CN109337949A - 一种深海鱼皮胶原蛋白肽 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种深海鱼皮胶原蛋白肽,其制备方法为:首先将洗净的深海鱼皮进行脱脂除杂蛋白处理,然后使用酸性浸泡与水浴抽提相结合的方法提取鱼皮胶原蛋白,之后将经过活化的乳酸菌接种到含有鱼皮胶原蛋白粉的发酵液中培养发酵,发酵过程中控制发酵时间、温度及pH,发酵结束后过滤,离心,取上清液得到鱼皮胶原蛋白肽溶液,再对鱼皮胶原蛋白肽溶液进行脱色脱腥处理,最后超滤,将滤液旋转蒸发浓缩,低温冷冻,真空干燥即得到鱼皮胶原蛋白肽。本发明深海鱼皮胶原蛋白肽的纯度高、分子量低、生物活性好、亲水性强,其制备方法简单易行、反应条件温和、提取效率高、便于商业化推广。

Description

一种深海鱼皮胶原蛋白肽
技术领域
本发明涉及海洋生物工程技术领域,特别涉及一种深海鱼皮胶原蛋白肽。
背景技术
近几年来,随着生活水平的提高,人们对水产资源需求的多样性及实用性逐渐提高,从而促进我国水产加工业的飞速发展。但是,在水产加工业高速发展的同时会产生大量的鱼下脚料,例如鱼皮、鱼鳞、内脏、鱼头等,这些下脚料约占原料鱼的40-50%,除了少量用来生产鱼粉和鱼饲料,大部分都被丢弃,不仅造成了资源极大的浪费,而且还会造成环境污染。因此,如何能够高效利用鱼下脚料中的营养活性物质已经引起国内外科研工作者的高度重视,其中主要的废弃物鱼皮中的胶原含量相当丰富,胶原蛋白可以占到蛋白质总含量的60-80%,而占鱼皮湿重的18%,将其作为新型的胶原蛋白资源,具有很高的开发和利用价值。
胶原蛋白是动物细胞合成的一种天然生物高分子,作为细胞外基质中的重要成分几乎存在于所有组织内,约占动物总蛋白的30%,胶原蛋白具有高度抗延伸能力,使得皮肤等结缔组织得以维持一定的结构并具有特殊的机械力学性质以实现支撑和保护细胞、组织和机体功能,对细胞和组织的结构与性能等方面十分关键。
胶原多肽是指以胶原组织为原料,通过深度水解获得的具有特殊功能的低分子量的生物活性肽,胶原多肽分子量小,与胶原蛋白相比,胶原多肽更易被人体吸收,吸收率约95%以上,而胶原蛋白的吸收率只有25%。胶原蛋白多肽的亲水基团较多,因此水溶性更好,利用降解手段切断胶原蛋白的肽键,使功能性的片断显露出来,使得胶原蛋白多肽中存在大量的生物活性组分,包括具有抗氧化、抑制ACE活性、抗溃疡、抑制关节炎、提高免疫力、增强骨密度以及预防骨质疏松等生物活性的多肽,因此可被广泛应用于化妆品、保健食品和医药制品等领域中。
现有技术如授权公告号为CN 103805665 B的中国发明专利,公开了一种深海鱼皮胶原多肽的制备方法,该方法将鱼皮胶原蛋白液在55℃下加入复合蛋白酶进行酶解,酶解过程中多次用超滤膜过滤,然后对酶解液用复合活性炭采用分次吸附法脱色去腥,纳滤,干燥,得粉末状胶原多肽。该方法采用酶解和超滤分离联用工艺,做到人为控制反应条件,使产品的分子量可控、分子量分布合理,从而产品的各种理化性质更好。但是,该方法的不足之处是制备过程复杂,胶原蛋白酶解效率低。
发明内容
本发明的目的在于提供一种纯度高、分子量低、生物活性好、亲水性强、无腥味的深海鱼皮胶原蛋白肽,其制备方法简单易行、反应条件温和、提取效率高、便于商业化推广。
本发明针对上述技术中提到的问题,采取的技术方案为:
一种深海鱼皮胶原蛋白肽,其制备方法包括鱼皮预处理、鱼皮胶原蛋白的提取、发酵液制备、鱼皮胶原蛋白肽的制备、鱼皮胶原蛋白肽的纯化,具体步骤如下:
鱼皮预处理:以鳕鱼皮为原料,将鱼皮置于冰水中清洗、剪碎,然后将其置于含有脱脂剂的溶液中,在转速为180-200rpm下连续搅拌36-40h,控制料液比为1:20-25,脱脂温度8-12℃,之后将脱脂后的鱼皮用0.05-0.1mol/L的NaOH溶液浸泡30-50min,最后用水将浸泡过的鱼皮反复清洗至中性,沥干水分备用,对鱼皮进行预处理可以将包裹在胶原蛋白纤维周围的脂肪以及诸如球蛋白、角蛋白等非胶原性蛋白质去除,便于后续的提取分离工作,有利于提高鱼皮胶原蛋白肽的纯度;
鱼皮胶原蛋白的提取:将经过预处理的鱼皮用0.5-0.8mol/L冰乙酸溶液溶胀30-50min,控制料液比1:4-6,用水反复清洗至中性,沥干后干燥粉碎,之后向鱼皮粉中添加鱼皮粉重量8-10倍的蒸馏水,在30-35℃水浴摇床中抽提1-3h,抽提结束后真空抽滤除杂,冷冻干燥得到鱼皮胶原蛋白粉,通过酸性浸泡与水浴抽提相结合的方法可有效使鱼皮的胶原纤维被充分溶胀,有利于将胶原纤维中的胶原蛋白溶出,显著提高了胶原蛋白的提取率;
发酵液的制备:将鱼皮胶原蛋白粉、酵母膏、磷酸氢二钾、柠檬酸铵、葡萄糖、腺苷二磷酸酯、硫酸镁、硫酸锰和蒸馏水按照配比混合均匀,并在120-125℃高压灭菌20-30min,发酵液的组成搭配合理,营养充足,适合菌种的生长代谢;
鱼皮胶原蛋白肽的制备:将乳酸菌在脱脂乳培养基中进行活化培养,活化培养后接种到发酵液中,同时加入5-10%的蔗糖在40-50℃下培养发酵18-24h,控制发酵液的pH为6.0-6.5,发酵结束后进行过滤,并将滤液在3500-4000rpm离心20-30min,取上清液得到鱼皮胶原蛋白肽溶液,通过乳酸菌发酵制备深海鱼皮胶原蛋白肽的反应条件温和,得率和纯度好,且在发酵过程中产生的乙醛和双乙酰等风味物质具有一定除臭除腥的功能;
鱼皮胶原蛋白肽的纯化:将鱼皮胶原蛋白肽溶液稀释10-15倍,加入复合脱色脱腥剂,调节pH为3.5-4.0,在40-50℃下处理50-60min,结束后使用2000Da超滤膜超滤,最后将滤液在50-60℃旋转蒸发浓缩,低温冷冻,真空干燥即得到鱼皮胶原蛋白肽,所制备的鱼皮胶原蛋白肽白色泛微黄,无腥味,低分子量多肽比例高,生物活性好,便于机体吸收利用。
作为优选,鱼皮预处理过程中脱脂剂为体积比为1:1.0-1.5的异丙醇和乙醚的混合液,异丙醇和乙醚配合使用,可有效将将包裹在胶原蛋白纤维周围的脂肪去除,便于后续鱼皮胶原蛋白肽的提取分离工作,同时也可提高鱼皮胶原蛋白肽溶液的色泽、透明度和亲水性能。
作为优选,发酵液的原料成分及其重量份为:鱼皮胶原蛋白粉45-55份、酵母膏4-8份、磷酸氢二钾2-4份、柠檬酸铵2-5份、葡萄糖15-30份、腺苷二磷酸酯1.6-2.4份、硫酸镁0.2-0.6份、硫酸锰0.05-0.12份、蒸馏水80-100份,其中腺苷二磷酸酯与发酵培养液中其他组分发挥协同作用,一方面可促进乳酸菌的生长代谢过程中蛋白酶的合成与激活,增加乳酸菌细胞壁上蛋白酶的数量,有利于促进酶解效率,进而提高鱼皮胶原蛋白肽的得率,另一方面通过破坏鱼皮胶原蛋白三螺旋肽链之间的氢键、交联键以及范德华作用力,进而使鱼皮胶原蛋白的螺旋空间结构发生解旋,分子结构变得松散,多肽链上的酶结合位点增多,增加了酶与底物的结合几率,不仅大大提高了鱼皮胶原蛋白液的水解度,而且得到的多肽分子量低,生物活性高。
作为优选,乳酸菌为保加利亚乳杆菌、布氏乳杆菌、嗜热链球菌的混合物,其重量配比为1:1:0.8-1.2,添加量为每升发酵液中接种1.0-1.5%活化培养后的乳酸菌。
进一步优选,乳酸菌活化培养的具体方法为:将新鲜牛乳煮沸后静置30-40min,自然冷却,待出现脂肪层后,取下层乳液,在100-105℃灭菌30-50min,冷却即得脱脂乳培养基,然后将保加利亚乳杆菌、布氏乳杆菌、嗜热链球菌分别接入脱脂乳培养基中,40-45℃温箱内培养6-10h,连续活化3-4次,经过活化的乳酸菌代谢能力强、数量充足,可有效发酵水解鱼皮胶原蛋白的三股螺旋多肽链,使得肽链变短,分子量降低,产生更多具有生物活性的鱼皮胶原蛋白肽。
作为优选,鱼皮胶原蛋白多肽纯化过程中复合脱色脱腥剂的原料成分及其重量份为:活性炭粉3-5份、β-环糊精2-4份、酵母10-15份、β-D-酚酞葡萄糖苷酸4-6份、二甘醇1-2份,β-D-酚酞葡萄糖苷酸和二甘醇发挥协同作用,能够影响酵母的生长和代谢,激发代谢生成酶的活性,加强对鱼皮胶原蛋白肽溶液中以含有羰基的饱和或不饱和的醛类和酮类物质为主的腥味物质的转化作用,达到鱼皮胶原蛋白肽脱腥的目的,另外复合脱色脱腥剂也可作用于鱼皮胶原蛋白的螺旋肽链被切断成短肽时所暴露出的有色、带苦味的疏水氨基酸,并通过范德华力和疏水作用力将这些氨基酸的活性基团包合,以去除鱼皮胶原蛋白肽的腥苦味,因此,复合脱色脱腥剂可有效对鱼皮胶原蛋白肽溶液进行脱色脱腥处理,且蛋白损失率较低,可制备出白色泛微黄,无腥味,感官品质良好的鱼皮胶原蛋白肽。
与现有技术相比,本发明的优点在于:1)本发明一种深海鱼皮胶原蛋白肽的纯度高,分子量小,生物活性好,亲水性强,可被广泛应用于化妆品、保健食品和医药制品等领域中;2)本发明一种深海鱼皮胶原蛋白肽的制备方法简单易行、反应条件温和、提取效率高、便于商业化推广。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明方案作进一步说明:
实施例1:
一种深海鱼皮胶原蛋白肽,其制备方法包括鱼皮预处理、鱼皮胶原蛋白的提取、发酵液制备、鱼皮胶原蛋白肽的制备、鱼皮胶原蛋白肽的纯化,具体步骤如下:
1)鱼皮预处理:以鳕鱼皮为原料,将鱼皮置于冰水中清洗、剪碎,然后将其置于含有脱脂剂的溶液中,在转速为180rpm下连续搅拌36h,控制料液比为1:20,脱脂温度12℃,之后将脱脂后的鱼皮用0.05mol/L的NaOH溶液浸泡50min,最后用水将浸泡过的鱼皮反复清洗至中性,沥干水分备用,对鱼皮进行预处理可以将包裹在胶原蛋白纤维周围的脂肪以及诸如球蛋白、角蛋白等非胶原性蛋白质去除,便于后续的提取分离工作,有利于提高鱼皮胶原蛋白肽的纯度;
2)鱼皮胶原蛋白的提取:将经过预处理的鱼皮用0.5mol/L冰乙酸溶液溶胀30-50min,控制料液比1:4,用水反复清洗至中性,沥干后干燥粉碎,之后向鱼皮粉中添加鱼皮粉重量8倍的蒸馏水,在30℃水浴摇床中抽提1.5h,抽提结束后真空抽滤除杂,冷冻干燥得到鱼皮胶原蛋白粉,通过酸性浸泡与水浴抽提相结合的方法可有效使鱼皮的胶原纤维被充分溶胀,有利于将胶原纤维中的胶原蛋白溶出,显著提高了胶原蛋白的提取率;
3)发酵液的制备:将鱼皮胶原蛋白粉、酵母膏、磷酸氢二钾、柠檬酸铵、葡萄糖、腺苷二磷酸酯、硫酸镁、硫酸锰和蒸馏水按照配比混合均匀,并在120℃高压灭菌30min,发酵液的组成搭配合理,营养充足,适合菌种的生长代谢;
4)鱼皮胶原蛋白肽的制备:将乳酸菌在脱脂乳培养基中进行活化培养,活化培养后接种到发酵液中,同时加入5%的蔗糖在50℃下培养发酵18h,控制发酵液的pH为6.0-6.5,发酵结束后进行过滤,并将滤液在4000rpm离心20min,取上清液得到鱼皮胶原蛋白肽溶液,通过乳酸菌发酵制备深海鱼皮胶原蛋白肽的反应条件温和,得率和纯度好,且在发酵过程中产生的乙醛和双乙酰等风味物质具有一定除臭除腥的功能;
5)鱼皮胶原蛋白肽的纯化:将鱼皮胶原蛋白肽溶液稀释10-15倍,加入复合脱色脱腥剂,调节pH为3.5-4.0,在50℃下处理60min,结束后使用2000Da超滤膜超滤,最后将滤液在50-60℃旋转蒸发浓缩,低温冷冻,真空干燥即得到鱼皮胶原蛋白肽,所制备的鱼皮胶原蛋白肽白色泛微黄,无腥味,低分子量多肽比例高,生物活性好,便于机体吸收利用。
上述鱼皮预处理过程中脱脂剂为体积比为1:1.0的异丙醇和乙醚的混合液,异丙醇和乙醚配合使用,可有效将将包裹在胶原蛋白纤维周围的脂肪去除,便于后续鱼皮胶原蛋白肽的提取分离工作,同时也可提高鱼皮胶原蛋白肽溶液的色泽、透明度和亲水性能。
上述发酵液的原料成分及其重量份为:鱼皮胶原蛋白粉45份、酵母膏5份、磷酸氢二钾2份、柠檬酸铵3份、葡萄糖15份、腺苷二磷酸酯1.6份、硫酸镁0.2份、硫酸锰0.06份、蒸馏水80份,其中腺苷二磷酸酯与发酵培养液中其他组分发挥协同作用,一方面可促进乳酸菌的生长代谢过程中蛋白酶的合成与激活,增加乳酸菌细胞壁上蛋白酶的数量,有利于促进酶解效率,进而提高鱼皮胶原蛋白肽的得率,另一方面通过破坏鱼皮胶原蛋白三螺旋肽链之间的氢键、交联键以及范德华作用力,进而使鱼皮胶原蛋白的螺旋空间结构发生解旋,分子结构变得松散,多肽链上的酶结合位点增多,增加了酶与底物的结合几率,不仅大大提高了鱼皮胶原蛋白液的水解度,而且得到的多肽分子量低,生物活性高。
上述乳酸菌为保加利亚乳杆菌、布氏乳杆菌、嗜热链球菌的混合物,其重量配比为1:1:0.8,添加量为每升发酵液中接种1.0%活化培养后的乳酸菌。
上述乳酸菌活化培养的具体方法为:将新鲜牛乳煮沸后静置40min,自然冷却,待出现脂肪层后,取下层乳液,在100℃灭菌30min,冷却即得脱脂乳培养基,然后将保加利亚乳杆菌、布氏乳杆菌、嗜热链球菌分别接入脱脂乳培养基中,45℃温箱内培养7h,连续活化3次,经过活化的乳酸菌代谢能力强、数量充足,可有效发酵水解鱼皮胶原蛋白的三股螺旋多肽链,使得肽链变短,分子量降低,产生更多具有生物活性的鱼皮胶原蛋白肽。
上述鱼皮胶原蛋白多肽纯化过程中复合脱色脱腥剂的原料成分及其重量份为:活性炭粉3份、β-环糊精2份、酵母15份、β-D-酚酞葡萄糖苷酸4份、二甘醇1份,β-D-酚酞葡萄糖苷酸和二甘醇发挥协同作用,能够影响酵母的生长和代谢,激发代谢生成酶的活性,加强对鱼皮胶原蛋白肽溶液中以含有羰基的饱和或不饱和的醛类和酮类物质为主的腥味物质的转化作用,达到鱼皮胶原蛋白肽脱腥的目的,另外复合脱色脱腥剂也可作用于鱼皮胶原蛋白的螺旋肽链被切断成短肽时所暴露出的有色、带苦味的疏水氨基酸,并通过范德华力和疏水作用力将这些氨基酸的活性基团包合,以去除鱼皮胶原蛋白肽的腥苦味,因此,复合脱色脱腥剂可有效对鱼皮胶原蛋白肽溶液进行脱色脱腥处理,且蛋白损失率较低,可制备出白色泛微黄,无腥味,感官品质良好的鱼皮胶原蛋白肽。
实施例2:
一种深海鱼皮胶原蛋白肽,其制备方法包括鱼皮预处理、鱼皮胶原蛋白的提取、发酵液制备、鱼皮胶原蛋白肽的制备、鱼皮胶原蛋白肽的纯化,具体步骤如下:
1)鱼皮预处理:以鳕鱼皮为原料,将鱼皮置于冰水中清洗、剪碎,然后将其置于体积比为1:1.5的异丙醇和乙醚的混合液中,在转速为200rpm下连续搅拌40h,控制料液比为1:25,脱脂温度12℃,之后将脱脂后的鱼皮用0.1mol/L的NaOH溶液浸泡50min,最后用水将浸泡过的鱼皮反复清洗至中性,沥干水分备用;
2)鱼皮胶原蛋白的提取:将经过预处理的鱼皮用0.8mol/L冰乙酸溶液溶胀40min,控制料液比1:6,用水反复清洗至中性,沥干后干燥粉碎,之后向鱼皮粉中添加鱼皮粉重量10倍的蒸馏水,在35℃水浴摇床中抽提2h,抽提结束后真空抽滤除杂,冷冻干燥得到鱼皮胶原蛋白粉;
3)发酵液的制备:将鱼皮胶原蛋白粉50份、酵母膏4份、磷酸氢二钾4份、柠檬酸铵5份、葡萄糖25份、腺苷二磷酸酯2.2份、硫酸镁0.6份、硫酸锰0.10份、蒸馏水100份混合均匀,并在125℃高压灭菌30min;
4)鱼皮胶原蛋白肽的制备:将乳酸菌在脱脂乳培养基中进行活化培养,活化培养后接种到发酵液中,同时加入10%的蔗糖在45℃下培养发酵20h,控制发酵液的pH为6.0-6.5,发酵结束后进行过滤,并将滤液在4000rpm离心30min,取上清液得到鱼皮胶原蛋白肽溶液;
5)鱼皮胶原蛋白肽的纯化:将鱼皮胶原蛋白肽溶液稀释10倍,加入复合脱色脱腥剂,调节pH为3.5-4.0,在50℃下处理50min,结束后使用2000Da超滤膜超滤,最后将滤液在60℃旋转蒸发浓缩,低温冷冻,真空干燥即得到鱼皮胶原蛋白肽。
上述乳酸菌为保加利亚乳杆菌、布氏乳杆菌、嗜热链球菌的混合物,其重量配比为1:1:1.2,添加量为每升发酵液中接种1.0%活化培养后的乳酸菌。
上述乳酸菌活化培养的具体方法为:将新鲜牛乳煮沸后静置40min,自然冷却,待出现脂肪层后,取下层乳液,在105℃灭菌40min,冷却即得脱脂乳培养基,然后将保加利亚乳杆菌、布氏乳杆菌、嗜热链球菌分别接入脱脂乳培养基中, 45℃温箱内培养10h,连续活化4次。
上述鱼皮胶原蛋白多肽纯化过程中复合脱色脱腥剂的原料成分及其重量份为:活性炭粉5份、β-环糊精2份、酵母15份、β-D-酚酞葡萄糖苷酸5份、二甘醇2份。
实施例3:
一种深海鱼皮胶原蛋白肽,其制备方法包括鱼皮预处理、鱼皮胶原蛋白的提取、发酵液制备、鱼皮胶原蛋白肽的制备、鱼皮胶原蛋白肽的纯化,具体步骤如下:
1)鱼皮预处理:以鳕鱼皮为原料,将鱼皮置于冰水中清洗、剪碎,然后将其置于体积比为1:1.2的异丙醇和乙醚的混合液中,在转速为180rpm下连续搅拌36h,控制料液比为1:23,脱脂温度8℃,之后将脱脂后的鱼皮用0.08mol/L的NaOH溶液浸泡30min,最后用水将浸泡过的鱼皮反复清洗至中性,沥干水分备用;
2)鱼皮胶原蛋白的提取:将经过预处理的鱼皮用0.6mol/L冰乙酸溶液溶胀30min,控制料液比1:4,用水反复清洗至中性,沥干后干燥粉碎,之后向鱼皮粉中添加鱼皮粉重量8倍的蒸馏水,在30℃水浴摇床中抽提2h,抽提结束后真空抽滤除杂,冷冻干燥得到鱼皮胶原蛋白粉;
3)发酵液的制备:将鱼皮胶原蛋白粉55份、酵母膏4份、磷酸氢二钾3份、柠檬酸铵2份、葡萄糖25份、腺苷二磷酸酯2.0份、硫酸镁0.4份、硫酸锰0.09份、蒸馏水80份混合均匀,并在120℃高压灭菌20min;
4)鱼皮胶原蛋白肽的制备:将乳酸菌在脱脂乳培养基中进行活化培养,活化培养后接种到发酵液中,同时加入6%的蔗糖在50℃下培养发酵20h,控制发酵液的pH为6.0-6.5,发酵结束后进行过滤,并将滤液在4000rpm离心30min,取上清液得到鱼皮胶原蛋白肽溶液;
5)鱼皮胶原蛋白肽的纯化:将鱼皮胶原蛋白肽溶液稀释15倍,加入复合脱色脱腥剂,调节pH为3.5-4.0,在40℃下处理50min,结束后使用2000Da超滤膜超滤,最后将滤液在50℃旋转蒸发浓缩,低温冷冻,真空干燥即得到鱼皮胶原蛋白肽。
上述乳酸菌为保加利亚乳杆菌、布氏乳杆菌、嗜热链球菌的混合物,其重量配比为1:1:0.8,添加量为每升发酵液中接种1.0%活化培养后的乳酸菌。
上述乳酸菌活化培养的具体方法为:将新鲜牛乳煮沸后静置40min,自然冷却,待出现脂肪层后,取下层乳液,在100℃灭菌40min,冷却即得脱脂乳培养基,然后将保加利亚乳杆菌、布氏乳杆菌、嗜热链球菌分别接入脱脂乳培养基中,45℃温箱内培养8h,连续活化3次。
上述鱼皮胶原蛋白多肽纯化过程中复合脱色脱腥剂的原料成分及其重量份为:活性炭粉4份、β-环糊精2份、酵母10份、β-D-酚酞葡萄糖苷酸5份、二甘醇2份。
对比实施例1:
对比实施例1与实施例1相比,步骤3中发酵液的原料成分及其重量份为:鱼皮胶原蛋白粉45份、酵母膏5份、磷酸氢二钾2份、柠檬酸铵3份、葡萄糖15份、硫酸镁0.2份、硫酸锰0.06份、蒸馏水80份,且步骤5过程中不使用复合脱色脱腥剂对鱼皮胶原蛋白多肽溶液进行处理,除此外的方法步骤均相同。
为了对比本发明效果,分别观察实施例1、实施例2、实施例3和对比实施例1所制备的深海鱼皮胶原蛋白多肽的颜色、气味以及对相对分子质量在400-1000的胶原蛋白肽的含量进行测试,具体结果如表1。
表1鱼皮胶原蛋白多肽的观察及测试表
颜色 气味 相对分子质量在400-1000的含量/%
实施例1 白色泛微黄 基本无腥味 85
实施例2 白色泛微黄 基本无腥味 92
实施例3 白色泛微黄 基本无腥味 89
对比实施例1 明显泛黄 有腥味 69
从表1可以看出,与对比实施例1相比,实施例1、实施例2和实施例3所制备的相对分子质量在400-1000的胶原蛋白多肽的含量较高,且颜色偏白,无腥味,由此可见,本发明深海鱼皮胶原蛋白多肽感观质量好,分子量低,生物活性好,可被广泛应用于化妆品、保健食品和医药制品等领域中。
本发明的操作步骤中的常规操作为本领域技术人员所熟知,在此不进行赘述。
以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明,应理解的是以上所述仅为本发明的具体实施例,并不用于限制本发明,凡在本发明的原则范围内所做的任何修改、补充或类似方式替代等,均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种深海鱼皮胶原蛋白肽的制备方法,包括鱼皮预处理、鱼皮胶原蛋白的提取、发酵液制备、鱼皮胶原蛋白肽的制备、鱼皮胶原蛋白肽的纯化,其特征在于:所述鱼皮胶原蛋白肽的纯化为:将鱼皮胶原蛋白肽溶液稀释后加入复合脱色脱腥剂,调节pH,控制温度与时间,结束后超滤,最后将滤液旋转蒸发浓缩,低温冷冻,真空干燥即得到鱼皮胶原蛋白肽,所述复合脱色脱腥剂为活性炭粉、β-环糊精、酵母、β-D-酚酞葡萄糖苷酸和二甘醇的混合物。
2.根据权利要求1所述的一种深海鱼皮胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于:所述复合脱色脱腥剂的原料成分的重量份为:活性炭粉3-5份、β-环糊精2-4份、酵母10-15份、β-D-酚酞葡萄糖苷酸4-6份、二甘醇1-2份。
3.根据权利要求1所述的一种深海鱼皮胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于:所述鱼皮预处理过程中脱脂剂为体积比为1:1.0-1.5的异丙醇和乙醚的混合液。
4.根据权利要求1所述的一种深海鱼皮胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于:所述发酵液制备步骤中发酵液的原料成分及其重量份为:鱼皮胶原蛋白粉45-55份、酵母膏4-8份、磷酸氢二钾2-4份、柠檬酸铵2-5份、葡萄糖15-30份、腺苷二磷酸酯1.6-2.4份、硫酸镁0.2-0.6份、硫酸锰0.05-0.12份、蒸馏水80-100份。
5.根据权利要求1所述的一种深海鱼皮胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于:所述鱼皮胶原蛋白肽的制备过程中控制发酵温度为40-50℃,时间为18-24h,pH为6.0-6.5。
6.根据权利要求1所述的一种深海鱼皮胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于:所述鱼皮胶原蛋白肽的制备步骤中乳酸菌为保加利亚乳杆菌、布氏乳杆菌、嗜热链球菌的混合物,其重量配比为1:1:0.8-1.2,添加量为每升发酵液中接种1.0-1.5%活化培养后的乳酸菌。
7.根据权利要求6所述的一种深海鱼皮胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于:所述乳酸菌活化培养的具体方法为:将新鲜牛乳煮沸后静置30-40min,自然冷却,待出现脂肪层后,取下层乳液,在100-105℃灭菌30-50min,冷却即得脱脂乳培养基,然后将保加利亚乳杆菌、布氏乳杆菌、嗜热链球菌分别接入脱脂乳培养基中,40-45℃温箱内培养6-10h,连续活化3-4次。
8.权利要求1-7任何一项所述的一种深海鱼皮胶原蛋白肽的制备方法制备的一种深海鱼皮胶原蛋白肽。
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