CN109938010A

CN109938010A - 一种人脂肪间充质干细胞运输液及其制备方法

Info

Publication number: CN109938010A
Application number: CN201910216332.6A
Authority: CN
Inventors: 焦阳; 王铁; 朱迪·德瓦库玛; 杨丽华; 李靖
Original assignee: JIANGSU RE-STEM BIOTECHNOLOGY CO LTD
Current assignee: JIANGSU RE-STEM BIOTECHNOLOGY CO LTD
Priority date: 2019-03-20
Filing date: 2019-03-20
Publication date: 2019-06-28

Abstract

本发明公开了一种人脂肪间充质干细胞运输液及其制备方法。本发明提供的人脂肪间充质干细胞运输液，其配方按质量百分比计包括30～50％胎牛血清、10～20％DMSO、5～10％的0.2％肝素钙溶液、20～40％的0.2％海藻糖溶液。采用该运输液保存人脂肪间充质干细胞，可减慢细胞死亡速度，维持脂肪间充质干细胞增殖分化活性。

Description

一种人脂肪间充质干细胞运输液及其制备方法

技术领域

本发明涉及运输液领域，特别是涉及一种人脂肪间充质干细胞运输液及其制备方法。

背景技术

随着医学的发展，在临床应用及科研实践过程中，人们对保存离体器官、组织及细胞等认识不断提高，标准不断提升，在对一些待移植器官或组织的保存、运输等过程中，也对细胞生存的介质提出了更高的要求。既要确保器官、组织或细胞的生存能力，又要最大限度的保留其原有的生物学活性，同时还要防止其被细菌等污染，防止其死亡。各种器官、组织或细胞的属性不同，在保存运输等过程中其保存的介质也有不同要求。

间充质干细胞来源于中胚层，是一种非造血来源的多向分化潜能的干细胞。其特征在于免疫源性弱，不易与宿主产生免疫排斥反应，因此，在多学科多领域均成为理想的干细胞种子来源。在组织工程技术领域，已有搭载干细胞的组织工程材料修复病变组织，在小儿脑瘫、心肌梗死治疗临床应用中，也有通过注射间充质干细胞对坏死组织进行功能重建，并取得可喜成果的科研报道。同时，因为间充质干细胞还具有多向分化潜能，能够向多种体细胞进行分化，因此，也蕴藏了巨大的应用前景。脂肪间充质干细胞来源于脂肪组织，脂肪组织是人体非必须组织，获取方便，获取过程对人体产生的创伤较小，且其性能稳定，细胞增殖能力强，易大量分离培养。为配合其应用，本发明提出一种人脂肪间充质干细胞运输液及其制备方法。

目前细胞运输方式通常有两种，一种是在液氮低温下进行非细胞培养状态运输，另一种是常温培养基下运输。两种方法都存在一些弊端。其中液氮低温下进行非细胞培养状态运输成本高，冻存液成分不明确，细胞经过冻存其活性会下降，对后续实验造成一定的影响。而对贴壁细胞进行运输，每次运输细胞的数量较少，耗费培养基过多，一般不能采用空运模式，且容易发生运输液渗漏，导致细胞死亡。

发明内容

本发明主要解决目前技术存在的不足，提供一种人脂肪间充质干细胞运输液，其配方按质量百分比计包括30～50％胎牛血清、10～20％DMSO、5～10％的0.2％肝素钙溶液、20～40％的0.2％海藻糖溶液。

优选的，0.2％肝素钙溶液由肝素钙和PBS缓冲液混合而成，0.2％为质量体积百分含量。

优选的，0.2％海藻糖溶液由海藻糖和PBS缓冲液配制而成，0.2％为质量体积百分含量。

上诉干细胞常温运输液在人脂肪间充质干细胞运输中的应用。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步解说。

实施例1

一种人脂肪间充质干细胞运输液，包括按照如下组份：50％胎牛血清、20％DMSO、10％的0.2％肝素钙溶液、20％的0.2％海藻糖溶液。

实施例2

一种人脂肪间充质干细胞运输液，包括按照如下组份：40％胎牛血清、10％DMSO、10％的0.2％肝素钙溶液、40％的0.2％海藻糖溶液。

实施例3

一种人脂肪间充质干细胞运输液，包括按照如下组份：30％胎牛血清、20％DMSO、10％的0.2％肝素钙溶液、40％的0.2％海藻糖溶液。

实施例4

一种人脂肪间充质干细胞运输液，其配方按质量百分比计包括35％胎牛血清、20％DMSO、10％的0.2％肝素钙溶液、35％的0.2％海藻糖溶液。

实施例5

将人脂肪间充质干细胞细胞添加至实施例1～4配制的运输液中，接种浓度调整为5×10⁴个/ml，模拟运输过程72h后，观察细胞活率，成骨分化面积。

表1

	实施例1	实施例2	实施例3	实施例4
					细胞活率％	81.8	84.3	87.2	90.2
成骨分化面积％	30.5	40.2	44.0	45.6

Claims

1.本发明公开了一种人脂肪间充质干细胞运输液，成分包括：胎牛血清、DMSO、0.2％肝素钙溶液、0.2％海藻糖溶液。

2.根据权利要求1所述的人脂肪间充质干细胞运输液的制备方法，其特征在于，其配方按质量百分比计包括30～50％胎牛血清、10～20％DMSO、5～10％的0.2％肝素钙溶液、20～40％的0.2％海藻糖溶液。

3.根据权利要求1所述的人脂肪间充质干细胞运输液的制备方法，其特征在于，0.2％肝素钙溶液由肝素钙和PBS缓冲液混合而成，0.2％为质量体积百分含量。

4.根据权利要求1所述的人脂肪间充质干细胞运输液的制备方法，其特征在于，0.2％海藻糖溶液由海藻糖和PBS缓冲液配制而成，0.2％为质量体积百分含量。

5.根据权利要求2～4任一项所述的人脂肪间充质干细胞运输液的制备方法，其特征在于，均在常温无菌环境下操作，人脂肪间充质干细胞运输液也在常温下对干细胞进行运输。