CN110025644A - 一种具有抗衰老作用的复合芹菜籽油脂肪乳制剂及其制备方法 - Google Patents

一种具有抗衰老作用的复合芹菜籽油脂肪乳制剂及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种具有抗衰老作用的复合芹菜籽油脂肪乳制剂及其制备方法。该制剂包含芹菜籽油，并复合具有抗衰老作用和能显著增强芹菜籽油抗衰老功效的植物脂肪油配伍组方，并溶解、分散和保护芹菜籽油，与磷脂类和或单脂肪酸甘油酯类配伍组方并为乳化剂，再与油酸、亚油酸、胆酸类别化合物或双脂肪酸甘油酯类配伍组方并为助乳化剂，添加附加剂及水制备而成。本发明利用脂肪乳作为芹菜籽油提取物的递药载体，同时配伍的植物脂肪油与乳化剂成分又为功能成分，所制备的复合芹菜籽油脂肪乳制剂无毒、粒径均匀、生物利用度高、稳定性好，可通过多种方式给药，充分发挥芹菜籽油及其组合物的药用和保健功效，改善人体的健康状况、提高机体的抗病能力。

Description

一种具有抗衰老作用的复合芹菜籽油脂肪乳制剂及其制备 方法
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体地，涉及一种具有抗衰老作用的芹菜籽油及复合芹菜籽油脂肪乳剂及其制备方法。
背景技术
芹菜籽油是从芹菜籽中提炼出来的一种疏水性黄绿色半透明油类物质。芹菜籽是伞形花科旱芹属植物芹菜(Apium graveolens L.)的种子。芹菜为一年生或二年生草本植物，世界各地均有栽培，芹菜不但有较高的食用价值，其果实提取的油类物质为黄绿色半透明油状液，有独特的清新香气，可作为调味香料在调味品、医药、化妆品等领域广泛应用。芹菜籽油与一般的植物籽油有所不同，芹菜籽油除含一般的植物籽油中所含的脂肪酸成分外，芹菜籽油中还含较大量的挥发油(即芹菜籽精油)；同时芹菜籽油中还含有绿原酸(Chlorogenic Acid)、咖啡酸、甘油醇酸等多种有机酸以及类黄酮物质、丁基苯酞类、氨基酸、膳食纤维、香豆素衍生物等多种物质。现代药理研究表明，芹菜籽油具有良好的抗氧化、抗肿瘤、抑菌及杀虫等生物活性。芹菜籽在维吾尔药中主要用于治疗高血压、关节炎、类风湿关节炎、气滞性子宫炎、腹水、肾脏等疾病，至今降血脂的药学研究也已有初探，近年来芹菜籽更是以其丰富的营养、独特的药理作用的特性日益受到人们的关注。
牡丹籽油是从毛莨科植物牡丹(Paeonia suffruticosa Andr.)的种子——牡丹籽中提炼出来的一种疏水性金黄色透明油类物质,牡丹籽油中总不饱和脂肪酸占脂肪含量可达93％，其中α-亚麻酸含量42～67％；紫苏籽油是从唇形科植物紫苏(Perillafrutescens L Brit.)的种子——紫苏籽中提炼出来的一种疏水性油类物质，紫苏籽油中总不饱和脂肪酸占脂肪含量达90％，其中α-亚麻酸含量达50～62％；杜仲籽油是从杜仲科植物杜仲(Eucommia ulmoides Oliver)的种子——杜仲籽中提炼出来的一种疏水性油类物质，杜仲籽油中总不饱和脂肪酸占脂肪含量达92％，其中α-亚麻酸含量达50～66％；亚麻籽油是从亚麻科植物亚麻(Linum usitatissimum L.)的种子——亚麻籽中提炼出来的一种疏水性油类物质，亚麻籽油中总不饱和脂肪酸占脂肪含量达91％，其中α-亚麻酸含量达54～58％；美藤果油是从大戟科植物美藤果(Plukenetia volubilis L.，Inca Peanut，sachainchi)中提炼出来的一种疏水性油类物质，美藤果油中总不饱和脂肪酸占脂肪含量达92％，其中α-亚麻酸含量达46～53％。牡丹籽油、紫苏籽油、杜仲籽油、亚麻籽油、美藤果油除具有各自功能和特点外，都有一共同特点：总不饱和脂肪酸占比高，均在90％以上，其中α-亚麻酸的含量远高于其它一般植物油。α-亚麻酸具较强抗氧化活性，为ω-3不饱和脂肪酸，是人体必需脂肪酸，构成细胞膜和生物酶的基础物质，同时在维持脂蛋白平衡、降血脂、调节胆固醇代谢、降血压、抗血栓、预防癌变等方面具有重要作用。
目前市场上的芹菜籽油因其具有独特的清新香气主要作为香料用于调味品、化妆品等领域；在医药、保健食品、食品方面研究相对较少，其发明专利主要集中在芹菜籽油的制备方法上，如中国专利CN 201510679016.4公开了“一种微波辅助低温压榨芹菜籽油的方法”，又如中国专利CN 201310276117.8公开了“一种对芹菜籽油进行富集与分离的方法”，再又如中国专利CN 201310144572.2公开了“一种芹菜籽油的分子蒸馏提纯方法及其装置”，还又如中国专利CN201510215274.7公开了“一种芹菜籽油提取方法”，采用压榨与浸提工艺复合提取芹菜籽油；未见芹菜籽油与牡丹籽油、紫苏籽油、杜仲籽油、亚麻籽油、美藤果油组合成复合芹菜籽油用于抗衰老作用，更未见芹菜籽油与牡丹籽油、紫苏籽油、杜仲籽油、亚麻籽油、美藤果油组合成复合芹菜籽油制备成具有抗衰老作用的复合芹菜籽油脂肪乳制剂及其制备方法。牡丹籽油、紫苏籽油、杜仲籽油、亚麻籽油、美藤果油除了各自营养价值和功能外，研究发现还分别具有抗氧化、抑制血栓形成、软化血管等作用，通过与芹菜籽油的配伍使用，可充分发挥和提高芹菜籽油的抗衰老作用。
芹菜籽油与一般的植物籽油不同，一般的植物籽油主含脂肪酸，不易挥发。而芹菜籽油除含一定的脂肪酸外，还含有较大量的挥发性萜类成分，在制剂的过程中需要注意芹菜籽油的挥发性，因此，芹菜籽油普通制剂与其脂肪乳制剂相比，不仅其生物利用度相对较低，而且芹菜籽油的易挥发性问题也难以解决。通过本发明不仅可得一种稳定的芹菜籽油脂肪乳制剂，可提高芹菜籽油或芹菜籽油与其相配的植物籽油的生物利用度，起效快，克服了芹菜籽油及与其相配的植物籽油普通制剂生物利用度较低的缺点，显著增强了芹菜籽油抗痛风作用；而且通过芹菜籽油与其选定的植物籽油相配形成复合芹菜籽油，可有效地克服芹菜籽油的易挥发性问题。同时，本品作为芹菜籽油一种新的组合剂型，可以为消费者提供一种新的选择。
发明内容
本发明的目的就是针对上述问题，提供一种生物利用度高，使用安全、方便的能显著增强抗衰老作用的一种新型复合芹菜籽油脂肪乳制剂。
本发明的另一目的是提供上述芹菜籽油或复合芹菜籽油脂肪乳制剂的制备方法。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：
一种具有抗衰老作用的复合芹菜籽油脂肪乳制剂，每1000ml水中含有如下成分：
在上述的复合芹菜籽油脂肪乳制剂中，所述复合芹菜籽油脂肪乳制剂为注射用脂肪乳剂型，每1000ml水中含有如下成分：
调整pH值到7左右。
在上述的复合芹菜籽油脂肪乳制剂中，所述复合芹菜籽油脂肪乳制剂为口服用脂肪乳制剂，每1000ml水中含有如下成分：
作为优选的，在上述的复合芹菜籽油脂肪乳制剂中，所述注射或食用植物籽油组分为牡丹籽油、或和紫苏籽油、或和杜仲籽油、或和亚麻籽油、或和美藤果油、或和它们之间的任一组合。
作为优选的，在上述的复合芹菜籽油脂肪乳制剂中，所述注射或食用植物籽油组分中各复合组分满足如下重量比关系：
芹菜籽油：牡丹籽油＝1：0.5～9.0或芹菜籽油：紫苏籽油＝1:0.5～9.0或芹菜籽油：杜仲籽油＝1:0.5～9.0或芹菜籽油：亚麻籽油＝1:0.5～9.0或芹菜籽油：美藤果油＝1:0.5～9.0；
或芹菜籽油：牡丹籽油:紫苏籽油＝1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：牡丹籽油:杜仲籽油＝1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：牡丹籽油:亚麻籽油＝1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：牡丹籽油:美藤果油＝1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：紫苏籽油:杜仲籽油＝1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：紫苏籽油:亚麻籽油＝1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：紫苏籽油:美藤果油＝1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：杜仲籽油:亚麻籽油＝1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：杜仲籽油:美藤果油＝1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：亚麻籽油:美藤果油＝1:0.5～4.5:0.5～4.5；
或芹菜籽油:牡丹籽油:紫苏籽油:杜仲籽油＝1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0或芹菜籽油:牡丹籽油:紫苏籽油:亚麻籽油＝1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0或芹菜籽油:牡丹籽油:紫苏籽油:美藤果油＝1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0或芹菜籽油:牡丹籽油:杜仲籽油:亚麻籽油＝1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0或芹菜籽油:牡丹籽油:杜仲籽油:美藤果油＝1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0或芹菜籽油:牡丹籽油:美藤果油:亚麻籽油＝1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0或芹菜籽油:紫苏籽油:杜仲籽油:亚麻籽油＝1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0或芹菜籽油:紫苏籽油:亚麻籽油:美藤果油＝1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0或芹菜籽油:杜仲籽油:亚麻籽油:美藤果油＝1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0或芹菜籽油:紫苏籽油:杜仲籽油:美藤果油＝1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0；
或芹菜籽油:牡丹籽油:紫苏籽油:杜仲籽油:亚麻籽油＝1:0.5～2.5:0.5～2.5:0.5～2.5:0.5～2.5或芹菜籽油:牡丹籽油:紫苏籽油:杜仲籽油:美藤果油＝1:0.5～2.5:0.5～2.5:0.5～2.5:0.5～2.5；
或芹菜籽油:牡丹籽油:紫苏籽油:杜仲籽油:亚麻籽油:美藤果油＝1:0.5～1.5:0.5～1.5:0.5～1.5:0.5～1.5:0.5～1.5。
作为优选的，在上述的复合芹菜籽油脂肪乳制剂中，所述乳化剂为大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂和/或合成磷脂。
作为优选的，在上述的复合芹菜籽油脂肪乳制剂中，所述增溶剂为乙醇、聚乙二醇、羟丙基β-环糊精或聚维酮；所述抗氧剂为维生素E或维生素C；所述等渗调节剂为注射用甘油；所述调味剂选自甜菊糖苷、阿斯巴甜、葡萄糖、果糖；所述香精为薄荷香精、柠檬香精、玫瑰香精、牛奶香精、薄荷香精、或其多种香精的组合物；所述防腐剂选用山梨酸钾；所述调整pH值采用的pH值调节剂为NaOH、Na2CO3或NaHCO3。
上述注射用脂肪乳制剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)在50～60℃水浴及氮气保护下，取注射用植物籽油，加入芹菜籽油组分混合均匀，加入部分乳化剂、抗氧剂，搅拌使其溶解并混合均匀，冷却至室温得油相；
(2)在50～60℃水浴及氮气保护下，将余下乳化剂、增溶剂与等渗调节剂混合后搅拌，溶解于部分注射用水中，必要时进行剪切搅拌，使其溶解并混合均匀，冷却至室温，得水相；
(3)在搅拌条件下，将油相缓慢地加入水相中，同时氮气保护下进行剪切搅拌15～60分钟,然后调节pH至7.0左右，再加注射用水至100％，得乳白色初乳；
(4)将制备好的白色初乳，移入高压匀质机，用高压均质机进行均质8～12次，匀化后，微孔滤膜过滤，充氮、灌封、灭菌，即得所述含芹菜籽油的复合脂肪乳制剂的注射液剂型。
上述口服用脂肪乳制剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)在50～60℃水浴及氮气保护下，取口服用植物籽油，加入芹菜籽油组分混合均匀，加入部分乳化剂、抗氧剂，搅拌使其溶解并混合均匀，冷却至室温得油相；
(2)在50～60℃水浴及氮气保护下，将余下乳化剂、增溶剂、调味剂、防腐剂、香精混合后搅拌，溶解于部分注射用水中，必要时进行剪切搅拌，使其溶解并混合均匀，冷却至室温，得水相；
(3)在搅拌条件下，将油相缓慢地加入水相中，同时氮气保护下进行剪切搅拌15～60分钟,然后调节pH至7.0左右，再加注射用水至100％，得乳白色初乳；
(4)将制备好的白色初乳，移入高压匀质机，用高压均质机进行均质5～8次，匀化后，微孔滤膜过滤，或充氮、灌封、灭菌，即得所述含芹菜籽油的复合脂肪乳制剂的口服液剂型。
所述的制备方法，所述注射用脂肪乳制剂的乳剂粒径控制在0.02～1μm。
所述的制备方法，所述口服用脂肪乳制剂的乳剂粒径控制在0.05～5μm。
本发明的含芹菜籽油的复合脂肪乳制剂与等量的芹菜籽油比较，能显著增强其芹菜籽油抗衰老作用。能用于制备复合芹菜籽油食品、保健食品或药物。
基于芹菜籽油以及芹菜籽油与所选定的植物籽油组成的复合芹菜籽油是油类物质，本身就可起到油相作用的原理，既是原料药有效成分，又是油相辅料。特别是所选定的植物籽油牡丹籽油、或和紫苏籽油、或和杜仲籽油、或和亚麻籽油、或和美藤果油、或和它们之间的任一组合还有另外二种用途。一是作为分散剂或载体分散或溶解芹菜籽油，使芹菜籽油相对稳定，相对不易挥发；二是所选定的这些植物籽油本身为具有抗衰老作用或具有辅助抗衰老作用的原料药有效成分。因此本发明提供了种芹菜籽油的新制剂——复合芹菜籽油脂肪乳制剂，它能显著增强芹菜籽油或复合芹菜籽油抗衰老作用的有益效果，比目前市售产品有显著的稳定性。同时，本发明提供了一种选择，它提供了一种新的安全产品作为现有技术的替代。芹菜籽油或复合芹菜籽油抗衰老作用
为了说明芹菜籽油或复合芹菜籽油脂肪乳制剂抗衰老作用的有益效果，本发明选用健康Wistar大白鼠为研究对象，分为5个组，为阴性对照组、模型对照组、芹菜籽油脂肪乳制剂组、复合芹菜籽油脂肪乳制剂1组、复合芹菜籽油脂肪乳制剂2组。通过观察芹菜籽油或复合芹菜籽油脂肪乳制剂对衰老模型动物学习记忆的改善,同时比较衰老动物脑组织内丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性的差异并通过统计学差异总结结论，结果显示芹菜籽油及复合芹菜籽油脂肪乳制剂对于衰老模型动物的衰老指标有显著的改善作用。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
⑴本发明所得芹菜籽油或复合芹菜籽油脂肪乳制剂具有高度的分散性，优良的贮存稳定性，特别是芹菜籽油的挥发性因与选用的其它植物籽油复合相溶被抑制，克服现有芹菜籽油产品的一些缺陷，其生物利用度被大大提高，提高了芹菜籽油及复合芹菜籽油的药用效果。
⑵本发明所选芹菜籽油与复合芹菜籽油本身是油类物质，既是原料药有效成分，又是油相辅料，且选用的其它植物籽油既可作为芹菜籽油的分散剂或载体分散或溶解芹菜籽油的有效成分，又可作为抗衰老作用或辅助抗衰老作用的原料药有效成分，相对增加了活性药物成分的浓度，突出了作用的效果。
⑶芹菜籽油与复合芹菜籽油脂肪乳注射剂，药物直接进入人体血液，起效快，吸收较完全。避免了药物的首过效应，提高了芹菜籽油与复合芹菜籽油生物利用度，最大限度的发挥有效成分的疗效。芹菜籽油与复合芹菜籽油有效成分包裹在脂肪油中，也有效增加了芹菜籽油的稳定性。
⑷由于芹菜籽油或复合芹菜籽油不溶于水，因此作为注射用药物制剂，较适宜制备成静脉注射乳剂，药物被动定向浓集在富含吞噬细胞的肝、脾、淋巴系统等部位，不仅可实现靶向给药，并且具有潜在的缓释作用，由于粒径＜1000nm而不易被网状皮质系统摄取，达到“长循环”的功效。
⑸芹菜籽油与复合芹菜籽油脂肪乳脂肪乳口服液体制剂，将不溶于水的成分制成乳化水剂应用于临床，提高了芹菜籽油或复合芹菜籽油口服制剂的生物利用度，同时起到吸收快、口感好、服用方便的作用。
⑹本发明芹菜籽油或复合芹菜籽油脂肪乳，所选主成分芹菜籽油具有挥发性，通过选用牡丹籽油、紫苏籽油、杜仲籽油、亚麻籽油、美藤果油分别或相互与芹菜籽油复合可起到四重作用：①分散或溶解芹菜籽油及其有效成分；②减少芹菜籽油及其有效成分的挥发性，稳定芹菜籽油的作用；③具有抗衰老作用或辅助抗衰老作用，可视为原料药有效成分的组成部分；④与芹菜籽油一起组成油相，又可被视为油相辅料的组成部分。
⑺该发明原料易得，工艺简单，可用常规的生产设备和工艺制备，适合于具GMP生产厂家大规模地投入批量生产。
具体实施方式
实施例1：复合芹菜籽油脂肪乳注射剂制备一
1、成分组成如表1所示：
表1 复合芹菜籽油脂肪乳注射剂成分组成一
2、制备方法
(1)在约56℃水浴及氮气保护下，取注射用紫苏籽油60g，加入牡丹籽油30g混合均匀,再加入芹菜籽油10g搅拌至均匀，投入大豆卵磷脂20g、维生素E 100mg搅拌至磷脂溶解形成均匀混和相，冷却至室温得油相；
(2)在约56℃水浴及氮气保护下，将注射用水800ml置于容器中，加入聚维酮40g、甘油22g及另一部分蛋黄卵磷脂15g进行剪切搅拌，使其溶解并混合均匀，冷却至室温，得水相；
(3)在搅拌条件下，将油相缓慢地加入水相中，同时氮气保护下进行剪切搅拌约20分钟,然后用1％NaOH液调节pH至6.5～7.0，再加注射用水至1000ml，得乳白色初乳；
(4)将制备好的白色初乳，移入高压匀质机，并在约56℃下用高压均质机进行均质12次，进行乳滴粒径检查，匀化后，微孔滤膜过滤，充氮、灌封、压盖；用旋转高压灭菌器进行100℃，FO为20的条件下灭菌。灭菌完毕后，逐渐冷却。在室温下贮存。即制成复合芹菜籽油脂肪乳注射剂。
⑸稳定性测定：稳定性测定方法系采取新鲜制备的脂肪乳，置于具塞离心管中，4000rpm离心15min后，未发现分层，也未见药物沉淀析出。室温阴凉处贮存一年，乳剂外观、粒径、Zeta电位等理化性质以及含量均未发生明显变化，表明乳剂稳定。
检查结果：脂肪乳静脉注射液pH值：6.9，乳粒的大小及范围：小于lμm。
实施例2：复合芹菜籽油脂肪乳注射剂制备二
1、成分组成如表2所示：
表2 复合芹菜籽油脂肪乳注射剂成分组成二
2、制备方法
(1)在约58℃水浴及氮气保护下，取注射用紫苏籽油60g，加入注射用杜仲籽油25g混合均匀,再加入芹菜籽油15g搅拌至均匀，投入蛋黄卵磷脂15g、维生素C 100mg搅拌至磷脂溶解形成均匀混和相，冷却至室温得油相；
(2)在约58℃水浴及氮气保护下，将注射用水800ml置于容器中，加入聚乙二醇30g、甘油22g及蛋黄卵磷脂15g进行剪切搅拌，使其溶解并混合均匀，冷却至室温，得水相；
(3)在搅拌条件下，将油相缓慢地加入水相中，同时氮气保护下进行剪切搅拌约30分钟,然后用1％NaOH液调节pH至6.5～7.0，再加注射用水至1000ml，得乳白色初乳；
(4)将制备好的白色初乳，移入高压匀质机，并在约58℃下用高压均质机进行均质11次，进行乳滴粒径检查，匀化后，微孔滤膜过滤，充氮、灌封、压盖；用旋转高压灭菌器进行100℃，FO为20的条件下灭菌。灭菌完毕后，逐渐冷却。在室温下贮存。即制成复合芹菜籽油脂肪乳注射剂。
⑸稳定性测定：稳定性测定方法系采取新鲜制备的脂肪乳，置于具塞离心管中，4000rpm离心15min后，未发现分层，也未见药物沉淀析出。室温阴凉处贮存一年，乳剂外观、粒径、Zeta电位等理化性质以及含量均未发生明显变化，表明乳剂稳定。
检查结果：脂肪乳静脉注射液pH值：6.8，乳粒的大小及范围：小于lμm。
实施例3：复合芹菜籽油脂肪乳注射剂制备三
1、成分组成如表3所示：
表3 复合芹菜籽油脂肪乳注射剂成分组成三
2、制备方法
(1)在约59℃水浴及氮气保护下，取注射用牡丹籽油35g，加入注射用杜仲籽油25g、紫苏籽油20g混合均匀,再加入芹菜籽油20g搅拌至均匀，投入蛋黄卵磷脂15g、维生素E100mg搅拌至磷脂溶解形成均匀混和相，冷却至室温得油相；
(2)在约59℃水浴及氮气保护下，将注射用水800ml置于容器中，加入聚维酮25g、甘油22g及蛋黄卵磷脂20g进行剪切搅拌，使其溶解并混合均匀，冷却至室温，得水相；
(3)在搅拌条件下，将油相缓慢地加入水相中，同时氮气保护下进行剪切搅拌约40分钟,然后用1％NaOH液调节pH至6.5～7.0，再加注射用水至1000ml，得乳白色初乳；
(4)将制备好的白色初乳，移入高压匀质机，并在约59℃下用高压均质机进行均质10次，进行乳滴粒径检查，匀化后，微孔滤膜过滤，充氮、灌封、压盖；用旋转高压灭菌器进行100℃，FO为20的条件下灭菌。灭菌完毕后，逐渐冷却。在室温下贮存。即制成复合芹菜籽油脂肪乳注射剂。
⑸稳定性测定：稳定性测定方法系采取新鲜制备的脂肪乳，置于具塞离心管中，4000rpm离心15min后，未发现分层，也未见药物沉淀析出。室温阴凉处贮存一年，乳剂外观、粒径、Zeta电位等理化性质以及含量均未发生明显变化，表明乳剂稳定。
检查结果：脂肪乳静脉注射液pH值：6.9，乳粒的大小及范围：小于lμm。
实施例4复合芹菜籽油脂肪乳注射剂制备四
1、成分组成如表4所示：
表4 复合芹菜籽油脂肪乳注射剂成分组成四
2、制备方法
(1)在约57℃水浴及氮气保护下，取注射用亚麻籽油30g,加入注射用牡丹籽油20g、杜仲籽油20g、紫苏籽油20g混合均匀,再加入芹菜籽油10g搅拌至均匀，投入合成磷脂20g、维生素E 100mg搅拌至磷脂溶解形成均匀混和相，冷却至室温得油相；
(2)在约57℃水浴及氮气保护下，将注射用水800ml置于容器中，加入聚维酮25g、甘油22g及合成磷脂20g进行剪切搅拌，使其溶解并混合均匀，冷却至室温，得水相；
(3)在搅拌条件下，将油相缓慢地加入水相中，同时氮气保护下进行剪切搅拌约40分钟,然后用1％NaOH液调节pH至6.5～7.0，再加注射用水至1000ml，得乳白色初乳；
(4)将制备好的白色初乳，移入高压匀质机，并在约57℃下用高压均质机进行均质11次，进行乳滴粒径检查，匀化后，微孔滤膜过滤，充氮、灌封、压盖；用旋转高压灭菌器进行100℃，FO为20的条件下灭菌。灭菌完毕后，逐渐冷却。在室温下贮存。即制成复合芹菜籽油脂肪乳注射剂。
⑸稳定性测定：稳定性测定方法系采取新鲜制备的脂肪乳，置于具塞离心管中，4000rpm离心15min后，未发现分层，也未见药物沉淀析出。室温阴凉处贮存一年，乳剂外观、粒径、Zeta电位等理化性质以及含量均未发生明显变化，表明乳剂稳定。
检查结果：脂肪乳静脉注射液pH值：6.7，乳粒的大小及范围：小于lμm。
实施例5复合芹菜籽油脂肪乳注射剂制备五
1、成分组成如表5所示：
表5 复合芹菜籽油脂肪乳注射剂成分组成五
2、制备方法
(1)在约58℃水浴及氮气保护下，取注射用亚麻籽油20g,加入注射用美藤果油10g、牡丹籽油20g、杜仲籽油20g、紫苏籽油18g混合均匀,再加入芹菜籽油12g搅拌至均匀，投入合成磷脂10g、蛋黄卵磷脂10g、维生素E 100mg搅拌至磷脂溶解形成均匀混和相，冷却至室温得油相；
(2)在约58℃水浴及氮气保护下，将注射用水800ml置于容器中，加入聚维酮25g、甘油22g及合成磷脂20g进行剪切搅拌，使其溶解并混合均匀，冷却至室温，得水相；
(3)在搅拌条件下，将油相缓慢地加入水相中，同时氮气保护下进行剪切搅拌约40分钟,然后用1％NaOH液调节pH至6.5～7.0，再加注射用水至1000ml，得乳白色初乳；
(4)将制备好的白色初乳，移入高压匀质机，并在约57℃下用高压均质机进行均质11次，进行乳滴粒径检查，匀化后，微孔滤膜过滤，充氮、灌封、压盖；用旋转高压灭菌器进行100℃，FO为20的条件下灭菌。灭菌完毕后，逐渐冷却。在室温下贮存。即制成复合芹菜籽油脂肪乳注射剂。
⑸稳定性测定：稳定性测定方法系采取新鲜制备的脂肪乳，置于具塞离心管中，4000rpm离心15min后，未发现分层，也未见药物沉淀析出。室温阴凉处贮存一年，乳剂外观、粒径、Zeta电位等理化性质以及含量均未发生明显变化，表明乳剂稳定。
检查结果：脂肪乳静脉注射液pH值：6.9，乳粒的大小及范围：小于lμm。
实施例6复合芹菜籽油脂肪乳口服制剂制备一
1、成分组成如表6所示：
表6 复合芹菜籽油脂肪乳口服制剂成分组成一
2、制备方法
(1)在约58℃水浴及氮气保护下，取紫苏籽油55g，加入牡丹籽油25g混合均匀,再加入芹菜籽油20g搅拌至均匀，投入大豆卵磷脂20g、维生素E 100mg搅拌至磷脂溶解形成均匀混和相，冷却至室温得油相；
(2)在约58℃水浴及氮气保护下，将纯化水800ml置于容器中，加入羟丙基β-环糊精30g、甜菊糖苷200mg、山梨酸钾500mg及另一部分蛋黄卵磷脂15g进行剪切搅拌，使其溶解并混合均匀，冷却至室温，得水相；
(3)在搅拌条件下，将油相缓慢地加入水相中，同时氮气保护下进行剪切搅拌约15分钟,然后用1％NaOH液调节pH至6.5～7.0，再加纯水至1000ml，得乳白色初乳；
(4)将制备好的白色初乳，移入高压匀质机，并在约58℃下用高压均质机进行均质7次，进行乳滴粒径检查，匀化后，微孔滤膜过滤，充氮、灌封、压盖；用旋转高压灭菌器进行100℃，FO为20的条件下灭菌。灭菌完毕后，逐渐冷却。在室温下贮存。即制成复合芹菜籽油脂肪乳口服液。
⑸稳定性测定：稳定性测定方法系采取新鲜制备的脂肪乳，置于具塞离心管中，4000rpm离心15min后，未发现分层，也未见药物沉淀析出。室温阴凉处贮存一年，乳剂外观、粒径、Zeta电位等理化性质以及含量均未发生明显变化，表明乳剂稳定。
检查结果：脂肪乳口服液pH值：6.7，乳粒的大小及范围：小于5μm。
实施例7：复合芹菜籽油脂肪乳口服制剂制备二
1、成分组成如表7所示：
表7 复合芹菜籽油脂肪乳口服制剂成分组成二
2、制备方法
(1)在约57℃水浴及氮气保护下，取紫苏籽油60g，加入杜仲籽油30g混合均匀,再加入芹菜籽油10g搅拌至均匀，投入蛋黄卵磷脂15g、维生素C 100mg搅拌至磷脂溶解形成均匀混和相，冷却至室温得油相；
(2)在约57℃水浴及氮气保护下，将纯化水800ml置于容器中，加入聚乙二醇30g、葡萄糖20g、玫瑰香精1.6g、山梨酸钾500mg及另一部分蛋黄卵磷脂15g进行剪切搅拌，使其溶解并混合均匀，冷却至室温，得水相；
(3)在搅拌条件下，将油相缓慢地加入水相中，同时氮气保护下进行剪切搅拌约40分钟,然后用1％NaOH液调节pH至6.5～7.0，再加纯化水至1000ml，得乳白色初乳；
(4)将制备好的白色初乳，移入高压匀质机，并在约57℃下用高压均质机进行均质6次，进行乳滴粒径检查，匀化后，微孔滤膜过滤，充氮、灌封、压盖；用旋转高压灭菌器进行100℃，FO为20的条件下灭菌。灭菌完毕后，逐渐冷却。在室温下贮存。即制成复合芹菜籽油脂肪乳口服液。
⑸稳定性测定：稳定性测定方法系采取新鲜制备的脂肪乳，置于具塞离心管中，4000rpm离心15min后，未发现分层，也未见药物沉淀析出。室温阴凉处贮存一年，乳剂外观、粒径、Zeta电位等理化性质以及含量均未发生明显变化，表明乳剂稳定。
检查结果：脂肪乳口服液pH值：6.8，乳粒的大小及范围：小于5μm。
实施例8：复合芹菜籽油脂肪乳口服制剂制备三
1、成分组成如表8所示：
表8 复合芹菜籽油脂肪乳口服制剂成分组成三
2、制备方法
(1)在约59℃水浴及氮气保护下，取牡丹籽油35g，加入杜仲籽油28g、紫苏籽油15g、混合均匀,再加入芹菜籽油12g搅拌至均匀，投入蛋黄卵磷脂15g、维生素E 100mg搅拌至磷脂溶解形成均匀混和相，冷却至室温得油相；
(2)在约59℃水浴及氮气保护下，将纯化水800ml置于容器中，加入甘油25g、果糖20g、牛奶香精1.6g、山梨酸钾500mg及另一部分蛋黄卵磷脂20g进行剪切搅拌，使其溶解并混合均匀，冷却至室温，得水相；
(3)在搅拌条件下，将油相缓慢地加入水相中，同时氮气保护下进行剪切搅拌约50分钟,然后用1％NaOH液调节pH至6.5～7.0，再加纯化水至1000ml，得乳白色初乳；
(4)将制备好的白色初乳，移入高压匀质机，并在约59℃下用高压均质机进行均质5次，进行乳滴粒径检查，匀化后，微孔滤膜过滤，充氮、灌封、压盖；用旋转高压灭菌器进行100℃，FO为20的条件下灭菌。灭菌完毕后，逐渐冷却。在室温下贮存。即制成复合芹菜籽油脂肪口服液。
⑸稳定性测定：稳定性测定方法系采取新鲜制备的脂肪乳，置于具塞离心管中，4000rpm离心15min后，未发现分层，也未见药物沉淀析出。室温阴凉处贮存一年，乳剂外观、粒径、Zeta电位等理化性质以及含量均未发生明显变化，表明乳剂稳定。
检查结果：脂肪乳口服液pH值：6.6，乳粒的大小及范围：小于5μm。
实施例9复合芹菜籽油脂肪乳口服制剂制备四
1、成分组成如表9所示：
表9 复合芹菜籽油脂肪乳口服制剂成分组成四
2、制备方法
(1)在约56℃水浴及氮气保护下，取亚麻籽油20g,加入牡丹籽油16g、杜仲籽油16g、紫苏籽油18g混合均匀,再加入芹菜籽油20g搅拌至均匀，投入合成磷脂20g、维生素E100mg搅拌至磷脂溶解形成均匀混和相，冷却至室温得油相；
(2)在约56℃水浴及氮气保护下，将纯化水800ml置于容器中，加入聚维酮25g、阿斯巴甜200mg、薄荷香精0.8g、柠檬香精0.8、山梨酸钾500mg及另一部分合成磷脂20g进行剪切搅拌，使其溶解并混合均匀，冷却至室温，得水相；
(3)在搅拌条件下，将油相缓慢地加入水相中，同时氮气保护下进行剪切搅拌约30分钟,然后用1％NaOH液调节pH至6.5～7.0，再加纯化水至1000ml，得乳白色初乳；
(4)将制备好的白色初乳，移入高压匀质机，并在约57℃下用高压均质机进行均质7次，进行乳滴粒径检查，匀化后，微孔滤膜过滤，充氮、灌封、压盖；用旋转高压灭菌器进行100℃，FO为20的条件下灭菌。灭菌完毕后，逐渐冷却。在室温下贮存。即制成复合芹菜籽油脂肪乳口服液。
⑸稳定性测定：稳定性测定方法系采取新鲜制备的脂肪乳，置于具塞离心管中，4000rpm离心15min后，未发现分层，也未见药物沉淀析出。室温阴凉处贮存一年，乳剂外观、粒径、Zeta电位等理化性质以及含量均未发生明显变化，表明乳剂稳定。
检查结果：脂肪乳口服液pH值：6.9，乳粒的大小及范围：小于5μm。
实施例10复合芹菜籽油脂肪乳口服制剂制备五
1、成分组成如表10所示：
表10 复合芹菜籽油脂肪乳口服制剂成分组成五
2、制备方法
制备方法
(1)在约58℃水浴及氮气保护下，取亚麻籽油20g,加入美藤果油10g、牡丹籽油20g、杜仲籽油20g、紫苏籽油18g混合均匀,再加入芹菜籽油12g搅拌至均匀，投入大豆卵磷脂10g、蛋黄卵磷脂10g、维生素E 100mg搅拌至磷脂溶解形成均匀混和相，冷却至室温得油相；
(2)在约59℃水浴及氮气保护下，将纯化水800ml置于容器中，加入甘油25g、果糖20g、牛奶香精1.6g、山梨酸钾500mg及另一部分大豆卵磷脂10g、蛋黄卵磷脂10g进行剪切搅拌，使其溶解并混合均匀，冷却至室温，得水相；
(3)在搅拌条件下，将油相缓慢地加入水相中，同时氮气保护下进行剪切搅拌约50分钟,然后用1％NaOH液调节pH至6.5～7.0，再加纯化水至1000ml，得乳白色初乳；
(4)将制备好的白色初乳，移入高压匀质机，并在约59℃下用高压均质机进行均质5次，进行乳滴粒径检查，匀化后，微孔滤膜过滤，充氮、灌封、压盖；用旋转高压灭菌器进行100℃，FO为20的条件下灭菌。灭菌完毕后，逐渐冷却。在室温下贮存。即制成复合芹菜籽油脂肪口服液。
⑸稳定性测定：稳定性测定方法系采取新鲜制备的脂肪乳，置于具塞离心管中，4000rpm离心15min后，未发现分层，也未见药物沉淀析出。室温阴凉处贮存一年，乳剂外观、粒径、Zeta电位等理化性质以及含量均未发生明显变化，表明乳剂稳定。
检查结果：脂肪乳口服液pH值：6.8，乳粒的大小及范围：小于5μm。
实施例11：复合芹菜籽油脂肪乳对衰老模型大鼠的抗衰老作用研究
衰老的自由基学说认为,衰老是由于自由基产生过多而引起脂质过氧化反应,使生物膜、蛋白质(酶)及遗传物质等损伤,并最终导致衰老。活性氧自由基(O2 -和H2O2)清除剂超氧化物歧化酶(SOD)可使有毒的O2 -和H2O2经过歧化和还原得到清除,从而阻止其引起自由基的链锁反应而降低自由基代谢产物丙二醛(MDA)的生成。因此,可将SOD活力大小作为机体抵抗衰老的一项重要指标。另外,也可将MDA作为抗氧化的一项指标。
芹菜籽油是从芹菜籽中提炼出来的一种疏水性黄绿色半透明油类物质，含有黄酮类、绿原酸、咖啡酸、甘油醇酸、挥发油、丁基苯酞类、香豆素衍生物等多种物质，芹菜籽油在体内可以增加SOD的活性；牡丹籽油、紫苏籽油、杜仲籽油、亚麻籽油、美藤果油是从各自的植物种子或果实中提炼出来的特殊油品，除具有各自功能和特点外，都还有一共同特点：总不饱和脂肪酸占比高(均在90％以上)，其中α-亚麻酸的含量远高于其它一般植物油,可高达60％。α-亚麻酸具较强抗氧化活性，为ω-3不饱和脂肪酸，是人体必需脂肪酸，在抗衰老方面具有重要作用。因此，以芹菜籽油为主要有效成分，配以和/或牡丹籽油、和/或紫苏籽油、和/或杜仲籽油、和/或亚麻籽油、和/或美藤果油组成的复合芹菜籽油，制备成复合芹菜籽油脂肪乳制剂，最大限度地提高了芹菜籽油的抗衰老作用，起到了意想不到的效果。本实验主要研究复合芹菜籽油脂肪乳制剂对衰老动物的学习记忆障碍的改善、降低衰老小鼠脑组织内MDA的含量及增加SOD的活性来观察复合芹菜籽油及其脂肪乳制剂的抗衰老作用。
1实验材料与方法
1.1材料与试剂
1.1.1实验试剂
芹菜籽油由本公司用微波辅助低温压榨的方法制备。芹菜籽油的制备方法为：除杂、干燥的芹菜籽→微波处理60～120s→低温压榨机压榨→粗制芹菜籽油→离心、过滤→芹菜籽油。
芹菜籽油脂肪乳制剂按上述实施例6的方法制备，将实施例6中的牡丹籽油、紫苏籽油以等量大豆油替代，分别依次复合芹菜籽油脂肪乳制剂以上述实施例6和实施例9制备的脂肪乳制剂供用，分别依次命名为脂肪乳1系统、脂肪乳2系统、脂肪乳3系统，即脂肪乳1系统为芹菜籽油脂肪乳口服制剂，脂肪乳2系统、脂肪乳3系统为复合芹菜籽油脂肪乳口服制剂(实施例6、实施例9)。
吡拉西坦片：山东仁和堂药业有限公司；D-半乳糖：德国Sigma公司；超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、总蛋白、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)测定试剂盒：上海常斤生物科技有限公司；其他试剂均为分析纯。
1.1.2实验仪器与设备
Morris水迷宫系统：北京众实迪创科技发展有限责任公司；DY89-Ⅱ电动玻璃匀浆机：宁波新芝生物科技股份有限公司；HH-21-6电热恒温水浴锅：常州诺基仪器有限公司；WH-1微型漩涡混合仪：上海沪西分析仪器厂有限公司；GTR16-2高速冷冻离心机：北京时代北利离心机有限公司；752型紫外可见分光光度计：上海光谱仪器有限公司。
1.1.3实验动物
清洁级Wistar大鼠60只，雄性，体重200±20g,由广东省医学实验动物中心提供，动物质量合格证明编号：No.44411600000901。实验动物使用许可证号：SYXK(粤)2013-0002。饲养环境：SPF级，单笼司养。
1.2实验方法
1.2.1动物分组、造模和给药
(1)动物分组：Wistar大鼠60只，先喂养一周以适应环境，随机法随机分为5组：阴性对照组，模型组、脂肪乳1系统组、脂肪乳2系统组、脂肪乳3系统组。
(2)衰老模型造模：除阴性对照组外，其余各组每天均颈部皮下注射D-半乳糖。D-半乳糖剂量为125mg/kg，皮下注射体积应控制在0.2mL/100g。D-半乳糖溶液配制：6.25g溶入100mL生理盐水中，可控制皮下注射量为0.2mL/100g。阴性对照组注射同体积生理盐水，连续注射8周。造模过程的时间中同时给予脂肪乳系统药物灌胃。
(3)给药：跟据芹菜籽油的成人每人每天的可食用量的较大剂量，通过相应换算得到大鼠的等效剂量约0.6g/kg，大鼠每日经口灌胃给药，给药8周，阴性对照组给予同体积的不含芹菜籽油的脂肪乳1系统。实验结束后，进行负重游泳测试和水迷宫测试，期间持续给药。
1.2.2负重游泳测试实验
负重游泳测试实验选用直径80cm高度100cm四周光滑的圆桶，负重物选用铅条，水温控制在28±2℃。将铅条绑在大鼠尾部根部，质量为大鼠体重的10％，从大鼠放入水中开始计时，当大鼠头部沉入水中10s以上时，实验结束，记录时间。负重游泳测试实验主要检测抗疲劳能力。
1.2.3 Morris水迷宫实验
Morris水迷宫是由不锈钢圆形水槽、隐藏在水面以下的平台以及一套图像自动采集和处理系统(摄像机、显示器和分析软件等)。水槽内部直径1.5m，高0.5m，水槽四周光滑，内壁涂成黑色。将圆形水槽分为4个象限(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ)，在4个象限水槽壁处各选一处标记作为入水点，大鼠每次面向水槽壁放入水中。平台位于第Ⅱ象限，水面高过平台2cm为宜。水槽上方安置连接显示系统的摄像机，同步记录大鼠运动轨迹。房间内光照恒定，无光线直接照射水槽。整个实验过程中，水槽周围参照物不能移动，同时实验者不得在动物视力范围内出现，并保持安静，无噪音影响。实验前1d，所有组别大鼠各自进行自由游泳，适应水槽环境。实验历时5d，分两个阶段进行：
(1)定位航行实验：每只大鼠进行4次训练，依此从第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ象限的入水点面向水槽壁入水。记录大鼠从入水到找到平台的时间，此为逃避潜伏期(Escape latency)。大鼠登上平台后，使其在平台停留15s。如果大鼠90s内无法找到平台，则将其牵引至平台，也使其在平台停留15s，潜伏期此时记为90s。每次训练结束后，使大鼠休息15s，4个象限训练的潜伏期的平均值记为当天的逃避潜伏期。总共训练4d，以第4天的逃避潜伏期作为最终的成绩，以此检测大鼠的学习能力。
(2)空间探索实验：第5天开始进行空间搜索实验，撤除水下平台，将大鼠从距原平台所处第Ⅱ象限最远的第Ⅳ象限入水点放入水中，记录大鼠90s内穿越原平台位置的次数以及有效时间比(即原平台所处象限游泳时间与总游泳时间的比值)，以次检测大鼠的记忆能力。
1.2.4生化指标测定
大鼠最后一天给药结束后禁食12h处死。断头处死，15mL EP管取血。血液室温放置30min后离心，3000r/min 4℃离心10min，取上层血清，进行超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的检测。大鼠断头处死，将大鼠头部置于冰盘上，迅速剥离大脑，用预冷的生理盐水冲洗，制10％的组织匀浆，3000r/min 4℃离心，取上清，进行总蛋白、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)的检测。
1.2.5统计学方法
实验数据以表示，使用SPSS17.0统计软件，多组间比较采用单因素方差分析，组间比较采用t检验，以P<0.05为差异具有统计学意义。
2实验结果
2.1负重游泳测试结果
负重游泳测试结果见表11，与模型组相比，阴性对照组负重游泳时间明显长于模型组(P＜0.05)，说明衰老模型造模成功；与模型组相比，脂肪乳1系统组、脂肪乳2系统组和脂肪乳3系统组游泳时间也明显长于模型组(P＜0.05)。结果表明，芹菜籽油脂肪乳口服制剂及复合芹菜籽油脂肪乳口服制剂均可增强衰老模型大鼠的抗疲劳能力，并且复合芹菜籽油脂肪乳口服制剂对衰老模型大鼠抗疲劳能力比芹菜籽油脂肪乳口服制剂明显增强。
表11 各组大鼠负重游泳测试结果 (n＝12)
组别 游泳时间/min
阴性对照组 18.03±0.38<sup>★</sup>
模型组 11.23±0.30
脂肪乳1系统组 15.92±0.27<sup>★</sup>
脂肪乳2系统组 17.58±0.41<sup>★</sup>
脂肪乳3系统组 17.79±0.39<sup>★</sup>
注：与模型组比较，★P＜0.05，★★P＜0.01。
2.2水迷宫结果
水迷宫结果见表12，与模型组相比，阴性对照组大鼠的逃避潜伏期明显少于模型组(P＜0.05)，有效时间比和穿越平台次数明显高于模型组(P＜0.05)；与模型组相比，脂肪乳口服制剂各组大鼠的逃避潜伏期也明显少于模型组(P＜0.05)，芹菜籽油脂肪乳口服制剂的有效时间比高于模型组(P＜0.05)，芹菜籽油脂肪乳口服制剂的穿越平台次数无明显差异，复合芹菜籽油脂肪乳口服制剂二组的有效时间比和穿越平台次数均明显高于模型组(P＜0.05)。上述结果表明，芹菜籽油脂肪乳口服制剂能增强衰老模型大鼠的学习记忆能力，而且复合芹菜籽油脂肪乳口服制剂对衰老模型大鼠的学习记忆能力的影响明显强于芹菜籽油脂肪乳口服制剂。
表12 各组大鼠Morris水迷宫实验结果 (n＝12)
组别 潜伏期/s 有效时间比 穿越平台次数
阴性对照组 33.67±7.61<sup>★</sup> 0.3619±0.1543<sup>★</sup> 3.64±2.33<sup>★</sup>
模型组 52.53±6.12 0.3043±0.2234 2.03±1.48
脂肪乳1系统组 40.23±4.81<sup>★</sup> 0.3577±0.2122<sup>★</sup> 2.71±1.83
脂肪乳2系统组 33.88±4.25<sup>★</sup> 0.3694±0.2007<sup>★</sup> 3.61±1.90<sup>★</sup>
脂肪乳3系统组 33.29±4.20<sup>★</sup> 0.3752±0.2231<sup>★</sup> 3.65±1.95<sup>★</sup>
注：与模型组比较，★P＜0.05，★★P＜0.01。
2.3生化指标结果
大鼠血清生化指标测定结果见表13，与模型组相比，阴性对照组SOD活力明显高于模型组(P＜0.05)，MDA含量明显低于模型组(P＜0.05)；与模型组相比，芹菜籽油脂肪乳口服制剂及复合芹菜籽油自脂肪乳口服制剂组的SOD活力明显高于模型组(P＜0.05)，MDA含量明显低于模型组(P＜0.05)，且复合芹菜籽油脂肪乳口服制剂组的活力强于芹菜籽油脂肪乳口服制剂组的活力。
表13 各组大鼠血清生化指标测定结果
组别 SOD/(U/mL) MDA/(nmol/mL)
阴性对照组 276.81±29.78<sup>★</sup> 4.83±0.34<sup>★</sup>
模型组 156.34±19.06 6.38±0.58
脂肪乳1系统组 263.85±45.82<sup>★</sup> 3.75±0.59<sup>★</sup>
脂肪乳2系统组 277.67±46.99<sup>★</sup> 2.99±0.46<sup>★</sup>
脂肪乳3系统组 278.69±23.80<sup>★</sup> 2.94±0.39<sup>★</sup>
注：与模型组比较，★P＜0.05，★★P＜0.01。
3结论
造模实验结果表明：本实验复制的D-半乳糖亚急性衰老模型是可信的；负重游泳实验结果显示：芹菜籽油脂肪乳口服制剂及复合芹菜籽油脂肪乳口服制剂均可增强衰老模型大鼠的抗疲劳能力，并且复合芹菜籽油脂肪乳口服制剂对衰老模型大鼠抗疲劳能力比芹菜籽油脂肪乳口服制剂明显增强；水迷宫实验结果表明：芹菜籽油及复合芹菜籽油脂肪乳口服制剂均能增强衰老模型大鼠的学习记忆能力，而且复合芹菜籽油脂肪乳口服制剂对衰老模型大鼠的学习记忆能力的影响明显强于芹菜籽油脂肪乳口服制剂；生化指标测定结果显示：芹菜籽油脂肪乳口服制剂及复合芹菜籽油脂肪乳口服制剂均可提高超氧化物歧化酶的活力，降低体内丙二醛的含量清除体内自由基从而达到保护机体的作用。
本实验结果还表明：不仅芹菜籽油脂肪乳口服制剂和复合芹菜籽油脂肪乳口服制剂均有较好地抗衰老的作用，而且芹菜籽油通过与牡丹籽油、紫苏籽油、杜仲籽油、亚麻籽油或美藤果油复合后，并经过自乳化制备形成复合芹菜籽油脂肪乳口服制剂，明显增强了芹菜籽油的抗衰老的作用，达到了较为理想的效果。

Claims (10)

1.一种具有抗衰老作用的复合芹菜籽油脂肪乳制剂，其特征在于，每1000ml水中含有如下成分：
芹菜籽油 0.5～50g
注射或食用植物籽油 50～250g
乳化剂 10～100g
增溶剂 10～80g
抗氧剂 0.1～0.3g
等渗调节剂 0～25g
调味剂 0～50g
香精 0～2g
防腐剂 0～1.5g；
调整pH值为7左右。
2.根据权利要求1所述的复合芹菜籽油脂肪乳制剂，其特征在于为注射用脂肪乳制剂，每1000ml水中含有如下成分：
芹菜籽油 0.5～25g
注射用植物籽油 60～100g
乳化剂 12～60g
增溶剂 12～50g
抗氧剂 0.1～0.2g
等渗调节剂 22g，
调整pH值到7左右。
3.根据权利要求1所述的复合芹菜籽油脂肪乳制剂，其特征在于为口服用脂肪乳制剂，每1000ml水中含有如下成分：
芹菜籽油 1～50g
食用植物籽油 70～120g
乳化剂 15～60g
增溶剂 12～50g
抗氧剂 0.2g
调味剂 0.2～10g
香精 0.5～2g
防腐剂 0.5g。
4.根据权利要求1所述的复合芹菜籽油脂肪乳制剂，其特征在于，所述注射或食用植物籽油组分为牡丹籽油、或和紫苏籽油、或和杜仲籽油、或和亚麻籽油、或和美藤果油、或和它们之间的任一组合。
5.根据权利要求1或4所述的复合芹菜籽油脂肪乳制剂，其特征在于所述注射或食用植物籽油组分中各复合组分满足如下重量比关系：
芹菜籽油：牡丹籽油=1：0.5～9.0或芹菜籽油：紫苏籽油=1:0.5～9.0或芹菜籽油：杜仲籽油=1:0.5～9.0或芹菜籽油：亚麻籽油=1:0.5～9.0或芹菜籽油：美藤果油=1:0.5～9.0；
或芹菜籽油：牡丹籽油: 紫苏籽油=1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：牡丹籽油: 杜仲籽油=1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：牡丹籽油: 亚麻籽油=1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：牡丹籽油: 美藤果油=1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：紫苏籽油: 杜仲籽油=1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：紫苏籽油: 亚麻籽油=1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：紫苏籽油: 美藤果油=1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：杜仲籽油: 亚麻籽油=1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：杜仲籽油: 美藤果油=1:0.5～4.5:0.5～4.5或芹菜籽油：亚麻籽油: 美藤果油=1:0.5～4.5:0.5～4.5；
或芹菜籽油:牡丹籽油:紫苏籽油:杜仲籽油=1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0或芹菜籽油:牡丹籽油:紫苏籽油:亚麻籽油=1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0或芹菜籽油:牡丹籽油:紫苏籽油:美藤果油=1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0或芹菜籽油:牡丹籽油:杜仲籽油:亚麻籽油=1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0或芹菜籽油:牡丹籽油:杜仲籽油:美藤果油=1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0或芹菜籽油:牡丹籽油:美藤果油:亚麻籽油=1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0或芹菜籽油:紫苏籽油:杜仲籽油:亚麻籽油=1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0或芹菜籽油:紫苏籽油:亚麻籽油:美藤果油=1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0或芹菜籽油:杜仲籽油: 亚麻籽油:美藤果油=1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0或芹菜籽油:紫苏籽油: 杜仲籽油:美藤果油=1:0.5～3.0:0.5～3.0:0.5～3.0；
或芹菜籽油:牡丹籽油:紫苏籽油:杜仲籽油:亚麻籽油=1:0.5～2.5:0.5～2.5:0.5～2.5:0.5～2.5或芹菜籽油:牡丹籽油:紫苏籽油:杜仲籽油:美藤果油=1:0.5～2.5:0.5～2.5:0.5～2.5:0.5～2.5；
或芹菜籽油:牡丹籽油:紫苏籽油:杜仲籽油:亚麻籽油:美藤果油=1:0.5～1.5:0.5～1.5:0.5～1.5:0.5～1.5:0.5～1.5。
6.根据权利要求1所述的复合芹菜籽油脂肪乳制剂，其特征在于，所述乳化剂为大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂和/或合成磷脂。
7.根据权利要求1所述的复合芹菜籽油脂肪乳制剂，其特征在于，所述增溶剂为乙醇、聚乙二醇、羟丙基β-环糊精或聚维酮；所述抗氧剂为维生素E或维生素C；所述等渗调节剂为注射用甘油；所述调味剂选自甜菊糖苷、阿斯巴甜、葡萄糖、果糖；所述香精为薄荷香精、柠檬香精、玫瑰香精、牛奶香精、薄荷香精、或其多种香精的组合物；所述防腐剂选用山梨酸钾；所述调整pH值选用的pH值调节剂为NaOH、Na2CO3或NaHCO3。
8.权利要求2所述注射用脂肪乳制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)在50～60℃水浴及氮气保护下，取注射用植物籽油，加入芹菜籽油组分混合均匀，加入部分乳化剂、抗氧剂，搅拌使其溶解并混合均匀，冷却至室温得油相；
(2)在50～60℃水浴及氮气保护下，将余下乳化剂、增溶剂与等渗调节剂混合后搅拌，溶解于部分注射用水中，必要时进行剪切搅拌，使其溶解并混合均匀，冷却至室温，得水相；
(3)在搅拌条件下，将油相缓慢地加入水相中，同时氮气保护下进行剪切搅拌15～60分钟, 然后调节pH至7.0左右，再加注射用水至100％，得乳白色初乳；
(4)将制备好的白色初乳，移入高压匀质机，用高压均质机进行均质8～12次，匀化后，微孔滤膜过滤，充氮、灌封、灭菌，即得所述含芹菜籽油的复合脂肪乳制剂的注射液剂型。
9.权利要求3所述口服用脂肪乳制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)在50～60℃水浴及氮气保护下，取口服用植物籽油，加入芹菜籽油组分混合均匀，加入部分乳化剂、抗氧剂，搅拌使其溶解并混合均匀，冷却至室温得油相；
(2)在50～60℃水浴及氮气保护下，将余下乳化剂、增溶剂、调味剂、防腐剂、香精混合后搅拌，溶解于部分注射用水中，必要时进行剪切搅拌，使其溶解并混合均匀，冷却至室温，得水相；
(3)在搅拌条件下，将油相缓慢地加入水相中，同时氮气保护下进行剪切搅拌15～60分钟, 然后调节pH至7.0左右，再加注射用水至100％，得乳白色初乳；
(4)将制备好的白色初乳，移入高压匀质机，用高压均质机进行均质5～8次，匀化后，微孔滤膜过滤，或充氮、灌封、灭菌，即得所述含芹菜籽油的复合脂肪乳制剂的口服液剂型。
10.权利要求8或9所述的制备方法，其特征在于，所述注射用脂肪乳制剂的乳剂粒径控制在0.02～1μm；所述口服用脂肪乳制剂的乳剂粒径控制在0.05～5μm。
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