CN109662945A - 一种含紫草素的微乳及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种含紫草素的微乳及其制备方法。所述的微乳由以下原料按重量比配制而成：紫草素0.015％～0.3％、乳化剂2～18％、助乳化剂3～15％、油相5～20％、水相50～78％。本发明具体制备方法如下：(1)称取乳化剂和助乳化剂，搅拌使之混合均匀；(2)再加入油相，搅拌均匀；(3)加入紫草素，搅拌至其完全溶解，得混合液；(4)用均质机对混合液均质，得均质液；(5)去离子水加入均质液中，搅拌至体系透明澄清。本发明克服了紫草素在水性制剂中溶解度极低、稳定性差的缺点，制备的紫草素微乳透明度好，并且具有良好的稳定性和透皮吸收性。

Description

一种含紫草素的微乳及其制备方法
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体的涉及一种含紫草素的微乳及其制备方法。
背景技术
紫草素，CAS号：517-89-5，分子式：C16H16O5，分子量：288.30，是紫草中特有的一种脂溶性萘醌色素类化合物。作为天然中药活性成分，具有良好的抗菌、抗肿瘤、抗氧化、抗病毒、抗炎和促进烧伤创口愈合等多重作用，已成为国内外研究的热点。天然紫草素在紫草中主要以酰基衍生物形式存在，包括乙酰紫草素，β，β-二甲基丙烯酰紫草素，异戊酰紫草素，异丁酰紫草素等，其中β，β-二甲基丙烯酰紫草素含量最高，乙酰紫草素次之，紫草素含量最低。许多公司已将紫草提取物做成具有抗炎止痒作用的紫草膏和紫草油，主要用于烧伤、湿疹等治疗。然而，紫草素本身易受外界因素如光、热等的影响，使用时不稳定，极容易被空气氧化，水溶性不佳，限制了其制剂的开发。制备高纯度紫草素的关键技术尚未产业化，目前国内以高纯度紫草素为原料的新药产品暂未正式进入市场。
紫草中含有称为吡咯里西啶类生物碱，简称PA，毒性集中于肝脏，又称为肝毒吡咯里西啶生物碱。早在2001年7月6日，美国药品监督管理局FDA就在其官方网站上发出警告，紫草中这种成分会对人体健康造成危害，甚至损害肝脏，要求厂家停止销售内服的含紫草成分的营养补充剂，外用时也不能用于开放式的伤口。而在部分欧盟国家，就连这类外用药膏也不允许出售。2010版中国药典仍然收载了一些含有PA类成分但缺少安全限量规定的品种，其中包括紫草，为临床应用留有隐患。
本发明以天然来源的98％高纯度紫草素为主要活性成分，制成微乳，不含有PA类毒性成分，质量安全可控。微乳(micro emulsion，ME)是由油相、水相、表面活性剂及助表面活性剂以适当比例混合后，自发形成的一种透明或半透明、低黏度的动力学和热力学都很稳定的混合体系，其液滴粒径介于10～100nm之间。微乳作为油、水难溶性药物的良好载体可增加药物的溶解度，并提高药物的稳定性，且微乳的表面张力较低，易于润湿皮肤，使角质层的结构发生变化，因而可促进药物经皮进入体循环。
发明内容
发明目的：针对现有技术中存在的问题，本发明提供了一种含紫草素的微乳及其制备方法，紫草素原料纯度高达98％，得到的紫草素微乳透明度好，并且具有良好的稳定性和透皮吸收性。
技术方案：本发明所述的含紫草素的微乳，紫草素0.015％～0.3％、乳化剂2～18％、助乳化剂3～15％、油相5～20％、水相50～78％。
一种含紫草素的微乳及其制备方法：
(1)将一定量的乳化剂和助乳化剂混合，用搅拌器在室温下以200rpm搅拌至均一状态；
(2)再加入一定量的油相，用搅拌器在室温下以200rpm搅拌至均一状态；
(3)加入一定量的紫草素，搅拌至其完全溶解，得到混合液；
(4)用均质机对步骤(3)得到的混合液，在室温下以8000～12000rpm均质10～20min，得到均质液；
(5)将一定量的去离子水慢慢加入步骤(4)得到的均质液中，搅拌至体系透明澄清，即得到含紫草素的微乳。
上述步骤(1)中，乳化剂选自聚氧乙烯(20EO)甲基葡萄糖苷倍半油酸酯、鲸蜡硬脂醇聚醚、辛基十二醇聚醚-20中的一种。
上述步骤(1)中，助乳化剂选自二乙二醇单乙基醚(Transcutol P)、辛基十二醇、PEG400、甘油中的一种。
上述步骤(2)中，油相选自油酸聚乙醇-6甘油酯(Labrafil M1944CS)、油酸乙酯、辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯、肉豆蔻酸异丙酯、大豆油、蓖麻油中的一种。
溶解度的测定：按2015版《中国药典》的溶解度测定方法，分别称取5g的油相、乳化剂、助乳化剂置于锥形瓶中，分别加入过量的紫草素，使其在各辅料中呈过饱和状态，在恒温25℃的水浴控温摇床中振摇48h，达平衡后，取上清液适量以8000rpm离心10min，精密称取离心后的上清液1g用甲醇稀释至适当浓度后于HPLC测定，计算药物的溶解度(表1)。
表1紫草素在不同辅料中的溶解度(x±s，n＝3)
乳化剂是形成微乳的重要物质，本实验紫草素在各乳化剂中的溶解度均较低，考虑到表面活性剂的亲水亲油平衡值(Hydrophilic lipophilic balance，HLB)和乳化能力，并结合实际，选择聚氧乙烯(20EO)甲基葡萄糖苷倍半油酸酯(HLB＝15.0)、鲸蜡硬脂醇聚醚(HLB＝15～17)、辛基十二醇聚醚-20(HLB＝14.9)中的一种为乳化剂。
紫草素在助乳化剂中的溶解度依次为：二乙二醇单乙基醚(Transcutol P)＞辛基十二醇＞PEG400＞甘油，其中在二乙二醇单乙基醚和辛基十二醇中的溶解度较理想。根据助乳化剂的特性及药物溶解度，选择二乙二醇单乙基醚(Transcutol P)、辛基十二醇中的一种为助乳化剂。
紫草素在各油相中的溶解度由大到小为：油酸聚乙醇-6甘油酯(LabrafilM1944CS)＞油酸乙酯＞辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯＞肉豆蔻酸异丙酯＞大豆油＞蓖麻油，即紫草素在油相油酸聚乙醇-6甘油酯(Labrafil M1944CS)中具有最大溶解度，而在大豆油和蓖麻油中的溶解度极低。为了满足微乳的载药量，油相选自油酸聚乙醇-6甘油酯(LabrafilM1944CS)、油酸乙酯中的一种。
有益效果：本发明以天然来源的98％高纯度紫草素为主要活性成分制成微乳，不含有PA类非药效毒性成分，质量安全可控。微乳作为油、水难溶性药物的良好载体可增加药物的溶解度，并提高药物的稳定性，且微乳的表面张力较低，易于润湿皮肤，使角质层的结构发生变化，因而可促进药物经皮进入体循环。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步的详细说明。
实施例1：
(1)称取8g聚氧乙烯(20EO)甲基葡萄糖苷倍半油酸酯和12g辛基十二醇混合，用搅拌器在室温下以200rpm搅拌至均一状态；
(2)再加入12g油酸聚乙醇-6甘油酯，用搅拌器在室温下以200rpm搅拌至均一状态；
(3)加入80mg紫草素，搅拌至其完全溶解，得到混合液；
(4)用均质机对步骤(3)得到的混合液，在室温下以10000rpm均质10min，得到均质液；
(5)将67.92g去离子水慢慢加入步骤(4)得到的均质液中，搅拌至体系透明澄清，即得到含紫草素的微乳。
实施例2：
(1)称取8g鲸蜡硬脂醇聚醚和3g二乙二醇单乙基醚混合，用搅拌器在室温下以200rpm搅拌至均一状态；
(2)再加入14g油酸乙酯，用搅拌器在室温下以200rpm搅拌至均一状态；
(3)加入50mg紫草素，搅拌至其完全溶解，得到混合液；
(4)用均质机对步骤(3)得到的混合液，在室温下以10000rpm均质10min，得到均质液；
(5)将74.95g去离子水慢慢加入步骤(4)得到的均质液中，搅拌至体系透明澄清，即得到含紫草素的微乳。
实施例3：
(1)称取15g辛基十二醇聚醚-20和12g辛基十二醇混合，用搅拌器在室温下以200rpm搅拌至均一状态；
(2)再加入18g油酸聚乙醇-6甘油酯，用搅拌器在室温下以200rpm搅拌至均一状态；
(3)加入300mg紫草素，搅拌至其完全溶解，得到混合液；
(4)用均质机对步骤(3)得到的混合液，在室温下以8000rpm均质20min，得到均质液；
(5)将54.70g去离子水慢慢加入步骤(4)得到的均质液中，搅拌至体系透明澄清，即得到含紫草素的微乳。
实施例4：
(1)称取12g辛基十二醇聚醚-20和3g二乙二醇单乙基醚混合，用搅拌器在室温下以200rpm搅拌至均一状态；
(2)再加入20g油酸聚乙醇-6甘油酯，用搅拌器在室温下以200rpm搅拌至均一状态；
(3)加入15mg紫草素，搅拌至其完全溶解，得到混合液；
(4)用均质机对步骤(3)得到的混合液，在室温下以12000rpm均质10min，得到均质液；
(5)将64.99g去离子水慢慢加入步骤(4)得到的均质液中，搅拌至体系透明澄清，即得到含紫草素的微乳。
实施例5：
紫草素微乳离心稳定性试验
按实施例1、2、3、4配方考察紫草素微乳剂的离心稳定性。将制备的微乳经8000r/min，离心30min，观察外观是否出现分层、浑浊等不稳定现象。
结果显示，实施例1-4形成的微乳体系都均一、稳定。
实施例6：
包封率测定
紫草素测定方法：色谱条件如下：色谱柱：Diamonsil C 18(250mm×4.6mm，5μm)，流动相：甲醇-0.025mol/L磷酸(85∶15V/V)，流速：1.0ml/min，检测波长：516nm，柱温：25℃，进样量：20μl。称取左旋紫草素对照品，加甲醇制成10.6μg/mL对照品贮备液。精密量取0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml的上述对照品贮备液，分别置于50ml容量瓶，加甲醇至刻度，配制成浓度为0.106、0.212、0.424、0.636、0.848、1.060、1.272ug/ml的对照品溶液，以上述色谱条件分别进样20ul，测定，记录色谱图，以峰面积(A)对浓度(C)进行线性回归。得到紫草素标准曲线方程A＝9.766×106C+1.674×104，r＝0.9999，线性关系良好。
供试品溶液的制备：取本发明配方工艺下制备的紫草素微乳，以8000rpm离心20min，精密移取1.0ml于10ml量瓶，加7ml甲醇常温超声10min使其破乳，续以甲醇定容至刻度，移取适量于离心管，经8000rpm离心10min后取上清液，经0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液作为紫草素微乳供试品溶液。
包封率测定：将实施例1、2、3、4批微乳按上述供试品溶液的制备方法制备供试品溶液，测定微乳有效载药浓度。
微乳包封率＝微乳有效载药量/处方量
表2本发明产品的紫草素微乳包封率
结果显示，实施例1-4制备的微乳的包封率均良好。
从实施例1-6的数据可以看出，本发明提供的一种含紫草素的微乳及其制备方法，紫草素的添加量在0.015％～0.35％时，形成的微乳体系均一、稳定，包封率良好。本方法反应效率高，整个操作工艺安全可靠、环保无毒，因此本方法易于推广，具有很强的实用性，适用于生产放大。
应当指出，以上具体实施方式仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，在阅读了本发明之后，本领域技术人员对本发明的各种等价形式的修改均落于本申请所附权利要求所限定的范围。

Claims (5)

1.一种含紫草素的微乳，其特征在于，该微乳由以下原料按重量比配制而成：紫草素0.015％～0.3％、乳化剂2～18％、助乳化剂3～15％、油相5～20％、水相50～78％。
2.一种含紫草素的微乳，其特征在于，制备方法由以下步骤组成：
(1)将一定量的乳化剂和助乳化剂混合，用搅拌器在室温下以200rpm搅拌至均一状态；
(2)加入一定量的油相，用搅拌器在室温下以200rpm搅拌至均一状态；
(3)加入一定量的紫草素，搅拌至其完全溶解，得到混合液；
(4)用均质机对步骤(3)得到的混合液，在室温下以8000～12000rpm均质10～20min，得到均质液；
(5)将一定量的去离子水慢慢加入步骤(4)得到的均质液中，搅拌至体系透明澄清，即得到含紫草素的微乳。
3.根据权利要求1所述含紫草素的微乳，其特征在于：所述乳化剂选自聚氧乙烯(20EO)甲基葡萄糖苷倍半油酸酯、鲸蜡硬脂醇聚醚、辛基十二醇聚醚-20中的一种。
4.根据权利要求1所述含紫草素的微乳，其特征在于：所述助乳化剂选自二乙二醇单乙基醚(Transcutol P)、辛基十二醇、PEG400、甘油中的一种。
5.根据权利要求1所述含紫草素的微乳，其特征在于：所述油相选自油酸聚乙醇-6甘油酯(Labrafil M1944CS)、油酸乙酯、辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯、肉豆蔻酸异丙酯、大豆油、蓖麻油中的一种。
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