CN110106212A - 一种化妆品级γ-聚谷氨酸的制备方法 - Google Patents
一种化妆品级γ-聚谷氨酸的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN110106212A CN110106212A CN201910305447.2A CN201910305447A CN110106212A CN 110106212 A CN110106212 A CN 110106212A CN 201910305447 A CN201910305447 A CN 201910305447A CN 110106212 A CN110106212 A CN 110106212A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- fermentation
- polyglutamic acid
- cosmetics
- preparation
- gamma
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 229920002643 polyglutamic acid Polymers 0.000 title claims abstract description 53
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 24
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 76
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 76
- 108010020346 Polyglutamic Acid Proteins 0.000 claims abstract description 18
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 16
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 15
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims abstract description 10
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 22
- 230000003519 ventilatory effect Effects 0.000 claims description 20
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 16
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 14
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 12
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 claims description 9
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000000835 fiber Substances 0.000 claims description 7
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 6
- 241000193744 Bacillus amyloliquefaciens Species 0.000 claims description 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 3
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 claims description 2
- -1 and after mixing Substances 0.000 claims description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 2
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 8
- 239000007787 solid Substances 0.000 abstract description 7
- 238000001035 drying Methods 0.000 abstract description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 10
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 8
- 235000012489 doughnuts Nutrition 0.000 description 5
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 4
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 4
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 4
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 2
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 2
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 5-oxo-L-proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 241000194108 Bacillus licheniformis Species 0.000 description 1
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 1
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-GSVOUGTGSA-N D-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 206010054949 Metaplasia Diseases 0.000 description 1
- 229910017621 MgSO4-7H2O Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 1
- 229920002385 Sodium hyaluronate Polymers 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 230000003796 beauty Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L disodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC([O-])=O PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 1
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 1
- 230000015689 metaplastic ossification Effects 0.000 description 1
- 230000003020 moisturizing effect Effects 0.000 description 1
- 235000013923 monosodium glutamate Nutrition 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 229940073490 sodium glutamate Drugs 0.000 description 1
- 229940010747 sodium hyaluronate Drugs 0.000 description 1
- YWIVKILSMZOHHF-QJZPQSOGSA-N sodium;(2s,3s,4s,5r,6r)-6-[(2s,3r,4r,5s,6r)-3-acetamido-2-[(2s,3s,4r,5r,6r)-6-[(2r,3r,4r,5s,6r)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2- Chemical compound [Na+].CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 YWIVKILSMZOHHF-QJZPQSOGSA-N 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/02—Amides, e.g. chloramphenicol or polyamides; Imides or polyimides; Urethanes, i.e. compounds comprising N-C=O structural element or polyurethanes
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种化妆品级γ‑聚谷氨酸的制备方法，包括以下步骤：微生物发酵、离心除菌、过滤浓缩和干燥。本发明通过微生物发酵、离心除菌、膜过滤浓缩和干燥等4个相对简单的工艺完成了化妆品级γ‑聚谷氨酸的制备，简化了常规γ‑聚谷氨酸的生产工艺流程，降低了生产成本，并且所得产品分子量为800‑1200kDa，性状为白色或淡白色粉末，固体样品中聚谷氨酸含量>90％，能够满足化妆品级γ‑聚谷氨酸的需求。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种化妆品级γ-聚谷氨酸的制备方法。
背景技术
γ-聚谷氨酸是一种由D-谷氨酸单体和L-谷氨酸单体通过α-氨基和γ-羧基之间形成的肽键连接形成的一种中性高分子聚合物，分子量通常介于 100KD-1000KD之间。多由微生物发酵合成得到，常用的微生物主要为地衣芽孢杆菌属和枯草芽孢杆菌属。γ-聚谷氨酸具有多种独特的物理、化学及生物学特性，如良好的水溶性、超强的吸附能力及具有生物降解性，并且其降解产物对人体和环境无毒害性等。可作为增稠剂、保水剂、缓释剂、药物载体等应用于工业、农业、食品及医学等领域。
γ-聚谷氨酸具有超强的保湿能力，其保湿能力是透明质酸、玻尿酸的数倍，应用在化妆品中，可起到防止皮肤结缔组织疏松引起的皮肤失去弹性和产生皱纹，起到保湿、美白、抗皱的作用。添加到化妆品中的γ-聚谷氨酸要求较高(分子量>700kDa，纯度>90％)，高分子量的γ-聚谷氨酸因其黏度较大，后期提纯难度较大，目前所采取的提纯、制备工艺主要包括板框过滤除菌、乙醇或异丙醇反复沉淀、结晶、冷冻干燥等方法，工艺复杂，需要大量的乙醇或异丙醇，生产成本高，为工业化生产带来许多不便。
目前，还没有化妆品级γ-聚谷氨酸制备的相关专利。
公开于该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
发明内容
本发明拟提供一种化妆品级γ-聚谷氨酸的制备方法，简化后处理工艺，降低生产成本，为化妆品级γ-聚谷氨酸的工业化生产提供可能。
本发明提供了如下技术方案：
一种化妆品级γ-聚谷氨酸的制备方法，包括以下步骤：
(1)微生物发酵：转接菌种至发酵罐中进行发酵，得到发酵液，发酵过程中维持发酵温度、通气量、搅拌速度和发酵PH值；
(2)离心除菌：将所得发酵液添加水，混合均匀后，离心，收集上清液；
(3)膜过滤浓缩：将所得上清液用膜过滤浓缩，得到浓缩液；
(4)干燥：将所得浓缩液加热后，干燥。
作为优选，所述步骤(1)中菌种为贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis PG1-2，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.15718。
作为优选，所述步骤(1)中菌种以5％的体积比接种到发酵培养基中。
作为优选，所述步骤(1)中维持发酵温度35-50℃，通气量1.0-2.0vvm，搅拌速度150-250rpm，发酵pH 6.5-7.0，发酵60-72h后停止发酵；其中发酵前期，通气量和搅拌速度分别控制在1.0vvm和150rpm，发酵后期随着发酵液黏度增加，需要增加通气量和搅拌速度；发酵后期，调整发酵温度为50℃至发酵结束。
作为优选，所述步骤(1)中通过添加氨水或柠檬酸维持发酵过程中的pH 值。
作为优选，所述步骤(2)中发酵液添加10-15倍体积的水，离心速度为 12000rpm，离心1h。
作为优选，所述步骤(3)中上清液用中空纤维膜过滤，浓缩至原体积的 1/2-1倍。
作为优选，所述中空纤维膜截留分子量为300-500kDa，过膜压力 0.1-0.3Mpa。
作为优选，所述步骤(4)中浓缩液加温至90℃，进行喷雾干燥；喷雾干燥进风温度为150℃，出风温度110℃。
作为优选，喷雾干燥时浓缩液中聚谷氨酸含量调整为20-40g/L；喷雾干燥所得产品为白色或淡黄色粉末，无丝状物出现。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
(1)本发明通过微生物发酵、离心除菌、膜过滤浓缩和干燥等4个相对简单的工艺完成了化妆品级γ-聚谷氨酸的制备，简化了常规γ-聚谷氨酸的生产工艺流程，降低了生产成本。
(2)本发明所得产品分子量为800-1200kDa，性状为白色或淡白色粉末，固体样品中聚谷氨酸含量＞90％，能够满足化妆品级γ-聚谷氨酸的需求。
保藏信息说明
贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis PG1-2，保藏编号为CGMCC No.15718，保藏日期为2018年5月2日，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
具体实施方式
下面对本发明的具体实施方式进行详细描述，但应当理解本发明的保护范围并不受具体实施方式的限制。
本发明实施例中菌种为贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis PG1-2；菌种液体培养基为(g/L)：葡萄糖40，酵母粉5，蛋白胨5，KH2PO4 1，K2HPO4 1， MgSO4-7H2O 0.2，初始pH7.0-7.2；发酵培养基(g/L)：蔗糖120，酵母粉20，蛋白胨5，谷氨酸钠80，KH2PO4 1，K2HPO4 1，CaCl2 0.2，初始pH 7.0-7.2。
实施例1
一种化妆品级γ-聚谷氨酸的制备方法，包括以下步骤：
(1)微生物发酵：从菌株保存平板挑选菌株转接至液体培养基中，37℃， 200rpm震荡培养16h至对数生长中期；菌种以5％接种量转接至装有30L发酵培养基的50L发酵罐中，维持发酵pH 6.5；发酵前期：0-24h，维持发酵温度35℃，通气量1.0vvm，搅拌速度150rpm；发酵中期：24-48h，维持发酵温度35℃，通气量调整为1.5vvm，搅拌速度调整为200rpm，发酵后期：48-72h，调整发酵温度为50℃，通气量维持1.5vvm，搅拌速度维持200rpm，发酵至72h停止；
(2)离心除菌：放出发酵液，添加300L水，离心机12000rpm，离心 1h，收集上清；
(3)膜过滤浓缩：将所得上清液用中空纤维膜过滤，浓缩至30L停止过滤，得到浓缩液；其中中空纤维膜截留分子量为300kDa，过膜压力0.2Mpa；
(4)干燥：将所得浓缩液加热至90℃，进行喷雾干燥；喷雾干燥进风温度为150℃，出风温度110℃；收集干燥所得粉末，检测聚谷氨酸含量和分子量，固体粉末中聚谷氨酸含量91.3％，聚谷氨酸分子量介于865kDa。
实施例2
一种化妆品级γ-聚谷氨酸的制备方法，包括以下步骤：
(1)微生物发酵：从菌株保存平板挑选菌株转接至液体培养基中，37℃， 200rpm震荡培养16h至对数生长中期；菌种以5％接种量转接至装有30L发酵培养基的50L发酵罐中，维持发酵pH 6.5；发酵前期：0-24h，维持发酵温度40℃，通气量1.0vvm，搅拌速度150rpm；发酵中期：24-60h，维持发酵温度40℃，通气量调整为1.5vvm，搅拌速度调整为200rpm，发酵后期： 60-72h，调整发酵温度为50℃，通气量维持1.5vvm，搅拌速度维持200rpm，发酵至72h停止；
(2)离心除菌：放出发酵液，添加300L水，离心机12000rpm，离心 1h，收集上清；
(3)膜过滤浓缩：将所得上清液用中空纤维膜过滤，浓缩至30L停止过滤，得到浓缩液；其中中空纤维膜截留分子量为500kDa，过膜压力0.3Mpa；
(4)干燥：将所得浓缩液加热至90℃，进行喷雾干燥；喷雾干燥进风温度为150℃，出风温度110℃；收集干燥所得粉末，检测聚谷氨酸含量和分子量，固体粉末中聚谷氨酸含量92.4％，聚谷氨酸分子量介于1160kDa。
实施例3
一种化妆品级γ-聚谷氨酸的制备方法，包括以下步骤：
(1)微生物发酵：从菌株保存平板挑选菌株转接至液体培养基中，37℃， 200rpm震荡培养16h至对数生长中期；菌种以5％接种量转接至装有30L发酵培养基的50L发酵罐中，维持发酵pH 6.5；发酵前期：0-24h，维持发酵温度37℃，通气量1.0vvm，搅拌速度150rpm；发酵中期：24-48h，维持发酵温度37℃，通气量调整为1.5vvm，搅拌速度调整为200rpm，发酵后期： 48-60h，调整发酵温度为50℃，通气量维持1.5vvm，搅拌速度维持200rpm，发酵至60h停止；
(2)离心除菌：放出发酵液，添加450L水，离心机12000rpm，离心 1h，收集上清；
(3)膜过滤浓缩：将所得上清液用中空纤维膜过滤，浓缩至30L停止过滤，得到浓缩液；其中中空纤维膜截留分子量为300kDa，过膜压力0.3Mpa；
(4)干燥：将所得浓缩液加热至90℃，进行喷雾干燥；喷雾干燥进风温度为150℃，出风温度110℃；收集干燥所得粉末，检测聚谷氨酸含量和分子量，固体粉末中聚谷氨酸含量90.8％，聚谷氨酸分子量介于960kDa。
实施例4
一种化妆品级γ-聚谷氨酸的制备方法，包括以下步骤：
(1)微生物发酵：从菌株保存平板挑选菌株转接至液体培养基中，37℃， 200rpm震荡培养16h至对数生长中期；菌种以5％接种量转接至装有30L发酵培养基的50L发酵罐中，维持发酵pH 6.5；发酵前期：0-24h，维持发酵温37℃，通气量1.0vvm，搅拌速度150rpm；发酵中期：24-48h，维持发酵温度37℃，通气量调整为1.5vvm，搅拌速度调整为200rpm，发酵后期：48-72 h，调整发酵温度为50℃，通气量维持1.5vvm，搅拌速度维持200rpm，发酵至72h停止；
(2)离心除菌：放出发酵液，添加450L水，离心机12000rpm，离心 1h，收集上清；
(3)膜过滤浓缩：将所得上清液用中空纤维膜过滤，浓缩至30L停止过滤，得到浓缩液；其中中空纤维膜截留分子量为500kDa，过膜压力0.3Mpa；
(4)干燥：将所得浓缩液加热至90℃，进行喷雾干燥；喷雾干燥进风温度为150℃，出风温度110℃；收集干燥所得粉末，检测聚谷氨酸含量和分子量，固体粉末中聚谷氨酸含量95.6％，聚谷氨酸分子量介于1085kDa。
在实施例1-4中均能实现化妆品级γ-聚谷氨酸的顺利制备，固体粉末中聚谷氨酸含量均＞90％，聚谷氨酸分子量介于800kDa-1200kDa。说明本发明制备化妆品级γ-聚谷氨酸方法简化了生产工艺，降低了生产成本，提高了生产效率，为化妆品级γ-聚谷氨酸的工业化生产提供了可能。
前述对本发明的具体示例性实施方案的描述是为了说明和例证的目的。这些描述并非想将本发明限定为所公开的精确形式，并且很显然，根据上述教导，可以进行很多改变和变化。对示例性实施例进行选择和描述的目的在于解释本发明的特定原理及其实际应用，从而使得本领域的技术人员能够实现并利用本发明的各种不同的示例性实施方案以及各种不同的选择和改变。本发明的范围意在由权利要求书及其等同形式所限定。
Claims (10)
1.一种化妆品级γ-聚谷氨酸的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)微生物发酵：转接菌种至发酵罐中进行发酵，得到发酵液，发酵过程中维持发酵温度、通气量、搅拌速度和发酵PH值；
(2)离心除菌：将所得发酵液添加水，混合均匀后，离心，收集上清液；
(3)过滤浓缩：将所得上清液用膜过滤浓缩，得到浓缩液；
(4)干燥：将所得浓缩液加热后，干燥。
2.根据权利要求1所述的化妆品级γ-聚谷氨酸的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中菌种为贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis PG1-2，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.15718。
3.根据权利要求1所述的化妆品级γ-聚谷氨酸的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中菌种以5％的体积比接种到发酵培养基中。
4.根据权利要求1所述的化妆品级γ-聚谷氨酸的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中维持发酵温度35-50℃，通气量1.0-2.0vvm，搅拌速度150-250rpm，发酵pH6.5-7.0，发酵60-72h后停止发酵；其中发酵前期，通气量和搅拌速度分别控制在1.0vvm和150rpm，发酵后期随着发酵液黏度增加，需要增加通气量和搅拌速度；发酵后期，调整发酵温度为50℃至发酵结束。
5.根据权利要求1所述的化妆品级γ-聚谷氨酸的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中通过添加氨水或柠檬酸维持发酵过程中的pH值。
6.根据权利要求1所述的化妆品级γ-聚谷氨酸的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中发酵液添加10-15倍体积的水，离心速度为12000rpm，离心1h。
7.根据权利要求1所述的化妆品级γ-聚谷氨酸的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中上清液用中空纤维膜过滤，浓缩至原体积的1/2-1倍。
8.根据权利要求7所述的化妆品级γ-聚谷氨酸的制备方法，其特征在于，所述中空纤维膜截留分子量为300-500kDa，过膜压力0.1-0.3Mpa。
9.根据权利要求1所述的化妆品级γ-聚谷氨酸的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中浓缩液加温至90℃，进行喷雾干燥；喷雾干燥进风温度为150℃，出风温度110℃。
10.根据权利要求9所述的化妆品级γ-聚谷氨酸的制备方法，其特征在于，喷雾干燥时浓缩液中聚谷氨酸含量调整为20-40g/L；喷雾干燥所得产品为白色或淡黄色粉末，无丝状物出现。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910305447.2A CN110106212B (zh) | 2019-04-16 | 2019-04-16 | 一种化妆品级γ-聚谷氨酸的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910305447.2A CN110106212B (zh) | 2019-04-16 | 2019-04-16 | 一种化妆品级γ-聚谷氨酸的制备方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN110106212A true CN110106212A (zh) | 2019-08-09 |
| CN110106212B CN110106212B (zh) | 2022-10-25 |
Family
ID=67485514
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201910305447.2A Active CN110106212B (zh) | 2019-04-16 | 2019-04-16 | 一种化妆品级γ-聚谷氨酸的制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN110106212B (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112143663A (zh) * | 2020-07-08 | 2020-12-29 | 常熟理工学院 | 一株贝莱斯芽孢杆菌株及其在合成γ-聚谷氨酸中的应用 |
| CN114075520A (zh) * | 2020-08-19 | 2022-02-22 | 中国农业大学 | 一种产γ-聚谷氨酸的贝莱斯芽孢杆菌及其固体发酵生产γ-聚谷氨酸的方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20010016341A1 (en) * | 1999-12-29 | 2001-08-23 | Ho-Nam Chang | Process for preparing gamma-polyglutamic acid from high-viscous culture broth |
| CN107760732A (zh) * | 2017-11-16 | 2018-03-06 | 天津北洋百川生物技术有限公司 | 一种农业级γ‑聚谷氨酸的生产方法 |
| CN107828675A (zh) * | 2017-07-27 | 2018-03-23 | 燕山大学 | 一株可耐受高浓度谷氨酸钠和葡萄糖产γ‑聚谷氨酸的贝莱斯芽孢杆菌 |
| CN109161492A (zh) * | 2018-08-06 | 2019-01-08 | 南京卉之源生物科技有限公司 | 一种γ-聚谷氨酸产生菌及高效合成γ-聚谷氨酸的方法 |
-
2019
- 2019-04-16 CN CN201910305447.2A patent/CN110106212B/zh active Active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20010016341A1 (en) * | 1999-12-29 | 2001-08-23 | Ho-Nam Chang | Process for preparing gamma-polyglutamic acid from high-viscous culture broth |
| CN107828675A (zh) * | 2017-07-27 | 2018-03-23 | 燕山大学 | 一株可耐受高浓度谷氨酸钠和葡萄糖产γ‑聚谷氨酸的贝莱斯芽孢杆菌 |
| CN107760732A (zh) * | 2017-11-16 | 2018-03-06 | 天津北洋百川生物技术有限公司 | 一种农业级γ‑聚谷氨酸的生产方法 |
| CN109161492A (zh) * | 2018-08-06 | 2019-01-08 | 南京卉之源生物科技有限公司 | 一种γ-聚谷氨酸产生菌及高效合成γ-聚谷氨酸的方法 |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112143663A (zh) * | 2020-07-08 | 2020-12-29 | 常熟理工学院 | 一株贝莱斯芽孢杆菌株及其在合成γ-聚谷氨酸中的应用 |
| CN114075520A (zh) * | 2020-08-19 | 2022-02-22 | 中国农业大学 | 一种产γ-聚谷氨酸的贝莱斯芽孢杆菌及其固体发酵生产γ-聚谷氨酸的方法 |
| CN114075520B (zh) * | 2020-08-19 | 2023-11-10 | 中国农业大学 | 一种产γ-聚谷氨酸的贝莱斯芽孢杆菌及其固体发酵生产γ-聚谷氨酸的方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN110106212B (zh) | 2022-10-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103665371B (zh) | 一种利用超滤纳滤技术精制生物发酵液中聚谷氨酸的方法 | |
| CN103710404B (zh) | 一种高分子量γ- 聚谷氨酸的生产方法 | |
| CN103881954B (zh) | 一株产γ-聚谷氨酸基因工程菌及其高产γ-聚谷氨酸方法 | |
| CN102250822A (zh) | 一种改造氧化葡萄糖酸杆菌产维生素c前体2-酮基-l-古龙酸的方法 | |
| CN109988739A (zh) | 一步法高效制备小分子硫酸软骨素和小分子透明质酸的方法 | |
| CN103409480A (zh) | 一种生产不同分子量普鲁兰多糖的方法 | |
| CN110106212A (zh) | 一种化妆品级γ-聚谷氨酸的制备方法 | |
| CN108467876A (zh) | 一种提高可得然胶产量的发酵方法 | |
| CN105624218A (zh) | 提高出芽短梗霉合成聚苹果酸产量的方法 | |
| CN101186911B (zh) | 一种腈水合酶基因工程菌的构建方法以及基因工程菌株和应用 | |
| CN103088089B (zh) | 一种阿卡波糖的发酵方法 | |
| CN107815476A (zh) | 一种利用地衣芽孢杆菌生产γ 聚谷氨酸的方法 | |
| CN109182404A (zh) | 一种利用地衣芽孢杆菌发酵时流加蔗糖生产γ-聚谷氨酸的方法 | |
| CN110042129B (zh) | 一种农业用γ-聚谷氨酸的制备方法 | |
| CN108220352A (zh) | 一种生料发酵生产γ-聚谷氨酸的方法 | |
| CN106906264A (zh) | 一种利用茶渣作为碳源制备细菌纤维素的方法 | |
| CN105567779A (zh) | 一种高产低分子量热凝胶的发酵方法 | |
| US5071976A (en) | Novel heteropolysaccharide | |
| CN102093990B (zh) | 微生物发酵生产低温淀粉酶的方法 | |
| CN107760732A (zh) | 一种农业级γ‑聚谷氨酸的生产方法 | |
| CN101709286B (zh) | 一种腈水合酶基因工程菌及应用 | |
| CN110066757B (zh) | 一株产阿魏酸酯酶的假单胞菌及其应用 | |
| CN115725488A (zh) | 一株无色素产生的骆驼刺泛菌及其在制备胞外多糖中的应用 | |
| CN104894205B (zh) | 一种利用不动杆菌提高细菌可得然胶产量的方法 | |
| CN103882076A (zh) | 一种高分子量普鲁兰多糖的发酵生产方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| TA01 | Transfer of patent application right | ||
| TA01 | Transfer of patent application right |
Effective date of registration: 20190912 Address after: 530007 6 floor, 3 complex building, 56 Xiu Yuan Avenue, Nanning, the Guangxi Zhuang Autonomous Region. Applicant after: GUANGXI DUODELE BIOTECHNOLOGY Co.,Ltd. Address before: 530044 Building at Tanli Intersection of Shuangding Town, Xixiangtang District, Nanning City, Guangxi Zhuang Autonomous Region Applicant before: GUANGXI DINGHAO AGRICULTURAL TECHNOLOGY CO.,LTD. |
|
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |
Denomination of invention: A cosmetic grade g- Preparation method of polyglutamic acid Effective date of registration: 20221229 Granted publication date: 20221025 Pledgee: Nanning United Innovation Financing Guarantee Co.,Ltd. Pledgor: GUANGXI DUODELE BIOTECHNOLOGY Co.,Ltd. Registration number: Y2022450000241 |
|
| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right |
Date of cancellation: 20231221 Granted publication date: 20221025 Pledgee: Nanning United Innovation Financing Guarantee Co.,Ltd. Pledgor: GUANGXI DUODELE BIOTECHNOLOGY Co.,Ltd. Registration number: Y2022450000241 |
|
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |
Denomination of invention: A cosmetic grade g- Preparation method of polyglutamic acid Effective date of registration: 20231225 Granted publication date: 20221025 Pledgee: Nanning United Innovation Financing Guarantee Co.,Ltd. Pledgor: GUANGXI DUODELE BIOTECHNOLOGY Co.,Ltd. Registration number: Y2023450000142 |