CN109689640A - 可用作免疫调节剂的化合物 - Google Patents

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Abstract

本公开文本总体上涉及可用作免疫调节剂的化合物。本文提供了化合物、包含此类化合物的组合物及其使用方法。本公开文本还涉及包含根据本公开文本的至少一种化合物的药物组合物，其可用于治疗多种疾病，包括癌症和感染性疾病。

Description

可用作免疫调节剂的化合物
相关申请
本申请要求2016年7月8日提交的美国临时申请序列号62/359,971的优先权，将其通过引用并入本文。
本公开文本总体上涉及可用作PD-1/PD-L1蛋白/蛋白和CD80/PD-L1蛋白/蛋白相互作用的抑制剂的化合物。本文提供了化合物、包含此类化合物的组合物及其使用方法。本公开文本还涉及包含根据本公开文本的至少一种化合物的药物组合物，其可用于治疗多种疾病，包括癌症和感染性疾病。
程序性死亡-1(CD279)是T细胞上的一种受体，已经显示当被其任一配体程序性死亡配体1(PD-L1，CD274，B7-H1)或PD-L2(CD273，B7-DC)结合时，其抑制来自T细胞受体的激活信号(Sharpe等人,Nat.Imm.2007)。当表达PD-1的T细胞接触表达其配体的细胞时，响应于抗原刺激的功能活性(包括增殖、细胞因子分泌和细胞溶解活性)降低。PD-1/PD配体相互作用在感染或肿瘤消退期间或在自身耐受性发展期间下调免疫反应(Keir Me,Butte MJ,Freeman GJ等人PD-1and its ligands in tolerance andimmunity.Annu.Rev.Immunol.2008；26:Epub)。慢性抗原刺激(如在肿瘤疾病或慢性感染期间发生的慢性抗原刺激)产生这样的T细胞，其表达升高水平的PD-1并且在对慢性抗原的活性方面是功能失调的(综述于Kim和Ahmed,Curr Opin Imm,2010中)。这被称为“T细胞耗竭”。B细胞也表现出PD-1/PD配体抑制和“耗竭”。
还已经显示PD-L1与CD80相互作用(Butte MJ等人,Immunity；27:111-122(2007))。已经显示表达免疫细胞上PD-L1/CD80的相互作用是一种抑制性相互作用。已经显示阻断这种相互作用消除了这种抑制性相互作用(Paterson AM等人,J Immunol.,187:1097-1105(2011)；Yang J等人J Immunol.8月1日；187(3):1113-9(2011))。
已经显示使用针对PD-L1的抗体阻断PD-1/PD-L1相互作用在许多系统中恢复和增强T细胞激活。患有晚期癌症的患者受益于用针对PD-L1的单克隆抗体的疗法(Brahmer等人,New Engl J Med 2012)。肿瘤的临床前动物模型已经显示，通过单克隆抗体阻断PD-1/PD-L1途径可以增强免疫反应并导致针对许多组织学上不同的肿瘤的免疫反应(Dong H,Chen L.B7-H1pathway and its role in the Evasion of tumor immunity.J MolMed.2003；81(5):281-287；Dong H,Strome SE,Salamoa DR等人Tumor-associated B7-H1promotes T-cell apoptosis:a potential mechanism of immune evasion.NatMed.2002；8(8):793-800)。
对PD-1/PD-L1相互作用的干扰也已经在慢性感染系统中显示出增强的T细胞活性。通过阻断PD-L1，小鼠的慢性淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒感染也表现出改善的病毒清除和恢复的免疫(Barber DL,Wherry EJ,Masopust D等人Restoring function inexhausted CD8T cells during chronic viral infection.Nature.2006；439(7077):682-687)。感染HIV-1的人源化小鼠显示出增强的抗病毒血症的保护作用和减少的CD4+T细胞的病毒性耗竭(Palmer等人,J.Immunol 2013)。通过针对PD-L1的单克隆抗体阻断PD-1/PD-L1可以恢复对来自HIV患者(Day,Nature 2006；Petrovas,J.Exp.Med.2006；Trautman,Nature Med.2006；D’Souza,J.Immunol.2007；Zhang,Blood 2007；Kaufmann,NatureImm.2007；Kasu,J.Immunol.2010；Porichis,Blood 2011)、HCV患者[Golden-Mason,J.Virol.2007；Jeung,J.Leuk.Biol.2007；Urbani,J.Hepatol.2008；Nakamoto,PLoSPath.2009；Nakamoto,Gastroenterology 2008]或HBV患者(Boni,J.Virol.2007；Fisicaro,Gastro.2010；Fisicaro等人,Gastroenterology,2012；Boni等人,Gastro.,2012；Penna等人,JHep,2012；Raziorrough,Hepatology 2009；Liang,World JGastro.2010；Zhang,Gastro.2008)的T细胞的体外抗原特异性功能。
还已经显示阻断PD-L1/CD80相互作用刺激免疫(Yang J.等人,J Immunol.8月1日；187(3):1113-9(2011))。已经显示通过与阻断进一步的PD-1/PD-L1或PD-1/PD-L2相互作用组合增强了由阻断PD-L1/CD80相互作用所产生的免疫刺激。
假设免疫细胞表型的改变是脓毒性休克的一个重要因素(Hotchkiss等人,NatRev Immunol(2013))。这些包括增加水平的PD-1和PD-L1和T细胞凋亡(Guignant等人,Crit.Care(2011))。针对PD-L1的抗体可以降低免疫细胞凋亡的水平(Zhang等人,Crit.Care(2011))。此外，缺乏PD-1表达的小鼠比野生型小鼠对脓毒性休克症状更有抵抗力(Yang J.等人J Immunol.8月1日；187(3):1113-9(2011))。研究已经揭示，使用抗体阻断PD-L1的相互作用可以抑制不适当的免疫反应并改善疾病症状。
除了增强针对慢性抗原的免疫反应外，还已经显示阻断PD-1/PD-L1途径增强针对疫苗接种(包括在慢性感染背景下的治疗性疫苗接种)的反应(S.J.Ha,S.N.Mueller,E.J.Wherry等人,“Enhancing therapeutic vaccination by blocking PD-1-mediatedinhibitory signals during chronic infection,”The Journal of ExperimentalMedicine,第205卷,第3期,第543-555页,2008.；A.C.Finnefrock,A.Tang,F.Li等人,“PD-1blockade in rhesus macaques:impact on chronic infection and prophylacticvaccination,”The Journal of Immunology,第182卷,第2期,第980-987页,2009；M.-Y.Song,S.-H.Park,H.J.Nam,D.-H.Choi和Y.-C.Sung,“Enhancement of vaccine-inducedprimary and memory CD8+t-cell responses by soluble PD-1,”The Journal ofImmunotherapy,第34卷,第3期,第297-306页,2011)。
PD-1途径是源自慢性感染和肿瘤疾病期间的慢性抗原刺激的T细胞耗竭中的一种关键抑制性分子。已经显示通过靶向PD-L1蛋白阻断PD-1/PD-L1相互作用在体外和体内恢复抗原特异性T细胞免疫功能，包括在肿瘤或慢性感染环境中针对疫苗接种的增强的反应。
因此，需要阻断PD-L1与PD-1或CD80的相互作用的药剂。
申请人发现了有效力的化合物，其具有作为PD-L1与PD-1和CD80的相互作用的抑制剂的活性，并且因此可用于治疗性给药以增强癌症或感染(包括治疗性疫苗)中的免疫。提供这些化合物可用作具有对其可药性重要的所需稳定性、生物利用度、治疗指数和毒性值的药物。
本公开文本还提供了药物组合物，其包含式(I)的化合物和/或其药学上可接受的盐；和药学上可接受的载体。
本公开文本还提供了治疗与PD-L1活性(包括其与诸如PD-1和B7-1(CD80)等其他蛋白质的相互作用)相关的疾病或障碍的方法，该方法包括向有需要的患者给予式(I)的化合物和/或其药学上可接受的盐。
本公开文本还提供了用于制备式(I)的化合物和/或其盐的方法和中间体。
本公开文本还提供了式(I)的化合物和/或其药学上可接受的盐，用于在疗法中使用。
本公开文本还提供了式(I)的化合物和/或其药学上可接受的盐在生产用于治疗或预防PD-L1相关病症(如癌症和感染性疾病)的药物中的用途。
式(I)的化合物和包含式(I)的化合物的组合物可以用于治疗、预防或治愈多种感染性疾病和癌症。包含这些化合物的药物组合物可用于治疗、预防多个治疗领域中的疾病或障碍(如癌症和感染性疾病)或减缓其进展。
随着本公开文本继续，将以扩展的形式阐述本公开文本的这些和其他特征。
在第一方面，本公开文本提供了式(I)的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
m是0、1或2；
R1选自氢、卤代C1-C4烷基、羟基C1-C4烷基、-(CH2)nX和-(CH2)nAr；其中
n是1、2、3或4；
X选自氢，-CH3，-CF3，C1-C4烷氧基，-N(CH3)2，C3-C6环烷基，CN，-CO2Rg，-C(O)NH2，吗啉基，四氢吡喃基，任选地被羟基取代的吡咯烷酮基以及任选地被一或两个独立地选自C1-C4烷基、羧基、羟基和C1-C4烷氧基羰基的基团取代的哌啶基；其中Rg选自氢和C1-C4烷基；
Ar选自苯并二噁烷基、吲唑基、异喹啉基、异噁唑基、萘基、噁二唑基、苯基、吡啶基、嘧啶基和喹啉基；其中每个环任选地被1、2、3或4个独立地选自C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基羰基、C1-C4烷氧基羰基氨基、C1-C4烷基、C1-C4烷基羰基、C1-C4烷基磺酰基、酰胺基、酰胺基C1-C4烷基、-(CH2)qCO2C1-C4烷基、-(CH2)qOH、羧基、氰基、甲酰基、卤基、卤代C1-C4烷基、卤代C1-C4烷氧基、硝基、任选地被一个氰基取代的苯基、任选地被一个卤基取代的苯氧基、苯基羰基、吡咯和四氢吡喃的取代基取代，其中q是0、1、2、3或4；
R2选自
其中
Rn选自氢、C1-C3烷基、卤基和卤代C1-C3烷基；
Y选自氢、C1-C3烷氧基、C1-C3烷基、氰基和卤基；
R5是苯基或单环或双环不饱和杂环，该杂环含有五至十个原子，其中那些原子中的一至四个独立地选自氮、氧和硫；并且其中该苯基和该单环或双环基团任选地被一、二、三、四或五个独立地选自以下的取代基取代：C1-C3烷基、氰基、甲酰基、卤基、卤代C1-C3烷氧基、卤代C1-C3烷基、羟基、氧代、-L-(CH2)m’NRcRd、-L-(CH2)m’OH、 其中
L选自键、-CH2-、-NHC(O)-、-C(O)NH-和-O-；条件是当它通过该杂环中的氮原子附接至该母体分子部分时，L是-CH2-；
m'是1、2、3或4；条件是当m'是1时，L是通过碳原子附接至该母体分子部分的键；
t是0、1、2或3；
z是1、2或3；
每个Rz独立地选自C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基羰基、C1-C4烷氧基羰基C1-C4烷基、C1-C4烷基、C1-C4烷基酰胺基、C1-C4烷基氨基、C1-C4烷基羰基、酰胺基、羧基、羧基C1-C4烷基、氰基、二(C1-C4烷基)酰胺基、二(C1-C4烷基)氨基、卤基、卤代C1-C4烷氧基、卤代C1-C4烷基、羟基、羟基C1-C4烷基、-NRcRd、(NRcRd)C1-C4烷基、-NReRf、(NReRf)C1-C4烷基、苯基和苯基C1-C4烷基；其中Re和Rf与它们所附接的原子一起形成选自吗啉和的环；
Rc和Rd独立地选自氢、C2-C4烯基羰基、C1-C4烷氧基羰基、C1-C6烷基、C1-C4烷基羰基、酰胺基C1-C4烷基、氨基C1-C4烷基、芳基C1-C4烷基、C3-C10环烷基、(C3-C10环烷基)C1-C4烷基、卤代C1-C4烷基羰基、杂芳基C1-C4烷基和羟基C1-C4烷基；其中该酰胺基C1-C4烷基、该氨基C1-C4烷基、该芳基C1-C4烷基、该(C3-C10环烷基)C1-C4烷基和该杂芳基C1-C4烷基的烷基部分任选地被一或两个独立地选自羧基和羟基的基团取代；其中该羟基C1-C4烷基的烷基部分任选地被一或两个独立地选自羧基和羟基的基团取代；并且其中该芳基C1-C4烷基的芳基部分、该C3-C10环烷基、该(C3-C10环烷基)C1-C4烷基的环烷基部分和该杂芳基C1-C4烷基的杂芳基部分各自任选地被一、二或三个独立地选自C1-C4烷氧基羰基、C1-C4烷基和卤基的基团取代；
Q选自S、O和-NRp；其中Rp选自氢、C1-C4烷基、C1-C4烷基酰胺基C1-C4烷基、C1-C4烷基氨基C1-C4烷基、酰胺基C1-C4烷基、氨基C1-C4烷基、二(C1-C4烷基)酰胺基C1-C4烷基、二(C1-C4烷基)氨基C1-C3烷基、羟基C1-C4烷基、吡啶基和任选地被甲氧基取代的苯基；
条件是当R2是时，则R5不是苯基；并且
R6是氢，或者R5和R6与它们所附接的原子一起形成含有一或两个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的五元或六元不饱和环，其中该环任选地被一或两个独立地选自C1-C3烷基、氰基、甲酰基、卤基、卤代C1-C3烷基、羟基、氧代、-L-(CH2)nNRcRd、-L-(CH2)nOH的取代基取代；
每个R3独立地选自C2-C4烯基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基、氰基、卤基和卤代C1-C4烷基；并且
R4选自-(CH2)pCHO、-(CH2)n’OH和-(CH2)n’NRqR8，其中
p是0、1、2或3；
n'是1、2、3或4；
Rq选自氢、C1-C4烷基和苄基；并且
R8选自
其中
s是0、1或2；
z是1、2或3；
Rj选自C1-C3烷基、C1-C3烷基磺酰基C1-C3烷基、C1-C3烷基亚磺酰基(sulfoxyl)C1-C3烷基和C1-C3烷基硫烷基C1-C3烷基；
Rw是-CO2H或-CONH2，
R9选自氢、苄基和甲基；
每个R9’独立地选自氢、乙基和甲基；
R10选自氢、C1-C3烷基和苄基；并且
R11选自C2-C4烯基和C1-C4烷基；
或者
R8和Rq与它们所附接的氮原子一起形成选自以下的环：
其中
s是0、1或2；
z是1、2或3；
Q'选自CHR13’、S、O、-N(CH2)2OH和NCH3；
R12选自氢、-CO2H、羟基C1-C4烷基和-C(O)NHSO2R16；其中R16选自三氟甲基、环丙基、C1-C4烷基、二甲基氨基、4-甲基哌嗪基和被甲基取代的咪唑基；
R13选自氢、羟基C1-C4烷基和-CO2H；
R13’选自氢、羟基C1-C3烷基和-CO2H；并且
R14选自C1-C4烷氧基羰基、C1-C3烷基、羧基、卤基、羟基、羟基C1-C4烷基和-NRc’Rd’；其中Rc’和Rd’独立地选自氢、C1-C4烷氧基羰基和C1-C4烷基羰基。
在第一方面的第一个实施方案中，本公开文本提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1是-(CH2)nAr，其中n是1并且Ar是任选地被氰基取代的吡啶基。
在第一方面的第二个实施方案中，本公开文本提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1是-(CH2)nAr，其中n是1并且Ar是任选地被氰基取代的吡啶基；m是1；并且R3是卤基。
在第三个实施方案中，本公开文本提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1是-(CH2)nAr，其中n是1并且Ar是任选地被氰基取代的吡啶基；m是1；并且R3是卤基，并且其中R2选自
其中
Rn是氢；
Y是甲基；
R5是苯基或单环或双环不饱和杂环，该杂环含有五至十个原子，其中那些原子中的一至四个独立地选自氮、氧和硫；并且其中该苯基和该单环或双环基团任选地被一、二或三个独立地选自以下的取代基取代：C1-C3烷基、氰基、甲酰基、卤基、卤代C1-C3烷氧基、卤代C1-C3烷基、羟基、氧代、-L-(CH2)m’NRcRd、-L-(CH2)m’OH、
其中L选自键、-CH2-和-O-；
m'是1、2、3或4；条件是当m'是1时，L是通过碳原子附接至该母体分子部分的键；
t是0或1；
z是2或3；
Rz是羟基；
Rc和Rd各自是甲基；并且
R6是氢。
在第一方面的第四个实施方案中，本公开文本提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1是-(CH2)nAr，其中n是1并且Ar是任选地被氰基取代的吡啶基；m是1；并且R3是卤基；R4选自-(CH2)pCHO、-(CH2)n’OH和-(CH2)n’NRqR8，其中
p是0；
n'是1；
Rq是氢；并且
R8选自
其中
s是1；
z是2；
R9选自氢、苄基和甲基；
每个R9’独立地选自氢、乙基和甲基；并且
R10选自氢、C1-C3烷基和苄基；或者
R8和Rq与它们所附接的氮原子一起形成环，其为：
其中
s是0、1或2；
z是1、2或3；并且
R14选自C1-C4烷氧基羰基、C1-C3烷基、羧基和羟基。
在第二方面，本公开文本提供了式(I)的化合物，
或其药学上可接受的盐，其中：
m是1；
R1是-(CH2)nAr；其中
n是1，
Ar是任选地被氰基取代的吡啶基；
R2选自
其中
Rn是氢；
Y是C1-C3烷基；
R5是苯基或单环或双环不饱和杂环，该杂环含有五至十个原子，其中那些原子中的一至四个独立地选自氮、氧和硫；并且其中该苯基和该单环或双环基团任选地被一、二、三、四或五个独立地选自以下的取代基取代：C1-C3烷基、氰基、甲酰基、卤基、卤代C1-C3烷氧基、卤代C1-C3烷基、羟基、氧代、-L-(CH2)m’NRcRd、-L-(CH2)m’OH、
其中
L选自键、-CH2-和-O-；条件是当它通过该杂环中的氮原子附接至该母体分子部分时，L是-CH2-；
m'是1、2、3或4；条件是当m'是1时，L是通过碳原子附接至该母体分子部分的键；
t是0、1、2或3；
z是1、2或3；
Rz是羟基；
Rc和Rd是C1-C6烷基；
条件是当R2是时，则R5不是苯基；
R6是氢，
R3是卤基；并且
R4选自-(CH2)pCHO、-(CH2)n’OH和-(CH2)n’NRqR8，其中
p是0；
n'是1；
Rq是氢；并且
R8选自
其中
s是1；
z是2；
R9选自氢、苄基和甲基；
每个R9’独立地选自氢、乙基和甲基；并且
R10选自氢、C1-C3烷基和苄基；
或者
R8和Rq与它们所附接的氮原子一起形成环，其为
其中
s是1或2；
z是2或3；并且
R14选自C1-C4烷氧基羰基、C1-C3烷基、羧基、卤基和羟基。
在第三方面，本公开文本提供了药物组合物，其包含式(I)的化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。
在第四方面，本公开文本提供了增强、刺激、调节和/或增加有需要的受试者的免疫反应的方法，所述方法包括向该受试者给予治疗有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。在第四方面的第一个实施方案中，该方法还包括在式(I)的化合物或其药学上可接受的盐之前、之后或与其同时给予另外的药剂。在第四方面的第二个实施方案中，该另外的药剂是抗微生物剂、抗病毒剂、修饰基因表达的药剂、细胞毒剂和/或免疫反应调节剂。
在第五方面，本公开文本提供了抑制有需要的受试者的癌细胞的生长、增殖或转移的方法，所述方法包括向该受试者给予治疗有效量的式(I)的化合物或药学上可接受的盐。在第五方面的第一个实施方案中，该癌症选自黑色素瘤、肾细胞癌、鳞状非小细胞肺癌(NSCLC)、非鳞状NSCLC、结肠直肠癌、去势抗性前列腺癌、卵巢癌、胃癌、肝细胞癌、胰腺癌、头颈部鳞状细胞癌、食道癌、胃肠道癌和乳腺癌以及血液恶性肿瘤。
在第六方面，本公开文本提供了治疗有需要的受试者的感染性疾病的方法，该方法包括向该受试者给予治疗有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。在第六方面的第一个实施方案中，该感染性疾病由病毒引起。在第六方面的第二个实施方案中，该病毒选自HIV、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、丁型肝炎病毒、疱疹病毒、乳头瘤病毒和流感病毒。
在第七方面，本公开文本提供了治疗有需要的受试者的脓毒性休克的方法，该方法包括向该受试者给予治疗有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
在第八方面，本公开文本提供了阻断受试者的PD-L1与PD-1和/或CD80的相互作用的方法，所述方法包括向该受试者给予治疗有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
在阅读以下发明详述后，本领域普通技术人员可以更容易地理解本公开文本的特征和优点。应当理解，为了清楚起见在单独的实施方案的上下文中描述的本公开文本的某些特征也可以组合以形成单个实施方案。相反，为了简洁起见在单个实施方案的上下文中描述的本公开文本的各种特征也可以组合以便形成其子组合。在本文标识为示例性的或优选的实施方案旨在是说明性的而非限制性的。
除非本文另有明确说明，否则以单数形式提及的提及项也可以包括复数形式。例如，“一种/个(a和an)”可以指一种/个或者一种/个或多种/个。
如本文所用的，短语“化合物或其药学上可接受的盐”是指至少一种化合物、该化合物的至少一种盐或其组合。例如，式(I)的化合物或其药学上可接受的盐包括式(I)的化合物；两种式(I)的化合物；式(I)的化合物和式(I)的化合物的一种或多种盐；以及式(I)的化合物的两种或更多种盐。
除非另有说明，否则具有不饱和化合价的任何原子被认为具有足以满足化合价的氢原子。
在整个说明书中，本领域技术人员可以选择基团及其取代基以提供稳定的部分和化合物。
下文列出了用于描述本公开文本的各个术语的定义。这些定义适用于如它们在整个说明书中单独地或作为更大基团的一部分使用的术语(除非它们在特定情况下另有限制)。本文阐述的定义优先于通过引用并入本文的任何专利、专利申请和/或专利申请公开中阐述的定义。
如本文所用的，术语“C2-C4烯基”是指衍生自含有一至四个碳原子和一或两个双键的直链或支链烃的基团。
如本文所用的，术语“C2-C4烯基羰基”是指通过羰基附接至母体分子部分的C2-C4烯基。
如本文所用的，术语“C1-C4烷氧基”是指通过氧原子附接至母体分子部分的C1-C4烷基。
如本文所用的，术语“C1-C4烷氧基羰基”是指通过羰基附接至母体分子部分的C1-C4烷氧基。
如本文所用的，术语“C1-C4烷氧基羰基C1-C4烷基”是指通过C1-C4烷基附接至母体分子部分的C1-C4烷氧基羰基。
如本文所用的，术语“C1-C4烷氧基羰基氨基”是指通过-NH基团附接至母体分子部分的C1-C4烷氧基羰基。
如本文所用的，术语“C1-C3烷基”是指衍生自含有一至三个碳原子的直链或支链饱和烃的基团。
如本文所用的，术语“C1-C4烷基”是指衍生自含有一至四个碳原子的直链或支链饱和烃的基团。
如本文所用的，术语“C1-C6烷基”是指衍生自含有一至六个碳原子的直链或支链饱和烃的基团。
如本文所用的，术语“C1-C4烷基酰胺基”是指-C(O)NHR，其中R是C1-C4烷基。
如本文所用的，术语“C1-C4烷基酰胺基C1-4烷基”是指通过C1-C4烷基附接至母体分子部分的C1-C4烷基酰胺基。
如本文所用的，术语“C1-C4烷基氨基”是指-NHR，其中R是C1-C4烷基。
如本文所用的，术语“C1-C4烷基氨基C1-4烷基”是指通过C1-C4烷基附接至母体分子部分的C1-C4烷基氨基。
如本文所用的，术语“C1-C4烷基羰基”是指通过羰基附接至母体分子部分的C1-C4烷基。
如本文所用的，术语“C1-C3烷基硫烷基”是指通过硫原子附接至母体分子部分的C1-C3烷基。
如本文所用的，术语“C1-C3烷基硫烷基C1-C3烷基”是指通过C1-C3烷基附接至母体分子部分的C1-C3烷基硫烷基。
如本文所用的，术语“C1-C3烷基磺酰基”是指通过磺酰基附接至母体分子部分的C1-C4烷基。
如本文所用的，术语“C1-C4烷基磺酰基”是指通过磺酰基附接至母体分子部分的C1-C4烷基。
如本文所用的，术语“C1-C3烷基磺酰基C1-C3烷基”是指通过C1-C3烷基附接至母体分子部分的C1-C3烷基磺酰基。
如本文所用的，术语“C1-C3烷基亚磺酰基”是指通过亚磺酰基附接至母体分子部分的C1-C3烷基。
如本文所用的，术语“C1-C3烷基亚磺酰基C1-C3烷基”是指通过C1-C3烷基附接至母体分子部分的C1-C3烷基亚磺酰基。
如本文所用的，术语“酰胺基”是指-C(O)NH2。
如本文所用的，术语“酰胺基C1-C4烷基”是指通过C1-C4烷基附接至母体分子部分的酰胺基。
如本文所用的，术语“氨基C1-C4烷基”是指通过C1-C4烷基附接至母体分子部分的氨基。
如本文所用的，术语“芳基”是指苯基或其中的一个或两个环是苯基的双环稠环系统。双环稠环系统由与四元至六元芳族或非芳族碳环稠合的苯基组成。本发明的芳基可以通过该基团中的任何可取代的碳原子附接至母体分子部分。芳基的代表性例子包括但不限于茚满基、茚基、萘基、苯基和四氢萘基。
如本文所用的，术语“芳基C1-C4烷基”是指通过C1-C4烷基附接至母体分子部分的芳基。
如本文所用的，术语“羰基”是指-C(O)-。
如本文所用的，术语“羧基”是指-CO2H。
如本文所用的，术语“羧基C1-C4烷基”是指通过C1-C4烷基附接至母体分子部分的羧基。
如本文所用的，术语“氰基”是指-CN。
如本文所用的，术语“C3-C6环烷基”是指具有三至六个碳原子和零个杂原子的饱和单环烃环系。
如本文所用的，术语“C3-C10环烷基”是指具有三至十个碳原子和零个杂原子的饱和单环烃环系。
如本文所用的，术语“(C3-C10环烷基)C1-C4烷基”是指通过C1-C4烷基附接至母体分子部分的C3-C10环烷基。
如本文所用的，术语“二(C1-C4烷基)酰胺基”是指-C(O)NR2，其中R是C1-C4烷基。两个R基团可以相同或不同。
如本文所用的，术语“二(C1-C4烷基)酰胺基C1-C4烷基”是指通过C1-C4烷基附接至母体分子部分的二(C1-C4烷基)酰胺基。
如本文所用的，术语“二(C1-C4烷基)氨基”是指-NR2，其中R是C1-C4烷基。两个R基团可以相同或不同。
如本文所用的，术语“二(C1-C4烷基)氨基C1-C4烷基”是指通过C1-C4烷基附接至母体分子部分的基团二(C1-C4烷基)氨基。
如本文所用的，术语“二甲基氨基”是指-N(CH3)2。
如本文所用的，术语“甲酰基”是指-C(O)H。
如本文所用的，术语“卤基”和“卤素”是指F、Cl、Br或I。
如本文所用的，术语“卤代C1-C3烷基”是指被一、二或三个卤素原子取代的C1-C3烷基。
如本文所用的，术语“卤代C1-C4烷氧基”是指通过氧原子附接至母体分子部分的卤代C1-C4烷基。
如本文所用的，术语“卤代C1-C4烷基”是指被一、二或三个卤素原子取代的C1-C4烷基。
如本文所用的，术语“卤代C1-C4烷基羰基”是指通过羰基附接至母体分子部分的卤代C1-C4烷基。
如本文所用的，术语“杂芳基”是指含有一、二或三个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的五元或六元芳环。术语“杂芳基”还包括双环基团，其中杂芳基环与另一个单环杂芳基或苯基稠合。如本文所用的，术语“杂芳基C1-C4烷基”是指通过C1-C4烷基附接至母体分子部分的杂芳基。
如本文所用的，术语“羟基”是指-OH。
如本文所用的，术语“羟基C1-C4烷基”是指通过C1-C4烷基附接至母体分子部分的羟基。
如本文所用的，术语“(NRcRd)C1-C4烷基”是指通过C1-C4烷基附接至母体分子部分的NRcRd基团。
如本文所用的，术语“(NReRf)C1-C4烷基”是指通过C1-C4烷基附接至母体分子部分的NRcRd基团。
如本文所用的，术语“硝基”是指-NO2。
如本文所用的，术语“氧代”是指＝O。
如本文所用的，术语“苯基C1-C4烷基”是指通过C1-C4烷基附接至母体分子部分的苯基。
如本文所用的，术语“苯基羰基”是指通过羰基附接至母体分子部分的苯基。
如本文所用的，术语“苯氧基”是指通过氧原子附接至母体分子部分的苯基。
如本文所用的，术语“磺酰基”是指-SO2-。
如本文所用的，术语“亚磺酰基”是指-SO-。
本文采用短语“药学上可接受的”是指在合理医学判断范围内适合于与人和动物组织接触使用而没有过多的毒性、刺激、过敏反应或其他问题或并发症，与合理的效益/风险比相称的那些化合物、材料、组合物和/或剂型。
式(I)的化合物可以形成盐，其也在本公开文本的范围内。除非另有说明，否则提及本发明化合物应理解为包括提及其一种或多种盐。术语“盐”表示与无机和/或有机酸和碱形成的酸式和/或碱式盐。此外，术语“盐”可以包括两性离子(内盐)，例如当式(I)的化合物含有碱性部分(如胺或吡啶或咪唑环)和酸性部分(如羧酸)时。药学上可接受的(即，无毒的生理学上可接受的)盐是优选的，例如像其中的阳离子对盐的毒性或生物活性没有显著贡献的可接受的金属盐和胺盐。然而，其他盐可以例如用于可在制备期间采用的分离或纯化步骤中，并且因此预期在本公开文本的范围内。式(I)的化合物的盐可以例如通过使式(I)的化合物与一定量的酸或碱(如当量量)在介质(如盐在其中沉淀的介质)中或在水性介质中反应，随后冻干而形成。
示例性的酸加成盐包括乙酸盐(如与乙酸或三卤乙酸(例如三氟乙酸)形成的那些)、己二酸盐、海藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、富马酸盐、葡庚酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、盐酸盐(与盐酸形成)、氢溴酸盐(与溴化氢形成)、氢碘酸盐、马来酸盐(与马来酸形成)、2-羟基乙磺酸盐、乳酸盐、甲磺酸盐(与甲磺酸形成)、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、草酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、水杨酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐(如与硫酸形成的那些)、磺酸盐(如本文所提及的那些)、酒石酸盐、硫氰酸盐、诸如甲苯磺酸盐(tosylate)等甲苯磺酸盐(toluenesulfonate)、十一烷酸盐等。
示例性的碱式盐包括铵盐；碱金属盐，如钠盐、锂盐和钾盐；碱土金属盐，如钙盐和镁盐；钡盐、锌盐和铝盐；与有机碱(例如有机胺)的盐，该有机碱是如三烷基胺(如三乙胺)、普鲁卡因、二苄胺、N-苄基-β-苯乙胺、1-二苯羟甲胺(ephenamine)、N,N′-二苄乙烯-二胺、脱氢枞胺、N-乙基哌啶、苄胺、二环己胺或类似的药学上可接受的胺；以及与氨基酸的盐，该氨基酸是如精氨酸、赖氨酸等。碱性含氮基团可以用诸如低级烷基卤化物(例如，甲基、乙基、丙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物)、二烷基硫酸酯(例如，二甲基、二乙基、二丁基和二戊基的硫酸酯)、长链卤化物(例如，癸基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂酰基的氯化物、溴化物和碘化物)、芳烷基卤化物(例如，苄基和苯乙基的溴化物)等试剂季铵化。优选的盐包括单盐酸盐、硫酸氢盐、甲磺酸盐、磷酸盐或硝酸盐。
各种形式的前药在本领域是熟知的，并且描述于：
a)The Practice of Medicinal Chemistry,Camille G.Wermuth等人,第31章,(Academic Press,1996)；
b)Design of Prodrugs,由H.Bundgaard编辑,(Elsevier,1985)；
c)A Textbook of Drug Design and Development,P.Krogsgaard-Larson和H.Bundgaard编辑第5章,第113-191页(Harwood Academic Publishers,1991)；以及
d)Hydrolysis in Drug and Prodrug Metabolism,Bernard Testa和JoachimM.Mayer,(Wiley-VCH,2003)。
此外，可以分离和纯化制备后的式(I)的化合物以获得含有按重量计等于或大于99％的量的式(I)的化合物(“基本上纯的”)组合物，然后将其如本文所述使用或配制。此类“基本上纯的”式(I)的化合物也在本文被预期是本公开文本的一部分。
“稳定化合物”和“稳定结构”意欲指示足够稳健而可在从反应混合物分离至可用纯度，并且配制为有效治疗剂后幸存的化合物。本公开文本旨在体现稳定化合物。
“治疗有效量”旨在包括独的本公开文本的化合物的量或所要求保护的化合物的组合的量或本公开文本的化合物与其他活性成分的组合的量，所述量有效抑制PD-1/PD-L1蛋白/蛋白和/或CD80/PD-L1蛋白/蛋白相互作用，或有效治疗或预防癌症或感染性疾病，如HIV或乙型肝炎、丙型肝炎和丁型肝炎。
如本文所用的，“治疗(treating或treatment)”涵盖哺乳动物(特别是人)的疾病状态的治疗，并且包括：(a)防止该疾病状态在哺乳动物中发生，特别是当这种哺乳动物易患该疾病状态，但尚未被诊断为患有该疾病状态时；(b)抑制该疾病状态，即阻止其发展；和/或(c)缓解该疾病状态，即引起该疾病状态的消退。
本公开文本的化合物旨在包括本公开文本化合物中存在的原子的所有同位素。同位素包括原子数相同但质量数不同的那些原子。通过一般举例而非限制的方式，氢的同位素包括氘(D)和氚(T)。碳的同位素包括13C和14C。本公开文本的同位素标记的化合物通常可以通过本领域技术人员已知的常规技术或通过与本文描述的那些类似的方法使用适当的同位素标记的试剂代替否则采用的未标记的试剂来制备。例如，甲基(-CH3)还包括氘代甲基，如-CD3。
根据式(I)的化合物和/或其药学上可接受的盐可以通过适合于待治疗病症的任何方式给予，这可以取决于对位点特异性治疗的需要或待递送的式(I)化合物的量。本公开文本还包括一类药物组合物，其包含式(I)的化合物和/或其药学上可接受的盐；以及一种或多种无毒的药学上可接受的载体和/或稀释剂和/或佐剂(在本文中统称为“载体”材料)和(如果需要的话)其他活性成分。式(I)的化合物可以通过任何合适的途径给予，优选地以适合于这种途径的药物组合物的形式，并且以对预期治疗有效的剂量。本公开文本的化合物和组合物可以例如以含有常规药学上可接受的载体、佐剂和媒介物的剂量单位配制品口服、经粘膜、经直肠或肠胃外(包括血管内、静脉内、腹膜内、皮下、肌内和胸膜内)给予。例如，药物载体可以含有甘露醇或乳糖和微晶纤维素的混合物。该混合物可以含有另外的组分，如润滑剂(例如硬脂酸镁)和崩解剂(如交聚维酮)。载体混合物可以填充到明胶胶囊中或压缩成片剂。例如，该药物组合物可以作为口服剂型或输注给予。
对于口服给予，该药物组合物可以呈例如片剂、胶囊剂、液体胶囊剂、悬浮液或液体的形式。该药物组合物优选地以含有特定量活性成分的剂量单位的形式制备。例如，该药物组合物可以提供为片剂或胶囊剂，其包含的活性成分的量在约0.1至1000mg、优选约0.25至250mg、更优选约0.5至100mg的范围内。对于人或其他哺乳动物，合适的日剂量可以根据患者的状况和其他因素而广泛变化，但是可以使用常规方法来确定。
本文预期的任何药物组合物可以例如通过任何可接受且合适的口服制剂口服递送。示例性的口服制剂包括但不限于例如片剂、锭剂、糖锭剂、水性和油性悬浮液、可分散粉末或颗粒、乳液、硬和软胶囊剂、液体胶囊剂、糖浆剂和酏剂。旨在用于口服给予的药物组合物可以根据本领域已知的用于生产旨在用于口服给予的药物组合物的任何方法制备。为了提供药学上可口的制剂，根据本公开文本的药物组合物可以含有选自甜味剂、调味剂、着色剂、缓和剂、抗氧化剂和防腐剂的至少一种试剂。
片剂可以例如通过将至少一种式(I)的化合物和/或其至少一种药学上可接受的盐与适合于生产片剂的至少一种无毒的药学上可接受的赋形剂混合来制备。示例性的赋形剂包括但不限于例如惰性稀释剂，例如像碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙和磷酸钠；制粒剂和崩解剂，例如像微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、玉米淀粉和海藻酸；粘合剂，例如像淀粉、明胶、聚乙烯吡咯烷酮和阿拉伯胶；以及润滑剂，例如像硬脂酸镁、硬脂酸和滑石。另外，片剂可以是未包衣的，或通过已知技术包衣，以掩盖尝起来令人不快的药物的不良味道，或延迟胃肠道中活性成分的崩解和吸收，从而维持活性成分的作用持续更长时间。示例性的水溶性味道掩蔽材料包括但不限于羟丙基甲基纤维素和羟丙基纤维素。示例性的延时材料包括但不限于乙基纤维素和乙酸丁酸纤维素。
硬明胶胶囊可以例如通过将至少一种式(I)的化合物和/或其至少一种盐与至少一种惰性固体稀释剂(例如像碳酸钙、磷酸钙和高岭土)混合来制备。
软明胶胶囊可以例如通过将至少一种式(I)的化合物和/或其至少一种药学上可接受的盐与至少一种水溶性载体(例如像聚乙二醇)和至少一种油介质(例如像花生油、液体石蜡和橄榄油)混合来制备。
水性悬浮液可以例如通过将至少一种式(I)的化合物和/或其至少一种药学上可接受的盐与适合于生产水性悬浮液的至少一种赋形剂混合来制备。适合于生产水性悬浮液的示例性的赋形剂包括但不限于例如悬浮剂，例如像羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠、海藻酸、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍胶和阿拉伯树胶；分散剂或润湿剂，例如像天然存在的磷脂，例如卵磷脂；环氧烷与脂肪酸的缩合产物，例如像聚氧乙烯硬脂酸酯；环氧乙烷与长链脂族醇的缩合产物，例如像十七烷乙烯-氧基鲸蜡醇；环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合产物，例如像聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯；以及环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合产物，例如像聚乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。水性悬浮液还可以含有至少一种防腐剂，例如像对羟基苯甲酸乙酯和对羟基苯甲酸正丙酯；至少一种着色剂；至少一种调味剂；和/或至少一种甜味剂，包括但不限于例如蔗糖、糖精和阿斯巴甜。
油性悬浮液可以例如通过将至少一种式(I)的化合物和/或其至少一种药学上可接受的盐悬浮在植物油(例如像花生油、橄榄油、芝麻油和椰子油)或者悬浮在矿物油(例如像液体石蜡)中来制备。油性悬浮液还可以含有至少一种增稠剂，例如像蜂蜡、硬石蜡和十六醇。为了提供可口的油性悬浮液，可以将上文已经描述的至少一种甜味剂和/或至少一种调味剂添加到油性悬浮液中。油性悬浮液还可以含有至少一种防腐剂，包括但不限于例如抗氧化剂，例如像丁基化羟基茴香醚和α-生育酚。
可分散粉末和颗粒可以例如通过将至少一种式(I)的化合物和/或其至少一种药学上可接受的盐与至少一种分散剂和/或润湿剂、至少一种悬浮剂和/或至少一种防腐剂混合来制备。合适的分散剂、润湿剂和悬浮剂如上文已经描述。示例性的防腐剂包括但不限于例如抗氧化剂，例如抗坏血酸。此外，可分散粉末和颗粒还可以含有至少一种赋形剂，包括但不限于例如甜味剂、调味剂和着色剂。
至少一种式(I)的化合物和/或其至少一种药学上可接受的盐的乳液可以例如制备为水包油乳液。包含式(I)的化合物的乳液的油相能以已知方式由已知成分构成。油相可以通过但不限于此例如植物油(例如像橄榄油和花生油)、矿物油(例如像液体石蜡)及其混合物来提供。虽然该相可以仅包含乳化剂，但是它可以包含至少一种乳化剂与脂肪或油或与脂肪和油两者的混合物。合适的乳化剂包括但不限于例如天然存在的磷脂，例如大豆卵磷脂；衍生自脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯，例如像脱水山梨糖醇单油酸酯；以及偏酯与环氧乙烷的缩合产物，例如像聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。优选地，亲水性乳化剂与亲脂性乳化剂一起被包括，所述亲脂性乳化剂用作稳定剂。还优选的是包括油和脂肪两者。乳化剂与或不与稳定剂一起构成所谓的乳化蜡，并且蜡与油和脂肪一起构成所谓的乳化软膏基质，其形成乳膏配制品的油性分散相。乳液还可以含有甜味剂、调味剂、防腐剂和/或抗氧化剂。适合于本公开文本的配制品的乳化剂和乳液稳定剂包括Tween 60、Span 80、十六十八醇、肉豆蔻醇、单硬脂酸甘油酯、十二烷基硫酸钠、单独或与蜡一起的二硬脂酸甘油酯或本领域熟知的其他材料。
式(I)的化合物和/或其至少一种药学上可接受的盐还可以例如通过任何药学上可接受的且合适的可注射形式静脉内、皮下和/或肌肉内递送。示例性的可注射形式包括但不限于例如无菌水溶液，其包含可接受的媒介物和溶剂，例如像水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液；无菌水包油微乳液；以及水性或油性悬浮液。
用于肠胃外给予的配制品可以呈水性或非水性等渗无菌注射溶液或悬浮液的形式。这些溶液和悬浮液可以使用提及的用于在供口服给予的配制品中使用的一种或多种载体或稀释剂或者通过使用其他合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂由无菌粉末或颗粒制备。可以将化合物溶于水、聚乙二醇、丙二醇、乙醇、玉米油、棉籽油、花生油、芝麻油、苯甲醇、氯化钠、黄蓍胶和/或各种缓冲剂中。其他佐剂和给药方式在制药领域中是众所周知的。活性成分也可以通过注射作为与合适的载体(包括盐水、右旋糖或水)或与环糊精(即Captisol)、共溶剂增溶(即丙二醇)或胶束增溶(即Tween 80)的组合物来给予。
无菌可注射制剂还可以是在无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或悬浮液，例如作为在1,3-丁二醇中的溶液。可以采用的可接受的媒介物和溶剂包括水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。另外，无菌的固定油通常用作溶剂或悬浮介质。为此目的，可以采用任何温和的固定油，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。此外，脂肪酸(如油酸)可用于制备注射剂。
无菌可注射水包油微乳液可以例如通过以下方式来制备：1)将至少一种式(I)的化合物溶于油相(例如像大豆油和卵磷脂的混合物)中；2)将含式(I)的油相与水和甘油混合物组合；并且3)加工该组合以形成微乳液。
可以根据本领域已知的方法制备无菌水性或油性悬浮液。例如，可以用无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂(例如像1,3-丁二醇)制备无菌水溶液或悬浮液；并且可以用无菌无毒可接受溶剂或悬浮介质(例如像无菌固定油，例如合成的甘油单酯或甘油二酯；和脂肪酸，例如像油酸)制备无菌油性悬浮液。
可用于本公开文本的药物组合物中的药学上可接受的载体、佐剂和媒介物包括但不限于离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、诸如d-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯等自乳化药物递送系统(SEDDS)、诸如Tween等用于药物剂型中的表面活性剂、诸如CREMOPHOR表面活性剂(BASF)等聚乙氧基化蓖麻油、或其他类似的聚合物递送基质、诸如人血清白蛋白等血清蛋白、诸如磷酸盐等缓冲物质、甘氨酸、山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物、水、盐或诸如硫酸鱼精蛋白等电解质、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、胶体二氧化硅、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素基物质、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛脂。诸如α-、β-和γ-环糊精等环糊精或诸如羟烷基环糊精(包括2-和3-羟丙基-环糊精)等化学改性的衍生物或其他溶解的衍生物也可以有利地用于增强本文描述的式的化合物的递送。
本公开文本的药物活性化合物可以根据常规药学方法加工，以产生用于向患者(包括人和其他哺乳动物)给予的药剂。该药物组合物可以经受诸如灭菌等常规制药操作和/或可以含有常规佐剂，如防腐剂、稳定剂、润湿剂、乳化剂、缓冲剂等。片剂和丸剂可以另外用肠溶包衣制备。此类组合物还可以包含佐剂，如润湿剂、甜味剂、调味剂和芳香剂。
给予的化合物的量和用本公开文本的化合物和/或组合物治疗疾病病状的剂量方案取决于多种因素，包括受试者的年龄、体重、性别、医学状况、疾病类型、疾病的严重程度、给药的途径和频率以及所用的具体化合物。因此，剂量方案可以广泛变化，但是可以使用标准方法常规确定。约0.001至100mg/kg体重、优选约0.0025与约50mg/kg体重之间、最优选约0.005至10mg/kg体重之间的日剂量可能是适当的。日剂量能以每天一至四剂给予。其他给药方案包括每周一剂和每两天一剂的循环。
出于治疗目的，本公开文本的活性化合物通常与适合于所示给药途径的一种或多种佐剂组合。如果口服给予，可以将化合物与乳糖、蔗糖、淀粉、链烷酸的纤维素酯、纤维素烷基酯、滑石、硬脂酸、硬脂酸镁、氧化镁、磷酸和硫酸的钠盐和钙盐、明胶、阿拉伯树胶、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮和/或聚乙烯醇混合，并且然后压片或胶囊化以方便给药。此类胶囊剂或片剂可以含有控释配制品，其可以在活性化合物在羟丙基甲基纤维素中的分散体中提供。
本公开文本的药物组合物包含至少一种式(I)的化合物和/或其至少一种药学上可接受的盐和任选地选自任何药学上可接受的载体、佐剂和媒介物的另外的药剂。本公开文本的替代组合物包含本文描述的式(I)的化合物或其前药和药学上可接受的载体、佐剂或媒介物。
本公开文本的化合物抑制PD-1/PD-L1蛋白/蛋白，导致PD-L1阻断。阻断PD-L1可以增强哺乳动物(包括人)针对癌性细胞和感染性疾病的免疫反应。
在一个方面，本公开文本涉及使用式(I)的化合物或其盐在体内治疗受试者，使得抑制癌性肿瘤的生长。可以单独使用式(I)的化合物或其盐来抑制癌性肿瘤的生长。可替代地，式(I)的化合物或其盐可以与其他免疫原性剂或标准癌症治疗结合使用，如下文所述。
在一个实施方案中，本公开文本提供了抑制受试者的肿瘤细胞生长的方法，其包括向该受试者给予治疗有效量的式(I)的化合物或其盐。
在一个实施方案中，提供了一种用于治疗癌症的方法，其包括向有需要的患者给予治疗有效量的式(I)的化合物或其盐。癌症的例子包括使用本公开文本的化合物可以抑制其生长的那些，包括通常对免疫疗法有反应的癌症。供治疗的优选癌症的非限制性例子包括黑色素瘤(例如，转移性恶性黑色素瘤)、肾癌(例如透明细胞癌)、前列腺癌(例如激素难治性前列腺腺癌)、乳腺癌、结肠癌和肺癌(例如非小细胞肺癌)。另外，本公开文本包括使用本公开文本的化合物可以抑制其生长的难治性或复发性恶性肿瘤。
可以使用本公开文本的方法治疗的其他癌症的例子包括骨癌、胰腺癌、皮肤癌、头颈癌、皮肤或眼内恶性黑色素瘤、子宫癌、卵巢癌、直肠癌、肛区癌、胃癌、睾丸癌、子宫癌、输卵管癌、子宫内膜癌、宫颈癌、阴道癌、外阴癌、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、食道癌、小肠癌、内分泌系统癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、慢性或急性白血病(包括急性髓性白血病、慢性髓性白血病、急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞白血病)、儿童实体瘤、淋巴细胞淋巴瘤、膀胱癌、肾癌或尿道癌、肾盂癌、中枢神经系统(CNS)肿瘤、原发性CNS淋巴瘤、肿瘤血管生成、脊髓轴肿瘤、脑干胶质瘤、垂体腺瘤、卡波西肉瘤、表皮样癌、鳞状细胞癌、T细胞淋巴瘤、环境诱发的癌症(包括由石棉诱导的那些)以及所述癌症的组合。本公开文本还可用于治疗转移性癌症，尤其是表达PD-L1的转移性癌症(Iwai等人(2005)Int.Immunol.17:133-144)。
任选地，式(I)的化合物或其盐可以与另一种免疫原性剂组合，该免疫原性剂是如癌性细胞、纯化的肿瘤抗原(包括重组蛋白、肽和碳水化合物分子)、细胞和用编码免疫刺激细胞因子的基因转染的细胞(He等人(2004)J.Immunol.173:4919-28)。可以使用的肿瘤疫苗的非限制性例子包括黑色素瘤抗原的肽(如gp100、MAGE抗原、Trp-2、MART1和/或酪氨酸酶的肽)或转染以表达细胞因子GM-CSF的肿瘤细胞。
在人中，已经显示一些肿瘤具有免疫原性，如黑色素瘤。预计通过PD-L1阻断提高T细胞激活的阈值，预期肿瘤反应在宿主中被激活。
PD-L1阻断可以与疫苗接种方案组合。已经设计了许多用于针对肿瘤的疫苗接种的实验策略(参见Rosenberg,S.,2000,Development of Cancer Vaccines,ASCOEducational Book Spring:60-62；Logothetis,C.,2000,ASCO Educational BookSpring:300-302；Khayat,D.2000,ASCO Educational Book Spring:414-428；Foon,K.2000,ASCO Educational Book Spring:730-738；还参见Restifo,N.和Sznol,M.,CancerVaccines,第61章,第3023-3043页在DeVita,V.等人(编辑),1997,Cancer:Principles andPractice of Oncology.第5版)。在这些策略之一中，使用自体或同种异体肿瘤细胞制备疫苗。已经显示，当肿瘤细胞被转导以表达GM-CSF时，这些细胞疫苗是最有效的。已经显示GM-CSF是用于肿瘤疫苗接种的抗原呈递的有效力的激活剂(Dranoff等人(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.90:3539-43)。
对各种肿瘤中的基因表达和大规模基因表达模式的研究已经产生了所谓的肿瘤特异性抗原的定义(Rosenberg,S A(1999)Immunity 10:281-7)。在许多情况下，这些肿瘤特异性抗原是在肿瘤和肿瘤产生的细胞中表达的分化抗原，例如黑素细胞抗原gp100、MAGE抗原和Trp-2。更重要的是，许多这些抗原可以显示为宿主中发现的肿瘤特异性T细胞的靶标。PD-L1阻断可以与肿瘤中表达的重组蛋白和/或肽的集合结合使用，以产生针对这些蛋白质的免疫反应。这些蛋白质通常被免疫系统视为自身抗原，并且因此对它们具有耐受性。肿瘤抗原还可以包括蛋白质端粒酶，其是合成染色体端粒所需的并且在超过85％的人类癌症和仅有限数量的体细胞组织中表达(Kim,N等人(1994)Science 266:2011-2013)。(可以通过各种手段保护这些体细胞组织免受免疫攻击)。肿瘤抗原也可以是在癌细胞中表达的“新抗原”，因为改变蛋白质序列或在两个不相关序列之间产生融合蛋白(即费城染色体中的bcr-abl)的体细胞突变，或者来自B细胞肿瘤的独特型。
其他肿瘤疫苗可以包括来自牵涉在人类癌症中的病毒的蛋白质，所述病毒是如人乳头瘤病毒(HPV)、肝炎病毒(HBV、HDV和HCV)和卡波西疱疹肉瘤病毒(KHSV)。可以与PD-L1阻断结合使用的另一种形式的肿瘤特异性抗原是从肿瘤组织本身分离的纯化的热休克蛋白(HSP)。这些热休克蛋白含有来自肿瘤细胞的蛋白质片段，并且这些HSP在递送至抗原呈递细胞时高效引发肿瘤免疫(Suot,R&Srivastava,P(1995)Science 269:1585-1588；Tamura,Y.等人(1997)Science 278:117-120)。
树突细胞(DC)是有效力的抗原呈递细胞，其可以用于引发抗原特异性反应。DC可以离体产生并加载各种蛋白质和肽抗原以及肿瘤细胞提取物(Nestle,F.等人(1998)Nature Medicine 4:328-332)。DC还可以通过遗传手段转导以也表达这些肿瘤抗原。出于免疫目的，DC还已经直接与肿瘤细胞融合(Kugler,A.等人(2000)Nature Medicine 6:332-336)。作为一种疫苗接种方法，DC免疫可以与PD-L1阻断有效组合以激活更有效力的抗肿瘤反应。
PD-L1阻断还可以与标准癌症治疗组合。PD-L1阻断可以与化学治疗方案有效组合。在这些情况下，可以减少给予的化学治疗剂的剂量(Mokyr,M.等人(1998)CancerResearch 58:5301-5304)。这种组合的例子是本公开文本的化合物与达卡巴嗪组合用于治疗黑色素瘤。这种组合的另一个例子是本公开文本的化合物与白细胞介素-2(IL-2)组合用于治疗黑色素瘤。组合使用PD-L1阻断和化学疗法背后的科学原理是，作为大多数化学治疗化合物的细胞毒作用的结果的细胞死亡应该导致抗原呈递途径中肿瘤抗原水平的增加。可能通过细胞死亡导致与PD-L1阻断协同作用的其他组合疗法是放射、手术和激素剥夺。这些方案中的每一种都在宿主中产生肿瘤抗原的来源。血管生成抑制剂也可以与PD-L1阻断剂组合。抑制血管生成导致肿瘤细胞死亡，其可以将肿瘤抗原供给宿主抗原呈递途径。
本公开文本的化合物还可以与将表达Fcα或Fcγ受体的效应细胞靶向肿瘤细胞的双特异性化合物组合使用(参见例如，美国专利号5,922,845和5,837,243)。双特异性化合物可以用于靶向两种单独的抗原。例如，已经使用抗Fc受体/抗肿瘤抗原(例如，Her-2/neu)双特异性化合物将巨噬细胞靶向肿瘤部位。这种靶向可以更有效地激活肿瘤特异性反应。这些反应的T细胞臂将通过使用PD-L1阻断来增强。可替代地，可以通过使用与肿瘤抗原和树突细胞特异性细胞表面标志物结合的双特异性化合物将抗原直接递送至DC。
肿瘤通过各种各样的机制逃避宿主免疫监视。许多这些机制可以通过由肿瘤表达并且具免疫抑制性的蛋白质的失活来克服。这些尤其包括TGF-β(Kehrl,J.等人(1986)J.Exp.Med.163:1037-1050)、IL-10(Howard,M.&O'Garra,A.(1992)Immunology Today 13:198-200)和Fas配体(Hahne,M.等人(1996)Science 274:1363-1365)。结合并阻断这些实体中的每一种的抑制剂可以与本公开文本的化合物组合使用以抵消免疫抑制剂的作用并且有利于宿主的肿瘤免疫反应。
激活宿主免疫反应性的化合物可以与PD-L1阻断组合使用。这些包括树突细胞表面上的分子，其激活DC功能和抗原呈递。抗CD40化合物能够有效地替代T细胞辅助活性(Ridge,J.等人(1998)Nature 393:474-478)并且可以与PD-L1阻断结合使用(Ito,N.等人(2000)Immunobiology 201(5)527-40)。将化合物激活为T细胞共刺激分子如CTLA-4(例如，美国专利号5,811,097)、OX-40(Weinberg,A.等人(2000)Immunol 164:2160-2169)、4-1BB(Melero,I.等人(1997)Nature Medicine 3:682-685(1997))和ICOS(Hutloff,A.等人(1999)Nature 397:262-266)也可以提供增加水平的T细胞激活。
骨髓移植目前用于治疗多种造血来源的肿瘤。虽然移植物抗宿主病是这种治疗的结果，但是可以从移植物抗肿瘤反应获得治疗益处。PD-L1阻断可以用于增加供体移植的肿瘤特异性T细胞的有效性。
本公开文本的其他方法用于治疗已经暴露于特定毒素或病原体的患者。因此，本公开文本的另一个方面提供了治疗受试者的感染性疾病的方法，其包括向该受试者给予治疗有效量的式(I)的化合物或其盐。
类似于如上文讨论的其对肿瘤的应用，式(I)的化合物或其盐可以单独使用，或作为佐剂与疫苗组合使用，以刺激针对病原体、毒素和自身抗原的免疫反应。这种治疗方法可能特别有用的病原体的例子包括目前没有有效疫苗的病原体或常规疫苗不完全有效的病原体。这些包括但不限于HIV、肝炎病毒(甲型、乙型、丙型或丁型)、流感病毒、疱疹病毒、贾第虫(Giardia)、疟原虫(Malaria)、利什曼原虫(Leishmania)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas Aeruginosa)。PD-L1阻断对于在感染过程中呈现改变的抗原的诸如HIV等剂的确定感染特别有用。这些新型表位在给药时被识别为外源，因此引起强烈的T细胞反应，其不会被PD-1的负信号抑制。
引起可通过本公开文本的方法治疗的感染的致病病毒的一些例子包括HIV、肝炎病毒(甲型、乙型、丙型或丁型)、疱疹病毒(例如，VZV、HSV-1、HAV-6、HHv-7、HHV-8、HSV-2、CMV和爱泼斯坦-巴尔病毒(Epstein Barr virus))、腺病毒、流感病毒、黄病毒、埃可病毒、鼻病毒、柯萨奇病毒、冠状病毒(cornovirus)、呼吸道合胞病毒、腮腺炎病毒、轮状病毒、麻疹病毒、风疹病毒、细小病毒、痘苗病毒、HTLV病毒、登革热病毒、乳头瘤病毒、软疣病毒、脊髓灰质炎病毒、狂犬病病毒、JC病毒和虫媒病毒性脑炎病毒。
引起可通过本公开文本的方法治疗的感染的致病细菌的一些例子包括衣原体(chlamydia)、立克次体细菌(rickettsial bacteria)、分枝杆菌(mycobacteria)、葡萄球菌(staphylococci)、链球菌(streptococci)、肺炎球菌(pneumonococci)、脑膜炎球菌(meningococci)和淋球菌(conococci)、克雷伯菌(klebsiella)、变形杆菌(proteus)、沙雷菌(serratia)、假单胞菌(pseudomonas)、军团菌(legionella)、白喉、沙门氏菌(salmonella)、杆菌(bacilli)、霍乱、破伤风、肉毒杆菌、炭疽、鼠疫、钩端螺旋体病和莱姆病细菌。
引起可通过本公开文本的方法治疗的感染的致病真菌的一些例子包括念珠菌(Candida)(白色念珠菌(albicans)、克柔念珠菌(krusei)、光滑念珠菌(glabrata)、热带念珠菌(tropicalis)等)、新型隐球菌(Cryptococcus neoformans)、曲霉(Aspergillus)(烟曲霉(fumigatus)、黑曲霉(niger)等)、属毛霉目(Genus Mucorales)(毛霉菌属(mucor)、犁头霉属(absidia)、根霉属(rhizophus))、申克孢子丝菌(Sporothrix schenkii)、皮炎芽生菌(Blastomyces dermatitidis)、巴西副球孢子菌(Paracoccidioides brasiliensis)、粗球孢子菌(Coccidioides immitis)和荚膜组织胞浆菌(Histoplasma capsulatum)。
引起可通过本公开文本的方法治疗的感染的致病寄生虫的一些例子包括溶组织内阿米巴(Entamoeba histolytica)、结肠小袋纤毛虫(Balantidium coli)、福氏耐格里阿米巴(Naegleriafowleri)、棘阿米巴属物种(Acanthamoeba sp.)、蓝氏贾第虫(Giardialambia)、隐孢子虫属物种(Cryptosporidium sp.)、卡氏肺孢子虫(Pneumocystiscarinii)、间日疟原虫(Plasmodium vivax)、微小巴贝虫(Babesia microti)、布氏锥虫(Trypanosoma brucei)、克氏锥虫(Trypanosoma cruzi)、杜氏利什曼原虫(Leishmaniadonovani)、刚地弓形虫(Toxoplasma gondi)和巴西日圆线虫(Nippostrongylusbrasiliensis)。
在所有上述方法中，PD-L1阻断可以与其他形式的免疫疗法组合，该其他形式的免疫疗法是如细胞因子治疗(例如，干扰素、GM-CSF、G-CSF、IL-2)或提供增强的肿瘤抗原呈递的双特异性抗体疗法(参见例如，Holliger(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90:6444-6448；Poljak(1994)Structure 2:1121-1123)、疫苗或修饰基因表达的药剂。
本公开文本的化合物可以引起和放大自身免疫反应。实际上，使用肿瘤细胞和肽疫苗诱导抗肿瘤反应揭示到，许多抗肿瘤反应涉及抗自身反应性(在van Elsas等人同上的抗CTLA-4+GM-CSF修饰的B16黑色素瘤中观察到的脱色素；在Trp-2接种小鼠中的脱色素(Overwijk,W.等人(1999)Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.96:2982-2987)；由TRAMP肿瘤细胞疫苗诱发的自身免疫性前列腺炎(Hurwitz,A.(2000)同上)，黑色素瘤肽抗原疫苗接种和在人临床试验中观察到的白癜风(Rosenberg,S A和White,D E(1996)J.ImmunotherEmphasis Tumor Immunol 19(1):81-4)。
因此，可以考虑将抗PD-L1阻断与各种自身蛋白结合使用，以便设计疫苗接种方案以有效地产生针对这些自身蛋白的免疫反应用于疾病治疗。例如，阿尔茨海默病涉及Aβ肽以淀粉样沉积物在大脑中的不适当积累；针对淀粉样蛋白的抗体反应能够清除这些淀粉样沉积物(Schenk等人,(1999)Nature400:173-177)。
其他自身蛋白也可以用作靶标，例如用于治疗过敏和哮喘的IgE以及用于类风湿性关节炎的TNFα。最后，可以通过使用式(I)的化合物或其盐诱导针对各种激素的抗体反应。针对生殖激素的中和抗体反应可以用于避孕。针对特定肿瘤生长所需的激素和其他可溶性因子的中和抗体反应也可以被认为是可能的疫苗接种靶标。
如上文针对使用抗PD-L1抗体描述的类似方法可以用于诱导治疗性自身免疫反应，以治疗具有其他自身抗原的不适当积累的患者，所述其他自身抗原是如淀粉样沉积物(包括在阿尔茨海默病中的Aβ)、细胞因子(如TNFα)和IgE。
本公开文本的化合物可以通过共给予式(I)的化合物或其盐与目标抗原(例如，疫苗)来刺激抗原特异性免疫反应。因此，在另一个方面，本公开文本提供了增强受试者针对抗原的免疫反应的方法，其包括向该受试者给予：(i)该抗原；和(ii)式(I)的化合物或其盐，使得该受试者针对该抗原的免疫反应得以增强。该抗原可以是例如肿瘤抗原、病毒抗原、细菌抗原或来自病原体的抗原。此类抗原的非限制性例子包括在以上部分中讨论的那些，如上文讨论的肿瘤抗原(或肿瘤疫苗)或来自上述病毒、细菌或其他病原体的抗原。
如前所述，本公开文本的化合物可以与一种或多种其他治疗剂(例如，细胞毒剂、放射性毒剂或免疫抑制剂)共给予。本公开文本的化合物可以在其他治疗剂之前、之后或与其同时给予，或者可以与其他已知疗法(例如抗癌疗法，例如放射)共给予。此类治疗剂尤其包括抗肿瘤剂，如多柔比星(阿霉素)、顺铂硫酸博来霉素、卡莫司汀、苯丁酸氮芥、达卡巴嗪(decarbazin)和环磷酰胺羟基脲，它们本身仅在对患者有毒或亚毒的水平下有效。顺铂以100mg/剂每四周一次静脉内给予，并且阿霉素以60-75mg/mL的剂量每21天一次静脉内给予。式(I)的化合物或其盐与化学治疗剂的共给予提供了两种抗癌剂，它们通过不同的机制起作用，这对人肿瘤细胞产生细胞毒性作用。这种共给药可以解决由于药物抗性的发展或肿瘤细胞的抗原性变化而导致它们与抗体不反应的问题。
包含式(I)的化合物或其盐和使用说明书的试剂盒也在本公开文本的范围内。该试剂盒还可以含有至少一种另外的试剂。试剂盒通常包括指示试剂盒内容物的预期用途的标签。术语标签包括在试剂盒上或与试剂盒一起提供的任何书写或记录材料，或者以其他方式随试剂盒一起提供的任何书写或记录材料。
当与本公开文本的化合物组合使用时，上述其他治疗剂可以例如以Physicians’Desk Reference(PDR)中指出的那些量使用或者如由本领域普通技术人员以其他方式确定的那些量使用。在本公开文本的方法中，此类其他治疗剂可以在给予本发明化合物之前、与其同时或之后给予。
在一个实施方案中，式(I)的化合物抑制PD-1/PD-L1相互作用，其IC50值为10μM或更小(例如0.01至10μM)，如通过PD-1/PD-L1均相时间分辨荧光(HTRF)结合测定测量的。优选地，式(I)的化合物抑制PD-1/PD-L1相互作用，其IC50值为1μM或更小(例如0.01至1μM)。
实施例
在以下实施例中进一步定义本公开文本。应该理解的是，实施例仅以说明的方式给出。根据以上讨论和实施例，本领域技术人员可以确定本公开文本的本质特征，并且在不脱离其精神和范围的情况下，可以进行各种改变和修改以使本公开文本适应各种用途和条件。结果，本公开文本不受下文阐述的说明性实施例的限制，而是由所附权利要求限定。
本文使用的缩写是本领域技术人员已知的。例子是：THF是四氢呋喃的缩写；DCM是二氯甲烷的缩写；DMF是N,N-二甲基甲酰胺的缩写；DMSO是二甲亚砜的缩写；TFA是三氟乙酸的缩写；AcOH是乙酸的缩写；ACN或MeCN是乙腈的缩写；MeOH是甲醇的缩写；NH4OAc是乙酸铵的缩写；DIAD是偶氮二甲酸二异丙酯的缩写；h是小时的缩写；min是分钟的缩写；DCE是1,2-二氯乙烷的缩写；EtOH是乙醇的缩写；rt或RT是保留时间或室温的缩写(背景将指示)；并且DIPEA是二异丙基乙胺的缩写。
通用方案1、2和3表示可用于制备实施例的一些方法。据了解，交叉偶联配偶体、溴化物和硼酸(或硼酸酯)是可互换的。
方案1
Or heteroaryl methanol 或杂芳基甲醇
Amine or amino acid 胺或氨基酸
Heteroaryl 杂芳基
方案2
Or heteroaryl methanol 或杂芳基甲醇
Amine or amino acid 胺或氨基酸
方案3
Leaving group 离去基团
Amine or amino acid 胺或氨基酸
实验：
中间体：(2-甲基-3-(喹啉-7-基)苯基)甲醇
向密封管中添加THF(75mL)、水(18mL)、喹啉-7-硼酸(500mg，2.89mmol)、(3-溴-2-甲基苯基)甲醇(0.581g，2.89mmol)、磷酸三钾(1.53g，7.23mmol)和第2代XPhos预催化剂(0.068g，0.087mmol)。将混合物用氮气脱气/冲洗3次，然后在室温下搅拌2天。将粗反应混合物用DCM稀释，用水、盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并蒸发。将粗产物在硅胶上使用25％-80％乙酸乙酯/己烷纯化，以得到0.42g呈黄色固体的(2-甲基-3-(喹啉-7-基)苯基)甲醇(57％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.94(dd,J＝4.2,1.7Hz,1H),8.42(d,J＝8.3Hz,1H),8.04(d,J＝8.3Hz,1H),7.88(s,1H),7.62-7.51(m,2H),7.47(d,J＝7.1Hz,1H),7.33-7.26(m,1H),7.25-7.19(m,1H),5.15(t,J＝5.1Hz,1H),4.59(d,J＝4.6Hz,2H),2.17(s,3H)。
中间体：5-氯-2-羟基-4-((2-甲基-3-(喹啉-7-基)苄基)氧基)苯甲醛
在0℃下将THF(12mL)中的偶氮二甲酸二异丙酯(184mg，0.911mmol)滴加到THF(12mL)中的(2-甲基-3-(喹啉-7-基)苯基)甲醇(206.5mg，0.828mmol)、5-氯-2,4-二羟基苯甲醛(157mg，0.911mmol)和三苯基膦(239mg，0.911mmol)的溶液中。搅拌所得混合物并允许达到室温过夜。将反应混合物浓缩，然后在硅胶上使用10％-80％乙酸乙酯/己烷纯化，以得到280mg(71％产率)呈黄色固体的5-氯-2-羟基-4-((2-甲基-3-(喹啉-7-基)苄基)氧基)苯甲醛。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Waters Aquity BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm柱，梯度为在1.5分钟内2％-98％B(B＝100％HPLC级乙腈/0.05％三氟乙酸)，(A＝100％HPLC级水/0.05％三氟乙酸)，以0.8mL/分钟的流速保持0.5分钟。LCMS Rt(保留时间)＝1.059min.,m/z 404.2(M+H)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.06(s,1H),8.96(dd,J＝4.3,1.7Hz,1H),8.88(m,2H),8.45(dd,J＝8.4,0.8Hz,1H),8.08(d,J＝8.4Hz,1H),7.95-7.89(m,1H),7.73(s,1H),7.63-7.56(m,2H),7.43-7.34(m,1H),6.90(s,1H),5.38(s,2H),2.29(s,3H)。
中间体：5-((4-氯-2-甲酰基-5-((2-甲基-3-(喹啉-7-基)苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈
向小圆底烧瓶(RBF)中添加碳酸铯(452mg，1.387mmol)、5-(氯甲基)烟腈(212mg，1.387mmol)、5-氯-2-羟基-4-((2-甲基-3-(喹啉-7-基)苄基)氧基)苯甲醛(280mg，0.693mmol)和DMF(10mL)。将混合物在室温下搅拌过夜。将粗混合物用10mL DCM稀释，用4滴0.1M HCl水溶液中和，萃取，用水、盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并蒸发。将所得固体用冷(0℃)乙醚研磨，以得到179mg(37％产率)呈黄色固体的5-((4-氯-2-甲酰基-5-((2-甲基-3-(喹啉-7-基)苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Waters BEH 1.7μm C18，2x 50mm柱，梯度为在3分钟内0-100％B(B＝95％HPLC级乙腈/10mM乙酸铵/5％HPLC级水)，(A＝95％HPLC级水/10mM乙酸铵/5％HPLC级乙腈)，以1mL/分钟的流速保持0.5分钟。LCMS Rt＝2.07min.,m/z 520.3(M+H)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.23(s,1H),9.03(d,J＝2.6Hz,2H),8.95(d,J＝2.9Hz,1H),8.54(s,1H),8.44(d,J＝8.1Hz,1H),8.08(d,J＝8.1Hz,1H),7.97-7.88(m,1H),7.74(s,1H),7.63-7.54(m,3H),7.38(d,J＝4.0Hz,2H),7.28(s,1H),5.50(s,1H),5.46(s,1H),2.30(s,3H)。
实施例1001：(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(喹啉-7-基)苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸
向带螺旋盖的小瓶中添加5-((4-氯-2-甲酰基-5-((2-甲基-3-(喹啉-7-基)苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈(40mg，0.077mmol)、(R)-2-氨基-3-羟基-2-甲基丙酸(27.5mg，0.231mmol)、三乙酰氧基硼氢化钠(48.9mg，0.231mmol)和DMF(3mL)。盖上小瓶，并且将混合物在室温下振荡过夜。使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μmC18，19x 200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经35分钟20％-85％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。产物的产量为4.5mg(10％产率)，并且通过LCMS分析估计的其纯度为99％。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.03(s,1H),8.98(s,1H),8.93(d,J＝4.0Hz,1H),8.49(s,1H),8.44(d,J＝8.4Hz,1H),8.07(d,J＝8.4Hz,1H),7.91(s,1H),7.62-7.55(m,3H),7.52(m,1H),7.39-7.32(m,2H),7.13(s,1H),5.37(s,2H),5.33(s,2H),4.04(m,2H),3.75-3.69(m,1H),3.60-3.52(m,1H),2.28(s,3H),1.26(s,3H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.58min；ESI-MS(+)m/z＝623.4(M+H),ESI-MS(-)m/z＝621.3(M-H)。
分析条件2：保留时间＝2.66min；ESI-MS(+)m/z＝623.5(M+H),ESI-MS(-)m/z＝621.5(M-H)。
以与实施例1001类似的方式制备以下实施例：
中间体：(2-甲基-3-(喹啉-3-基)苯基)甲醇
将粗产物在硅胶上使用25％-80％乙酸乙酯/己烷纯化，以得到0.48g呈黄色固体的(2-甲基-3-(喹啉-3-基)苯基)甲醇(99％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.85(d,J＝2.2Hz,1H),8.30(d,J＝2.0Hz,1H),8.06(dd,J＝14.2,8.3Hz,2H),7.83-7.76(m,1H),7.70-7.62(m,1H),7.50(d,J＝7.6Hz,1H),7.36-7.30(m,1H),7.29-7.21(m,1H),5.17(t,J＝5.4Hz,1H),4.60(d,J＝5.4Hz,2H),2.18(s,3H)。
中间体：5-氯-2-羟基-4-((2-甲基-3-(喹啉-3-基)苄基)氧基)苯甲醛
将粗产物在硅胶上使用10％-80％乙酸乙酯/己烷纯化，以得到0.21g呈黄色固体的5-氯-2-羟基-4-((2-甲基-3-(喹啉-3-基)苄基)氧基)苯甲醛(74％产率)。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：WatersAquity BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm柱，梯度为在1.5分钟内2％-98％B(B＝100％HPLC级乙腈/0.05％三氟乙酸)，(A＝100％HPLC级水/0.05％三氟乙酸)，以0.8mL/分钟的流速保持0.5分钟。LCMS Rt(保留时间)＝1.125min.,m/z 403.9(M+H)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ11.44(s,1H),9.72(s,1H),8.93(d,J＝2.2Hz,1H),8.18(d,J＝8.6Hz,1H),8.12(d,J＝2.0Hz,1H),7.88(d,J＝8.3Hz,1H),7.77(m,1H),7.65-7.55(m,3H),7.40-7.36(m,1H),6.66(s,1H),5.26(s,2H),2.33(s,3H)。
中间体：5-((4-氯-2-甲酰基-5-((2-甲基-3-(喹啉-3-基)苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈
获得115mg呈黄色固体的5-((4-氯-2-甲酰基-5-((2-甲基-3-(喹啉-3-基)苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈(38％产率)。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Waters Aquity BEH 1.7μm C18，2.1x50mm柱，梯度为在1.5分钟内2％-98％B(B＝100％HPLC级乙腈/0.05％三氟乙酸)，(A＝100％HPLC级水/0.05％三氟乙酸)，以0.8mL/分钟的流速保持0.5分钟。
LCMS Rt＝1.140min.,m/z 520.1(M+H)。
实施例1002：(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(喹啉-3-基)苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸
使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μm C18，19x200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经15分钟40％-80％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。产物的产量为7.8mg(16％产率)，并且通过LCMS分析估计的其纯度为99％。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.02(s,1H),8.98(s,1H),8.86(s,1H),8.48(s,1H),8.34(s,1H),8.12-8.03(m,2H),7.82(t,J＝7.7Hz,1H),7.67(t,J＝7.7Hz,1H),7.60-7.52(m,2H),7.42-7.33(m,2H),7.12(s,1H),5.35(m,4H),4.03(s,2H),3.71-3.69(m,1H),3.59-3.53(m,1H),2.29(s,3H),1.25(s,3H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.60min；ESI-MS(+)m/z＝623.4(M+H),ESI-MS(-)m/z＝621.4(M-H)。
分析条件2：保留时间＝2.71min；ESI-MS(+)m/z＝623.4(M+H),ESI-MS(-)m/z＝621.3(M-H)。
实施例1003：(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(喹啉-3-基)苄基)氧基)苄基)哌啶-2-甲酸
使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μm C18，19x200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经30分钟25％-85％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。产物的产量为4.8mg(10％产率)，并且通过LCMS分析估计的其纯度为99％。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.99(d,J＝5.1Hz,2H),8.86(s,1H),8.46(s,1H),8.35(s,1H),8.12-8.03(m,2H),7.82(t,J＝7.7Hz,1H),7.67(t,J＝7.3Hz,1H),7.61-7.55(m,1H),7.53(s,1H),7.43-7.35(m,2H),7.14(s,1H),5.36(s,2H),5.32(s,2H),4.04(d,J＝12.8Hz,1H),3.88(t,J＝6.4Hz,1H),3.26-3.17(m,1H),2.99(m,1H),2.25(m,1H),2.29(s,3H),1.96-1.87(m,1H),1.68(d,J＝9.9Hz,1H),1.54(m,3H),1.36(m,1H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.69min；ESI-MS(+)m/z＝633.5(M+H),ESI-MS(-)m/z＝631.4(M-H)。
分析条件2：保留时间＝2.75min；ESI-MS(+)m/z＝633.5(M+H),ESI-MS(-)m/z＝631.4(M-H)。
中间体：(2-甲基-3-(喹啉-2-基)苯基)甲醇
将粗产物在硅胶上使用25％-80％乙酸乙酯/己烷纯化，以得到0.77g呈黄色固体的(2-甲基-3-(喹啉-2-基)苯基)甲醇(85％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.23(d,J＝8.3Hz,1H),8.18(d,J＝8.6Hz,1H),7.89(d,J＝8.1Hz,1H),7.76(m,1H),7.71-7.64(m,1H),7.62-7.54(m,1H),7.48(m,1H),7.46-7.41(m,1H),7.39-7.31(m,1H),4.80(d,J＝5.6Hz,2H),2.34(s,3H)。
5-氯-2-羟基-4-((2-甲基-3-(喹啉-2-基)苄基)氧基)苯甲醛
将粗产物在硅胶上使用10％-70％乙酸乙酯/己烷纯化，以得到0.14g呈黄色固体的5-氯-2-羟基-4-((2-甲基-3-(喹啉-2-基)苄基)氧基)苯甲醛(25％产率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.05(s,1H),8.48(d,J＝8.4Hz,1H),8.09-8.02(m,2H),7.82(m,1H),7.73(s,1H),7.68-7.64(m,2H),7.62-7.61(m,1H),7.49(dd,J＝7.6,1.1Hz,1H),7.45-7.38(m,1H),6.90(s,1H),5.39(s,2H),2.33(s,3H)。
中间体：5-((4-氯-2-甲酰基-5-((2-甲基-3-(喹啉-2-基)苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈
获得82mg呈米色固体的5-((4-氯-2-甲酰基-5-((2-甲基-3-(喹啉-3-基)苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈(46％产率)。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Waters Aquity BEH 1.7μm C18，2.1x50mm柱，梯度为在1.5分钟内2％-98％B(B＝100％HPLC级乙腈/0.05％三氟乙酸)，(A＝100％HPLC级水/0.05％三氟乙酸)，以0.8mL/分钟的流速保持0.5分钟。LCMS Rt＝1.134min.,m/z 520.0(M+H)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.25(s,1H),9.05(d,J＝1.7Hz,2H),8.57(m,1H),8.48(d,J＝8.4Hz,1H),8.10-8.02(m,2H),7.82(m,1H),7.78-7.73(m,1H),7.71-7.62(m,3H),7.51(dd,J＝7.6,1.1Hz,1H),7.44-7.37(m,1H),7.32(s,1H),5.55-5.46(m,4H),2.40-2.33(m,3H)。
实施例1004：(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(喹啉-2-基)苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸
使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μm C18，19x200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经15分钟30％-80％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。产物的产量为16.1mg(60％产率)，并且通过LCMS分析估计的其纯度为98％。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.03(d,J＝14.3Hz,2H),8.52(s,1H),8.47(d,J＝8.4Hz,1H),8.05(t,J＝7.3Hz,2H),7.81(t,J＝7.5Hz,1H),7.70-7.63(m,2H),7.61-7.55(m,2H),7.48(d,J＝7.3Hz,1H),7.40-7.33(m,1H),7.16(s,1H),5.37(m,4H),3.96(s,2H),3.62(m,1H),3.53(m,1H),2.34(s,3H),1.24(s,3H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.60min；ESI-MS(+)m/z＝623.5(M+H),ESI-MS(-)m/z＝621.4(M-H)。
分析条件2：保留时间＝2.82min；ESI-MS(+)m/z＝623.4(M+H),ESI-MS(-)m/z＝621.4(M-H)。
中间体：(2-甲基-3-(喹啉-6-基)苯基)甲醇
将粗产物在硅胶上使用10％-70％乙酸乙酯/己烷纯化，以得到0.28g呈黄色固体的(2-甲基-3-(喹啉-6-基)苯基)甲醇(39％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.96(dd,J＝4.3,1.6Hz,1H),8.23-8.12(m,2H),7.74(d,J＝2.0Hz,1H),7.69(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),7.46(dt,J＝8.1,3.9Hz,2H),7.36-7.29(m,2H),4.82(d,J＝5.6Hz,2H),2.29(s,3H)。
中间体：5-氯-2-羟基-4-((2-甲基-3-(喹啉-6-基)苄基)氧基)苯甲醛
将粗产物在硅胶上使用10％-70％乙酸乙酯/己烷纯化，以得到0.160g呈黄色固体的5-氯-2-羟基-4-((2-甲基-3-(喹啉-6-基)苄基)氧基)苯甲醛(45％产率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.05(s,1H),8.95(dd,J＝4.3,1.7Hz,1H),8.44(dd,J＝8.6,1.0Hz,1H),8.10(d,J＝8.7Hz,1H),7.95(d,J＝2.0Hz,1H),7.77-7.68(m,2H),7.62-7.55(m,2H),7.42-7.36(m,2H),6.90(s,1H),5.37(s,2H),2.27(s,3H)。
中间体：5-((4-氯-2-甲酰基-5-((2-甲基-3-(喹啉-6-基)苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈
获得165mg呈橙色固体的5-((4-氯-2-甲酰基-5-((2-甲基-3-(喹啉-6-基)苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈(65％产率)。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Waters Aquity BEH 1.7μm C18，2.1x50mm柱，梯度为在1.5分钟内2％-98％B(B＝100％HPLC级乙腈/0.05％三氟乙酸)，(A＝100％HPLC级水/0.05％三氟乙酸)，以0.8mL/分钟的流速保持0.5分钟。
LCMS Rt＝1.090min.,m/z 520.0(M+H)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.25(s,1H),9.05(m,2H),8.95(dd,J＝4.2,1.7Hz,1H),8.57(t,J＝2.0Hz,1H),8.48-8.41(m,1H),8.11(d,J＝8.7Hz,1H),7.96(d,J＝1.9Hz,1H),7.79-7.72(m,2H),7.63-7.56(m,2H),7.42-7.36(m,2H),7.32(s,1H),5.52(s,2H),5.47(s,2H),2.30(s,3H)。
实施例1005：(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(喹啉-6-基)苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸
使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μm C18，19x200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经15分钟25％-65％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。产物的产量为16.0mg(33％产率)，并且通过LCMS分析估计的其纯度为99％。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.03(d,J＝15.4Hz,2H),8.94(d,J＝4.0Hz,1H),8.51(s,1H),8.43(d,J＝8.4Hz,1H),8.10(d,J＝8.4Hz,1H),7.98-7.90(m,1H),7.74(d,J＝8.4Hz,1H),7.63-7.51(m,3H),7.40-7.29(m,2H),7.15(s,1H),5.36(m,4H),3.97(s,2H),3.66-3.50(m,2H),2.29(s,3H),1.24(s,3H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.54min；ESI-MS(+)m/z＝623.4(M+H),ESI-MS(-)m/z＝621.4(M-H)。
分析条件2：保留时间＝2.82min；ESI-MS(+)m/z＝623.4(M+H),ESI-MS(-)m/z＝621.4(M-H)。
中间体：(2-甲基-3-(喹喔啉-2-基)苯基)甲醇
将粗产物在硅胶上使用20％-80％乙酸乙酯/己烷纯化，以得到0.69g呈黄色固体的(2-甲基-3-(喹喔啉-2-基)苯基)甲醇(79％产率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.08(s,1H),8.21-8.10(m,2H),7.95-7.85(m,2H),7.61-7.57(m,1H),7.47(dd,J＝7.6,1.1Hz,1H),7.42-7.35(m,1H),5.24(t,J＝5.4Hz,1H),4.63(d,J＝5.4Hz,2H),2.28(s,3H)。
中间体：5-氯-2-羟基-4-((2-甲基-3-(喹喔啉-2-基)苄基)氧基)苯甲醛
将粗产物在硅胶上使用10％-70％乙酸乙酯/己烷纯化，以得到0.360g呈黄色固体的5-氯-2-羟基-4-((2-甲基-3-(喹喔啉-2-基)苄基)氧基)苯甲醛(17％产率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.05(s,1H),9.12(s,1H),8.15(m,2H),7.92(m,2H),7.71(m,2H),7.47(m,2H),6.87(s,1H),5.40(s,2H),2.38(s,3H)。
中间体：5-((4-氯-2-甲酰基-5-((2-甲基-3-(喹喔啉-2-基)苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈
获得341mg呈黄色固体的5-((4-氯-2-甲酰基-5-((2-甲基-3-(喹喔啉-2-基)苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈(99％产率)。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Waters Aquity BEH 1.7μm C18，2.1x50mm柱，梯度为在1.5分钟内2％-98％B(B＝100％HPLC级乙腈/0.05％三氟乙酸)，(A＝100％HPLC级水/0.05％三氟乙酸)，以0.8mL/分钟的流速保持0.5分钟。
LCMS Rt＝1.384min.,m/z 521.0(M+H)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.25(s,1H),9.14(s,1H),9.05(dd,J＝9.7,2.0Hz,2H),8.62-8.55(m,1H),8.22-8.13(m,2H),7.96-7.90(m,2H),7.75(s,1H),7.71(d,J＝7.3Hz,1H),7.58-7.57(m,1H),7.46(t,J＝7.6Hz,1H),7.37(s,1H),5.55(m,4H),2.41(s,3H)。
实施例1006：(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(喹喔啉-2-基)苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸
使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μm C18，19x200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经15分钟25％-65％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。产物的产量为4.3mg(9.4％产率)，并且通过LCMS分析估计的其纯度为95％。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.11(s,1H),9.02(d,J＝15.8Hz,2H),8.51(s,1H),8.22-8.11(m,2H),7.99-7.87(m,2H),7.65(d,J＝7.7Hz,1H),7.59(d,J＝7.3Hz,1H),7.56(s,1H),7.42(t,J＝7.7Hz,1H),7.14(s,1H),5.37(m,4H),3.94(s,2H),3.65-3.49(m,2H),2.39(s,3H),1.22(s,3H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.50min；ESI-MS(+)m/z＝624.5(M+H),ESI-MS(-)m/z＝622.4(M-H)。
分析条件2：保留时间＝2.77min；ESI-MS(+)m/z＝624.4(M+H),ESI-MS(-)m/z＝622.4(M-H)。
中间体：(3-(异喹啉-3-基)-2-甲基苯基)甲醇
将粗产物在硅胶上使用25％-80％乙酸乙酯/己烷纯化，以得到0.69g呈黄色固体的(3-(异喹啉-3-基)-2-甲基苯基)甲醇(99％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.40(s,1H),8.17(d,J＝7.8Hz,1H),8.02(d,J＝7.8Hz,1H),7.89(s,1H),7.82(m,1H),7.75-7.68(m,1H),7.52-7.44(m,1H),7.37-7.25(m,2H),5.18(t,J＝5.4Hz,1H),4.60(d,J＝5.4Hz,2H),2.22(s,3H)。
中间体：5-氯-2-羟基-4-((3-(异喹啉-3-基)-2-甲基苄基)氧基)苯甲醛
将粗产物在硅胶上使用10％-70％乙酸乙酯/己烷纯化，以得到0.407g呈黄色固体的5-氯-2-羟基-4-((3-(异喹啉-3-基)-2-甲基苄基)氧基)苯甲醛(33％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.05(s,1H),9.41(s,1H),8.50(br.s.,1H),8.18(d,J＝8.3Hz,1H),8.04(d,J＝8.5Hz,1H),7.93(s,1H),7.83(t,J＝7.4Hz,1H),7.76-7.69(m,1H),7.57(d,J＝6.8Hz,1H),7.48(d,J＝6.8Hz,1H),7.41-7.35(m,1H),6.89(s,1H),5.37(s,2H),2.31(s,3H)。
中间体：5-((4-氯-2-甲酰基-5-((3-(异喹啉-3-基)-2-甲基苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈
获得86mg呈棕褐色固体的5-((4-氯-2-甲酰基-5-((3-(异喹啉-3-基)-2-甲基苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈(25％产率)。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Waters Aquity BEH 1.7μm C18，2.1x50mm柱，梯度为在1.5分钟内2％-98％B(B＝100％HPLC级乙腈/0.05％三氟乙酸)，(A＝100％HPLC级水/0.05％三氟乙酸)，以0.8mL/分钟的流速保持0.5分钟。
LCMS Rt＝1.109min.,m/z 520.1(M+H)。
实施例1007：(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(异喹啉-3-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸
使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μm C18，19x200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经20分钟20％-100％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。产物的产量为7.2mg(17％产率)，并且通过LCMS分析估计的其纯度为100％。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.41(s,1H),9.05(s,1H),9.02(s,1H),8.52(s,1H),8.19(d,J＝8.1Hz,1H),8.04(d,J＝8.1Hz,1H),7.93(s,1H),7.83(t,J＝7.5Hz,1H),7.73(t,J＝7.5Hz,1H),7.60-7.54(m,2H),7.47(d,J＝7.7Hz,1H),7.35(t,J＝7.5Hz,1H),7.16(s,1H),5.36(m,4H),3.98(s,2H),3.66-3.60(m,1H),3.55(m,1H),2.34(s,3H),1.24(s,3H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.59min；ESI-MS(+)m/z＝623.5(M+H),ESI-MS(-)m/z＝621.4(M-H)。
分析条件2：保留时间＝2.84min；ESI-MS(+)m/z＝623.5(M+H),ESI-MS(-)m/z＝621.5(M-H)。
中间体：(3-(异喹啉-7-基)-2-甲基苯基)甲醇
将粗产物在硅胶上使用25％-80％乙酸乙酯/己烷纯化，以得到0.51g呈黄色固体的(3-(异喹啉-7-基)-2-甲基苯基)甲醇(72％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.36(s,1H),8.54(d,J＝5.9Hz,1H),8.04(m,2H),7.89(d,J＝5.9Hz,1H),7.75(dd,J＝8.6,1.7Hz,1H),7.48(d,J＝7.3Hz,1H),7.31(t,J＝7.5Hz,1H),7.27-7.15(m,1H),4.59(m,2H),2.16(s,3H)。
中间体：5-氯-2-羟基-4-((3-(异喹啉-7-基)-2-甲基苄基)氧基)苯甲醛
将粗产物在硅胶上使用10％-80％乙酸乙酯/己烷纯化，以得到0.299g呈黄色固体的5-氯-2-羟基-4-((3-(异喹啉-7-基)-2-甲基苄基)氧基)苯甲醛(41％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.04(s,1H),9.38(s,1H),8.54(d,J＝5.8Hz,1H),8.11-8.03(m,2H),7.90(d,J＝5.5Hz,1H),7.76(d,J＝7.5Hz,1H),7.71(m,1H),7.57(d,J＝7.0Hz,1H),7.42-7.32(m,2H),6.87(s,1H),5.36(s,2H),2.26(s,3H)。
中间体：5-((4-氯-2-甲酰基-5-((3-(异喹啉-7-基)-2-甲基苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈
获得319mg呈棕褐色固体的5-((4-氯-2-甲酰基-5-((3-(异喹啉-7-基)-2-甲基苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈(83％产率)。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Waters Aquity BEH 1.7μm C18，2.1x50mm柱，梯度为在1.5分钟内2％-98％B(B＝100％HPLC级乙腈/0.05％三氟乙酸)，(A＝100％HPLC级水/0.05％三氟乙酸)，以0.8mL/分钟的流速保持0.5分钟。
LCMS Rt＝1.065min.,m/z 520.2(M+H)。
实施例1008：(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(异喹啉-7-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸
使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μm C18，19x200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经20分钟20％-70％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。产物的产量为2mg(10％产率)，并且通过LCMS分析估计的其纯度为99％。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.38(s,1H),9.02(m,2H),8.59-8.47(m,2H),8.12-8.01(m,2H),7.90(d,J＝5.5Hz,1H),7.76(d,J＝7.7Hz,1H),7.62-7.48(m,2H),7.35(m,2H),7.15(s,1H),5.37(s,2H),5.34(s,2H),3.98(br.s.,2H),3.63(m,2H),2.28(s,3H),1.24(s,3H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.53min；ESI-MS(+)m/z＝623.5(M+H),ESI-MS(-)m/z＝621.5(M-H)。
分析条件2：保留时间＝2.68min；ESI-MS(+)m/z＝623.5(M+H),ESI-MS(-)m/z＝621.5(M-H)。
中间体：(3-(异喹啉-6-基)-2-甲基苯基)甲醇
将粗产物在硅胶上使用10％-80％乙酸乙酯/己烷纯化，以得到0.333g呈黄色固体的(3-(异喹啉-6-基)-2-甲基苯基)甲醇(42％产率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.37(s,1H),8.54(d,J＝5.7Hz,1H),8.19(d,J＝8.4Hz,1H),7.91-7.83(m,2H),7.64(dd,J＝8.4,1.4Hz,1H),7.48(d,J＝7.4Hz,1H),7.31(t,J＝7.6Hz,1H),7.22(d,J＝7.4Hz,1H),5.20(t,J＝5.3Hz,1H),4.59(d,J＝5.0Hz,2H),2.16(s,3H)。
中间体：5-氯-2-羟基-4-((3-(异喹啉-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苯甲醛
将粗产物在硅胶上使用10％-80％乙酸乙酯/己烷纯化，以得到0.158g呈黄色固体的5-氯-2-羟基-4-((3-(异喹啉-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苯甲醛(31％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.04(s,1H),9.38(s,1H),8.55(d,J＝5.8Hz,1H),8.21(d,J＝8.8Hz,1H),7.92(s,1H),7.89(d,J＝6.0Hz,1H),7.72(s,1H),7.66(d,J＝7.0Hz,1H),7.58(d,J＝7.3Hz,1H),7.43-7.32(m,2H),6.89(s,1H),5.36(s,2H),2.25(s,3H)。
中间体：5-((4-氯-2-甲酰基-5-((3-(异喹啉-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈
获得136mg呈橙色固体的5-((4-氯-2-甲酰基-5-((3-(异喹啉-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈(67％产率)。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Waters Aquity BEH 1.7μm C18，2.1x50mm柱，梯度为在1.5分钟内2％-98％B(B＝100％HPLC级乙腈/0.05％三氟乙酸)，(A＝100％HPLC级水/0.05％三氟乙酸)，以0.8mL/分钟的流速保持0.5分钟。
LCMS Rt＝1.065min.,m/z 520.0(M+H)。
实施例1009：(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(异喹啉-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸
使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μm C18，19x200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经20分钟20％-70％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。使用以下条件通过制备型LC/MS进一步纯化材料：Waters XBridge 5μm C18，19x 200mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，梯度为经15分钟45％-85％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。产物的产量为1.3mg(3％产率)，并且通过LCMS分析估计的其纯度为100％。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.37(s,1H),9.01(m,2H),8.55(d,J＝5.9Hz,1H),8.50(s,1H),8.21(d,J＝8.4Hz,1H),7.93-7.86(m,2H),7.66(d,J＝7.7Hz,1H),7.56(d,J＝6.2Hz,1H),7.49(s,1H),7.37-7.30(m,2H),7.13(s,1H),5.36(s,2H),5.31(s,2H),3.94-3.86(m,2H),3.53-3.46(m,2H),2.27(s,3H),1.17(s,3H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.52min；ESI-MS(+)m/z＝623.5(M+H),ESI-MS(-)m/z＝621.5(M-H)。
分析条件2：保留时间＝2.64min；ESI-MS(+)m/z＝623.1(M+H),ESI-MS(-)m/z＝621.5(M-H)。
中间体：7-溴-2-氯喹喔啉
在氮气下，向含有喹喔啉-2-醇(10g，68.4mmol)和乙酸(500mL，68.4mmol)的圆底烧瓶(RBF)中逐滴添加溴(3.60mL，69.9mmol)。当添加完成时，将红色混合物在室温下搅拌1.5小时。将所得粗产物过滤，将固体用1L水洗涤并允许风干1小时。将固体溶解在10mLDMSO中，并且添加100mL水。将所得浅黄色固体过滤并真空干燥，以得到12.69g的7-溴喹喔啉-2-醇(74％)。
使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Waters Aquity BEH 1.7μm C18，2x 50mm柱，梯度为在1.5分钟内2％-98％B(B＝1000％HPLC级乙腈/0.05％三氟乙酸)，(A＝100％HPLC级水/0.05％三氟乙酸)，以0.8mL/分钟的流速保持1分钟。
LCMS Rt＝0.859min.,m/z 226.9(M+H)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ12.39(br.s.,1H),8.19(s,1H),7.74-7.68(m,1H),7.46(m,2H)。
向RBF中添加7-溴喹喔啉-2-醇(7.3g，32.4mmol)和三氯氧磷(36.3mL，389mmol)。将反应混合物在90℃下搅拌2.5小时。将粗产物冷却至0℃，然后经60分钟缓慢滴入500mL冰水中。将所得混合物用乙酸乙酯稀释并萃取。将有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将粗产物在硅胶上使用30％-90％DCM/己烷纯化，以得到5.4g(66.4％)呈白色固体的7-溴-2-氯喹喔啉。
使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Waters Aquity BEH 1.7μm C18，2x 50mm柱，梯度为在1.5分钟内2％-98％B(B＝1000％HPLC级乙腈/0.05％三氟乙酸)，(A＝100％HPLC级水/0.05％三氟乙酸)，以0.8mL/分钟的流速保持1分钟。
LCMS Rt＝1.275min.,m/z 244.8(M+H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.06(s,1H),8.35(d,J＝2.3Hz,1H),8.14-8.09(m,1H),8.09-8.04(m,1H)。
中间体：(3-(7-溴喹喔啉-2-基)-2-甲基苯基)甲醇
使用以下方法通过制备型HPLC纯化粗产物：采用甲醇/水/三氟乙酸的Shimadzu制备型HPLC，其中溶剂A为10％甲醇/90％水/0.1％三氟乙酸，并且溶剂B为10％水//90％甲醇/0.1％三氟乙酸，用Waters Sunfire 5μm C18 19x 100mm柱，梯度为经15分钟30％-100％B且流速为30mL/min，保持7分钟，以得到0.204g(73％产率)呈白色固体的(3-(7-溴喹喔啉-2-基)-2-甲基苯基)甲醇。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/MicromassPlatform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Phenomenex Luna 3μm C18，2x 30mm柱，梯度为在2.0分钟内0-100％B(B＝90％HPLC级乙腈/0.1％三氟乙酸/10％HPLC级水)，(A＝90％HPLC级水/0.1％三氟乙酸/10％HPLC级乙腈)，以1mL/分钟的流速保持1分钟。LCMS Rt＝1.593min.,m/z 329.2(M+H)；1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.12(d,J＝2.4Hz,1H),8.36(d,J＝2.4Hz,1H),8.11(dd,J＝8.9,2.4Hz,1H),8.06-8.00(m,1H),7.59(d,J＝7.4Hz,1H),7.47(d,J＝7.6Hz,1H),7.43-7.35(m,1H),5.26(m,1H),4.62(d,J＝5.4Hz,2H),2.27(s,3H)。
中间体：4-((3-(7-溴喹喔啉-2-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-羟基苯甲醛
将粗产物用10mL乙醇研磨，然后过滤，以得到160mg(38％产率)呈淡棕褐色固体的4-((3-(7-溴喹喔啉-2-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-羟基苯甲醛。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：WatersAquity BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm柱，梯度为在1.5分钟内2％-98％B(B＝100％HPLC级乙腈/0.05％三氟乙酸)，(A＝100％HPLC级水/0.05％三氟乙酸)，以0.8mL/分钟的流速保持0.5分钟。
LCMS Rt＝1.562min.,m/z 484.8(M+H)。
中间体：5-((5-((3-(7-溴喹喔啉-2-基)-2-甲基苄基)氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈
获得115mg呈橙色固体的5-((5-((3-(7-溴喹喔啉-2-基)-2-甲基苄基)氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈(41％产率)。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Waters Aquity BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm柱，梯度为在1.5分钟内2％-98％B(B＝100％HPLC级乙腈/0.05％三氟乙酸)，(A＝100％HPLC级水/0.05％三氟乙酸)，以0.8mL/分钟的流速保持0.5分钟。
LCMS Rt＝1.529min.,m/z 600.9(M+H)。
实施例1010：(R)-2-((4-((3-(7-溴喹喔啉-2-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸
使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μm C18，19x200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经15分钟40％-80％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。使用以下条件通过制备型LC/MS进一步纯化材料：Waters XBridge 5μm C18，19x 200mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，梯度为经20分钟50％-90％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。产物的产量为3.4mg(7％产率)，并且通过LCMS分析估计的其纯度为97％。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.16(s,1H),9.02(m,2H),8.51(s,1H),8.38(s,1H),8.17-8.10(m,1H),8.05(d,J＝9.2Hz,1H),7.66(d,J＝7.3Hz,1H),7.60(d,J＝7.7Hz,1H),7.56(s,1H),7.43(t,J＝7.7Hz,1H),7.15(s,1H),5.37(s,4H),4.03-3.86(m,3H),3.65-3.50(m,2H),2.40(s,3H),1.23(s,3H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.76min；ESI-MS(+)m/z＝702.4(M+H),ESI-MS(-)m/z＝700.4(M-H)。
分析条件2：保留时间＝2.88min；ESI-MS(+)m/z＝702.4(M+H),ESI-MS(-)m/z＝700.4(M-H)。
中间体：(3-(苯并[d]噻唑-6-基)-2-甲基苯基)甲醇
将粗产物在硅胶上使用10％-60％乙酸乙酯/己烷纯化，以得到0.577g呈黄色固体的(3-(苯并[d]噻唑-6-基)-2-甲基苯基)甲醇(95％产率)。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Waters Aquity BEH1.7μm C18，2.1x 50mm柱，梯度为在1.5分钟内2％-98％B(B＝100％HPLC级乙腈/0.05％三氟乙酸)，(A＝100％HPLC级水/0.05％三氟乙酸)，以0.8mL/分钟的流速保持0.5分钟。LCMSRt＝1.044min.,m/z 256.5(M+H)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.03(s,1H),8.18(d,J＝8.6Hz,1H),7.88(d,J＝1.2Hz,1H),7.51-7.41(m,2H),7.33-7.28(m,1H),7.25(m,1H),4.81(d,J＝5.6Hz,2H),2.27(s,3H)。
中间体：4-((3-(苯并[d]噻唑-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-羟基苯甲醛
将粗产物在硅胶上使用10％-80％乙酸乙酯/己烷纯化，以得到0.500g呈白色固体的4-((3-(苯并[d]噻唑-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-羟基苯甲醛(32％产率)。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Waters Aquity BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm柱，梯度为在1.5分钟内2％-98％B(B＝100％HPLC级乙腈/0.05％三氟乙酸)，(A＝100％HPLC级水/0.05％三氟乙酸)，以0.8mL/分钟的流速保持0.5分钟。LCMS Rt＝1.439min.,m/z 409.9(M+H)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ11.46(s,1H),9.74-9.68(m,1H),9.05(s,1H),8.20(d,J＝8.3Hz,1H),7.91(d,J＝1.5Hz,1H),7.59-7.47(m,3H),7.36-7.30(m,2H),5.24(s,2H),2.28(s,3H)。
中间体：5-((5-((3-(苯并[d]噻唑-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈
获得260mg呈橙色固体的5-((5-((3-(7-溴喹喔啉-2-基)-2-甲基苄基)氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈(61％产率)。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Waters Aquity BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm柱，梯度为在1.5分钟内2％-98％B(B＝100％HPLC级乙腈/0.05％三氟乙酸)，(A＝100％HPLC级水/0.05％三氟乙酸)，以0.8mL/分钟的流速保持0.5分钟。LCMS Rt＝1.405min.,m/z 526.0(M+H)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.25(s,1H),9.44(s,1H),9.05(m,2H),8.60-8.53(m,1H),8.17(dd,J＝4.9,3.3Hz,2H),7.75(s,1H),7.58(dd,J＝6.9,2.1Hz,1H),7.50(dd,J＝8.4,1.7Hz,1H),7.39-7.34(m,2H),7.31(s,1H),5.51(s,2H),5.46(s,2H),2.28(s,3H)。
实施例1011：(R)-2-((4-((3-(苯并[d]噻唑-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸
使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μm C18，19x200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经25分钟20％-60％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持7分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。产物的产量为16mg(35％产率)，并且通过LCMS分析估计的其纯度为100％。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.43(s,1H),9.03(m,2H),8.51(s,1H),8.21-8.10(m,2H),7.57(s,1H),7.55-7.45(m,2H),7.35-7.27(m,2H),7.15(s,1H),5.43-5.25(m,4H),3.98(s,2H),3.68-3.54(m,2H),2.26(s,3H),1.24(s,3H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.59min；ESI-MS(+)m/z＝629.5(M+H),ESI-MS(-)m/z＝627.7(M-H)。
分析条件2：保留时间＝2.68min；ESI-MS(+)m/z＝629.5(M+H),ESI-MS(-)m/z＝627.7(M-H)。
中间体：(3-(苯并[d]噁唑-5-基)-2-甲基苯基)甲醇
将粗产物在硅胶上使用10％-60％乙酸乙酯/己烷纯化，以得到0.461g呈黄色固体的(3-(苯并[d]噁唑-5-基)-2-甲基苯基)甲醇(74％产率)。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Waters Aquity BEH1.7μm C18，2.1x 50mm柱，梯度为在1.5分钟内2％-98％B(B＝100％HPLC级乙腈/0.05％三氟乙酸)，(A＝100％HPLC级水/0.05％三氟乙酸)，以0.8mL/分钟的流速保持0.5分钟。LCMSRt＝1.005min.,m/z 240.1(M+H)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.16(s,1H),7.71(d,J＝1.5Hz,1H),7.63(d,J＝8.3Hz,1H),7.44(d,J＝7.3Hz,1H),7.33(dd,J＝8.4,1.6Hz,1H),7.30(m,1H),7.24(m,1H),4.80(d,J＝5.4Hz,2H),2.25(s,3H)。
中间体：4-((3-(苯并[d]噁唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-羟基苯甲醛
将粗产物在硅胶上使用0-70％乙酸乙酯/己烷纯化，以得到0.320g呈白色固体的4-((3-(苯并[d]噁唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-羟基苯甲醛(40％产率)。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Waters Aquity BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm柱，梯度为在1.5分钟内2％-98％B(B＝100％HPLC级乙腈/0.05％三氟乙酸)，(A＝100％HPLC级水/0.05％三氟乙酸)，以0.8mL/分钟的流速保持0.5分钟。LCMS Rt＝1.400min.,m/z 394.3(M+H)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ11.45(s,1H),9.72(s,1H),8.17(s,1H),7.75(d,J＝1.5Hz,1H),7.65(d,J＝8.8Hz,1H),7.57(s,1H),7.54-7.48(m,1H),7.40-7.29(m,3H),5.24(s,2H),2.26(s,3H)。
中间体：5-((5-((3-(苯并[d]噁唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈
获得412mg呈橙色固体的5-((5-((3-(苯并[d]噁唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈(80％产率)。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Waters Aquity BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm柱，梯度为在1.5分钟内2％-98％B(B＝100％HPLC级乙腈/0.05％三氟乙酸)，(A＝100％HPLC级水/0.05％三氟乙酸)，以0.8mL/分钟的流速保持0.5分钟。LCMS Rt＝1.387min.,m/z 510.2(M+H)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.25(s,1H),9.05(m,2H),8.82(s,1H),8.57(s,1H),7.86(d,J＝8.4Hz,1H),7.75(m,2H),7.56(d,J＝6.1Hz,1H),7.42-7.28(m,4H),5.51(s,2H),5.45(s,2H),2.26(s,3H)。
实施例1012：(R)-2-((4-((3-(苯并[d]噁唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸
使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μm C18，19x200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经25分钟20％-80％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。产物的产量为16mg(33％产率)，并且通过LCMS分析估计的其纯度为100％。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.02(m,2H),8.81(s,1H),8.51(s,1H),7.85(d,J＝8.4Hz,1H),7.72(s,1H),7.57(s,1H),7.51(d,J＝7.0Hz,1H),7.38(d,J＝8.8Hz,1H),7.30(q,J＝7.9Hz,2H),7.14(s,1H),5.37(s,2H),5.32(s,2H),3.98(s,2H),3.67-3.60(m,1H),3.55(m,1H),2.24(s,3H),1.25(s,3H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.55min；ESI-MS(+)m/z＝613.1(M+H),ESI-MS(-)m/z＝611.2(M-H)。
分析条件2：保留时间＝2.61min；ESI-MS(+)m/z＝613.0(M+H),ESI-MS(-)m/z＝611.1(M-H)。
中间体：(3-(苯并呋喃-5-基)-2-甲基苯基)甲醇
将粗产物在硅胶上使用10％-60％乙酸乙酯/己烷纯化，以得到1.03g呈黄色固体的(3-(苯并呋喃-5-基)-2-甲基苯基)甲醇(55％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.68(d,J＝2.2Hz,1H),7.55(d,J＝8.6Hz,1H),7.51(d,J＝1.5Hz,1H),7.44-7.40(dd,J＝1.5,8.6Hz,1H),7.33-7.28(m,1H),7.28-7.25(m,1H),7.24-7.21(m,1H),6.83(dd,J＝2.1,0.9Hz,1H),4.80(br.s.,2H),2.27(s,3H)。
中间体：4-((3-(苯并呋喃-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-羟基苯甲醛
将粗产物在硅胶上使用0-50％乙酸乙酯/己烷纯化，以得到0.215g呈白色固体的4-((3-(苯并[d]噁唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-羟基苯甲醛(41％产率)。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+/-)上获得LC/MS数据：Phenomenex Luna 3μm C18，2x 30mm柱，梯度为在2分钟内0-100％B(B＝95％HPLC级乙腈/10mM乙酸铵/5％HPLC级水)，(A＝95％HPLC级水/10mM乙酸铵/5％HPLC级乙腈)，以1mL/分钟的流速保持1分钟。
LCMS Rt＝2.17min.,m/z 391.31(M-H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.18(s,1H),10.05(s,1H),8.06(d,J＝2.0Hz,1H),7.72(s,1H),7.68(d,J＝8.3Hz,1H),7.58(d,J＝1.7Hz,1H),7.52(d,J＝7.1Hz,1H),7.37-7.21(m,2H),7.04-6.99(m,1H),6.88(s,1H),5.34(s,2H),2.23(s,3H)。
中间体：5-((5-((3-(苯并呋喃-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈
采用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μm C18，19x200mm柱，流动相A，5:95乙腈/含10mM乙酸铵的水，并且流动相B，95:5乙腈/含10mM乙酸铵的水，梯度为经15分钟55％-95％B，在100％B下以20mL/min的流速保持5分钟。蒸发溶剂，以得到240mg(82％产率)的5-((5-((3-(苯并呋喃-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：柱：Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水；温度：50℃；梯度：0％B，经3分钟0-100％B，然后在100％B下保持0.5分钟；流速：1mL/min；检测：在220nm下的UV。
注射2条件：柱：Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A：5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B：95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水；温度：50℃；梯度：0％B，经3分钟0-100％B，然后在100％B下保持0.5分钟；流速：0.5mL/min；检测：在220nm下的UV。
分析条件1：保留时间＝2.41min；ESI-MS(+)m/z＝509.0(M+H)
分析条件2：保留时间＝3.21min；ESI-MS(+)m/z＝509.2(M+H)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.25(s,1H),9.08-8.91(m,2H),8.57(s,1H),8.06(d,J＝2.0Hz,1H),7.75(s,1H),7.68(d,J＝8.5Hz,1H),7.62-7.57(m,1H),7.54(d,J＝7.1Hz,1H),7.41-7.22(m,4H),7.01(d,J＝1.4Hz,1H),5.51(s,2H),5.45(s,2H),2.26(s,3H)。
实施例1013：(R)-2-((4-((3-(苯并呋喃-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸
使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μm C18，19x200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经15分钟45％-85％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。产物的产量为10mg(28％产率)，并且通过LCMS分析估计的其纯度为100％。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.03(m,2H),8.52(s,1H),8.05(s,1H),7.67(d,J＝7.3Hz,1H),7.57(m,2H),7.48(m,1H),7.26(m,3H),7.14(s,1H),7.01(s,1H),5.43-5.25(m,4H),4.04-3.87(m,2H),3.71-3.51(m,2H),2.24(s,3H),1.24(s,3H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.88min；ESI-MS(+)m/z＝612.9(M+H)。
分析条件2：保留时间＝3.35min；ESI-MS(+)m/z＝612.0(M+H)。
实施例1014：(S)-2-((4-((3-(苯并呋喃-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-5-胍基戊酸
使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μm C18，19x200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经15分钟25％-65％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。产物的产量为24mg(58％产率)，并且通过LCMS分析估计的其纯度为96％。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.05-8.95(m,J＝8.1Hz,2H),8.46(s,1H),8.05(s,1H),7.66(d,J＝8.4Hz,1H),7.58(s,1H),7.49(d,J＝7.0Hz,1H),7.39(s,1H),7.32-7.19(m,3H),7.10(s,1H),7.01(s,1H),5.33(s,2H),5.26(s,2H),3.73(d,J＝13.6Hz,1H),3.66-3.58(m,1H),3.16-3.03(m,1H),3.03-2.94(m,1H),2.94-2.85(m,1H),2.24(s,3H),1.62-1.40(m,4H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.73min；ESI-MS(+)m/z＝668.0(M+H)。
分析条件2：保留时间＝3.29min；ESI-MS(+)m/z＝668.1(M+H)。
实施例1015：2-((4-((3-(苯并呋喃-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-2-甲基丙酸
使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μm C18，19x200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经15分钟45％-85％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。产物的产量为11.5mg(33％产率)，并且通过LCMS分析估计的其纯度为100％。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.04(m,2H),8.53(s,1H),8.06(s,1H),7.67(d,J＝8.4Hz,1H),7.58(m,2H),7.50(d,J＝7.0Hz,1H),7.32-7.21(m,3H),7.15(s,1H),7.01(s,1H),5.35(s,2H),5.33(s,2H),3.90(s,2H),2.25(s,3H),1.28(m,6H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3.5分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3.5分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.90min；ESI-MS(+)m/z＝596.0(M+H),ESI-MS(-)m/z＝594.2(M-H)。
分析条件2：保留时间＝3.35min；ESI-MS(+)m/z＝596.0(M+H),ESI-MS(-)m/z＝594.2(M-H)。
中间体：(3-(苯并[d]噁唑-6-基)-2-甲基苯基)甲醇
将粗产物在硅胶上使用10％-60％乙酸乙酯/己烷纯化，以得到0.470g呈橙色固体的(3-(苯并[d]噁唑-6-基)-2-甲基苯基)甲醇(55％产率)。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Waters Aquity BEH1.7μm C18，2.1x 50mm柱，梯度为在1.5分钟内2％-98％B(B＝100％HPLC级乙腈/0.05％三氟乙酸)，(A＝100％HPLC级水/0.05％三氟乙酸)，以0.8mL/分钟的流速保持0.5分钟。
LCMS Rt＝0.987min.,m/z 240.1(M+H)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.15(s,1H),7.82(d,J＝8.1Hz,1H),7.52(d,J＝1.2Hz,1H),7.47-7.42(m,1H),7.34-7.28(m,2H),7.25(d,J＝1.2Hz,1H),4.80(s,2H),2.25(s,3H)。
中间体：4-((3-(苯并[d]噁唑-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-羟基苯甲醛
将粗产物在硅胶上使用0-50％乙酸乙酯/己烷纯化，以得到0.190g呈白色固体的4-((3-(苯并[d]噁唑-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-羟基苯甲醛(34％产率)。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Phenomenex Luna 3μm C18，2x 30mm柱，梯度为在2分钟内0-100％B(B＝90％HPLC级乙腈/0.1％三氟乙酸/10％HPLC级水)，(A＝90％HPLC级水/0.1％三氟乙酸/10％HPLC级乙腈)，以1mL/分钟的流速保持1分钟。LCMS Rt＝1.973min.,m/z 394.3(M-H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.18(br.s.,1H),10.05(s,1H),8.81(s,1H),7.88(d,J＝8.1Hz,1H),7.75(d,J＝1.0Hz,1H),7.72(s,1H),7.55(d,J＝6.1Hz,1H),7.40-7.29(m,3H),6.89(s,1H),5.35(s,2H),2.24(s,3H)。
中间体：5-((5-((3-(苯并[d]噁唑-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈
采用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μm C18，19x200mm柱，流动相A，5:95甲醇/含10mM乙酸铵的水，并且流动相B，95:5甲醇/含10mM乙酸铵的水，梯度为经15分钟60％-100％B，在100％B下以20mL/min的流速保持10分钟。蒸发溶剂，以得到271mg(72％产率)的5-((5-((3-(苯并[d]噁唑-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：柱：Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水；温度：50℃；梯度：0％B，经3分钟0-100％B，然后在100％B下保持0.5分钟；流速：1mL/min；检测：在220nm下的UV。
注射2条件：柱：Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A：5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B：95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水；温度：50℃；梯度：0％B，经3分钟0-100％B，然后在100％B下保持0.5分钟；流速：0.5mL/min；检测：在220nm下的UV。
分析条件1：保留时间＝2.12min；ESI-MS(+)m/z＝510.1(M+H)
分析条件2：保留时间＝2.98min；ESI-MS(+)m/z＝510.1(M+H)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.25(s,1H),9.04(m,2H),8.80(s,1H),8.56(s,1H),7.88(d,J＝8.2Hz,1H),7.78-7.73(m,2H),7.57(dd,J＝7.2,1.5Hz,1H),7.40-7.28(m,4H),5.51(s,2H),5.45(s,2H),2.27(s,3H)。
实施例1016：2-((4-((3-(苯并[d]噁唑-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-2-甲基丙酸
使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μm C18，19x200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经15分钟25％-65％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。产物的产量为12.4mg(36％产率)，并且通过LCMS分析估计的其纯度为100％。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.03(m,2H),8.80(s,1H),8.53(s,1H),7.88(d,J＝8.1Hz,1H),7.75(s,1H),7.58(s,1H),7.53(d,J＝7.0Hz,1H),7.41-7.26(m,3H),7.15(s,1H),5.34(m,4H),3.88(s,2H),2.26(s,3H),1.27(s,6H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.54min；ESI-MS(+)m/z＝597.2(M+H),ESI-MS(-)m/z＝595.2(M-H)。
分析条件2：保留时间＝2.57min；ESI-MS(+)m/z＝597.2(M+H),ESI-MS(-)m/z＝595.3(M-H)。
实施例1017：(R)-2-((4-((3-(苯并[d]噁唑-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸
使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μm C18，19x200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经20分钟10％-100％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。产物的产量为20.3mg(61％产率)，并且通过LCMS分析估计的其纯度为100％。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.03(s,1H),8.99(s,1H),8.76(s,1H),8.49(s,1H),7.87(d,J＝8.1Hz,1H),7.72(s,1H),7.57(s,1H),7.50(d,J＝7.0Hz,1H),7.38-7.26(m,3H),7.12(s,1H),5.37(s,2H),5.31(s,2H),4.02(s,2H),3.68(m,1H),3.54(m,1H),2.24(s,3H),1.26(s,3H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3.5分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3.5分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.70min；ESI-MS(+)m/z＝613.1(M+H),ESI-MS(-)m/z＝611.1(M-H)。
分析条件2：保留时间＝3.27min；ESI-MS(+)m/z＝613.2(M+H),ESI-MS(-)m/z＝611.0(M-H)。
中间体：(3-(苯并呋喃-6-基)-2-甲基苯基)甲醇
将粗产物在硅胶上使用10％-60％乙酸乙酯/己烷纯化，以得到0.486g呈白色泡沫的(3-(苯并呋喃-6-基)-2-甲基苯基)甲醇(56％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.67(d,J＝2.2Hz,1H),7.63(d,J＝8.1Hz,1H),7.45(s,1H),7.44-7.40(m,1H),7.33-7.28(m,1H),7.25(s,1H),7.19(dd,J＝7.9,1.3Hz,1H),6.83(dd,J＝2.1,0.9Hz,1H),4.80(br.s.,2H),2.27(s,3H)。
中间体：4-((3-(苯并呋喃-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-羟基苯甲醛
将粗产物在硅胶上使用10％-60％乙酸乙酯/己烷纯化，以得到0.603g呈白色固体的4-((3-(苯并呋喃-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-羟基苯甲醛(60％产率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.05(s,1H),8.05(d,J＝2.2Hz,1H),7.74-7.71(m,2H),7.57-7.51(m,2H),7.37-7.28(m,2H),7.22(m,1H),7.03(dd,J＝2.2,0.9Hz,1H),6.91-6.86(m,1H),5.34(s,2H),2.25(s,3H)。
中间体：5-((5-((3-(苯并呋喃-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈
获得493mg呈黄色粉末的5-((5-((3-(苯并呋喃-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈(75％产率)。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Waters Aquity BEH 1.7μm C18，2.1x50mm柱，梯度为在1.5分钟内2％-98％B(B＝100％HPLC级乙腈/0.05％三氟乙酸)，(A＝100％HPLC级水/0.05％三氟乙酸)，以0.8mL/分钟的流速保持0.5分钟。LCMS Rt＝1.509min.,m/z 509.15(M+H)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.25(s,1H),9.09-8.97(m,2H),8.56(t,J＝2.0Hz,1H),8.05(d,J＝2.2Hz,1H),7.81-7.70(m,2H),7.60-7.51(m,2H),7.37-7.29(m,3H),7.22(dd,J＝7.9,1.4Hz,1H),7.03(dd,J＝2.2,0.9Hz,1H),5.51(s,2H),5.41(s,2H),2.27(s,3H)。
实施例1018：2-((4-((3-(苯并呋喃-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-2-甲基丙酸
使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μm C18，19x200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经15分钟20％-60％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。产物的产量为4.9mg(11％产率)，并且通过LCMS分析估计的其纯度为98％。1H NMR(500MHz,DMSO-δ)δ9.02(d,J＝15.4Hz,2H),8.51(br.s.,1H),8.02(br.s.,1H),7.73(d,J＝7.7Hz,1H),7.58(s,1H),7.53(br.s.,1H),7.48(m,1H),7.32-7.24(m,2H),7.20(d,J＝7.7Hz,1H),7.13(br.s.,1H),7.02(br.s.,1H),5.33(m,4H),3.92(s,2H),2.25(s,3H),1.27(s,6H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.85min；ESI-MS(+)m/z＝596.5(M+H),ESI-MS(-)m/z＝594.6(M-H)。
分析条件2：保留时间＝2.86min；ESI-MS(+)m/z＝596.5(M+H),ESI-MS(-)m/z＝594.6(M-H)。
实施例1019：(R)-2-((4-((3-(苯并呋喃-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸
使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μm C18，19x200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经15分钟10％-50％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。使用以下条件通过制备型LC/MS进一步纯化材料：Waters XBridge 5μm C18，19x 200mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，梯度为经15分钟45％-85％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。产物的产量为8.2mg(18％产率)，并且通过LCMS分析估计的其纯度为98％。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.03(s,1H),8.98(s,1H),8.50(s,1H),8.01(s,1H),7.72(d,J＝7.9Hz,1H),7.55(s,1H),7.51(s,1H),7.47(d,J＝6.1Hz,1H),7.32-7.22(m,2H),7.18(d,J＝7.9Hz,1H),7.12(s,1H),7.00(s,1H),5.36(s,2H),5.29(s,2H),3.99(br.s.,2H),3.88(m,1H),3.56(m,1H),2.24(s,3H),1.24(s,3H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.81min；ESI-MS(+)m/z＝612.6(M+H),ESI-MS(-)m/z＝610.6(M-H)。
分析条件2：保留时间＝2.85min；ESI-MS(+)m/z＝612.5(M+H),ESI-MS(-)m/z＝610.5(M-H)。
实施例1020：(S)-1-(4-((3-(苯并呋喃-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)-2-甲基吡咯烷-2-甲酸
使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μm C18，19x200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含20mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经15分钟10％-60％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。使用以下条件通过制备型LC/MS进一步纯化材料：Waters XBridge 5μm C18，19x 200mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，梯度为经15分钟40％-80％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。产物的产量为7.3mg(15％产率)，并且通过LCMS分析估计的其纯度为96％。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.03-8.95(m,2H),8.45(s,1H),8.01(s,1H),7.72(d,J＝8.1Hz,1H),7.52(s,1H),7.48(d,J＝6.2Hz,1H),7.42(s,1H),7.32-7.23(m,2H),7.19(d,J＝7.7Hz,1H),7.12(s,1H),7.00(s,1H),5.38(s,2H),5.27(s,2H),3.82(br.s.,2H),2.90-2.77(m,2H),2.25(s,3H),2.16(m,1H),1.79-1.59(m,3H),1.30(s,3H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.95min；ESI-MS(+)m/z＝622.6(M+H)。
分析条件2：保留时间＝2.90min；ESI-MS(+)m/z＝622.6(M+H)。
中间体：(3-(苯并[d]噻唑-5-基)-2-甲基苯基)甲醇
将粗产物在硅胶上使用10％-60％乙酸乙酯/己烷纯化，以得到0.71g呈白色固体的(3-(苯并[d]噻唑-5-基)-2-甲基苯基)甲醇(98％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.06(s,1H),8.07(d,J＝1.2Hz,1H),8.01(d,J＝8.3Hz,1H),7.45(dd,J＝7.1,1.5Hz,1H),7.41(dd,J＝8.3,1.7Hz,1H),7.34-7.28(m,2H),4.81(d,J＝5.6Hz,2H),2.31-2.25(s,3H)。
中间体：4-((3-(苯并[d]噻唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-羟基苯甲醛
将粗产物在硅胶上使用0-60％乙酸乙酯/己烷纯化，以得到0.234g呈黄色粉末的4-((3-(苯并[d]噻唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-羟基苯甲醛(21％产率)。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Phenomenex Luna 3μm C18，2x 30mm柱，梯度为在2分钟内0-100％B(B＝90％HPLC级乙腈/0.1％三氟乙酸/10％HPLC级水)，(A＝90％HPLC级水/0.1％三氟乙酸/10％HPLC级乙腈)，以1mL/分钟的流速保持1分钟。
LCMS Rt＝2.053min.,m/z 410.3(M+H)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.05(s,1H),9.47(s,1H),8.26(d,J＝8.4Hz,1H),8.01(d,J＝1.4Hz,1H),7.73(s,1H),7.55(dd,J＝7.2,1.7Hz,1H),7.45(dd,J＝8.3,1.7Hz,1H),7.40-7.31(m,2H),6.89(s,1H),5.36(s,2H),2.26(s,3H)。
中间体：5-((5-((3-(苯并[d]噻唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈
获得231mg呈黄色固体的5-((5-((3-(苯并[d]噻唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈(81％产率)。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Phenomenex Luna 3μm C18，2x 30mm柱，梯度为在2分钟内0-100％B(B＝90％HPLC级乙腈/0.1％三氟乙酸/10％HPLC级水)，(A＝90％HPLC级水/0.1％三氟乙酸/10％HPLC级乙腈)，以1mL/分钟的流速保持1分钟。LCMS Rt＝2.037min.,m/z 526.3(M+H)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.25(s,1H),9.47(s,1H),9.05(m,2H),8.57(t,J＝2.0Hz,1H),8.26(d,J＝8.4Hz,1H),8.02(d,J＝1.3Hz,1H),7.75(s,1H),7.62-7.54(m,1H),7.47(dd,J＝8.3,1.7Hz,1H),7.38-7.35(m,2H),7.30(s,1H),5.51(s,2H),5.46(s,2H),2.29(s,3H)。
实施例1021：(R)-2-((4-((3-(苯并[d]噻唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸
使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μm C18，19x200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含20mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经15分钟10％-60％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。产物的产量为5.8mg(12％产率)，并且通过LCMS分析估计的其纯度为99％。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.45(s,1H),9.04(s,1H),8.99(s,1H),8.51(s,1H),8.24(d,J＝8.1Hz,1H),8.00(s,1H),7.56-7.49(m,2H),7.44(d,J＝8.4Hz,1H),7.31(m,2H),7.13(s,1H),5.37(s,2H),5.31(s,2H),3.97(s,2H),3.62(m,1H),3.54(m,1H),2.26(s,3H),1.24(s,3H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.62min；ESI-MS(+)m/z＝629.5(M+H),ESI-MS(-)m/z＝627.5(M-H)。
分析条件2：保留时间＝2.65min；ESI-MS(+)m/z＝629.5(M+H),ESI-MS(-)m/z＝627.5(M-H)。
实施例1022：2-((4-((3-(苯并[d]噻唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-2-甲基丙酸
使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μm C18，19x200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含30mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经15分钟10％-70％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。产物的产量为3.8mg(8％产率)，并且通过LCMS分析估计的其纯度为100％。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.46(s,1H),9.04(s,1H),9.01(s,1H),8.53(s,1H),8.25(d,J＝8.1Hz,1H),8.00(s,1H),7.58(s,1H),7.56-7.49(m,1H),7.44(d,J＝8.4Hz,1H),7.32(m,2H),7.14(s,1H),5.34(m,4H),3.90(s,2H),2.27(s,3H),1.27(s,6H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.65min；ESI-MS(+)m/z＝613.5(M+H),ESI-MS(-)m/z＝611.5(M-H)。
分析条件2：保留时间＝2.65min；ESI-MS(+)m/z＝613.5(M+H),ESI-MS(-)m/z＝611.5(M-H)。
实施例1023：(S)-1-(4-((3-(苯并[d]噻唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)-2-甲基吡咯烷-2-甲酸
使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μm C18，19x200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含25mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经15分钟10％-65％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。产物的产量为9.7mg(20％产率)，并且通过LCMS分析估计的其纯度为100％。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.45(s,1H),9.00(m,2H),8.45(s,1H),8.24(d,J＝8.4Hz,1H),8.00(s,1H),7.56-7.48(m,1H),7.44(d,J＝8.1Hz,1H),7.41(s,1H),7.33-7.28(m,2H),7.13(s,1H),5.38(s,2H),5.28(s,2H),3.85-3.74(m,2H),2.82(m,2H),2.26(s,3H),2.21-2.12(m,1H),1.79-1.60(m,3H),1.29(s,3H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.78min；ESI-MS(+)m/z＝639.6(M+H),ESI-MS(-)m/z＝637.6(M-H)。
分析条件2：保留时间＝2.68min；ESI-MS(+)m/z＝639.6(M+H),ESI-MS(-)m/z＝637.5(M-H)。
中间体：5-((5-((3-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈
向小密封管中添加5-溴-1H-苯并咪唑(22.79mg，0.116mmol)、二噁烷(1446μl)、水(482μl)、5-((4-氯-2-甲酰基-5-((2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈(50mg，0.096mmol)、碳酸铯(94mg，0.289mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(2.82mg，3.86μmol)。将小瓶密封，并且将混合物用氮气脱气/冲洗3次。将混合物在90℃下加热过夜。将混合物冷却并浓缩至接近干燥，溶解在4mL乙腈中并使用Shimadzu制备型HPLC纯化，所述Shimadzu制备型HPLC采用乙腈/水/0.1％三氟乙酸，其中溶剂A为10％乙腈/90％水/0.1％三氟乙酸，并且溶剂B为10％水/90％乙腈/0.1％三氟乙酸，用XTERRA 5μC18 19x 100mm柱，梯度为经15分钟30％-100％B且流速为25mL/min，保持10分钟，以得到21.4mg(36％产率)的5-((5-((3-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈TFA盐。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Phenomenex Luna3μm C18，2x 30mm柱，梯度为在2分钟内0-100％B(B＝90％HPLC级乙腈/0.1％三氟乙酸/10％HPLC级水)，(A＝90％HPLC级水/0.1％三氟乙酸/10％HPLC级乙腈)，以1mL/分钟的流速保持1分钟。LCMS Rt＝1.472min.,m/z 509.4(M+H)。
实施例1024：(R)-2-((4-((3-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸
向小瓶中添加DMF(1mL)、乙酸(0.111mL)、5-((5-((3-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈TFA(21.4mg，0.034mmol)、2-甲基-D-丝氨酸(12.28mg，0.103mmol)和硼烷-2-甲基吡啶络合物(5.51mg，0.052mmol)。盖上小瓶，并且将混合物在室温下振荡过夜。使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：WatersXBridge 5μm C18，19x 200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含15mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经15分钟10％-55％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。产物的产量为7mg(33％产率)，并且通过LCMS分析估计的其纯度为98％。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.04(s,1H),9.00(s,1H),8.52(s,1H),8.26(s,1H),7.66(d,J＝8.1Hz,1H),7.56(s,1H),7.53-7.43(m,2H),7.27(m,2H),7.18-7.09(m,2H),5.37(s,2H),5.31(s,2H),3.99(s,2H),3.64(m,1H),3.57(m,1H),2.25(s,3H),1.25(s,3H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.31min；ESI-MS(+)m/z＝612.6(M+H),ESI-MS(-)m/z＝610.6(M-H)。
分析条件2：保留时间＝2.32min；ESI-MS(+)m/z＝612.5(M+H),ESI-MS(-)m/z＝610.5(M-H)。
中间体：2-(5-溴-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-N,N-二甲基乙胺和2-(6-溴-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-N,N-二甲基乙胺
向RBF中添加DMSO(3mL)、2-氯-N,N-二甲基乙胺HCl盐(219mg，1.523mmol)和5-溴-1H-苯并咪唑(250mg，1.269mmol)。将混合物冷却至0℃，并且添加粉末状无水氢氧化钠(228mg，5.71mmol)。将RBF密封，并且允许混合物升温至室温并搅拌过夜。将粗混合物用10mL水稀释并推过6g Waters HLB柱体。将柱体用30mL的另外的水冲洗2次。将产物用60mL甲醇洗脱，然后蒸发，以得到351.6mg(93％产率)的2-(5-溴-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-N,N-二甲基乙胺和2-(6-溴-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-N,N-二甲基乙胺的1:1混合物。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Waters Aquity BEH 1.7μm C18，2x 50mm柱，梯度为在1.5分钟内2％-98％B(B＝1000％HPLC级乙腈/0.05％三氟乙酸)，(A＝100％HPLC级水/0.05％三氟乙酸)，以0.8mL/分钟的流速保持1分钟。LCMS Rt＝0.694min.,m/z 267.9&269.9(M+H)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.98(m,1H),7.94(d,J＝1.7Hz,0.5H),7.66(m,0.5H),7.56(d,J＝1.7Hz,0.5H),7.42-7.35(m,1H),7.27(m,0.5H),4.21(m,2H),2.71(m,2H),2.33-2.25(m,6H)。
中间体：5-((4-氯-5-((3-(1-(2-(二甲基氨基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈和5-((4-氯-5-((3-(1-(2-(二甲基氨基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈
And和
向密封管中添加THF(3614μl)、水(1205μl)、2-(5-溴-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-N,N-二甲基乙胺和2-(6-溴-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-N,N-二甲基乙胺的1:1混合物(110mg，0.370mmol)、5-((4-氯-2-甲酰基-5-((2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈(120mg，0.231mmol)、磷酸钾(147mg，0.694mmol)和第二代Xphos预催化剂(14.56mg，0.019mmol)。将容器密封，将混合物用氮气脱气/冲洗并且然后在75℃下加热过夜。将粗反应混合物溶解在8mL的1:1DMF/甲醇中并且使用Shimadzu制备型HPLC纯化，所述Shimadzu制备型HPLC采用乙腈/水/0.1％三氟乙酸，其中溶剂A为10％乙腈/90％水/0.1％三氟乙酸，并且溶剂B为10％水/90％乙腈/0.1％三氟乙酸，用XTERRA 5μC18 30x 100mm柱，梯度为经15分钟20％-100％B且流速为40mL/min，保持10分钟，以得到98.7mg的5-((4-氯-5-((3-(1-(2-(二甲基氨基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈2TFA和5-((4-氯-5-((3-(1-(2-(二甲基氨基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈2TFA的1:1混合物。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Waters Aquity BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm柱，梯度为在1.5分钟内2％-98％B(B＝100％HPLC级乙腈/0.05％三氟乙酸)，(A＝100％HPLC级水/0.05％三氟乙酸)，以0.8mL/分钟的流速保持0.5分钟。LCMS Rt＝0.964min.,m/z 580.30(M+H)。
实施例1025：(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(1-(2-(二甲基氨基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸和(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(1-(2-(二甲基氨基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸
And和
向小瓶中添加DMF(1mL)、乙酸(0.100mL)、硼烷-2-甲基吡啶络合物(3.97mg，0.037mmol)、D-丝氨酸(7.80mg，0.074mmol)以及5-((4-氯-5-((3-(1-(2-(二甲基氨基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈2TFA和5-((4-氯-5-((3-(1-(2-(二甲基氨基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈2TFA的1:1混合物。盖上小瓶，并且将混合物在室温下振荡过夜。使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μm C18，19x 200mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，梯度为经20分钟45％-85％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥，以得到5.3mg(31％产率，98％纯度)的位置异构体的1:1混合物。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.02(m,2H),8.52(br.s.,1H),8.30-8.23(m,1H),7.73-7.65(m,1H),7.58-7.52(m,1H),7.50(m,2H),7.35-7.25(m,2H),7.20(d,J＝7.3Hz,0.5H),7.15(m,1.5H),5.42-5.33(m,2H),5.29(br.s.,2H),4.36(m,2H),4.02-3.89(m,2H),3.63(m,2H),3.07(m,1H),2.71-2.62(m,2H),2.31-2.12(m,9H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3.5分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3.5分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.30min；ESI-MS(+)m/z＝669.1(M+H),ESI-MS(-)m/z＝667.2(M-H)。
分析条件2：保留时间＝2.89min；ESI-MS(+)m/z＝669.1(M+H),ESI-MS(-)m/z＝667.2(M-H)。
实施例1026：2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(1-(2-(二甲基氨基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-2-甲基丙酸和2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(1-(2-(二甲基氨基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-2-甲基丙酸
And和
使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μm C18，19x200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经25分钟10％-50％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥，以得到4.2mg(25％产率，97％纯度)的位置异构体的1:1混合物。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.03(m,2H),8.53(s,1H),8.30-8.23(m,1H),7.73-7.66(m,1H),7.61-7.52(m,2H),7.49(m,1H),7.35-7.26(m,2H),7.22-7.11(m,2H),5.34(m,4H),4.41-4.32(m,2H),3.88(s,2H),2.73-2.62(m,2H),2.36-2.05(m,9H),1.26(s,6H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3.5分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3.5分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.49min；ESI-MS(+)m/z＝667.7(M+H),ESI-MS(-)m/z＝665.7(M-H)。
分析条件2：保留时间＝2.43min；ESI-MS(+)m/z＝667.8(M+H),ESI-MS(-)m/z＝665.3(M-H)。
中间体：(R)-1-(2-(5-溴苯并[d]噁唑-2-基)乙基)吡咯烷-3-醇
polyphosphoric acid多磷酸
在室温下向二氯甲烷(DCM)(20mL)中的2-氨基-4-溴苯酚(980mg，5.21mmol)中滴加3-氯丙酰氯(0.500mL，5.21mmol)。将粉色混合物在室温下搅拌1.5小时。向产物混合物中添加5mL的DCM和0.5当量(0.250mL，2.61mmol)的3-氯丙酰氯。继续搅拌30分钟。在搅拌下向粗产物中添加5mL饱和碳酸氢钠水溶液。将混合物搅拌5分钟，然后转移到分液漏斗中。将产物萃取，用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并蒸发，以得到1.46g(99％产率)的N-(5-溴-2-羟基苯基)-3-氯丙酰胺。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass PlatformLC(ESI+)上获得LC/MS数据：Phenomenex Luna 3μm C18，2x 30mm柱，梯度为在2分钟内0-100％B(B＝90％HPLC级乙腈/0.1％三氟乙酸/10％HPLC级水)，(A＝90％HPLC级水/0.1％三氟乙酸/10％HPLC级乙腈)，以1mL/分钟的流速保持1分钟。LCMS Rt＝1.737min.,m/z280.1&282.1(M+H)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.19(br.s.,1H),9.40(s,1H),8.12(d,J＝2.2Hz,1H),7.08(dd,J＝8.5,2.2Hz,1H),6.82(d,J＝8.5Hz,1H),3.85(t,J＝6.2Hz,2H),2.93(t,J＝6.2Hz,2H)。
向小密封管中添加N-(5-溴-2-羟基苯基)-3-氯丙酰胺(153mg，0.55mmol)和多磷酸(5mL)。将管密封，并且将混合物在130℃下加热4小时。将混合物冷却至0℃，并且滴加冷的氢氧化铵直至pH 7。将产物用30mL乙酸乙酯稀释，萃取，用15mL的1.5M磷酸钾、水、盐水洗涤，经硫酸镁干燥并蒸发，以得到100.6mg(70％产率)的5-溴-2-(2-氯乙基)苯并[d]噁唑和5-溴-2-乙烯基苯并[d]噁唑的1:1混合物。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Phenomenex Luna 3μm C18，2x 30mm柱，梯度为在2分钟内0-100％B(B＝90％HPLC级乙腈/0.1％三氟乙酸/10％HPLC级水)，(A＝90％HPLC级水/0.1％三氟乙酸/10％HPLC级乙腈)，以1mL/分钟的流速保持1分钟。针对氯乙基产物，LCMS Rt＝1.750min.,m/z 259.9&261.9(M+H)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.85(m,1H),7.46(m,1H),7.40(m,1H),6.75(dd,J＝17.5,11.2Hz,0.5H),6.50(d,J＝17.5Hz,0.5H),5.91(d,J＝11.2Hz,0.5H),4.01(t,J＝6.9Hz,1H),3.42(t,J＝6.9Hz,1H)。
向5-溴-2-(2-氯乙基)苯并[d]噁唑(50mg，0.192mmol)和5-溴-2-乙烯基苯并[d]噁唑(50mg，0.223mmol)的1:1混合物中添加DMF(5mL)、碳酸铯(300mg，0.921mmol)和(R)-吡咯烷-3-醇盐酸盐(85mg，0.691mmol)。将混合物在50℃下搅拌20小时。将混合物冷却并转移到分液漏斗中。向粗产物中添加10mL水和25mL乙酸乙酯，将产物萃取，用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并蒸发，以得到60.8mg(85％产率)的(R)-1-(2-(5-溴苯并[d]噁唑-2-基)乙基)吡咯烷-3-醇。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Phenomenex Luna 3μm C18，2x 30mm柱，梯度为在2分钟内0-100％B(B＝90％HPLC级乙腈/0.1％三氟乙酸/10％HPLC级水)，(A＝90％HPLC级水/0.1％三氟乙酸/10％HPLC级乙腈)，以1mL/分钟的流速保持1分钟。
LCMS Rt＝1.218min.,m/z 312.1(M+H)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.73(m,1H),7.40-7.34(m,1H),7.34-7.29(m,1H),4.30(m,1H),3.08(m,2H),2.97(m,2H),2.77(m,1H),2.71-2.57(m,2H),2.37(m,1H),2.10(m,1H),1.70(m,1H)。
实施例1027：(R)-5-((4-氯-2-甲酰基-5-((3-(2-(2-(3-羟基吡咯烷-1-基)乙基)苯并[d]噁唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈
向密封管中添加5-((4-氯-2-甲酰基-5-((2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈(79mg，0.152mmol)、THF(4.5mL)、水(1.5mL)、(R)-1-(2-(5-溴苯并[d]噁唑-2-基)乙基)吡咯烷-3-醇(84mg，0.228mmol)、磷酸三钾(64.6mg，0.305mmol)和第2代XPhos预催化剂(5.99mg，7.61μmol)。将容器密封，将混合物用氮气脱气/冲洗，然后在75℃下加热过夜。将反应混合物冷却，浓缩成油状物，用乙酸乙酯稀释，用水、盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并蒸发。将粗反应混合物溶解在8mL的1:1DMF/甲醇中并且使用Shimadzu制备型HPLC纯化，所述Shimadzu制备型HPLC采用乙腈/水/三氟乙酸，其中溶剂A为10％乙腈/90％水/0.1％三氟乙酸，并且溶剂B为10％水/90％乙腈/0.1％三氟乙酸，用Waters XTERRA 5μm C18 30x 100mm柱，梯度为经10分钟20％-100％B且流速为25mL/min，保持10分钟，以得到55.7mg(48％产率)的(R)-5-((4-氯-2-甲酰基-5-((3-(2-(2-(3-羟基吡咯烷-1-基)乙基)苯并[d]噁唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈TFA。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Phenomenex Luna 3μm C18，2x 30mm柱，梯度为在2分钟内0-100％B(B＝90％HPLC级乙腈/0.1％三氟乙酸/10％HPLC级水)，(A＝90％HPLC级水/0.1％三氟乙酸/10％HPLC级乙腈)，以1mL/分钟的流速保持1分钟。
LCMS rt＝1.547min.,m/z 623.3(M+H)。1H NMR(500MHz,THF-d8)δ10.29(m,1H),8.95(s,1H),8.90(s,1H),8.33(s,1H),7.82(m,1H),7.63-7.56(m,1H),7.55-7.41(m,1H),7.31-7.18(m,3H),7.04(m,1H),6.95-6.84(m,1H),5.36(m,4H),4.51-4.46(m,1H),3.76(m,1H),3.63-3.51(m,4H),3.05(t,J＝7.2Hz,1H),2.88(s,1H),2.77(s,1H),2.30(m,4H),1.73(m,1H)。
实施例1028：(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2-(2-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)乙基)苯并[d]噁唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸
向小瓶中添加DMF(1.3mL)、乙酸(0.130mL)、(R)-5-((4-氯-2-甲酰基-5-((3-(2-(2-(3-羟基吡咯烷-1-基)乙基)苯并[d]噁唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈TFA(48.6mg，0.066mmol)、2-甲基-D-丝氨酸(19.63mg，0.165mmol)和硼烷-2-甲基吡啶络合物(8.46mg，0.079mmol)。将小瓶密封，并且将混合物在室温下振荡过夜。使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μm C18，19x 200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含20mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经15分钟10％-60％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。产物的产量为7.5mg(16％产率)，并且通过LCMS分析估计的其纯度为100％。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.03(s,1H),9.00(s,1H),8.50(s,1H),7.73(d,J＝8.4Hz,1H),7.58(s,1H),7.55(s,1H),7.49(d,J＝7.0Hz,1H),7.33-7.23(m,3H),7.13(s,1H),5.36(s,2H),5.30(s,2H),4.22-4.13(m,1H),3.94(s,2H),3.61-3.58(m,1H),3.52-3.50(m,1H),3.16-3.08(m,2H),2.96-2.87(m,2H),2.80-2.73(m,1H),2.62(m,1H),2.50(m,1H),2.36(m,1H),2.23(s,3H),2.00-1.91(m,1H),1.51(m,1H),1.22(s,3H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含0.1％三氟乙酸的水；流动相B为95:5乙腈:含0.1％三氟乙酸的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.43min；ESI-MS(+)m/z＝726.0(M+H),ESI-MS(-)m/z＝724.0(M-H)。
分析条件2：保留时间＝1.33min；ESI-MS(+)m/z＝725.9(M+H),ESI-MS(-)m/z＝724.0(M-H)。
实施例1029：(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2-(2-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)乙基)苯并[d]噁唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-甲酸
以与实施例1028类似的方式制备实施例1029。使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μm C18，19x 200mm柱，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经25分钟15％-65％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。使用以下条件进一步纯化材料：Waters XBridge5μm C18，19x 200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含0.1％三氟乙酸的水，并且流动相B为95:5乙腈:含0.1％三氟乙酸的水，梯度为经20分钟15％-55％B，在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。作为2TFA盐的产物的产量为3.2mg，并且通过LCMS分析估计的纯度为96％。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.01(m,2H),8.46(s,1H),7.74(d,J＝8.2Hz,1H),7.60(d,J＝1.2Hz,1H),7.52(d,J＝7.3Hz,1H),7.44(s,1H),7.34-7.25(m,3H),7.14(s,1H),5.35(s,2H),5.28(s,2H),4.18(br.s.,1H),3.80(d,J＝14.0Hz,1H),3.63(d,J＝14.0Hz,1H),3.13(m,4H),2.98-2.87(m,3H),2.79(dd,J＝9.8,6.1Hz,1H),2.65(m,1H),2.38(dd,J＝9.5,3.7Hz,1H),2.33-2.27(m,1H),2.25(s,3H),1.95(m,1H),1.86-1.68(m,2H),1.50(m,4H),1.41-1.34(m,1H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含0.1％三氟乙酸的水；流动相B为95:5乙腈:含0.1％三氟乙酸的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.468min；ESI-MS(+)m/z＝736.1(M+H)
分析条件2：保留时间＝1.398min；ESI-MS(+)m/z＝736.1(M+H)
中间体：3-((6-溴吡啶-2-基)氧基)丙-1-醇
在0℃下向(30mL)中的2,6-二溴吡啶(4.27g，18.03mmol)和5当量的1,3-丙二醇(6.47mL，90mmol)的溶液中分批添加矿物油中的60％氢化钠(1.081g，27.0mmol)。将反应在0℃下搅拌10分钟，除去冰浴，并且将混合物在室温下搅拌2小时。将反应混合物再次冷却至0℃，然后用5mL盐水淬灭。将产物用乙酸乙酯(50mL x 3)萃取，推过硅藻土/硫酸钠塞并在氮气流下蒸发过夜。将产物在硅胶上使用己烷中的0-70％乙酸乙酯纯化，以得到2.13g呈无色油状物的3-((6-溴吡啶-2-基)氧基)丙-1-醇(38％产率)。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LCMS(ESI+)上获得LC/MS数据：Phenomenex Luna 3μm C18，2x 30mm柱，梯度为在2分钟内0-100％B(B＝90％HPLC级乙腈/0.1％三氟乙酸/10％HPLC级水)，(A＝90％HPLC级水/0.1％三氟乙酸/10％HPLC级乙腈)，以1mL/分钟的流速保持1分钟。LCMS Rt＝1.219min.,m/z 233.95(M+H),95％纯度。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.43(t,J＝8.2Hz,1H),7.07(dd,J＝8.2,0.6Hz,1H),6.69(dd,J＝8.2,0.6Hz,1H),4.49(t,J＝6.0Hz,2H),3.76(q,J＝5.9Hz,2H),2.11-1.92(m,2H)。
中间体：(R)-1-(3-((6-溴吡啶-2-基)氧基)丙基)吡咯烷-3-醇
向闪烁瓶中添加3-((6-溴吡啶-2-基)氧基)丙-1-醇(100mg，0.431mmol)、DCM(2mL)和三乙胺(0.066mL，0.474mmol)。将溶液冷却至0℃，并且添加甲磺酰氯(0.033mL，0.431mmol)。盖上小瓶，除去冰浴，并且将混合物在室温下搅拌过夜。将小瓶转移到Buchi旋转蒸发器中，除去溶剂，并且获得呈棕褐色油状物的粗产物3-((6-溴吡啶-2-基)氧基)丙基甲磺酸酯。向分离的棕褐色油状物中添加DMF(10mL)、6当量(R)-吡咯烷-3-醇盐酸盐(320mg，2.59mmol)、5当量碘化钠(323mg，2.155mmol)和10当量碳酸钾(596mg，4.31mmol)。盖上小瓶，并且将混合物在55℃下搅拌7小时。将混合物冷却至室温，用10mL水稀释并推过Waters 6g HLB提取柱体。将柱体用20mL的另外的水冲洗，将产物用20mL甲醇洗脱。然后将甲醇溶液推过Biotage 5g SCX-2柱体。将SCX柱体用20mL甲醇冲洗。将所需产物用50mL的甲醇中的2M氨洗脱。将挥发物在氮气流下蒸发，以得到60mg呈淡黄色油状物的(R)-1-(3-((6-溴吡啶-2-基)氧基)丙基)吡咯烷-3-醇(44％产率)。使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LCMS(ESI+)上获得LC/MS数据：Phenomenex Luna 3μm C18，2x 30mm柱，梯度为在2分钟内0-100％B(B＝90％HPLC级乙腈/0.1％三氟乙酸/10％HPLC级水)，(A＝90％HPLC级水/0.1％三氟乙酸/10％HPLC级乙腈)，以1mL/分钟的流速保持1分钟。LCMS Rt＝1.059min.,m/z 302.95(M+H),90％纯度。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.41(t,J＝7.6Hz,1H),7.04(d,J＝7.6Hz,1H),6.67(d,J＝7.6Hz,1H),4.41-4.30(m,3H),2.93(m,1H),2.73(d,J＝10.1Hz,1H),2.65-2.59(m,2H),2.52(dd,J＝10.0,5.1Hz,1H),2.33-2.25(m,1H),2.20(m,1H),2.02-1.92(m,2H),1.80-1.70(m,1H)。
中间体：(R)-5-((4-氯-2-甲酰基-5-((3-(6-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)吡啶-2-基)-2-甲基苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈
向密封管中添加5-((4-氯-2-甲酰基-5-((2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈(52.5mg，0.101mmol)、THF(6mL)、水(2.000mL)、(R)-1-(3-((6-溴吡啶-2-基)氧基)丙基)吡咯烷-3-醇(27.7mg，0.092mmol)、磷酸三钾(48.8mg，0.230mmol)和第二代X-Phos预催化剂(3.62mg，4.60μmol)。将容器密封，将混合物用氮气脱气/冲洗，然后在80℃下加热过夜。冷却混合物，并且在氮气流下除去挥发物。将所得油状固体溶解在DCM中，用水、盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在氮气下蒸发，以得到66.6mg呈黄色固体的(R)-5-((4-氯-2-甲酰基-5-((3-(6-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)吡啶-2-基)-2-甲基苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈(83％)。
使用下组条件在220nm下在Shimadzu分析型LC/Micromass Platform LC(ESI+)上获得LC/MS数据：Phenomenex Luna 3μm C18，2x 30mm柱，梯度为在2分钟内0-100％B(B＝90％HPLC级乙腈/0.1％三氟乙酸/10％HPLC级水)，(A＝90％HPLC级水/0.1％三氟乙酸/10％HPLC级乙腈)，以1mL/分钟的流速保持1分钟。LCMS Rt＝1.480min.,m/z 614.25(M+H)。1HNMR(500MHz,CDCl3)δ10.29(s,1H),8.91(m,2H),8.09(m,1H),7.94(s,1H),7.66(dd,J＝8.4,7.3Hz,1H),7.50-7.39(m,2H),7.33(m,1H),6.97(m,1H),6.73(dd,J＝8.3,0.7Hz,1H),6.65(s,1H),5.29-5.22(m,4H),4.39(t,J＝6.5Hz,2H),4.32(m,1H),2.93(m,1H),2.73(m,1H),2.64(t,J＝7.3Hz,2H),2.50(m,1H),2.40(s,3H),2.28(m,1H),2.23-2.12(m,1H),2.04-1.94(m,2H),1.73(m,1H)。
实施例1030：(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(6-(3-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)吡啶-2-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-甲酸
向小瓶中添加(R)-5-((4-氯-2-甲酰基-5-((3-(6-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)吡啶-2-基)-2-甲基苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈(34mg，0.055mmol)、L-哌啶酸(10.74mg，0.083mmol)、DMF(1mL)、AcOH(0.111mL)和硼烷-2-甲基吡啶络合物(11.86mg，0.111mmol)。盖上小瓶，并且将混合物在室温下振荡过夜。使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗产物：Waters XBridge 5μm C18，19x 200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经30分钟20％-75％B，以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。产物(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(6-(3-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)吡啶-2-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-甲酸的产量为4.4mg(10.4％)，并且通过LCMS分析估计的其纯度为95.5％。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.00(m,2H),8.46(s,1H),7.79(t,J＝7.8Hz,1H),7.54(d,J＝7.3Hz,1H),7.44(s,1H),7.40-7.35(m,1H),7.34-7.27(m,1H),7.12(s,1H),7.06(d,J＝7.3Hz,1H),6.79(d,J＝8.2Hz,1H),5.34(s,2H),5.28(s,2H),4.29(t,J＝6.7Hz,2H),4.21-4.10(m,1H),3.77(d,J＝13.7Hz,1H),3.06(m,1H),2.87(m,1H),2.69(m,1H),2.48(m,1H),2.33(s,3H),2.29(m,2H),2.22(m,1H),2.03-1.89(m,2H),1.89-1.82(m,6H),1.49(m,4H),1.34(m,1H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含0.1％三氟乙酸的水；流动相B为95:5乙腈:含0.1％三氟乙酸的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.358min；ESI-MS(+)m/z＝727.1(M+H)
分析条件2：保留时间＝1.383min；ESI-MS(+)m/z＝727.1(M+H)
实施例1031：(R)-5-((4-氯-2-(羟基甲基)-5-((3-(6-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)吡啶-2-基)-2-甲基苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈
从实施例1030的反应混合物中分离实施例1031。使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μm C18，19x 200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经30分钟20％-75％B，以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。产物的产量为4.6mg(11％产率)，并且通过LCMS分析估计的其纯度为95％。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.96(m,2H),8.38(s,1H),7.85-7.69(m,1H),7.49(d,J＝7.0Hz,1H),7.42-7.30(m,2H),7.30-7.21(m,1H),7.11-6.97(m,2H),6.78(d,J＝7.9Hz,1H),5.32(s,2H),5.25(s,2H),4.47(s,2H),4.27(m,2H),3.88(m,1H),2.70(m,1H),2.43(m,1H),2.31(m 4H),1.95(m 1H),1.86(m,5H),1.51(m,1H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含0.1％三氟乙酸的水；流动相B为95:5乙腈:含0.1％三氟乙酸的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.599min；ESI-MS(+)m/z＝616.1(M+H)
分析条件2：保留时间＝1.598min；ESI-MS(+)m/z＝616.1(M+H)
中间体：(2-甲基-3-(喹喔啉-6-基)苯基)甲醇
通过使用在THF中的第2代XPhos预催化剂和0.5M磷酸三钾水溶液从室温下的6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹喔啉与(3-溴-2-甲基苯基)甲醇之间的偶联获得(2-甲基-3-(喹喔啉-6-基)苯基)甲醇。
1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.93-8.89(m,2H),8.18(d,J＝8.5Hz,1H),8.07(d,J＝2.0Hz,1H),7.78(dd,J＝8.7,1.9Hz,1H),7.51(dd,J＝7.2,1.6Hz,1H),7.39-7.31(m,2H),4.85(d,J＝5.5Hz,2H),2.33(s,3H),1.72(t,J＝5.6Hz,1H)。
中间体：5-氯-2-羟基-4-((2-甲基-3-(喹喔啉-6-基)苄基)氧基)苯甲醛
使用在THF中的偶氮二甲酸二异丙酯和三苯基膦从(2-甲基-3-(喹喔啉-6-基)苯基)甲醇与5-氯-2,4-二羟基苯甲醛之间的反应获得5-氯-2-羟基-4-((2-甲基-3-(喹喔啉-6-基)苄基)氧基)苯甲醛。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ11.47(s,1H),9.77-9.71(m,1H),8.95-8.88(m,2H),8.20(d,J＝8.5Hz,1H),8.09(d,J＝1.8Hz,1H),7.80(dd,J＝8.7,1.9Hz,1H),7.62-7.55(m,2H),7.44-7.35(m,2H),6.68(s,1H),5.27(m,2H),2.34(s,3H)。
中间体：5-((4-氯-2-甲酰基-5-((2-甲基-3-(喹喔啉-6-基)苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈
使用在DMF中的碳酸铯从5-氯-2-羟基-4-((2-甲基-3-(喹喔啉-6-基)苄基)氧基)苯甲醛与5-(氯甲基)烟腈之间的反应获得5-((4-氯-2-甲酰基-5-((2-甲基-3-(喹喔啉-6-基)苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈。
实施例1032：(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(喹喔啉-6-基)苄基)氧基)苄基)哌啶-2-甲酸
使用在DMF中的TFA和三乙酰氧基硼氢化钠从5-((4-氯-2-甲酰基-5-((2-甲基-3-(喹喔啉-6-基)苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈与(S)-哌啶-2-甲酸之间的反应获得(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(喹喔啉-6-基)苄基)氧基)苄基)哌啶-2-甲酸。用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：柱：XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10-mM乙酸铵的水；梯度：经15分钟25％-65％B，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.01(d,J＝2.7Hz,4H),8.47(s,1H),8.19(d,J＝8.5Hz,1H),8.03(d,J＝1.2Hz,1H),7.87(dd,J＝8.5,1.5Hz,1H),7.62-7.57(m,1H),7.44(s,1H),7.41-7.35(m,2H),7.15(s,1H),5.40-5.34(m,2H),5.32(s,2H),3.79(d,J＝13.7Hz,1H),3.62(d,J＝14.0Hz,1H),3.14(dd,J＝7.3,4.3Hz,1H),2.93-2.85(m,1H)2.34-2.24(m,4H),1.84-1.68(m,2H),1.49(br.s.,3H),1.37(br.s.,1H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：柱：Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水；温度：50℃；梯度：0％B，经3分钟0-100％B，然后在100％B下保持0.5分钟；流速：1mL/min；检测：在220nm下的UV。
注射2条件：柱：Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A：5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B：95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水；温度：50℃；梯度：0％B，经3分钟0-100％B，然后在100％B下保持0.5分钟；流速：0.5mL/min；检测：在220nm下的UV。
LCMS(注射1条件：乙腈:含10mM乙酸铵的水)
Rt(保留时间)＝1.65min,ESI m/z 634(M+1),632(M-1)。
LCMS(注射2条件：甲醇:含10mM乙酸铵的水)
Rt＝2.52min,ESI m/z 634(M+1),632(M-1)。
实施例1033：(R)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(喹喔啉-6-基)苄基)氧基)苄基)哌啶-2-甲酸
以与实施例1001类似的方式从5-((4-氯-2-甲酰基-5-((2-甲基-3-(喹喔啉-6-基)苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈和(R)-哌啶-2-甲酸获得(R)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(喹喔啉-6-基)苄基)氧基)苄基)哌啶-2-甲酸。用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：柱：XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10-mM乙酸铵的水；梯度：经15分钟25％-65％B，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.01(d,J＝2.7Hz,4H),8.47(s,1H),8.19(d,J＝8.9Hz,1H),8.02(s,1H),7.87(d,J＝8.5Hz,1H),7.61-7.57(m,1H),7.44(s,1H),7.42-7.35(m,2H),7.15(s,1H),5.40-5.30(m,4H),3.79(d,J＝13.7Hz,1H),3.62(d,J＝13.7Hz,1H),3.14(dd,J＝7.3,4.0Hz,1H),2.93-2.85(m,1H),2.34-2.25(m,4H),1.85-1.68(m,2H),1.49(br.s.,3H),1.37(br.s.,1H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：柱：Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水；温度：50℃；梯度：0％B，经3分钟0-100％B，然后在100％B下保持0.5分钟；流速：1mL/min；检测：在220nm下的UV。
注射2条件：柱：Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A：5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B：95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水；温度：50℃；梯度：0％B，经3分钟0-100％B，然后在100％B下保持0.5分钟；流速：0.5mL/min；检测：在220nm下的UV。
LCMS(注射1条件：乙腈:含10mM乙酸铵的水)
Rt＝1.60min,ESI m/z 634(M+1),632(M-1)。
LCMS(注射2条件：甲醇:含10mM乙酸铵的水)
Rt＝2.52min,ESI m/z 634(M+1),632(M-1)。
实施例1034：(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(喹喔啉-6-基)苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸
以与实施例1001类似的方式从5-((4-氯-2-甲酰基-5-((2-甲基-3-(喹喔啉-6-基)苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈和(R)-2-氨基-3-羟基丙酸获得(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(喹喔啉-6-基)苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸。用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：柱：XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10-mM乙酸铵的水；梯度：经15分钟20％-60％B，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.07-8.99(m,4H),8.54(s,1H),8.20(d,J＝8.5Hz,1H),8.03(d,J＝1.5Hz,1H),7.87(dd,J＝8.5,1.8Hz,1H),7.59(d,J＝6.7Hz,1H),7.55(s,1H),7.42-7.35(m,2H),7.18(s,1H),5.43-5.33(m,4H),4.07-3.98(m,2H),3.74(dd,J＝11.3,4.3Hz,1H),3.67-3.61(m,1H),3.22-3.17(m,1H),2.32(s,3H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：柱：Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水；温度：50℃；梯度：0％B，经3分钟0-100％B，然后在100％B下保持0.5分钟；流速：1mL/min；检测：在220nm下的UV。
注射2条件：柱：Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A：5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B：95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水；温度：50℃；梯度：0％B，经3分钟0-100％B，然后在100％B下保持0.5分钟；流速：0.5mL/min；检测：在220nm下的UV。
LCMS(注射1条件：乙腈:含10mM乙酸铵的水)
Rt＝1.73min,ESI m/z 610(M+1),608(M-1)。
LCMS(注射2条件：甲醇:含10mM乙酸铵的水)
Rt＝2.47min,ESI m/z 610(M+1),608(M-1)。
实施例1035：(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(喹喔啉-6-基)苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸
以与实施例1001类似的方式从5-((4-氯-2-甲酰基-5-((2-甲基-3-(喹喔啉-6-基)苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈和(R)-2-氨基-3-羟基-2-甲基丙酸获得(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(喹喔啉-6-基)苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸。用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：柱：XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10-mM乙酸铵的水；梯度：经15分钟15％-55％B，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.04(d,J＝1.5Hz,1H),9.03-8.98(m,3H),8.52(s,1H),8.19(d,J＝8.8Hz,1H),8.02(d,J＝1.2Hz,1H),7.86(dd,J＝8.5,1.5Hz,1H),7.60-7.54(m,2H),7.42-7.34(m,2H),7.16(s,1H),5.36(d,J＝11.6Hz,4H),3.95(s,2H),3.63-3.58(m,1H),3.53(d,J＝11.3Hz,1H),2.31(s,3H),1.23(s,3H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：柱：Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水；温度：50℃；梯度：0％B，经3分钟0-100％B，然后在100％B下保持0.5分钟；流速：1mL/min；检测：在220nm下的UV。
注射2条件：柱：Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A：5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B：95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水；温度：50℃；梯度：0％B，经3分钟0-100％B，然后在100％B下保持0.5分钟；流速：0.5mL/min；检测：在220nm下的UV。
LCMS(注射1条件：乙腈:含10mM乙酸铵的水)
Rt＝1.54min,ESI m/z 624(M+1),622(M-1)。
LCMS(注射2条件：甲醇:含10mM乙酸铵的水)
Rt＝2.50min,ESI m/z 624(M+1),622(M-1)。
实施例1036：(S)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(喹喔啉-6-基)苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸
以与实施例1001类似的方式从5-((4-氯-2-甲酰基-5-((2-甲基-3-(喹喔啉-6-基)苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈和(S)-2-氨基-3-羟基-2-甲基丙酸获得(S)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(喹喔啉-6-基)苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸。用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：柱：XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10-mM乙酸铵的水；梯度：经15分钟15％-55％B，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.04(d,J＝1.5Hz,1H),9.03-8.99(m,3H),8.52(s,1H),8.19(d,J＝8.5Hz,1H),8.02(d,J＝1.5Hz,1H),7.86(dd,J＝8.5,1.5Hz,1H),7.59-7.55(m,2H),7.41-7.34(m,2H),7.16(s,1H),5.36(d,J＝11.6Hz,4H),3.95(s,2H),3.63-3.59(m,1H),3.53(d,J＝11.3Hz,1H),2.31(s,3H),1.24(s,3H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：柱：Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水；温度：50℃；梯度：0％B，经3分钟0-100％B，然后在100％B下保持0.5分钟；流速：1mL/min；检测：在220nm下的UV。
注射2条件：柱：Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A：5:95甲醇:含10mM乙酸铵的水；流动相B：95:5甲醇:含10mM乙酸铵的水；温度：50℃；梯度：0％B，经3分钟0-100％B，然后在100％B下保持0.5分钟；流速：0.5mL/min；检测：在220nm下的UV。
LCMS(注射1条件：乙腈:含10mM乙酸铵的水)
Rt＝1.62min,ESI m/z 624(M+1),622(M-1)。
LCMS(注射2条件：甲醇:含10mM乙酸铵的水)
Rt＝2.50min,ESI m/z 624(M+1),622(M-1)。
中间体：3-溴-1-(3-氯丙基)吡啶-2(1H)-酮和3-溴-1-(3-溴丙基)吡啶-2(1H)-酮
向DMF(13mL)中的3-溴吡啶-2(1H)-酮(500mg，2.87mmol)的溶液中添加K2CO3(794mg，5.75mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1小时，然后添加1-溴-3-氯丙烷(0.283mL，2.87mmol)，并且将反应混合物在50℃下搅拌19小时。除去溶剂。将残余物溶于DCM中。将有机层用水、盐水洗涤并经MgSO4干燥，并且然后浓缩。通过硅胶柱色谱法纯化粗产物(用DCM中的EtOAc的梯度(0-50％)洗脱)，以提供目标化合物的混合物(352mg，49％)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ7.77(dd,J＝7.3,1.9Hz,1H),7.39-7.35(m,1H),6.11(t,J＝6.9Hz,1H),4.22-4.15(m,2H),3.61-3.54(m,1.5H),3.42(t,J＝6.1Hz,0.5H),2.41-2.35(m,0.5H),2.30(dt,J＝12.4,6.4Hz,1.5H)。基于1H NMR谱：3-溴-1-(3-氯丙基)吡啶-2(1H)-酮为75％，并且3-溴-1-(3-溴丙基)吡啶-2(1H)-酮(76)为25％。
中间体：5-((4-氯-5-((3-(1-(3-氯丙基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈
使用在THF中的第2代XPhos预催化剂和0.5M磷酸三钾水溶液从3-溴-1-(3-氯丙基)吡啶-2(1H)-酮和3-溴-1-(3-溴丙基)吡啶-2(1H)-酮的混合物与5-((4-氯-2-甲酰基-5-((2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈的偶联获得5-((4-氯-5-((3-(1-(3-氯丙基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ10.32-10.27(m,1H),8.97(d,J＝2.0Hz,1H),8.88(d,J＝1.9Hz,1H),8.19(t,J＝2.0Hz,1H),7.92(s,1H),7.46(dd,J＝6.8,2.0Hz,1H),7.40(dd,J＝6.8,2.0Hz,1H),7.38-7.35(m,1H),7.27-7.22(m,1H),7.22-7.18(m,1H),6.45(s,1H),6.34(t,J＝6.8Hz,1H),5.27(d,J＝6.0Hz,2H),5.17(s,2H),4.24-4.17(m,2H),3.61(t,J＝6.1Hz,2H),2.33-2.25(m,5H)。
中间体：(R)-5-((4-氯-2-甲酰基-5-((3-(1-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-2-甲基苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈
将DMF(8mL)中的5-((4-氯-5-((3-(1-(3-氯丙基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈(304mg，0.540mmol)(77)、(R)-吡咯烷-3-醇HCl(100mg，0.811mmol)和K2CO3(112mg，0.811mmol)、碘化钠(81mg，0.540mmol)的溶液在60℃下加热6小时。除去溶剂。将残余物分配在EtOAc与水之间。将水相用乙酸乙酯萃取一次。将有机萃取物合并并用盐水洗涤并且然后经硫酸钠干燥。通过过滤除去干燥剂，并且在真空中除去溶剂。通过硅胶柱色谱法(Biotage 25s，0-20％MeOH/DCM)纯化所得残余物，以获得145mg目标化合物。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ10.29(s,1H),8.98(d,J＝2.0Hz,1H),8.87(d,J＝1.9Hz,1H),8.22(t,J＝2.0Hz,1H),7.91(s,1H),7.47-7.46(m,1H),7.39-7.34(m,2H),7.26-7.17(m,2H),6.46-6.44(m,1H),6.32-6.28(m,1H),5.37(br,s 2H),5.16(s,2H),4.34(ddt,J＝7.0,4.7,2.1Hz,1H),4.12(t,J＝6.9Hz,2H),2.91(td,J＝8.6,4.8Hz,1H),2.72(d,J＝9.9Hz,1H),2.55-2.47(m,3H),2.31-2.24(m,4H),2.22-2.14(m,1H),2.05-1.96(m,2H),1.75(dt,J＝13.5,6.7Hz,1H)。
实施例1037：(S)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(1-(3-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)丙基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸
使用在MeOH中的硼烷-2-甲基吡啶络合物和乙酸从(R)-5-((4-氯-2-甲酰基-5-((3-(1-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-2-甲基苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈和(S)-2-氨基-3-羟基-2-甲基丙酸的偶联获得2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(1-(3-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)丙基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸。用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：柱：XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10-mM乙酸铵的水；梯度：经20分钟5％-45％B，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.04(d,J＝1.8Hz,1H),9.00(d,J＝1.8Hz,1H),8.51(s,1H),7.73(dd,J＝6.8,2.0Hz,1H),7.54(s,1H),7.43(d,J＝7.3Hz,1H),7.35(dd,J＝6.6,1.8Hz,1H),7.22(t,J＝7.7Hz,1H),7.13(d,J＝8.1Hz,1H),7.07(s,1H),6.32(t,J＝6.8Hz,1H),5.34(s,2H),5.28(s,2H),4.17(br.s.,1H),4.01-3.94(m,4H),,2.72-2.65(m,1H),2.57-2.53(m,2H),2.45-2.35(m,3H),2.29(dd,J＝9.5,3.3Hz,1H),2.16-212(m,1H),2.14(s,3H),2.00-1.92(m,1H),1.85-1.75(m,2H),1.53(dd,J＝8.4,4.8Hz,1H),1.23(s,3H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：柱：Waters Acquity UPLC BEH C18，2.1x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水；温度：50℃；梯度：经3分钟0-100％B，然后在100％B下保持0.75分钟；流速：1.0mL/min；检测：在220nm下的UV。
注射2条件：柱：Waters Acquity UPLC BEH C18，2.1x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含0.1％三氟乙酸的水；流动相B：95:5乙腈:含0.1％三氟乙酸的水；温度：50℃；梯度：经3分钟0-100％B，然后在100％B下保持0.75分钟；流速：1.0mL/min；检测：在220nm下的UV。
LCMS(注射1条件：乙腈:含10mM乙酸铵的水)
Rt＝1.185min,ESI m/z 716(M+1),714(M-1)。
LCMS(注射2条件：乙腈:含0.1％三氟乙酸的水)
Rt＝1.182min,ESI m/z 716(M+1),714(M-1)。
实施例1038：(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(1-(3-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)丙基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸
以与实施例1006类似的方式从(R)-5-((4-氯-2-甲酰基-5-((3-(1-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-2-甲基苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈与(R)-2-氨基-3-羟基-2-甲基丙酸之间的反应获得(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(1-(3-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)丙基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸。用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：柱：XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10-mM乙酸铵的水；梯度：经20分钟5％-45％B，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.04(d,J＝1.8Hz,1H),9.00(d,J＝1.8Hz,1H),8.50(s,1H),7.73(dd,J＝6.8,2.0Hz,1H),7.54(s,1H),7.43(d,J＝7.0Hz,1H),7.35(dd,J＝6.6,2.2Hz,1H),7.22(t,J＝7.7Hz,1H),7.12(d,J＝8.1Hz,1H),7.07(s,1H),6.32(t,J＝6.8Hz,1H),5.34(s,2H),5.28(s,2H),4.17(br.s.,1H),4.01-3.94(m,4H),2.69(dd,J＝9.5,6.2Hz,1H),2.56-2.53(m,2H),2.43-2.36(m,3H),2.28(dd,J＝9.5,3.7Hz,1H),2.16-2.11(m,1H),2.14(s,3H),2.01-1.93(m,1H),1.85-1.75(m,2H),1.58-1.49(m,1H),1.23(s,3H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：柱：Waters Acquity UPLC BEH C18，2.1x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水；温度：50℃；梯度：经3分钟0-100％B，然后在100％B下保持0.75分钟；流速：1.0mL/min；检测：在220nm下的UV。注射2条件：柱：Waters Acquity UPLC BEH C18，2.1x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含0.1％三氟乙酸的水；流动相B：95:5乙腈:含0.1％三氟乙酸的水；温度：50℃；梯度：经3分钟0-100％B，然后在100％B下保持0.75分钟；流速：1.0mL/min；检测：在220nm下的UV。
LCMS(注射1条件：乙腈:含10mM乙酸铵的水)
Rt＝1.203min,ESI m/z 716(M+1),714(M-1)。
LCMS(注射2条件：乙腈:含0.1％三氟乙酸的水)
Rt＝1.158min,ESI m/z 716(M+1),714(M-1)。
实施例1039：(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(1-(3-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)丙基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-甲酸
以与实施例1006类似的方式从(R)-5-((4-氯-2-甲酰基-5-((3-(1-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-2-甲基苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈和(S)-哌啶-2-甲酸获得(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(1-(3-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)丙基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-甲酸。用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：柱：XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10-mM乙酸铵的水；梯度：经20分钟10％-50％B，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.01(s,2H),8.46(s,1H),7.74(d,J＝4.8Hz,1H),7.47-7.42(m,2H),7.37-7.34(m,1H),7.23(t,J＝7.5Hz,1H),7.13(d,J＝7.3Hz,1H),7.07(s,1H),6.32(t,J＝6.8Hz,1H),5.33(s,2H),5.25(s,2H),4.17(br.s.,1H),4.02-3.95(m,2H),3.85(d,J＝13.6Hz,1H),3.68(d,J＝13.6Hz,1H),3.19-3.11(m,1H),2.95-2.87(m,1H),2.69(dd,J＝9.7,6.4Hz,1H),2.55(m,2H),2.45-2.36(m,3H),2.32-2.26(m,1H),2.14(s,3H),2.01-1.93(m,1H),1.82(t,J＝6.6Hz,3H),1.75-1.64(m,1H),1.50(br.s.,4H),1.37(br.s.,1H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：柱：Waters Acquity UPLC BEH C18，2.1x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水；温度：50℃；梯度：经3分钟0-100％B，然后在100％B下保持0.75分钟；流速：1.0mL/min；检测：在220nm下的UV。
注射2条件：柱：Waters Acquity UPLC BEH C18，2.1x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含0.1％三氟乙酸的水；流动相B：95:5乙腈:含0.1％三氟乙酸的水；温度：50℃；梯度：经3分钟0-100％B，然后在100％B下保持0.75分钟；流速：1.0mL/min；检测：在220nm下的UV。
LCMS(注射1条件：乙腈:含10mM乙酸铵的水)
Rt＝1.218min,ESI m/z 726(M+1),724(M-1)。
LCMS(注射2条件：乙腈:含0.1％三氟乙酸的水)
Rt＝1.218min,ESI m/z 726(M+1),724(M-1)。
实施例1040：(S)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(1-(3-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)丙基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸
以与实施例1006类似的方式从(R)-5-((4-氯-2-甲酰基-5-((3-(1-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-2-甲基苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈和(S)-2-氨基-3-羟基丙酸获得(S)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(1-(3-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)丙基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸。用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：柱：XBridge C18，19x200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10-mM乙酸铵的水；梯度：经15分钟15％-50％B，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.04(d,J＝1.5Hz,1H),9.01(d,J＝1.8Hz,1H),8.51(s,1H),7.73(dd,J＝6.6,1.8Hz,1H),7.51(s,1H),7.43(d,J＝7.7Hz,1H),7.35(dd,J＝6.8,2.0Hz,1H),7.23(t,J＝7.5Hz,1H),7.13(d,J＝7.7Hz,1H),7.08(s,1H),6.32(t,J＝6.8Hz,1H),5.34(d,J＝7.3Hz,2H),5.27(s,2H),4.17(br.s.,1H),4.05-3.94(m,4H),3.73-3.67(m,1H),3.64-3.58(m,1H),3.17-3.12(m,1H),2.75-2.67(m,1H),2.59-2.53(m,1H),2.46-2.38(m,3H),2.30(dd,J＝9.5,3.7Hz,1H),2.14(s,3H),2.00-1.92(m,1H),1.82(t,J＝7.2Hz,2H),1.58-1.50(br,s,H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：柱：Waters Acquity UPLC BEH C18，2.1x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水；温度：50℃；梯度：经3分钟0-100％B，然后在100％B下保持0.75分钟；流速：1.0mL/min；检测：在220nm下的UV。
注射2条件：柱：Waters Acquity UPLC BEH C18，2.1x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含0.1％三氟乙酸的水；流动相B：95:5乙腈:含0.1％三氟乙酸的水；温度：50℃；梯度：经3分钟0-100％B，然后在100％B下保持0.75分钟；流速：1.0mL/min；检测：在220nm下的UV。
LCMS(注射1条件：乙腈:含10mM乙酸铵的水)
Rt＝1.161min,ESI m/z 702(M+1),700(M-1)。
LCMS(注射2条件：乙腈:含0.1％三氟乙酸的水)
Rt＝1.158min,ESI m/z 702(M+1),700(M-1)。
实施例1041：(S)-1-(4-((3-(苯并[d]噁唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)哌啶-2-甲酸
向小密封管中添加THF(2mL)、水(0.667mL)、5-溴苯并恶唑(13.16mg，0.066mmol)、(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苄基)氧基)苄基)哌啶-2-甲酸(35mg，0.055mmol)、磷酸三钾(23.51mg，0.111mmol)和第二代XPhos预催化剂(2.179mg，2.77μmol)。将容器密封，将混合物用氮气脱气/冲洗并且然后在75℃下加热过夜。
使用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：Waters XBridge 5μm C18，19x200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经15分钟25％-65％B，然后在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。使用以下条件通过制备型LC/MS进一步纯化材料：Waters XBridge 5μm C18，19x 200mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水，并且流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，梯度为经15分钟25％-65％B，然后在100％B下以20mL/分钟的流速保持5分钟。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。产物的产量为4.2mg(12％产率)，并且通过LCMS分析估计的其纯度为95％。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.93(m,2H),8.71(s,1H),8.37(s,1H),7.78(m,1H),7.73(s,1H),7.51-7.46(m,1H),7.44-7.32(m,1H),7.30-7.11(m,2H),7.03(m,1H),6.54(m,1H),5.28(m,2H),5.17(m,2H),3.71(d,J＝13.7Hz,1H),3.49(d,J＝13.7Hz,1H),3.04-2.97(m,1H),2.89-2.80(m,1H),2.25-2.18(m,4H),1.70(m,2H),1.43(m,3H),1.34-1.23(m,1H)。
使用两次分析型LC/MS注射来确定最终纯度。
注射1条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B为95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
注射2条件：Waters Acquity UPLC BEH 1.7μm C18，2.1x 50mm，其中流动相A为5:95乙腈:含0.1％三氟乙酸的水；流动相B为95:5乙腈:含0.1％三氟乙酸的水，温度为50℃，梯度为经3分钟0-100％B，在100％B下在220nm的UV波长下以1.0mL/分钟的流速保持0.75分钟。
分析条件1：保留时间＝1.696min；ESI-MS(+)m/z＝623.0(M+H)
分析条件2：保留时间＝1.874min；ESI-MS(+)m/z＝623.1(M+H)如下文所述制备实施例2001至2016，并且在下文列出了用于这些实施例的HPLC LC/MS条件：
LC/MS条件A：
柱＝Waters Aquity UPLC BEH C18，2.1x 50mm，1.7μm
开始％B＝2；最终％B＝98
梯度时间＝1.5min；停止时间＝2或2.5min
流速＝0.8mL/min；波长＝220nm或254nm
溶剂A＝100％水/0.05％TFA
溶剂B＝100％ACN/0.05％TFA，(ACN＝乙腈)
炉温＝40℃
LC/MS条件B：
柱＝Phenomenex-Luna C18，2.0X 50mm，3μm
开始％B＝0；最终％B＝100
梯度时间＝4min；停止时间＝5或6min
流速＝0.8mL/min；波长＝220nm或254nm
溶剂A＝5％ACN/95％水/10mM NH4OAc
溶剂B＝95％ACN/5％水/10mM NH4OAc
炉温＝40℃
LC/MS条件C：
柱＝Acquity UPLC BEH，C18 2.1x 50mm，1.7μ
开始％B＝0；最终％B＝100
梯度时间＝2min；停止时间＝3min
流速＝0.8mL/min；波长＝220nm或254nm
溶剂A＝10％MeOH/90％H2O/0.1％TFA
溶剂B＝90％MeOH/10％H2O/0.1％TFA
炉温＝40℃
LC/MS条件D：
柱＝Waters Aquity UPLC BEH C18，2.1x 50mm，1.7μm
开始％B＝2；最终％B＝98
梯度时间＝1.5min；停止时间＝1.6min
流速＝0.8mL/min；波长＝220nm或254nm
溶剂A＝100％水/0.05％TFA
溶剂B＝100％ACN/0.05％TFA
炉温＝50℃
LC/MS条件E：
柱＝Waters Acquity UPLC BEH C18，2.1x 50mm，1.7-μm
开始％B＝0；最终％B＝100
梯度时间＝3min；停止时间＝3.75min
流速＝1.0mL/min；波长＝220nm
溶剂A＝5％ACN/95％水/10mM NH4OAc
溶剂B＝95％ACN/5％水/10mM NH4OAc
炉温＝50℃
LC/MS条件F：
柱＝Waters Acquity UPLC BEH C18，2.1x 50mm，1.7-μm
开始％B＝0；最终％B＝100
梯度时间＝3min；停止时间＝3.75min
流速＝1.0mL/min；波长＝220nm
溶剂A＝5％ACN/95％水/0.1％TFA
溶剂B＝95％ACN/5％水/0.1％TFA
炉温＝50℃
中间体：5-氯-2-羟基-4-((2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苄基)氧基)苯甲醛
将新鲜蒸馏的无水THF(250mL)中的(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)甲醇(8.0g，32.2mmol)、5-氯-2,4-二羟基苯甲醛(5.56g，32.2mmol)和三苯基膦(11.4g，43.5mmol)的磁力搅拌溶液在冰/水浴中冷却并缓慢地(经30min)用DIAD(偶氮二甲酸二异丙酯，8.0mL，41.1mmol)处理。将反应用氩气冲洗，密封并允许搅拌过夜，同时缓慢升温至室温。将反应真空蒸发至稠油状物，然后在CH2Cl2/hex中施加到120gTeledyne Isco Silica Flash柱的头部，并且在Biotage上使用100％己烷至己烷中的40％EtOAc经12个柱体积纯化。将含有产物的级分真空蒸发并在高真空下干燥，以得到5.5g(42％)呈白色固体的纯标题化合物：1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ11.43(s,1H),9.71(s,1H),7.80(d,J＝7.5Hz,1H),7.60-7.47(m,2H),7.25(t,J＝7.5Hz,1H),6.61(s,1H),5.19(s,2H),2.59(s,3H),1.39(s,12H)。
中间体：5-((4-氯-2-甲酰基-5-((2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈
向无水DMF(40mL)中的5-氯-2-羟基-4-((2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苄基)氧基)苯甲醛(2.76g，6.85mmol)的磁力搅拌溶液中添加5-(氯甲基)烟腈(1.26g，8.26mmol)，然后添加碳酸铯(3.35g，10.28mmol)。将反应用N2充分冲洗，牢固地盖上盖子，并且置于75℃的油浴中。2.75h后，将反应冷却并用EtOAc(200mL)和水(150mL)分配。将水层用另外的EtOAc(200mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2x 50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并且真空蒸发。将残余物溶于CH2Cl2(15mL)中，施加到80g TeledyneIsco Silica Flash柱的头部，并且在Biotage上使用100％CH2Cl2至25％EtOAc/CH2Cl2的梯度经8个柱体积纯化。将含有产物的级分真空蒸发，然后在高真空下干燥，以得到1.92g(54％)呈灰白色固体的纯标题化合物：1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ10.29(s,1H),8.91(dd,J＝11.7,2.1Hz,2H),8.07(t,J＝2.1Hz,1H),7.93(s,1H),7.81(dd,J＝7.5,1.2Hz,1H),7.47(d,J＝6.6Hz,1H),7.24(t,J＝7.6Hz,1H),6.57(s,1H),5.24(s,2H),5.19(s,2H),2.60(s,3H),1.39(s,12H)。
中间体：4-溴-3-氯-2-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)吡啶
在连续氩气冲洗下，向无水DMF(5mL)中的氢化钠(74.1mg，3.09mmol)的悬浮液中缓慢添加3-(哌啶-1-基)丙-1-醇(440mg，3.07mmol)。将反应搅拌10min，然后经1min分批用固体4-溴-2,3-二氯吡啶(655mg，2.89mmol)处理。允许将反应在室温下搅拌3h，通过0.45uM玻璃料过滤，并且通过反相制备型HPLC纯化，使用Sunfire C18 10uM 50x 300mm柱，以150mL/min经30min从10％溶剂B至100％溶剂B，在220nM下检测(溶剂A为10％MeOH/90％含0.1％TFA的水，并且溶剂B为90％MeOH和10％含0.1％TFA的水)，以得到呈TFA盐的纯标题化合物(151.5mg，9％)；1H NMR(500Mhz,氯仿-d)δ7.86(d,J＝5.3Hz,1H),7.21(d,J＝5.3Hz,1H),4.47(t,J＝5.7Hz,2H),3.79(br d,J＝11.7Hz,2H),3.37-3.25(m,2H),2.83-2.67(m,2H),2.39-2.25(m,2H),2.04-1.89(m,5H),1.56-1.40(m,1H)
中间体：5-((4-氯-5-((3-(3-氯-2-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)吡啶-4-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈
向无水THF(7mL)中的4-溴-3-氯-2-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)吡啶2TFA(86.3mg，0.154mmol)和5-((4-氯-2-甲酰基-5-((2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈(90mg，0.173mmol)的溶液中添加水中的磷酸三钾0.5M(0.8mL，0.400mmol)。将反应用氩气充分冲洗，并且然后用第2代X-phos预催化剂(17mg，0.022mmol)处理。将所得混合物再次用氩气冲洗，牢固地盖上盖子，并且允许在室温下搅拌3.5天。在温和的N2流下除去溶剂，并且将残余物用水(100mL)和EtOAc(75mL)分配。将有机层用盐水(40mL)萃取，经Na2SO4干燥，过滤，并且将溶剂真空除去，以得到按粗品使用的标题化合物。LC/MS条件A：保留时间1.104min；m/e＝645，(ret time＝retention time)。
中间体：3-((2,3-二氯吡啶-4-基)氧基)丙-1-醇
在氩气下向纯丙烷-1,3-二醇(4g，52.6mmol)中添加氢化钠(68mg，2.75mmol)。将反应(非常温热)在N2下冲洗，然后用4-溴-2,3-二氯吡啶(500mg，2.204mmol)处理，然后用无水THF(5mL)处理。将反应用氩气冲洗，牢固地盖上盖子，并且允许在室温下搅拌2天。将反应倒入水(150mL，含有1N HCl(1mL))中并用EtOAc(200mL)分配。分离各层，并且将有机层用水(23x 70mL)、盐水(75mL)洗涤，经Na2SO4干燥，并且真空除去溶剂。将粗材料在CH2Cl2中施加到80g Teledyne Isco Silica Flash柱的头部，并且在Biotage上使用100％CH2Cl2至己烷中的100％EtOAc的地图经9个柱体积纯化。将含有产物的级分合并，真空蒸发并在高真空下干燥，以得到呈白色固体的纯标题化合物(210mg，43％)LC/MS条件A：保留时间0.860min；m/e＝222；1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ8.17(d,J＝5.5Hz,1H),6.84(d,J＝5.6Hz,1H),4.29(t,J＝6.0Hz,2H),3.92(t,J＝5.8Hz,2H),2.14(quin,J＝5.9Hz,2H)
中间体：5-((4-氯-5-((3-(3-氯-4-(3-羟基丙氧基)吡啶-2-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈
向无水THF(30mL)中的5-((4-氯-2-甲酰基-5-((2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈(400mg，0.771mmol)和3-((2,3-二氯吡啶-4-基)氧基)丙-1-醇(175mg，0.788mmol)的溶液中添加水中的磷酸三钾0.5M(3.9mL，1.950mmol)。将反应用氩气冲洗，并且然后用第2代X-phos预催化剂(60mg，0.076mmol)处理。将所得混合物再次用氩气充分冲洗，牢固地盖上盖子并置于65℃的油浴中持续18h。在温和的N2流下大部分除去溶剂，并且将残余物用EtOAc(100mL)和水(40mL)分配。将水层用EtOAc(50mL)萃取，并且将有机层合并，用盐水(15mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并且真空除去溶剂。将粗材料在CH2Cl2中施加到40g Teledyne Isco Silica Flash柱的头部，并且在Biotage上使用100％CH2Cl2至100％EtOAc的梯度经8个柱体积纯化，然后使用100％EtOAc值20％MeOH/EtOAc的梯度经5个柱体积纯化。将含有产物的级分合并，真空蒸发并在高真空下干燥，以得到纯标题化合物(300mg，67％)。LC/MS条件A：保留时间1.002min；m/e＝578；1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ10.29(s,1H),8.92(d,J＝1.5Hz,2H),8.47(d,J＝5.6Hz,1H),8.11(t,J＝1.8Hz,1H),7.93(s,1H),7.49(d,J＝7.3Hz,1H),7.40-7.32(m,1H),7.30(s,1H),6.95(d,J＝5.6Hz,1H),6.55(s,1H),5.33(s,2H),5.15(s,2H),4.35(br t,J＝4.9Hz,2H),3.95(br s,2H),2.23-2.15(m,5H)
中间体：5-((5-((3-(4-(3-溴丙氧基)-3-氯吡啶-2-基)-2-甲基苄基)氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈
在连续氩气冲洗下，向CH2Cl2(5mL)中的5-((4-氯-5-((3-(3-氯-4-(3-羟基丙氧基)吡啶-2-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈(182mg，0.315mmol)和三苯基膦(98.3mg，0.375mmol)的磁力搅拌溶液中添加固体四溴化碳(123mg，0.371mmol)。将反应用氩气充分冲洗，牢固地盖上盖子并在室温下搅拌4h。将反应直接施加到40gTeledyne Isco Silica Flash柱的头部，并且在Biotage上使用100％CH2Cl2至100％EtOAc的梯度经11个柱体积纯化。将含有产物的级分合并，真空蒸发并在高真空下干燥，以得到纯标题化合物(88.5mg，44％)。LC/MS条件B：保留时间3.68min；m/e＝640
1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ10.29(s,1H),8.93(m,2H),8.48(d,J＝5.5Hz,1H),8.11(t,J＝2.1Hz,1H),7.94(s,1H),7.51-7.46(m,1H),7.37-7.33(m,1H),7.31-7.29(m,1H),6.95(d,J＝5.6Hz,1H),6.56(s,1H),5.33(s,2H),5.16(s,2H),4.34(t,J＝5.6Hz,2H),3.69(t,J＝6.3Hz,2H),2.47(quin,J＝6.0Hz,2H),2.19(s,3H)。
中间体：(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸
向DCE(15mL)和EtOH(15mL)的混合物中的5-((4-氯-2-甲酰基-5-((2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈(1.2g，2.313mmol)和(R)-2-氨基-3-羟基-2-甲基丙酸(0.551g，4.63mmol)的混合物中添加乙酸(0.265mL，4.63mmol)和4A分子筛(100mg)。将所得混合物在室温下搅拌5h，然后经40h用氰基硼氢化钠(4.63mL，4.63mmol)逐滴处理。过滤反应混合物，浓缩滤液(<20℃浴)，并且通过反相制备型HPLC纯化残余物，使用Sunfire C18 10uM 50x 100mm柱，以150mL/min经30min从15％溶剂B至100％溶剂B，在220nM下检测(溶剂A为5％CH3CN/95％含10mM NH4OAc的水，并且溶剂B为95％CH3CN/5％含10mM NH4Oac的水)，以得到纯标题化合物(220mg，15％)。LC/MS条件C：保留时间2.120min,m/e＝622；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.96(d,J＝6.3Hz,1H),8.89(d,J＝6.0Hz,1H),8.39(d,J＝12.5Hz,1H),7.69(dd,J＝7.5,1.3Hz,1H),7.55(d,J＝1.0Hz,1H),7.49-7.38(m,1H),7.30-7.24(m,1H),7.18(dt,J＝14.9,7.5Hz,1H),7.03-6.90(m,1H),5.35(d,J＝2.3Hz,2H),5.26(s,2H),4.22(s,2H),3.92(d,J＝11.8Hz,1H),3.72(d,J＝12.0Hz,1H),2.61-2.32(m,3H),1.44(s,3H),1.38(s,6H)。
中间体：2-溴-1,3-二甲基-5,6,7,8-四氢吡唑并[1,2-a]哒嗪-4-鎓溴化物
向150mL压力瓶中添加4-溴-3,5-二甲基-1H-吡唑(2.29g，13.08mmol)、碳酸钾(4g，28.9mmol)和无水乙腈(70mL)。将反应用N2冲洗，并且然后用1,4-二溴丁烷(22g，102mmol)处理。将反应盖上盖子并在室温下搅拌18h。然后将反应加热至50℃-55℃持续5h，冷却至室温，过滤，并且在温和的N2流下蒸发掉溶剂。将残余物用CH2Cl2(40mL)研磨，并且通过过滤收集固体，以得到呈白色固体的纯标题化合物(2.6g，64％)。
1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ4.60(br s,4H),2.54(s,6H),2.39(dt,J＝6.4,3.0Hz,4H)
中间体：(R)-1-(4-(4-溴-3,5-二甲基-1H-吡唑-1-基)丁基)吡咯烷-3-醇
在N2下向干燥反应小瓶中添加2-溴-1,3-二甲基-5,6,7,8-四氢吡唑并[1,2-a]哒嗪-4-鎓溴化物(400mg，1.290mmol)、(R)-吡咯烷-3-醇HCl(200mg，1.618mmol)、无水DMSO(2mL)和N,N-二异丙基乙胺(530μl，3.03mmol)。将反应用Ar冲洗，牢固地盖上盖子并置于135℃的油浴中持续10.5h。将反应用甲醇(2mL)稀释，并且通过反相制备型HPLC纯化，使用Sunfire C18 10uM 50x 300mm柱，以150mL/min经30min从10％溶剂B至100％溶剂B，在220nM下检测(溶剂A为5％CH3CN/95％含10mM NH4OAc的水，并且溶剂B为95％CH3CN和5％含10mM NH4OAc的水)，以得到呈棕褐色固体的纯标题化合物(140.5mg，33％)。LC/MS条件A：保留时间0.769min,m/e＝316
中间体：4-((5-溴-4-甲基吡啶-3-基)甲氧基)-5-氯-2-羟基苯甲醛
在连续氩气冲洗下，经5min通过注射器向无水THF(20mL)中的(5-溴-4-甲基吡啶-3-基)甲醇(418mg，2.069mmol)、5-氯-2,4-二羟基苯甲醛(400mg，2.318mmol)和三苯基膦(600mg，2.288mmol)的混合物中添加DIAD(450μl，2.314mmol)。将反应(rxn)牢固地盖上盖子并在室温下搅拌18h。在温和的N2流下蒸发掉大部分溶剂。将残余物再溶于CH2Cl2(25mL)和水(30ml)的混合物中，并且在温和的N2流下除去大部分溶剂。将残余物用冷MeOH((20μL)研磨，并且通过过滤收集固体，以得到呈棕褐色固体的标题化合物(263.2mg，36％)。LC/MS条件A：保留时间1.144min,m/e＝3561H NMR(500MHz,氯仿-d)δ11.45(s,1H),9.74(s,1H),8.74(s,1H),8.57(s,1H),7.58(s,1H),6.64(s,1H),5.19(s,2H),2.50(s,3H)
中间体：5-((5-((5-溴-4-甲基吡啶-3-基)甲氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈
向无水DMF(1.1mL)中的4-((5-溴-4-甲基吡啶-3-基)甲氧基)-5-氯-2-羟基苯甲醛(253mg，0.709mmol)和5-(氯甲基)烟腈(130mg，0.852mmol)的溶液中添加碳酸铯(278mg，0.853mmol)。将反应用N2充分冲洗，牢固地盖上盖子并置于65℃的油浴中持续3h。通过移液管将反应添加到水(14mL)中，滤出固体，用Et2O(10mL)洗涤并在高真空下干燥，以得到呈淡棕色固体的标题化合物(380mg，定量)。LC/MS条件A：保留时间1.174min,m/e＝472；1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.24(s,1H),9.04(dd,J＝6.2,2.1Hz,2H),8.74(s,1H),8.62(s,1H),8.56(t,J＝2.0Hz,1H),7.75(s,1H),7.31(s,1H),5.49(d,J＝1.7Hz,4H),2.46(s,3H)
中间体：2-(3-(3-溴丙氧基)-2-甲基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷
在烘干的150mL压力瓶中装入2-(3-(3-溴丙氧基)-2-甲基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(5.30g，17.2mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧杂环戊硼烷)(7.3g，28.7mmol)和乙酸钾(5.3g，54.0mmol)。添加二噁烷(100mL)，在氩气中鼓泡10min，并且添加[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(825mg，1.128mmol)。将反应密封并在80℃的油浴中加热21h。将反应用水(300mL)和EtOAc(250L)处理，并且通过硅藻土过滤以除去一些深色固体。用乙酸乙酯(300mL)洗涤硅藻土。分配各层。将有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，蒸发至深色油状固体。在CH2Cl2/己烷中施加到330gTeledyne Isco Silica Flash柱的头部，并且在Biotage上使用100％己烷至100％CH2Cl2的梯度经11个体积柱纯化。将含有产物的级分真空蒸发并在高真空下干燥，以得到4.36g(71％)呈白色固体的纯标题化合物。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ7.38(d,J＝7.3Hz,1H),7.16(t,J＝7.8Hz,1H),6.94(d,J＝8.1Hz,1H),4.11(t,J＝5.7Hz,2H),3.66(t,J＝6.5Hz,2H),2.44(s,3H),2.36(quin,J＝6.1Hz,2H),1.37(s,12H)。
中间体：5-((5-((5-(3-(3-溴丙氧基)-2-甲基苯基)-4-甲基吡啶-3-基)甲氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈
向THF(30mL)中的5-((5-((5-溴-4-甲基吡啶-3-基)甲氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈(335mg，0.709mmol)和2-(3-(3-溴丙氧基)-2-甲基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(275mg，0.774mmol)的溶液中添加磷酸三钾(3.54mL，1.770mmol)。将反应用氩气非常充分地冲洗，然后用第2代X-Phos预催化剂(53mg，0.067mmol)处理。将反应再次用氩气非常充分地冲洗，牢固地盖上盖子并在室温下搅拌2.5h。然后将反应置于45℃的油浴中持续45min，然后允许在室温下搅拌过夜持续18h。添加另外的催化剂(12mg，0.015mmol)，用氩气充分冲洗并置于40℃的油浴中持续3.5h。将反应用EtOAc(110mL)稀释，用水(1x 15mL)、盐水(1x 15mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并真空蒸发掉溶剂，以得到标题化合物(340mg，77％)。LC/MS条件A：保留时间1.155min,m/e＝620
中间体：1-(3-(羟基甲基)-2-甲基苯基)-3,5-二甲基-1H-吡唑-4-甲醛
向干燥的反应小瓶中添加(2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)甲醇(1.02g，4.11mmol)、3,5-二甲基-1H-吡唑-4-甲醛(510mg，4.11mmol)，乙酸铜(II)(0.747g，4.11mmol)和吡啶(3mL)。将反应用空气冲洗，牢固地盖上盖子并在振荡下置于60℃的沙浴中持续42h。在温和的N2流下除去溶剂，并且CH2Cl2(10mL)添加到所得残余物中。将反应再次用空气冲洗，盖上盖子并在室温下搅拌7天。滤出固体沉淀物，并且将滤液施加到80g Teledyne Isco Silica Flash柱的头部，并且在Biotage上使用100％己烷至70％EtOAc/己烷的梯度经10个柱体积纯化。将含有产物的级分合并并真空蒸发，以得到标题化合物(149mg，15％)。LC/MS条件A：保留时间0.744min,m/e＝245。
中间体：1-(3-((2-氯-4-甲酰基-5-羟基苯氧基)甲基)-2-甲基苯基)-3,5-二甲基-1H-吡唑-4-甲醛
在连续氩气流下，经4-5min向THF(6mL)中的1-(3-(羟基甲基)-2-甲基苯基)-3,5-二甲基-1H-吡唑-4-甲醛(149mg，0.610mmol)、5-氯-2,4-二羟基苯甲醛(210mg，1.217mmol)和三苯基膦(192mg，0.732mmol)的溶液中添加DIAD(0.192mL，0.989mmol)。添加完成后，将反应牢固地盖上盖子并允许在室温下搅拌数小时。
在温和的N2流下蒸发掉溶剂。将残余物溶于CH2Cl2(7mL)中，施加到40g TeledyneIsco Silica Flash柱的头部，并且在Biotage上使用100％己烷至100％EtOAc的线性梯度经15个柱体积纯化。将含有产物的级分合并并真空蒸发，以得到标题化合物(140mg，55％)。LC/MS条件A：保留时间1.189min,m/e＝399；1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.17(s,1H),10.05(s,1H),9.98(s,1H),7.73(s,1H),7.69(d,J＝7.6Hz,1H),7.48-7.43(m,1H),7.38(d,J＝7.6Hz,1H),6.87(s,1H),5.37(s,2H),2.42(s,3H),2.29(s,3H),1.97(s,3H)
中间体：5-((4-氯-2-甲酰基-5-((3-(4-甲酰基-3,5-二甲基-1H-吡唑-1-基)-2-甲基苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈
向无水DMF(550μL)中的1-(3-((2-氯-4-甲酰基-5-羟基苯氧基)甲基)-2-甲基苯基)-3,5-二甲基-1H-吡唑-4-甲醛(122mg，0.306mmol)和5-(氯甲基)烟腈(56mg，0.367mmol)的溶液中添加碳酸铯(120mg，0.368mmol)和碘化钠(5mg，0.033mmol)。将反应用氩气充分冲洗，牢固地盖上盖子并置于65℃的油浴中持续3h。将反应用EtOAc(125mL)稀释，并且将有机层用水(3x 20mL)、盐水(1x 20mL)萃取，经Na2SO4干燥，过滤并真空蒸发掉溶剂，以得到标题化合物(63.3mg，40％)。LC/MS条件A：保留时间1.195min,m/e＝515。
中间体：(R)-1-((3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)甲基)吡咯烷-3-醇
向EtOH(5mL)中的3,5-二甲基-1H-吡唑-4-甲醛(0.3g，2.417mmol)和(R)-吡咯烷-3-醇HCl(0.597g，4.83mmol)的混合物中添加乙酸(0.277mL，4.83mmol)和4A分子筛(100mg)。将反应用N2冲洗，牢固地盖上盖子并在室温下搅拌2h。然后将反应用氰基硼氢化钠(4.83mL，4.83mmol)处理，用N2冲洗，盖上盖子并在室温下搅拌6h。将反应用MeOH(100mL)稀释，再次用N2冲洗，盖上盖子并在室温下搅拌18h。将反应混合物过滤，并且将滤液通过反相制备型HPLC纯化，使用Sunfire C18 10uM 50x 300mm柱，以150mL/min经30min从10％溶剂B至100％溶剂B，在220nM下检测(溶剂A为5％CH3CN/95％含10mM NH4OAc的水，并且溶剂B为95％CH3CN和5％含10mM NH4OAc的水)，以得到呈白色固体的纯标题化合物(280mg，33％)。LC/MS条件C：保留时间0.504min,m/e＝196。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ4.46(tt,J＝5.6,1.4Hz,1H),3.90-3.78(m,2H),3.41(ddd,J＝10.1,8.4,5.3Hz,1H),3.23(d,J＝11.1Hz,1H),2.82(dd,J＝11.2,5.7Hz,1H),2.71-2.63(m,1H),2.30(s,6H),2.06-1.98(m,2H)。
实施例2001：5-((4-氯-5-((3-(3-氯-2-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)吡啶-4-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-(((1,3-二羟基-2-甲基丙-2-基)氨基)甲基)苯氧基)甲基)烟腈
向DCE(0.8mL)和乙醇(0.7mL)中的5-((4-氯-5-((3-(3-氯-2-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)吡啶-4-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈(40mg，0.062mmol)和2-氨基-2-甲基丙烷-1,3-二醇(27mg，0.257mmol)的溶液中添加乙酸(14μl，0.245mmol)和活化的4A分子筛。将反应在氩气下冲洗，在室温下搅拌25min，然后经3h通过注射器缓慢地用THF中的氰基硼氢化钠1M(0.22mL，0.220mmol)处理。添加完成后，将反应在室温下搅拌3h。用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：柱：XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含0.1％三氟乙酸的水；流动相B：95:5乙腈:含0.1％三氟乙酸的水；梯度：经20分钟15％-55％B，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥，以得到纯标题化合物(21.6mg，46％)。
LC/MS条件E：保留时间1.59min；m/e＝734(M+H)+。
LC/MS条件F：保留时间1.41min；m/e＝734(M+H)+。
实施例2002：(R)-5-((4-氯-5-((3-(3-氯-4-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)吡啶-2-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-(((1,3-二羟基-2-甲基丙-2-基)氨基)甲基)苯氧基)甲基)烟腈
向DCE(0.8mL)和乙醇(0.7mL)的混合物中的5-((5-((3-(4-(3-溴丙氧基)-3-氯吡啶-2-基)-2-甲基苄基)氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈(46.5mg，0.073mmol)和2-氨基-2-甲基丙烷-1,3-二醇(25mg，0.238mmol)的溶液中添加乙酸(12μl，0.210mmol)和活化的4A分子筛。将反应在氩气下短暂冲洗，在室温下搅拌25min，并且然后经3h用THF中的氰基硼氢化钠1.0M(220μL，0.220mmol)缓慢处理。添加完成后，将反应在室温下再搅拌3h。在N2流下大部分除去溶剂，并且将残余物再溶于MeOH(1.5mL)中。将所得溶液用(R)-吡咯烷-3-醇HCl(120mg，0.971mmol)和N,N-二异丙基乙胺(210μL，1.202mmol)处理并在振荡下置于65℃的沙浴中持续18h。用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：柱：XBridge C18，19x200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10-mM乙酸铵的水；梯度：经20分钟10％-50％B，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min，以得到纯标题化合物(37.4mg，67％)。
LC/MS条件E：保留时间1.18min；m/e＝736(M+H)+。
LC/MS条件F：保留时间1.15min；m/e＝736(M+H)+。
实施例2003：(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(1-(4-((S)-3-羟基吡咯烷-1-基)丁基)-3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸
向THF(6mL)中的(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸(35mg，0.056mmol)和(R)-1-(4-(4-溴-3,5-二甲基-1H-吡唑-1-基)丁基)吡咯烷-3-醇(20mg，0.063mmol)的溶液中添加水中的磷酸三钾0.5M(0.4mL，0.200mmol)。将反应用Ar充分冲洗，然后用第2代X-phos预催化剂(5mg，6.35μmol)处理。将反应再次用氩气充分冲洗，牢固地盖上盖子并在搅拌下置于60℃的油浴中持续65h。用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：柱：XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10-mM乙酸铵的水；梯度：经20分钟10％-50％B，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min，以得到纯标题化合物(5.8mg，14％)。
LC/MS条件E：保留时间1.36min；m/e＝731(M+H)+。
LC/MS条件F：保留时间1.23min；m/e＝731(M+H)+。
实施例2004：5-((4-氯-5-((3-(3-氯-4-(3-羟基丙氧基)吡啶-2-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-(((1,3-二羟基-2-甲基丙-2-基)氨基)甲基)苯氧基)甲基)烟腈
向DCE(0.8mL)和EtOH(0.5mL)的混合物中的5-((4-氯-5-((3-(3-氯-4-(3-羟基丙氧基)吡啶-2-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈(23mg，0.040mmol)和2-氨基-2-甲基丙烷-1,3-二醇(25mg，0.238mmol)的溶液中添加乙酸(10μl，0.175mmol)和活化的4A分子筛。将反应用氩气短暂冲洗，在室温下搅拌20min，然后经2h用THF中的氰基硼氢化钠1M(160μl，0.160mmol)逐滴处理。添加完成后，将反应在室温下搅拌18h。用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：柱：XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10-mM乙酸铵的水；梯度：经20分钟10％-50％B，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min，以得到纯标题化合物(19.5mg，74％)。
LC/MS条件E：保留时间1.53min；m/e＝667(M+H)+。
LC/MS条件F：保留时间1.32min；m/e＝667(M+H)+。
实施例2005：(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((5-(3-(3-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)-2-甲基苯基)-4-甲基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)哌啶-2-甲酸
向DCE(800μL)和EtOH(500μL)的混合物中的5-((5-((5-(3-(3-溴丙氧基)-2-甲基苯基)-4-甲基吡啶-3-基)甲氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈(52mg，0.084mmol)和L-哌啶酸(33mg，0.256mmol)的溶液中添加乙酸(19μL，0.332mmol)和4A分子筛。将反应用N2短暂冲洗，盖上盖子，在室温下搅拌45min，然后经2h用THF中的氰基硼氢化钠1.0M(250μL，0.250mmol)逐滴处理。添加完成后，允许将反应在室温下搅拌过夜。在N2流下大部分除去溶剂，并且将残余物再溶于MeOH(1.5mL)中。将所得溶液用(R)-3-羟基吡咯烷盐酸盐(155mg，1.254mmol)和N,N-二异丙基乙胺(350μL，2.004mmol)处理，并且在振荡下置于65℃的沙浴中持续3.5h。用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：柱：XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10-mM乙酸铵的水；梯度：经23分钟10％-50％B，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。用以下条件通过制备型LC/MS进一步纯化材料：柱：XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含0.1％三氟乙酸的水；流动相B：95:5乙腈:含0.1％三氟乙酸的水；梯度：经20分钟5％-40％B，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min，以得到呈TFA盐的纯标题化合物(14.2mg，14％)。
LC/MS条件E：保留时间1.24min；m/e＝740(M+H)+。
LC/MS条件F：保留时间1.08min；m/e＝740(M+H)+。
实施例2006：5-((4-氯-2-(((2-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)乙基)氨基)甲基)-5-((3-(4-(((2-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)乙基)氨基)甲基)-3,5-二甲基-1H-吡唑-1-基)-2-甲基苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈
向DCE(900μL)和EtOH(600μL)的混合物中的5-((4-氯-2-甲酰基-5-((3-(4-甲酰基-3,5-二甲基-1H-吡唑-1-基)-2-甲基苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈(22.8mg，0.044mmol)的溶液中添加(3R)-1-(2-氨基乙基)-3-吡咯烷醇(43mg，0.330mmol)、乙酸(8μL，0.140mmol)和4A分子筛。将反应用N2短暂冲洗，牢固地盖上盖子，在室温下搅拌1h，然后经5h用THF中的氰基硼氢化钠1.0M(270μL，0.270mmol)逐滴处理。添加完成后，允许将反应在室温下搅拌过夜。用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：柱：XBridge C18，19x200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10-mM乙酸铵的水；梯度：经18分钟5％-35％B，然后在100％B下保持3分钟；流速：20mL/min，以得到纯标题化合物(2.9mg，8％)。
LC/MS条件E：保留时间1.18min；m/e＝743(M+H)+。
LC/MS条件F：保留时间0.907min；m/e＝743(M+H)+。
实施例2007：5-((4-氯-2-(((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)甲基)-5-((3-(4-(((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)甲基)-3,5-二甲基-1H-吡唑-1-基)-2-甲基苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈
向DCE(900μL)和EtOH(600μL)的混合物中的5-((4-氯-2-甲酰基-5-((3-(4-甲酰基-3,5-二甲基-1H-吡唑-1-基)-2-甲基苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈(22.8mg，0.044mmol)和(R)-3-羟基吡咯烷盐酸盐(40mg，0.324mmol)的溶液中添加乙酸(5.2μL，0.091mmol)、N,N-二异丙基乙胺(13μL，0.074mmol)和4A分子筛。将反应用N2短暂冲洗，盖上盖子，在室温下搅拌2h，并且然后经3.5h用THF中的氰基硼氢化钠1.0M(270μL，0.270mmol)逐滴处理。添加完成后，将反应在室温下搅拌过夜。用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：柱：XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10-mM乙酸铵的水；梯度：经20分钟8％-48％B，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min，以得到纯标题化合物(8.0mg，26％)。
LC/MS条件E：保留时间1.23min；m/e＝657(M+H)+。
LC/MS条件F：保留时间1.22min；m/e＝657(M+H)+。
实施例2008：(R)-5-((4-氯-2-(((1,3-二羟基-2-甲基丙-2-基)氨基)甲基)-5-((5-(3-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)-2-甲基苯基)-4-甲基吡啶-3-基)甲氧基)苯氧基)甲基)烟腈
向DCE(800μL)和乙醇(500μL)的混合物中的5-((5-((5-(3-(3-溴丙氧基)-2-甲基苯基)-4-甲基吡啶-3-基)甲氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈(20.4mg，0.033mmol)和2-氨基-2-甲基-1,3-丙二醇(10.4mg，0.099mmol)的溶液中添加乙酸(7.5μL，0.131mmol)和活化的4A分子筛。将反应在室温下搅拌30min，然后经30min用THF中的氰基硼氢化钠1.0M(115μL，0.115mmol)逐滴处理。添加完成后，将反应在室温下搅拌过夜。在N2流下大部分除去溶剂，并且将残余物再溶于MeOH(1.5mL)中。将所得溶液用(R)-3-羟基吡咯烷盐酸盐(74mg，0.599mmol)和N,N-二异丙基乙胺(185μL，1.059mmol)处理，N2短暂冲洗，盖上盖子，在振荡下置于65℃的沙浴中持续4.5h，然后置于45℃的沙浴中持续36h。用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：柱：XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10-mM乙酸铵的水；梯度：经25分钟5％-55％B，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min，以得到标题化合物(7.2mg，29％)。
LC/MS条件E：保留时间1.31min；m/e＝716(M+H)+。
LC/MS条件F：保留时间1.18min；m/e＝716(M+H)+。
实施例2009：(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(4-(((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)甲基)-3,5-二甲基-1H-吡唑-1-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸
向(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸(90mg，0.145mmol)、(R)-1-((3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)甲基)吡咯烷-3-醇2AcOH(63mg，0.200mmol)、2,2'-联吡啶(23mg，0.147mmol)和乙酸铜(II)(40mg，0.220mmol)的混合物中添加吡啶(1mL)。将反应盖上盖子并在室温下在空气的存在下搅拌过夜。用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：柱：XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含0.1％三氟乙酸的水；流动相B：95:5乙腈:含0.1％三氟乙酸的水；梯度：经25分钟5％-45％B，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。用以下条件通过制备型LC/MS进一步纯化材料：柱：XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10-mM乙酸铵的水；梯度：经15分钟10％-50％B，然后在100％B下保持3分钟；流速：20mL/min，以得到纯标题化合物(1.3mg，1.2％)。
LC/MS条件E：保留时间1.04min；m/e＝689(M+H)+。
LC/MS条件F：保留时间1.16min；m/e＝689(M+H)+。
实施例2010：(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(4-甲酰基-3,5-二甲基-1H-吡唑-1-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸
向CH2Cl2(2mL)中的(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸(32.5mg，0.052mmol)和3,5-二甲基-1H-吡唑-4-甲醛(11.9mg，0.096mmol)的混合物中添加吡啶(32μl，0.396mmol)，然后添加固体乙酸铜(II)(16mg，0.088mmol)。将反应用O2冲洗，密封并在室温下搅拌6天。用以下条件通过制备型LC/MS纯化粗材料：柱：XBridgeC18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10-mM乙酸铵的水；梯度：经20分钟15％-55％B，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。用以下条件通过制备型LC/MS进一步纯化材料：柱：XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10-mM乙酸铵的水；梯度：经20分钟15％-55％B，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min，以得到标题化合物(1mg，2％)。
LC/MS条件E：保留时间1.47min；m/e＝618(M+H)+。
LC/MS条件F：保留时间1.57min；m/e＝618(M+H)+。
中间体：4-((4-溴-3-甲基吡啶-2-基)甲氧基)-5-氯-2-羟基苯甲醛
由于连续的N2冲洗(黄色混浊混合物)，将(4-溴-3-甲基吡啶-2-基)甲醇(560mg，2.77mmol)、5-氯-2,4-二羟基苯甲醛(478mg，2.77mmol)和三苯基膦(800mg，3.05mmol)的混合物在THF(20mL)中冷却，同时经2min通过注射器添加DIAD(450μl，2.314mmol)。当添加DIAD时，悬浮液变成澄清的橙色溶液，并且约10min后，观察到一些沉淀物。将反应在N2下密封并在室温下搅拌过夜。通过过滤反应混合物收集第一批产物，以得到0.277g白色固体。将滤液在N2下吹干并用冷MeOH研磨并且然后过滤，以得到约0.2g呈灰白色固体的第2批产物(总计0.47g，45％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ11.37(s,1H),9.69(s,1H),8.24(d,J＝5.3Hz,1H),7.53(d,J＝5.3Hz,1H),7.52(s,1H),6.76(s,1H),5.38(s,2H),2.54(s,3H)。LC/MS条件D：保留时间1.01min,m/e＝356
中间体：5-((5-((4-溴-3-甲基吡啶-2-基)甲氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈
将DMF(6mL)中的4-((4-溴-3-甲基吡啶-2-基)甲氧基)-5-氯-2-羟基苯甲醛(0.277g，0.777mmol)、5-(氯甲基)烟腈(0.142g，0.932mmol)、碘化钠(0.012g，0.078mmol)和碳酸铯(0.304g，0.932mmol)的混合物在氮气下在75℃下搅拌3h。将反应混合物冷却至室温并倒入50ml冰水中。然后将混合物搅拌2h并过滤以收集呈灰白色固体的产物5-((5-((4-溴-3-甲基吡啶-2-基)甲氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈(0.3g，0.597mmol，77％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.25(s,1H),8.96(d,J＝2.0Hz,1H),8.92(d,J＝1.8Hz,1H),8.20(d,J＝5.3Hz,1H),8.11(t,J＝2.0Hz,1H),7.86(s,1H),7.55(d,J＝5.3Hz,1H),7.08(s,1H),5.48(s,2H),5.21(s,2H),2.60(s,3H)。LC/MS条件D：保留时间1.07min,m/e＝472
中间体：5-((5-((4-(3-(3-溴丙氧基)-2-甲基苯基)-3-甲基吡啶-2-基)甲氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈
将氯(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)[2-(2'-氨基-1,1'-联苯)]钯(II)(0.025g，0.032mmol)添加到THF(15mL)中的2-(3-(3-溴丙氧基)-2-甲基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(0.225g，0.635mmol)和磷酸三钾(3.17mL，1.587mmol)的混合物中(在添加催化剂之前用N2冲洗10min)。将所得混合物在室温下搅拌18h。将反应混合物分配在EtOAc/碳酸氢钠水溶液之间。将水层用EtOAc(3x 20ml)萃取。将合并的有机层用碳酸氢钠水溶液(2x 20ml)和盐水(20ml)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩，以得到0.5g粗产物，将其通过硅胶色谱法(Biotage Horizon系统；RediSepRf 40g柱；EtOAc/己烷，梯度：0％～100％)纯化，以得到呈白色固体的5-((5-((4-(3-(3-溴丙氧基)-2-甲基苯基)-3-甲基吡啶-2-基)甲氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈(0.3g，0.459mmol，72.3％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.27(s,1H),8.99(d,J＝2.3Hz,1H),8.92(d,J＝2.0Hz,1H),8.44(d,J＝4.8Hz,1H),8.15(t,J＝2.1Hz,1H),7.86(s,1H),7.27(s,1H),7.24-7.18(m,1H),7.11(d,J＝5.0Hz,1H),6.91(d,J＝8.0Hz,1H),6.67(d,J＝7.0Hz,1H),5.60-5.45(m,2H),5.27(s,2H),4.17(td,J＝5.8,3.3Hz,2H),3.65(t,J＝6.4Hz,2H),2.39(dd,J＝6.3,5.8Hz,2H),2.24(s,3H),1.86(s,3H)。LC/MS条件D：保留时间1.08min；m/e＝620
实施例2011：(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((4-(3-(3-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)-2-甲基苯基)-3-甲基吡啶-2-基)甲氧基)苄基)哌啶-2-甲酸
将ClCH2CH2Cl(5mL)和EtOH(5mL)中的5-((5-((4-(3-(3-溴丙氧基)-2-甲基苯基)-3-甲基吡啶-2-基)甲氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈(0.1g，0.161mmol)、(S)-哌啶-2-甲酸(0.042g，0.322mmol)、乙酸(0.018mL，0.322mmol)和少量4A MS(分子筛)的混合物在室温下搅拌2h。添加氰基硼氢化钠(1.0M，在THF中)(0.322mL，0.322mmol)，并且将所得反应混合物在室温下搅拌1天。将反应混合物用N2冲洗过夜并泵送干燥2h。将残余物溶于4ml的DMF中，过滤，并且将滤液分成2等份，并且使其中一份经受下一步骤。将另一份用于制备实施例2014。向该中间体的溶液中添加(R)-吡咯烷-3-醇HCl(0.100g，0.805mmol)和DIPEA(二异丙基乙胺，0.141mL，0.805mmol)。将所得反应混合物在60℃下搅拌6h。过滤反应混合物，并且用以下条件通过制备型LC/MS纯化滤液：柱：XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10-mM乙酸铵的水；梯度：经15分钟15％-55％B，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。用以下条件通过制备型LC/MS进一步纯化材料：柱：XBridgeC18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含0.1％三氟乙酸的水；流动相B：95:5乙腈:含0.1％三氟乙酸的水；梯度：经15分钟10％-50％B，然后在100％B下保持3分钟；流速：20mL/min。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥，以得到呈TFA盐的(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((4-(3-(3-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)-2-甲基苯基)-3-甲基吡啶-2-基)甲氧基)苄基)哌啶-2-甲酸(6.6mg，5.4％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.99(s,2H),8.46-8.37(m,2H),7.39(s,1H),7.28-7.18(m,1H),7.12(br.s.,2H),7.01(d,J＝8.4Hz,1H),6.68(d,J＝7.3Hz,1H),5.40(s,2H),5.29(s,2H),4.20(br.s.,1H),4.13-4.00(m,2H),3.74(dd,J＝14.3,5.5Hz,1H),3.57(dd,J＝14.1,5.3Hz,1H),3.13(br.s.,1H),2.88(d,J＝11.7Hz,1H),2.78-2.69(m,1H),2.66-2.56(m,3H),2.46(d,J＝6.2Hz,1H),2.40-2.33(m,1H),2.30-2.19(m,1H),2.11(s,3H),2.02-1.93(m,1H),1.92(s,5H),1.81(s,3H),1.78(br.s.,2H),1.60-1.32(m,5H)。LC/MS条件E保留时间1.25min；m/e＝740.1。
实施例2012：(S)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((4-(3-(3-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)-2-甲基苯基)-3-甲基吡啶-2-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸
将ClCH2CH2Cl(2mL)和EtOH(2mL)中的5-((5-((4-(3-(3-溴丙氧基)-2-甲基苯基)-3-甲基吡啶-2-基)甲氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈(120mg，0.193mmol)、(S)-2-氨基-3-羟基-2-甲基丙酸(46.0mg，0.387mmol)、乙酸(0.022mL，0.387mmol)和少量4A MS的混合物在室温下搅拌2h。添加氰基硼氢化钠(0.322mL，0.322mmol)，并且将所得反应混合物在室温下搅拌3天。将反应混合物过滤，并且将滤液浓缩并泵送干燥2h。将残余物溶于4ml的DMF中。使一半材料经受下一步骤。将另一半份用于实施例2015。向2ml的DMF中的该中间体的溶液中添加(R)-吡咯烷-3-醇HCl(47.8mg，0.387mmol)和DIPEA(0.141mL，0.805mmol)。将所得反应混合物在60℃下搅拌6h。过滤反应混合物，并且用以下条件通过制备型LC/MS纯化滤液：柱：waters xbridge c-18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10-mM乙酸铵的水；梯度：经15分钟0-30％B，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。用以下条件通过制备型LC/MS进一步纯化材料：柱：XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10-mM乙酸铵的水；梯度：经20分钟10％-50％B，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥，以得到(S)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((4-(3-(3-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)-2-甲基苯基)-3-甲基吡啶-2-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸(4.9mg，产率3.4％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.05-8.97(m,1H),8.48-8.37(m,1H),7.48(s,1H),7.28-7.22(m,1H),7.17-7.10(m,2H),7.02(d,J＝7.7Hz,1H),6.68(d,J＝7.3Hz,1H),5.41(d,J＝2.9Hz,2H),5.32(s,2H),4.20(br.s.,1H),4.13-4.02(m,3H),3.85(s,3H),3.59-3.44(m,3H),2.80-2.68(m,1H),2.66-2.56(m,3H),2.37(dd,J＝9.5,4.0Hz,3H),2.11(s,3H),2.03-1.93(m,2H),1.83(s,3H),1.57(d,J＝2.9Hz,1H),1.22(s,3H)。LC/MS条件E：保留时间1.13min；m/e＝730.0。
实施例2013：(R)-5-((4-氯-2-(((1-羟基-2-(羟基甲基)丁-2-基)氨基)甲基)-5-((4-(3-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)-2-甲基苯基)-3-甲基吡啶-2-基)甲氧基)苯氧基)甲基)烟腈
将ClCH2CH2Cl(2mL)和EtOH(2mL)中的5-((5-((4-(3-(3-溴丙氧基)-2-甲基苯基)-3-甲基吡啶-2-基)甲氧基)-4-氯-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟腈(80mg，0.129mmol)、2-氨基-2-乙基丙烷-1,3-二醇(30.7mg，0.258mmol)、乙酸(0.015mL，0.258mmol)和少量4A MS的混合物在室温下搅拌2h。添加氰基硼氢化钠(0.322mL，0.322mmol)，并且将所得反应混合物在室温下搅拌24h。将反应混合物用N2冲洗过夜并泵送干燥2h。将残余物溶于4ml的DMF中，过滤，并且将滤液分成两等份，并且使一份经受下一步骤。将另一份用于合成实施例2016。向该中间体的溶液中添加(R)-吡咯烷-3-醇HCl(0.100g，0.805mmol)和DIPEA(0.141mL，0.805mmol)。将所得反应混合物在60℃下搅拌6h。过滤反应混合物，并且用以下条件通过制备型LC/MS纯化滤液：柱：XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含0.1％三氟乙酸的水；流动相B：95:5乙腈:含0.1％三氟乙酸的水；梯度：经20分钟5％-40％B，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥，以得到呈TFA盐的(R)-5-((4-氯-2-(((1-羟基-2-(羟基甲基)丁-2-基)氨基)甲基)-5-((4-(3-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)-2-甲基苯基)-3-甲基吡啶-2-基)甲氧基)苯氧基)甲基)烟腈(15.2mg，产率15％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.99(br.s.,2H),8.47-8.34(m,2H),7.39(s,1H),7.25(t,J＝7.9Hz,1H),7.16-7.09(m,2H),7.01(d,J＝8.1Hz,1H),6.68(d,J＝7.3Hz,1H),5.39(d,J＝3.7Hz,2H),5.30(s,2H),4.20(br.s.,1H),4.12-3.97(m,2H),3.61(s,1H),2.79-2.56(m,4H),2.49-2.31(m,2H),2.11(s,3H),2.04-1.94(m,1H),1.83(s,3H),1.57(d,J＝4.4Hz,1H),1.36(q,J＝7.2Hz,2H),0.77(t,J＝7.5Hz,3H)。LC/MS条件E：保留时间1.17min；m/e＝730.1。
实施例2014：(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-甲基-4-(2-甲基-3-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)苯基)吡啶-2-基)甲氧基)苄基)哌啶-2-甲酸
将DMF(2mL)中的(S)-1-(4-((4-(3-(3-溴丙氧基)-2-甲基苯基)-3-甲基吡啶-2-基)甲氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)哌啶-2-甲酸(来自实施例2011的中间体)(60mg，0.038mmol)、哌啶(32.0mg，0.376mmol)和DIPEA(0.066mL，0.376mmol)的混合物在氮气下在60℃下搅拌6h。过滤反应混合物，并且用以下条件通过制备型LC/MS纯化滤液：柱：XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10-mM乙酸铵的水；梯度：经20分钟20％-60％B，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥。用以下条件通过制备型LC/MS进一步纯化材料：柱：XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含0.1％三氟乙酸的水；流动相B：95:5乙腈:含0.1％三氟乙酸的水；梯度：经15分钟10％-50％B，然后在100％B下保持3分钟；流速：20mL/min。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥，以得到呈TFA盐的(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-甲基-4-(2-甲基-3-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)苯基)吡啶-2-基)甲氧基)苄基)哌啶-2-甲酸(7.1mg，产率15％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.02(s,2H),8.48-8.38(m,2H),7.51(s,1H),7.34-7.19(m,2H),7.14(d,J＝4.8Hz,1H),7.04(d,J＝8.4Hz,1H),6.72(d,J＝7.7Hz,1H),5.45(d,J＝4.0Hz,2H),5.37(br.s.,2H),4.21(br.s.,2H),4.17-4.06(m,2H),3.88(br.s.,1H),3.31-3.19(m,1H),2.85(br.s.,1H),2.28-2.17(m,2H),2.12(s,3H),1.86(d,J＝4.4Hz,3H),1.67(br.s.,10H)。LC/MS条件E：保留时间1.12min；m/e＝738.3。
实施例2015：(S)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-甲基-4-(2-甲基-3-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)苯基)吡啶-2-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸
向DMF(2mL)中的(S)-2-((4-((4-(3-(3-溴丙氧基)-2-甲基苯基)-3-甲基吡啶-2-基)甲氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸(65mg，0.025mmol)(来自实施例2012的中间体)的溶液中添加哌啶(21.40mg，0.251mmol)。将所得反应混合物在60℃下搅拌6h。过滤反应混合物，并且用以下条件通过制备型LC/MS纯化滤液：柱：waters xbridge c-18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10-mM乙酸铵的水；梯度：经15分钟10％-50％B，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥，以得到(S)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-甲基-4-(2-甲基-3-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)苯基)吡啶-2-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸(14.8mg，产率78％)。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.00(d,J＝14.3Hz,1H),8.51-8.36(m,1H),7.49(s,1H),7.25(t,J＝7.9Hz,1H),7.16(s,1H),7.13(d,J＝4.8Hz,1H),7.01(d,J＝8.1Hz,1H),6.68(d,J＝7.3Hz,1H),5.41(br.s.,2H),5.32(s,2H),4.12-4.02(m,2H),3.88(br.s.,2H),3.64-3.46(m,2H),2.47(t,J＝7.2Hz,3H),2.38(d,J＝5.1Hz,6H),2.11(s,4H),1.82(s,4H),1.51(d,J＝4.8Hz,5H),1.40(d,J＝4.8Hz,3H),1.23(s,4H)。LC/MS条件E：保留时间1.10min；m/e＝728.1。
实施例2016：5-((4-氯-2-(((1-羟基-2-(羟基甲基)丁-2-基)氨基)甲基)-5-((3-甲基-4-(2-甲基-3-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)苯基)吡啶-2-基)甲氧基)苯氧基)甲基)烟腈
将DMF(2mL)中的5-((5-((4-(3-(3-溴丙氧基)-2-甲基苯基)-3-甲基吡啶-2-基)甲氧基)-4-氯-2-(((1-羟基-2-(羟基甲基)丁-2-基)氨基)甲基)苯氧基)甲基)烟腈(来自实施例2013的中间体)(42mg，0.022mmol)、哌啶(18.77mg，0.220mmol)和DIPEA(0.038mL，0.220mmol)的混合物在氮气下在60℃下搅拌4h。LCMS显示出所需产物。过滤反应混合物，并且用以下条件通过制备型LC/MS纯化滤液：柱：XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈:含10-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈:含10-mM乙酸铵的水；梯度：经20分钟10％-50％B，然后在100％B下保持5分钟；流速：20mL/min。将含有所需产物的级分合并并通过离心蒸发干燥，以产生5-((4-氯-2-(((1-羟基-2-(羟基甲基)丁-2-基)氨基)甲基)-5-((3-甲基-4-(2-甲基-3-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)苯基)吡啶-2-基)甲氧基)苯氧基)甲基)烟腈(15.5mg，产率92％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.99(br.s.,1H),8.46-8.33(m,1H),7.39(s,1H),7.25(t,J＝7.9Hz,1H),7.16-7.09(m,2H),7.02(d,J＝8.4Hz,1H),6.68(d,J＝7.7Hz,1H),5.45-5.35(m,2H),5.30(s,2H),4.15-3.99(m,2H),3.61(s,1H),3.31(s,1H),2.46(t,J＝7.0Hz,2H),2.37(br.s.,3H),2.12(s,3H),1.92(s,5H),1.83(s,3H),1.51(d,J＝5.1Hz,4H),1.45-1.30(m,4H),0.77(t,J＝7.5Hz,3H)。LC/MS条件E：保留时间1.11min；m/e＝728.2。
生物学测定
使用PD-1/PD-L1均相时间分辨荧光(HTRF)结合测定研究式(I)的化合物与PD-L1结合的能力。
均相时间分辨荧光(HTRF)结合测定。
可以使用这两种蛋白质的细胞外结构域的可溶的纯化制剂来评估PD-1和PD-L1的相互作用。PD-1和PD-L1蛋白质细胞外结构域表达为具有检测标签的融合蛋白，对于PD-1，标签是免疫球蛋白的Fc部分(PD-1-Ig)；并且对于PD-L1，它是6组氨酸基序(PD-L1-His)。所有结合研究在HTRF测定缓冲液中进行，所述缓冲液由补充有0.1％(含)牛血清白蛋白和0.05％(v/v)Tween-20的dPBS组成。对于h/PD-L1-His结合测定，将抑制剂与PD-L1-His(最终10nM)在4μl定缓冲液中预孵育15分钟，然后添加1μl测定缓冲液中的PD-1-Ig(最终20nM)并且再孵育15分钟。使用铕窝穴体(crypate)标记的抗Ig(最终1nM)和别藻蓝蛋白(APC)标记的抗His(最终20nM)实现HTRF检测。将抗体在HTRF检测缓冲液中稀释，并且在结合反应之上分配5μl。允许反应混合物平衡30分钟，并且使用EnVision荧光计获得所得信号(665nm/620nm比)。在人蛋白质PD-1-Ig/PD-L2-His(分别为20nM和5nM)与CD80-His/PD-L1-Ig(分别为100nM和10nM)之间建立另外的结合测定。重组蛋白。将具有免疫球蛋白G(Ig)表位标签的C末端人Fc结构域的人PD-1(25-167)[hPD-1(25-167)-3S-IG]和具有C末端His表位标签的人PD-L1(18-239)[hPD-L1(18-239)-TVMV-His]在HEK293T细胞中表达，并且通过ProteinA亲和色谱法和尺寸排阻色谱法依次纯化。通过商业来源获得人PD-L2-His和CD80-His。
重组人PD-1-Ig的序列
(SEQ ID NO:1)
重组人PD-L1-His的序列
(SEQ ID NO:2)
下表列出了在PD-1/PD-L1均相时间分辨荧光(HTRF)结合测定中测量的本公开文本的代表性化合物的IC50值。范围如下：A＝0.001至0.010微摩尔；B＝0.011至0.150微摩尔；C＝0.151至10微摩尔。
式(I)的化合物具有作为PD-1/PD-L1相互作用的抑制剂的活性，并且因此可以用于治疗与PD-1/PD-L1相互作用相关的疾病或缺陷。通过抑制PD-1/PD-L1相互作用，本公开文本的化合物可以用于治疗诸如HIV、甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎或丁型肝炎等感染性疾病和癌症。
序列表
<110> 百时美施贵宝公司
<120> 可用作免疫调节剂的化合物
<130> 12662WOPCT
<150> US 62/359,971
<151> 2016-07-08
<160> 2
<170> PatentIn版本3.5
<210> 1
<211> 384
<212> PRT
<213> 智人
<400> 1
Leu Asp Ser Pro Asp Arg Pro Trp Asn Pro Pro Thr Phe Ser Pro Ala
1 5 10 15
Leu Leu Val Val Thr Glu Gly Asp Asn Ala Thr Phe Thr Cys Ser Phe
20 25 30
Ser Asn Thr Ser Glu Ser Phe Val Leu Asn Trp Tyr Arg Met Ser Pro
35 40 45
Ser Asn Gln Thr Asp Lys Leu Ala Ala Phe Pro Glu Asp Arg Ser Gln
50 55 60
Pro Gly Gln Asp Cys Arg Phe Arg Val Thr Gln Leu Pro Asn Gly Arg
65 70 75 80
Asp Phe His Met Ser Val Val Arg Ala Arg Arg Asn Asp Ser Gly Thr
85 90 95
Tyr Leu Cys Gly Ala Ile Ser Leu Ala Pro Lys Ala Gln Ile Lys Glu
100 105 110
Ser Leu Arg Ala Glu Leu Arg Val Thr Glu Arg Arg Ala Glu Val Pro
115 120 125
Thr Ala His Pro Ser Pro Ser Pro Arg Pro Ala Gly Gln Phe Gln Gly
130 135 140
Ser Pro Gly Gly Gly Gly Gly Arg Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr
145 150 155 160
His Thr Ser Pro Pro Ser Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Ser Ser
165 170 175
Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg
180 185 190
Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro
195 200 205
Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala
210 215 220
Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val
225 230 235 240
Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr
245 250 255
Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr
260 265 270
Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu
275 280 285
Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys
290 295 300
Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser
305 310 315 320
Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp
325 330 335
Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser
340 345 350
Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala
355 360 365
Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
370 375 380
<210> 2
<211> 237
<212> PRT
<213> 智人
<400> 2
Phe Thr Val Thr Val Pro Lys Asp Leu Tyr Val Val Glu Tyr Gly Ser
1 5 10 15
Asn Met Thr Ile Glu Cys Lys Phe Pro Val Glu Lys Gln Leu Asp Leu
20 25 30
Ala Ala Leu Ile Val Tyr Trp Glu Met Glu Asp Lys Asn Ile Ile Gln
35 40 45
Phe Val His Gly Glu Glu Asp Leu Lys Val Gln His Ser Ser Tyr Arg
50 55 60
Gln Arg Ala Arg Leu Leu Lys Asp Gln Leu Ser Leu Gly Asn Ala Ala
65 70 75 80
Leu Gln Ile Thr Asp Val Lys Leu Gln Asp Ala Gly Val Tyr Arg Cys
85 90 95
Met Ile Ser Tyr Gly Gly Ala Asp Tyr Lys Arg Ile Thr Val Lys Val
100 105 110
Asn Ala Pro Tyr Asn Lys Ile Asn Gln Arg Ile Leu Val Val Asp Pro
115 120 125
Val Thr Ser Glu His Glu Leu Thr Cys Gln Ala Glu Gly Tyr Pro Lys
130 135 140
Ala Glu Val Ile Trp Thr Ser Ser Asp His Gln Val Leu Ser Gly Lys
145 150 155 160
Thr Thr Thr Thr Asn Ser Lys Arg Glu Glu Lys Leu Phe Asn Val Thr
165 170 175
Ser Thr Leu Arg Ile Asn Thr Thr Thr Asn Glu Ile Phe Tyr Cys Thr
180 185 190
Phe Arg Arg Leu Asp Pro Glu Glu Asn His Thr Ala Glu Leu Val Ile
195 200 205
Pro Glu Leu Pro Leu Ala His Pro Pro Asn Glu Arg Thr Gly Ser Ser
210 215 220
Glu Thr Val Arg Phe Gln Gly His His His His His His
225 230 235

Claims (17)

1.一种式(I)的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
m是0、1或2；
R1选自氢、卤代C1-C4烷基、羟基C1-C4烷基、-(CH2)nX和-(CH2)nAr；其中
n是1、2、3或4；
X选自氢，-CH3，-CF3，C1-C4烷氧基，-N(CH3)2，C3-C6环烷基，CN，-CO2Rg，-C(O)NH2，吗啉基，四氢吡喃基，任选地被羟基取代的吡咯烷酮基以及任选地被一或两个独立地选自C1-C4烷基、羧基、羟基和C1-C4烷氧基羰基的基团取代的哌啶基；其中Rg选自氢和C1-C4烷基；
Ar选自苯并二噁烷基、吲唑基、异喹啉基、异噁唑基、萘基、噁二唑基、苯基、吡啶基、嘧啶基和喹啉基；其中每个环任选地被1、2、3或4个独立地选自C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基羰基、C1-C4烷氧基羰基氨基、C1-C4烷基、C1-C4烷基羰基、C1-C4烷基磺酰基、酰胺基、酰胺基C1-C4烷基、-(CH2)qCO2C1-C4烷基、-(CH2)qOH、羧基、氰基、甲酰基、卤基、卤代C1-C4烷基、卤代C1-C4烷氧基、硝基、任选地被一个氰基取代的苯基、任选地被一个卤基取代的苯氧基、苯基羰基、吡咯和四氢吡喃的取代基取代，其中q是0、1、2、3或4；
R2选自
其中
Rn选自氢、C1-C3烷基、卤基和卤代C1-C3烷基；
Y选自氢、C1-C3烷氧基、C1-C3烷基、氰基和卤基；
R5是苯基或单环或双环不饱和杂环，该杂环含有五至十个原子，其中那些原子中的一至四个独立地选自氮、氧和硫；并且其中该苯基和该单环或双环基团任选地被一、二、三、四或五个独立地选自以下的取代基取代：C1-C3烷基、氰基、甲酰基、卤基、卤代C1-C3烷氧基、卤代C1-C3烷基、羟基、氧代、-L-(CH2)m’NRcRd、-L-(CH2)m’OH、
其中
L选自键、-CH2-、-NHC(O)-、-C(O)NH-和-O-；条件是当它通过该杂环中的氮原子附接至该母体分子部分时，L是-CH2-；
m'是1、2、3或4；条件是当m'是1时，L是通过碳原子附接至该母体分子部分的键；
t是0、1、2或3；
z是1、2或3；
每个Rz独立地选自C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基羰基、C1-C4烷氧基羰基C1-C4烷基、C1-C4烷基、C1-C4烷基酰胺基、C1-C4烷基氨基、C1-C4烷基羰基、酰胺基、羧基、羧基C1-C4烷基、氰基、二(C1-C4烷基)酰胺基、二(C1-C4烷基)氨基、卤基、卤代C1-C4烷氧基、卤代C1-C4烷基、羟基、羟基C1-C4烷基、-NRcRd、(NRcRd)C1-C4烷基、-NReRf、(NReRf)C1-C4烷基、苯基和苯基C1-C4烷基；其中Re和Rf与它们所附接的原子一起形成选自吗啉和的环；
Rc和Rd独立地选自氢、C2-C4烯基羰基、C1-C4烷氧基羰基、C1-C6烷基、C1-C4烷基羰基、酰胺基C1-C4烷基、氨基C1-C4烷基、芳基C1-C4烷基、C3-C10环烷基、(C3-C10环烷基)C1-C4烷基、卤代C1-C4烷基羰基、杂芳基C1-C4烷基和羟基C1-C4烷基；其中该酰胺基C1-C4烷基、该氨基C1-C4烷基、该芳基C1-C4烷基、该(C3-C10环烷基)C1-C4烷基和该杂芳基C1-C4烷基的烷基部分任选地被一或两个独立地选自羧基和羟基的基团取代；其中该羟基C1-C4烷基的烷基部分任选地被一或两个独立地选自羧基和羟基的基团取代；并且其中该芳基C1-C4烷基的芳基部分、该C3-C10环烷基、该(C3-C10环烷基)C1-C4烷基的环烷基部分和该杂芳基C1-C4烷基的杂芳基部分各自任选地被一、二或三个独立地选自C1-C4烷氧基羰基、C1-C4烷基和卤基的基团取代；
Q选自S、O和-NRp；其中Rp选自氢、C1-C4烷基、C1-C4烷基酰胺基C1-C4烷基、C1-C4烷基氨基C1-C4烷基、酰胺基C1-C4烷基、氨基C1-C4烷基、二(C1-C4烷基)酰胺基C1-C4烷基、二(C1-C4烷基)氨基C1-C3烷基、羟基C1-C4烷基、吡啶基和任选地被甲氧基取代的苯基；
条件是当R2是时，则R5不是苯基；并且
R6是氢，或者R5和R6与它们所附接的原子一起形成含有一或两个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的五元或六元不饱和环，其中该环任选地被一或两个独立地选自C1-C3烷基、氰基、甲酰基、卤基、卤代C1-C3烷基、羟基、氧代、-L-(CH2)nNRcRd、-L-(CH2)nOH的取代基取代；
每个R3独立地选自C2-C4烯基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基、氰基、卤基和卤代C1-C4烷基；并且
R4选自-(CH2)pCHO、-(CH2)n’OH和-(CH2)n’NRqR8，其中
p是0、1、2或3；
n'是1、2、3或4；
Rq选自氢、C1-C4烷基和苄基；并且
R8选自
其中
s是0、1或2；
z是1、2或3；
Rj选自C1-C3烷基、C1-C3烷基磺酰基C1-C3烷基、C1-C3烷基亚磺酰基C1-C3烷基和C1-C3烷基硫烷基C1-C3烷基；
Rw是-CO2H或-CONH2，
R9选自氢、苄基和甲基；
每个R9’独立地选自氢、乙基和甲基；
R10选自氢、C1-C3烷基和苄基；并且
R11选自C2-C4烯基和C1-C4烷基；
或者
R8和Rq与它们所附接的氮原子一起形成选自以下的环：
其中
s是0、1或2；
z是1、2或3；
Q'选自CHR13’、S、O、-N(CH2)2OH和NCH3；
R12选自氢、-CO2H、羟基C1-C4烷基和-C(O)NHSO2R16；其中R16选自三氟甲基、环丙基、C1-C4烷基、二甲基氨基、4-甲基哌嗪基和被甲基取代的咪唑基；
R13选自氢、羟基C1-C4烷基和-CO2H；
R13’选自氢、羟基C1-C3烷基和-CO2H；并且
R14选自C1-C4烷氧基羰基、C1-C3烷基、羧基、卤基、羟基、羟基C1-C4烷基和-NRc’Rd’；其中Rc’和Rd’独立地选自氢、C1-C4烷氧基羰基和C1-C4烷基羰基。
2.权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1是-(CH2)nAr，其中n是1并且Ar是任选地被氰基取代的吡啶基。
3.权利要求2的化合物或其药学上可接受的盐，其中m是1并且R3是卤基。
4.权利要求3的化合物或其药学上可接受的盐，其中R2选自
其中
Rn是氢；
Y是甲基；
R5是苯基或单环或双环不饱和杂环，该杂环含有五至十个原子，其中那些原子中的一至四个独立地选自氮、氧和硫；并且其中该苯基和该单环或双环基团任选地被一、二或三个独立地选自以下的取代基取代：C1-C3烷基、氰基、甲酰基、卤基、卤代C1-C3烷氧基、卤代C1-C3烷基、羟基、氧代、-L-(CH2)m’NRcRd、-L-(CH2)m’OH、
其中L选自键、-CH2-和-O-；
m'是1、2、3或4；条件是当m'是1时，L是通过碳原子附接至该母体分子部分的键；
t是0或1；
z是2或3；
Rz是羟基；
Rc和Rd各自是甲基；并且
R6是氢。
5.权利要求3的化合物，其中R4选自-(CH2)pCHO、-(CH2)n’OH和-(CH2)n’NRqR8，其中
p是0；
n'是1；
Rq是氢；并且
R8选自
其中
s是1；
z是2；
R9选自氢、苄基和甲基；
每个R9’独立地选自氢、乙基和甲基；并且
R10选自氢、C1-C3烷基和苄基；或者
R8和Rq与它们所附接的氮原子一起形成环，其为：
其中
s是0、1或2；
z是1、2或3；并且
R14选自C1-C4烷氧基羰基、C1-C3烷基、羧基和羟基。
6.一种式(I)的化合物，
或其药学上可接受的盐，其中：
m是1；
R1是-(CH2)nAr；其中
n是1，
Ar是任选地被氰基取代的吡啶基；
R2选自
其中
Rn是氢；
Y是C1-C3烷基；
R5是苯基或单环或双环不饱和杂环，该杂环含有五至十个原子，其中那些原子中的一至四个独立地选自氮、氧和硫；并且其中该苯基和该单环或双环基团任选地被一、二、三、四或五个独立地选自以下的取代基取代：C1-C3烷基、氰基、甲酰基、卤基、卤代C1-C3烷氧基、卤代C1-C3烷基、羟基、氧代、-L-(CH2)m’NRcRd、-L-(CH2)m’OH、
其中
L选自键、-CH2-和-O-；条件是当它通过该杂环中的氮原子附接至该母体分子部分时，L是-CH2-；
m'是1、2、3或4；条件是当m'是1时，L是通过碳原子附接至该母体分子部分的键；
t是0、1、2或3；
z是1、2或3；
Rz是羟基；
Rc和Rd是C1-C6烷基；
条件是当R2是时，则R5不是苯基；
R6是氢，
R3是卤基；并且
R4选自-(CH2)pCHO、-(CH2)n’OH和-(CH2)n’NRqR8，其中
p是0；
n'是1；
Rq是氢；并且
R8选自
其中
s是1；
z是2；
R9选自氢、苄基和甲基；
每个R9’独立地选自氢、乙基和甲基；并且
R10选自氢、C1-C3烷基和苄基；
或者
R8和Rq与它们所附接的氮原子一起形成环，其为
其中
s是1或2；
z是2或3；并且
R14选自C1-C4烷氧基羰基、C1-C3烷基、羧基、卤基和羟基。
7.一种化合物，其选自
(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(喹啉-7-基)苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸；
(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(喹啉-3-基)苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸；
(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(喹啉-3-基)苄基)氧基)苄基)哌啶-2-甲酸；
(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(喹啉-2-基)苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸；
(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(喹啉-6-基)苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸；
(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(喹喔啉-2-基)苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸；
(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(异喹啉-3-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸；
(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(异喹啉-7-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸；
(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(异喹啉-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸；
(R)-2-((4-((3-(7-溴喹喔啉-2-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸；
(R)-2-((4-((3-(苯并[d]噻唑-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸；
(R)-2-((4-((3-(苯并[d]噁唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸；
(R)-2-((4-((3-(苯并呋喃-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸；
(S)-2-((4-((3-(苯并呋喃-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-5-胍基戊酸；
2-((4-((3-(苯并呋喃-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-2-甲基丙酸；
2-((4-((3-(苯并[d]噁唑-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-2-甲基丙酸；
(R)-2-((4-((3-(苯并[d]噁唑-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸；
2-((4-((3-(苯并呋喃-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-2-甲基丙酸；
(R)-2-((4-((3-(苯并呋喃-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸；
(S)-1-(4-((3-(苯并呋喃-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)-2-甲基吡咯烷-2-甲酸；
(R)-2-((4-((3-(苯并[d]噻唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸；
2-((4-((3-(苯并[d]噻唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-2-甲基丙酸；
(S)-1-(4-((3-(苯并[d]噻唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)-2-甲基吡咯烷-2-甲酸；
(R)-2-((4-((3-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸；
(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(1-(2-(二甲基氨基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸；
(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(1-(2-(二甲基氨基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸；
2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(1-(2-(二甲基氨基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-2-甲基丙酸；
2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(1-(2-(二甲基氨基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-2-甲基丙酸；
(R)-5-((4-氯-2-甲酰基-5-((3-(2-(2-(3-羟基吡咯烷-1-基)乙基)苯并[d]噁唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈；
(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2-(2-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)乙基)苯并[d]噁唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸；
(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2-(2-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)乙基)苯并[d]噁唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-甲酸；
(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(6-(3-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)吡啶-2-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-甲酸；
(R)-5-((4-氯-2-(羟基甲基)-5-((3-(6-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)吡啶-2-基)-2-甲基苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈；
(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(喹喔啉-6-基)苄基)氧基)苄基)哌啶-2-甲酸；
(R)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(喹喔啉-6-基)苄基)氧基)苄基)哌啶-2-甲酸；
(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(喹喔啉-6-基)苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸；
(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(喹喔啉-6-基)苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸；
(S)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-3-(喹喔啉-6-基)苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸；
(S)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(1-(3-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)丙基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸；
(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(1-(3-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)丙基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸；
(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(1-(3-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)丙基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-甲酸；
(S)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(1-(3-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)丙基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸；
5-((4-氯-5-((3-(3-氯-2-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)吡啶-4-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-(((1,3-二羟基-2-甲基丙-2-基)氨基)甲基)苯氧基)甲基)烟腈；
(R)-5-((4-氯-5-((3-(3-氯-4-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)吡啶-2-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-(((1,3-二羟基-2-甲基丙-2-基)氨基)甲基)苯氧基)甲基)烟腈；
(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(1-(4-((S)-3-羟基吡咯烷-1-基)丁基)-3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸；
5-((4-氯-5-((3-(3-氯-4-(3-羟基丙氧基)吡啶-2-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-(((1,3-二羟基-2-甲基丙-2-基)氨基)甲基)苯氧基)甲基)烟腈；
(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((5-(3-(3-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)-2-甲基苯基)-4-甲基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)哌啶-2-甲酸；5-((4-氯-2-(((2-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)乙基)氨基)甲基)-5-((3-(4-(((2-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)乙基)氨基)甲基)-3,5-二甲基-1H-吡唑-1-基)-2-甲基苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈；
5-((4-氯-2-(((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)甲基)-5-((3-(4-(((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)甲基)-3,5-二甲基-1H-吡唑-1-基)-2-甲基苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟腈；
(R)-5-((4-氯-2-(((1,3-二羟基-2-甲基丙-2-基)氨基)甲基)-5-((5-(3-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)-2-甲基苯基)-4-甲基吡啶-3-基)甲氧基)苯氧基)甲基)烟腈；
(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(4-(((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)甲基)-3,5-二甲基-1H-吡唑-1-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸；
(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(4-甲酰基-3,5-二甲基-1H-吡唑-1-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸
(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((4-(3-(3-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)-2-甲基苯基)-3-甲基吡啶-2-基)甲氧基)苄基)哌啶-2-甲酸；
(S)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((4-(3-(3-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)-2-甲基苯基)-3-甲基吡啶-2-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸；
(R)-5-((4-氯-2-(((1-羟基-2-(羟基甲基)丁-2-基)氨基)甲基)-5-((4-(3-(3-(3-羟基吡咯烷-1-基)丙氧基)-2-甲基苯基)-3-甲基吡啶-2-基)甲氧基)苯氧基)甲基)烟腈；
(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-甲基-4-(2-甲基-3-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)苯基)吡啶-2-基)甲氧基)苄基)哌啶-2-甲酸；
(S)-1-(4-((3-(苯并[d]噁唑-5-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)苄基)哌啶-2-甲酸；
(S)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-甲基-4-(2-甲基-3-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)苯基)吡啶-2-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸；以及
5-((4-氯-2-(((1-羟基-2-(羟基甲基)丁-2-基)氨基)甲基)-5-((3-甲基-4-(2-甲基-3-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)苯基)吡啶-2-基)甲氧基)苯氧基)甲基)烟腈；
或其药学上可接受的盐。
8.一种药物组合物，其包含权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。
9.一种增强、刺激、调节和/或增加有需要的受试者的免疫反应的方法，所述方法包括向该受试者给予治疗有效量的权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐。
10.权利要求9的方法，其还包括在权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐之前、之后或与其同时给予另外的药剂。
11.权利要求10的方法，其中该另外的药剂是抗微生物剂、抗病毒剂、细胞毒剂、基因表达调节剂和/或免疫反应调节剂。
12.一种抑制有需要的受试者的癌细胞的生长、增殖或转移的方法，所述方法包括向该受试者给予治疗有效量的权利要求1的化合物或药学上可接受的盐。
13.权利要求12的方法，其中该癌症选自黑色素瘤、肾细胞癌、鳞状非小细胞肺癌(NSCLC)、非鳞状NSCLC、结肠直肠癌、去势抗性前列腺癌、卵巢癌、胃癌、肝细胞癌、胰腺癌、头颈部鳞状细胞癌、食道癌、胃肠道癌和乳腺癌以及血液恶性肿瘤。
14.一种治疗有需要的受试者的感染性疾病的方法，该方法包括向该受试者给予治疗有效量的权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐。
15.权利要求14的方法，其中该感染性疾病由病毒引起。
16.权利要求10的方法，其中该病毒选自HIV、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、丁型肝炎病毒、疱疹病毒、乳头瘤病毒和流感病毒。
17.一种治疗有需要的受试者的脓毒性休克的方法，该方法包括向该受试者给予治疗有效量的权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐。
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WO (1) WO2018009505A1 (zh)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111333629A (zh) * 2020-04-10 2020-06-26 颜建发 苯基-1h-吡唑类衍生物及其在抗肿瘤药物中的应用
CN112457308A (zh) * 2019-09-09 2021-03-09 上海长森药业有限公司 新型三环芳香杂环化合物，及其制备方法、药物组合物和应用
CN112574183A (zh) * 2019-09-29 2021-03-30 南京华威医药科技集团有限公司 一种pd-1抑制剂及其制备方法和用途
WO2021129584A1 (zh) * 2019-12-26 2021-07-01 杭州阿诺生物医药科技有限公司 Pd-l1拮抗剂化合物

Families Citing this family (80)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10745382B2 (en) 2015-10-15 2020-08-18 Bristol-Myers Squibb Company Compounds useful as immunomodulators
CN109803651B (zh) 2016-06-27 2022-05-31 凯莫森特里克斯股份有限公司 免疫调节剂化合物
US10144706B2 (en) 2016-09-01 2018-12-04 Bristol-Myers Squibb Company Compounds useful as immunomodulators
IL265921B1 (en) 2016-10-14 2024-01-01 Prec Biosciences Inc Transgenic meganonucleases specific for recognition sequences in the hepatitis B virus genome
JP7106572B2 (ja) * 2016-12-20 2022-07-26 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 免疫調節剤として有用な化合物
ES2961550T3 (es) 2017-03-27 2024-03-12 Bristol Myers Squibb Co Derivados de isoquinolina sustituidos como inmunomoduladores
JOP20180040A1 (ar) 2017-04-20 2019-01-30 Gilead Sciences Inc مثبطات pd-1/pd-l1
WO2018200571A1 (en) 2017-04-25 2018-11-01 Arbutus Biopharma Corporation Substituted 2,3-dihydro-1h-indene analogs and methods using same
IL272258B (en) 2017-07-28 2022-08-01 Chemocentryx Inc Immunomodulator compounds
KR20200056989A (ko) 2017-08-08 2020-05-25 케모센트릭스, 인크. 마크로사이클릭 면역조절제
AU2018392212B9 (en) 2017-12-20 2021-03-18 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 2'3' cyclic dinucleotides with phosphonate bond activating the STING adaptor protein
US10966999B2 (en) 2017-12-20 2021-04-06 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 3′3′ cyclic dinucleotides with phosphonate bond activating the sting adaptor protein
US11414418B2 (en) 2018-01-23 2022-08-16 Bristol-Myers Squibb Company Compounds useful as immunomodulators
UA126458C2 (uk) 2018-02-13 2022-10-05 Гіліад Сайєнсіз, Інк. Інгібітори pd-1/pd-l1
US10568874B2 (en) 2018-02-22 2020-02-25 Chemocentryx, Inc. Indane-amines as PD-L1 antagonists
EP3759109B1 (en) 2018-02-26 2023-08-30 Gilead Sciences, Inc. Substituted pyrrolizine compounds as hbv replication inhibitors
WO2019169123A1 (en) 2018-03-01 2019-09-06 Bristol-Myers Squibb Company Compounds useful as immunomodulators
US10870691B2 (en) 2018-04-05 2020-12-22 Gilead Sciences, Inc. Antibodies and fragments thereof that bind hepatitis B virus protein X
TWI818007B (zh) 2018-04-06 2023-10-11 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 2'3'-環二核苷酸
WO2019193543A1 (en) 2018-04-06 2019-10-10 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 3'3'-cyclic dinucleotides
TW202005654A (zh) 2018-04-06 2020-02-01 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 ２，２，─環二核苷酸
US11142750B2 (en) 2018-04-12 2021-10-12 Precision Biosciences, Inc. Optimized engineered meganucleases having specificity for a recognition sequence in the Hepatitis B virus genome
JP7242702B2 (ja) 2018-04-19 2023-03-20 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド Ｐｄ－１／ｐｄ－ｌ１阻害剤
TW202014193A (zh) 2018-05-03 2020-04-16 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 包含碳環核苷酸之2’3’－環二核苷酸
WO2019232319A1 (en) 2018-05-31 2019-12-05 Peloton Therapeutics, Inc. Compositions and methods for inhibiting cd73
TWI732245B (zh) 2018-07-13 2021-07-01 美商基利科學股份有限公司 Pd‐1/pd‐l1抑制劑
WO2020028097A1 (en) 2018-08-01 2020-02-06 Gilead Sciences, Inc. Solid forms of (r)-11-(methoxymethyl)-12-(3-methoxypropoxy)-3,3-dimethyl-8-0x0-2,3,8,13b-tetrahydro-1h-pyrido[2,1-a]pyrrolo[1,2-c] phthalazine-7-c arboxylic acid
CN109305934A (zh) * 2018-08-07 2019-02-05 成都海博锐药业有限公司 苯醚类衍生物及可药用盐、医药上的用途
CN110872275A (zh) * 2018-08-31 2020-03-10 深圳微芯生物科技股份有限公司 作为免疫调节剂的联苯化合物及其用途
WO2020086556A1 (en) 2018-10-24 2020-04-30 Gilead Sciences, Inc. Pd-1/pd-l1 inhibitors
EP3873608A1 (en) 2018-10-31 2021-09-08 Gilead Sciences, Inc. Substituted 6-azabenzimidazole compounds having hpk1 inhibitory activity
CA3117556A1 (en) 2018-10-31 2020-05-07 Gilead Sciences, Inc. Substituted 6-azabenzimidazole compounds as hpk1 inhibitors
SG11202105850YA (en) 2018-11-02 2021-07-29 Shanghai Maxinovel Pharmaceuticals Co Ltd Diphenyl-like compound, intermediate thereof, preparation method therefor, pharmaceutical composition thereof and uses thereof
CN112876411A (zh) * 2019-02-21 2021-06-01 杭州阿诺生物医药科技有限公司 化合物及其在合成pdl1拮抗剂类药物分子中的应用
JP7350872B2 (ja) 2019-03-07 2023-09-26 インスティチュート オブ オーガニック ケミストリー アンド バイオケミストリー エーエスシーアール，ヴイ．ヴイ．アイ． ３’３’－環状ジヌクレオチドおよびそのプロドラッグ
CN113543851A (zh) 2019-03-07 2021-10-22 捷克共和国有机化学与生物化学研究所 2’3’-环二核苷酸及其前药
WO2020178768A1 (en) 2019-03-07 2020-09-10 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 3'3'-cyclic dinucleotide analogue comprising a cyclopentanyl modified nucleotide as sting modulator
AU2020246317A1 (en) 2019-03-22 2021-11-18 Guangzhou Maxinovel Pharmaceuticals Co., Ltd Small-molecule inhibitor of PD-1/PD-L1, pharmaceutical composition thereof with PD-L1 antibody, and application of same
US20220041733A1 (en) 2019-03-28 2022-02-10 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
KR20210146349A (ko) 2019-03-28 2021-12-03 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 종양을 치료하는 방법
TW202210480A (zh) 2019-04-17 2022-03-16 美商基利科學股份有限公司 類鐸受體調節劑之固體形式
TWI751517B (zh) 2019-04-17 2022-01-01 美商基利科學股份有限公司 類鐸受體調節劑之固體形式
CA3139526A1 (en) 2019-05-15 2020-11-19 Chemocentryx, Inc. Triaryl compounds for treatment of pd-l1 diseases
TWI826690B (zh) 2019-05-23 2023-12-21 美商基利科學股份有限公司 經取代之烯吲哚酮化物及其用途
US20220363760A1 (en) 2019-05-30 2022-11-17 Bristol-Myers Squibb Company Multi-tumor gene signature for suitability to immuno-oncology therapy
WO2020243568A1 (en) 2019-05-30 2020-12-03 Bristol-Myers Squibb Company Methods of identifying a subject suitable for an immuno-oncology (i-o) therapy
KR20220016157A (ko) 2019-05-30 2022-02-08 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 세포 국재화 시그너쳐 및 조합 요법
US20220305114A1 (en) 2019-06-18 2022-09-29 Janssen Sciences Ireland Unlimited Company Combination of hepatitis b virus (hbv) vaccines and small molecule pdl1 or pd1 inhibitor
KR20220024701A (ko) 2019-06-20 2022-03-03 케모센트릭스, 인크. Pd-l1 질환의 치료를 위한 화합물
WO2021007386A1 (en) 2019-07-10 2021-01-14 Chemocentryx, Inc. Indanes as pd-l1 inhibitors
US20220257619A1 (en) 2019-07-18 2022-08-18 Gilead Sciences, Inc. Long-acting formulations of tenofovir alafenamide
WO2021034804A1 (en) 2019-08-19 2021-02-25 Gilead Sciences, Inc. Pharmaceutical formulations of tenofovir alafenamide
WO2021055994A1 (en) 2019-09-22 2021-03-25 Bristol-Myers Squibb Company Quantitative spatial profiling for lag-3 antagonist therapy
CN114555799A (zh) 2019-09-30 2022-05-27 吉利德科学公司 Hbv疫苗和治疗hbv的方法
CA3152714A1 (en) 2019-10-16 2021-04-22 Pingchen Fan Heteroaryl-biphenyl amines for the treatment of pd-l1 diseases
US11713307B2 (en) 2019-10-16 2023-08-01 Chemocentryx, Inc. Heteroaryl-biphenyl amides for the treatment of PD-L1 diseases
JP2022553851A (ja) 2019-11-08 2022-12-26 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 黒色腫の処置のためのｌａｇ－３アンタゴニスト
EP4069729A1 (en) 2019-12-06 2022-10-12 Precision BioSciences, Inc. Optimized engineered meganucleases having specificity for a recognition sequence in the hepatitis b virus genome
EP4121437A1 (en) 2020-03-20 2023-01-25 Gilead Sciences, Inc. Prodrugs of 4'-c-substituted-2-halo-2'-deoxyadenosine nucleosides and methods of making and using the same
EP4146345A2 (en) 2020-05-05 2023-03-15 Teon Therapeutics, Inc. Cannabinoid receptor type 2 (cb2) modulators and uses thereof
BR112023003427A2 (pt) 2020-08-28 2023-03-21 Bristol Myers Squibb Co Terapia com antagonista de lag-3 para carcinoma hepatocelular
AU2021334361A1 (en) 2020-08-31 2023-05-11 Bristol-Myers Squibb Company Cell localization signature and immunotherapy
JP2023540612A (ja) 2020-09-09 2023-09-25 グアンジョウ マキシノベル ファーマシューティカルズ カンパニー リミテッド 芳香族エチレン系化合物、その製造方法、中間体、医薬組成物及びその使用
EP4232019A1 (en) 2020-10-23 2023-08-30 Bristol-Myers Squibb Company Lag-3 antagonist therapy for lung cancer
WO2022120179A1 (en) 2020-12-03 2022-06-09 Bristol-Myers Squibb Company Multi-tumor gene signatures and uses thereof
WO2022212400A1 (en) 2021-03-29 2022-10-06 Juno Therapeutics, Inc. Methods for dosing and treatment with a combination of a checkpoint inhibitor therapy and a car t cell therapy
WO2022241134A1 (en) 2021-05-13 2022-11-17 Gilead Sciences, Inc. COMBINATION OF A TLR8 MODULATING COMPOUND AND ANTI-HBV siRNA THERAPEUTICS
WO2022261310A1 (en) 2021-06-11 2022-12-15 Gilead Sciences, Inc. Combination mcl-1 inhibitors with anti-body drug conjugates
CA3222269A1 (en) 2021-06-11 2022-12-15 Gilead Sciences, Inc. Combination mcl-1 inhibitors with anti-cancer agents
CN117377671A (zh) 2021-06-23 2024-01-09 吉利德科学公司 二酰基甘油激酶调节化合物
KR20240005901A (ko) 2021-06-23 2024-01-12 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 디아실글리세롤 키나제 조절 화합물
EP4359415A1 (en) 2021-06-23 2024-05-01 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
US11932634B2 (en) 2021-06-23 2024-03-19 Gilead Sciences, Inc. Diacylglycerol kinase modulating compounds
TW202325306A (zh) 2021-09-02 2023-07-01 美商天恩治療有限公司 改良免疫細胞之生長及功能的方法
WO2023077090A1 (en) 2021-10-29 2023-05-04 Bristol-Myers Squibb Company Lag-3 antagonist therapy for hematological cancer
WO2023081730A1 (en) 2021-11-03 2023-05-11 Teon Therapeutics, Inc. 4-hydroxy-2-oxo-1,2-dihydro-1,8-naphthyridine-3-carboxamide derivatives as cannabinoid cb2 receptor modulators for the treatment of cancer
WO2023097211A1 (en) 2021-11-24 2023-06-01 The University Of Southern California Methods for enhancing immune checkpoint inhibitor therapy
WO2023147371A1 (en) 2022-01-26 2023-08-03 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy for hepatocellular carcinoma
WO2023196964A1 (en) 2022-04-08 2023-10-12 Bristol-Myers Squibb Company Machine learning identification, classification, and quantification of tertiary lymphoid structures
WO2024015372A1 (en) 2022-07-14 2024-01-18 Teon Therapeutics, Inc. Adenosine receptor antagonists and uses thereof

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2011788A4 (en) * 2006-04-24 2010-10-13 Astellas Pharma Inc OXADIAZOLIDINDIONVERBINDUNG
WO2015034820A1 (en) * 2013-09-04 2015-03-12 Bristol-Myers Squibb Company Compounds useful as immunomodulators
WO2015160641A2 (en) * 2014-04-14 2015-10-22 Bristol-Myers Squibb Company Compounds useful as immunomodulators

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6124343A (en) * 1919-01-27 2000-09-26 Rhone-Poulenc Rorer Limited Substituted phenyl compounds with a substituent having a thienyl ring
US6410690B1 (en) 1995-06-07 2002-06-25 Medarex, Inc. Therapeutic compounds comprised of anti-Fc receptor antibodies
US5811097A (en) 1995-07-25 1998-09-22 The Regents Of The University Of California Blockade of T lymphocyte down-regulation associated with CTLA-4 signaling
US5922845A (en) 1996-07-11 1999-07-13 Medarex, Inc. Therapeutic multispecific compounds comprised of anti-Fcα receptor antibodies
US10745382B2 (en) * 2015-10-15 2020-08-18 Bristol-Myers Squibb Company Compounds useful as immunomodulators

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2011788A4 (en) * 2006-04-24 2010-10-13 Astellas Pharma Inc OXADIAZOLIDINDIONVERBINDUNG
WO2015034820A1 (en) * 2013-09-04 2015-03-12 Bristol-Myers Squibb Company Compounds useful as immunomodulators
WO2015160641A2 (en) * 2014-04-14 2015-10-22 Bristol-Myers Squibb Company Compounds useful as immunomodulators

Cited By (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112457308A (zh) * 2019-09-09 2021-03-09 上海长森药业有限公司 新型三环芳香杂环化合物，及其制备方法、药物组合物和应用
WO2021047547A1 (zh) * 2019-09-09 2021-03-18 上海长森药业有限公司 新型三环芳香杂环化合物，及其制备方法、药物组合物和应用
CN114364676A (zh) * 2019-09-09 2022-04-15 上海长森药业有限公司 新型三环芳香杂环化合物,及其制备方法、药物组合物和应用
CN112457308B (zh) * 2019-09-09 2024-01-02 上海长森药业有限公司 新型三环芳香杂环化合物，及其制备方法、药物组合物和应用
CN114364676B (zh) * 2019-09-09 2024-02-02 上海长森药业有限公司 新型三环芳香杂环化合物,及其制备方法、药物组合物和应用
CN112574183A (zh) * 2019-09-29 2021-03-30 南京华威医药科技集团有限公司 一种pd-1抑制剂及其制备方法和用途
CN112574183B (zh) * 2019-09-29 2022-07-08 南京华威医药科技集团有限公司 一种pd-1抑制剂及其制备方法和用途
WO2021129584A1 (zh) * 2019-12-26 2021-07-01 杭州阿诺生物医药科技有限公司 Pd-l1拮抗剂化合物
CN111333629A (zh) * 2020-04-10 2020-06-26 颜建发 苯基-1h-吡唑类衍生物及其在抗肿瘤药物中的应用
CN111333629B (zh) * 2020-04-10 2021-03-05 颜建发 苯基-1h-吡唑类衍生物及其在抗肿瘤药物中的应用

Also Published As

Publication number Publication date
JP2019524705A (ja) 2019-09-05
WO2018009505A1 (en) 2018-01-11
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