CN109781919A - 一种水产品中甲胺磷残留的快速检测方法 - Google Patents
一种水产品中甲胺磷残留的快速检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN109781919A CN109781919A CN201910042414.3A CN201910042414A CN109781919A CN 109781919 A CN109781919 A CN 109781919A CN 201910042414 A CN201910042414 A CN 201910042414A CN 109781919 A CN109781919 A CN 109781919A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- sample
- acephatemet
- phase
- solution
- aquatic products
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- NNKVPIKMPCQWCG-UHFFFAOYSA-N methamidophos Chemical group COP(N)(=O)SC NNKVPIKMPCQWCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 88
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract description 33
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 30
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 25
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 claims abstract description 25
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 claims abstract description 25
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 claims abstract description 25
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 20
- 239000012224 working solution Substances 0.000 claims abstract description 17
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims abstract description 16
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims abstract description 14
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 claims abstract description 13
- 238000010811 Ultra-Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry Methods 0.000 claims abstract description 10
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 8
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 claims abstract description 7
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000012071 phase Substances 0.000 claims description 55
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 45
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 43
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 claims description 38
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 claims description 32
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical group CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 24
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 13
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 13
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 claims description 11
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- JHISIGSCVMVTET-UHFFFAOYSA-N [P].CN Chemical compound [P].CN JHISIGSCVMVTET-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 8
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 claims description 8
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 5
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 4
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims description 4
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 4
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 claims description 4
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000010931 gold Substances 0.000 claims description 4
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 claims description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 4
- QEVHRUUCFGRFIF-MDEJGZGSSA-N reserpine Chemical compound O([C@H]1[C@@H]([C@H]([C@H]2C[C@@H]3C4=C(C5=CC=C(OC)C=C5N4)CCN3C[C@H]2C1)C(=O)OC)OC)C(=O)C1=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C1 QEVHRUUCFGRFIF-MDEJGZGSSA-N 0.000 claims description 4
- 238000012546 transfer Methods 0.000 claims description 4
- 238000002137 ultrasound extraction Methods 0.000 claims description 4
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 3
- 239000012982 microporous membrane Substances 0.000 claims description 3
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims description 3
- 244000144972 livestock Species 0.000 claims description 2
- 125000000467 secondary amino group Chemical class [H]N([*:1])[*:2] 0.000 claims description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 claims 1
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 11
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 60
- 241000252230 Ctenopharyngodon idella Species 0.000 description 22
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 10
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 7
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 7
- 241000209094 Oryza Species 0.000 description 6
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 6
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 6
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 5
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000012496 blank sample Substances 0.000 description 4
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000001294 liquid chromatography-tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 3
- BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N Methylamine Chemical compound NC BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 2
- 230000010355 oscillation Effects 0.000 description 2
- UIDUKLCLJMXFEO-UHFFFAOYSA-N propylsilane Chemical compound CCC[SiH3] UIDUKLCLJMXFEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 241000040710 Chela Species 0.000 description 1
- 241000238557 Decapoda Species 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 230000005611 electricity Effects 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002290 gas chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000010985 leather Substances 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005374 membrane filtration Methods 0.000 description 1
- 238000002414 normal-phase solid-phase extraction Methods 0.000 description 1
- 239000003986 organophosphate insecticide Substances 0.000 description 1
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 238000004885 tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
Landscapes
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
Abstract
本发明提供了一种水产品中甲胺磷残留的快速检测方法，包括如下步骤：1、甲胺磷母液的配制；2、乙酸铵溶液和混合溶液的配制；3、标准工作液的配制；4、UPLC‑MS/MS检测；5、绘制标准曲线；6、样品的制备；7、样品的提取；8、样品的净化；9、样品的测定。该方法简单，速度快，精密度、准确度和灵敏度高，重现性好，为水产品中甲胺磷药物残留监控和质量安全评价提供简便、高效、实用的检测方法。
Description
技术领域
本发明属于水产品质量安全技术领域，具体涉及一种水产品中甲胺磷残留的快速检 测方法。
背景技术
甲胺磷(methamidophos，MAP)又称多灭磷，是一种内吸性很强、兼有触杀和胃毒作用的高效有机磷杀虫剂，可用于水稻种植。近几年兴起的稻渔共作模式将水稻种植与 水产品养殖有机结合在一起，促进农民丰产增收，与此同时，种稻过程中所用农药对稻 田养殖水产品食用安全性也存在一定影响。稻田水产品作为稻田环境中主要的生物类 群，极易因富集效应受到其养殖环境中甲胺磷的影响，进而对人类健康饮食产生不良影 响。
现有技术中，水产品中甲胺磷残留检测主要采用的技术方法分为两部分：样品前处 理和仪器分析测定，其中样品前处理多采用固相萃取小柱净化，净化步骤繁琐，且耗时；仪器分析测定报道较多的是气相色谱串联质谱法(GC-MS/MS)，也有液相色谱串联质 谱法(LC-MS/MS)，但是采用QuEChERS净化和液相色谱串联质谱法测定水产品中甲 胺磷残留的检测方法未见报道。
发明内容
基于上述现有技术，本发明提供了一种水产品中甲胺磷残留的快速检测方法，该方 法简单，速度快，精密度、准确度和灵敏度高，重现性好，为水产品中甲胺磷药物残留 监控和质量安全评价提供简便、高效、实用的检测方法。
实现本发明上述目的所采用的技术方案为：
一种水产品中甲胺磷残留的快速检测方法，包括如下步骤：
1、甲胺磷母液的配制：
移取甲胺磷标准品于容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度线，配制成甲胺磷母液，保存备用；
2、乙酸铵溶液和混合溶液的配制：
将乙酸铵加入到混合溶剂中，配制成4-6mmol/L的乙酸铵溶液，混合溶剂中甲酸与水的体积比为0.0005-0.0015；
按照甲醇和乙酸铵溶液的体积比为1-3:7-9，将甲醇和乙酸铵溶液混合均匀，配制成 混合溶液；
3、标准工作液的配制：
用混合溶液将甲胺磷母液稀释成N份不同甲胺磷浓度的标准工作液，N为不小于4的正整数；
4、UPLC-MS/MS检测：
色谱条件：
色谱柱为Thermo Hypersil GOLD C18，流动相为有机相和水相的混合液，有机相为甲醇，水相为乙酸铵溶液，流动相采用梯度洗脱的方式进行洗脱，流动相流速为0.2-0.3mL/min；
将N份标准工作液采用UPLC-MS/MS进行检测，得到N份标准工作液中甲胺磷的 定量离子峰面积；
5、绘制标准曲线：
以甲胺磷浓度为横坐标，以定量离子峰面积为纵坐标，根据检测的数据进行绘图，拟合后得到标准曲线，根据标准曲线得到标准曲线的函数关系式y＝k1x+b1；
6、样品的制备：
将水产动物进行处理，取可食部分，将可食部分切块后均质，制得样品，将样品密封，并保存备用；
7、样品的提取：
向样品中加入提取溶剂，混匀，在室温下超声提取，提取完成后离心，取上清液；
8、样品的净化：
向上清液中加入净化剂，净化剂中乙二胺-N-丙基硅烷、石墨化碳黑粉和无水硫酸镁 的质量比为1-3:0.5-1.5:5-7，净化剂与上清液的质量体积比为3-5g：50mL，混合均匀，离心，将上清液进行浓缩，得到前处理试样；
9、样品的测定：
将前处理试样用混合溶液进行复溶，混合均匀，用水相微孔滤膜过滤，滤液即为待测试样，将待测试样用步骤1.4的检测条件进行检测，得到待测试样中甲胺磷的定量离 子峰面积，将待测试样中甲胺磷的定量离子峰面积代入标准曲线的函数关系式中，得到 待测试样中甲胺磷的浓度，将待测试样中甲胺磷的浓度乘以待测试样的体积，得到样品 中甲胺磷的质量。
进一步，所述流动相梯度洗脱的条件为：
第一阶段：采用有机相和水相的混合液洗脱0-2min，其中有机相的体积百分含量为10-20％，水相的体积百分含量为80-90％；
第二阶段：采用有机相和水相的混合液洗脱5-7min，其中有机相的体积百分含量为 80-90％，水相的体积百分含量为10-20％；
第三阶段：采用有机相和水相的混合液洗脱3-5min，其中有机相的体积百分含量为 10-20％，水相的体积百分含量为80-90％。
进一步，所述的提取溶剂为乙腈、乙酸乙酯、乙酸体积百分含量为0.1的乙腈溶液或乙酸体积百分含量为0.1的乙酸乙酯溶液。
进一步，所述的水相微孔滤膜的孔径为0.22μm。
5、根据权利要求1所述的水产品中甲胺磷残留的快速检测方法，其特征在于：步骤7中，所述的离心为冷冻离心。
进一步，质谱条件为：
离子源为加热大气压电喷雾源，正离子模式扫描，选择反应监测模式测定，喷雾电压3000-4000V，蒸发温度300-350℃，离子传输毛细管温度300-350℃，鞘气流速20-40 L/min，辅助气为3-15L/min，监测离子对：定量离子m/z 142.0/95.0和定性离子m /z142.0/125.0。
与现有技术相比，本发明的有益效果和优点在于：
1、该方法采用QuEChERS方法来净化样品，UPLC-MS/MS测定甲胺磷残留，检出 限和定量限低，灵敏度高，重现性好，精密度和准确度高能够准确反应水产品中甲胺磷 残留情况。
2、该方法提取和净化步骤简单，使用较少溶剂和试剂，污染小，对环境友好，而且成本低。
3、该方法简单，时间短，效率高，成本低，非常实用。
附图说明
图1为实施例1获得的甲胺磷的标准曲线图。
图2为甲胺磷标准溶液、草鱼空白样品和草鱼中甲胺磷加标样品的色谱图。
图3为甲胺磷标准溶液、克氏原螯虾空白样品和克氏原螯虾中甲胺磷加标样品的色谱 图。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。
实施例1
1、甲胺磷母液的配制：
准确移取1mL甲胺磷标准品(浓度为100mg/L)于100mL容量瓶中，用甲醇溶解并 定容至刻度线，配制成浓度为1mg/L甲胺磷母液，于-20℃冰箱中保存备用；
2、乙酸铵溶液和混合溶液的配制：
将乙酸铵加入到混合溶剂中，配制成5mmol/L的乙酸铵溶液，混合溶剂中甲酸与水的体积比为0.001；
按照甲醇和乙酸铵溶液的体积比为1:4，将甲醇和乙酸铵溶液混合均匀，配制成混合 溶液；
3、标准工作液的配制：
用混合溶液将甲胺磷母液分别稀释成甲胺磷浓度为1、2、5、10、20、50μg/L的6 份标准工作液；
4、UPLC-MS/MS检测：
色谱条件：
色谱柱为Thermo Hypersil GOLD C18，进样量为5μL，流动相为有机相和水相的混合液，有机相为甲醇，水相为乙酸铵溶液，流动相流速为0.2mL/min，流动相采用梯度 洗脱的方式进行洗脱，梯度洗脱条件为：
第一阶段：采用有机相和水相的混合液洗脱2min，其中有机相的体积百分含量为10％，水相的体积百分含量为90％；
第二阶段：采用有机相和水相的混合液洗脱5min，其中有机相的体积百分含量为90％，水相的体积百分含量为10％；
第三阶段：采用有机相和水相的混合液洗脱3min，其中有机相的体积百分含量为10％，水相的体积百分含量为90％；
质谱条件：
质谱仪：TSQ Quantum，加热大气压电喷雾(H-ESI)源，正离子模式扫描，选择反 应监测模式(SRM)，喷雾电压3500V，蒸发温度350℃，离子传输毛细管温度330℃， 鞘气和辅助气均为高纯氮气，流速分别为30L/min和5L/min，碰撞气为高纯氩气，压 力为2mTorr，监测离子对：m/z 142.0/95.0(定量离子)和142.0/125.0(定性离子)； 碰撞压力：均为15V；
将6份标准工作液采用UPLC-MS/MS进行检测，得到6份标准工作液中甲胺磷的 定量离子峰面积；
5、绘制标准曲线：
以甲胺磷浓度为横坐标，以定量离子峰面积为纵坐标，根据检测的数据进行绘图，拟合后得到标准曲线，根据标准曲线得到标准曲线的函数关系式Y＝226522X-28393，相 关系数R2为0.9992，如图1所示；
6、样品的制备：
将草鱼去鳞，带皮沿背脊取肌肉部分，将肌肉部分切成不大于0.5cm×0.5cm×0.5cm小块后均质，制得草鱼样品，将草鱼样品密封，于-20℃下冷冻保存备用；
7、样品的提取：
称取(2.00±0.01)g解冻后的草鱼样品于50mL具塞离心管中，向离心管中加入10mL乙腈，涡旋混匀1min，于室温下超声提取5min，以7000r/min的转速冷冻离心5min， 取上清液于25mL比色管中，重复提取一次，合并上清液并用乙腈定容至刻度线，混匀；
8、样品的净化：
在25mL比色管中取10mL液体于15mL具塞离心管中，依次加入0.2g乙二胺-N- 丙基硅烷(PSA)、0.1g石墨化碳黑粉(GCB)和0.6g无水硫酸镁，涡旋振荡1min， 以8000r/min的转速冷冻离心5min，取5mL上清液于40℃氮吹至干，得到草鱼前处 理试样；
9、样品的测定：
将草鱼前处理试样用1mL混合溶液进行复溶，涡旋混匀，用孔径为0.22μm水相微孔滤膜过滤，滤液即为待测试样，将草鱼待测试样用步骤4的检测条件进行检测，得到 草鱼待测试样中甲胺磷的定量离子峰面积，将草鱼待测试样中甲胺磷的定量离子峰面积 代入标准曲线的函数关系式中，得到草鱼待测试样中甲胺磷的浓度为低于检出限，将草 鱼待测试样中甲胺磷的浓度乘以草鱼待测试样的体积，得到草鱼样品中甲胺磷的质量。
试验一、本发明的水产品(以草鱼为例)中甲胺磷残留的快速检测方法的检出限和定量限测定试验
将实施例1所得的草鱼前处理液用甲胺磷标准品逐级稀释，分别测定其信噪比，以3倍信噪比(S/N＝3)和10倍信噪比(S/N＝10)分别确定甲胺磷的检出限为0.25μg/kg， 定量限为0.5μg/kg。
试验二、本发明的水产品(以草鱼为例)中甲胺磷残留的快速检测方法的回收率和精密度测定试验
取三份将实施例1所得的草鱼样品，分别加入低、中、高三种浓度甲胺磷标准溶液，使得甲胺磷的最终浓度分别为2、5和10μg/kg，按照实施例1中步7-9进行前处理和测 定，计算回收率和相对标准偏差，详细结果如表1所示：
表1甲胺磷在草鱼中的加标回收率和相对标准偏差(n＝6)
由表1可知，本发明的水产品中甲胺磷残留的快速检测方法的回收率高，精密度高。
将甲胺磷标准溶液、草鱼空白样品和草鱼中甲胺磷加标样品进行采用实施例1的方 法进行色谱分析，其色谱图如图2所示。
实施例2
1、甲胺磷母液的配制：
准确移取1mL甲胺磷标准品(浓度为100mg/L)于100mL容量瓶中，用甲醇溶解并 定容至刻度线，配制成浓度为1mg/L甲胺磷母液，于-20℃冰箱中保存备用；
2、乙酸铵溶液和混合溶液的配制：
将乙酸铵加入到混合溶剂中，配制成5mmol/L的乙酸铵溶液，混合溶剂中甲酸与水的体积比为0.001；
按照甲醇和乙酸铵溶液的体积比为1:4，将甲醇和乙酸铵溶液混合均匀，配制成混合 溶液；
3、标准工作液的配制：
用混合溶液将甲胺磷母液分别稀释成甲胺磷浓度为1、2、5、10、20、50μg/L的6 份标准工作液；
4、UPLC-MS/MS检测：
色谱条件：
色谱柱为Thermo Hypersil GOLD C18，进样量为5μL，流动相为有机相和水相的混合液，有机相为甲醇，水相为乙酸铵溶液，流动相流速为0.2mL/min，流动相采用梯度 洗脱的方式进行洗脱，梯度洗脱条件为：
第一阶段：采用有机相和水相的混合液洗脱2min，其中有机相的体积百分含量为10％，水相的体积百分含量为90％；
第二阶段：采用有机相和水相的混合液洗脱5min，其中有机相的体积百分含量为90％，水相的体积百分含量为10％；
第三阶段：采用有机相和水相的混合液洗脱3min，其中有机相的体积百分含量为10％，水相的体积百分含量为90％；
质谱条件：
质谱仪：TSQ Quantum，加热大气压电喷雾(H-ESI)源，正离子模式扫描，选择反 应监测模式(SRM)，喷雾电压3500V，蒸发温度350℃，离子传输毛细管温度330℃， 鞘气和辅助气均为高纯氮气，流速分别为30L/min和5L/min，碰撞气为高纯氩气，压 力为2mTorr，监测离子对：m/z 142.0/95.0(定量离子)和142.0/125.0(定性离子)； 碰撞压力：均为15V；
将6份标准工作液采用UPLC-MS/MS进行检测，得到6份标准工作液中甲胺磷的 定量离子峰面积；
5、绘制标准曲线：
以甲胺磷浓度为横坐标，以定量离子峰面积为纵坐标，根据检测的数据进行绘图，拟合后得到标准曲线，根据标准曲线得到标准曲线的函数关系式Y＝205248X-79978，相 关系数R2为0.9997；
6、样品的制备：
将克氏原螯虾去头、壳和肠腺，取肌肉部分，将肌肉部分切成不大于0.5cm×0.5cm×0.5cm小块后均质，制得克氏原螯虾样品，将克氏原螯虾样品密封，于-20℃下冷冻 保存备用；
7、样品的提取：
称取(2.00±0.01)g解冻后的克氏原螯虾样品于50mL具塞离心管中，向离心管中加入10mL乙腈，涡旋混匀1min，于室温下超声提取5min，以7000r/min的转速冷冻 离心5min，取上清液于25mL比色管中，重复提取一次，合并上清液并用乙腈定容至 刻度线，混匀；
8、样品的净化：
在25mL比色管中取10mL液体于15mL具塞离心管中，依次加入0.2g乙二胺-N- 丙基硅烷(PSA)、0.1g石墨化碳黑粉(GCB)和0.6g无水硫酸镁，涡旋振荡1min， 以8000r/min的转速冷冻离心5min，取5mL上清液于40℃氮吹至干，得到克氏原螯 虾前处理试样；
9、样品的测定：
将克氏原螯虾前处理试样用1mL混合溶液进行复溶，涡旋混匀，用孔径为0.22μm水相微孔滤膜过滤，滤液即为克氏原螯虾待测试样，将克氏原螯虾待测试样用步骤4的 检测条件进行检测，得到克氏原螯虾待测试样中甲胺磷的定量离子峰面积，将克氏原螯 虾待测试样中甲胺磷的定量离子峰面积代入标准曲线的函数关系式中，得到克氏原螯虾 待测试样中甲胺磷的浓度低于检出限，将克氏原螯虾待测试样中甲胺磷的浓度乘以克氏 原螯虾待测试样的体积，得到克氏原螯虾样品中甲胺磷的质量。
试验三、本发明的水产品(以克氏原螯虾为例)中甲胺磷残留的快速检测方法的检出限和定量限测定试验
将实施例2所得的克氏原螯虾前处理液用甲胺磷标准品逐级稀释，分别测定其信噪 比，以3倍信噪比(S/N＝3)和10倍信噪比(S/N＝10)分别确定甲胺磷的检出限为0.25 μg/kg，定量限为0.5μg/kg。
试验四、本发明的水产品(以克氏原螯虾为例)中甲胺磷残留的快速检测方法的回收率和精密度测定试验
取三份将实施例2所得的克氏原螯虾样品，分别加入低、中、高三种浓度甲胺磷标准溶液，使得甲胺磷的最终浓度分别为2、5和10μg/kg，按照实施例2中步骤7-9进行 前处理和测定，计算回收率和相对标准偏差，详细结果如表2所示：
表2甲胺磷在克氏原螯虾中的加标回收率和相对标准偏差(n＝6)
由表2可知，本发明的水产品中甲胺磷残留的快速检测方法的回收率高，精密度高。
将甲胺磷标准溶液、克氏原螯虾空白样品和克氏原螯虾中甲胺磷加标样品采用实施 例2的方法进行色谱分析，其色谱图如图3所示。
Claims (6)
1.一种水产品中甲胺磷残留的快速检测方法，其特征在于包括如下步骤：
1.1、甲胺磷母液的配制：
移取甲胺磷标准品于容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度线，配制成甲胺磷母液，保存备用；
1.2、乙酸铵溶液和混合溶液的配制：
将乙酸铵加入到混合溶剂中，配制成4-6mmol/L的乙酸铵溶液，混合溶剂中甲酸与水的体积比为0.0005-0.0015；
按照甲醇和乙酸铵溶液的体积比为1-3:7-9，将甲醇和乙酸铵溶液混合均匀，配制成混合溶液；
1.3、标准工作液的配制：
用混合溶液将甲胺磷母液稀释成N份不同甲胺磷浓度的标准工作液，N为不小于4的正整数；
1.4、UPLC-MS/MS检测：
色谱条件：
色谱柱为Thermo Hypersil GOLD C18，流动相为有机相和水相的混合液，有机相为甲醇，水相为乙酸铵溶液，流动相采用梯度洗脱的方式进行洗脱，流动相流速为0.2-0.3mL/min；
将N份标准工作液采用UPLC-MS/MS进行检测，得到N份标准工作液中甲胺磷的定量离子峰面积；
1.5、绘制标准曲线：
以甲胺磷浓度为横坐标，以定量离子峰面积为纵坐标，根据检测的数据进行绘图，拟合后得到标准曲线，根据标准曲线得到标准曲线的函数关系式y＝k1x+b1；
1.6、样品的制备：
将水产动物进行处理，取可食部分，将可食部分切块后均质，制得样品，将样品密封，并保存备用；
1.7、样品的提取：
向样品中加入提取溶剂，混匀，在室温下超声提取，提取完成后离心，取上清液；
1.8、样品的净化：
向上清液中加入净化剂，净化剂中乙二胺-N-丙基硅烷、石墨化碳黑粉和无水硫酸镁的质量比为1-3:0.5-1.5:5-7，净化剂与上清液的质量体积比为3-5g：50mL，混合均匀，离心，将上清液进行浓缩，得到前处理试样；
1.9、样品的测定：
将前处理试样用混合溶液进行复溶，混合均匀，用水相微孔滤膜过滤，滤液即为待测试样，将待测试样用步骤1.4的检测条件进行检测，得到待测试样中甲胺磷的定量离子峰面积，将待测试样中甲胺磷的定量离子峰面积代入标准曲线的函数关系式中，得到待测试样中甲胺磷的浓度，将待测试样中甲胺磷的浓度乘以待测试样的体积，得到样品中甲胺磷的质量。
2.根据权利要求1所述的水产品中甲胺磷残留的快速检测方法，其特征在于所述流动相梯度洗脱的条件为：
第一阶段：采用有机相和水相的混合液洗脱0-2min，其中有机相的体积百分含量为10-20％，水相的体积百分含量为80-90％；
第二阶段：采用有机相和水相的混合液洗脱5-7min，其中有机相的体积百分含量为80-90％，水相的体积百分含量为10-20％；
第三阶段：采用有机相和水相的混合液洗脱3-5min，其中有机相的体积百分含量为10-20％，水相的体积百分含量为80-90％。
3.根据权利要求1所述的水产品中甲胺磷残留的快速检测方法，其特征在于：所述的提取溶剂为乙腈、乙酸乙酯、乙酸体积百分含量为0.1的乙腈溶液或乙酸体积百分含量为0.1的乙酸乙酯溶液。
4.根据权利要求1所述的水产品中甲胺磷残留的快速检测方法，其特征在于：所述的水相微孔滤膜的孔径为0.22μm。
5.根据权利要求1所述的水产品中甲胺磷残留的快速检测方法，其特征在于：步骤1.7中，所述的离心为冷冻离心。
6.根据权利要求1所述的水产品中甲胺磷残留的快速检测方法，其特征在于质谱条件为：
离子源为加热大气压电喷雾源，正离子模式扫描，选择反应监测模式测定，喷雾电压3000-4000V，蒸发温度300-350℃，离子传输毛细管温度300-350℃，鞘气流速20-40L/min，辅助气为3-15L/min，监测离子对：定量离子m/z 142.0/95.0和定性离子m/z142.0/125.0。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910042414.3A CN109781919A (zh) | 2019-01-17 | 2019-01-17 | 一种水产品中甲胺磷残留的快速检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910042414.3A CN109781919A (zh) | 2019-01-17 | 2019-01-17 | 一种水产品中甲胺磷残留的快速检测方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN109781919A true CN109781919A (zh) | 2019-05-21 |
Family
ID=66500874
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201910042414.3A Pending CN109781919A (zh) | 2019-01-17 | 2019-01-17 | 一种水产品中甲胺磷残留的快速检测方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN109781919A (zh) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102156177A (zh) * | 2011-05-17 | 2011-08-17 | 中华人民共和国绍兴出入境检验检疫局 | 一种黄酒中甲胺磷的测定方法 |
| US20110212512A1 (en) * | 2005-12-19 | 2011-09-01 | Hong Wang | Monitoring network based on nano-structured sensing devices |
| CN107576741A (zh) * | 2017-09-14 | 2018-01-12 | 浙江省海洋水产研究所 | 一种固相萃取‑气相色谱串联质谱法检测水产品中有机磷农药多组分残留的方法 |
-
2019
- 2019-01-17 CN CN201910042414.3A patent/CN109781919A/zh active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20110212512A1 (en) * | 2005-12-19 | 2011-09-01 | Hong Wang | Monitoring network based on nano-structured sensing devices |
| CN102156177A (zh) * | 2011-05-17 | 2011-08-17 | 中华人民共和国绍兴出入境检验检疫局 | 一种黄酒中甲胺磷的测定方法 |
| CN107576741A (zh) * | 2017-09-14 | 2018-01-12 | 浙江省海洋水产研究所 | 一种固相萃取‑气相色谱串联质谱法检测水产品中有机磷农药多组分残留的方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| ADERBAL A. ROCHA ET AL: "Monitoring of Pesticide Residues in Surface and Subsurface Waters, Sediments, and Fish in Center-Pivot Irrigation Areas", 《J. BRAZ. CHEM. SOC.》 * |
| 王雪荣 等: "有机磷药物在水产品中的存在状态研究及其分析应用", 《化学学报》 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN105699572B (zh) | 一种hplc‑ms/ms同时测定6种水溶性维生素含量的方法 | |
| CN115060839B (zh) | 一种基于液相色谱质谱法测定双唑草腈代谢物的方法 | |
| CN105784880A (zh) | 用于检测β-受体激动剂的组合检测试剂及其检测方法 | |
| CN110174470A (zh) | 一种水产品中海洋生物毒素的高通量检测方法 | |
| CN106483230B (zh) | 一种尿液羟基多环芳烃的快速检测方法 | |
| CN102539592A (zh) | 检测体液中极长链脂肪酸含量的方法 | |
| CN109781919A (zh) | 一种水产品中甲胺磷残留的快速检测方法 | |
| CN108680663B (zh) | 一种甘蔗中草甘膦及其代谢物的检测方法 | |
| CN103278586A (zh) | 乳制品中双氰胺成分的提取及检测方法 | |
| CN109884235A (zh) | 卡马西平的高效液相检测方法 | |
| CN102539600B (zh) | 一种样品中氨基丁酸的高效液相色谱分析方法 | |
| CN111855873B (zh) | 一种超高效液相色谱-串联质谱测定水产品中三嗪类除草剂残留的方法 | |
| CN108414661B (zh) | 一种检测生物样品中氨含量的衍生化气相色谱-质谱方法 | |
| CN107102078A (zh) | 一种测定栀子黄中黄曲霉毒素b1的方法 | |
| CN112964796A (zh) | 一种测定化妆品中牛胆酸的方法 | |
| CN109212076B (zh) | 一种利用hplc-ms/ms法检测水中乙氧氟草醚的方法 | |
| CN114487247A (zh) | 草铵膦及其代谢物的测定试剂盒及其制备方法和测定方法 | |
| CN111830185A (zh) | 二氯喹啉酸的超高效液相色谱串联质谱检测方法 | |
| CN103344726B (zh) | 乳制品中双氰胺成分的提取方法 | |
| CN112816578B (zh) | 一种含氨基小分子蘑菇毒素的检测方法以及一种试剂盒 | |
| CN111337611A (zh) | 水产品中孔雀石绿、隐色孔雀石绿、结晶紫、隐色结晶紫的检测方法 | |
| CN109164196A (zh) | 一种利用气相色谱法测定tmg含量的方法 | |
| CN116124930B (zh) | 一种测定高脂肪样品基质中的黄曲霉毒素预警指示物Averantin的方法 | |
| CN109633071B (zh) | 一种利用uplc-ms/ms法检测水中噻森铜的方法 | |
| KR20030044662A (ko) | 미량 산성농약의 동시 검출법 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20190521 |