CN109805374A - 一种富含胶原蛋白的桃胶酵素及其制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种富含胶原蛋白的桃胶酵素及其制备方法与应用，包括以下步骤：1)桃胶酶解液培养基的制备：首先将桃胶清洗并加热融化，皂角米、青木瓜洗净打浆，然后桃胶液、皂角米、青木瓜浆液酶解，灭菌，冷却，得到酶解液培养基；2)产γ‑氨基丁酸的乳杆菌的菌种用培养基活化得到种子液；3)将所述步骤2)得到的种子液接种到所述步骤1)得到的酶解液培养基中，并加入β‑葡聚糖发酵，得到发酵制品；所得酵素用于骨质疏松、乳房下垂、皮肤瘀斑的药品、保健品或特膳食品的制备。本发明富含胶原蛋白的桃胶食用酵素，吸收率和体内利用率能够超越市面上同类产品。

Description

一种富含胶原蛋白的桃胶酵素及其制备方法与应用

技术领域

本发明涉及功能性食品加工技术领域，具体涉及富含胶原蛋白的桃胶食用酵素及其制备方法与应用。

背景技术

桃胶是蔷薇科植物桃或山桃等树皮中分泌出来的树脂，又名桃油，桃脂，桃花泪，桃树胶，桃凝。是桃树自然分泌，或在外力作用下产生伤口，而分泌桃胶有利于伤口自愈。比较粘稠的液体通过太阳晒蒸发，产生固体。

干的桃胶呈结晶石状很硬，形似琥珀。桃胶有足够的水溶性和适当的粘度，用清水浸泡十多个小时候后泡发变软。树胶的主要组成为半乳糖、鼠李糖、α-葡萄糖醛酸等。含有碳水化合物，脂肪和蛋白质。它有如下功效：

1.增强体力：人体中的细胞和组织中都含有大量的蛋白质，蛋白质不但是人体中的重要组成成分还是人体内部多种活动的参与者，蛋白质是人体的生命之源，食用桃胶能为机体补充蛋白质，增强机体内部的组织的合成，有强身健体的作用。

2.控血糖、降血脂：桃胶主要是多种单糖的聚合体和不饱和脂肪酸，用清水泡发后煮成粥食用，能增加血液中的单糖含量和不饱和脂肪酸的含量，对血糖的控制和降血脂都有一定的帮助。

3.美容养颜：人体皮肤的衰老和自由基有直接关系，皮肤的弹性和胶原蛋白有关，人体内的胶原蛋白不足时，便会出现皮肤的弹性下降，出现皱纹等，桃胶中含有较多的植物胶原蛋白，适量的食用桃胶能有效的补充机体的胶原蛋白，对皮肤弹性的下降有防治效果。

4.补脑益智：桃胶中含有大量的半乳糖，半乳糖本是哺乳动物乳汁中乳糖的分解成分，植物中除了甜菜，其他很少含有，半乳糖是构成脑神经系统中脑苷脂的成分,与婴儿出生后脑的迅速生长有密切关系。因此，适当食用桃胶能补充大脑所需的半乳糖，对补脑益智有很大帮助。

皂角米俗称雪莲子、皂角米、皂角仁、皂角精，是滇皂荚(GleditsiajaponicaMiq.var.delavayi(Franch.)L.C.L.)的果实。属高能量、高碳水化合物、低蛋白，低脂肪食物。并含有植物性膳食纤维，富含胶原蛋白。具有养心通脉、清肝明目等功效。具有放水加热膨胀，胶质半透明，香糯润口，是调和人体脏腑功能的珍贵纯天然绿色滋补食品。

青木瓜富含胶原蛋白，成熟后黄皮红心，富含木瓜酵素、木瓜蛋白酶、凝乳蛋白酶、胡萝卜素等及十七种以上氨基酸和多种营养元素。新鲜的青木瓜一般的带有点苦、涩味，果浆味也比较浓。有助消化、润滑肌肤、分解体内脂肪、刺激女性荷尔蒙分泌、刺激乳腺激素等功效，是丰胸的第一佳果。

现有技术领域中，含有桃胶酵素产品以护肤品餐研究较多，以桃胶作为酵素的食品尚未发现相关报道。

发明内容

鉴于现有技术的上述缺陷，本发明所要解决的技术问题是提供一种富含胶原蛋白的桃胶食用酵素及其制备方法。

本发明公开了一种富含胶原蛋白的桃胶酵素制备方法，包括以下步骤：

1)桃胶酶解液培养基的制备：首先将桃胶清洗并加热融化，皂角米、青木瓜洗净打浆，然后桃胶液、皂角米、青木瓜浆液酶解，灭菌，冷却，得到酶解液培养基；

2)产γ-氨基丁酸的乳杆菌的菌种用培养基活化得到种子液；所述产γ-氨基丁酸的乳杆菌为希氏乳杆菌(Lactobacillus hilgardii)DSMZ 20051、2002年分离得到的乳杆菌新种丘氏乳杆菌(Lactobacillus diolivorans)DSMZ14421及kisonensis乳杆菌(Lactobacillus kisonensis)JCM15041；

3)将所述步骤2)得到的种子液接种到所述步骤1)得到的酶解液培养基中，并加入β-葡聚糖发酵，得到发酵制品；然后将发酵制品制为散剂、粉剂、片剂、颗粒剂、汤剂、口服液、膏体和饮料中的任意一种。

优选地，所述步骤1)在温度30-50℃中融化后再进行酶解。

优选地，所述步骤1)中的酶解条件为桃胶、皂角米及青木瓜的总体质量与水的质量比，即料液比为1:5-10。

优选地，所述步骤1)中的酶解所用的酶为菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶和无花果蛋白酶中的一种或几种；酶解温度为60-75℃；酶解时间为20-60min。

优选地，所述步骤1)中的桃胶液、皂角米、木瓜含量比为30-60:5-10:15-25。

优选地，所述步骤2)中的培养基为MRS培养基。

优选地，所述步骤3)中的接种量为体积百分比3％-9％，发酵时长是24-72h。

优选地，所述步骤1)具体为：将桃胶清洗，在30-50℃融化后，然后加入皂角米、青木瓜浆液，再加入纯水，糊化时料液质量比1:5-10，加热升温并搅拌，到达酶解温度60-75℃时，按10-50U/g的添加量加入菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶和无花果蛋白酶中的一种或几种，酶解时间20-45min，后迅速升温至100℃，煮沸10-25min，115-130℃杀菌15-30min、冷却，得到桃胶酶解液培养基。

优选地，所述步骤3)具体为：接种kisonensis乳杆菌(Lactobacilluskisonensis)JCM15041到所述步骤1)得到的桃胶酶解液培养基中，接种量为1-6％，30℃下，发酵24-36h。

本发明提供由上述制备方法制得的桃胶酵素。

本发明的桃胶酵素可用于制备骨质疏松、乳房下垂、皮肤瘀斑的药品、保健品或特膳食品。

本发明有益效果：

本发明富含胶原蛋白的桃胶食用酵素，吸收率和体内利用率能够超越市面上同类产品。服用本发明的产品可使三个月骨密度改善率98％以上，六个月骨质疏松康复率87％以上；三个月皮肤紧致改善率96％以上；六个月乳房下垂改善率91％以上；三个月皮肤瘀斑康复率98％以上。

本发明的其它特征和优点将在随后具体实施方式部分予以详细说明。

具体实施方式

下面将更详细地描述本发明的优选实施方式。虽然以下描述了本发明的优选实施方式，然而应该理解，可以以各种形式实现本发明而不应被这里阐述的实施方式所限制。

实施例1

本实施例提供了一种富含胶原蛋白的桃胶酵素及其制备方法，包括以下步骤：

1)桃胶酶解液培养基的制备：首先将桃胶清洗并加热融化，皂角米、青木瓜洗净打浆，然后桃胶液、皂角米、青木瓜浆液酶解，灭菌，冷却，得到酶解液培养基；

2)产γ-氨基丁酸的乳杆菌的菌种用培养基活化得到种子液；所述产γ-氨基丁酸的乳杆菌为希氏乳杆菌(Lactobacillus hilgardii)DSMZ 20051、2002年分离得到的乳杆菌新种丘氏乳杆菌(Lactobacillus diolivorans)DSMZ14421及kisonensis乳杆菌(Lactobacillus kisonensis)JCM15041；

3)将所述步骤2)得到的种子液接种到所述步骤1)得到的酶解液培养基中，并加入β-葡聚糖发酵，得到发酵制品；然后将发酵制品制为片剂。

所述步骤1)在温度30℃中融化后再进行酶解。

所述步骤1)中的酶解条件为桃胶、皂角米、青木瓜总体质量与水的质量比，即料液比为1:5。

所述步骤1)中的酶解所用的酶为菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶和无花果蛋白酶中的一种或几种；酶解温度为65℃；酶解时间为20min。

所述步骤1)中的桃胶液、皂角米、木瓜含量比为30:5:15。

所述步骤2)中的培养基为MRS培养基。

所述步骤3)中的接种量为体积百分比3％，发酵时长是24h。

所述步骤1)具体为：将桃胶清洗，在30℃融化后，然后加入皂角米、青木瓜浆液，再加入纯水，糊化时料液质量比1:5，加热升温并搅拌，到达酶解温度60℃时，按10U/g的添加量加入菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶和无花果蛋白酶中的一种或几种，酶解时间20min，后迅速升温至100℃，煮沸10min，115℃杀菌15min、冷却，得到桃胶酶解液培养基。

所述步骤3)具体为：接种kisonensis乳杆菌(Lactobacillus kisonensis)JCM15041到所述步骤1)得到的桃胶酶解液培养基中，接种量为1％，25℃，发酵24h。

所得酵素产品用于骨质疏松的药品、保健品或特膳食品制备。

实施例2

本实施例提供了一种富含胶原蛋白的桃胶酵素及其制备方法，包括以下步骤：

1)桃胶酶解液培养基的制备：首先将桃胶清洗并加热融化，皂角米、青木瓜洗净打浆，然后桃胶液、皂角米、青木瓜浆液酶解，灭菌，冷却，得到所述桃胶酶解液培养基；

2)产γ-氨基丁酸的乳杆菌的菌种用培养基活化得到种子液；所述产γ-氨基丁酸的乳杆菌为希氏乳杆菌(Lactobacillus hilgardii)DSMZ 20051、2002年分离得到的乳杆菌新种丘氏乳杆菌(Lactobacillus diolivorans)DSMZ14421及kisonensis乳杆菌(Lactobacillus kisonensis)JCM15041；

3)将所述步骤2)得到的种子液接种到所述步骤1)得到的酶解液培养基中，并加入β-葡聚糖发酵，然后将发酵制品制为为片剂。

所述步骤1)在温度35℃中融化后再进行酶解。

所述步骤1)中的酶解条件为桃胶、皂角米及青木瓜的总体质量与水的质量比，即料液比为1:8。

所述步骤1)中的酶解所用的酶为菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶和无花果蛋白酶中的一种或几种；酶解温度为70℃；酶解时间为40min。

所述步骤1)中的桃胶液、皂角米、木瓜含量比为60:10:25。

所述步骤2)中的培养基为MRS培养基。

所述步骤3)中的接种量为体积百分比5％，发酵时长是36h。

所述步骤1)具体为：将桃胶清洗，在35℃融化后，然后加入皂角米、青木瓜浆液，再加入纯水，糊化时料液质量比1:8，加热升温并搅拌，到达酶解温度65℃时，按30U/g的添加量加入菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶和无花果蛋白酶中的一种或几种，酶解时间30min，后迅速升温至100℃，煮沸20min，120℃杀20min、冷却，得到桃胶酶解液培养基。

所述步骤3)具体为：接种kisonensis乳杆菌(Lactobacillus kisonensis)JCM15041到所述步骤1)得到的桃胶酶解液培养基中，接种量为3％，28℃，发酵30h。

所得酵素产品用于乳房下垂的药品、保健品或特膳食品制备，制品为散剂、粉剂、片剂、颗粒剂、汤剂、口服液、膏体和饮料中的任意一种。

实施例3

本实施例提供了一种富含胶原蛋白的桃胶酵素及其制备方法，包括以下步骤：

1)桃胶酶解液培养基的制备：首先将桃胶清洗并加热融化，皂角米、青木瓜洗净打浆，然后桃胶液、皂角米、青木瓜浆液酶解，灭菌，冷却，得到酶解液培养基；

2)产γ-氨基丁酸的乳杆菌的菌种用培养基活化得到种子液所述产γ-氨基丁酸的乳杆菌为希氏乳杆菌(Lactobacillus hilgardii)DSMZ 20051、2002年分离得到的乳杆菌新种丘氏乳杆菌(Lactobacillus diolivorans)DSMZ14421及kisonensis乳杆菌(Lactobacillus kisonensis)JCM15041；

3)将所述步骤2)得到的种子液接种到所述步骤1)得到的酶解液培养基中，并加入β-葡聚糖发酵，然后将发酵制品制为为片剂。

所述步骤1)在温度50℃中融化后再进行酶解。

所述步骤1)中的酶解条件为桃胶、皂角米及青木瓜的总体质量与水的质量比，即料液比为1:10。

所述步骤1)中的酶解所用的酶为菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶和无花果蛋白酶中的一种或几种；酶解温度为75℃；酶解时间为60min。

所述步骤1)中的桃胶液、皂角米、木瓜含量比为60:9:20。

所述步骤2)中的培养基为MRS培养基。

所述步骤3)中的接种量为体积百分比9％，发酵时长是72h。

所述步骤1)具体为：将桃胶清洗，在50℃融化后，然后加入皂角米、青木瓜浆液，再加入纯水，糊化时料液质量比1:10，加热升温并搅拌，到达酶解温度75℃时，按50U/g的添加量加入木瓜蛋白酶30min、冷却，得到桃胶酶解液培养基。

所述步骤3)具体为：接种kisonensis乳杆菌(Lactobacillus kisonensis)JCM15041到所述步骤1)得到的桃胶酶解液培养基中，接种量为6％，29℃，发酵36h。

所得酵素产品用于皮肤瘀斑的药品、保健品或特膳食品制备，制品为散剂、粉剂、片剂、颗粒剂、汤剂、口服液、膏体和饮料中的任意一种。

实验例1：治疗骨质疏松临床试验

诊断标准主要症状：骨痛，腰背疼痛，腿膝酸软，易发生骨折，足跟痛，夜间或有排肠肌痉挛。X线表现正常或骨组织密度降低、骨皮质变薄、骨小梁减少变细或有胸腰椎体呈双凹状或前方呈楔痉挛。X线表现正常或骨组织密度降低、骨皮质变薄、骨小梁减少变细或有胸腰椎体呈双凹状或前方呈楔形改变。

试验方法：

选择符合诊断标准的270名自愿者，男135人，女135人，平均年龄55岁。将自愿者随机平均分为9组，各组间无统计学差异，分别为试验组1-3和对照组1-3。试验组1-3分别服用实施例1-3制备的片剂，每天服用2次，每次1片，连续服用30天。对照组1-3分别服用现有治疗骨质疏松产品，每天服用2次，每次1片，连续服用6个月。

疗效标准：

显效：腰背痛，局部疼痛等症状基本消失，行走腰背痛消失；有效：腰背痛，局部疼痛等症状基本消除，行走疼痛有所减轻；无效：腰背痛，局部疼痛等症状无明显改善。

临床结果见表1。

表1

样本	显效	有效	无效	总有效率
					实施例1	29	0	1	96.7％
实施例2	27	1	2	93.3％
					实施例3	26	2	2	93.3％
对照品1	18	3	9	70.0％
					对照品2	15	3	11	63.3％
对照品3	16	3	10	66.7％

实验例2：改善乳房下垂临床试验

受试对象：选择280名胸部下垂的女性作为试验者，试验者年龄为20-45岁，将自愿者随机平均份为8组，每组35人，分别为试验组1-5和对照组1-3,各组间无统计学差异。判断乳房情况的标准如下：

(1)标准乳房，应具备：丰满、挺拔、有弹性，呈半球状；乳房位置在第2-6肋间，乳头位于第4肋间；乳房基底面的直径10-12cm，两乳头间隔大于20cm：四分之一乳轴(从基底面到乳头的高度)为5-6cm；胸围等于臀围。

(2)乳房松弛下垂：乳轴向下，乳房张力、弹力降低。若乳头位置低于乳房下面反折线为l度下垂，乳头位置低于第6肋弓边缘为2度下垂，乳头位置达脐部为3度下垂。

测量方法：受测者自然站立，两脚分开与肩等宽，双肩放松，上肢自然下垂，将带尺上缘经背部肩脚骨下角下缘至胸前围绕一圈，测出胸围；将带尺由乳头至锁骨中点，测出乳头位置；将带尺经乳头测量乳房超过胸骨平面的垂直距离，测出乳轴高度；将带尺由乳头至乳房内侧、外侧，测出乳房基底面直径。

试验组1-3分别服用实施例1-3制备的片剂，每天服用2次，每次1片，连续服用6个月，月经期间禁用。对照组1-3分别服用现有治疗乳房下垂产品，每天服用2次，每次1片，连续服用6个月。

疗效标准

显效：胸围增加5cm以上，或者乳房上提3cm以上；有效：胸围增加1-5cm，或者乳房上提1-3cm；无效：胸围增加或乳房上提1cm以下。6个月后，试验者胸部变化结果见表2。

表2

综上，本发明富含胶原蛋白的桃胶食用酵素，吸收率和体内利用率能够超越市面上同类产品。服用本发明的产品可使三个月骨密度改善率98％以上，六个月骨质疏松康复率87％以上；三个月皮肤紧致改善率96％以上；六个月乳房下垂改善率91％以上；三个月皮肤瘀斑康复率98％以上。

以上已经描述了本发明的各实施例，上述说明是示例性的，并非穷尽性的，并且也不限于所披露的各实施例。在不偏离所说明的各实施例的范围和精神的情况下，对于本技术领域的普通技术人员来说许多修改和变更都是显而易见的。

Claims (10)

1.一种富含胶原蛋白的桃胶酵素的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)桃胶酶解液培养基的制备：首先将桃胶清洗并加热融化，皂角米、青木瓜洗净打浆，然后桃胶液、皂角米、青木瓜浆液酶解，灭菌，冷却，得到酶解液培养基；

2)产γ-氨基丁酸的乳杆菌的菌种用培养基活化得到种子液；所述产γ-氨基丁酸的乳杆菌为希氏乳杆菌(Lactobacillus hilgardii)DSMZ 20051、2002年分离得到的乳杆菌新种丘氏乳杆菌(Lactobacillus diolivorans)DSMZ14421及kisonensis乳杆菌(Lactobacillus kisonensis)JCM15041；

3)将所述步骤2)得到的种子液接种到所述步骤1)得到的酶解液培养基中，并加入β-葡聚糖发酵，得到发酵制品；将发酵制品制为散剂、粉剂、片剂、颗粒剂、汤剂、口服液、膏体和饮料中的任意一种。

2.根据权利要求1所述的桃胶酵素的制备方法，其特征在于，所述步骤1)在温度30-50℃中融化后再进行酶解。

3.根据权利要求1所述的桃胶酵素的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中的酶解条件为桃胶、皂角米及青木瓜的总体质量与水的质量比，即料液比为1:5-10；

所述步骤1)中的酶解所用的酶为菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶和无花果蛋白酶中的一种或几种；酶解温度为60-75℃；酶解时间为20-60min。

4.根据权利要求1所述的桃胶酵素的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中的桃胶液、皂角米、木瓜质量比为30-60:5-10:15-25。

5.根据权利要求1所述的桃胶酵素的制备方法，其特征在于，所述步骤2)中的培养基为MRS培养基。

6.根据权利要求1所述的桃胶酵素的制备方法，其特征在于，所述步骤3)中的接种量为体积百分比3％-9％，发酵时长是24-72h。

7.根据权利要求1所述的桃胶酵素的制备方法，其特征在于，所述步骤1)包括：将桃胶清洗，在30-50℃融化后，然后加入皂角米、青木瓜浆液，再加入纯水，糊化时料液质量比1:5-10，加热升温并搅拌，到达酶解温度60-75℃时，按10-50U/g的添加量加入菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶和无花果蛋白酶中的一种或几种，酶解时间20-45min，后迅速升温至100℃，煮沸10-25min，115-130℃杀菌15-30min、冷却，得到桃胶酶解液培养基。

8.根据权利要求1所述的桃胶酵素的制备方法，其特征在于，所述步骤3)包括：接种kisonensis乳杆菌(Lactobacillus kisonensis)JCM15041到所述步骤1)得到的桃胶酶解液培养基中，接种量为1-6％，30℃下，发酵24-36h。

9.由权利要求1-8中任意一项所述的制备方法制得的桃胶酵素。

10.权利要求9所述的桃胶酵素在制备用于骨质疏松、乳房下垂、皮肤瘀斑的药品、保健品或特膳食品中的应用。