CN105949130A - 一种利用超声-微波辅助结合真空冷冻干燥提取食用菌麦角硫因的方法 - Google Patents

一种利用超声-微波辅助结合真空冷冻干燥提取食用菌麦角硫因的方法 Download PDF

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Abstract

本发明属于保健食品加工技术领域，公开了一种利用超声‑微波辅助结合真空冷冻干燥提取食用菌麦角硫因的方法。该方法包括以下步骤：将新鲜洁净的杏鲍菇横切成薄片，真空冷冻干燥后粉碎过筛，得到杏鲍菇干粉；加入乙醇，微波处理得到杏鲍菇提取液；将杏鲍菇提取液超声处理；离心取上清液，得到麦角硫因提取液。采用真空冷冻干燥技术对新鲜杏鲍菇进行干燥处理，便于保藏，保持了其中麦角硫因的含量和活性基本不变，便于充分粉碎增大麦角硫因提取得率。采用超声‑微波辅助提取，流程简单，操作性强，可使麦角硫因充分溶出，耗时短，提取率高。适当的提取温度可得高品质麦角硫因提取液，采用无毒无害提取剂，安全，环保。

Description

一种利用超声-微波辅助结合真空冷冻干燥提取食用菌麦角硫因的方法
技术领域
本发明属于保健食品加工技术领域，具体地涉及一种食用菌麦角硫因的提取方法，特别涉及一种利用超声-微波辅助结合真空冷冻干燥提取食用菌麦角硫因的方法。
背景技术
麦角硫因(巯基组氨酸三甲基内盐，ergothioneine，ERT)是1909年在麦角中发现的一种稀有化合物。它存在于很多动植物体内，含量丰富，不能由动物机体自身合成，只能从食物中摄取，属于稀有氨基酸。目前，国内外多使用化学合成抗氧化剂，但动物实验表明它们有一定毒性和致癌作用，而天然抗氧化剂安全、无毒，已经成为研究的热点。麦角硫因作为一种天然抗氧化剂，具有清除自由基、解毒、维持DNA的生物合成、细胞的正常生长及细胞免疫等多种生理功能，广泛应用于抗衰老保健品、化妆品等。
食用菌是一类供人们食用的大型真菌的总称。食药用菌中麦角硫因的含量高，且具备人们所需的天然安全性，又有易培养，周期短，培养基质丰富低廉等优势，成为获取麦角硫因的最佳来源。
Encarnacion等(2010)将金针菇于蒸馏水中在95℃下加热1小时，离心浓缩后，麦角硫因提取率为1.44mg/g.DW。Bao等(2009)将金针菇子实体真空冷冻干燥后于70％的丙酮水溶液中进行二次均质提取，提取液经真空旋转蒸发后，麦角硫因的提取率为3.03±0.07mg/g(干重)。
目前已报道的麦角硫因的提取方法存在时间长、提取率低，杂质清除率低，能耗高等的问题。单纯使用微波或超声提取不能充分使麦角硫因从物料中充分溶出。
超声波辅助提取因其空化作用而产生高强度机械效应和热效应，具有细胞破碎、增加穿透性与加速质量传递等优势。微波辅助提取通过产生高效内热和电介质热而提高提取效率、减少提取时间并降低料液消耗。超声-微波辅助提取即将超声波辅助提取和微波辅助提取联合用于物料中有效成分的提取，可显著提高有效成分的溶出和得率，缩短提取时间，提高提取效率。
真空冷冻干燥是物料脱水干燥的一种新工艺措施，通过对鲜物料预先冻结，并在冻结状态下，将物料的水分从固态直接升华为气态，达到去除水分的目的。真空冷冻干燥能排除物料中95％～99％的水分，保持物料色、香、形不变，复水性好，营养损失极小，微生物和酶的活性被抑制，对易氧化的物质起到很好的保护作用。
物料采后经真空冷冻干燥可避免其色变腐败，最大程度保持其营养成分，便于保存以及后续粉碎过筛。超声-微波辅助提取可在较短时间内实现对物料中有效成分的提取，得到较高的提取率，提高提取效率。
发明内容
为了克服现有技术的缺点与不足，本发明的目的在于提供一种利用超声-微波辅助结合真空冷冻干燥提取食用菌麦角硫因的方法。该方法快速，便捷，安全，提取率高，所获得的麦角硫因可用于进一步的纯化和食品，医药，保健方面的应用。
本发明的目的通过下述技术方案实现：
一种利用超声-微波辅助结合真空冷冻干燥提取食用菌麦角硫因的方法，包括以下操作步骤：
(1)真空冷冻干燥：将新鲜洁净的杏鲍菇横切成厚度0.5cm的薄片，于－70℃冷冻，然后真空干燥24h；将干燥后的杏鲍菇粉碎，过70目筛，得到杏鲍菇干粉，于－70℃密封保存；
(2)常压微波萃取：将步骤(1)所得的杏鲍菇干粉按照料液比1:20～1:60加入体积百分浓度为40％～100％的乙醇，在微波功率100W～700W，微波温度50℃～70℃，微波时间3min～30min条件下处理，得到杏鲍菇提取液；
(3)超声细胞粉碎：将步骤(2)所得杏鲍菇提取液在超声功率300W～700W，超声时间5min～50min下处理；离心分离，取上清液，得到麦角硫因提取液。
优选的，步骤(2)所述杏鲍菇干粉是按照料液比1:50加入乙醇。
优选的，步骤(2)所述乙醇的体积百分浓度为55％。
优选的，步骤(2)所述微波功率是500W，微波温度是70℃，微波时间为5min。
优选的，步骤(3)所述超声功率为500W，超声时间为5min。
优选的，步骤(3)所述离心是将提取液8000转/分钟下离心10min。
上述所得麦角硫因提取液中的麦角硫因含量检测：高效液相色谱法，色谱柱为00G-4252-E0(250×4.6mm)，流动相为甲醇-水，体积比为2:98，检测波长254nm，流速1mL/min，进样量20μL。
与现有技术相比，本发明具有以下优点及有益效果：
(1)采用真空冷冻干燥技术对新鲜杏鲍菇进行干燥处理，便于保藏，保持了其中麦角硫因的含量基本不变，便于充分粉碎增大麦角硫因提取量。
(2)采用超声-微波辅助提取，流程简单，操作性强，可使麦角硫因充分溶出，耗时短，提取率高。
(3)适当的提取温度可得高品质麦角硫因提取液，采用无毒无害提取剂，安全，环保。
附图说明
图1是实施例2中料液比对麦角硫因提取量的影响；
图2是实施例3中乙醇比对麦角硫因提取量的影响；
图3是实施例4中微波功率对麦角硫因提取量的影响；
图4是实施例5中微波温度对麦角硫因提取量的影响；
图5是实施例6中超声功率对麦角硫因提取量的影响；
图6是实施例7中微波时间对麦角硫因提取量的影响；
图7是实施例8中超声时间对麦角硫因提取量的影响。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
实施例1：真空冷冻干燥杏鲍菇
将新鲜洁净的杏鲍菇横切成厚度0.5cm的薄片，于－70℃冻干，然后真空干燥24h；将干燥后的杏鲍菇粉碎，过70目筛，得到杏鲍菇干粉，－70℃密封保存。
实施例2：
将实施例1所得杏鲍菇干粉按照料液比1:20，1:30，1:40，1:50，1:60加入体积百分浓度70％的乙醇，先在微波功率400W，微波温度70℃的条件下微波处理4min，然后再在超声功率500W条件下超声处理5min。将提取液离心，取上清用体积百分浓度70％的乙醇定容，检测麦角硫因的提取量在料液比1:50时最高，达到2.46mg/mL。
本实施例考察了料液比对麦角硫因提取量的影响，如图1所示。
实施例3：
将实施例1所得杏鲍菇干粉按照料液比1:50分别加入体积百分浓度40％，55％，70％，85％，100％的乙醇，先在微波功率400W，微波温度70℃的条件下微波处理4min，然后再在超声功率500W条件下超声处理5min。将提取液离心，取上清分别用体积百分浓度为40％，55％，70％，85％，100％的乙醇定容待测，检测麦角硫因的提取量在乙醇体积百分浓度55％时最高，达到2.93mg/mL。
本实施例考察了乙醇比对麦角硫因提取量的影响，如图2所示。
实施例4：
将实施例1所得杏鲍菇干粉按照料液比1:50加入体积百分浓度55％的乙醇，分别在微波功率100W，200W，300W，400W，500W，600W，700W，微波温度70℃条件下微波处理4min，然后在超声功率500W条件下超声处理5min。将提取液离心，取上清用体积百分浓度55％的乙醇定容，检测麦角硫因的提取量在微波功率500W时最高，达到2.02mg/mL。
本实施例考察了微波功率对麦角硫因提取量的影响，如图3所示。
实施例5：
将实施例1所得杏鲍菇干粉按照料液比1:50加入体积百分浓度55％的乙醇，在微波功率500W，微波温度分别为50℃，55℃，60℃，65℃，70℃的条件下，微波处理4min，然后在超声功率500W条件下超声处理5min。将提取液离心，取上清用体积百分浓度55％的乙醇定容，检测麦角硫因的提取量在微波温度70℃时最高，达到2.73mg/mL。
本实施例考察了微波温度对麦角硫因提取量的影响，如图4所示。
实施例6：
将实施例1所得杏鲍菇干粉按照料液比1:50加入体积百分浓度55％的乙醇，在微波功率500W，微波温度70℃条件下微波处理4min，然后在超声功率分别为300W，400W，500W，600W，700W的条件下超声处理5min。将提取液离心，取上清用体积百分浓度55％的乙醇定容，检测麦角硫因的提取量在超声功率500W时最高，达到3.07mg/mL。
本实施例考察了超声功率对麦角硫因提取量的影响，如图5所示。
实施例7：
将实施例1所得杏鲍菇干粉按照料液比1:50加入体积百分浓度55％的乙醇，在微波功率500W，微波温度为70℃条件下分别微波处理3min，5min，10min，15min，20min，25min，30min，然后在超声功率500W条件下超声处理5min。将提取液离心，取上清用体积百分浓度55％的乙醇定容，检测麦角硫因的提取量在微波时间5min时最高，达到3.22mg/mL。
本实施例考察了微波时间对麦角硫因提取量的影响，如图6所示。
实施例8：
将实施例1所得杏鲍菇干粉按照料液比1:50加入体积百分浓度55％的乙醇，先在微波功率500W，微波温度为70℃条件下微波处理5min，然后在超声功率500W条件下分别超声处理5min，10min，20min，30min，40min，50min。将提取液离心，取上清用体积百分浓度55％的乙醇定容，检测麦角硫因的提取量在超声时间5min时最高，达到3.67mg/mL。
本实施例考察了超声时间对麦角硫因提取量的影响，如图7所示。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (6)

1.一种利用超声-微波辅助结合真空冷冻干燥提取食用菌麦角硫因的方法，其特征在于包括以下操作步骤：
(1)真空冷冻干燥：将新鲜洁净的杏鲍菇横切成厚度0.5cm的薄片，于－70℃冷冻，然后真空干燥24h；将干燥后的杏鲍菇粉碎，过70目筛，得到杏鲍菇干粉，于－70℃密封保存；
(2)常压微波萃取：将步骤(1)所得的杏鲍菇干粉按照料液比1:20～1:60加入体积百分浓度为40％～100％的乙醇，在微波功率100W～700W，微波温度50℃～70℃，微波时间3min～30min条件下处理，得到杏鲍菇提取液；
(3)超声细胞粉碎：将步骤(2)所得杏鲍菇提取液在超声功率300W～700W，超声时间5min～50min下处理；离心分离，取上清液，得到麦角硫因提取液。
2.根据权利要求1所述的一种利用超声-微波辅助结合真空冷冻干燥提取食用菌麦角硫因的方法，其特征在于：步骤(2)所述杏鲍菇干粉是按照料液比1:50加入乙醇。
3.根据权利要求1所述的一种利用超声-微波辅助结合真空冷冻干燥提取食用菌麦角硫因的方法，其特征在于：步骤(2)所述乙醇的体积百分浓度为55％。
4.根据权利要求1所述的一种利用超声-微波辅助结合真空冷冻干燥提取食用菌麦角硫因的方法，其特征在于：步骤(2)所述微波功率是500W，微波温度是70℃，微波时间为5min。
5.根据权利要求1所述的一种利用超声-微波辅助结合真空冷冻干燥提取食用菌麦角硫因的方法，其特征在于：步骤(3)所述超声功率为500W，超声时间为5min。
6.根据权利要求1所述的一种利用超声-微波辅助结合真空冷冻干燥提取食用菌麦角硫因的方法，其特征在于：步骤(3)所述离心是将提取液8000转/分钟下离心10min。
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