CN1101224C - 一种戒心瘾注射液 - Google Patents
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Abstract
一种戒心瘾注射液，由蛇毒分离的神经生长因子(Nerve growth factor NGF)和菇类多糖组成，NGF和多糖按比例混合后，以无菌水配制、微孔滤膜过滤除菌、冲氮、抽真空、封管成针剂。本药物具有减低复吸率50%以上和修复免疫损伤机能(恢复达常人的80%)的功能。是生物工程药物戒毒的重大突破。
Description
本发明涉及一种戒毒注射液，特别是一种戒心瘾注射液的制备方法，属医药卫生领域。
从蛇毒中分离出神经生长因子(nerve growth factor NGF)然后制成毒注射液，从而达到戒毒的目的。神经生长因子(NGF)是最早发现细胞调节因子，也是神经系统最重要的生理活性物质之一，由于NGF具有广泛的应用价值，所以世界上各大制药公司都投入大量人力对NGF进行开发研究。据有关文献报导，已从多种生物材料中分离纯化出NGF，其中包括蛇毒。将蛇毒用于戒毒，国内也有相关报导。中国专利CN-1104096A“蛇毒替代戒毒及蛇毒抗老人痴呆药及制备方法”及CN-1209998A“一种用于戒毒止痛的药制备方法”中都有以蛇毒的配伍药制成戒毒药物的报导。其从蛇毒中提NGF一般均是将蛇毒经过不同的层析柱进行层析分离。由于蛇离成份复杂，分离纯化要求高，因而难于获得均一的，有利于工业化生产的NGF。上述报导的蛇毒戒毒药物，对戒毒有一定的效果，但却难于戒患者的心瘾。
本发明的目的是提供一种心瘾注射液，即从蛇毒中分离纯化出分辩率高、对酸、碱、温度稳定性好的NGF，将NGF与多糖配合，制备出戒心瘾用注射药物。
本发明是这样实现的：由蛇毒中分离出NGF，及从菇类提取多糖(金针菇多糖、香菇多糖)，然后将神经生长因子NGF和多糖按重量比1∶1混合，以无菌水配制，微孔滤膜过滤，除菌、冲氮、抽真空、封管制成针剂。
下面详细说明之：
A、蛇毒神经生长因子NGF的制备。
蛇毒NGF采用眼镜蛇、银环蛇和金环蛇等蛇毒提取，经冷冻干燥成干粉。在常温下用连续SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳制备NGF。
1)、在0.05％～0.5％(重量浓度)SDS(十二烷基硫酸钠)条件下进行凝胶电泳，蛇毒蛋白质在凝胶介质中向阳极泳动时依分子的大小不同而得到分离灌制聚丙烯酰胺凝胶时，先倒出分离胶，待分离胶聚合后再在其中灌制积层胶，然而固牢在电泳装置中，蛇毒样品在SDS存在下煮沸溶解，并加入2-巯基乙醇(2-ME)或2-硫苏糖醇(DTT)以还原二硫键。
2)将蛇毒样品2×磷酸/SDS样品缓冲液按1∶1混合，于100℃加热2min，然后加样入电泳孔。
3)通电电泳，对于0.75mm厚凝胶，先以1.5mA电泳，电泳至视踪染料进入凝胶，在30mA下电泳5h(10％凝胶)直至染料到达凝胶底部为止，保持凝胶温度在15～20℃。
4)将相对应的胶带切下，用玻璃粉纯化、除去杂质，真空抽干得NGF样品。
B、金针菇发酵后提取多糖。
将金针菇菌丝体在全自动发酵罐中发酵后进行多糖提取，金针菇菌丝体经发酵后，样品泡浸在冷的95％乙醇中，然后用80％乙醇连续提取三次，每次24小时，将提取过的材料用热的酒精清洗，然后放在铅制器皿中烘干，经葡聚糖凝胶G200层析纯化多糖备用。
本戒毒注射液是一种戒心瘾药物。由蛇毒神经生长因子和菇类多糖复合配制而成，戒毒(尤其是戒心瘾)效果显著，且具有减低复吸率50％以上及修复免疫损伤机能(恢复常人的80％)的功能。戒心瘾药物经广东省汕头、清远、湛江、顺德、湖南省怀化等地戒毒所临床试用，效果很好。以一个疗程(20支)为例，95％患者可脱瘾，降低复吸率在80％以上，一般达50％～60％。本药物经广东省科委和广东省卫生厅检验，认为该药物安全、有效、创新。是用生物工程药物戒毒的一大突破。
实施例：
蛇毒+20％SDS+0.1mol磷酸缓冲液，在3500～4000转/分转速条件下离心5分钟，得到的样品依次用100％，95％和75％的酒精洗去杂质，然后用G200层析过柱。再经过甲基化，用聚丙烯酰胺(SDS)凝胶电泳，可得到不同的电泳带，从中选取相应分子量——7983(见1.张豁中、温玉麟；动物活性成份化学，天津科学技术出版社，1995，553-574页；2.Mebs D.et al，Biochem.Biophys.Res.Commun；1971，44.711.)的电泳带进行切割，将切割后的电泳带用DPS进行纯化，得NGF(蛇毒神经生长因子)待用。
Claims (2)
1、一种戒心瘾注射液，以从蛇毒中分离的神经生长因子为主要成份，其特征是该注射液由蛇毒神经生长因子NGF和菇类多糖按重量比1∶1组成。
2、权利要求1的戒心瘾注射液的制备方法，包括以下步聚：将蛇毒神经生长因子NGF和多糖按重量比1∶1的比例混合，以无菌水配制，微孔滤膜过滤除菌、冲氮、抽真空，封管后成针剂。
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