CN110025651A - 一种具有抗衰老作用的复合芹菜籽油自乳化软胶囊及其制备方法 - Google Patents
一种具有抗衰老作用的复合芹菜籽油自乳化软胶囊及其制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种具有抗衰老作用的复合芹菜籽油自乳化软胶囊及其制备方法。该制剂包含芹菜籽油、复合具有抗衰老作用和或能显著增强芹菜籽油抗衰老功效的植物油、表面活性剂、助表面活性剂及其它药物制成的均一透明溶液。本发明利用在适宜温度条件下，将易挥发的芹菜籽油，与不易挥发并具有抗衰老或能显著增强其作用的植物油复合成复合芹菜籽油，再与表面活性剂、助表面活性剂和或其它药物制成软胶囊剂。通过本发明可得一种稳定的芹菜籽油或复合芹菜籽油自乳化系统，可提高复合芹菜籽油或芹菜籽油及其它药物的生物利用度，且起效快，克服了芹菜籽油普通制剂生物利用度较低、易挥发的缺点，显著增强了其芹菜籽油抗衰老作用。
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体地，涉及一种具有抗衰老作用的芹菜籽油或复合芹菜籽油自乳化软胶囊及其制备方法。
背景技术
芹菜籽油是从芹菜籽中提炼出来的一种疏水性黄绿色半透明油类物质。芹菜籽是伞形花科旱芹属植物芹菜(Apium graveolens L.)的种子。芹菜为一年生或二年生草本植物，世界各地均有栽培，芹菜不但有较高的食用价值，其果实提取的油类物质为黄绿色半透明油状液，有独特的清新香气，可作为调味香料在调味品、医药、化妆品等领域广泛应用。芹菜籽油与一般的植物籽油有所不同，芹菜籽油除含一般的植物籽油中所含的脂肪酸成分外，芹菜籽油中还含较大量的挥发油(即芹菜籽精油)；同时芹菜籽油中还含有绿原酸(Chlorogenic Acid)、咖啡酸、甘油醇酸等多种有机酸以及类黄酮物质、丁基苯酞类、氨基酸、膳食纤维、香豆素衍生物等多种物质。现代药理研究表明，芹菜籽油具有良好的抗氧化、抗肿瘤、抑菌及杀虫等生物活性。芹菜籽在维吾尔药中主要用于治疗高血压、关节炎、类风湿关节炎、气滞性子宫炎、腹水、肾脏等疾病，至今降血脂的药学研究也已有初探，近年来芹菜籽更是以其丰富的营养、独特的药理作用的特性日益受到人们的关注。
牡丹籽油是从毛莨科植物牡丹(Paeonia suffruticosa Andr.)的种子——牡丹籽中提炼出来的一种疏水性金黄色透明油类物质,牡丹籽油中总不饱和脂肪酸占脂肪含量可达93％，其中α-亚麻酸含量42～67％；紫苏籽油是从唇形科植物紫苏(Perillafrutescens L Brit.)的种子——紫苏籽中提炼出来的一种疏水性油类物质，紫苏籽油中总不饱和脂肪酸占脂肪含量达90％，其中α-亚麻酸含量达50～62％；杜仲籽油是从杜仲科植物杜仲(Eucommia ulmoides Oliver)的种子——杜仲籽中提炼出来的一种疏水性油类物质，杜仲籽油中总不饱和脂肪酸占脂肪含量达92％，其中α-亚麻酸含量达50～66％；亚麻籽油是从亚麻科植物亚麻(Linum usitatissimum L.)的种子——亚麻籽中提炼出来的一种疏水性油类物质，亚麻籽油中总不饱和脂肪酸占脂肪含量达91％，其中α-亚麻酸含量达54～58％；美藤果油是从大戟科植物美藤果(Plukenetia volubilis L.，Inca Peanut，sachainchi)中提炼出来的一种疏水性油类物质，美藤果油中总不饱和脂肪酸占脂肪含量达92％，其中α-亚麻酸含量达46～53％。牡丹籽油、紫苏籽油、杜仲籽油、亚麻籽油、美藤果油除具有各自功能和特点外，都有一共同特点：总不饱和脂肪酸占比高，均在90％以上，其中α-亚麻酸的含量远高于其它一般植物油。α-亚麻酸具较强抗氧化活性，为ω-3不饱和脂肪酸，是人体必需脂肪酸，构成细胞膜和生物酶的基础物质，同时在维持脂蛋白平衡、降血脂、调节胆固醇代谢、降血压、抗血栓、预防癌变等方面具有重要作用。
目前市场上的芹菜籽油因其具有独特的清新香气主要作为香料用于调味品、化妆品等领域；在医药、保健食品、食品方面研究相对较少，其发明专利主要集中在芹菜籽油的制备方法上，如中国专利CN 201510679016.4公开了“一种微波辅助低温压榨芹菜籽油的方法”，又如中国专利CN 201310276117.8公开了“一种对芹菜籽油进行富集与分离的方法”，再又如中国专利CN 201310144572.2公开了“一种芹菜籽油的分子蒸馏提纯方法及其装置”，还又如中国专利 CN201510215274.7公开了“一种芹菜籽油提取方法”，采用压榨与浸提工艺复合提取芹菜籽油；未见芹菜籽油与牡丹籽油、紫苏籽油、杜仲籽油、亚麻籽油、美藤果油组合成复合芹菜籽油用于抗衰老作用，更未见芹菜籽油与牡丹籽油、紫苏籽油、杜仲籽油、亚麻籽油、美藤果油组合成复合芹菜籽油制备成具有抗衰老作用的复合芹菜籽油自乳化软胶囊及其制备方法。牡丹籽油、紫苏籽油、杜仲籽油、亚麻籽油、美藤果油除了各自营养价值和功能外，研究发现还分别具有抗氧化、抑制血栓形成、软化血管等作用，通过与芹菜籽油的配伍使用，可充分发挥和提高芹菜籽油的抗衰老作用。
芹菜籽油与一般的植物籽油不同，一般的植物籽油主含脂肪酸，不易挥发。而芹菜籽油除含一定的脂肪酸外，还含有较大量的挥发性萜类成分，在制剂的过程中需要注意芹菜籽油的挥发性，因此，芹菜籽油普通制剂与其自乳化软胶囊制剂相比，不仅其生物利用度相对较低，而且芹菜籽油的易挥发性问题也难以解决。通过本发明不仅可得一种稳定的芹菜籽油自乳化软胶囊制剂，可提高芹菜籽油或芹菜籽油与其相配的牡丹籽油、紫苏籽油、杜仲籽油、亚麻籽油、美藤果油的生物利用度，起效快。克服了芹菜籽油及与其相配牡丹籽油、紫苏籽油、杜仲籽油、亚麻籽油、美藤果油的普通制剂生物利用度较低的缺点，显著增强了芹菜籽油抗衰老作用；而且通过芹菜籽油与其相配形成复合芹菜籽油，可有效地克服芹菜籽油的易挥发性问题。同时，本品作为芹菜籽油一种新的组合剂型，可以为消费者提供一种新的选择。
发明内容
本发明的目的就是针对上述问题，提供一种生物利用度高，服用安全、方便的能显著增强的具有抗衰老作用的复合芹菜籽油自乳化软胶囊。
本发明的另一目的是提供一种上述自乳化软胶囊制剂的制备方法。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：
一种具有抗衰老作用的复合芹菜籽油自乳化软胶囊，包括囊芯和囊壳，所述囊芯由如下重量百分数的组分组成：复合芹菜籽油39％～74.5％，表面活性剂 20～55％，助表面活性剂5～20％，抗氧剂0.5％～1.0％。
在上述的具有抗衰老作用的复合芹菜籽油自乳化软胶囊中，所述复合芹菜籽油由芹菜籽油和其他植物油组成，其他植物油选自牡丹籽油、紫苏籽油、杜仲籽油、亚麻籽油、美藤果油。
在上述的具有抗衰老作用的复合芹菜籽油自乳化软胶囊中，所述复合芹菜籽油的重量组成比为：芹菜籽油：牡丹籽油＝1：0.5～9.0或芹菜籽油：紫苏籽油＝1:0.5～9.0或芹菜籽油：杜仲籽油＝1:0.5～9.0或芹菜籽油：亚麻籽油＝1:0.5～ 9.0或芹菜籽油：美藤果油＝1:0.5～9.0；
或芹菜籽油：牡丹籽油:紫苏籽油＝1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：牡丹籽油:杜仲籽油＝1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：牡丹籽油:亚麻籽油＝1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：牡丹籽油:美藤果油＝1:0.5～4.5:0.5～ 4.5或芹菜籽油：紫苏籽油:杜仲籽油＝1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：紫苏籽油:亚麻籽油＝1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：紫苏籽油:美藤果油＝1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：杜仲籽油:亚麻籽油＝1:0.5～4.5:0.5～ 4.5或芹菜籽油：杜仲籽油:美藤果油＝1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：亚麻籽油:美藤果油＝1:0.5～4.5:0.5～4.5；
或芹菜籽油:牡丹籽油:紫苏籽油:杜仲籽油＝1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～ 3.0或芹菜籽油:牡丹籽油:紫苏籽油:亚麻籽油＝1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0或芹菜籽油:牡丹籽油:紫苏籽油:美藤果油＝1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～ 3.0或芹菜籽油:牡丹籽油:杜仲籽油:亚麻籽油＝1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～ 3.0或芹菜籽油:牡丹籽油:杜仲籽油:美藤果油＝1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～ 3.0或芹菜籽油:牡丹籽油:美藤果油:亚麻籽油＝1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～ 3.0或芹菜籽油:紫苏籽油:杜仲籽油:亚麻籽油＝1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～ 3.0或芹菜籽油:紫苏籽油:亚麻籽油:美藤果油＝1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～ 3.0或芹菜籽油:杜仲籽油:亚麻籽油:美藤果油＝1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～ 3.0或芹菜籽油:紫苏籽油:杜仲籽油:美藤果油＝1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～ 3.0；
或芹菜籽油:牡丹籽油:紫苏籽油:杜仲籽油:亚麻籽油＝1:0.5～2.5:0.5～ 2.5:0.5～2.5:0.5～2.5或芹菜籽油:牡丹籽油:紫苏籽油:杜仲籽油:美藤果油＝1:0.5～2.5:0.5～2.5:0.5～2.5:0.5～2.5；
或芹菜籽油:牡丹籽油:紫苏籽油:杜仲籽油:亚麻籽油:美藤果油＝1:0.5～ 1.5:0.5～1.5:0.5～1.5:0.5～1.5:0.5～1.5
在上述的具有抗衰老作用的复合芹菜籽油自乳化软胶囊中，所述复合芹菜籽油的制备方法为：取芹菜籽油加入配料容器中，在20～40℃的条件下，加入其他植物油，慢速搅拌20～30分钟，过滤后得到复合芹菜籽油。
在上述的具有抗衰老作用的复合芹菜籽油自乳化软胶囊中，所述自乳化系统中芹菜籽油或复合芹菜籽油既为活性成分或主要活性成分或药物，又为油相，还可以是分散剂或稀释剂。
在上述的具有抗衰老作用的复合芹菜籽油自乳化软胶囊中，所述的表面活性剂选自下列之一或它们的组合：大豆磷脂、蛋黄卵磷脂、液态卵磷脂、脑磷脂。
在上述的具有抗衰老作用的复合芹菜籽油自乳化软胶囊中，所述的助表面活性剂选自下列之一或它们的组合：甘油、异丙醇、l，2一丙二醇、乙二醇、乙醇、聚氧乙烯脂肪酸酯或聚乙二醇400。
在上述的具有抗衰老作用的复合芹菜籽油自乳化软胶囊中，所述的抗氧剂选自下列之一或它们的组合：维生素E、维生素C。
上述具有抗衰老作用的复合芹菜籽油自乳化软胶囊的制备方法，包括如下步骤：
⑴取复合芹菜籽油，在20-60℃条件温度下，加入表面活性剂、助表面活性剂、抗氧剂，充分搅拌均匀，滤过，得到囊芯自乳化系统；
⑵将明胶加入溶胶罐中，加入60-80℃的水，加入防腐剂，密闭同时加热，搅拌至融化溶胀完全，加入甘油，密闭配胶罐，关闭搅拌，开启真空泵，抽真空，待气泡抽净，即得软胶囊囊壳液，50-70℃保温，备用。
⑶取软胶囊囊壳液、囊芯自乳化系统，上软胶囊机，采用压制法制备软胶囊，经干燥，洗涤，再干燥，分检，包装，得成品。
本发明的复合芹菜籽油自乳化软胶囊与抗衰老芹菜籽油普通制剂比较，能显著增强其芹菜籽油抗衰老作用。能应用于制备芹菜籽油复合芹菜籽油食品、保健食品或药物。
基于芹菜籽油以及芹菜籽油与所选定的植物籽油组成的复合芹菜籽油是油类物质，本身就可起到油相作用的原理，既是原料药有效成分，又是油相辅料。特别是所选定的植物籽油牡丹籽油、或和紫苏籽油、或和杜仲籽油、或和亚麻籽油、或和美藤果油、或牡丹籽油和紫苏籽油和杜仲籽油和亚麻籽油和美藤果油相互任一给合所组成的植物籽油复合物，还有另外二种用途。一是作为分散剂或载体分散或溶解芹菜籽油，使芹菜籽油相对稳定，相对不易挥发；二是所选定的这些植物籽油本身为具有抗衰老作用或具有辅助抗衰老作用的原料药有效成分。因此本发明提供了种芹菜籽油的新制剂——复合芹菜籽油自乳化软胶囊制剂，它能显著增强芹菜籽油或复合芹菜籽油抗衰老作用的有益效果，比目前市售产品有显著的稳定性。同时，本发明提供了一种选择，它提供了一种新的安全产品作为现有技术的替代。
为了说明复合芹菜籽油脂肪乳制剂抗衰老作用的有益效果，本发明选用健康Wistar大白鼠为研究对象，分为5个组，为阴性对照组、模型对照组、芹菜籽油自乳化软胶囊制剂组、复合芹菜籽油自乳化软胶囊制剂1组、复合芹菜籽油自乳化软胶囊制剂2组。通过观察芹菜籽油和复合芹菜籽油自乳化软胶囊对衰老模型动物学习记忆的改善,同时比较衰老动物脑组织内丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性的差异并通过统计学差异总结结论，结果显示复合芹菜籽油自乳化软胶囊制剂对于衰老模型动物的衰老指标有显著的改善作用。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
⑴本发明所得复合芹菜籽油自乳化软胶囊具有高度的分散性，优良的贮存稳定性，特别是芹菜籽油的挥发性因与选用的其它植物籽油复合相溶被抑制，克服现有芹菜籽油产品的一些缺陷，其生物利用度被大大提高，提高了复合芹菜籽油的药用效果。
⑵本发明的复合芹菜籽油本身是油类物质，既是原料药有效成分，又是油相辅料，且选用的其它植物油既可作为芹菜籽油的分散剂或载体分散或溶解芹菜籽油的有效成分，又可作为抗衰老作用或辅助抗衰老作用的原料药有效成分；其形成的自乳化系统，相对增加了自乳化系统药物的浓度，减少了自乳化剂的用量，突出了自乳化作用的效果。
⑶本发明所得复合芹菜籽油自乳化软胶囊与现有普通自乳化软胶囊相比，减少了药物或油相部分、分散剂或载体部分，乳化剂、助乳化剂用量相对少，服用量相对减少，最大限度的发挥了有效成分的疗效。
⑷本发明的复合芹菜籽油自乳化软胶囊，将具有挥发性芹菜籽油用不具挥发性植物油复合，有效增加了芹菜籽油的稳定性。所制成的自乳化软胶囊可俺盖药物的不良气味、口感好、服用方便。
⑸本发明的复合芹菜籽油自乳化软胶囊，所选主成分芹菜籽油具有挥发性，通过选用牡丹籽油、紫苏籽油、杜仲籽油、亚麻籽油、美藤果分别或相互与芹菜籽油复合可起到四重作用：①分散或溶解芹菜籽油及其有效成分；②减少芹菜籽油及其有效成分的挥发性，稳定芹菜籽油的作用；③具有抗衰老作用或辅助抗衰老作用；④既可视为原料药有效成分的组成部分，又可被视为辅料的组成部分。
⑹本发明所选择的乳化剂、助乳化剂为药剂学上广泛应用的药用辅料，具有无毒、无刺激性的特性。既解决了油类成分的生物利用度的问题，又不增加产品的毒副作用。
⑺采用本发明所提供的方法，工艺流程简单，操作方便，产品质量控制方便，有可操作性，是适合于工业生产的安全可靠的制备方法。
具体实施方式
实施例1：复合芹菜籽油自乳化软胶囊制备一
1、成分组成如表1所示：
表1复合芹菜籽油自乳化软胶囊成分组成1
2、制备方法
⑴复合芹菜籽油的调和：按表1所示取芹菜籽油，加入配料容器中，在35℃的条件下，依次加入牡丹籽油、紫苏籽油、维生素E，慢速搅拌25分钟，过滤后得到复合芹菜籽油。
⑵按表1所示，取大豆卵磷脂、甘油混合，用剪切机(8000转/分)，搅拌二次，第一次5分钟，第二次2分钟，使其分散均匀，加入温热的复合芹菜籽油，搅拌3次，每次5分钟，滤过，形成均一的液体即复合芹菜籽油的自乳化系统。
⑶按表1所示，将明胶加入溶胶罐中，加入60℃的水，加入防腐剂尼泊金乙酯，必要时加入遮光剂和着色剂，密闭同时加热，搅拌至融化溶胀完全，加入甘油，密闭配胶罐，关闭搅拌，开启真空泵，抽真空，待气泡抽净，即得软胶囊囊材液。50℃保温，备用。
⑷取软胶囊囊材液、复合芹菜籽油的自乳化系统上软胶囊机，采用压制法制备软胶囊，经干燥，洗涤，再干燥，分检，包装，得成品。
3、自乳化效果检测
取该复合芹菜籽油的自乳化系统0.5ml，加至lOml人工胃液中，用玻璃棒缓和搅拌，即可迅速形成带有蓝色乳光的乳剂。对乳剂的粒径用TSM超细颗粒粒径分析仪进行测定，测得结果为乳滴的平均粒径在0.15μm左右。
实施例2：复合芹菜籽油自乳化软胶囊制备二
1、成分组成如表2所示：
表2复合芹菜籽油自乳化软胶囊成分组成2
2、制备方法
⑴复合芹菜籽油的调和：按表2所示取芹菜籽油，加入配料容器中，在35℃的条件下，依次加入杜仲籽油、紫苏籽油、维生素E、维生素C，慢速搅拌20 分钟，过滤后得到复合芹菜籽油。
⑵按表2所示，取蛋黄卵磷脂、乙醇、甘油混合，用剪切机(8000转/分)，搅拌二次，第一次5分钟，第二次2分钟，使其分散均匀，加入温热的复合芹菜籽油，搅拌3次，每次5分钟，滤过，形成均一的液体即复合芹菜籽油的自乳化系统。
⑶按表2所示，将明胶加入溶胶罐中，加入60℃的水，加入防腐剂尼泊金乙酯，必要时加入遮光剂和着色剂，密闭同时加热，搅拌至融化溶胀完全，加入甘油，密闭配胶罐，关闭搅拌，开启真空泵，抽真空，待气泡抽净，即得软胶囊囊材液。50℃保温，备用。
⑷取软胶囊囊材液、复合芹菜籽油的自乳化系统，上软胶囊机采用压制法制备软胶囊，经干燥，洗涤，再干燥，分检，包装，得成品。
3、自乳化效果检测
取该复合芹菜籽油的自乳化系统0.5ml，加至lOml人工胃液中，用玻璃棒缓和搅拌，即可迅速形成带有蓝色乳光的乳剂。对乳剂的粒径用TSM超细颗粒粒径分析仪进行测定，测得结果为乳滴的平均粒径在0.14μm左右。
实施例3：复合芹菜籽油自乳化软胶囊制备三
1、成分组成如表3所示：
表3复合芹菜籽油自乳化软胶囊成分组成3
2、制备方法
⑴复合芹菜籽油的调和：按表3所示取芹菜籽油，加入配料容器中，在30℃的条件下，依次加入紫苏籽油、杜仲籽油、牡丹籽油、维生素E、维生素C，慢速搅拌25分钟，过滤后得到复合芹菜籽油。
⑵按表2所示，取液态卵磷脂、乙醇、甘油混合，用剪切机(8000转/分)，搅拌二次，第一次5分钟，第二次2分钟，使其分散均匀，加入温热的复合芹菜籽油，搅拌3次，每次5分钟，滤过，形成均一的液体即复合芹菜籽油的自乳化系统。
⑶按表3所示，将明胶加入溶胶罐中，加入60℃的水，加入防腐剂尼泊金乙酯，必要时加入遮光剂和着色剂，密闭同时加热，搅拌至融化溶胀完全，加入甘油，密闭配胶罐，关闭搅拌，开启真空泵，抽真空，待气泡抽净，即得软胶囊囊材液。50℃保温，备用。
⑷取软胶囊囊材液、复合芹菜籽油的自乳化系统，上软胶囊机采用压制法制备软胶囊，经干燥，洗涤，再干燥，分检，包装，得成品。
3、自乳化效果检测
取该复合芹菜籽油的自乳化系统0.5ml，加至lOml人工胃液中，用玻璃棒缓和搅拌，即可迅速形成带有蓝色乳光的乳剂。对乳剂的粒径用TSM超细颗粒粒径分析仪进行测定，测得结果为乳滴的平均粒径在0.17μm左右。
实施例4：复合芹菜籽油自乳化软胶囊制备四
1、成分组成如表4所示：
表4复合芹菜籽油自乳化软胶囊成分组成4
2、制备方法
⑴复合芹菜籽油的调和：按表4所示取芹菜籽油，加入配料容器中，在36℃的条件下，依次加入紫苏籽油、杜仲籽油、牡丹籽油、亚麻籽油、维生素E，慢速搅拌25分钟，过滤后得到复合芹菜籽油。
⑵按表4所示，取蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂、甘油，用剪切机(8000转/分)，搅拌二次，第一次5分钟，第二次2分钟，使其分散均匀，加入温热的复合芹菜籽油，搅拌3次，每次2分钟，滤过，形成均一的液体即复合芹菜籽油的自乳化系统。
⑶按表4所示，将明胶加入溶胶罐中，加入60℃的水，加入防腐剂尼泊金乙酯，必要时加入遮光剂和着色剂，密闭同时加热，搅拌至融化溶胀完全，加入甘油，密闭配胶罐，关闭搅拌，开启真空泵，抽真空，待气泡抽净，即得软胶囊囊材液。50℃保温，备用。
⑷取软胶囊囊材液、复合芹菜籽油的自乳化系统，上软胶囊机采用压制法制备软胶囊，经干燥，洗涤，再干燥，分检，包装，得成品。
3、自乳化效果检测
取该芹菜籽油的自乳化系统0.5ml，加至lOml人工胃液中，用玻璃棒缓和搅拌，即可迅速形成带有蓝色乳光的乳剂。对乳剂的粒径用TSM超细颗粒粒径分析仪进行测定，测得结果为乳滴的平均粒径在0.16μm左右。
实施例5：复合芹菜籽油自乳化软胶囊制备五
1、成分组成如表5所示：
表5复合芹菜籽油自乳化软胶囊成分组成5
2、制备方法
⑴复合芹菜籽油的调和：按表4所示取芹菜籽油，加入配料容器中，在36℃的条件下，依次加入紫苏籽油、杜仲籽油、牡丹籽油、亚麻籽油、美藤果油、维生素E，慢速搅拌25分钟，过滤后得到复合芹菜籽油。
⑵按表4所示，取蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂、甘油，用剪切机(8000转/分)，搅拌二次，第一次5分钟，第二次2分钟，使其分散均匀，加入温热的复合芹菜籽油，搅拌3次，每次2分钟，滤过，形成均一的液体即复合芹菜籽油的自乳化系统。
⑶按表4所示，将明胶加入溶胶罐中，加入60℃的水，加入防腐剂尼泊金乙酯，必要时加入遮光剂和着色剂，密闭同时加热，搅拌至融化溶胀完全，加入甘油，密闭配胶罐，关闭搅拌，开启真空泵，抽真空，待气泡抽净，即得软胶囊囊材液。50℃保温，备用。
⑷取软胶囊囊材液、复合芹菜籽油的自乳化系统，上软胶囊机采用压制法制备软胶囊，经干燥，洗涤，再干燥，分检，包装，得成品。
3、自乳化效果检测
美藤果油取该芹菜籽油的自乳化系统0.5ml，加至lOml人工胃液中，用玻璃棒缓和搅拌，即可迅速形成带有蓝色乳光的乳剂。对乳剂的粒径用TSM超细颗粒粒径分析仪进行测定，测得结果为乳滴的平均粒径在0.13μm左右。
实施例6：复合芹菜籽油自乳化软胶囊对衰老模型大鼠的抗衰老作用研究
衰老的自由基学说认为,衰老是由于自由基产生过多而引起脂质过氧化反应,使生物膜、蛋白质(酶)及遗传物质等损伤,并最终导致衰老。活性氧自由基 (O2 -和H2O2)清除剂超氧化物歧化酶(SOD)可使有毒的O2 -和H2O2经过歧化和还原得到清除,从而阻止其引起自由基的链锁反应而降低自由基代谢产物丙二醛(MDA) 的生成。因此,可将SOD活力大小作为机体抵抗衰老的一项重要指标。另外,也可将MDA作为抗氧化的一项指标。
芹菜籽油是从芹菜籽中提炼出来的一种疏水性黄绿色半透明油类物质，含有黄酮类、绿原酸、咖啡酸、甘油醇酸、挥发油、丁基苯酞类、香豆素衍生物等多种物质，芹菜籽油在体内可以增加SOD的活性；牡丹籽油、紫苏籽油、杜仲籽油、亚麻籽油、美藤果油是从各自的植物种子或果实中提炼出来的特殊油品，除具有各自功能和特点外，都还有一共同特点：总不饱和脂肪酸占比高(均在90％以上)，其中α-亚麻酸的含量远高于其它一般植物油,可高达60％。α-亚麻酸具较强抗氧化活性，为ω-3不饱和脂肪酸，是人体必需脂肪酸，在抗衰老方面具有重要作用。因此，以芹菜籽油为主要有效成分，配以和/或牡丹籽油、和/或紫苏籽油、和/或杜仲籽油、和/或亚麻籽油、和/或美藤果油组成的复合芹菜籽油，制备成复合芹菜籽油自乳化软胶囊，最大限度地提高了芹菜籽油的抗衰老作用，起到了意想不到的效果。本实验主要研究复合芹菜籽油自乳化软胶囊对衰老动物的学习记忆障碍的改善、降低衰老小鼠脑组织内MDA的含量及增加SOD的活性来观察复合芹菜籽油的抗衰老作用。
1实验材料与方法
1.1材料与试剂
1.1.1实验试剂
芹菜籽油由本公司用微波辅助低温压榨的方法制备。芹菜籽油的制备方法为：除杂、干燥的芹菜籽→微波处理60～120s→低温压榨机压榨→粗制芹菜籽油→离心、过滤→芹菜籽油。
芹菜籽油自乳化软胶囊(自乳化1系统)按上述实施例1的方法制备，将实施例1中的牡丹籽油、紫苏籽油以等量大豆油替代，分别依次复合芹菜籽油自乳化软胶囊以上述实施例1和实施例4制备的复合芹菜籽油自乳化软胶囊制剂1 组、复合芹菜籽油自乳化软胶囊制剂2组供用，分别依次命名为自乳化1系统、自乳化2系统、自乳化3系统，即自乳化1系统为芹菜籽油自乳化软胶囊，自乳化2系统为复合芹菜籽油自乳化软胶囊制剂1组(实施例1)、自乳化3系统为复合芹菜籽油自乳化软胶囊制剂2组(实施例4)。
吡拉西坦片：山东仁和堂药业有限公司；D-半乳糖：德国Sigma公司；超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、总蛋白、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS) 测定试剂盒：上海常斤生物科技有限公司；其他试剂均为分析纯。
1.1.2实验仪器与设备
Morris水迷宫系统：北京众实迪创科技发展有限责任公司；DY89-Ⅱ电动玻璃匀浆机：宁波新芝生物科技股份有限公司；HH-21-6电热恒温水浴锅：常州诺基仪器有限公司；WH-1微型漩涡混合仪：上海沪西分析仪器厂有限公司；GTR16 -2高速冷冻离心机：北京时代北利离心机有限公司；752型紫外可见分光光度计：上海光谱仪器有限公司。
1.1.3实验动物
清洁级Wistar大鼠60只，雄性，体重200±20g,由广东省医学实验动物中心提供，动物质量合格证明编号：No.44411600000901。实验动物使用许可证号：SYXK(粤)2013-0002。饲养环境：SPF级，单笼司养。
1.2实验方法
1.2.1动物分组、造模和给药
(1)动物分组：Wistar大鼠60只，先喂养一周以适应环境，随机法随机分为5组：阴性对照组，模型组、自乳化1系统组、自乳化2系统组、自乳化3 系统组。
(2)衰老模型造模：除阴性对照组外，其余各组每天均颈部皮下注射D-半乳糖。D-半乳糖剂量为125mg/kg，皮下注射体积应控制在0.2mL/100g。D-半乳糖溶液配制：6.25g溶入100mL生理盐水中，可控制皮下注射量为0.2mL/100g。阴性对照组注射同体积生理盐水，连续注射8周。造模过程的时间中同时给予自乳化系统药物灌胃。
(3)给药：跟据芹菜籽油的成人每人每天的可食用量的较大剂量，通过相应换算得到大鼠的等效剂量约0.6g/kg，大鼠每日经口灌胃给药，给药8周，阴性对照组给予同体积的不含芹菜籽油的自乳化1系统。实验结束后，进行负重游泳测试和水迷宫测试，期间持续给药。
1.2.2负重游泳测试实验
负重游泳测试实验选用直径80cm高度100cm四周光滑的圆桶，负重物选用铅条，水温控制在28±2℃。将铅条绑在大鼠尾部根部，质量为大鼠体重的10％，从大鼠放入水中开始计时，当大鼠头部沉入水中10s以上时，实验结束，记录时间。负重游泳测试实验主要检测抗疲劳能力。
1.2.3Morris水迷宫实验
Morris水迷宫是由不锈钢圆形水槽、隐藏在水面以下的平台以及一套图像自动采集和处理系统(摄像机、显示器和分析软件等)。水槽内部直径1.5m，高 0.5m，水槽四周光滑，内壁涂成黑色。将圆形水槽分为4个象限(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ)，在4个象限水槽壁处各选一处标记作为入水点，大鼠每次面向水槽壁放入水中。平台位于第Ⅱ象限，水面高过平台2cm为宜。水槽上方安置连接显示系统的摄像机，同步记录大鼠运动轨迹。房间内光照恒定，无光线直接照射水槽。整个实验过程中，水槽周围参照物不能移动，同时实验者不得在动物视力范围内出现，并保持安静，无噪音影响。实验前1d，所有组别大鼠各自进行自由游泳，适应水槽环境。实验历时5d，分两个阶段进行：
(1)定位航行实验：每只大鼠进行4次训练，依此从第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ象限的入水点面向水槽壁入水。记录大鼠从入水到找到平台的时间，此为逃避潜伏期 (Escape latency)。大鼠登上平台后，使其在平台停留15s。如果大鼠90s内无法找到平台，则将其牵引至平台，也使其在平台停留15s，潜伏期此时记为90s。每次训练结束后，使大鼠休息15s，4个象限训练的潜伏期的平均值记为当天的逃避潜伏期。总共训练4d，以第4天的逃避潜伏期作为最终的成绩，以此检测大鼠的学习能力。
(2)空间探索实验：第5天开始进行空间搜索实验，撤除水下平台，将大鼠从距原平台所处第Ⅱ象限最远的第Ⅳ象限入水点放入水中，记录大鼠90s内穿越原平台位置的次数以及有效时间比(即原平台所处象限游泳时间与总游泳时间的比值)，以次检测大鼠的记忆能力。
1.2.4生化指标测定
大鼠最后一天给药结束后禁食12h处死。断头处死，15mL EP管取血。血液室温放置30min后离心，3000r/min 4℃离心10min，取上层血清，进行超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的检测。大鼠断头处死，将大鼠头部置于冰盘上，迅速剥离大脑，用预冷的生理盐水冲洗，制10％的组织匀浆，3000r/min 4℃离心，取上清，进行总蛋白、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)的检测。
1.2.5统计学方法
实验数据以表示，使用SPSS17.0统计软件，多组间比较采用单因素方差分析，组间比较采用t检验，以P<0.05为差异具有统计学意义。
2实验结果
2.1负重游泳测试结果
负重游泳测试结果见表6，与模型组相比，阴性对照组负重游泳时间明显长于模型组(P＜0.05)，说明衰老模型造模成功；与模型组相比，自乳化1系统组、自乳化2系统组和自乳化3系统组游泳时间也明显长于模型组(P＜0.05)。结果表明，芹菜籽油自乳化软胶囊及复合芹菜籽油自乳化软胶囊均可增强衰老模型大鼠的抗疲劳能力，并且复合芹菜籽油自乳化软胶囊对衰老模型大鼠抗疲劳能力比芹菜籽油自乳化软胶囊明显增强。
表6各组大鼠负重游泳测试结果(n＝12)
| 组别 | 游泳时间/min |
| 阴性对照组 | 17.86±0.37<sup>★</sup> |
| 模型组 | 11.12±0.29 |
| 自乳化1系统组 | 15.76±0.24<sup>★</sup> |
| 自乳化2系统组 | 17.41±0.38<sup>★</sup> |
| 自乳化3系统组 | 17.65±0.35<sup>★</sup> |
注：与模型组比较，★P＜0.05，★★P＜0.01。
2.2水迷宫结果
水迷宫结果见表7，与模型组相比，阴性对照组大鼠的逃避潜伏期明显少于模型组(P＜0.05)，有效时间比和穿越平台次数明显高于模型组(P＜0.05)；与模型组相比，自乳化软胶囊各组大鼠的逃避潜伏期也明显少于模型组(P＜0.05)，芹菜籽油自乳化软胶囊组的有效时间比高于模型组(P＜0.05)，芹菜籽油自乳化软胶囊组的穿越平台次数无明显差异，复合芹菜籽油自乳化软胶囊二组的有效时间比和穿越平台次数均明显高于模型组(P＜0.05)。上述结果表明，芹菜籽油自乳化软胶囊能增强衰老模型大鼠的学习记忆能力，而且复合芹菜籽油自乳化软胶囊对衰老模型大鼠的学习记忆能力的影响明显强于芹菜籽油自乳化软胶囊。
表7各组大鼠Morris水迷宫实验结果 (n＝12)
| 组别 | 潜伏期/s | 有效时间比 | 穿越平台次数 |
| 阴性对照组 | 33.34±7.53<sup>★</sup> | 0.3584±0.1528<sup>★</sup> | 3.60±2.31<sup>★</sup> |
| 模型组 | 52.01±6.06 | 0.3013±0.2212 | 2.01±1.47 |
| 自乳化1系统组 | 39.83±4.76<sup>★</sup> | 0.3542±0.2101<sup>★</sup> | 2.68±1.81 |
| 自乳化2系统组 | 33.54±4.21<sup>★</sup> | 0.3658±0.1987<sup>★</sup> | 3.57±1.88<sup>★</sup> |
| 自乳化3系统组 | 32.96±4.16<sup>★</sup> | 0.3715±0.2209<sup>★</sup> | 3.61±1.93<sup>★</sup> |
注：与模型组比较，★P＜0.05，★★P＜0.01。
2.3生化指标结果
大鼠血清生化指标测定结果见表8，与模型组相比，阴性对照组SOD活力明显高于模型组(P＜0.05)，MDA含量明显低于模型组(P＜0.05)；与模型组相比，芹菜籽油自乳化软胶囊组及复合芹菜籽油自乳化软胶囊组的SOD活力明显高于模型组(P＜0.05)，MDA含量明显低于模型组(P＜0.05)，且复合芹菜籽油自乳化软胶囊组的活力强于芹菜籽油自乳化软胶囊组的活力。
表8各组大鼠血清生化指标测定结果
| 组别 | SOD/(U/mL) | MDA/(nmol/mL) |
| 阴性对照组 | 274.07±29.49<sup>★</sup> | 4.78±0.34<sup>★</sup> |
| 模型组 | 154.79±18.87 | 6.32±0.57 |
| 自乳化1系统组 | 261.24±45.37<sup>★</sup> | 3.71±0.58<sup>★</sup> |
| 自乳化2系统组 | 274.92±46.53<sup>★</sup> | 2.96±0.45<sup>★</sup> |
| 自乳化3系统组 | 275.93±23.56<sup>★</sup> | 2.91±0.38<sup>★</sup> |
注：与模型组比较，★P＜0.05，★★P＜0.01。
3结论
造模实验结果表明：本实验复制的D-半乳糖亚急性衰老模型是可信的；负重游泳实验结果显示：芹菜籽油自乳化软胶囊及复合芹菜籽油自乳化软胶囊均可增强衰老模型大鼠的抗疲劳能力，并且复合芹菜籽油自乳化软胶囊对衰老模型大鼠抗疲劳能力比芹菜籽油自乳化软胶囊明显增强；水迷宫实验结果表明：芹菜籽油自乳化软胶囊能增强衰老模型大鼠的学习记忆能力，而且复合芹菜籽油自乳化软胶囊对衰老模型大鼠的学习记忆能力的影响明显强于芹菜籽油自乳化软胶囊；生化指标测定结果显示：芹菜籽油自乳化软胶囊及复合芹菜籽油自乳化软胶囊均可提高超氧化物歧化酶的活力，降低体内丙二醛的含量清除体内自由基从而达到保护机体的作用。
本实验结果还表明：不仅芹菜籽油自乳化软胶囊和复合芹菜籽油自乳化软胶囊均有较好地抗衰老的作用，而且芹菜籽油通过与牡丹籽油、紫苏籽油、杜仲籽油、亚麻籽油、美藤果油复合后，并经过自乳化制备形成复合芹菜籽油自乳化软胶囊，明显增强了芹菜籽油的抗衰老的作用，达到了较为理想的效果。
Claims (8)
1.一种具有抗衰老作用的复合芹菜籽油自乳化软胶囊，包括囊芯和囊壳，其特征在于所述囊芯由如下重量百分数的组分组成：复合芹菜籽油39％～74.5％，表面活性剂20～55％，助表面活性剂5～20％，抗氧剂0.5％～1.0％。
2.如权利要求1所述的具有抗衰老作用的复合芹菜籽油自乳化软胶囊，其特征在于所述复合芹菜籽油由芹菜籽油和其他植物油组成，其他植物油选自牡丹籽油、紫苏籽油、杜仲籽油、亚麻籽油、美藤果油。
3.如权利要求2所述的具有抗衰老作用的复合芹菜籽油自乳化软胶囊，其特征在于所述复合芹菜籽油的重量组成比为：芹菜籽油：牡丹籽油=1：0.5～9.0或芹菜籽油：紫苏籽油=1:0.5～9.0或芹菜籽油：杜仲籽油=1:0.5～9.0或芹菜籽油：亚麻籽油=1:0.5～9.0或芹菜籽油：美藤果油=1:0.5～9.0；
或芹菜籽油：牡丹籽油: 紫苏籽油=1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：牡丹籽油: 杜仲籽油=1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：牡丹籽油: 亚麻籽油=1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：牡丹籽油: 美藤果油=1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：紫苏籽油: 杜仲籽油=1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：紫苏籽油: 亚麻籽油=1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：紫苏籽油: 美藤果油=1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：杜仲籽油: 亚麻籽油=1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：杜仲籽油: 美藤果油=1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：亚麻籽油: 美藤果油=1:0.5～4.5:0.5～4.5；
或芹菜籽油:牡丹籽油:紫苏籽油:杜仲籽油=1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0或芹菜籽油:牡丹籽油:紫苏籽油:亚麻籽油=1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0或芹菜籽油:牡丹籽油:紫苏籽油:美藤果油=1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0或芹菜籽油:牡丹籽油:杜仲籽油:亚麻籽油=1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0或芹菜籽油:牡丹籽油:杜仲籽油:美藤果油=1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0或芹菜籽油:牡丹籽油:美藤果油:亚麻籽油=1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0或芹菜籽油:紫苏籽油:杜仲籽油:亚麻籽油=1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0或芹菜籽油:紫苏籽油:亚麻籽油:美藤果油=1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0或芹菜籽油:杜仲籽油: 亚麻籽油:美藤果油=1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0或芹菜籽油:紫苏籽油: 杜仲籽油:美藤果油=1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0；
或芹菜籽油:牡丹籽油:紫苏籽油:杜仲籽油:亚麻籽油=1:0.5～2.5:0.5～2.5:0.5～2.5:0.5～2.5或芹菜籽油:牡丹籽油:紫苏籽油:杜仲籽油:美藤果油=1:0.5～2.5:0.5～2.5:0.5～2.5:0.5～2.5；
或芹菜籽油:牡丹籽油:紫苏籽油:杜仲籽油:亚麻籽油:美藤果油=1:0.5～1.5:0.5～1.5:0.5～1.5:0.5～1.5:0.5～1.5。
4.如权利要求1所述的具有抗衰老作用的复合芹菜籽油自乳化软胶囊，其特征在于所述复合芹菜籽油的制备方法为：取芹菜籽油加入配料容器中，在20～40℃的条件下，加入其他植物油，慢速搅拌20～30分钟，过滤后得到复合芹菜籽油。
5.如权利要求1所述的具有抗衰老作用的复合芹菜籽油自乳化软胶囊，其特征在于所述的表面活性剂选自下列之一或它们的组合：大豆磷脂、蛋黄卵磷脂、液态卵磷脂、脑磷脂。
6.如权利要求1所述的具有抗衰老作用的复合芹菜籽油自乳化软胶囊，其特征在于所述的助表面活性剂选自下列之一或它们的组合：甘油、异丙醇、l，2一丙二醇、乙二醇、乙醇、聚氧乙烯脂肪酸酯或聚乙二醇400。
7.如权利要求1所述的具有抗衰老作用的复合芹菜籽油自乳化软胶囊，其特征在于所述的抗氧剂选自下列之一或它们的组合：维生素E、维生素C。
8.一种权利要求 1-7任一项所述的具有抗衰老作用的复合芹菜籽油自乳化软胶囊的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
⑴取复合芹菜籽油，在20-60℃条件温度下，加入表面活性剂、助表面活性剂、抗氧剂，充分搅拌均匀，滤过，得到囊芯自乳化系统；
⑵将明胶加入溶胶罐中，加入60-80℃的水，加入防腐剂，密闭同时加热，搅拌至融化溶胀完全，加入甘油，密闭配胶罐，关闭搅拌，开启真空泵，抽真空，待气泡抽净，即得软胶囊囊壳液，50-70℃保温，备用；
⑶取软胶囊囊壳液、囊芯自乳化系统，上软胶囊机，采用压制法制备软胶囊，经干燥，洗涤，再干燥，分检，包装，得成品。
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