CN110082486A - 应用骨胶原的稳定同位素对肉羊产地溯源的方法 - Google Patents
应用骨胶原的稳定同位素对肉羊产地溯源的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN110082486A CN110082486A CN201910397641.8A CN201910397641A CN110082486A CN 110082486 A CN110082486 A CN 110082486A CN 201910397641 A CN201910397641 A CN 201910397641A CN 110082486 A CN110082486 A CN 110082486A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- ossein
- bone
- sheep
- sample
- production
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 241001494479 Pecora Species 0.000 title claims abstract description 63
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 28
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 20
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 claims abstract description 78
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims abstract description 13
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 claims description 12
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 claims description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 9
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 5
- QJZYHAIUNVAGQP-UHFFFAOYSA-N 3-nitrobicyclo[2.2.1]hept-5-ene-2,3-dicarboxylic acid Chemical compound C1C2C=CC1C(C(=O)O)C2(C(O)=O)[N+]([O-])=O QJZYHAIUNVAGQP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 4
- 239000004021 humic acid Substances 0.000 claims description 4
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 claims description 4
- 238000005498 polishing Methods 0.000 claims description 4
- 238000005303 weighing Methods 0.000 claims description 4
- ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N Tin Chemical compound [Sn] ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 3
- 238000007667 floating Methods 0.000 claims description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims description 3
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims description 3
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 claims description 2
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 abstract description 8
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 abstract description 8
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 abstract description 8
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 abstract description 3
- 244000144972 livestock Species 0.000 abstract description 2
- 238000005238 degreasing Methods 0.000 description 3
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 238000002790 cross-validation Methods 0.000 description 2
- 238000003801 milling Methods 0.000 description 2
- 238000010239 partial least squares discriminant analysis Methods 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 235000019687 Lamb Nutrition 0.000 description 1
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 1
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/02—Food
- G01N33/12—Meat; Fish
Landscapes
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本发明涉及畜产品产地溯源技术领域，尤其是应用骨胶原的稳定同位素对肉羊产地溯源的方法。该方法的具体步骤为：a)将羊骨进行骨胶原提取；b)对羊骨中提取的骨胶原进行稳定同位素δ13C和δ15N值的测定；c)应用统计软件对羊骨中骨胶原δ13C和δ15N值进行显著性差异多重比较‑Duncan分析；d)应用统计软件对羊骨中骨胶原δ13C和δ15N值进行PLS‑DA偏最小二乘法判别分析。本发明通过提取羊骨胶原，测定不同地区羊骨胶原的δ13C和δ15N值，对肉羊进行产地溯源，从而于保证羊肉质量与安全，保障人们身体健康。
Description
技术领域
本发明涉及畜产品产地溯源技术领域，尤其是应用骨胶原的稳定同位素对肉羊产地溯源的方法。
背景技术
20世纪90年代以来，羊肉需求量猛增，尤其是优质羔羊肉的需求量增加最为显著，极大地促进了羊肉生产行业的快速发展。因此，在市场需求和相关政策的推动下，我国肉羊产业发展迅速。
虽然我国的羊肉生产和消费均居世界首位，已形成了以内蒙古为代表的北方牧区和以山东为代表的中原和西南农区这两大肉羊“生产集团”，然而优质羊肉的产地识别研究相对落后，而产地是决定羊肉价格的主要因素之一。
同时，肉羊产业的安全管理却相对滞后，还没有建立起完善的溯源体系。近年来，羊痒病、羊布病的出现严重威胁了羊肉产品的安全。当疫情发生时，我们可以及时有效地找到源头并采取措施控制其传播速度，对于保证羊肉安全，保障人们身体健康有着重要的现实意义。
因此对肉羊的产地进行溯源识别，能够保证羊肉的质量与安全。
发明内容
为了解决背景技术中描述的技术问题，，本发明提供了一种应用骨胶原的稳定同位素对肉羊产地溯源的方法，通过提取羊骨胶原，测定不同地区羊骨胶原的δ13C和δ15N值，对肉羊进行产地溯源，从而于保证羊肉质量与安全，保障人们身体健康。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：
一种应用骨胶原的稳定同位素对肉羊产地溯源的方法，该方法的具体步骤为：
a)将羊骨进行骨胶原提取；
b)对羊骨中提取的骨胶原进行稳定同位素δ13C和δ15N值的测定；
c)应用统计软件对羊骨中骨胶原δ13C和δ15N值进行显著性差异多重比较 -Duncan分析；
d)应用统计软件对羊骨中骨胶原δ13C和δ15N值进行PLS-DA偏最小二乘法判别分析。
具体地，步骤a)中，所述骨胶原提取的方法为：用去离子水将骨样表面清洗干净；将剔取的羊骨表面打磨，将骨头表面的肉除掉；在60℃的烘箱里对骨样放入培养皿中进行干燥，每隔12h取出一次，称量计算前后一次的差值，差值小于0.05g时，即为干燥完全；截取重300mg-600mg的骨样，并计入下每份样品所取的骨样重量；将骨样置于玻璃烧杯中，加人去离子水，放入超声波清洗仪中清洗两次，每次3min；从清洗液中移除出样品，加入2mol/L的HCl溶液至完全将骨样浸泡，用保鲜膜封闭烧杯口后置于4℃冰箱中冷藏脱钙；每隔一天更换酸液，直至骨样松软、无气泡冒出为止；取出松软漂浮的骨样，加去离子水洗至中性；继而加入0.125mol/L的NaOH溶液浸泡24h以去除腐殖酸；经上述处理后的骨样移人塑料离心管中加入去离子水，5000r/pm离心15min，弃上清液；重复该步骤直至骨样呈中性；加入0.001mol/L的HCl溶液，锡纸封口后放入90℃烘箱中进行明胶化；明胶化后将剩余液体进行过滤，取上清液于新的10ml离心管中，冷冻干燥后制得骨胶原；将制得的骨胶原用研磨机磨粉备用。
具体地，所述统计软件为SPSS统计软件。
本发明的有益效果是：本发明提供了一种应用骨胶原的稳定同位素对肉羊产地溯源的方法，通过提取羊骨胶原，测定不同地区羊骨胶原的δ13C和δ15N值，对肉羊进行产地溯源，从而于保证羊肉质量与安全，保障人们身体健康。
附图说明
下面结合附图和实施例对本发明进一步说明。
图1是本发明的流程图；
图2是本发明的肉羊骨胶原的δ13C和δ15N值对肉羊产地的PLS-DA分析实验结果图；
图3是本发明的肉羊的脱脂羊肉中的δ13C和δ15N值对肉羊产地的PLS-DA 分析实验结果图。
具体实施方式
现在结合附图对本发明作进一步详细的说明。
图1是本发明的流程图,图2是本发明的肉羊骨胶原的δ13C和δ15N值对肉羊产地的PLS-DA分析实验结果图,图3是本发明的肉羊的脱脂羊肉中的δ13C和δ15N值对肉羊产地的PLS-DA分析实验结果图。
提供了应用羊骨头中骨胶原δ13C和δ15N值进行羊肉产地溯源的方法，包括以下步骤：
如附图1所示，步骤一、将羊肉与羊骨分开，羊骨磨粉进行骨胶原提取；
步骤二、对羊骨中提取的骨胶原进行稳定同位素δ13C和δ15N值的测定；
步骤三、应用SPSS统计软件对羊骨中骨胶原δ13C和δ15N值进行显著性差异多重比较-Duncan分析；
步骤四、应用SPSS统计软件对羊骨胶原δ13C和δ15N值进行PLS-DA(偏最小二乘法判别分析)的判别分析。
1、羊骨磨粉
1)清洗骨样：将骨样从羊肉中剔下、取出。
2)打磨骨样：将剔取的羊骨表面仔细打磨，将骨头表面的肉除掉。
3)烘箱烘干：在60℃的烘箱里对骨样(放入培养皿中)进行干燥，每隔12h 取出一次，称量计算前后一次的差值，差值小于0.05g时，即为干燥完全。
4)骨样磨粉：将干燥完全的骨样用破碎机研磨成粉末状，收集放入10ml离心管中备用。
2、骨胶原的制备
1)清洗骨样：用去离子水将骨样表面清洗干净。
2)打磨骨样：将剔取的羊骨表面仔细打磨，将骨头表面的肉除掉。
3)烘箱烘干：在60℃的烘箱里对骨样(放入培养皿中)进行干燥，每隔 12h取出一次，称量计算前后一次的差值，差值小于0.05g时，即为干燥完全。
4)截取骨样：截取重约300mg-600mg的骨样，并计入下每份样品所取的骨样重量。
5)再次清洗骨样：将骨样置于洁净的玻璃烧杯中，加人适量去离子水，放入超声波清洗仪中清洗两次，每次3min。
6)脱钙：从清洗液中移除出样品，加入2mol/L的HCl溶液至完全将骨样浸泡，用保鲜膜封闭烧杯口后置于4℃冰箱中冷藏脱钙。每隔一天更换酸液，直至骨样松软、无气泡冒出为止。
7)去腐殖酸：取出松软漂浮的骨样，加去离子水洗至中性；继而加入 0.125mol/L的NaOH溶液浸泡24h以去除腐殖酸。
8)骨胶原的富集和明胶化：经上述处理后的骨样呈现浑浊的絮状，将其移人洁净塑料离心管中加入去离子水，5000r/pm离心15min，弃上清液。重复该步骤直至骨样呈中性
9)明胶化：加入0.001mol/L的HCl溶液，锡纸封口后放入90℃烘箱中进行明胶化，此过程大约需要10h。
10)冻干制取骨胶原：明胶化后将剩余液体进行过滤，取上清液于新的 10ml离心管中，冷冻干燥后制得骨胶原。
11)磨粉：将10)后制得的骨胶原用研磨机磨粉备用。
12)C和N稳定性同位素值的测定。
实施例1
如附图2所示，本发明提供了一种提供了应用羊骨胶原δ13C、δ15N值进行羊肉产地溯源的方法，包括：
步骤一、测定羊骨中骨胶原C、N稳定同位素比值；
步骤二、对羊骨中骨胶原的δ13C和δ15N值数据用统计软件做平均值和方差的分析；
步骤三、对羊骨中骨胶原的δ13C和δ15N值数据用SPSS统计软件进行PLS-DA (偏最小二乘法判别分析)分析，分析发现交叉验证结果正确率：66.67％。
实施例1的肉羊羊骨中骨胶原的δ13C和δ15N值的平均值和方差分析表：
对比例1
如附图3所示，对比例1中对肉羊的脱脂羊肉中的δ13C和δ15N值用SPSS 统计做PLS-DA(偏最小二乘法判别分析)分析，分析发现交叉验证结果正确率： 33.33％。
通过和传统的应用羊肉进行产地溯源相比，应用骨胶原进行肉羊产地的准确由33.33％提高到66.7％。
以上述依据本发明的理想实施例为启示，通过上述的说明内容，相关工作人员完全可以在不偏离本项发明技术思想的范围内，进行多样的变更以及修改。本项发明的技术性范围并不局限于说明书上的内容，必须要根据权利要求范围来确定其技术性范围。
Claims (3)
1.一种应用骨胶原的稳定同位素对肉羊产地溯源的方法，其特征在于，该方法的具体步骤为：
a)将羊骨进行骨胶原提取；
b)对羊骨中提取的骨胶原进行稳定同位素δ13C和δ15N值的测定；
c)应用统计软件对羊骨中骨胶原δ13C和δ15N值进行显著性差异多重比较-Duncan分析；
d)应用统计软件对羊骨中骨胶原δ13C和δ15N值进行PLS-DA偏最小二乘法判别分析。
2.根据权利要求1所述的应用骨胶原的稳定同位素对肉羊产地溯源的方法，其特征在于：步骤a)中，所述骨胶原提取的方法为：用去离子水将骨样表面清洗干净；将剔取的羊骨表面打磨，将骨头表面的肉除掉；在60℃的烘箱里对骨样放入培养皿中进行干燥，每隔12h取出一次，称量计算前后一次的差值，差值小于0.05g时，即为干燥完全；截取重300mg-600mg的骨样，并计入下每份样品所取的骨样重量；将骨样置于玻璃烧杯中，加人去离子水，放入超声波清洗仪中清洗两次，每次3min；从清洗液中移除出样品，加入2mol/L的HCl溶液至完全将骨样浸泡，用保鲜膜封闭烧杯口后置于4℃冰箱中冷藏脱钙；每隔一天更换酸液，直至骨样松软、无气泡冒出为止；取出松软漂浮的骨样，加去离子水洗至中性；继而加入0.125mol/L的NaOH溶液浸泡24h以去除腐殖酸；经上述处理后的骨样移人塑料离心管中加入去离子水，5000r/pm离心15min，弃上清液；重复该步骤直至骨样呈中性；加入0.001mol/L的HCl溶液，锡纸封口后放入90℃烘箱中进行明胶化；明胶化后将剩余液体进行过滤，取上清液于新的10ml离心管中，冷冻干燥后制得骨胶原；将制得的骨胶原用研磨机磨粉备用。
3.根据权利要求1所述的应用骨胶原的稳定同位素对肉羊产地溯源的方法，其特征在于：所述统计软件为SPSS统计软件。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910397641.8A CN110082486B (zh) | 2019-05-14 | 2019-05-14 | 应用骨胶原的稳定同位素对肉羊产地溯源的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910397641.8A CN110082486B (zh) | 2019-05-14 | 2019-05-14 | 应用骨胶原的稳定同位素对肉羊产地溯源的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN110082486A true CN110082486A (zh) | 2019-08-02 |
| CN110082486B CN110082486B (zh) | 2021-12-14 |
Family
ID=67419872
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201910397641.8A Active CN110082486B (zh) | 2019-05-14 | 2019-05-14 | 应用骨胶原的稳定同位素对肉羊产地溯源的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN110082486B (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111289603A (zh) * | 2020-03-02 | 2020-06-16 | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 | 宁夏盐池滩羊肉产地的鉴别方法 |
| CN111879846A (zh) * | 2020-07-30 | 2020-11-03 | 华南农业大学 | 一种利用元素分析-稳定同位素质谱鉴别燕窝真伪的方法及应用 |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105331662A (zh) * | 2015-11-30 | 2016-02-17 | 四川大学 | 一种动物软骨源的未变性ii型胶原及其制备方法 |
| CN106560692A (zh) * | 2016-10-20 | 2017-04-12 | 中国计量大学 | 联合四种检验技术的武夷岩茶产地鉴别方法 |
| CN106560693A (zh) * | 2016-10-20 | 2017-04-12 | 中国计量大学 | 基于偏最小二乘判别的武夷岩茶产地鉴别方法 |
| CN107290508A (zh) * | 2017-08-04 | 2017-10-24 | 浙江理工大学 | 一种以稳定同位素技术为基础对丝绸产地溯源的方法 |
| CN107290509A (zh) * | 2017-08-04 | 2017-10-24 | 浙江理工大学 | 一种以稳定同位素技术为基础对羊毛纤维产地溯源的方法 |
| CN108419751A (zh) * | 2018-03-26 | 2018-08-21 | 四川大学 | 一种四川省阿坝州黑水县产凤尾鸡 |
| CN109239176A (zh) * | 2018-09-19 | 2019-01-18 | 青海省畜牧兽医科学院 | 一种基于多元素和稳定同位素的牦牛肉产地溯源方法 |
-
2019
- 2019-05-14 CN CN201910397641.8A patent/CN110082486B/zh active Active
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105331662A (zh) * | 2015-11-30 | 2016-02-17 | 四川大学 | 一种动物软骨源的未变性ii型胶原及其制备方法 |
| CN106560692A (zh) * | 2016-10-20 | 2017-04-12 | 中国计量大学 | 联合四种检验技术的武夷岩茶产地鉴别方法 |
| CN106560693A (zh) * | 2016-10-20 | 2017-04-12 | 中国计量大学 | 基于偏最小二乘判别的武夷岩茶产地鉴别方法 |
| CN107290508A (zh) * | 2017-08-04 | 2017-10-24 | 浙江理工大学 | 一种以稳定同位素技术为基础对丝绸产地溯源的方法 |
| CN107290509A (zh) * | 2017-08-04 | 2017-10-24 | 浙江理工大学 | 一种以稳定同位素技术为基础对羊毛纤维产地溯源的方法 |
| CN108419751A (zh) * | 2018-03-26 | 2018-08-21 | 四川大学 | 一种四川省阿坝州黑水县产凤尾鸡 |
| CN109239176A (zh) * | 2018-09-19 | 2019-01-18 | 青海省畜牧兽医科学院 | 一种基于多元素和稳定同位素的牦牛肉产地溯源方法 |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111289603A (zh) * | 2020-03-02 | 2020-06-16 | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 | 宁夏盐池滩羊肉产地的鉴别方法 |
| CN111879846A (zh) * | 2020-07-30 | 2020-11-03 | 华南农业大学 | 一种利用元素分析-稳定同位素质谱鉴别燕窝真伪的方法及应用 |
| CN111879846B (zh) * | 2020-07-30 | 2021-08-20 | 华南农业大学 | 一种利用元素分析-稳定同位素质谱鉴别燕窝真伪的方法及应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN110082486B (zh) | 2021-12-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN110082486A (zh) | 应用骨胶原的稳定同位素对肉羊产地溯源的方法 | |
| CN104086471B (zh) | 从聚硒植物碎米荠中提取硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸的方法 | |
| CN104490983A (zh) | 一种中药杜仲的炮制方法 | |
| CN104098600B (zh) | 一种鳄鱼卵磷脂的制备方法 | |
| CN102590431B (zh) | 一种治疗咳嗽的中药药物组合物检测方法 | |
| CN102000133B (zh) | 一种中药抗氧化制剂的制备方法 | |
| CN103044569B (zh) | 含有枸杞酸的枸杞提取物及其制备方法 | |
| CN105943692B (zh) | 中药饮片的制备方法 | |
| CN104531813A (zh) | 一种山羊角活性多肽的制备方法 | |
| CN104370992B (zh) | 一种从女贞子中提取熊果酸和齐墩果酸混合物的方法 | |
| CN102000132B (zh) | 一种中药制剂的制备方法及其制备抗氧化药物的用途 | |
| CN104086639A (zh) | 鸡卵类粘蛋白的纯化工艺 | |
| CN109384861A (zh) | 一种肝素钠废液提取硫酸皮肤素的方法 | |
| CN103344730A (zh) | 一种基于hplc技术的不同种类普洱生茶指纹图谱识别方法 | |
| CN107951900B (zh) | 用于急性肝损伤治疗的中药多糖及其制备方法 | |
| CN206823439U (zh) | 一种l‑丙氨酸除尘去味系统 | |
| CN114235996B (zh) | 鲜益母草药材及其标准汤剂和中药配方颗粒特征图谱构建及检测方法 | |
| CN104001006A (zh) | 一种从天冬中提取游离氨基酸的方法 | |
| CN109970536A (zh) | 一种干姜有效成分的提取方法 | |
| CN106074397A (zh) | 复方金银花颗粒的制备方法 | |
| CN102590384A (zh) | 籽瓜hplc指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱 | |
| CN108324658A (zh) | 一种眼膜液及其制备方法 | |
| Feng et al. | Foreign particle inspection for infusion fluids via robust dictionary learning | |
| CN108379293A (zh) | 一种猪胆粉的制备方法及其产品和应用 | |
| CN106261939A (zh) | 一种红曲鸭蛋腌制方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |