CN110269840A - 一种大麻二酚cbd纳米乳及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种大麻二酚CBD纳米乳及其制备方法，由下列质量比的原料制成：乳化剂5‑10%，助乳化剂2.5‑6%，大麻二酚CBD 1‑25%，油相1‑25%，余量为去离子水。本发明将大麻二酚CBD直接溶于油相，再经过反复冷冻、解冻、热浴，制得大麻二酚CBD纳米乳，利用纳米乳的稳定性能，使大麻二酚CBD纳米乳可以长期有效的维持其形态，不仅保留了大麻二酚CBD原有的结构，还能使大麻二酚CBD最大限度地被吸收利用，大大提高了大麻二酚CBD的生物利用率。另外，本发明制备的大麻二酚CBD纳米乳可溶于水，扩大了大麻二酚CBD纳米乳的应用范围。为后序应用、研发提供可靠技术支持。
Description
技术领域
本发明涉及一种纳米乳冻干粉，特别是一种大麻二酚(CBD)纳米乳冻干粉及其制备方法，属于生物技术领域。
背景技术
大麻二酚CBD是从汉麻中提取出来的成分。汉麻属于木兰纲(Magnoliopsida)荨麻目(Urticales)大麻科(Cannabinaceae)大麻属(Cannabis)大麻种(Cannabis sativa L.)一年生草本植物。研究表明大麻二酚CBD具有重要的药用价值，在神经保护以及癫痫、多发性硬化症、风湿性关节炎、肿瘤等治疗领域，均表现出良好的药理活性，具有非常好的应用前景，而且不具有成瘾性。目前可用的大麻二酚CBD是从THC含量低于0.3％的工业大麻中提取的有效成分，在我国及大多数国家不属于毒品、易制毒化学品、麻醉药品、精神药品。有治疗癫痫(CN103826621A)、脑瘤(CN102083426B)、精神病(CN101939017B)等作用，但目前尚无文献报道对治疗鼻炎有效果。
大麻二酚CBD应用前景广阔，但由于其属于脂溶性物质而极易氧化，难于长时间保持其应有的药理活性。由于分子极性的不同而不能溶于水，改变其结果可以使之溶于水，但这样会导致原物质的物理化学性状发生改变，其药效也将会发生变化，这在实际工作中也就没有应用价值。因此，如何克服大麻二酚CBD极易氧化的问题，是本领域科技人员重点研究项目之一。
发明内容
为解决大麻二酚极易氧化，延长其药理活性的有效期，本发明第一个目的在于提供一种大麻二酚CBD纳米乳。
本发明的第二个目的在于提供一种大麻二酚CBD纳米乳的制备方法。
本发明第一个目的通过下列技术方案实现：一种大麻二酚CBD纳米乳，其特征在于由下列质量比的原料制成：
上述各组分的总和为100％。
所述乳化剂为：氢化蓖麻油聚氧乙烯醚-40、氢化蓖麻油聚氧乙烯醚-20、吐温-80中的一种或几种，且几种的质量比是任意的。
所述助乳化剂为：聚乙二醇-400、山梨糖醇液、甘油中的一种或或几种，且几种的质量比是任意的。
所述大麻二酚CBD为市购产品，其是从THC含量低于0.3％的工业大麻中提取的有效成分，属于非成瘾性活性物质，大麻二酚CBD具有镇痛、抗肿瘤、抗恶心呕吐、治疗精神及大脑疾病、抗炎、抗菌等作用。
所述油相为：火麻油、葡萄籽油、柠檬油中的一种或几种，且几种的质量比是任意的。
本发明第二个目的通过下列技术方案实现：一种大麻二酚CBD纳米乳的制备方法，其特征在于包括下列各步骤：
1)按下列质量比备料：
上述各组分的总和为100％；
2)先将油相放到30-67℃水浴锅中加热10-20min，使油温达到30-67℃后，再将大麻二酚CBD加入油中，在搅拌速度为10-30r/s下使大麻二酚CBD溶解于油中，得油溶物；
3)将油溶物置于-80—-196℃液氮冰箱中冷冻30min-1h后，解冻至室温,放到30-67℃水浴锅中加热10-20min，再置于-80—-196℃液氮冰箱中冷冻30min-1h，解冻至室温,放到30-67℃水浴锅中加热10-20min，如此反复,直至大麻二酚CBD的溶解达到其饱和度；再依次加入乳化剂、助乳化剂，以10-40r/s的速度搅拌5-15min，得混合物；
4)以1ml/min的速度，将总水量的1/2去离子水加入到步骤3)的混合物中，再在搅拌转速为10-40r/s条件下,以2ml/min的速度，继续加入余量去离子水，搅拌10-30min，得大麻二酚CBD纳米乳。
本发明将大麻二酚CBD直接溶于油相，再经过反复冷冻、解冻、热浴，制得大麻二酚CBD纳米乳，利用纳米乳的稳定性能，使大麻二酚CBD纳米乳可以长期有效的维持其形态，不仅保留了大麻二酚CBD原有的结构，还能使大麻二酚CBD最大限度地被吸收利用，大大提高了大麻二酚CBD的生物利用率。另外，本发明制备的大麻二酚CBD纳米乳可溶于水，扩大了大麻二酚CBD纳米乳的应用范围。为后序应用、研发提供可靠技术支持。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明做进一步说明，但本发明不仅仅限于这些实施例。
实施例1
一种大麻二酚CBD纳米乳，经过下列步骤制备：
1)按下列质量份备料：
2)先将火麻油放到30℃水浴锅中加热至油温达到30℃后，再将大麻二酚CBD加入火麻油中，在搅拌速度为10r/s下使大麻二酚CBD溶解于油中，得油溶物；
3)将油溶物置于-80℃液氮冰箱中冷冻1h后，解冻至室温,放到30℃水浴锅中加热20min，再置于-80℃液氮冰箱中冷冻1h，解冻至室温,放到30℃水浴锅中加热20min，如此反复,直至大麻二酚CBD的溶解达到其饱和度；再依次加入氢化蓖麻油聚氧乙烯醚-40、氢化蓖麻油聚氧乙烯醚-20、聚乙二醇-400，以10r/s的速度搅拌15min，得混合物；
4)以1ml/min的速度，将总水量的1/2去离子水加入到步骤3)的混合物中，再在搅拌转速为10r/s条件下,以2ml/min的速度，继续加入余量去离子水，搅拌30min，得大麻二酚CBD纳米乳。
实施例2
一种大麻二酚CBD纳米乳，经过下列步骤制备：
1)按下列质量份备料：
2)先将火麻油、葡萄籽油混合均匀后，放到67℃水浴锅中加热至油温达到67℃后，再将大麻二酚CBD加入混合油中，在搅拌速度为30r/s下使大麻二酚CBD溶解于混合油中，得油溶物；
3)将油溶物置于-196℃液氮冰箱中冷冻30min后，解冻至室温,放到67℃水浴锅中加热10min，再置于-196℃液氮冰箱中冷冻30min，解冻至室温,放到67℃水浴锅中加热10min，如此反复,直至大麻二酚CBD的溶解达到其饱和度；再依次加入氢化蓖麻油聚氧乙烯醚-40、吐温-80、山梨糖醇液、甘油，以40r/s的速度搅拌5min，得混合物；
4)以1ml/min的速度，将总水量的1/2去离子水加入到步骤3)的混合物中，再在搅拌转速为40r/s条件下,以2ml/min的速度，继续加入余量去离子水，搅拌10min，得大麻二酚CBD纳米乳。
实施例3
一种大麻二酚CBD纳米乳，经过下列步骤制备：
1)按下列质量份备料：
2)先将柠檬油相放到45℃水浴锅中加热至油温达到45℃后，再将大麻二酚CBD加入油中，在搅拌速度为20r/s下使大麻二酚CBD溶解于柠檬油中，得油溶物；
3)将油溶物置于-120℃液氮冰箱中冷冻50min后，解冻至室温,放到40℃水浴锅中加热15min，再置于-120℃液氮冰箱中冷冻50min，解冻至室温,放到40℃水浴锅中加热15min，如此反复,直至大麻二酚CBD的溶解达到其饱和度；再依次加入吐温-80、氢化蓖麻油聚氧乙烯醚-20、助乳化剂、聚乙二醇-400、山梨糖醇液，以30r/s的速度搅拌10min，得混合物；
4)以1ml/min的速度，将总水量的1/2去离子水加入到步骤3)的混合物中，再在搅拌转速为30r/s条件下,以2ml/min的速度，继续加入余量去离子水，搅拌20min，得大麻二酚CBD纳米乳。
实例4
一种大麻二酚CBD纳米乳，经过下列步骤制备：
1)按下列质量份备料：
2)先将柠檬油放到55℃水浴锅中加至油温达到55℃后，再将大麻二酚CBD加入柠檬油中，在搅拌速度为18r/s下使大麻二酚CBD溶解于油中，得油溶物；
3)将油溶物置于-160℃液氮冰箱中冷冻40min后，解冻至室温,放到55℃水浴锅中加热18min，再置于-160℃液氮冰箱中冷冻40min，解冻至室温,放到55℃水浴锅中加热18min，如此反复,直至大麻二酚CBD的溶解达到其饱和度；再依次加入氢化蓖麻油聚氧乙烯醚-40、氢化蓖麻油聚氧乙烯醚-20、聚乙二醇-400，以20r/s的速度搅拌10min，得混合物；
4)以1ml/min的速度，将总水量的1/2去离子水加入到步骤3)的混合物中，再在搅拌转速为20r/s条件下,以2ml/min的速度，继续加入余量去离子水，搅拌20min，得大麻二酚CBD纳米乳。
实施例5
一种大麻二酚CBD纳米乳，经过下列步骤制备：
1)按下列质量份备料：
2)先将葡萄籽油、火麻油、柠檬油混合均匀后，放到39℃水浴锅中加热至油温达到39℃后，再将大麻二酚CBD加入混合油中，在搅拌速度为25r/s下使大麻二酚CBD溶解于油中，得油溶物；
3)将油溶物置于-100℃液氮冰箱中冷冻45min后，解冻至室温,放到45℃水浴锅中加热15min，再置于-100℃液氮冰箱中冷冻45min，解冻至室温,放到45℃水浴锅中加热15min，如此反复,直至大麻二酚CBD的溶解达到其饱和度；再依次加入氢化蓖麻油聚氧乙烯醚-40、吐温-80、氢化蓖麻油聚氧乙烯醚-20、山梨糖醇液、聚乙二醇-400、甘油，以32r/s的速度搅拌13min，得混合物；
4)以1ml/min的速度，将总水量的1/2去离子水加入到步骤3)的混合物中，再在搅拌转速为32r/s条件下,以2ml/min的速度，继续加入余量去离子水，搅拌26min，得大麻二酚CBD纳米乳。
实验例
为验证本发明的大麻二酚CBD纳米乳的作用，进行以下试验：
一、稳定性
1.检测指标为：
1.1实施例1-5的大麻二酚CBD纳米乳的检测指标：外观(浑浊、分层、沉淀、絮状)、离心(观察有无浑浊、分层、沉淀、絮状现象)、大麻二酚CBD含量测定。
1.2以市购的大麻二酚CBD作为对照例的检测指标：外观(颜色、气味、状态)、含量测定
2.检测样品
样品分组见表1：
表1-样品分组
| 样品编号 | 样品名称 | 性状 | CBD含量 |
| 对照 | 99％的CBD | 白色粉状小晶体，无气味 | 0.99g/g粉 |
| 实施例1 | 7.7％的CBD纳米乳 | 淡黄色澄清液体 | 0.077g/ml乳 |
| 实施例2 | 6.67％的CBD纳米乳 | 淡黄色澄清液体 | 0.0667g/ml乳 |
| 实施例3 | 4.17％的CBD纳米乳 | 淡黄色澄清液体 | 0.0417g/ml乳 |
| 实施例4 | 3.33％的CBD纳米乳 | 淡黄色澄清液体 | 0.0333g/ml乳 |
| 实施例5 | 1.67％的CBD纳米乳 | 淡黄色澄清液体 | 0.0167g/ml乳 |
3.检测方法
六个样品各取6份，5g/份，其中3份分别曝光密封放置于4℃、25℃、37℃的环境下6个月，然后检测各项指标。另外3份分别避光密封放置于4℃、25℃、37℃的环境下6个月，然后检测各项指标。
3.1外观的检测方法：肉眼观察即可
3.2离心：取1mlCBD纳米乳，在10000r/min，10min的情况下，观察有无浑浊、分层、沉淀、絮状现象。
3.3CBD含量测定：用高效液相色谱进行检测
4.检测结果见表2-7：
表2-样品避光4℃下稳定性检测结果
表3-样品避光25℃下稳定性检测结果
表4-样品避光37℃下稳定性检测结果
表5-样品曝光4℃下稳定性检测结果
表6-样品曝光25℃下稳定性检测结果
表7-样品曝光37℃下稳定性检测结果
结果：CBD结合纳米乳后，进一步延长了其保质期
二、增强药效——镇痛
1.材料
1.1药物与试剂
生理盐水、6％醋酸(现配现用)、对照例的大麻二酚CBD、去离子水、实施例1-5的大麻二酚CBD纳米乳。
1.2动物
KM雌性小鼠21只，每组3只，标准体重20±2g。
1.3仪器
灌胃针、2ml注射器、50ml容量瓶6个、电子平秤、试剂勺、称量纸。
1.4样品分组
| 样品编号 | 样品名称 | 性状 |
| 对照例 | 99％的CBD | 白色粉状小晶体，无气味 |
| 实施例1 | 7.7％的CBD纳米乳 | 淡黄色澄清液体 |
| 实施例2 | 6.67％的CBD纳米乳 | 淡黄色澄清液体 |
| 实施例3 | 4.17％的CBD纳米乳 | 淡黄色澄清液体 |
| 实施例4 | 3.33％的CBD纳米乳 | 淡黄色澄清液体 |
| 实施例5 | 1.67％的CBD纳米乳 | 淡黄色澄清液体 |
| 模型组 | 生理盐水 | 无色液体 |
注：对照例市购，样品1-5为本发明样品
2.方法
醋酸扭体法。
2.2实验方法
21只雌性昆明小鼠，均分为7组。小鼠均灌胃给药，给药容量均为10m L/kg，给药剂量均为0.1g/kg，1次/d，连续给药6d。末次给药后1h，各鼠均腹腔注射0.6％醋酸10ml/kg(醋酸溶液临用前配制)。记录各组小鼠腹腔注射后20min内扭体反应(腹部收缩内凹、伸展后肢)次数，并计算抑制率。
抑制率(％)＝(模型组扭体反应次数－给药组扭体反应次数)/模型组扭体反应次数×100％
2.3注射醋酸后20min内的扭体反应
2.6结果
抑制率(％)＝(模型组扭体反应次数－给药组扭体反应次数)/模型组扭体反应次数×100％
Claims (6)
1.一种大麻二酚CBD纳米乳，其特征在于由下列质量比的原料制成：
乳化剂 5-10%
助乳化剂 2.5-6%
大麻二酚CBD 1-25%
油相 1-25%
去离子水 余量
上述各组分的总和为100%。
2.如权利要求1所述的大麻二酚CBD纳米乳，其特征在于所述乳化剂为：氢化蓖麻油聚氧乙烯醚-40、氢化蓖麻油聚氧乙烯醚-20、吐温-80中的一种或几种，且几种的质量比是任意的。
3.如权利要求1所述的大麻二酚CBD纳米乳，其特征在于所述助乳化剂为：聚乙二醇-400、山梨糖醇液、甘油中的一种或几种，且几种的质量比是任意的。
4.如权利要求1所述的大麻二酚CBD纳米乳，其特征在于所述大麻二酚CBD为市购产品，其是从THC含量低于0.3%的工业大麻中提取的有效成分，属于非成瘾性活性物质。
5.如权利要求1所述的大麻二酚CBD纳米乳，其特征在于所述油相为：火麻油、葡萄籽油、柠檬油中的一种或几种，且几种的质量比是任意的。
6.一种大麻二酚CBD纳米乳的制备方法，其特征在于包括下列各步骤：
1）按下列质量比备料：
乳化剂 5-10%
助乳化剂 2.5-6%
大麻二酚CBD 1-25%
油相 1-25%
去离子水 余量
上述各组分的总和为100%；
2）先将油相放到30-67℃水浴锅中加热至油温达到30-67℃后，再将大麻二酚CBD加入油中，在搅拌速度为10-30r/s下使大麻二酚CBD溶解于油中，得油溶物；
3）将油溶物置于-80 — -196℃液氮冰箱中冷冻30min-1h后，解冻至室温,放到30-67℃水浴锅中加热10-20min，再置于-80 — -196℃液氮冰箱中冷冻30min-1h，解冻至室温,放到30-67℃水浴锅中加热10-20min，如此反复,直至大麻二酚CBD的溶解达到其饱和度；再依次加入乳化剂、助乳化剂，以10-40r/s的速度搅拌5-15min，得混合物；
4）以1ml/ min的速度，将总水量的1/2去离子水加入到步骤3）的混合物中，再在搅拌转速为10-40r/s条件下, 以2ml/min的速度，继续加入余量去离子水，搅拌10-30min，得大麻二酚CBD纳米乳。
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