CN110236175A - 一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱及其制备方法 - Google Patents
一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱及其制备方法 Download PDFInfo
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- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Abstract
本发明提供了一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱及其制备方法，属于食品加工领域。所述薏米抹酱包含以下原料：薏仁粉2000‑3000g、杏鲍菇麦角硫因提取液1000‑1500mL、食品级变性淀粉40‑60g、食品级L‑硒‑甲基硒代半胱氨酸0.4‑0.6μg、食品级海藻糖40‑60g、食盐60‑90g、食品级对羟基苯甲酸乙酯0.4‑0.6g。本发明将杏鲍菇液体发酵技术、麦角硫因提取工艺及薏米抹酱制作工艺有序结合，制成一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱。本产品涂抹方便、口味微甜、口感细腻，具薏米食品清热利湿、益肺排脓、健脾胃、强筋骨的作用，还具麦角硫因功能食品增加抗氧化、化解人体毒素、增强抗癌免疫的作用。
Description
技术领域
本发明属于食品加工领域，具体涉及一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱及其制备方法。
背景技术
麦角硫因(L-Ergothioneine,EGT)是种稀有的天然手性氨基酸，最早发现于1909年，被认为是人机体内重要活性物质。EGT具有很强的抗氧化活性，与其他抗氧化剂相比，具有无毒、无异味、稳定性好、生理pH条件下不会自发氧化、极易溶于水、在水溶液中不易分解、对光和热不敏感等优点。EGT制备主要有化学合成法、天然生物提取法和生物合成法，利用食药用真菌发酵合成EGT是种较好的生物合成法，相比化学合成法具成本低、安全性高等优点，相比天然生物提取法具纯度高、原料来源广等优点。
目前，美国、日本、韩国、中国等国学者对食药用真菌发酵合成EGT进行了诸多探讨，利用的食药用真菌有：双孢蘑菇Agaricus bisporus、姬松茸Agaricus blazei、金针菇Flammulina velutipes、紫黑灵芝Ganoderma neo-japonicum、猴头菇Hericiumerinaceus、香菇Lentinus edodes、杏鲍菇pleurotus eryngii、灰树花Polyporusfrondosus和平茹Pleurotus ostreatus等(刘琦等，2013；ZL 201210392417.8和申请专利号201811605008.5)；提取源有：子实体和菌丝体，据刘琦等(2013)统计，从子实体中提取(EGT在不同子实体中含量差别大，通常为0.06-5.54mg/g DW)，从菌丝体中提取(EGT在不同的菌丝体中含量差异相对较小，通常为0.33-0.72mg/g DW)；采用的发酵方式有：固体发酵和液体发酵，两者相比，液体发酵能大幅度缩短生产周期，还能通过代谢调控等发酵过程控制手段有效地提高产物产率，降低生产成本，更容易实现生产的规模化、连续化、机械化和自动化，现已逐步取代固体发酵，成为EGT生物合成技术的发展趋势。上述探讨给利用食药用真菌液体发酵合成EGT指明了方向，但也存在一些困难，一是EGT合成量仍然偏低，如用香菇菌种液体发酵合成EGT，菌丝体中EGT最高含量为3.45mg/g DW，折算到发酵液中EGT的含量为23.6mg/L(Pramvadee Tepwong et al.,2012)；二是发酵时间整体偏长，如用杏鲍菇菌种液体发酵合成EGT，发酵到20d时，菌丝体EGT最高含量也只有5.84mg/g DW，折算到发酵液中EGT的含量约为64.2mg/L(Chih-Hung Liang et al.,2013)。因此，要实现可控规模化生产，仍需探讨采用新的代谢调控方法，进一步改良液体发酵工艺，缩短发酵生产周期，提高EGT的代谢积累产率及提取工艺。
杏鲍菇EGT的体外抗氧化力已得到证实总体较强(王艳等,杏鲍菇麦角硫因的体外抗氧化力及环境因素对其稳定性的影响，食品与发酵工业，2019.6.20：1-12)，并且欧盟委员会也发布了(EU)2017/1281号法规，授权L-麦角硫因(L-ergothioneine)作为新食品成分投放市场，规定最高使用水平一般人为30mg/d、3岁以上儿童20mg/d。因此，将EGT作为保健食品的功能型添加剂是一种新的趋势。薏米作为一种营养丰富、具有诸多保健功能的食品，具有利水消肿、健脾去湿、舒筋除痹、清热排脓等功效，并且相比市面上保健品具有价格低廉、食品安全、禁忌少的优点。目前市面上薏米产品以红豆薏米粉、薏米粥、薏米食品为主，尚未有人将麦角硫因与薏米结合起来制作抹酱的案例。
发明内容
本发明目的是提供一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱及其制备方法。本发明将杏鲍菇液体发酵技术、麦角硫因提取工艺及薏米抹酱制作工艺有序结合，改良培养基配方，采用固-液-液二级放大培养工艺将发酵生产周期缩短至11-15d，使发酵液中EGT的含量提升至276-382μg/mL，并通过菌丝体-发酵液EGT混提工艺，最终制得一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱。该抹酱涂抹方便、口味微甜、口感细腻，具薏米食品清热利湿、益肺排脓、健脾胃、强筋骨的作用，还具麦角硫因功能食品增加抗氧化、化解人体毒素、增强抗癌免疫的作用。
本发明由以下技术方案实现：
一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱，由以下原料组成：薏仁粉2000-3000g、杏鲍菇麦角硫因提取液1000-1500mL、食品级变性淀粉40-60g、食品级L-硒-甲基硒代半胱氨酸0.4-0.6μg、食品级海藻糖40-60g、食盐60-90g、食品级对羟基苯甲酸乙酯0.4-0.6g。
一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱的制备方法，由杏鲍菇液体发酵培养、麦角硫因提取和薏米抹酱制作三个部分有序结合组成，包括以下步骤：
步骤S1杏鲍菇液体发酵培养
采用固-液-液二级放大培养工艺，对杏鲍菇菌种进行液体发酵培养，最终获得富含杏鲍菇菌丝体小球的母种放大培养液，供用于麦角硫因提取液制备。其操作包括：平板活化培养、液体母种培养和母种放大培养3个步骤。
步骤S11平板活化培养：选用杏鲍菇Pe528菌种进行平板活化培养，改进培养基配方为：葡萄糖3％、蛋白胨1.5％、麦麸浸提液2％、琼脂2％，于121℃高压灭菌20min。倒平板培养皿直径为90mm，培养基量为15-20mL，皿中心接入似小黄豆大小(直径4-5mm)杏鲍菇菌块，置于25℃恒温培养箱内培养7-10d，当白色菌丝辐射浓密生长至距皿边缘近5mm且无明显扭结发生前，及时转用于液体母种培养。
步骤S12液体母种培养：从平板中打取表面平滑且菌丝生长壮实的菌块供用于液体母种培养，改进培养液配方为：葡萄糖2％、蛋白胨1.5％、麦麸细粉1％、KH2PO40.1％、MgSO40.1％、谷氨酸0.1％、维生素B60.1％，于121℃高压灭菌20min。将100mL培养液装进250mL三角瓶中，接入5块直径为8mm的平板杏鲍菇活菌块，置于25℃、180rpm恒温摇床培养5-7d，当液体母种颜色逐渐加深成浅棕色且悬浮有大量似小米粒大小(粒径0.5-1.5mm)的菌丝簇时，及时转用于母种放大培养。
步骤S13母种放大培养：将富含杏鲍菇菌丝簇的液体母种转入母种放大培养基进行生产放大培养，改进培养液配方为：玉米糁(粒径1.5-2.5mm)2％、蛋白胨1.5％、麦麸细粉1％、KH2PO40.1％、MgSO40.1％、谷氨酸0.1％、组氨酸0.15％、维生素B60.1％，于121℃高压灭菌20min。将1000mL培养液装进2000mL三角瓶中，接入杏鲍菇液体母种100mL，置于25℃、180rpm恒温摇床培养7-8d，当放大培养液颜色逐渐加深成黄棕色且瓶底沉淀有大量杏鲍菇菌丝体小球(粒径1.0-3.0mm)时，及时转用于麦角硫因提取。
步骤S2麦角硫因提取
以富含杏鲍菇菌丝体小球的母种放大培养物为原料，采用菌丝体-发酵液EGT混提工艺，获得杏鲍菇麦角硫因提取液，供用于薏米抹酱制作。其操作包括：真空冷冻干燥和麦角硫因浸提纯化2个步骤。
步骤S21真空冷冻干燥：将富含杏鲍菇菌丝体小球的母种放大培养物分装于不锈钢制品托盘(430*235*25mm)中，每个托盘最大承装量为1000mL母种放大培养液，装液后托盘置于真空冷冻干燥机的制品搁板上，-50℃、1.3-13pa环境下冷冻干燥24h，收集干燥后的碎片状浅棕色粉体，密封保存，备用于麦角硫因浸提纯化。
步骤S22麦角硫因浸提纯化：将真空冷冻干燥制得的碎片状粉体按1:10(g:mL)比例加入纯净水，加温到70±2℃，300rpm电动搅拌机持续搅动20-30min制成待提液；待提液转置于超声波细胞破碎仪上处理，超声功率在10-1000W间依待提液容量调整，超声及间歇时间均为5s，连续处理10-15min制得粗提液；在搅动状态下缓慢向粗提液中加入3倍体积比95vol％食用酒精，4℃静置24h后，在微波功率500W、微波温度80℃条件下处理3-5min，先后用300目网式滤布和孔径0.45μm PTFE微孔滤膜纯化过滤，收集滤液获得麦角硫因提取液，HPLC检测标注麦角硫因含量后置于冰箱4℃保存备用。
步骤S3薏米抹酱制作
以薏仁、麦角硫因提取液为主原料，经科学配制，制得一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱。其操作包括：原料准备、抹酱制作及包装贮藏。
步骤S31原料准备：选取具有“甘、糯、稠”特有品质特征且符合相应的食品安全标准及有关规定的薏仁，在生产加工过程具备符合GB14881规定的环境下，将薏仁洗净后用电加热炒锅炒成金黄色且发脆，冷却后用具有干磨功能的粉碎机破碎成薏仁粉备用；将杏鲍菇麦角硫因提取液用纯净水定容至200-300μg/mL备用。
步骤S32抹酱制作：将薏仁粉2000-3000g、杏鲍菇麦角硫因提取液1000-1500mL、食品级变性淀粉40-60g、食品级L-硒-甲基硒代半胱氨酸0.4-0.6μg、食品级海藻糖40-60g、食盐60-90g、食品级对羟基苯甲酸乙酯0.4-0.6g依量放入煮制搅拌蒸煮锅内，按1:2(g:mL)比例加纯净水，提温至100℃，搅拌蒸煮30-45min，制成粘稠的薏米抹酱料，抹酱料总重控制在4000-6000g，其麦角硫因含量计算公式如下：
y：薏米抹酱料麦角硫因含量(μg/g)；L：杏鲍菇麦角硫因提取液添加量(mL)；K：杏鲍菇麦角硫因提取液定容浓度(μg/mL)；N:薏米抹酱料总重(g)。
步骤S33包装贮藏：将制备好的薏米抹酱料采用符合卫生标准的200g标准玻璃瓶进行分装，分装量160±5g，瓶盖密封后用巴氏灭菌法灭菌，产品抽检合格后即为一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱；产品可在常温阴凉条件下贮藏，开盖后须4℃冷藏。
本发明相比现有技术具有如下优点：
1.本发明将杏鲍菇液体发酵技术、麦角硫因提取工艺及薏米抹酱制作工艺有序结合，改良培养基配方，采用固-液-液二级放大培养工艺将发酵生产周期缩短至11-15d，使发酵液中EGT的含量提升至276-382μg/mL，并通过菌丝体-发酵液EGT混提工艺，最终制得一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱。
2.本发明将麦角硫因与薏米结合起来制作抹酱是首创，制得的抹酱产品涂抹方便、口味微甜、口感细腻，具薏米食品清热利湿、益肺排脓、健脾胃、强筋骨的作用，还具麦角硫因功能食品增加抗氧化、化解人体毒素、增强抗癌免疫的作用。
具体实施方式
为了使本发明所述的内容更加便于理解，下面结合具体实施方式对本发明所述的技术方案做进一步的说明。
实施例1
一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱，由以下成分组成：薏仁粉2000g、杏鲍菇麦角硫因提取液1000mL、食品级变性淀粉40g、食品级L-硒-甲基硒代半胱氨酸0.4μg、食品级海藻糖40g、食盐60g、食品级对羟基苯甲酸乙酯0.4g。
一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱，由杏鲍菇液体发酵培养、麦角硫因提取和薏米抹酱制作三个部分组成。
1、杏鲍菇液体发酵培养
采用固-液-液二级放大培养工艺，对杏鲍菇菌种进行液体发酵培养，最终获得富含杏鲍菇菌丝体小球的母种放大培养液，供用于麦角硫因提取液制备。其操作包括：平板活化培养、液体母种培养和母种放大培养3个步骤。
(1)平板活化培养：选用杏鲍菇Pe528菌株进行平板活化培养，改进培养基配方为：葡萄糖3％、蛋白胨1.5％、麦麸浸提液2％、琼脂2％，于121℃高压灭菌20min。倒平板培养皿直径为90mm，培养基量为15mL，皿中心接入直径4-5mm的杏鲍菇菌块，置于25℃恒温培养箱内培养7d，当白色菌丝辐射浓密生长至距皿边缘近5mm且无明显扭结发生前，及时转用于液体母种培养；
(2)液体母种培养：从平板中打取表面平滑且菌丝生长壮实的菌块供用于液体母种培养，改进培养液配方为：葡萄糖2％、蛋白胨1.5％、麦麸细粉1％、KH2PO40.1％、MgSO40.1％、谷氨酸0.1％、维生素B60.1％，于121℃高压灭菌20min。将100mL培养液装进250mL三角瓶中，接入5块直径为8mm的平板杏鲍菇活菌块，置于25℃、180rpm恒温摇床培养5d，当液体母种颜色逐渐加深成浅棕色且悬浮有大量粒径0.5-1.5mm的菌丝簇时，及时转用于母种放大培养；
(3)母种放大培养：将富含杏鲍菇菌丝簇的液体母种转入母种放大培养基进行生产放大培养，改进培养液配方为：玉米糁(粒径1.5-2.5mm)2％、蛋白胨1.5％、麦麸细粉1％、KH2PO40.1％、MgSO40.1％、谷氨酸0.1％、组氨酸0.15％、维生素B60.1％，于121℃高压灭菌20min。将1000mL培养液装进2000mL三角瓶中，接入杏鲍菇液体母种100mL，置于25℃、180rpm恒温摇床培养7d，当放大培养液颜色逐渐加深成黄棕色且瓶底沉淀有大量粒径为1.0-3.0mm的杏鲍菇菌丝体小球时，及时转用于麦角硫因提取。
2、麦角硫因提取
以富含杏鲍菇菌丝体小球的母种放大培养物为原料，采用菌丝体-发酵液EGT混提工艺，获得杏鲍菇麦角硫因提取液，供用于薏米抹酱制作。其操作包括：真空冷冻干燥和麦角硫因浸提纯化2个步骤。
(1)真空冷冻干燥：将富含杏鲍菇菌丝体小球的母种放大培养物分装于430*235*25mm不锈钢制品托盘中，每个托盘最大承装量为1000mL母种放大培养液，装液后托盘置于真空冷冻干燥机的制品搁板上，-50℃、1.3-13pa环境下冷冻干燥24h，收集干燥后的碎片状浅棕色粉体，密封保存，备用于麦角硫因浸提纯化；
(2)麦角硫因浸提纯化：将真空冷冻干燥制得的碎片状粉体按1:10(g:mL)比例加入纯净水，加温到70±2℃，300rpm电动搅拌机持续搅动20min制成待提液；待提液转置于超声波细胞破碎仪上处理，超声功率在10-1000W间依待提液容量调整，超声及间歇时间均为5s，连续处理10min制得粗提液；在搅动状态下向粗提液中加入3倍体积比95vol％食用酒精，4℃静置24h后，在微波功率500W、微波温度80℃条件下处理3min，先后用300目网式滤布和孔径0.45μmPTFE微孔滤膜纯化过滤，收集滤液获得麦角硫因提取液，HPLC检测麦角硫因含量为276μg/mL、后置于冰箱4℃保存备用。
3、薏米抹酱制作
以薏仁、麦角硫因提取液为主原料，经科学配制，制得一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱。其操作包括：原料准备、抹酱制作及包装贮藏。
(1)原料准备：选取具有“甘、糯、稠”特有品质特征且符合相应的食品安全标准及有关规定的薏仁，在生产加工过程具备符合GB14881规定的环境下，将薏仁洗净后用电加热炒锅炒成金黄色且发脆，冷却后用具有干磨功能的粉碎机破碎成薏仁粉备用；将杏鲍菇麦角硫因提取液用纯净水定容至200μg/mL备用；
(2)抹酱制作：将薏仁粉2000g、杏鲍菇麦角硫因提取液1000mL、食品级变性淀粉40g、食品级L-硒-甲基硒代半胱氨酸0.4μg、食品级海藻糖40g、食盐60g、食品级对羟基苯甲酸乙酯0.4g依量放入煮制搅拌蒸煮锅内，按1:2(g:mL)比例加纯净水，提温至100℃，搅拌蒸煮30-45min，制成粘稠的薏米抹酱料，抹酱料总重控制在4000g，制得的薏米抹酱麦角硫因含量为50μg/mL、其麦角硫因含量计算公式如下：
y：薏米抹酱料麦角硫因含量(μg/g)；L：杏鲍菇麦角硫因提取液添加量(mL)；K：杏鲍菇麦角硫因提取液定容浓度(μg/mL)；N:薏米抹酱料总重(g)；
(3)包装贮藏：将制备好的薏米抹酱料采用符合卫生标准的200g标准玻璃瓶进行分装，分装量160±5g，瓶盖密封后用巴氏灭菌法灭菌，产品抽检合格后即为一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱；产品可在常温阴凉条件下贮藏，开盖后须4℃冷藏。
实施例2
一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱，由以下成分组成：薏仁粉3000g、杏鲍菇麦角硫因提取液1500mL、食品级变性淀粉60g、食品级L-硒-甲基硒代半胱氨酸0.6μg、食品级海藻糖60g、食盐90g、食品级对羟基苯甲酸乙酯0.6g。
一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱，由杏鲍菇液体发酵培养、麦角硫因提取和薏米抹酱制作三个部分组成。
1、杏鲍菇液体发酵培养
采用固-液-液二级放大培养工艺，对杏鲍菇菌种进行液体发酵培养，最终获得富含杏鲍菇菌丝体小球的母种放大培养液，供用于麦角硫因提取液制备。其操作包括：平板活化培养、液体母种培养和母种放大培养3个步骤。
(1)平板活化培养：选用杏鲍菇Pe528菌株进行平板活化培养，改进培养基配方为：葡萄糖3％、蛋白胨1.5％、麦麸浸提液2％、琼脂2％，于121℃高压灭菌20min。倒平板培养皿直径为90mm，培养基量为20mL，皿中心接入直径4-5mm的杏鲍菇菌块，置于25℃恒温培养箱内培养10d，当白色菌丝辐射浓密生长至距皿边缘近5mm且无明显扭结发生前，及时转用于液体母种培养；
(2)液体母种培养：从平板中打取表面平滑且菌丝生长壮实的菌块供用于液体母种培养，改进培养液配方为：葡萄糖2％、蛋白胨1.5％、麦麸细粉1％、KH2PO40.1％、MgSO40.1％、谷氨酸0.1％、维生素B60.1％，于121℃高压灭菌20min。将100mL培养液装进250mL三角瓶中，接入5块直径为8mm的平板杏鲍菇活菌块，置于25℃、180rpm恒温摇床培养7d，当液体母种颜色逐渐加深成浅棕色且悬浮有大量粒径为0.5-1.5mm的菌丝簇时，及时转用于母种放大培养；
(3)母种放大培养：将富含杏鲍菇菌丝簇的液体母种转入母种放大培养基进行生产放大培养，改进培养液配方为：玉米糁(粒径1.5-2.5mm)2％、蛋白胨1.5％、麦麸细粉1％、KH2PO40.1％、MgSO40.1％、谷氨酸0.1％、组氨酸0.15％、维生素B60.1％，于121℃高压灭菌20min。将1000mL培养液装进2000mL三角瓶中，接入杏鲍菇液体母种100mL，置于25℃、180rpm恒温摇床培养8d，当放大培养液颜色逐渐加深成黄棕色且瓶底沉淀有大量粒径为1.0-3.0mm的杏鲍菇菌丝体小球时，及时转用于麦角硫因提取。
2、麦角硫因提取
以富含杏鲍菇菌丝体小球的母种放大培养物为原料，采用菌丝体-发酵液EGT混提工艺，获得杏鲍菇麦角硫因提取液，供用于薏米抹酱制作。其操作包括：真空冷冻干燥和麦角硫因浸提纯化2个步骤。
(1)真空冷冻干燥：将富含杏鲍菇菌丝体小球的母种放大培养物分装于430*235*25mm不锈钢制品托盘中，每个托盘最大承装量为1000mL母种放大培养液，装液后托盘置于真空冷冻干燥机的制品搁板上，-50℃、1.3-13pa环境下冷冻干燥24h，收集干燥后的碎片状浅棕色粉体，密封保存，备用于麦角硫因浸提纯化；
(2)麦角硫因浸提纯化：将真空冷冻干燥制得的碎片状粉体按1:10(g:mL)比例加入纯净水，加温到70±2℃，300rpm电动搅拌机持续搅动30min制成待提液；待提液转置于超声波细胞破碎仪上处理，超声功率在10-1000W间依待提液容量调整，超声及间歇时间均为5s，连续处理15min制得粗提液；在搅动状态下向粗提液中加入3倍体积比95vol％食用酒精，4℃静置24h后，在微波功率500W、微波温度80℃条件下处理5min，先后用300目网式滤布和孔径0.45μmPTFE微孔滤膜纯化过滤，收集滤液获得麦角硫因提取液，HPLC检测麦角硫因含量为382μg/mL、后置于冰箱4℃保存备用。
3、薏米抹酱制作
以薏仁、麦角硫因提取液为主原料，经科学配制，制得一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱。其操作包括：原料准备、抹酱制作及包装贮藏。
(1)原料准备：选取具有“甘、糯、稠”特有品质特征且符合相应的食品安全标准及有关规定的薏仁，在生产加工过程具备符合GB14881规定的环境下，将薏仁洗净后用电加热炒锅炒成金黄色且发脆，冷却后用具有干磨功能的粉碎机破碎成薏仁粉备用；将杏鲍菇麦角硫因提取液用纯净水定容至300μg/mL备用；
(2)抹酱制作：将薏仁粉3000g、杏鲍菇麦角硫因提取液1500mL、食品级变性淀粉60g、食品级L-硒-甲基硒代半胱氨酸0.6μg、食品级海藻糖60g、食盐90g、食品级对羟基苯甲酸乙酯0.6g依量放入煮制搅拌蒸煮锅内，按1:2(g:mL)比例加纯净水，提温至100℃，搅拌蒸煮30-45min，制成粘稠的薏米抹酱料，抹酱料总重控制在6000g，制得的薏米抹酱麦角硫因含量为75μg/mL、其麦角硫因含量计算公式如下：
y：薏米抹酱料麦角硫因含量(μg/g)；L：杏鲍菇麦角硫因提取液添加量(mL)；K：杏鲍菇麦角硫因提取液定容浓度(μg/mL)；N:薏米抹酱料总重(g)；
(3)包装贮藏：将制备好的薏米抹酱料采用符合卫生标准的200g标准玻璃瓶进行分装，分装量160±5g，瓶盖密封后用巴氏灭菌法灭菌，产品抽检合格后即为一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱；产品可在常温阴凉条件下贮藏，开盖后须4℃冷藏。
实施例3
一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱，由以下成分组成：薏仁粉2500g、杏鲍菇麦角硫因提取液1250mL、食品级变性淀粉50g、食品级L-硒-甲基硒代半胱氨酸0.5μg、食品级海藻糖50g、食盐75g、食品级对羟基苯甲酸乙酯0.5g。
一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱，由杏鲍菇液体发酵培养、麦角硫因提取和薏米抹酱制作三个部分组成。
1、杏鲍菇液体发酵培养
采用固-液-液二级放大培养工艺，对杏鲍菇菌种进行液体发酵培养，最终获得富含杏鲍菇菌丝体小球的母种放大培养液，供用于麦角硫因提取液制备。其操作包括：平板活化培养、液体母种培养和母种放大培养3个步骤。
(1)平板活化培养：选用杏鲍菇Pe528菌株进行平板活化培养，改进培养基配方为：葡萄糖3％、蛋白胨1.5％、麦麸浸提液2％、琼脂2％，于121℃高压灭菌20min。倒平板培养皿直径为90mm，培养基量为18mL，皿中心接入直径4-5mm的杏鲍菇菌块，置于25℃恒温培养箱内培养8d，当白色菌丝辐射浓密生长至距皿边缘近5mm且无明显扭结发生前，及时转用于液体母种培养；
(2)液体母种培养：从平板中打取表面平滑且菌丝生长壮实的菌块供用于液体母种培养，改进培养液配方为：葡萄糖2％、蛋白胨1.5％、麦麸细粉1％、KH2PO40.1％、MgSO40.1％、谷氨酸0.1％、维生素B60.1％，于121℃高压灭菌20min。将100mL培养液装进250mL三角瓶中，接入5块直径为8mm的平板杏鲍菇活菌块，置于25℃、180rpm恒温摇床培养6d，当液体母种颜色逐渐加深成浅棕色且悬浮有大量粒径为0.5-1.5mm的菌丝簇时，及时转用于母种放大培养；
(3)母种放大培养：将富含杏鲍菇菌丝簇的液体母种转入母种放大培养基进行生产放大培养，改进培养液配方为：玉米糁(粒径1.5-2.5mm)2％、蛋白胨1.5％、麦麸细粉1％、KH2PO40.1％、MgSO40.1％、谷氨酸0.1％、组氨酸0.15％、维生素B60.1％，于121℃高压灭菌20min。将1000mL培养液装进2000mL三角瓶中，接入杏鲍菇液体母种100mL，置于25℃、180rpm恒温摇床培养7d，当放大培养液颜色逐渐加深成黄棕色且瓶底沉淀有大量粒径为1.0-3.0mm的杏鲍菇菌丝体小球时，及时转用于麦角硫因提取。
2、麦角硫因提取
以富含杏鲍菇菌丝体小球的母种放大培养物为原料，采用菌丝体-发酵液EGT混提工艺，获得杏鲍菇麦角硫因提取液，供用于薏米抹酱制作。其操作包括：真空冷冻干燥和麦角硫因浸提纯化2个步骤。
(1)真空冷冻干燥：将富含杏鲍菇菌丝体小球的母种放大培养物分装于430*235*25mm不锈钢制品托盘中，每个托盘最大承装量为1000mL母种放大培养液，装液后托盘置于真空冷冻干燥机的制品搁板上，-50℃、1.3-13pa环境下冷冻干燥24h，收集干燥后的碎片状浅棕色粉体，密封保存，备用于麦角硫因浸提纯化；
(2)麦角硫因浸提纯化：将真空冷冻干燥制得的碎片状粉体按1:10(g:mL)比例加入纯净水，加温到70±2℃，300rpm电动搅拌机持续搅动25min制成待提液；待提液转置于超声波细胞破碎仪上处理，超声功率在10-1000W间依待提液容量调整，超声及间歇时间均为5s，连续处理13min制得粗提液；在搅动状态下向粗提液中加入3倍体积比95vol％食用酒精，4℃静置24h后，在微波功率500W、微波温度80℃条件下处理4min，先后用300目网式滤布和孔径0.45μmPTFE微孔滤膜纯化过滤，收集滤液获得麦角硫因提取液，HPLC检测麦角硫因含量为325μg/mL、后置于冰箱4℃保存备用。
3、薏米抹酱制作
以薏仁、麦角硫因提取液为主原料，经科学配制，制得一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱。其操作包括：原料准备、抹酱制作及包装贮藏。
(1)原料准备：选取具有“甘、糯、稠”特有品质特征且符合相应的食品安全标准及有关规定的薏仁，在生产加工过程具备符合GB14881规定的环境下，将薏仁洗净后用电加热炒锅炒成金黄色且发脆，冷却后用具有干磨功能的粉碎机破碎成薏仁粉备用；将杏鲍菇麦角硫因提取液用纯净水定容至250μg/mL备用；
(2)抹酱制作：将薏仁粉2500g、杏鲍菇麦角硫因提取液1250mL、食品级变性淀粉50g、食品级L-硒-甲基硒代半胱氨酸0.5μg、食品级海藻糖50g、食盐75g、食品级对羟基苯甲酸乙酯0.5g依量放入煮制搅拌蒸煮锅内，按1:2(g:mL)比例加纯净水，提温至100℃，搅拌蒸煮30-45min，制成粘稠的薏米抹酱料，抹酱料总重控制在5000g，制得的薏米抹酱麦角硫因含量为62.5μg/mL、其麦角硫因含量计算公式如下：
y：薏米抹酱料麦角硫因含量(μg/g)；L：杏鲍菇麦角硫因提取液添加量(mL)；K：杏鲍菇麦角硫因提取液定容浓度(μg/mL)；N:薏米抹酱料总重(g)；
(3)包装贮藏：将制备好的薏米抹酱料采用符合卫生标准的200g标准玻璃瓶进行分装，分装量160±5g，瓶盖密封后用巴氏灭菌法灭菌，产品抽检合格后即为一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱；产品可在常温阴凉条件下贮藏，开盖后须4℃冷藏。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。
Claims (7)
1.一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱，其特征在于，包含以下原料：薏仁粉2000-3000 g、杏鲍菇麦角硫因提取液1000-1500 mL、食品级变性淀粉40-60 g、食品级L-硒-甲基硒代半胱氨酸0.4-0.6 μg、食品级海藻糖40-60 g、食盐60-90 g、食品级对羟基苯甲酸乙酯0.4-0.6 g。
2.一种如权利要求1所述的富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：杏鲍菇液体发酵培养、麦角硫因提取和薏米抹酱制作。
3.根据权利要求2所述的一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱的制备方法，其特征在于，所述杏鲍菇液体发酵培养包括以下具体步骤：
（1）平板活化培养：选用杏鲍菇Pe528菌种进行平板活化培养，改进培养基配方为：葡萄糖3 %、蛋白胨1.5 %、麦麸浸提液2 %、琼脂2 %，于121 ℃高压灭菌20 min；倒平板培养皿直径为90 mm，培养基量为15-20 mL，皿中心接入直径4-5 mm的杏鲍菇菌块，置于25 ℃恒温培养箱内培养7-10 d，当白色菌丝辐射浓密生长至距皿边缘近5 mm且无明显扭结发生前，及时转用于液体母种培养；
（2）液体母种培养：从平板中打取表面平滑且菌丝生长壮实的菌块供用于液体母种培养，改进培养液配方为：葡萄糖2 %、蛋白胨1.5 %、麦麸细粉1 %、KH2PO4 0.1 %、MgSO4 0.1%、谷氨酸0.1 %、维生素B6 0.1 %，于121 ℃高压灭菌20 min；将100 mL培养液装进250 mL三角瓶中，接入5块直径为8 mm的平板杏鲍菇活菌块，置于25 ℃、180 rpm恒温摇床培养5-7d，当液体母种颜色逐渐加深成浅棕色且悬浮有大量粒径为0.5-1.5 mm的菌丝簇时，及时转用于母种放大培养；
（3）母种放大培养：将富含杏鲍菇菌丝簇的液体母种转入母种放大培养基进行生产放大培养，改进培养液配方为：粒径1.5-2.5 mm玉米糁2 %、蛋白胨1.5 %、麦麸细粉1 %、KH2PO40.1 %、MgSO4 0.1 %、谷氨酸 0.1 %、组氨酸0.15 %、维生素B6 0.1 %，于121 ℃高压灭菌20min；将1000 mL培养液装进2000 mL三角瓶中，接入杏鲍菇液体母种100 mL，置于25 ℃、180rpm恒温摇床培养7-8 d，当放大培养液颜色逐渐加深成黄棕色且瓶底沉淀有大量粒径为1.0-3.0 mm的杏鲍菇菌丝体小球时，及时转用于麦角硫因提取。
4.根据权利要求2所述的一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱的制备方法，其特征在于，所述麦角硫因提取包括以下具体步骤：
（1）真空冷冻干燥：将富含杏鲍菇菌丝体小球的母种放大培养物分装于430*235*25 mm不锈钢制品托盘中，每个托盘最大承装量为1000 mL母种放大培养液，装液后托盘置于真空冷冻干燥机的制品搁板上，-50 ℃、1.3-13 pa环境下冷冻干燥24 h，收集干燥后的碎片状浅棕色粉体，密封保存，备用于麦角硫因浸提纯化；
（2）麦角硫因浸提纯化：将真空冷冻干燥制得的碎片状粉体按1:10 (g:mL)比例加入纯净水，加温到70±2 ℃，300 rpm电动搅拌机持续搅动20-30 min制成待提液；待提液转置于超声波细胞破碎仪上处理，超声处理制得粗提液；在搅动状态下向粗提液中加入3倍体积比95 vol%食用酒精，4 ℃静置24 h后，在微波功率500 W、微波温度80 ℃条件下处理3-5min，先后用300目网式滤布和孔径0.45 μm PTFE微孔滤膜纯化过滤，收集滤液获得麦角硫因提取液，HPLC检测标注麦角硫因含量后置于冰箱4℃保存备用。
5.根据权利要求4所述的一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱的制备方法，其特征在于，所述超声处理制得粗提液，具体超声条件：超声功率在10-1000 W间依待提液容量调整，超声及间歇时间均为5 s，连续处理10-15 min制得粗提液。
6.根据权利要求2所述的一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱的制备方法，其特征在于，所述薏米抹酱制作包括以下具体步骤：
（1）原料准备：选取具有“甘、糯、稠”特有品质特征且符合相应的食品安全标准及有关规定的薏仁，在生产加工过程具备符合GB14881规定的环境下，将薏仁洗净后用电加热炒锅炒成金黄色且发脆，冷却后用具有干磨功能的粉碎机破碎成薏仁粉备用；将杏鲍菇麦角硫因提取液用纯净水定容至200-300 μg/mL备用；
（2）抹酱制作：将薏仁粉2000-3000 g、杏鲍菇麦角硫因提取液1000-1500 mL、食品级变性淀粉40-60 g、食品级L-硒-甲基硒代半胱氨酸0.4-0.6 μg、食品级海藻糖40-60 g、食盐60-90 g、食品级对羟基苯甲酸乙酯0.4-0.6 g依量放入煮制搅拌蒸煮锅内，按1:2 (g:mL)比例加纯净水，提温至100 ℃，搅拌蒸煮30-45 min，制成粘稠的薏米抹酱料，抹酱料总重控制在4000-6000 g；
（3）包装贮藏：将制备好的薏米抹酱料采用符合卫生标准的200 g标准玻璃瓶进行分装，分装量160±5 g，瓶盖密封后用巴氏灭菌法灭菌，产品抽检合格后即为一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱；产品可在常温阴凉条件下贮藏，开盖后须4℃冷藏。
7.根据权利要求6所述的一种富含杏鲍菇麦角硫因的薏米抹酱的制备方法，其特征在于，其麦角硫因含量计算公式如下：
y：薏米抹酱料麦角硫因含量，单位μg/g；L：杏鲍菇麦角硫因提取液添加量，单位mL；K：杏鲍菇麦角硫因提取液定容浓度，单位μg/mL；N:薏米抹酱料总重，单位g。
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