CN109879936B - 一种利用微通道模块化反应装置合成棕榈酰六肽的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了利用微通道模块化反应装置合成棕榈酰六肽的方法，其具体步骤如下：将活化的Boc‑Pro‑OH和H‑Gly‑OPg分别用计量泵通入第一微结构反应器反应，继而通过第二微结构反应器水洗萃取除杂，收集有机相得到Boc‑Pro‑Gly‑OPg；将Boc‑Pro‑Gly‑OPg和TFA分别用计量泵通入第三微结构反应器反应，得到二肽H‑Pro‑Gly‑OPg。重复以上操作，依肽序分别将剩余氨基酸及棕榈酰接入，得到Polmitoyl‑Val‑Gly‑Val‑Ala‑Pro‑Gly‑OPg。最后脱除C端保护基，经液相色谱纯化制备得到棕榈酰六肽。该方法氨基酸原料、偶联试剂及有机溶剂消耗大大减少，成本大大降低，三废排放量少，工艺绿色环保，产率高，可适合大规模生产。

Description

一种利用微通道模块化反应装置合成棕榈酰六肽的方法
技术领域
本发明涉及多肽合成领域，具体涉及一种应用微通道模块化反应装置合成多肽的方法。
背景技术
在肽化学的早期发展阶段，肽合成反应一般都是在液相中进行的。遗憾的是，液相合成多肽很费力，并且需要具备在选择保护基和缩合方法上的策略和战略以及解决溶解性问题等诸多方面的知识。固相多肽合成方法自1963年由Merrifield提出以来，由于合成方便、迅速，成为多肽合成的首选方法。固相合成的优点主要表现在最初的反应物和产物都是连接在固相载体上，因此可以在一个反应容器中进行所有的反应，便于自动化操作，加入过量的反应物可以获得高产率的产物，同时产物很容易分离。但是，固相合成方法也有很多自身难以克服的限制：要求使用过量的氨基酸及偶联试剂以保证缩合反应完成，因而原子经济性极差；需要消耗大量的有机溶剂洗涤树脂；反应为非均相体系，难于监测和分析反映进程，并受实验误差的干扰；增长中的肽链聚集现象增加了合成的难度。
连续流微通道反应是近年来发展起来的绿色有机合成方法。微反应器的两大特征——比表面积大及连续操作方式，使得我们对反应工艺的精确控制成为可能。相对于传统的间歇反应工艺，微反应器具有高速混合、高效传热、反应物停留时间窄、重复性好、几乎无放大效应、便于实时监测反应进程、在线化学品量少从而达到高安全性能等优势。目前，连续流微通道反应器在有机小分子的合成中取得了很多应用，但应用于多肽合成的案例还很少见。
棕榈酰六肽，亦称为脂肽，是一种化妆品活性成分，主要用于高端美容抗皱产品。其氨基酸序列结构为Palmitoyl-Val-Gly-Val-Ala-Pro-Gly-OH，其结构式如式一所示。
Figure BDA0001991189590000021
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种棕榈酰六肽的连续流微通道反应方法，该方法原料和溶剂消耗少，成本低，操作方便，便于在线监测反应进程，可适合大规模生产。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：
一种利用微通道模块化反应装置合成棕榈酰六肽的方法，包括以下步骤：
(1)将活化后的Boc-Pro-OH、缩合试剂和有机溶剂三者形成的混合液，与H-Gly-OPg、DIEA和有机溶剂三者形成的混合液，分别同时泵入微通道模块化反应装置中的第一微结构反应器中进行氨基酸之间的缩合反应，15～40℃(优选30℃)下停留时间4～20min(优选10min)；将第一微结构反应器流出液，与碳酸钠水溶液分别同时泵入到微通道模块化反应装置中的第二微结构反应器中进行洗涤，将缩合反应中多余的活化试剂以及氨基酸在这一步通过水洗的方式除去，15～40℃(优选30℃)下停留时间8～12min(优选10min)，洗涤后的流出液在静置分液装置中静置分层，保留有机层；将有机层，与TFA分别同时泵入微通道模块化反应装置中的第三微结构反应器中进行脱Boc保护的反应，15～40℃(优选30℃)下停留时间5～15min(优选10min)，用HPLC监测脱Boc保护的程度；将第三微结构反应器的流出液用碳酸钠水溶液中和，中和后静置分液，保留有机层I；
(2)将活化后的Boc-Ala-OH替换步骤(1)中的Boc-Pro-OH，将步骤(1)得到的有机层I替换步骤(1)中所述的H-Gly-OPg、DIEA和有机溶剂三者形成的混合液(即有机层I不需要再与DIEA、有机溶剂混合)，进行步骤(1)相同的反应和处理过程(即反应时间，反应温度、物料比要求和步骤(1)相同)，得到有机层II；
(3)将活化后的Boc-Val-OH替换步骤(1)中的Boc-Pro-OH，将步骤(2)得到的有机层II替换步骤(1)中所述的H-Gly-OPg、DIEA和有机溶剂三者形成的混合液(即有机层II不需要再与DIEA、有机溶剂混合)，进行步骤(1)相同的反应和处理过程(即反应时间，反应温度、物料比要求和步骤(1)相同)，得到有机层III；
(4)将活化后的Boc-Gly-OH替换步骤(1)中的Boc-Pro-OH，将步骤(3)得到的有机层III替换步骤(1)中所述的H-Gly-OPg、DIEA和有机溶剂三者形成的混合液(即有机层III不需要再与DIEA、有机溶剂混合)，进行步骤(1)相同的反应和处理过程(即反应时间，反应温度、物料比要求和步骤(1)相同)，得到有机层IV；
(5)将活化后的Boc-Val-OH替换步骤(1)中的Boc-Pro-OH，将步骤(4)得到的有机层IV替换步骤(1)中所述的H-Gly-OPg、DIEA和有机溶剂三者形成的混合液(即有机层IV不需要再与DIEA、有机溶剂混合)，进行步骤(1)相同的反应和处理过程(即反应时间，反应温度、物料比要求和步骤(1)相同)，得到有机层V，即为H-Val-Gly-Val-Ala-Pro-Gly-OPg；
(6)将活化后的棕榈酸，与步骤(5)得到的有机层V分别同时泵入微通道模块化反应装置中的第一微结构反应器中进行缩合反应，15～40℃(优选30℃)下停留时间4～20min(优选10min)；将第一微结构反应器流出液，与碳酸钠水溶液分别同时泵入到微通道模块化反应装置中的第二微结构反应器中进行洗涤，15～40℃(优选30℃)下停留时间8～12min(优选10min)，得到全保护的棕榈酰六肽Polmitoyl-Val-Gly-Val-Ala-Pro-Gly-OPg；
(7)将步骤(6)得到的全保护的棕榈酰六肽Polmitoyl-Val-Gly-Val-Ala-Pro-Gly-OPg进行切割Pg得到粗肽，并将粗肽经液相色谱进行制备纯化，得到纯度99％的棕榈酰六肽。
其中，所述的微通道模块化反应装置包括第一原料储料罐、第二原料储料罐、第三原料储料罐、第四原料储料罐、第五原料储料罐、第六原料储料罐、第一微结构反应器、第二微结构反应器、第三微结构反应器、第一冷热一体机、第二冷热一体机、第三冷热一体机、第一温度显示器、第二温度显示器、第三温度显示器、以及静置分液装置；
其中，
第一原料储料罐和第二原料储料罐分别通过设置有计量泵的管道与第一微结构反应器串联，第一微结构反应器由第一冷热一体机控制温度并且由第一温度显示器显示温度；
第一微结构反应器出料口和第三原料储料罐分别通过管道与第二微结构反应器串联，第三原料储料罐与第二微结构反应器的连接管道上设置有计量泵，第二微结构反应器由第二冷热一体机控制温度并且由第二温度显示器显示温度；
第二微结构反应器出料口连接有静置分液装置，静置分液装置与第四原料储料罐相连；
第四原料储料罐与第五原料储料罐分别通过设置有计量泵的管道与第三微结构反应器串联，第三微结构反应器由第三冷热一体机控制温度并且由第三温度显示器显示温度；
第三微结构反应器出料口与第六原料储料罐相连；第六原料储料罐可替换第二原料储料罐通过管道与第一微结构反应器相连；
反应物料和产物通过精确且低脉动的计量泵实现输入和输出。
第一微结构反应器持液量优选为40ml，第二微结构反应器持液量优选为90ml，第三微结构反应器持液量优选为40ml。
步骤(1)中，所述的有机溶剂为乙酸乙酯、二氯甲烷、四氢呋喃、甲苯、乙腈、DMF、二氯乙烷中的任意一种或几种任意比例的混合物，优选二氯甲烷；所述的缩合试剂为HOBt、DMAP、EDC·HCl、DIC、DCC、PyBop、CDI或HATU中的任意一种或几种的组合，优选的HOBt与EDC·HCl按摩尔比0.5-2：1的组合，最佳摩尔比为1：1；所述的碳酸钠水溶液，其碳酸钠浓度优选为10wt％。
步骤(1)中，Boc-Pro-OH、缩合试剂和DIEA的摩尔比优选为1：1.2：2；Boc-Pro-OH与H-Gly-OPg的摩尔比控制为1.2：1。
步骤(1)中，活化后的Boc-Pro-OH与缩合试剂、有机胺和有机溶剂形成的混合液泵入第一微结构反应器的流速，与H-Gly-OPg和有机溶剂形成的混合液泵入第一微结构反应器的流速相同，分别为1.5～2.5ml/min；碳酸钠水溶液泵入第二微结构反应器的流速为4～6ml/min；有机层泵入第三微结构反应器的流速是3～5ml/min，TFA泵入第三微结构反应器的流速是0.5～1.5ml/min，控制有机层和TFA的流速比优选为4:1。
步骤(1)中，将第三微结构反应器的流出液用碳酸钠水溶液中和，是将碳酸钠水溶液缓慢加入到第三微结构反应器的流出液中会有大量CO2放出，直至无气体放出，即TFA完全被中和。
步骤(1)中，所述的活化后的Boc-Pro-OH、活化后的Boc-Ala-OH、活化后的Boc-Val-OH、活化后的Boc-Gly-OH、活化后的Boc-Val-OH、活化后的棕榈酸，是将Boc-Pro-OH、Boc-Ala-OH、Boc-Val-OH、Boc-Gly-OH、Boc-Val-OH、棕榈酸分别在有机溶剂中活化30min得到，所述的有机溶剂是乙酸乙酯、二氯甲烷、四氢呋喃、甲苯、乙腈、DMF、二氯乙烷中的任意一种或几种任意比例的混合物，优选二氯甲烷。
当实施步骤(2)～(5)时，保证活化后的带保护基的单个氨基酸微过量即可，优选活化后的带保护基的单个氨基酸与有机层中已缩合形成的肽链的摩尔比为1.2：1。
步骤(6)中，活化后的棕榈酸泵入第一微结构反应器的流速为1.5～2.5ml/min，有机层V泵入第一微结构反应器的流速为1.5～2.5ml/min，控制棕榈酸与H-Val-Gly-Val-Ala-Pro-Gly-OPg的摩尔比为优选为1：1；碳酸钠水溶液泵入第二微结构反应器中的流速为4～6ml/min；所述的碳酸钠水溶液，其碳酸钠浓度优选为10wt％。
步骤(7)中，切割方式依据Pg的选择调整，包括酸脱或者碱脱；Pg为Bzl、Me或TMES保护基；当Pg为Bzl保护基(C端保护基)时，用钯碳加氢脱除后过滤；当Pg为Me保护基，用4mol/L的氢氧化钠皂化脱除；当Pg为TMES保护基(C端保护基)，用四丁基氟化铵·三水脱除。上述切割方式皆为本领域技术人员公知的技术手段。
步骤(7)中，并将粗肽经液相色谱进行制备纯化，色谱条件为，流动相分别选用A为0.1％v/v AcOH/H2O和B为0.1％v/vAcOH/MeCN，制备柱选用C18，20mmID×250mm，设置制备梯度为0min-5min-125min-140min的时间对应B％含量为5％-20％-60％-95％，B％含量的增长过程为线性增长。
有益效果：与现有技术相比，本发明具有如下优点：
(1)本发明使传热、传质效率提高，缩短了偶联反应时间；
(2)本发明属于多肽液相合成在连续流中的应用，与传统固相相比氨基酸、偶联试剂以及溶剂的消耗量大大减少，降低了成本；
(3)本发明是采用连续流设备来进行多肽合成，通过调节流速、温度来提高偶联效率，操作简单，重复率高，适合于大规模生产；
(4)本发明是采用连续流设备来进行多肽合成，摒弃了传统的釜式反应，减少了生产所需的空间；
(5)本发明的连续流设备是选用碳化硅材质，耐腐蚀，适用于用TFA脱保护，安全性更高。
本发明采用的部分缩略语相对应的化学名称如下：
Boc：叔丁氧羰基
Pro：脯氨酸
Gly：甘氨酸
Pg：保护基
Polmitoyl：棕榈酸
DIEA：N，N-二异丙基乙胺
Val：缬氨酸
Ala：丙氨酸
Na2CO3：碳酸钠
HPLC：高效液相色谱
TFA：三氟乙酸
DMF：N,N-二甲基甲酰胺
EDC.HCl：1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐
DIC：N，N’-二异丙基碳二亚胺
DCC：N，N’-二环己基碳二亚胺
PyBop：六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷
CDI：N,N'-羰基二咪唑
HATU：2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸盐
HOBt：1-羟基苯并三唑
Bzl：苄氧羰基
Me：甲基
TMES-OH：2-(三甲硅基)乙醇
H2O:水
AcOH:醋酸
MeCN:乙腈
DMAP:4-二甲氨基吡啶
附图说明
图1为本发明实施例所用的微通道模块化反应装置合成棕榈酰六肽的结构示意图。
图2为棕榈酰六肽纯化后的液相谱图。
图3为棕榈酰六肽的Mass谱图。
具体实施方式
根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的内容仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。
以下实施例所适用的微通道模块化反应装置如图1所示，包括第一原料储料罐、第二原料储料罐、第三原料储料罐、第四原料储料罐、第五原料储料罐、第六原料储料罐、第一微结构反应器、第二微结构反应器、第三微结构反应器、第一冷热一体机、第二冷热一体机、第三冷热一体机、第一温度显示器、第二温度显示器、第三温度显示器、以及静置分液装置；
其中，
第一原料储料罐和第二原料储料罐分别通过设置有计量泵的管道与第一微结构反应器串联，第一微结构反应器由第一冷热一体机控制温度并且由第一温度显示器显示温度；
第一微结构反应器出料口和第三原料储料罐分别通过管道与第二微结构反应器串联，第三原料储料罐与第二微结构反应器的连接管道上设置有计量泵，第二微结构反应器由第二冷热一体机控制温度并且由第二温度显示器显示温度；
第二微结构反应器出料口连接有静置分液装置，静置分液装置与第四原料储料罐相连；
第四原料储料罐与第五原料储料罐分别通过设置有计量泵的管道与第三微结构反应器串联，第三微结构反应器由第三冷热一体机控制温度并且由第三温度显示器显示温度；
第三微结构反应器出料口与第六原料储料罐相连；第六原料储料罐可替换第二原料储料罐通过管道与第一微结构反应器相连；
反应物料和产物通过精确且低脉动的计量泵实现输入和输出。
其中，物料1、物料2、物料3、物料4、物料5以及物料6分别对应第一原料储料罐、第二原料储料罐、第三原料储料罐、第四原料储料罐、第五原料储料罐以及第六原料储料罐。
第一微结构反应器持液量40ml，第二微结构反应器持液量90ml，第三微结构反应器持液量40ml。
微反应器型号SiliconCarbideMicroreactor，购自于山东金德新材料有限公司。
冷热一体机型号VCO-HL30，购自于昆山纬亿塑胶机械有限公司。
泵的型号MP2002C，购自于上海三为科学仪器有限公司。
温度显示器与微反应器一同购自与山东金德新材料有限公司。
实施例1
a.Boc-Pro-Gly-OBzl的制备过程
配制物料1：将Boc-Pro-OH(5g，23.22mmol)、EDC.HCl(5.34g，27.87mmol)以及HOBt(3.765g，27.87mmol)溶于250ml二氯甲烷中，Boc-Pro-OH的浓度为0.09289mmol/ml；
配制物料2：将H-Gly-OBzl.HCl(4.075g，19.35mmol)和DIEA(1.000g，38.7mmol)溶于250ml二氯甲烷中，H-Gly-OBzl的浓度为0.0774mmol/ml。物料1与物料2的进料流速通过计量泵来调节，流速相等为2ml/min。缩合反应在第一微结构反应器中进行，反应时间10min，温度30℃，得到二肽Boc-Pro-Gly-OBzl。
b.Boc-Pro-Gly-OBzl洗涤的过程
物料3：10wt％Na2CO3水溶液。
物料3的进料流速为5ml/min，通过计量泵来调节，在第二微结构反应器中进行洗涤，洗涤10min，用分液漏斗在出料口接液，静置分层，用HPLC监测有机相是否洗涤除杂感觉，若还有杂质可再洗涤一轮。
c.Boc-Pro-Gly-OBzl脱Boc保护的过程
将洗涤后的二肽Boc-Pro-Gly-OBzl(物料4)与TFA(物料5)通过计量泵调节流速分别为4ml/min、1ml/min，10min的时间在第三微结构反应器中脱除Boc，得到H-Pro-Gly-OBzl。
d.脱保护后的后处理过程
在出料口用烧杯收集脱Boc后的反应液，用10wt％Na2CO3水溶液中和TFA，放出大量的CO2气体，直至无气体放出，静置分层，保留有机层，HPLC监测脱除效果。
e.通过微通道模块化反应装置，类似于a～d处理方式依次偶联上Boc-Ala-OH、Boc-Val-OH、Boc-Gly-OH以及Boc-Val-OH，每偶联一个氨基酸之后都要进行洗涤、脱保护以及后处理的过程。配制Boc-Ala-OH、Boc-Val-OH以及Boc-Gly-OH的活化液的浓度均是0.09289mmol/ml，溶剂二氯甲烷均控制在250ml，得到H-Val-Gly-Val-Ala-Pro-Gly-OBzl。
f.Polmitoyl-Val-Gly-Val-Ala-Pro-Gly-OBzl的制备过程
配制物料6：将棕榈酸(4.963g，19.35mmol)，浓度为0.0774mmol/ml，与物料7(H-Val-Gly-Val-Ala-Pro-Gly-OBzl)通过计量泵等流速2ml/min进入第一微结构反应器中进行偶联反应，反应时间10min，温度30℃。
g.Polmitoyl-Val-Gly-Val-Ala-Pro-Gly-OBzl的洗涤过程
参考b洗涤的过程。
h.Polmitoyl-Val-Gly-Val-Ala-Pro-Gly-OBzl的脱Bzl保护过程
脱保护的方式为钯碳加氢氢解，选用4.118g5％钯碳加氢催化剂，30℃下加氢反应2h。
i.棕榈酰六肽制备纯化的过程
色谱条件为，流动相分别选用A为0.1％v/v AcOH/H2O和B为0.1％v/vAcOH/MeCN，制备柱选用C18，20mmID×250mm，设置制备梯度为0min-5min-125min-140min的时间对应B％含量为5％-20％-60％-95％，B％含量的增长过程为线性增长。
本实施例棕榈酰六肽总收率62.7％，纯度99％。棕榈酰六肽的分子量MW＝736，[MW+H]+＝737，[MW+Na]+＝759，[MW+K]+＝775，[MW+2H]2+＝369，[MW+Na+H]2+＝380，[MW+K+H]2+＝388。
实施例2
a.Boc-Gly-OTMES的制备过程
将Boc-Gly-OH(8g，45.66mmol)、TMES-OH(6.479g，54.79mmol)、EDC.HCl(10.50g，54.79mmol)和DMAP(1.114g，9.132mmol)溶于1L的二氯甲烷中，30℃反应3小时，反应结束后倒入3L分液漏斗中，用5％的碳酸钾溶液洗涤3遍，干燥、浓缩后柱层析的方式进行纯化，TLC展开条件为PE：EA＝1：4，旋干得到固体10.12g，收率80.45％。
b.Boc-Gly-OTMES脱Boc保护的过程
将8gBoc-Gly-OTMES加入到已配好的500ml20％TFA/二氯甲烷中，30℃反应2h。反应结束后，用10％碳酸钠水溶液中和TFA，直至无气泡放出，水相呈碱性，手机有机层，干燥、旋干后得到4.63g，收率91.14％。
c.Boc-Pro-Gly-OTMES的制备过程
配制物料2.1：将Boc-Pro-OH(5.89g，27.36mmol)、EDC.HCl(6.293g，32.83mmol)以及HOBt(4.435g，32.83mmol)溶于250ml二氯甲烷中，浓度为0.1094mmol/ml；
配制物料2.2：将H-Gly-OTMES(4g，22.80mmol)和DIEA(1.178g，45.6mmol)溶于250ml二氯甲烷中，浓度为0.0912mmol/ml。物料2.1与物料2.2的进料流速通过计量泵来调节，流速相等为2ml/min。缩合反应在第一微结构反应器中进行，反应时间10min，温度30℃，得到二肽Boc-Pro-Gly-OTMES。
d.Boc-Pro-Gly-OTMES洗涤的过程
物料2.3：10％Na2CO3水溶液。物料2.3的进料流速为5ml/min，通过计量泵来调节，在第二微结构反应器中进行洗涤，洗涤10min，用分液漏斗在出料口接液，静置分层，用HPLC监测有机相是否洗涤除杂感觉，若还有杂质可再洗涤一轮。
e.Boc-Pro-Gly-OTMES脱Boc保护的过程
将洗涤后的二肽Boc-Pro-Gly-OTMES(物料2.4)与TFA(物料2.5)通过计量泵调节流速分别为4ml/min、1ml/min，10min的时间在第三微结构反应器中脱除Boc，得到H-Pro-Gly-OTMES。
f.脱保护后的后处理过程
在出料口用烧杯收集脱Boc后的反应液，用10％Na2CO3水溶液中和TFA，放出大量的CO2气体，直至无气体放出，静置分层，保留有机层，HPLC监测脱除效果。
g.通过微通道模块化反应装置，类似于c～f处理方式依次偶联上Boc-Ala-OH、Boc-Val-OH、Boc-Gly-OH以及Boc-Val-OH，每偶联一个氨基酸之后都要进行洗涤、脱保护以及后处理的过程。配制Boc-Ala-OH、Boc-Val-OH以及Boc-Gly-OH的活化液的浓度均是0.1094mmol/ml，溶剂二氯甲烷均控制在250ml，得到H-Val-Gly-Val-Ala-Pro-Gly-OBzl。
h.Polmitoyl-Val-Gly-Val-Ala-Pro-Gly-OTMES的制备过程
配制物料2.6：将棕榈酸(5.846g，22.80mmol)，浓度为0.0912mmol/ml，与物料2.7(H-Val-Gly-Val-Ala-Pro-Gly-OTMES)通过计量泵等流速2ml/min进入第一微结构反应器中进行偶联反应，反应时间10min，温度30℃。
i.Polmitoyl-Val-Gly-Val-Ala-Pro-Gly-OTMES的洗涤过程
参考d洗涤的过程。
g.Polmitoyl-Val-Gly-Val-Ala-Pro-Gly-OTMES的脱TMES保护过程
旋干DCM，以500ml四氢呋喃为溶剂，称取四丁基氟化铵.三水(35.97g，114mmol)，室温下搅拌反应13h，液相监测。旋干四氢呋喃，以二氯甲烷为溶剂，食盐水水洗。
k.棕榈酰六肽制备纯化的过程
色谱条件为，流动相分别选用A为0.1％v/v AcOH/H2O和B为0.1％v/vAcOH/MeCN，制备柱选用C18，20mmID×250mm，设置制备梯度为0min-5min-125min-140min的时间对应B％含量为5％-20％-60％-95％，B％含量的增长过程为线性增长。
本实施例棕榈酰六肽总收率(步骤c～k)72.1％，纯度99％。棕榈酰六肽的分子量MW＝736，[MW+H]+＝737，[MW+Na]+＝759，[MW+K]+＝775，[MW+2H]2+＝369，[MW+Na+H]2+＝380，[MW+K+H]2+＝388。

Claims (4)

1.一种利用微通道模块化反应装置合成棕榈酰六肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）将活化后的Boc-Pro-OH、缩合试剂和有机溶剂三者形成的混合液，与H-Gly-OPg、DIEA和有机溶剂三者形成的混合液，分别同时泵入微通道模块化反应装置中的第一微结构反应器中进行氨基酸之间的缩合反应，15~40°C下停留时间4~20min；将第一微结构反应器流出液，与碳酸钠水溶液分别同时泵入到微通道模块化反应装置中的第二微结构反应器中进行洗涤，15~40°C下停留时间8~12min，洗涤后的流出液在静置分液装置中静置分层，保留有机层；将有机层，与TFA分别同时泵入微通道模块化反应装置中的第三微结构反应器中进行脱Boc保护的反应，15~40°C下停留时间5~15min；将第三微结构反应器的流出液用碳酸钠水溶液中和，中和后静置分液，保留有机层I；
（2）将活化后的Boc-Ala-OH替换步骤（1）中的Boc-Pro-OH，将步骤（1）得到的有机层I替换步骤（1）中所述的H-Gly-OPg、DIEA和有机溶剂三者形成的混合液，进行步骤（1）相同的反应和处理过程，得到有机层II；
（3）将活化后的Boc-Val-OH替换步骤（1）中的Boc-Pro-OH，将步骤（2）得到的有机层II替换步骤（1）中所述的H-Gly-OPg、DIEA和有机溶剂三者形成的混合液，进行步骤（1）相同的反应和处理过程，得到有机层III；
（4）将活化后的Boc-Gly-OH替换步骤（1）中的Boc-Pro-OH，将步骤（3）得到的有机层III替换步骤（1）中所述的H-Gly-OPg、DIEA和有机溶剂三者形成的混合液，进行步骤（1）相同的反应和处理过程，得到有机层IV；
（5）将活化后的Boc-Val-OH替换步骤（1）中的Boc-Pro-OH，将步骤（4）得到的有机层IV替换步骤（1）中所述的H-Gly-OPg、DIEA和有机溶剂三者形成的混合液，进行步骤（1）相同的反应和处理过程，得到有机层V，即为H-Val-Gly-Val-Ala-Pro-Gly-OPg；
（6）将活化后的棕榈酸，与步骤（5）得到的有机层V分别同时泵入微通道模块化反应装置中的第一微结构反应器中进行缩合反应，15~40°C下停留时间4~20min；将第一微结构反应器流出液，与碳酸钠水溶液分别同时泵入到微通道模块化反应装置中的第二微结构反应器中进行洗涤，15~40°C下停留时间8~12min，得到全保护的棕榈酰六肽Polmitoyl-Val-Gly-Val-Ala-Pro-Gly-OPg；
（7）将步骤（6）得到的全保护的棕榈酰六肽Polmitoyl-Val-Gly-Val-Ala-Pro-Gly-OPg进行切割Pg得到粗肽，并将粗肽经液相色谱进行制备纯化，得到棕榈酰六肽；
步骤（1）中，Boc-Pro-OH、缩合试剂和DIEA的摩尔比为1：1.2：1.67；Boc-Pro-OH与H-Gly-OPg的摩尔比控制为1.2：1；
步骤（1）中，活化后的Boc-Pro-OH与缩合试剂、有机胺和有机溶剂形成的混合液泵入第一微结构反应器的流速，与H-Gly-OPg和有机溶剂形成的混合液泵入第一微结构反应器的流速相同，分别为1.5~2.5ml/min；碳酸钠水溶液泵入第二微结构反应器的流速为4~6ml/min；有机层泵入第三微结构反应器的流速是3~5ml/min，TFA泵入第三微结构反应器的流速是0.5~1.5ml/min，控制有机层和TFA的流速比为4:1；
步骤（1）中，所述的活化后的Boc-Pro-OH、活化后的Boc-Ala-OH、活化后的Boc-Val-OH、活化后的Boc-Gly-OH、活化后的Boc-Val-OH、活化后的棕榈酸，是将Boc-Pro-OH、Boc-Ala-OH、Boc-Val-OH、Boc-Gly-OH、Boc-Val-OH、棕榈酸分别在有机溶剂中活化30min得到，所述的有机溶剂是乙酸乙酯、二氯甲烷、四氢呋喃、甲苯、乙腈、DMF、二氯乙烷中的任意一种或几种任意比例的混合物；
步骤（6）中，活化后的棕榈酸泵入第一微结构反应器的流速为1.5~2.5ml/min，有机层V泵入第一微结构反应器的流速为1.5~2.5ml/min，控制棕榈酸与H-Val-Gly-Val-Ala-Pro-Gly-OPg的摩尔比为1：1；碳酸钠水溶液泵入第二微结构反应器中的流速为4~6ml/min；
步骤（7）中，切割方式依据Pg的选择调整，包括酸脱或者碱脱；Pg为Bzl、Me或TMES保护基；当Pg为Bzl保护基时，用钯碳加氢脱除后过滤；当Pg为Me保护基，用4mol/L的氢氧化钠皂化脱除；当Pg为TMES保护基，用四丁基氟化铵·三水脱除；
步骤（7）中，并将粗肽经液相色谱进行制备纯化，色谱条件为，流动相分别选用A为0.1%v/v AcOH/H2O和B为0.1% v/vAcOH/MeCN，制备柱选用C18，20mmID×250mm，设置制备梯度为0min-5min-125min-140min 的时间对应B%含量为5%-20%-60%-95%，B%含量的增长过程为线性增长。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的微通道模块化反应装置包括第一原料储料罐、第二原料储料罐、第三原料储料罐、第四原料储料罐、第五原料储料罐、第六原料储料罐、第一微结构反应器、第二微结构反应器、第三微结构反应器、第一冷热一体机、第二冷热一体机、第三冷热一体机、第一温度显示器、第二温度显示器、第三温度显示器、以及静置分液装置；
其中，
第一原料储料罐和第二原料储料罐分别通过设置有计量泵的管道与第一微结构反应器串联，第一微结构反应器由第一冷热一体机控制温度并且由第一温度显示器显示温度；
第一微结构反应器出料口和第三原料储料罐分别通过管道与第二微结构反应器串联，第三原料储料罐与第二微结构反应器的连接管道上设置有计量泵，第二微结构反应器由第二冷热一体机控制温度并且由第二温度显示器显示温度；
第二微结构反应器出料口连接有静置分液装置，静置分液装置与第四原料储料罐相连；
第四原料储料罐与第五原料储料罐分别通过设置有计量泵的管道与第三微结构反应器串联，第三微结构反应器由第三冷热一体机控制温度并且由第三温度显示器显示温度；
第三微结构反应器出料口与第六原料储料罐相连；
反应物料和产物通过精确且低脉动的计量泵实现输入和输出。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的有机溶剂为乙酸乙酯、二氯甲烷、四氢呋喃、甲苯、乙腈、DMF、二氯乙烷中的任意一种或几种任意比例的混合物；所述的缩合试剂为HOBt、DMAP、EDC·HCl、DIC、DCC、PyBop、CDI或HATU中的任意一种或几种的组合；所述的碳酸钠水溶液，其碳酸钠浓度为10wt%。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中，将第三微结构反应器的流出液用碳酸钠水溶液中和，是将碳酸钠水溶液缓慢加入到第三微结构反应器的流出液中直至无气体放出，即TFA完全被中和。
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