的组合物11的SEM图像，用于更近地观察其结构。

图12：显示了实施例3中制得的组合物12的SEM图像。

图13：显示了实施例3中制得的组合物13的SEM图像。

图14：显示了实施例3中制得的组合物14的SEM图像。

图15：显示了实施例3中制得的组合物15的SEM图像。

图16：显示了实施例3中制得的组合物16的SEM图像。

图17：显示了实施例3中制得的组合物17的SEM图像。

图18A：显示了实施例4中制得的组合物18的SEM图像。

图18B：显示了实施例4中制得的组合物18的SEM图像，用于更近地观察其结构。

图19A：显示了实施例4中制得的组合物19的SEM图像。

图19B：显示了实施例4中制得的组合物19的SEM图像，用于更近地观察其结构。

图20A：显示了实施例4中制得的组合物20的SEM图像。

图20B：显示了实施例4中制得的组合物20的SEM图像，用于更近地观察其结构。

图21A：显示了实施例4中制得的组合物21的SEM图像。

图21B：显示了实施例4中制得的组合物21的SEM图像，用于更近地观察其结构。

图22A：显示了实施例4中制得的组合物22的SEM图像。

图22B：显示了实施例4中制得的组合物22的SEM图像，用于更近地观察其结构。

图23A：显示了实施例4中制得的组合物23的SEM图像。

图23B：显示了实施例4中制得的组合物23的SEM图像，用于更近地观察其结构。

图24A：显示了实施例4中制得的组合物24的SEM图像。

图24B：显示了实施例4中制得的组合物24的SEM图像，用于更近地观察其结构。

图25：显示了实施例4中制得的组合物18的网格尺寸分布图。

图26：显示了实施例4中制得的组合物19的网格尺寸分布图。

图27：显示了实施例4中制得的组合物20的网格尺寸分布图。

图28：显示了实施例4中制得的组合物21的网格尺寸分布图。

图29：显示了实施例4中制得的组合物22的网格尺寸分布图。

图30：显示了实施例4中制得的组合物23的网格尺寸分布图。

图31：显示了实施例4中制得的组合物24的网格尺寸分布图。

图32：显示了组合物25和26对眼下区域中角质层厚度的影响。

图33：显示了施用组合物25（A、B、C）和组合物26（D、E、F）后4小时眼下区域的角质层（A、D、E）和颗粒层（B、C、F）的所记录的图像。视野：0.5mm×0.5mm。

发明详述

I．定义

除非另行说明，否则本文中提及的所有百分比是重量百分比。

本文中提及的所有文献经此引用以其全文并入本文。

“自体吞噬”是指细胞通过在碎片周围形成膜，将其与细胞其余部分隔离并将所形成的液泡与细胞溶酶体（其是含有酸性水解酶的细胞器，该酸性水解酶分解液泡中存在的细胞碎片和废物）接合从而自身清除毒素和碎片的过程。

“自体吞噬活化剂”是指刺激正常细胞自体吞噬过程的成分。

“CLOCK基因活化剂”是指活化角质形成细胞中存在的一种或多种CLOCK基因的成分。

术语“DNA修复酶”是指可操作以修复DNA碱基诱变损伤的酶。此类酶通常根据它们修复的DNA损伤的类型来分类，例如BER（碱基切除修复）酶；核苷酸切除修复（NER）酶；错配修复（MMR）酶；DNA解旋酶；DNA聚合酶等等。例如，诸如8-氧代-7,8-二氢-2’-脱氧鸟苷的突变可以通过OGG1（8-氧代鸟嘌呤糖基化酶）来修复；T-T二聚体（其可以通过核苷酸切除修复(NER)光裂合酶来修复）；6-4光产物（其可以通过NER来修复）；和06-甲基鸟嘌呤（其可以通过06-烷基鸟嘌呤转移酶(AGT)来修复）。

“微网”是指具有膜状外壁的三维球形结构，其互锁连结以形成网络。球形结构的膜状外壁在球内形成内部空间，该内部空间将周边环境与互锁球的内容物隔离。在一个优选实施方案中，当组合聚合物、LMW HA、HMW HA、聚氨基酸盐与水时形成的球形结构的大约80至90%具有0.001至1000 μm²的二维面积和0.001至50微米的直径。

术语“水凝胶”是指向聚合物、LMW HA、HMW HA和聚氨基酸盐的混合物中加入水时形成的凝胶，其中水将填充形成的三维球之间的空间，由此形成凝胶。

术语“扫描电子显微镜（SEM）”是指显微镜用聚焦的电子束扫描样品，并递送具有关于样品形貌和组成的信息的图像。

“PER1基因活化剂”是指活化角质形成细胞中存在的一种或多种PER1基因的成分。

“蛋白酶体”是指通常位于细胞的细胞核或细胞质中的蛋白复合物，其通过蛋白水解成较小的亚单位，所述较小的亚单位可随后进一步消解成单个氨基酸而可操作以降解受损的细胞蛋白。这些再循环氨基酸可以由细胞用于合成新的蛋白。

“蛋白酶体活化剂”是指刺激角蛋白表面的细胞（如角质形成细胞、成纤维细胞等等）中的蛋白酶体的活性的活性成分。

“再循环”就细胞碎片和毒素的降解而言是指碎片和毒素可以分解成分子，如蛋白、脂质、氨基酸或由细胞在其正常健康代谢过程中可使用的其它生物材料。

“修复”就皮肤细胞而言是指减少或消除细胞（如DNA、线粒体、蛋白、脂质或其它细胞材料）的受损部分。

“选择性分解代谢”就角蛋白表面的细胞而言是指该细胞能够自身选择性清除碎片、废物和毒素，而不会损害健康的细胞成分，并优选通过诸如活化细胞自体吞噬或活化细胞蛋白酶体过程的机制中的一种或多种来实现。

II．局部组合物

该局部组合物包含下文所述的成分。该局部组合物可以为乳液、水溶液或分散体、凝胶、或无水组合物的形式。如果为乳液形式，其可以是油包水或水包油乳液。如果为乳液形式，该组合物可以含有大约1-99%、优选大约5-90%、更优选大约10-85%的水和大约1-99%、优选大约5-90%、更优选大约5-75%的油。如果为水性悬浮液或水性分散体的形式，该组合物通常可以含有大约1-99.9%、优选大约5-95%、更优选大约10-90%的水，剩余成分是活性成分或其它配方成分。

A．聚合物（所述“聚合物”）

该局部组合物包含至少一种如本文中进一步限定的聚合物。该聚合物的建议量可以为总组合物重量的0.001至10%、优选0.01至5%和更优选0.05至1.0%。除了下文列举的聚合物之外，形成所需微网结构的其它合适的聚合物可以通过将测试聚合物与LMW HA、HMWHA、聚氨基酸和水组合并确定组合的成分是否形成如本文中所定义并如附图中所展示的微网来鉴别。

提及聚合物、LMW HA、HMW HA和聚氨基酸还将包括相应的碱金属或碱土金属盐（包括但不限于钠、钾等等）。

(1) 吸水性丙烯酸类树脂或甲基丙烯酸类树脂

一种合适的聚合物是美国专利申请公开号2016-0030328中公开的吸水性聚合物。这种聚合物可以获自单体(A)、(B)和(C)的聚合：

(i) 组分(A)是含磷酸酯的丙烯酸类单体或甲基丙烯酸类单体。只要单体具有磷酸酯基团和丙烯酸基团或甲基丙烯酸基团，用于连接这两个基团的键的结构没有特殊限制。示例性的键包括亚烷基基团，如亚甲基、亚乙基和亚丙基，以及氧亚烷基基团，如氧亚乙基、氧亚丙基、氧亚丁基、氧亚戊基及其混合物。其中，聚氧亚烷基基团是优选的，聚氧亚丙基是最优选的。该单体是市售的，例如可以以商品名Sipomer PAM-200购自Rhodia。

还包括含磷酸酯的丙烯酸类单体或甲基丙烯酸类单体的盐，其可以通过向含磷酸酯的丙烯酸类单体或甲基丙烯酸类单体中加入碱性水溶液来形成。

(ii) 组分(B)是不同于组分(A)的在分子中具有一个丙烯酸基团或甲基丙烯酸基团的单体。合适的单体包括丙烯酸、甲基丙烯酸、马来酸、马来酸酐、富马酸、巴豆酸、衣康酸、2-(甲基)丙烯酰胺-2-甲基丙磺酸、(甲基)丙烯酰氧基链烷磺酸、N-乙烯基-2-吡咯烷酮、N-乙烯基乙酰胺、(甲基)丙烯酰胺、N-异丙基(甲基)丙烯酸酯、N,N-二甲基(甲基)丙烯酰胺、2-羟乙基(甲基)丙烯酸酯、甲氧基聚乙二醇(甲基)丙烯酸酯、聚乙二醇(甲基)丙烯酸酯和丙烯酸硬脂基酯。可以通过向(甲基)丙烯酸类单体中加入碱性水溶液来形成单体的盐。

“盐”包括碱金属盐如钠、钾和锂，碱土金属盐如钙、镁和钡，以及铵盐如季铵和季烷基铵。其中，钠盐是最常见和优选的。中和处理优选在10至100℃、更优选20至90℃的温度下进行。丙烯酸或聚合后的聚丙烯酸可以用碱中和。聚合之前的中和是优选的，因为在聚合后将未中和或低中和（特别是小于30摩尔%的中和度）的聚丙烯酸后中和是耗时的。基于聚合物中酸基团的摩尔数，本发明的吸水性聚合物优选具有0.01至100%、更优选1至90%和甚至更优选20至80%的中和度。

(iii) 组分(C)是在两端具有(甲基)丙烯酸基团的有机聚硅氧烷，由通式(1)表示：

其中R¹各自独立地为具有1至8个碳原子的不含脂族不饱和度的一价烃基团。R²是具有通式(2)的含有聚氧亚烷基基团的基团：

其中R⁴各自独立地为具有2至15个碳原子的二价有机基团，x和y各自是0至30的整数，满足1≤ x+y ≤50，R³是具有(甲基)丙烯酸基团的取代基，a是包含0的整数，b是至少1的整数。

由R¹代表的一价烃基团的实例包括烷基如甲基、乙基和丁基，环烷基如环戊基和环己基，芳基如苯基和甲苯基，以及芳烷基如苄基和苯乙基。其中，1至4个碳原子的烷基和苯基是优选的，甲基是最优选的。

在式(2)中，R⁴各自独立地选自具有2至15个碳原子的二价有机基团，例如-(CH₂)₂-、-(CH₂)₃-、-(CH₂)₄-、-CH₂CH(CH₃)CH₂-、-(CH₂)₈-、和-(CH₂)₁₁-。其中，-(CH₂)₂-、-(CH₂)₃-和-(CH₂)₄-是优选的。x和y各自是0至30的整数，满足1≦x+y≦50。x和y各自优选为5至25、更优选10至20的整数，并且x+y之和为10至45、更优选20至40。

优选的合适的吸水性聚合物是聚丙烯酸钠交联聚合物-1，其为通过甲基丙烯酸和甲基丙烯酰基PPG-6磷酸酯的聚合获得的交联聚合物，和通过使含有氢化硅基团的甲基丙烯酸酯封端的聚二甲基硅氧烷聚合物与PEG-18/PPG-17烯丙醚反应制备的有机硅共聚物。

(2) 丙烯酰基二甲基牛磺酸盐的共聚物

同样合适的是由部分成盐或完全成盐的2-甲基-2-[(1-氧代-2-丙烯基)氨基]-1-丙磺酸与至少一种选自丙烯酰胺、丙烯酸(2-羟乙基)酯或N,N-二甲基丙烯酰胺的中性单体和至少一种式(I)的单体在至少一种交联剂的存在下的聚合获得的增稠聚合物：

其中R代表具有8至20个碳原子的直链或支链的烷基，并且n代表大于或等于1且小于或等于20的数字，所述式(I)的单体选自四乙氧基化甲基丙烯酸月桂基酯或二十乙氧基化甲基丙烯酸硬脂基酯。在美国专利申请公开号2012/0172457（其也经此引用以其全文并入本文）中记载了该聚合物。

一种优选的合适的增稠聚合物是丙烯酰基二烷基牛磺酸铵、二烷基丙烯酰胺、甲基丙烯酸月桂基酯和月桂醇聚醚-4甲基丙烯酸酯的共聚物，其与三羟甲基丙烷三丙烯酸酯交联。

最优选的是INCI名称为聚丙烯酸酯交联聚合物-6的聚合物，其可以以商品名SepiMAX Zen购自Seppic Inc。聚丙烯酸酯交联聚合物-6是丙烯酰基二甲基牛磺酸铵、二甲基丙烯酰胺、甲基丙烯酸月桂基酯和月桂醇聚醚-4甲基丙烯酸酯的共聚物，其与三羟甲基丙烷三丙烯酸酯交联。

(3) 丙烯酸酯交联有机硅共聚物

同样合适的是丙烯酸酯交联有机硅共聚物，其含有至少一个聚醚取代的结构单元和至少一个环氧或环氧乙烷结构单元，其与丙烯酸酯反应以产生含有聚醚取代的结构网络和丙烯酸酯交联键的交联有机硅。此类聚合物公开在美国专利号7,687,574和7,833,541中，其经此引用以其全文并入本文。

特别地，该聚合物可以是以下物质的反应产物：

1) M_aM^H _b-h-kM^PE _hM^E _kD_cD^H _d-i-lD^PE _iD^E _lT_eT^H _f-j-mT^PE _jT^E _mQ_g和

2) 化学计量或超化学计量的量的丙烯酸酯，其中

M=R¹R²R³SiO_1/2；

M^H=R⁴R⁵HSiO_1/2；

M^PE=R⁴R⁵(-CH₂CH(R⁹)(R¹⁰)_nO(R¹¹)_o(C₂H₄O)_p(C₃H₆O)_q(C₄H₈O)_rR¹²)SiO_1/2；

M^E=R⁴R⁵(-R¹⁷R¹⁸C-CR¹⁶Q_sQ_tR¹⁵(COC)R¹³R¹⁴)SiO_1/2

D=R⁶R⁷SiO_2/2；和

D^H=R⁸HSiO_2/2

D^PE=R⁸(-CH₂CH(R⁹)(R¹⁰)_nO(R¹¹)_o(C₂H₄O)_p(C₃H₆O)_q(C₄H₈O)_rR¹²)SiO_2/2

D^E=R⁸(-R¹⁷R¹⁸C-CR¹⁶Q_sQ_tR¹⁵(COC)R¹³R¹⁴)SiO_2/2；

T=R¹⁹SiO_3/2；

T^H=HSiO_3/2；

T^PE=(-CH₂CH(R⁹)(R¹⁰)_nO(R¹¹)_o(C₂H₄O)_p(C₃H₆O)_q(C₄H₈O)_rR¹²)SiO_3/2；

T^E=(-R¹⁷R¹⁸C-CR¹⁶Q_sQ_tR¹⁵(COC)R¹³R¹⁴)SiO_3/2；和

Q=SiO_4/2；

其中R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸和R¹⁹各自独立地选自具有1至60个碳原子的一价烃基团；

R⁹是H或1至6个碳原子的烷基；R¹⁰是1至6个碳的二价烷基；

R¹¹选自由-C₂H₄O-、-C₃H₆O-和-C₄H₈O-组成的二价基团的组；R¹²是H、1至6个碳的单官能烃基团、或乙酰基；R¹³、R¹⁴、R¹⁵、R¹⁶、R¹⁷和R¹⁸各自独立地选自氢和具有1至60个碳原子的一价烃基团，Q_t是具有1至60个碳原子的二价或三价烃基团，

Q^s是具有1至60个碳原子的二价烃基团，限制条件是当Q_t为三价时，R¹⁴不存在，并且R¹⁶和R¹⁸可以彼此为顺式或反式；

下标a可以为0或正数，限制条件是当下标a为0时，b必须为正数；

下标b可以为0或正数，限制条件是当b为0时，下标a必须为正数；

下标c为正数并具有大约5至大约1,000的值；

下标d为正数并具有大约3至大约400的值；

下标e为0或正数并具有0至大约50的值；

下标f为0或正数并具有0至大约30的值；

下标g为0或正数并具有0至大约20的值；

下标h为0或正数并具有0至大约2的值，限制条件是下标h、i和j之和为正数；

下标i为0或正数并具有0至大约200的值，限制条件是下标h、i和j之和为正数；

下标j为0或正数并具有0至大约30的值，限制条件是下标h、i和j之和为正数；

下标k为0或正数并具有0至大约2的值，限制条件是下标k、l和m之和为正数；

下标l为0或正数并具有0至大约200的值，限制条件是下标k、l和m之和为正数；

下标m为0或正数并具有0至大约30的值，限制条件是下标k、l和m之和为正数；

下标n为0或1；

下标o为0或1；

下标p为0或正数并具有0至大约100的值，限制条件是(p+q+r)>0；

下标q为0或正数并具有0至大约100的值，限制条件是(p+q+r)>0；

下标r为0或正数并具有0至大约100的值，限制条件是(p+q+r)>0；

下标s为0或1；

下标t为0或1；和

3) 自由基引发剂。

优选的合适的聚合物是聚丙烯酸酯交联聚合物-7，其是甲基丙烯酸酯PPG-6磷酸酯与一种或多种丙烯酸、甲基丙烯酸或其简单酯之一的单体的共聚物，与聚二甲基硅氧烷PEG/PPG-25/29丙烯酸酯交联。

(4) 阴离子多糖

同样合适的是一种或多种天然衍生的阴离子多糖，包括海藻酸或其钠盐。

更优选的合适的天然阴离子多糖是海藻酸钠。

B．低分子量透明质酸和高分子量透明质酸

该化妆品组合物包含至少一种LMW HA和至少一种HMW HA。优选LMA HA与HMW HA的重量比可以为大约100:1至1:100、优选大约50:1至1:50、更优选大约15:1至1:15。

(1) 高分子量透明质酸

HMW HA具有大约8×10⁵道尔顿至1×10⁷道尔顿、优选1×10⁶道尔顿至8×10⁶道尔顿、更优选1.2×10⁶道尔顿至3×10⁶道尔顿的分子量。HMW HA可以是合成的，或其可以通过经由在发酵过程中发酵酵母（如酵母菌）的生物技术处理而获得。适用于所要求保护的组合物的HMW HA可以以透明质酸为名购自Contipro Biotech s.r.o.，其钠盐具有INCI名称透明质酸钠。

HMW HA的建议范围可以为总组合物重量的大约0.001至10%、优选大约0.005至5%和更优选大约0.01至1.5%。

(2) 低分子量透明质酸（LMW HA）

LMA HA或其盐的分子量可以为大约1 ×10³道尔顿至8×10⁵道尔顿、优选5×10³道尔顿至1×10⁵道尔顿、更优选8×10³道尔顿至5×10⁴道尔顿。LMW HA也可以是合成的，或其可以通过经由来自发酵过程的酵母（如酵母菌）发酵的生物技术处理而获得。适用于所要求保护的组合物的透明质酸可以以HyActive粉末为名购自Contipro Biotech s.r.o.，其INCI名称为透明质酸钠。

LMW HA的建议范围为总组合物重量的大约0.001至10%、优选大约0.005至5%和更优选大约0.01至1.5%。

C．氨基酸均聚物或共聚物或其盐

该化妆品组合物包含至少一种由聚氨基酸和/或其盐组成的聚合物。聚氨基酸的建议范围为总组合物重量的大约0.001至10%、优选0.005至5%和更优选0.01至1%。此类聚合物包括美国专利号3,867,352中公开的那些。

最优选的是具有以下重复单元的天冬氨酸，钠盐的聚合物：

最优选的是INCI名称为聚天冬氨酸钠的聚合物，其分子量为2,000至6,000道尔顿、更优选3,000至5,000道尔顿。该聚合物可以以商品名Aquadew SPA-30购自Ajinomoto。

III．其它成分

该局部组合物可以含有其它成分，包括但不限于本文中列举的那些。

A．自体吞噬活化剂

本发明的组合物可以含有一种或多种成分，其可操作以活化正常细胞的自体吞噬过程。该自体吞噬活化剂以大约0.00001至20%、优选0.0001-5%、更优选大约0.001至1%的量存在。通常，细胞的自体吞噬过程包括四个一般步骤。步骤1是开始形成液泡；步骤2是形成初始液泡或自体吞噬体（其隔离待降解的细胞质材料）。步骤3是自体吞噬体成熟为降解性液泡。步骤4是隔离材料的实际降解。

具有自体吞噬活化活性的成分可以通过它们刺激或抑制各种细胞代谢途径的能力来鉴别。例如，刺激MAP-LC3、ATG5-12、蛋白p53、AMPK或DRAM的表达的成分是合适的自体吞噬活化剂。抑制mTOR的表达的成分也是合适的自体吞噬活化剂。

基因MAP-LC3编码微管相关蛋白1轻链3——一种启动自体吞噬体形成的蛋白。ATG5-12也刺激自体吞噬体的形成。mTOR（也称为雷帕霉素的哺乳动物靶标）也被称为雷帕霉素或FK506结合蛋白12-雷帕霉素相关蛋白1（FRAP1）的机制性靶标。FRAP1通过FRAP基因编码。抑制mTOR的表达的任何成分（参与自体吞噬体生成）将具有自体吞噬活化性质。同样适合作为自体吞噬活化剂的是刺激角质形成细胞中的蛋白p53、AMPK和/或DRAM（损害补救自体吞噬调节蛋白）的表达的成分。蛋白p53（也被称为肿瘤抑制蛋白）通过p53基因编码。AMPK是指AMP活化蛋白激酶和DRAM，损害相关的自体吞噬调节剂。已知二者均刺激角质形成细胞中的自体吞噬活化。

由此，对所述基因具有上述作用的任何成分可以是合适的自体吞噬活化剂。在自体吞噬过程期间，细胞碎片如氧化蛋白和过氧化脂质被降解。此类细胞碎片通常影响正常的代谢功能。通过上文提及的刺激或抑制细胞（优选角质形成细胞）、基因和/或蛋白的能力筛选成分以确定效力可以根据如美国专利公开号2011/0243983中记载的方法或本领域中已知的其它方法来进行。

例如，用于鉴别可能是自体吞噬活化剂的成分的一种通用方法是通过首先在培养细胞如角质形成细胞中诱导营养应激。例如，细胞首先在含有生长因子的完全培养基中培养大约24小时。随后移除该培养基，并代之以非营养培养基（例如，不含生长因子的培养基）。细胞在营养应激状态下培养大约30分钟至大约25小时。随后，移除非营养培养基并代之以完全培养基以促进细胞恢复。随后，通过在那些细胞中测量MAP-LC3；ATGS-12；磷酸化mTOR；磷酸化p53；DRAM；或磷酸化AMPK中的一种或多种的表达来评价细胞的自体吞噬活性。此类表达的测量可以通过免疫荧光测量来进行。此外，该表达可以通过与表达的基因相关的磷酸化蛋白的Western印迹分析来验证。

已知对上文提及的基因施加刺激或抑制作用（这转而又刺激自体吞噬）的成分的实例是酵母提取物，其包括但不限于来自诸如以下种属的那些：石枝藻属（Lithothamnium）、草木樨属植物（Melilot）、柑橘属植物（Citrus）、念珠菌属（Candida）、兵豆属（Lens）、荨麻属（Urtica）、杨桃属（Carambola）、苦瓜属（Momordica）、耶氏酵母属（Yarrowia）、白花丹属植物（Plumbago）等等。进一步的具体实例包括嗜钙石枝藻（Lithothamniumn calcareum）、黄香草木樨（Melilotus officinalis）、香橼（Citrus limonum）、齐藤假丝酵母（Candida saitoana）、兵豆（Lens culinaria）、大荨麻（Urtica dioica）、杨桃（Averrhoa carambola）、苦瓜（Momordica charantia）、解脂耶氏酵母（Yarrowia lipolytica）、白花丹（Plumbago zeylanica）等等。

同样合适的是以下成分，如盐酸胺碘酮，GF 109203X，其也被称为(3-(N-[二甲基氨基]丙基-3-吲哚基)-4-(3-吲哚基)马来酰亚胺、 3-[1-[3-(二甲基氨基)丙基]1H-吲哚-3-基]-4-(1H吲哚-3-基)1H-吡咯-2,5二酮、双吲哚马来酰亚胺I；N-己酰基-D-鞘氨醇；氯硝柳胺；来自吸水链霉菌（Streptomyces hygroscopicus）的雷帕霉素；咖马林（Rottlerin），其也被称为（1-[6-[(3-乙酰基-2,4,6-三羟基-5-甲基苯基)甲基]-5,7-二羟基-2,2-二甲基-2H-1-苯并吡喃-8-基]-3-苯基-2-丙烯-1-酮、粗糠柴毒）；STF-62247，也被称为5-吡啶-4-基-噻唑-2-基-m-甲苯基-胺；他莫昔芬（Tamoxifen）；西罗莫司（Temsirolimus），其也被称为42-[3-羟基-2-甲基丙酸酯、CCI-779、雷帕霉素；ATG1自体吞噬相关1同系物；ATG1，丝氨酸/苏氨酸-蛋白激酶 ULK1，UNC-51-样激酶；或Z36，其也被称为((Z)-5-氟-1-(3'-二甲基氨基)丙基-3-[(5'-甲氧基吲哚-3-亚基)甲基]-吲哚啉-2-酮；或1-[3-(二甲基氨基)丙基]-5-氟-1,3-二氢-3-[(5-甲氧基-1H-吲哚-3-基)亚甲基]-2H-吲哚-2-酮；蟾蜍灵（Bufalin），也被称为3β,14-二羟基-5β,20(22)- 蟾蜍二烯羟酸内酯、5β,20(22)-蟾蜍二烯羟酸内酯-3β,14-二醇。此类成分可以购自Sigma-Aldrich Chemical Company。

B．蛋白酶体活化剂

该组合物可以以大约0.0001至65%、优选大约0.0005至50%、更优选大约0.001至40%的量含有一种或多种蛋白酶体活化剂。

合适的蛋白酶体活化剂是刺激角蛋白表面的细胞中的蛋白酶体活性的任何化合物、分子或活性成分。

合适的蛋白酶体活化剂的实例包括但不限于藻胶、海藻酸盐、水解藻胶、糖蜜提取物、栓菌属提取物（包括来自变色栓菌(Trametes versicolor)的提取物）、油橄榄hydroxol（olea hydroxol）。

C．CLOCK、PER1基因活化剂

本发明的组合物可以含有CLOCK或PER1细胞基因活化剂。建议范围为大约0.000001至大约40%、优选大约0.000005至35%、更优选大约0.00001至25%。合适的CLOCK或PER1活化剂可以以植物提取物、多肽、肽、氨基酸等等的形式存在。

1．肽CLOCK或PER1基因活化剂

特别优选的CLOCK和/或PER1基因活化剂包含式(I)的肽：

R₁-(AA)_n- X₁ –S – T – P – X₂ – (AA)_p– R₂

其中(AA)_n- X₁ –S – T – P – X₂ – (AA)_p为(SEQ ID No. 1)，并且：

X₁代表苏氨酸、丝氨酸，或等于0，

X₂代表异亮氨酸、亮氨酸、脯氨酸、缬氨酸、丙氨酸、甘氨酸，或等于0，

AA代表任何氨基酸或其衍生物，并且n和p是0至4的整数，

R₁代表游离的或被保护基团取代的N端氨基酸的伯胺官能，该保护基团可以选自乙酰基、苯甲酰基、甲苯磺酰基或苄氧羰基，

R₂代表被保护基团取代的C端氨基酸的羧基官能的羟基，该保护基团可以选自C1至C20烷基链或NH₂、NHY或NYY基团，其中Y代表C1至C4烷基链，

其中通式(I)的序列包含大约3至13个氨基酸残基，所述通式(I)的序列可能包含用其它化学等价氨基酸取代氨基酸X₁和X₂；其中该氨基酸是：丙氨酸(A)、精氨酸(R)、天冬酰胺(N)、天冬氨酸(D)、半胱氨酸(C)、谷氨酸(E)、谷氨酰胺(Q)、甘氨酸(G)、组氨酸(H)、异亮氨酸(I)、亮氨酸(L)、赖氨酸(K)、甲硫氨酸(M)、苯丙氨酸(F)、脯氨酸(P)、丝氨酸(S)、苏氨酸(T)、色氨酸(W)、酪氨酸(Y)、缬氨酸(V)。更优选的是上式的肽，如下：

S –T –P – NH₂

Ser-Thr-Pro-NH₂

(SEQ ID No. 2) Y – V - S –T –P – Y– N– NH₂

Tyr-Val-Ser-Thr-Pro-Tyr-Asn-NH₂

(SEQ ID NO. 3) NH₂ –V -S –T –P –E – NH₂

NH₂-Val-Ser-Thr-Pro-Glu-NH₂

(SEQ ID No. 4) NH₂ –L -H –S –T– P – P – NH₂

NH₂-Leu-His-Ser-Thr-Pro-Pro-NH₂

(SEQ ID No. 5) CH₃NH –R -H –S –T –P –E – NH₂

CH₃-NH-Arg-His-Ser-Thr-Pro-Glu-NH₂

(SEQ ID No. 6) CH₃NH - H –S –T –P –E - CH₃NH

CH₃-NH-His-Ser-Thr-Pro-Glu-CH₃-NH

尤其是S-T-P-NH₂或NH₂ –L -H –S –T– P – P – NH₂ (SEQ ID No. 4)，或其混合物。

S-T-P-NH₂可以以商标Chronolux®获自ISP-Vinscience，其INCI名称为三肽-32。同样高度优选的是

(SEQ ID No. 7) S-P-L-Q-NH₂

Ser-Pro-Leu-Gln-NH₂

一种由ISP-Vinscience以商标Chronogen®制造的肽，其INCI名称为四肽-26。

2．植物提取物

同样适合作为CLOCK或PER1基因活化剂的是菊苣酸或其异构体或衍生物。菊苣酸可以是合成或天然衍生的。合成菊苣酸可以购自多个商业制造商（包括Sigma Aldrich）。菊苣酸还可以提取自已知含有菊苣酸的植物来源，如紫锥花属(Echinacea)、菊苣属(Cichorium)、蒲公英属(Taraxacum)、罗勒属(Ocimum)、蜜蜂花属(Melissa)，或提取自藻类或海草。更具体而言，植物提取物如紫花紫锥菊(Echinacea purpurea)、菊苣(Cichorium intybus)、西洋蒲公英(Taraxacum officinale)、罗勒(Ocimum basilicum)或蜜蜂花(Melissa officinalis)。术语“菊苣酸”用于本文时还包括其可操作以提高皮肤细胞中的PER1基因表达的任何异构体。

一个具体实例包括由Symrise以商标名Symfinity™ 1298出售的来自紫花紫锥菊的植物提取物，其是在提取过程中经标准化以含有总提取组合物的大约3重量%的菊苣酸的紫花紫锥菊提取物。来自不同来源的紫锥花属提取物的菊苣酸含量将不等，并因此在诱导PER1基因表达方面获得不同的效果。例如，我们已经观察到，通常存在于紫锥花属提取物中的另一组分（具体为咖啡酸）不会提高皮肤细胞中的PER1基因表达。此外，紫锥花属的各物种在酚醛酸和菊苣酸的含量方面均不同。紫花紫锥菊根的乙醇提取物将提供比狭叶紫锥菊(Echineacea angustifolia)或淡紫紫锥菊(Echinacea pallida)的乙醇提取物更多的菊苣酸。任何提取物中的活性成分含量还极大地取决于提取方法。例如，已知在许多情况下，提取过程中的酶促褐变将减少所得提取物的酚醛酸含量。

D．DNA修复酶

本发明的方法中使用的组合物还可以含有一种或多种DNA修复酶。建议范围为大约0.00001至大约35%、优选大约0.00005至大约30%、更优选大约0.0001至大约25%的一种或多种DNA修复酶。

美国专利号5,077,211；5,190,762；5,272,079和5,296,231（其全部经此引用以其全文并入本文）中公开的DNA修复酶适用于本发明的组合物和方法。这样的DNA修复酶的一个实例可以以商品名Roxisomes®购自AGI/Dermatics，其INCI名称为拟南芥（ArabidopsisThaliana）提取物。它可以单独或以与卵磷脂和水混合的形式存在。这种DNA修复酶已知在修复8-氧代-鸟嘌呤碱基损伤方面是有效的。

可以使用的另一类DNA修复酶是已知在修复06-甲基鸟嘌呤碱基损伤方面有效的酶。其由AGI/Dermatics以商品名Adasomes®出售，其INCI名称为乳杆菌属（Lactobacillus）发酵产物，其可以自身或以与卵磷脂和水混合的形式添加到本发明的组合物中。

可以使用的另一类DNA修复酶是已知在修复T-T二聚体方面有效的酶。该酶存在于生物材料或植物材料的混合物中。此类成分的实例由AGI/Dermatics以商品名Ultrasomes®或Photosomes®出售。Ultrasomes®包含微球菌属（Micrococcus）裂解物（微球菌属的各个物种的受控裂解的最终产物）、卵磷脂和水的混合物。Photosomes®包含浮游生物提取物（其是海洋生物质的提取物，所述海洋生物质包括下列生物体中的一种或多种：海洋浮游生物、绿色微藻、硅藻、绿蓝海藻和固氮海藻）、水和卵磷脂的混合物。

另一类DNA修复酶可以是各种灭活的细菌裂解物的组分，所述细菌裂解物如双歧杆菌（Bifida）裂解物或双歧杆菌发酵产物裂解物，后者是来自双歧杆菌细菌的裂解物，其含有代谢产物和细胞质级分（当培养、灭活并随后分解双歧杆菌细菌时）。该材料的INCI名称为双歧杆菌发酵产物裂解物。

其它合适的DNA修复酶包括核酸内切酶V，其可以通过噬菌体T4的denV基因产生。同样合适的是T4核酸内切酶；O⁶-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶；光裂合酶，如尿嘧啶-和次黄嘌呤-DNA糖基化酶；脱嘧啶/脱嘌呤核酸内切酶；DNA核酸外切酶、损伤碱基糖基化酶（例如3-甲基腺嘌呤-DNA糖基化酶）；单独或在复合物（例如大肠杆菌(E. coli)uvrA/uvrB/uvrC核酸内切酶复合物）中的校正核酸内切酶；APEX核酸酶，其是通常称为“APE”的多功能DNA修复酶；二氢叶酸还原酶；末端转移酶；拓扑异构酶；O⁶苄基鸟嘌呤；DNA糖基化酶。

其它类型的合适的DNA修复酶可以通过促进的修复类型来分类，并包括BER（碱基切除修复）或BER因子酶，如尿嘧啶-DNA糖基化酶（UNG）；单链选择性单官能尿嘧啶DNA糖基化酶（SMUG1）；3,N(4)-亚乙烯基胞嘧啶糖基化酶（MBD4）；胸腺嘧啶DNA-糖基化酶（TDG）；A/G-特异性腺嘌呤DNA糖基化酶（MUTYH）；8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶（OGG1）；核酸内切酶III-样（NTHL1）；3-甲基腺嘌呤DNA糖苷酶（MPG）；DNA糖基化酶/AP裂解酶（NEIL1或2）；AP核酸内切酶（APEX 1和2）、DNA连接酶（LIG3）、连接酶辅助因子（XRCC1）；DNA 5'-激酶/3'-磷酸酶（PNKP）；ADP-核糖基转移酶（PARP1或2）。

另一类DNA修复酶包括据信直接逆转损伤的那些，如O⁶-MeG烷基转移酶（MGMT）；1-meA双加氧酶（ALKBH2或ALKBH3）。

可操作以修复DNA/蛋白交联的又另一类酶包括Tyr-DNA磷酸二酯酶（TDP1）。

同样合适的是MMR（错配切除修复）DNA修复酶，如MutS蛋白同系物（MSH2）；错配修复蛋白（MSH3）；mutS同系物4（MSH4）；MutS同系物5（MSH5）；或G/T错配结合蛋白（MSH6）；DNA错配修复蛋白（PMS1、PMS2、MLH1、MLH3）；减数分裂后分离增加的2-样蛋白（PMS2L3）；或减数分裂后分离增加的2-样4假基因（PMS2L4）。

同样合适的DNA修复酶是称为核苷酸切除修复（NER）酶的那些，并包括诸如以下的那些：着色性干皮病C组-互补蛋白（XPC）；RAD23（酿酒酵母）同系物（RAD23B）；钙牵蛋白同种型（CETN2）；RFA蛋白1、2或3（RPA1、2或3）；3’至5’ DNA解旋酶（ERCC3）；5’至3’DNA解旋酶（ERCC2）；基础转录因子（GTF2H1、GTF2H2、GTF2H3、GTF2H4、GTF2H5）；CDK活化激酶（CDK7、CCNH）；细胞周期蛋白G1相互作用蛋白（MNAT1）；DNA切除修复蛋白ERCC-5l；切除修复交叉互补（蛋白）1（ERCC1）；DNA连接酶1（LIG1）；ATP-依赖性解旋酶（ERCC6）；等等。

同样合适的可以是在促进同源重组的类别中的DNA修复酶，并且包括但不限于DNA修复蛋白RAD51同系物（RAD51、RAD51L1、RAD51B等等）；DNA修复蛋白XRCC2；DNA修复蛋白XRCC3；DNA修复蛋白RAD52；ATP酶（RAD50）；3’核酸外切酶（MRE11A）；等等。

作为DNA聚合酶的DNA修复酶也是合适的，并包括DNA聚合酶β亚单位（POLB）；DNA聚合酶γ（POLG）；DNA聚合酶亚单位δ（POLD1）；DNA聚合酶II亚单位A（POLE）；DNA聚合酶δ辅助蛋白（PCNA）；DNA聚合酶ζ（POLZ）；MAD2同系物（REV7）；DNA聚合酶η（POLH）；DNA聚合酶κ（POLK）；等等。

通常被称为“编辑和加工核酸酶”的各种类型的DNA修复酶包括3’-核酸酶；3’-核酸外切酶；5’-核酸外切酶；核酸内切酶；等等。

DNA修复酶的其它实例包括DNA解旋酶，其包括如ATP DNA解旋酶等等。

DNA修复酶可以作为植物提取物、细菌裂解物、生物材料等等的组分存在。例如，植物提取物可以含有DNA修复酶。

E．润湿剂

该组合物可以含有一种或多种润湿剂。如果存在的话，它们可以在大约0.01至75%、优选大约0.5至70%、更优选大约0.5至40%的范围内。合适的润湿剂的实例包括二醇类、糖类等等。合适的二醇类呈单体形式或聚合物形式，并包括聚乙二醇和聚丙二醇，如PEG 4-10，其是具有4至10个重复环氧乙烷单元的聚乙二醇；以及C_1-6亚烷基二醇，如丙二醇、丁二醇、戊二醇等等。合适的糖类（其中一部分也是多元醇）也是合适的润湿剂。此类糖的实例包括葡萄糖、果糖、蜂蜜、氢化蜂蜜、肌醇、麦芽糖、甘露醇、麦芽糖醇、山梨糖醇、蔗糖、木糖醇、木糖等。同样合适的是尿素。优选地，用于本发明的组合物的润湿剂是C_1-6、优选C_2-4亚烷基二醇，最特别为丁二醇。

F．表面活性剂

可期望该组合物含有一种或多种表面活性剂，尤其是如果为乳液形式。但是，如果该组合物是溶液、悬浮液或无水的，也可能使用此类表面活性剂，并将有助于分散具有极性的成分，例如颜料。此类表面活性剂可以是基于有机硅或有机的。该表面活性剂还有助于形成油包水或水包油形式的稳定乳液。如果存在的话，该表面活性剂可以在总组合物重量的大约0.001至30%、优选大约0.005至25%、更优选大约0.1至20%的范围内。

1．有机非离子型表面活性剂

该组合物可以包含一种或多种非离子型有机表面活性剂。合适的非离子型表面活性剂包括通过醇与环氧烷（通常为环氧乙烷或环氧丙烷）的反应形成的烷氧基化醇或醚。合适的醇包括一元醇、二元醇或多元短链（C1-6）醇；芳族或脂族的饱和或不饱和的脂肪（C12-40）醇、或胆固醇；等等。

在一个实施方案中，该醇是胆固醇，或可具有6至40个、优选大约10至30个、更优选大约12至22个碳原子的芳族或脂族的饱和或不饱和脂肪醇。实例包括油醇、鲸蜡硬脂醇、鲸蜡醇、硬脂醇、异硬脂醇、山萮醇等等。此类成分的实例包括油醇聚醚2-100；硬脂醇聚醚2-100；山萮醇聚醚5-30；鲸蜡硬脂醇聚醚2-100；鲸蜡醇聚醚2-100；胆固醇聚醚2-100，其中数字范围是指重复环氧乙烷单元的数量，例如鲸蜡醇聚醚2-100是指其中重复环氧乙烷单元的数量为2至100的鲸蜡醇聚醚。烷氧基化醇的衍生物也是合适的，如其磷酸酯。

一些优选的有机非离子型表面活性剂包括油醇聚醚-3、油醇聚醚-5、油醇聚醚-3磷酸酯、胆固醇聚醚-24；鲸蜡醇聚醚-24等等。

同样合适的是与一元醇、二元醇或多元短链醇（例如具有大约1至6个碳原子的那些）形成的烷氧基化醇。实例包括葡萄糖、甘油或其烷基化衍生物。实例包括甘油聚醚2-100；葡糖聚醚2-100；甲基葡糖聚醚2-100等等。最优选的是甲基葡糖聚醚-20；甘油聚醚-26等等。

其它类型的烷氧基化醇是合适的表面活性剂，包括具有不同数量的重复EO基团的环氧乙烷聚合物，通常称为PEG12至200。更优选的是PEG-75，其可以商品名Carbowax PEG-3350购自Dow Chemical。

其它合适的非离子型表面活性剂包括烷氧基化山梨聚糖和烷氧基化山梨聚糖衍生物。例如，山梨聚糖的烷氧基化、特别是乙氧基化提供了聚烷氧基化山梨聚糖衍生物。聚烷氧基化山梨聚糖的酯化提供山梨聚糖酯，如聚山梨醇酯。例如，聚烷氧基化山梨聚糖可用C6-30、优选C12-22脂肪酸酯化。此类成分的实例包括聚山梨醇酯20-85、山梨聚糖油酸酯、山梨聚糖倍半油酸酯、山梨聚糖棕榈酸酯、山梨聚糖倍半异硬脂酸酯、山梨聚糖硬脂酸酯等等。

2．有机硅或硅烷表面活性剂

同样合适的是各种类型的基于有机硅或硅烷的表面活性剂。实例包括被环氧乙烷或环氧丙烷基团取代的有机硅氧烷，如作为被聚乙二醇取代的聚二甲基硅氧烷的PEG聚二甲基硅氧烷，包括INCI名称为PEG-1聚二甲基硅氧烷；PEG-4聚二甲基硅氧烷；PEG-8聚二甲基硅氧烷；PEG-12聚二甲基硅氧烷；PEG-20聚二甲基硅氧烷；等等的那些。

同样合适的是被乙氧基和/或丙氧基取代的硅烷，如各种类型的PEG甲基醚硅烷，如双-PEG-18甲基醚二甲基硅烷；等等。

基于有机硅的表面活性剂的其它实例包括具有通用名聚二甲基硅氧烷共聚醇；鲸蜡基聚二甲基硅氧烷共聚醇等等的那些。

G．植物提取物

可期望将一种或多种附加的植物提取物并入该组合物中。如果存在的话，建议范围为大约0.0001至20%、优选大约0.0005至15%、更优选大约0.001至10%。合适的植物提取物包括来自植物（全草、根、花、果实、种子）如花、果实、蔬菜等等的提取物，包括酵母发酵产物提取物、粉团扇藻（Padina pavonica）提取物、嗜热栖热菌（Thermus Thermophilis）发酵产物提取物、亚麻荠（Camelina Sativa）籽油、齿叶乳香树（Boswellia Serrata）提取物、橄榄提取物、银荆（Acacia Dealbata）提取物、银槭（Acer Saccharinum）（糖枫）、嗜酸菌（Acidopholus）、菖蒲属（Acorus）、七叶树属（Aesculus）、伞菌属（Agaricus）、龙舌兰属（Agave）、龙牙草属（Agrimonia）、藻类、芦荟、柑橘、芸苔属（Brassica）、肉桂、橙子、苹果、蓝莓、蔓越莓、桃、梨、柠檬、酸橙、豌豆、海藻、咖啡因、绿茶、洋甘菊、杨柳、桑树、罂粟花和CTFA化妆品成分手册, 第8版, 第2卷的第1646至1660页中记载的那些。其它具体实例包括但不限于光果甘草（Glycyrrhiza Glabra）、黑柳（Salix Nigra）、巨藻（Macrocycstis Pyrifera）、苹果（Pyrus Malus）、草莓虎耳草（Saxifraga Sarmentosa）、酿酒葡萄（Vitis Vinifera）、黑桑（Morus Nigra）、黄芩（Scutellaria Baicalensis）、白花春黄菊（Anthemis Nobilis）、鼠尾草（Salvia Sclarea）、迷迭香（Rosmarinus Officianalis）、香橼（Citrus Medica Limonum）、人参（Panax Ginseng）、豨莶草（Siegesbeckia Orientalis）、乌梅（Fructus Mume）、泡叶藻（Ascophyllum Nodosum）、野毛豆（Glycine Soja）提取物、甜菜（Beta Vulgaris）、巴尔干苣苔（Haberlea Rhodopensis）、虎杖（Polygonum Cuspidatum）、甜橙（Citrus Aurantium Dulcis）、酿酒葡萄（Vitis Vinifera）、卷柏（Selaginella Tamariscina）、啤酒花（Humulus Lupulus）、柑橘（Citrus Reticulata）皮、石榴（Punica Granatum）、海门冬属（Asparagopsis）、姜黄（Curcuma Longa）、睡菜（Menyanthes Trifoliata）、向日葵（Helianthus Annuus）、大麦（Hordeum Vulgare）、黄瓜（Cucumis Sativus）、扁枝衣（Evernia Prunastri）、粉屑扁枝衣（Evernia Furfuracea）、苏丹可乐果（Kola Acuminata）及其混合物。如果期望的话，此类植物提取物可以发酵以提高效力或活性。发酵可以通过标准发酵技术使用细菌或酵母来完成。

H．生物材料

同样合适的是各种类型的生物材料，如源自细胞、发酵材料等等的那些。如果存在的话，此类材料可以在大约0.001至30%、优选大约0.005至25%、更优选大约0.01至20%的范围内。实例包括细胞RNA或DNA的片段、益生菌微生物、或微生物和来自植物（如叶、种子、提取物、花等等）的有机材料的发酵产物。特别优选的是RNA片段。

I．油

在本发明的组合物为乳液形式的情况下，该组合物将包含油相。油性成分对于皮肤保湿和防护性能是合意的。合适的油包括有机硅、酯、植物油、合成油，包括但不限于本文中记载的那些。油可以是挥发性的或非挥发性的，并优选在室温下为易浇注液体形式。术语“挥发性的”是指油具有可测量的蒸气压，或在20℃下至少大约2毫米汞柱的蒸气压。术语“非挥发性的”是指油具有在20℃下小于大约2毫米汞柱的蒸气压。如果存在的话，此类油可以在大约0.01至85%、优选大约0.05至80%、更优选大约0.1至50%的范围内。

合适的挥发性油通常具有25℃下大约0.5至5厘沲的粘度，并包括直链有机硅、环状有机硅、链烷烃或其混合物。

环状和直链挥发性有机硅可获自多个商业来源，包括Dow Corning Corporation和General Electric。Dow Corning直链挥发性有机硅以商品名Dow Corning 244、245、344和200流体出售。这些流体包括六甲基二硅氧烷（粘度0.65厘沲(简称cst)）、八甲基三硅氧烷（1.0 cst）、十甲基四硅氧烷（1.5 cst）、十二甲基五硅氧烷（2 cst）及其混合物，所有粘度测量均在25℃下。

合适的支链挥发性有机硅包括烷基聚三甲基硅氧烷，如甲基聚三甲基硅氧烷，其可以以商品名TMF-1.5购自Shin-Etsu Silicones，在25℃下具有1.5厘沲的粘度。

同样适于作为挥发性油的是各种直链或支链的链烷烃，其具有5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个碳原子，更优选8至16个碳原子。合适的烃类包括戊烷、己烷、庚烷、癸烷、十二烷、十四烷、十三烷、和美国专利号3,439,088和3,818,105（二者均经此引用并入本文）中公开的C_8-20异链烷烃。

优选的挥发性链烷烃具有70-225、优选160至190的分子量，和30至320℃、优选60至260℃的沸点，以及在25℃下小于大约10 cst的粘度。此类链烷烃可以以ISOPARS商标获自EXXON，并可获自Permethyl Corporation。合适的C₁₂异链烷烃由Permethyl Corporation以商品名Permethyl 99A制造。市售的各种C₁₆异链烷烃，如异十六烷（具有商品名PermethylR）也是合适的。

多种非挥发性油也适用于本发明的组合物。非挥发性油在25℃下通常具有大于大约5至10厘沲的粘度，并且粘度在25℃下可以为高至大约1,000,000厘泊。非挥发性油的实例包括但不限于单酯、二酯、和三酯。

可用于本发明的组合物的单酯油的实例包括月桂酸己酯、异硬脂酸丁酯、异硬脂酸十六烷基酯、棕榈酸鲸蜡基酯、新戊酸异硬脂基酯、庚酸硬脂基酯、异壬酸异硬脂基酯、乳酸硬脂基酯、辛酸硬脂基酯、硬脂酸硬脂基酯、异壬酸异壬基酯等等。

可用于本发明的组合物的二酯油的实例包括苹果酸二异硬脂基酯、新戊二醇二辛酸酯、癸二酸二丁酯、二鲸蜡硬脂醇二聚二亚油酸酯、己二酸二鲸蜡基酯、己二酸二异鲸蜡基酯、己二酸二异壬基酯、二异硬脂醇二聚二亚油酸酯、富马酸二异硬脂基酯、苹果酸二异硬脂基酯、苹果酸二辛酯等等。

合适的三酯包括花生四烯酸、柠檬酸、或山萮酸的酯，如甘油三花生酸酯、柠檬酸三丁酯、柠檬酸三异硬脂基酯、柠檬酸三C_12-13烷基酯、三辛酸甘油酯、柠檬酸三辛酰基酯、山萮酸十三烷基酯、柠檬酸三辛基十二烷基酯、山萮酸十三烷基酯；或椰油酸十三烷基酯、异壬酸十三烷基酯等等。

在C.T.F.A.化妆品成分词典与手册，第11版，2006中在“脂类”的分类下进一步描述了适用于该组合物的酯类。

可期望将一种或多种非挥发性烃油并入该组合物，所述非挥发性烃油如C_24-28烯烃、C_30-45烯烃、C_20-40异链烷烃、氢化聚异丁烯、聚异丁烯、聚癸烯、氢化聚癸烯、矿物油、五氢角鲨烯、角鲨烯、角鲨烷及其混合物。在一个优选实施方案中，此类烃类具有大约300至1000道尔顿的分子量。

合成的或天然存在的脂肪酸的甘油酯或甘油三酯也适用于该组合物。植物和动物来源均可使用。此类油的实例包括蓖麻油、羊毛脂油、C_10-18甘油三酯、辛酸/癸酸/甘油三酯、甜杏仁油、杏仁油、芝麻油、亚麻荠油、琼崖籽油、椰子油、玉米油、棉花籽油、亚麻籽油、油墨油、橄榄油、棕榈油、雾冰草脂、菜籽油、大豆油、葡萄籽油、葵花籽油、核桃油等等。

同样合适的是合成或半合成的甘油酯，如脂肪酸甘油单酯、甘油二酯和甘油三酯，其是经修饰的天然脂肪或油，例如多元醇（如甘油）的单酯、二酯或三酯。在一个实例中，脂肪(C_12-22)羧酸与一个或多个重复甘油基反应：硬脂酸甘油酯、二异硬脂酸二甘油酯、异硬脂酸聚甘油基-3酯、异硬脂酸聚甘油基-4酯、蓖麻醇酸聚甘油基-6酯、二油酸甘油酯、二异硬脂酸甘油酯、四异硬脂酸甘油酯、三辛酸甘油酯、二硬脂酸二甘油酯、亚油酸甘油酯、肉豆蔻酸甘油酯、异硬脂酸甘油酯、PEG蓖麻油、PEG油酸甘油酯、PEG硬脂酸甘油酯、PEG牛脂酸甘油酯等等。

水溶性和水不溶性的非挥发性有机硅油也适用于该组合物。此类有机硅优选在25℃下具有大约大于5至800,000 cst、优选20至200,000 cst的粘度。合适的水不溶性有机硅包括胺官能有机硅，如氨基封端聚二甲基硅氧烷（amodimethicone）、苯基取代的聚二甲基硅氧烷等等。

J．维生素和抗氧化剂

可期望将一种或多种维生素或抗氧化剂并入该组合物中。如果存在的话，建议范围为大约0.001至20%、优选大约0.005至15%、更优选大约0.010至10%。优选地，此类维生素、维生素衍生物和/或抗氧化剂可操作以清除单线态氧形式的自由基。此类维生素可以包括生育酚或其衍生物，如生育酚乙酸酯、生育酚阿魏酸酯；抗坏血酸或其衍生物，如抗坏血酸棕榈酸酯、抗坏血酸磷酸镁；维生素A或其衍生物，如棕榈酸视黄酯；或维生素D、K、B或其衍生物。

K．优选组合物

优选的组合物为水溶液或乳液形式，并含有至少一种聚合物、至少一种HMW HA、至少一种LMW HA、至少一种聚氨基酸、水和选自以下的成分：(1) 蛋白酶体活化剂、(2) 自体吞噬活化剂、(3) CLOCK或PER1基因活化剂、(4) DNA修复酶；和(5) 其混合物。

最优选的组合物包含含有以下成分的水溶液或乳液：至少一种聚合物、至少一种HMW HA、至少一种LMW HA、至少一种聚氨基酸、水、双歧杆菌属的灭活细菌裂解物和选自以下的成分：(1) 蛋白酶体活化剂、(2) 自体吞噬活化剂、(3) CLOCK或PER1基因活化剂、(4)DNA修复酶；和(5) 其混合物。

将结合以下实施例进一步描述本发明，这些实施例仅为举例说明的目的而阐述。

实施例1

如下制备形成微网水凝胶的组合物（组合物1）：

。

通过将苯氧基乙醇与水组合并充分混合来制备该组合物。向该混合物中加入HMWHA并充分混合直至均匀。向该混合物中加入LMW HA并充分混合直至均匀。随后加入聚丙烯酸酯交联聚合物-6并充分混合直至均匀。最后加入聚天冬氨酸钠，并将该混合物充分混合直至均匀。

用Zeiss SEM扫描组合物。图1A和图1B的SEM图像处于在各图像左下角显示的比例尺下的两种不同的比例以便更好地观察微网结构。

实施例2

如下制备局部组合物：

。

通过以水（q.s.100%）、苯氧基乙醇（0.5%）、HMW HA（0.11%）、LMW HA（0.05%）、聚合物（0.1%）和聚天冬氨酸钠（0.5%）的顺序添加成分并在每一步骤充分混合直至均匀来制造水凝胶。

组合物1-11的SEM图像分别显示在图1A-11A和图1B-11B上。组合物1、2、4和5的SEM图像清楚地显示了微网结构。组合物3和7的SEM图像显示了与图像1、2、4和5比较时不那么均匀的微网。

如下对所选组合物进行美观性测试：

。

结果表明，与不含微网结构的那些组合物相比时，含有微网结构的组合物显示出改善的美观性。

实施例3

如下制造组合物：

组合物	Sepixmax Zen (聚丙烯酸酯交联聚合物-6)(重量%)	HMW HA (重量%)	LMW HA (重量%)	Aquadew (聚天冬氨酸钠) (重量%)	Chronolux (三肽-32) (重量%)
						12	0.1	0.11	0.05	0.5
13	0.1	0.11	0.05		0.2
						14		0.11	0.05	0.5
15	0.1		0.05
						16		0.11	0.05
17	0.1			0.5

通过在混合下将苯氧基乙醇加入水中来制备水凝胶。将HMW HA溶液（Contipro）添加到混合物中并充分混合直至均匀（对于组合物12、13、14和16）。随后向该混合物中加入LMW HA并充分混合直至均匀（对于组合物12、13、14、15和16）。随后加入聚丙烯酸酯交联聚合物-6并充分混合直至均匀（对于12、13、15和17）。最后加入Aquadew SPA-30B（对于12、14和17）或Chronolux（对于13）并充分混合直至均匀。

如图12-17所示，优选组合物12的SEM图像清楚地显示了微网结构，而13、14（弱膜）、15、16（弱膜）、17的SEM图像未显示微网结构。

实施例4

如下制造微网水凝胶：

组合物	Sepixmax Zen (聚丙烯酸酯交联聚合物-6)(重量%)	HMW HA (重量%)	LMW HA (重量%)	Aquadew (聚天冬氨酸钠) (重量%)
					18	0.1	0.15	0.01	0.5
19	0.1	0.14	0.02	0.5
					20	0.1	0.11	0.05	0.5
21	0.1	0.08	0.08	0.5
					22	0.1	0.05	0.11	0.5
23	0.1	0.02	0.14	0.5
					24	0.1	0.01	0.15	0.5

通过在混合的情况下将Phenoxetol添加到水中来制备微网水凝胶。将HMW透明质酸溶液添加到该混合物中并充分混合直至均匀。随后将LMW透明质酸添加到该混合物中并充分混合直至均匀。随后加入Sepimax Zen并充分混合直至均匀。最后加入Aquadew SPA-30B并充分混合直至均匀。

SEM图像分别显示在图18A-24A和图18B-24B上。所有图像均清楚地显示了微网结构。

测量每种组合物的微网尺寸。组合物18-24的网格分布图分别显示在图25-31中。

实施例5

如下制造护肤组合物：

。

组合物25和26由几乎相同的成分制成，除了组合物25不具有聚合物（SepimaxZen）、HMW HA和LMW HA。在实施例3中表明，这三种成分对形成微网结构至关重要。因此，组合物25被认为不含微网，组合物26被认为含有微网。

对15名小组成员进行临床研究，以评估组合物25和26对眼下区域的角质层厚度的影响。该研究中的测试区域是左眼下区域和右眼下区域。进行分割面研究，其中将300微升的组合物25和26施加在面部的左侧和右侧上。以左/右随机的方式施加组合物。通过反射共聚焦显微镜（RCM）评估在基线处和在处理后4小时眼下区域中的角质层。使用手持式Vivascope 3000（Lucid, 1.5×，视野= 0.5×0.5毫米），其中通过折射率的差异提供对比度（SOP A.18v1，labbook 1846-1 p99）。记录了不同测试区域的至少5个最小光学层厚为1.96微米的Vivastack。Aquasonic透明凝胶用作物镜和组织帽之间以及组织帽和皮肤之间的浸液。通过测量角质层顶部与颗粒层顶部（具有可见细胞的第一层）之间的深度差来确定角质层的厚度。对同一小组成员收集不同组合物的数据，并使用配对Student’s t-检验对数据进行统计学评估。如果p≤0.05，则随时间推移和处理之间的差异被认为是显著的。

用反射共聚焦显微镜（RCM）（使用Vivascope 3000）来评估角质层。共聚焦图像用于确定在基线处和在处理后4小时的角质层厚度。

在用组合物26处理后4小时，在眼下区域中的角质层厚度与基线相比显著增加（p<10^-4）（参见图32）。用组合物25和26处理的那侧之间存在角质层厚度的显著差异（p=0.0003）。对于组合物25，与基线相比没有发现差异（p=0.67）。

图33显示了在产品施加后4小时拍摄的一名小组成员的眼下区域的角质层和颗粒层的示意性反射共聚焦图像。在每个图像上给出了记录深度（5个“层积”的平均值）。在用组合物25（图像A、B、C）处理的部位处，在角质层（图像A）顶部下方20.18微米处检测到颗粒层（图像B）。在用组合物25（图像D、E、F）处理的部位处，在角质层（图像D）顶部下方27.34微米处检测到颗粒层（图像F）。这说明了组合物26处理部位上的角质层的增厚。

基于通过反射共聚焦显微镜拍摄的非侵入性图像，在基线处和在用具有和不具有微网技术的配制物处理后4小时，评估眼下角质层的厚度。在用“微网”组合物（26）处理后4小时，显示了角质层厚度的显著增加。无“微网”技术的配制物（25）不具有这样的效果，并且与在不具有“微网”技术的情况下处理的部位相比，“微网”处理的部位上的角质层厚度明显更厚。这说明微网技术对眼下区域的角质层的即时物理丰盈效果。

虽然已经结合优选实施方案对本发明进行了描述，但是并非意图将本发明的范围限制于所记载的特定形式，而是相反，其意图涵盖如可以包括在由所附权利要求限定的本发明的精神和范围内的此类替代方案、修改方案和等同方案。

序列表

<110> Shah, Snehal

Wang, Hua

Xu, Zhequan

Smail, Mary Ann

Sojka, Milan Franz

Bratescu, Daniela

<120> 化妆品组合物

<130> 16.53-2

<160> 7

<210> 1

<211> 13

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CLOCK和/或PER1基因活化剂

<220>

<221> misc_feature

<222> (1)..(4)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸或不是氨基酸

220>

<221> misc_feature

<222> (5)

<223> Xaa可以是苏氨酸或丝氨酸或不是氨基酸

<220>

<221> misc_feature

<222> (9)

<223> Xaa可以是异亮氨酸、亮氨酸、脯氨酸、缬氨酸、丙氨酸、甘氨酸或不是氨基酸

<220>

<221> misc_feature

<222> (10)..(13)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸或不是氨基酸

<400> 1

Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Ser Thr Pro Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 2

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CLOCK和/或PER1基因活化剂

<400> 2

Tyr Val Ser Thr Pro Tyr Asn

1 5

<210> 3

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CLOCK和/或PER1基因活化剂

<400> 3

Val Ser Thr Pro Glu

1 5

<210> 4

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CLOCK和/或PER1基因活化剂

<400> 4

Leu His Ser Thr Pro Pro

1 5

<210> 5

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CLOCK和/或PER1基因活化剂

<400> 5

Arg His Ser Thr Pro Glu

1 5

<210> 6

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CLOCK和/或PER1基因活化剂

<400> 6

His Ser Thr Pro Glu

1 5

<210> 7

<211> 4

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CLOCK和/或PER1基因活化剂

<400> 7

Ser Pro Leu Gln

1

Claims

1.局部组合物，包含：

- 聚合物，其中所述聚合物是选自吸水性丙烯酸类树脂或甲基丙烯酸类树脂、丙烯酰基二甲基牛磺酸盐的共聚物、丙烯酸酯交联有机硅共聚物和阴离子多糖中的至少1种聚合物，所述聚合物的量为总组合物重量的0.001至10%，

- 高分子量透明质酸（HMW HA）和/或其盐，其中所述HMW HA具有1×10⁶道尔顿至1×10⁷道尔顿的分子量，

- 低分子量透明质酸（LMW HA）和/或其盐，其中所述LMW HA具有1×10³道尔顿至8×10⁵道尔顿的分子量，和

- 聚氨基酸和/或其盐，其中所述聚氨基酸是具有以下重复单元的天冬氨酸，钠盐的聚合物：

，且具有2,000至6,000道尔顿的分子量，所述聚氨基酸和/或其盐的量为总组合物重量的0.001至10%；和

- 水。

2.配制含有微网的局部组合物的方法，包括以下步骤：

将测试聚合物与至少一种LMW HA、至少一种HMW HA、聚氨基酸盐和水组合；

使用SEM确定是否形成微网；

选择形成微网的聚合物；和

配制含有相同成分组合的局部产品，其以与当测试聚合物、LMW HA、HMW HA、聚氨基酸和水单独组合时所获得的相同的比率和百分比形成微网，

其中所述聚合物是选自吸水性丙烯酸类树脂或甲基丙烯酸类树脂、丙烯酰基二甲基牛磺酸盐的共聚物、丙烯酸酯交联有机硅共聚物和阴离子多糖中的至少1种聚合物，所述聚合物的量为总组合物重量的0.001至10%，

所述HMW HA具有1×10⁶道尔顿至1×10⁷道尔顿的分子量，

所述LMW HA具有1×10³道尔顿至8×10⁵道尔顿的分子量，

所述聚氨基酸是具有以下重复单元的天冬氨酸，钠盐的聚合物：

，且具有2,000至6,000道尔顿的分子量，所述聚氨基酸盐的量为总组合物重量的0.001至10%。