CN1101553A - 二步法从人尿中联产生化药物的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种从人尿中联产生化药物的方
法，它是将经过预处理的无菌人尿通过工业用一体多
级或者是分体多级超过滤系统进行多级连续超过滤，
获取含有10余种生化药物成分的浓缩液；在获取的
浓缩液中加入两性电解质，然后直接输入蛋白质纯化
仪，将浓缩液中带有不同电荷(等电点)的生化药物分
离纯化，从而获得生化药物的无菌液体(原料药)。
Description
本发明涉及到一种生化药物的提取方法，特别是从人尿中提取多种生化药物的方法。
人尿中含有多种活性物质，如尿激酶、激肽释放酶、尿拟胃素、溶菌酶、核糖核酸酶、白蛋白、人尿糖蛋白、睡眠因子、集落刺激因子、人表皮生长因子、非特异性变态反应疾病治疗剂、红细胞生成素、蚕白酶抑制剂、补体系统活性抑制因子、血小板增殖因子、亲纤维蛋白尿激酶-抑制剂复合物、抗癌物质等等。这些生物学活性物质几乎对临床上所有的常见病、多发病都有着很好的疗效。现有的提取工艺都只能提取1～2种生化药物，通常使用二种不同原理的方法来联合进行，最常考虑的是分子量（分子大小）和电荷性两个特征，以此来选择提纯方案，常用的工艺有：
1、硅藻土吸附工艺；
2、树脂吸附工艺；
3、碱性聚苯乙烯吸附工艺；
4、高岭土吸附工艺；
5、DEAE-纤维素层析工艺；
6、亲和层析工艺；
7、高效大孔离子交换工艺。
现有工艺存在以下缺陷。
1、现有工艺均为单产工艺，至多能联产两种生化药品，往往造成“挂一漏十”的浪费，导致生产成本高，不利于工业化生产；
2、现有工艺的基本过程是：亲和结合某一种生化药物-洗涤去除其他成分解析生化药物-进一步纯化，整个生产工艺复杂、耗时、浪费大；
3、现有工艺都要加吸附剂或带有配基的分离介质和洗脱剂（如甲醇、乙醇、碱性水溶液等），导致成本增加，生化药品的大量损耗（平均总回收率＜40%），以及生化药品生物学活性的降低。
本发明的目的是提供一种新的从人尿中联产生化药物的方法，本发明依据不同的蛋白质具有不同的分子量和电荷，结合先进的膜分离技术（超过滤）和再循环无阻聚焦蛋白质电泳技术，同时分离、提纯10余种生化药物。
本发明的技术解决方案是这样的：将经过预处理的无菌人尿通过工业用一体多级或者是分体多级超过滤系统进行多级连续超过滤，获取含有10余种生化药物成份的浓缩液，在获取的浓缩液中加入两性电解质，然后拌匀；将浓缩液直接输入蛋白质纯化仪，通过蛋白质纯化仪将浓缩液中带有不同的电荷（等电点）的生化药物分离纯化，从而获得生化药物的无菌液体（原料药）。
其具体步骤如下：
a、多级连续超过滤获取浓缩液
将经过预处理的无菌人尿液泵入工业用超过滤系统，进行多级超过滤浓缩，每级浓缩比不低于4，平均操作时间16～20小时，起始通量200～250升/米2小时，最终通量2-4升/米2小时。超滤膜规格：截留分子量为3000道尔顿，截留包括抗瘤酮在内的10余种生化药物。在多级超过滤浓缩中最好是采用三级连续超过滤，每级的浓缩比最好是5，总浓缩比为125，在上述操作中，可选用Amicon厂家（美国）生产的DC90系列或DC120系列工业用超过滤系统。
B、再循环无阻聚焦蛋白质电泳
在经过多级连续超过滤获取的浓缩液中加入2·5%V/V的两性电解质，两性电解质为精氨酸8毫摩尔浓度，环丝氨酸10毫摩尔浓度，氨基本甲酸为5毫摩尔浓度。将加入两性电解质的浓缩液拌匀，然后进入再循环无阻聚焦蛋白纯化仪，温度控制在1～15℃，最好是1～5℃，经过2小时的运行，便可从自动收集器皿中得到14种生化药物的无菌液体（原料药）。
再循环无阻聚焦蛋白纯仪可选用RAININ Instrument Co·Inc·厂家（美国）生产的，型号为RF3-230-5。
采用本发明提供的方法可同时分离、提纯10余种生化药物，整个生产过程均在液相中进行，生产过程中无热变、相变，也无需化学添加剂，充分保留其生物学活性，产率可达90%以上，另外就是具有高附加值，提取药物后的尿液；可回收生产天然活性饮料和尿素。
Claims (3)
1、一种二步法从人尿中联产生化药物的方法：其特征是将经过预处理的无菌人尿通过工业用一体多级或者是分体多级超过滤系统进行多级连续超过滤，获取含有10余种生化药物成份的浓缩液；在获取的浓缩液中加入两性电解质，然后拌匀，将浓缩液直接输入蛋白质纯化仪，通过蛋白质纯化仪将浓缩液中带不同电荷(等电点)的生化药物分离纯化，从而获得生化药物的无菌液体(原料药)，其具体步骤如下：
a、多级连续超过滤获取浓缩液
将经过预处理的无菌人尿液泵入工业用超过滤系统，进行多级超过滤浓缩，每级浓缩比不低于4，平均操作时间16～20小时，起始通量200～250升/米2小时，最终通量2～4升/米2小时，超滤膜规格：截留分子量为3000道尔顿，截留包括抗瘤酮在内的10余种生化药物；
B再循环无阻聚焦蛋白质电泳
在经过多级连续超过滤获取的浓缩液中加入2.5%V/V的两性电解质，然后混匀，配好的料液直接进入再循环无阻聚焦蛋白纯化仪，经过2小时的运行，便可从自动收集器皿中得到10余种生化药物的无菌液体(原料药)。
2、如权利要求1所述的二步法从人尿中联产生化药物的方法。其特征是所说的多级连续超过滤最好是采用三级连续超过滤，每级的浓缩比最好是5，总浓缩比为125。
3、如权利要求1或2所述的二步法从人尿中联产生化药物的方法，其特征是所说的两性电解质为精氨酸、环丝氨酸和对氨基本甲酸，其含量分别为8毫摩尔浓度、10毫摩尔浓度和5毫摩尔浓度。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN93115535A CN1101553A (zh) | 1993-10-10 | 1993-10-10 | 二步法从人尿中联产生化药物的方法 |
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| CN93115535A CN1101553A (zh) | 1993-10-10 | 1993-10-10 | 二步法从人尿中联产生化药物的方法 |
Publications (1)
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|---|---|
| CN1101553A true CN1101553A (zh) | 1995-04-19 |
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Family Applications (1)
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| CN93115535A Pending CN1101553A (zh) | 1993-10-10 | 1993-10-10 | 二步法从人尿中联产生化药物的方法 |
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|---|---|
| CN (1) | CN1101553A (zh) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1064049C (zh) * | 1995-10-05 | 2001-04-04 | 南京大学 | 血小板生成素制备工艺 |
| CN1088597C (zh) * | 1999-10-26 | 2002-08-07 | 合肥永生制药有限公司 | 尿多酸肽组合物及其用途 |
| CN1090970C (zh) * | 1999-10-26 | 2002-09-18 | 合肥永生制药有限公司 | 尿多酸肽组合物的制备方法 |
| CN1090971C (zh) * | 1999-10-26 | 2002-09-18 | 合肥永生制药有限公司 | 尿多酸肽组合物 |
-
1993
- 1993-10-10 CN CN93115535A patent/CN1101553A/zh active Pending
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| CN1064049C (zh) * | 1995-10-05 | 2001-04-04 | 南京大学 | 血小板生成素制备工艺 |
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| CN1090971C (zh) * | 1999-10-26 | 2002-09-18 | 合肥永生制药有限公司 | 尿多酸肽组合物 |
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