CN109824676A

CN109824676A - 一种托法替布有关物质的制备方法与应用

Info

Publication number: CN109824676A
Application number: CN201910330392.0A
Authority: CN
Inventors: 曾伟强; 贺境杰; 高玉贺; 程雪清; 王衡新; 宋志林
Original assignee: Tiandi Hengyi Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Tiandi Hengyi Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2019-04-23
Filing date: 2019-04-23
Publication date: 2019-05-31

Abstract

本发明托法替布有关物质的制备方法与应用，提供了一种托法替布有关物质式Ⅲ所示的化合物的制备方法，该方法操作简单，产物纯度高，能快速地获取高纯度的托法替布有关物质对照品，有利于托法替布的质量研究、杂质控制，从而提高托法替布的质量控制水平。

Description

一种托法替布有关物质的制备方法与应用

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种托法替布有关物质的制备方法与应用。

背景技术

托法替布（Tofacitinib）是由辉瑞公司开发的一种Janus激酶（JAK）抑制剂，用于治疗对甲氨蝶呤（MTX）应答不佳或不能耐受的中度至严重活动性类风湿关节炎成年患者。临床上使用的可为托法替布或枸橼酸托法替布。国内外已有枸橼酸托法替布片上市。

枸橼酸托法替布（Tofacitinib citrate）化学名为3-[( 3R,4R)-4-甲基-3-[甲基-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基］哌啶-1-基]-3-氧代-丙腈-枸橼酸盐，其结构式如式Ⅰ所示。

Ⅰ

枸橼酸托法替布的原研企业——辉瑞公司在中国申请了有关枸橼酸托法替布制备方法的发明专利，其专利申请号为CN200680027901.3、发明名称为“吡咯并[2,3-D]嘧啶衍生物、其中间体和合成方法”。该申请公开了一种枸橼酸托法替布制备方法：顺式-1-苄基-3-甲氨基-4-甲基哌啶盐酸盐经L-二对甲苯甲酰酒石酸(L-DTTA)拆分得到( 3R,4R) -1-苄基-3-甲氨基-4-甲基哌啶-L-二对甲苯甲酰酒石酸盐（化合物2，酒石酸盐），再与2,4-二氯-7H-吡咯并［2,3-d］嘧啶发生亲核取代反应得到2-氯-4-{(甲基)[( 3R,4R) -1-苄基-4-甲基哌啶-3-基]氨基}-7H-吡咯并［2,3-d］嘧啶，继而在钯炭[Pd(OH)2/C]催化下与氢气反应，脱掉苄基和氯，生成关键中间体(3R,4R)-甲基-(4-甲基-哌啶-3-基)-(7H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)胺。其后，该中间体与氰乙酸乙酯发生亲核反应生成托法替布，再与枸橼酸成盐即得到枸橼酸托法替布。最后，粗品枸橼酸托法替布经乙醇/水混合溶剂重结晶得到精品枸橼酸托法替布。所述反应式如式Ⅱ所示。

式Ⅱ

有关物质是指在制备过程中可能出现的杂质。任何影响药物纯度的物质统称为杂质。杂质的研究是药品研发的一项重要内容。杂质研究对建立检测方法、分析杂质含量、并确定合理的杂质限度起到至关重要的作用。

降解杂质是指药品在特定温度、湿度、光照和空气的条件下发生水解、氧化、分解、异构化、聚合等化学反应生成的杂质。发明人经研究发现，托法替布在碱性条件下水解主要生成杂质(3R,4R)-甲基-(4-甲基-哌啶-3-基)-(7H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)胺，即反应式Ⅱ中的托法替布中间体4。但托法替布在酸性或碱性条件下发生水解或醇解，还会生成其他降解杂质。这些降解杂质会影响枸橼酸托法替布的质量。

发明内容

为克服现有技术的不足，本发明提供托法替布有关物质及其制备方法与应用。

本发明采用的技术方案是：

一种托法替布有关物质如式Ⅲ所示的化合物的制备方法，所述式Ⅲ的化学名称为3-[(3R,4R)-4-甲基-3-[甲基-（7H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基）]哌啶-1-基]-3-氧代-1-丙酸乙酯；

式Ⅲ

所述制备方法为基于式Ⅶ的合成路线；

式Ⅶ。

进一步，所述方法具体包括以下步骤：

步骤一：将丙二酸单乙酯与酰氯和有机碱在有机溶剂中进行搅拌反应；

步骤二：向步骤一反应完成后所得混合物中加入(3R,4R)-甲基-(4-甲基-哌啶-3-基)-(7H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)胺，继续搅拌反应，TLC监控反应完后，过滤，经萃取、洗涤、浓缩步骤后得杂质3-[(3R,4R)-4-甲基-3-[甲基-（7H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基）]哌啶-1-基]-3-氧代-1-丙酸乙酯式Ⅲ粗品；

步骤三：将步骤二所得粗品产物经柱层析纯化得到式Ⅲ化合物。

进一步，所述步骤一中的有机碱选自三乙胺、N-甲基吗啉或吡啶中的任一种或其混合物。

优选的，所述有机碱为三乙胺。

进一步，所述步骤一中的酰氯为特戊酰氯、草酰氯或乙酰氯中的任一种或其混合物。

优选的，所述酰氯为特戊酰氯。

进一步，所述有机溶剂为二氯甲烷、三氯甲烷中的任一种或其混合物。

优选的，所述有机溶剂为二氯甲烷。

进一步，本发明还提出了按上述制备方法得到的化合物式Ⅲ在托法替布或枸橼酸托法替布的原料或制剂的质量控制中的应用。

本发明所具有的有益效果是：在托法替布或枸橼酸托法替布原料药及其制剂的开发过程中，发明人发现了托法替布在酸性或碱性条件下发生水解或醇解生成的一种杂质式Ⅲ；本发明提供了一种杂质式Ⅲ的新的制备方法，该方法操作简单，产物纯度高，能快速地获取高纯度的托法替布有关物质对照品，有利于托法替布的质量研究、杂质控制，从而提高托法替布的质量控制水平。

附图说明

附图1为本发明所得托法替布有关物式Ⅲ所示化合物的核磁共振氢谱图；

附图2为本发明所得托法替布有关物式Ⅲ所示化合物的核磁共振碳谱图；

附图3为本发明所得托法替布有关物式Ⅲ所示化合物的质谱图；

附图4为本发明所得托法替布有关物式Ⅲ所示化合物的高效液相色谱图。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步说明，但不应视为对本发明的限制。

实施例1

3-[(3R,4R)-4-甲基-3-[甲基-（7H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基）]哌啶-1-基]-3-氧代-1-丙酸乙酯的制备方法如下：

反应瓶中装入丙二酸单乙酯3.41g、三乙胺 2.47g、二氯甲烷 25mL和适量干燥剂无水硫酸钠，体系在氩气环境下降温至-5～0℃，向体系中滴加特戊酰氯2.75g，滴加完后体系于0～5℃搅拌反应4小时后在-5～5℃范围内向体系中滴加(3R,4R)-甲基-(4-甲基-哌啶-3-基)-(7H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)胺2.0g的二氯甲烷 15mL溶液，滴加完后体系于5～15℃搅拌反应2小时后HPLC监测反应原料消失，过滤，滤液加入二氯甲烷50mL和饱和碳酸氢钠溶液50mL，于常温下搅拌0.5小时，分液，水相用二氯甲烷 50mL萃取一次，合并有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩得3-[(3R,4R)-4-甲基-3-[甲基-（7H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基）]哌啶-1-基]-3-氧代-1-丙酸乙酯粗品 2.6g，经柱层析（乙酸乙酯/正庚烷=2/1-1/0）纯化得到307mg化合物3-[(3R,4R)-4-甲基-3-[甲基-（7H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基）]哌啶-1-基]-3-氧代-1-丙酸乙酯，计算其纯度为98.26%，对其进行检测得数据如下：

氢谱检测：

如图1所示，¹HNMR(DMSO-d ₆ 400MHz) ：11.63 (s，1H)，8.10（d，1H），7.13（s，1H）, 6.55(s，1H)，4.87（s，1H），4.11（dd，1H），4.00（dd，1H），3.88（m，1H），3.72（m，1H），3.66（dd，2H），3.46（m，2H），3.27（s，3H），2.37（m，1H），1.78（m，1H），1.59（m，1H），1.21（t，2H），1.11（t，1H），1.00（d，3H）。

碳谱检测；

如图2所示，13C-NMR(DMSO-d6, 100Hz) ，δ(ppm)：13.8，14.0，31.1，31.4，33.9，40.8，41.6，42.9，45.5，60.6，101.7，102.2，120.7，150.5，151.7，157.0，164.3，167.8。

质谱检测；

如图3所示，MS：(m/z)＝360.3[M+H]⁺。

液相检测；

将实施例1制定的固体样品进行HPLC分析，通过峰面积计算其纯度，采用本方法合成的式Ⅲ杂质具有95%以上的纯度，完全符合标准品纯度要求，可作为标准品使用，以下即为实施例1制备得到的式Ⅲ化合物在托法替布分析检测中的应用。

检测方法：采用反相液相色谱柱（以C18、C8等键合硅胶为填料的分析柱），检测器为紫外检测器。以乙腈和磷酸盐的缓冲溶液为流动相，按照梯度的洗脱程序进行检测。

检测条件：使用色谱柱 Shiseido CAPCELL MG C18(250*4.6mm, 5μm)；柱温为40℃，流速为1.0ml/min；流动相：A为0.025mol/L的磷酸二氢钾溶液，B为乙腈，按下表梯度进行洗脱。

时间 (分钟)	流动相A（%）	流动相B (%)
			0	85	15
10	77	23
			13	77	23
40	60	40
			45	60	40
48	85	15
			55	85	15

溶液的配制：取包含式Ⅲ化合物在内的枸橼酸托法替布杂质适量，加稀释剂（乙腈-0.025mol/L的磷酸二氢钾溶液=15:85）溶解，并稀释制成每1ml中含杂质10ug的杂质储备溶液，再取上述杂质储备溶液用稀释剂稀释制成杂质的供试品溶液。

按上述色谱条件进行测定，记录色谱图。其中所示图4显示了本发明所述化合物即式Ⅲ杂质的液相色谱图。

实施例2

反应瓶中装入丙二酸单乙酯3.23g、N,N-二异丙基乙胺3.16g、三氯甲烷35mL和适量干燥剂无水硫酸钠，体系在氩气环境下降温至0～5℃，向体系中滴加草酰氯3.08g，滴加完后体系于5～10℃搅拌反应2小时后在0～10℃范围内向体系中滴加(3R,4R)-甲基-(4-甲基-哌啶-3-基)-(7H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)胺2.0g的三氯甲烷15mL溶液，滴加完后体系于5～15℃搅拌反应2小时后HPLC监测反应原料消失，过滤，滤液加入三氯甲烷50mL和饱和碳酸氢钠溶液50mL，于常温下搅拌0.5小时，分液，水相用三氯甲烷 50mL萃取一次，合并有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩得3-[(3R,4R)-4-甲基-3-[甲基-（7H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基）]哌啶-1-基]-3-氧代-1-丙酸乙酯粗品 3.1g，经柱层析（乙酸乙酯/正庚烷=2/1-1/0）纯化得到285mg化合物Ⅲ。

实施例3

反应瓶中装入丙二酸单乙酯3.23g、吡啶1.93g、二氯甲烷25mL和适量干燥剂无水硫酸钠，体系在氩气环境下降温至-5～0℃，向体系中滴加乙酰氯1.87g，滴加完后体系于0～5℃搅拌反应小时后在-5～5℃范围内向体系中滴加(3R,4R)-甲基-(4-甲基-哌啶-3-基)-(7H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)胺2.0g的二氯甲烷 15mL溶液，滴加完后体系于5～15℃搅拌反应2小时后HPLC监测反应原料消失，过滤，滤液加入二氯甲烷50mL和饱和碳酸氢钠溶液50mL，于常温下搅拌0.5小时，分液，水相用二氯甲烷 50mL萃取一次，合并有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩得3-[(3R,4R)-4-甲基-3-[甲基-（7H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基）]哌啶-1-基]-3-氧代-1-丙酸乙酯粗品 2.9g，经柱层析（乙酸乙酯/正庚烷=2/1-1/0）纯化得到267mg化合物Ⅲ。

Claims

1.一种托法替布有关物质如式Ⅲ所示的化合物的制备方法，所述式Ⅲ的化学名称为3-[(3R,4R)-4-甲基-3-[甲基-（7H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基）]哌啶-1-基]-3-氧代-1-丙酸乙酯；

式Ⅲ

其特征在于；所述制备方法为基于式Ⅶ的合成路线；

式Ⅶ。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于；所述方法具体包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于；所述步骤一中的有机碱选自三乙胺、N-甲基吗啉或吡啶中的任一种或其混合物。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于；所述步骤一中的酰氯为特戊酰氯、草酰氯或乙酰氯中的任一种或其混合物。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于；所述有机溶剂为二氯甲烷、三氯甲烷中的任一种或其混合物。

6.根据权利要求1所述制备方法得到的化合物式Ⅲ在托法替布或枸橼酸托法替布的原料或制剂的质量控制中的应用。