CN113512108B - 海洋鱼皮胶原低聚肽及其制备方法和应用 - Google Patents
海洋鱼皮胶原低聚肽及其制备方法和应用 Download PDFInfo
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- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
本发明属于海洋鱼皮胶原低聚肽制备技术领域,具体涉及一种海洋鱼皮胶原低聚肽及其制备方法和应用。本发明海洋鱼皮胶原低聚肽的制备方法包括将鱼皮剪碎成小块,进行脱脂处理,加入氯化钠水溶液,浸泡,过滤,向预处理后鱼皮中加入除味液,进行蒸汽处理,将蒸汽处理后鱼皮冷冻干燥,粉碎,向鱼皮粉中加水,均质,调节均质物料的pH,加入复合酶,酶解,对所得酶解液进行超滤处理,收集截留液,对所得截留液进行电渗析处理,将脱盐后的肽液浓缩,干燥,即得。本发明制得的海洋鱼皮胶原低聚肽口感好,无鱼腥味,将其应用于口服液的制备中,所得产品口感佳。且本发明提供的含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液具有显著的抗疲劳作用,能够缓解体力疲乏。
Description
技术领域
本发明属于海洋鱼皮胶原低聚肽制备技术领域,具体涉及一种海洋鱼皮胶原低聚肽及其制备方法和应用。
背景技术
我国是世界进出口鱼类加工品的第一大国,每年鱼产品的进出口量高达全世界的50%以上。而在鱼类工业加工的过程中,伴随有大量的鱼的下脚料约占鱼重量的30-50%,其中鱼皮所占比例较高。而这些废弃的鱼皮除部分被当做农业肥料或饲料外,大部分被废弃直接当做垃圾丢弃,这样做不仅造成了资源的浪费,还会引起严重的污染环境。近年来,国内外以鱼皮为原料,利用现代提取分离技术制备胶原蛋白、多肽和低聚肽的研究与开发取得重要进展。然而,我国目前以鱼皮为原料提取分离技术制备胶原蛋白、多肽和低聚肽的技术由于存在成本高、纯度低等技术制约,整个产业尚处于初级阶段,亟需先进的提取分离技术和高附加值产品开发。
生物活性肽具有多种生理调节、代谢作用,具有易被人体吸收、消化等特点。现代研究表明,许多生物活性多肽具有抗病毒、抗菌、激素调节、免疫调节、酶调节、以及降血压和降血脂等功效。随着人们生活质量的不断提高,伴随着各类富贵病,如肥胖病、糖尿病、高血压及高血脂等频发,人类健康越来越引起人们的关注,人们的消费观念早已从单纯的吃饱、吃好转向于预防、保健。在这种趋势下,具有预防疾病、增强体质及促进康复等优点的生物活性多肽类食品、保健品越来越多的受到青睐。因此,生物活性多肽其重要的应用附加值不容小觑。然而,现有的海洋鱼低聚肽的制备方法存在所得产品鱼腥味较重等问题,限制了其应用。
发明内容
针对现有技术的不足,本发明的目的在于提供一种海洋鱼皮胶原低聚肽及其制备方法和应用。采用本发明海洋鱼皮胶原低聚肽的制备方法制得的海洋鱼皮胶原低聚肽口感好,无鱼腥味,将其应用于口服液的制备中,所得产品口感佳。且本发明提供的含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液具有显著的抗疲劳作用,能够缓解体力疲乏。
本发明的技术方案是:
一种海洋鱼皮胶原低聚肽的制备方法,包括以下步骤:
S1将鱼皮用水清洗干净,剪碎成小块,加入正己烷进行脱脂处理,脱脂温度为4-10℃,脱脂时间为10-15h,过滤,用水清洗干净,得脱脂后鱼皮,向脱脂后鱼皮中加入质量浓度为3%的氯化钠水溶液,于4-10℃浸泡5-8h,浸泡过程中以100-150r/min的速度搅拌,过滤,得预处理后鱼皮;
S2向步骤S1所得预处理后鱼皮中加入除味液,搅拌均匀,放置1-2h,进行蒸汽处理,得蒸汽处理后鱼皮,将蒸汽处理后鱼皮冷冻干燥,将冷冻干燥后鱼皮粉碎,过50目筛,得鱼皮粉;
S3向步骤S2所得鱼皮粉中加水,水的加入量为鱼皮粉质量的10-13倍,均质,得均质物料;
S4调节步骤S3所得均质物料的pH至6-7,加热至50-60℃,在100-150r/min的搅拌速度下加入复合酶,复合酶的加入量为均质物料质量的0.5-1‰,酶解时间为0.5-2h,酶解结束后升温至80-90℃灭酶10-15min,冷却至25℃,过滤,得酶解液;
S5采用截留分子量为1000Da的超滤膜对步骤S4所得酶解液进行超滤处理,收集截留液,对所得截留液进行电渗析处理,将脱盐后的肽液浓缩,干燥,即得。
进一步地,所述步骤S2所述除味液的制备方法为:取乳酸、儿茶素和β-环糊精,混合,加入乳酸、儿茶素和β-环糊精总质量6倍的水,搅拌至完全溶解,即得。
进一步地,乳酸、儿茶素和β-环糊精的质量比为2-4:6-7:9-12。
进一步地,所述步骤S2所述蒸汽处理的具体操作为:常压下于蒸汽上蒸15-20min,蒸汽温度为100℃。
进一步地,所述步骤S4所述复合酶由木瓜蛋白酶和氨肽酶按质量比6-10:2-3组成。
进一步地,所述步骤S4所述超滤处理的具体操作为:超滤的操作压力为0.2-0.4MPa,超滤时间为10-20min。
进一步地,所述步骤S4所述电渗析处理的具体操作为:电渗析过程中恒定电流1-3A,流量20-30L/min,处理时间10-20min。
本发明的另一目的在于提供所述的海洋鱼皮胶原低聚肽的制备方法制得的海洋鱼皮胶原低聚肽在制备保健品中的应用。
一种含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液,包括以下组分及其质量百分数:
上述的海洋鱼皮胶原低聚肽的制备方法制得的海洋鱼皮胶原低聚肽4-7%,菊粉6-10%,沙棘果粉3-5%,蓝莓浓缩汁4-7%,雪莲培养物0.05-0.15%,野樱莓浓缩汁0.4-1.2%,鲣鱼弹性蛋白肽0.1-0.3%,N-乙酰神经氨酸0.1-0.3%,蛹虫草粉0.2-0.5%,γ-氨基丁酸0.1-0.3%,蜂蜜9-12%,纯化水56.25-73.05%。
进一步地,所述的含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液,包括以下组分及其质量百分数:
上述的海洋鱼皮胶原低聚肽的制备方法制得的海洋鱼皮胶原低聚肽6%,菊粉8%,沙棘果粉4%,蓝莓浓缩汁6%,雪莲培养物0.1%,野樱莓浓缩汁1%,鲣鱼弹性蛋白肽0.2%,N-乙酰神经氨酸0.2%,蛹虫草粉0.3%,γ-氨基丁酸0.2%,蜂蜜10%,纯化水64%。
本发明中,通过向经过脱脂处理、氯化钠水溶液浸泡处理后所得预处理后鱼皮中加入由乳酸、儿茶素和β-环糊精制成的除味液,放置一段时间后进行蒸汽处理,通过多重作用,排出异味,达到优异的除腥效果,保证了产品具有较佳的口味,将其应用于口服液的制备中,可以使所得产品获得更佳的口感。本发明中,通过在一定压力下对冷冻干燥后粉碎所得鱼皮粉进行均质,可以增大酶解时加入的复合酶与鱼皮中所含蛋白接触的机率,有利于活性成分的获得,提高鱼皮蛋白的水解度以及提取效率。本发明中,通过将酶解液进行超滤处理,对所得截留液进行电渗析处理,可以获得显著的脱盐效果,明显降低所得海洋鱼低聚肽的盐分,有利于其在口服液中的应用。本发明中加入的由木瓜蛋白酶和氨肽酶按一定质量比组成的复合酶,可以大幅度提高海洋鱼蛋白的水解度,有利于生物活性肽的提取。
与现有技术相比,本发明具有以下优势:
(1)本发明提高了海洋鱼皮胶原低聚肽的提取效率,保证了海洋鱼皮胶原低聚肽的生物活性。
(2)本发明提供的含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液携带方便,保质期长,质量稳定不易变质氧化。
(3)采用本发明方法制得的海洋鱼皮胶原低聚肽与菊粉、沙棘果粉、蓝莓浓缩汁、雪莲培养物、野樱莓浓缩汁、鲣鱼弹性蛋白肽等为原料制得的含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液配方科学合理,各组分相互协同,能够更好的促进海洋鱼皮胶原低聚肽等活性成分在人体内更好地吸收,从而快速发挥其功效。
(4)本发明提供的含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液具有显著的抗疲劳作用,能够缓解体力疲乏。
(5)采用本发明海洋鱼皮胶原低聚肽的制备方法制得的海洋鱼皮胶原低聚肽口感好,无鱼腥味,将其应用于口服液的制备中,所得产品口感佳。
具体实施方式
以下通过具体实施方式的描述对本发明作进一步说明,但这并非是对本发明的限制,本领域技术人员根据本发明的基本思想,可以做出各种修改或改进,但是只要不脱离本发明的基本思想,均在本发明的范围之内。
本发明中所用原料如无特殊说明均为市售。如木瓜蛋白酶可购自南宁庞博生物工程有限公司,货号:PBD-01-1,酶活力20万U/g;氨肽酶可购自武汉千润生物工程有限公司,货号:635601026894,酶活力10万u/g;沙棘果粉可购自西安首禾生物科技有限公司,货号:SH-01-01;蓝莓浓缩汁可购自西安万方生物科技有限公司,货号:03;雪莲培养物可购自西安全奥生物科技有限公司,货号:543;野樱莓浓缩汁可购自悦芃泰(广州)天然食品有限公司;鲣鱼弹性蛋白肽可购自西安优硕生物科技有限公司,货号:JY099;蛹虫草粉可购自扶风斯诺特生物科技有限公司,货号:SNT20。
实施例1、一种海洋鱼皮胶原低聚肽的制备方法
所述海洋鱼皮胶原低聚肽的制备方法,包括以下步骤:
S1将深海三文鱼皮用水清洗干净,剪碎成0.2cm×0.2cm的小块,加入正己烷进行脱脂处理,正己烷的加入量为鱼皮质量的6倍,脱脂温度为4℃,脱脂时间为10h,过滤,用水清洗干净,得脱脂后鱼皮,向脱脂后鱼皮中加入质量浓度为3%的氯化钠水溶液,氯化钠水溶液的加入量为脱脂后鱼皮质量的10倍,于4℃浸泡5h,浸泡过程中以100r/min的速度搅拌,过滤,得预处理后鱼皮;
S2向步骤S1所得预处理后鱼皮中加入除味液,除味液的加入量为预处理后鱼皮质量的4倍,搅拌均匀,放置1h,进行蒸汽处理,常压下于蒸汽上蒸15min,蒸汽温度为100℃,得蒸汽处理后鱼皮,将蒸汽处理后鱼皮冷冻干燥,将冷冻干燥后鱼皮粉碎,过50目筛,得鱼皮粉;
S3向步骤S2所得鱼皮粉中加水,水的加入量为鱼皮粉质量的10倍,均质,均质压力为20Mpa,均质时间为1min,得均质物料;
S4调节步骤S3所得均质物料的pH至6,加热至50℃,在100r/min的搅拌速度下加入由木瓜蛋白酶和氨肽酶按质量比6:3组成的复合酶,复合酶的加入量为均质物料质量的0.5‰,酶解时间为0.5h,酶解结束后升温至80℃灭酶10min,冷却至25℃,过滤,得酶解液;
S5采用截留分子量为1000Da的超滤膜对步骤S4所得酶解液进行超滤处理,超滤的操作压力为0.2MPa,超滤时间为10min,收集截留液,对所得截留液进行电渗析处理,电渗析过程中恒定电流1A,流量20L/min,处理时间10min,将脱盐后的肽液浓缩,干燥,即得。
所述步骤S2所述除味液的制备方法为:取质量比为2:7:12的乳酸、儿茶素和β-环糊精,混合,加入乳酸、儿茶素和β-环糊精总质量6倍的水,搅拌至完全溶解,即得。
实施例2、一种海洋鱼皮胶原低聚肽的制备方法
所述海洋鱼皮胶原低聚肽的制备方法,包括以下步骤:
S1将深海三文鱼皮用水清洗干净,剪碎成0.2cm×0.2cm的小块,加入正己烷进行脱脂处理,正己烷的加入量为鱼皮质量的8倍,脱脂温度为10℃,脱脂时间为15h,过滤,用水清洗干净,得脱脂后鱼皮,向脱脂后鱼皮中加入质量浓度为3%的氯化钠水溶液,氯化钠水溶液的加入量为脱脂后鱼皮质量的13倍,于10℃浸泡8h,浸泡过程中以150r/min的速度搅拌,过滤,得预处理后鱼皮;
S2向步骤S1所得预处理后鱼皮中加入除味液,除味液的加入量为预处理后鱼皮质量的6倍,搅拌均匀,放置2h,进行蒸汽处理,常压下于蒸汽上蒸20min,蒸汽温度为100℃,得蒸汽处理后鱼皮,将蒸汽处理后鱼皮冷冻干燥,将冷冻干燥后鱼皮粉碎,过50目筛,得鱼皮粉;
S3向步骤S2所得鱼皮粉中加水,水的加入量为鱼皮粉质量的13倍,均质,均质压力为35Mpa,均质时间为3min,得均质物料;
S4调节步骤S3所得均质物料的pH至7,加热至60℃,在150r/min的搅拌速度下加入由木瓜蛋白酶和氨肽酶按质量比10:2组成的复合酶,复合酶的加入量为均质物料质量的1‰,酶解时间为2h,酶解结束后升温至90℃灭酶15min,冷却至25℃,过滤,得酶解液;
S5采用截留分子量为1000Da的超滤膜对步骤S4所得酶解液进行超滤处理,超滤的操作压力为0.4MPa,超滤时间为20min,收集截留液,对所得截留液进行电渗析处理,电渗析过程中恒定电流3A,流量30L/min,处理时间20min,将脱盐后的肽液浓缩,干燥,即得。
所述步骤S2所述除味液的制备方法为:取质量比为4:6:9的乳酸、儿茶素和β-环糊精,混合,加入乳酸、儿茶素和β-环糊精总质量6倍的水,搅拌至完全溶解,即得。
实施例3、一种海洋鱼皮胶原低聚肽的制备方法
所述海洋鱼皮胶原低聚肽的制备方法,包括以下步骤:
S1将深海三文鱼皮用水清洗干净,剪碎成0.2cm×0.2cm的小块,加入正己烷进行脱脂处理,正己烷的加入量为鱼皮质量的7倍,脱脂温度为6℃,脱脂时间为12h,过滤,用水清洗干净,得脱脂后鱼皮,向脱脂后鱼皮中加入质量浓度为3%的氯化钠水溶液,氯化钠水溶液的加入量为脱脂后鱼皮质量的12倍,于6℃浸泡7h,浸泡过程中以120r/min的速度搅拌,过滤,得预处理后鱼皮;
S2向步骤S1所得预处理后鱼皮中加入除味液,除味液的加入量为预处理后鱼皮质量的5倍,搅拌均匀,放置1.5h,进行蒸汽处理,常压下于蒸汽上蒸18min,蒸汽温度为100℃,得蒸汽处理后鱼皮,将蒸汽处理后鱼皮冷冻干燥,将冷冻干燥后鱼皮粉碎,过50目筛,得鱼皮粉;
S3向步骤S2所得鱼皮粉中加水,水的加入量为鱼皮粉质量的11倍,均质,均质压力为25Mpa,均质时间为2min,得均质物料;
S4调节步骤S3所得均质物料的pH至6.5,加热至55℃,在120r/min的搅拌速度下加入由木瓜蛋白酶和氨肽酶按质量比8:3组成的复合酶,复合酶的加入量为均质物料质量的0.7‰,酶解时间为1h,酶解结束后升温至85℃灭酶13min,冷却至25℃,过滤,得酶解液;
S5采用截留分子量为1000Da的超滤膜对步骤S4所得酶解液进行超滤处理,超滤的操作压力为0.3MPa,超滤时间为15min,收集截留液,对所得截留液进行电渗析处理,电渗析过程中恒定电流2A,流量25L/min,处理时间15min,将脱盐后的肽液浓缩,干燥,即得。
所述步骤S2所述除味液的制备方法为:取质量比为3:7:10的乳酸、儿茶素和β-环糊精,混合,加入乳酸、儿茶素和β-环糊精总质量6倍的水,搅拌至完全溶解,即得。
实施例4、一种含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液
所述含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液,包括以下组分及其质量百分数:
实施例1制得海洋鱼皮胶原低聚肽6%,菊粉8%,沙棘果粉4%,蓝莓浓缩汁6%,雪莲培养物0.1%,野樱莓浓缩汁1%,鲣鱼弹性蛋白肽0.2%,N-乙酰神经氨酸0.2%,蛹虫草粉0.3%,γ-氨基丁酸0.2%,蜂蜜10%,纯化水64%。
所述含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液的制备方法为:
将海洋鱼皮胶原低聚肽、菊粉、沙棘果粉、蓝莓浓缩汁、雪莲培养物、野樱莓浓缩汁、鲣鱼弹性蛋白肽、N-乙酰神经氨酸、蛹虫草粉、γ-氨基丁酸、蜂蜜混合,加入纯化水,搅拌至完全溶解,过滤,灌装后经115℃后灭菌30min,即得。
实施例5、一种含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液
所述含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液,包括以下组分及其质量百分数:
实施例2制得海洋鱼皮胶原低聚肽6%,菊粉8%,沙棘果粉4%,蓝莓浓缩汁6%,雪莲培养物0.1%,野樱莓浓缩汁1%,鲣鱼弹性蛋白肽0.2%,N-乙酰神经氨酸0.2%,蛹虫草粉0.3%,γ-氨基丁酸0.2%,蜂蜜10%,纯化水64%。
所述含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液的制备方法与实施例4类似。
实施例6、一种含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液
所述含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液,包括以下组分及其质量百分数:
实施例3制得海洋鱼皮胶原低聚肽6%,菊粉8%,沙棘果粉4%,蓝莓浓缩汁6%,雪莲培养物0.1%,野樱莓浓缩汁1%,鲣鱼弹性蛋白肽0.2%,N-乙酰神经氨酸0.2%,蛹虫草粉0.3%,γ-氨基丁酸0.2%,蜂蜜10%,纯化水64%。
所述含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液的制备方法与实施例4类似。
对比例1、一种海洋鱼皮胶原低聚肽的制备方法
所述海洋鱼皮胶原低聚肽的制备方法,包括以下步骤:
S1将深海三文鱼皮用水清洗干净,剪碎成0.2cm×0.2cm的小块,加入正己烷进行脱脂处理,正己烷的加入量为鱼皮质量的7倍,脱脂温度为6℃,脱脂时间为12h,过滤,用水清洗干净,得脱脂后鱼皮,向脱脂后鱼皮中加入质量浓度为3%的氯化钠水溶液,氯化钠水溶液的加入量为脱脂后鱼皮质量的12倍,于6℃浸泡7h,浸泡过程中以120r/min的速度搅拌,过滤,得预处理后鱼皮;
S2向步骤S1所得预处理后鱼皮中加入除味液,除味液的加入量为预处理后鱼皮质量的5倍,搅拌均匀,放置1.5h,进行蒸汽处理,常压下于蒸汽上蒸18min,蒸汽温度为100℃,得蒸汽处理后鱼皮,将蒸汽处理后鱼皮冷冻干燥,将冷冻干燥后鱼皮粉碎,过50目筛,得鱼皮粉;
S3向步骤S2所得鱼皮粉中加水,水的加入量为鱼皮粉质量的11倍,均质,均质压力为25Mpa,均质时间为2min,得均质物料;
S4调节步骤S3所得均质物料的pH至6.5,加热至55℃,在120r/min的搅拌速度下加入由木瓜蛋白酶和氨肽酶按质量比8:3组成的复合酶,复合酶的加入量为均质物料质量的0.7‰,酶解时间为1h,酶解结束后升温至85℃灭酶13min,冷却至25℃,过滤,得酶解液;
S5采用截留分子量为1000Da的超滤膜对步骤S4所得酶解液进行超滤处理,超滤的操作压力为0.3MPa,超滤时间为15min,收集截留液,对所得截留液进行电渗析处理,电渗析过程中恒定电流2A,流量25L/min,处理时间15min,将脱盐后的肽液浓缩,干燥,即得。
所述步骤S2所述除味液的制备方法为:取质量比为7:10的儿茶素和β-环糊精,混合,加入儿茶素和β-环糊精总质量6倍的水,搅拌至完全溶解,即得。
所述海洋鱼皮胶原低聚肽的制备方法与实施例3类似。
与实施例3的不同在于,除味液的制备中未加入乳酸。
对比例2、一种海洋鱼皮胶原低聚肽的制备方法
所述海洋鱼皮胶原低聚肽的制备方法,包括以下步骤:
S1将深海三文鱼皮用水清洗干净,剪碎成0.2cm×0.2cm的小块,加入正己烷进行脱脂处理,正己烷的加入量为鱼皮质量的7倍,脱脂温度为6℃,脱脂时间为12h,过滤,用水清洗干净,得脱脂后鱼皮,向脱脂后鱼皮中加入质量浓度为3%的氯化钠水溶液,氯化钠水溶液的加入量为脱脂后鱼皮质量的12倍,于6℃浸泡7h,浸泡过程中以120r/min的速度搅拌,过滤,得预处理后鱼皮;
S2向步骤S1所得预处理后鱼皮中加入除味液,除味液的加入量为预处理后鱼皮质量的5倍,搅拌均匀,放置1.5h,将处理后鱼皮冷冻干燥,将冷冻干燥后鱼皮粉碎,过50目筛,得鱼皮粉;
S3向步骤S2所得鱼皮粉中加水,水的加入量为鱼皮粉质量的11倍,均质,均质压力为25Mpa,均质时间为2min,得均质物料;
S4调节步骤S3所得均质物料的pH至6.5,加热至55℃,在120r/min的搅拌速度下加入由木瓜蛋白酶和氨肽酶按质量比8:3组成的复合酶,复合酶的加入量为均质物料质量的0.7‰,酶解时间为1h,酶解结束后升温至85℃灭酶13min,冷却至25℃,过滤,得酶解液;
S5采用截留分子量为1000Da的超滤膜对步骤S4所得酶解液进行超滤处理,超滤的操作压力为0.3MPa,超滤时间为15min,收集截留液,对所得截留液进行电渗析处理,电渗析过程中恒定电流2A,流量25L/min,处理时间15min,将脱盐后的肽液浓缩,干燥,即得。
所述步骤S2所述除味液的制备方法为:取质量比为3:7:10的乳酸、儿茶素和β-环糊精,混合,加入乳酸、儿茶素和β-环糊精总质量6倍的水,搅拌至完全溶解,即得。
所述海洋鱼皮胶原低聚肽的制备方法与实施例3类似。
与实施例3的不同在于,步骤S2未进行蒸汽处理。
对比例3、一种海洋鱼皮胶原低聚肽的制备方法
所述海洋鱼皮胶原低聚肽的制备方法,包括以下步骤:
S1将深海三文鱼皮用水清洗干净,剪碎成0.2cm×0.2cm的小块,加入正己烷进行脱脂处理,正己烷的加入量为鱼皮质量的7倍,脱脂温度为6℃,脱脂时间为12h,过滤,用水清洗干净,得脱脂后鱼皮,向脱脂后鱼皮中加入质量浓度为3%的氯化钠水溶液,氯化钠水溶液的加入量为脱脂后鱼皮质量的12倍,于6℃浸泡7h,浸泡过程中以120r/min的速度搅拌,过滤,得预处理后鱼皮;
S2向步骤S1所得预处理后鱼皮中加入除味液,除味液的加入量为预处理后鱼皮质量的5倍,搅拌均匀,放置1.5h,进行蒸汽处理,常压下于蒸汽上蒸18min,蒸汽温度为100℃,得蒸汽处理后鱼皮,将蒸汽处理后鱼皮冷冻干燥,将冷冻干燥后鱼皮粉碎,过50目筛,得鱼皮粉;
S3向步骤S2所得鱼皮粉中加水,水的加入量为鱼皮粉质量的11倍,得物料;
S4调节步骤S3所得均质物料的pH至6.5,加热至55℃,在120r/min的搅拌速度下加入由木瓜蛋白酶和氨肽酶按质量比8:3组成的复合酶,复合酶的加入量为均质物料质量的0.7‰,酶解时间为1h,酶解结束后升温至85℃灭酶13min,冷却至25℃,过滤,得酶解液;
S5采用截留分子量为1000Da的超滤膜对步骤S4所得酶解液进行超滤处理,超滤的操作压力为0.3MPa,超滤时间为15min,收集截留液,对所得截留液进行电渗析处理,电渗析过程中恒定电流2A,流量25L/min,处理时间15min,将脱盐后的肽液浓缩,干燥,即得。
所述步骤S2所述除味液的制备方法为:取质量比为3:7:10的乳酸、儿茶素和β-环糊精,混合,加入乳酸、儿茶素和β-环糊精总质量6倍的水,搅拌至完全溶解,即得。
所述海洋鱼皮胶原低聚肽的制备方法与实施例3类似。
与实施例3的不同在于,步骤S3未进行均质处理。
对比例4、一种海洋鱼皮胶原低聚肽的制备方法
所述海洋鱼皮胶原低聚肽的制备方法,包括以下步骤:
S1将深海三文鱼皮用水清洗干净,剪碎成0.2cm×0.2cm的小块,加入正己烷进行脱脂处理,正己烷的加入量为鱼皮质量的7倍,脱脂温度为6℃,脱脂时间为12h,过滤,用水清洗干净,得脱脂后鱼皮,向脱脂后鱼皮中加入质量浓度为3%的氯化钠水溶液,氯化钠水溶液的加入量为脱脂后鱼皮质量的12倍,于6℃浸泡7h,浸泡过程中以120r/min的速度搅拌,过滤,得预处理后鱼皮;
S2向步骤S1所得预处理后鱼皮中加入除味液,除味液的加入量为预处理后鱼皮质量的5倍,搅拌均匀,放置1.5h,进行蒸汽处理,常压下于蒸汽上蒸18min,蒸汽温度为100℃,得蒸汽处理后鱼皮,将蒸汽处理后鱼皮冷冻干燥,将冷冻干燥后鱼皮粉碎,过50目筛,得鱼皮粉;
S3向步骤S2所得鱼皮粉中加水,水的加入量为鱼皮粉质量的11倍,均质,均质压力为25Mpa,均质时间为2min,得均质物料;
S4调节步骤S3所得均质物料的pH至6.5,加热至55℃,在120r/min的搅拌速度下加入木瓜蛋白酶,木瓜蛋白酶的加入量为均质物料质量的0.7‰,酶解时间为1h,酶解结束后升温至85℃灭酶13min,冷却至25℃,过滤,得酶解液;
S5采用截留分子量为1000Da的超滤膜对步骤S4所得酶解液进行超滤处理,超滤的操作压力为0.3MPa,超滤时间为15min,收集截留液,对所得截留液进行电渗析处理,电渗析过程中恒定电流2A,流量25L/min,处理时间15min,将脱盐后的肽液浓缩,干燥,即得。
所述步骤S2所述除味液的制备方法为:取质量比为3:7:10的乳酸、儿茶素和β-环糊精,混合,加入乳酸、儿茶素和β-环糊精总质量6倍的水,搅拌至完全溶解,即得。
所述海洋鱼皮胶原低聚肽的制备方法与实施例3类似。
与实施例3的不同在于,步骤S4未加入氨肽酶。
对比例5、一种含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液
所述含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液,包括以下组分及其质量百分数:
对比例1制得海洋鱼皮胶原低聚肽6%,菊粉8%,沙棘果粉4%,蓝莓浓缩汁6%,雪莲培养物0.1%,野樱莓浓缩汁1%,鲣鱼弹性蛋白肽0.2%,N-乙酰神经氨酸0.2%,蛹虫草粉0.3%,γ-氨基丁酸0.2%,蜂蜜10%,纯化水64%。
所述含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液的制备方法与实施例4类似。
对比例6、一种含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液
所述含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液,包括以下组分及其质量百分数:
对比例3制得海洋鱼皮胶原低聚肽6%,菊粉8%,沙棘果粉4%,蓝莓浓缩汁6%,雪莲培养物0.1%,野樱莓浓缩汁1%,鲣鱼弹性蛋白肽0.2%,N-乙酰神经氨酸0.2%,蛹虫草粉0.3%,γ-氨基丁酸0.2%,蜂蜜10%,纯化水64%。
所述含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液的制备方法与实施例4类似。
对比例7、一种含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液
所述含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液,包括以下组分及其质量百分数:
对比例4制得海洋鱼皮胶原低聚肽6%,菊粉8%,沙棘果粉4%,蓝莓浓缩汁6%,雪莲培养物0.1%,野樱莓浓缩汁1%,鲣鱼弹性蛋白肽0.2%,N-乙酰神经氨酸0.2%,蛹虫草粉0.3%,γ-氨基丁酸0.2%,蜂蜜10%,纯化水64%。
所述含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液的制备方法与实施例4类似。
试验例一、口感评价
1、试验材料:实施例3、对比例1-2制备的海洋鱼皮胶原低聚肽。
2、试验方法:
挑选10位经验丰富的评估受试者对制备的海洋鱼皮胶原低聚肽的口感进行评分,主要以有无鱼腥味为评价指标,10分制,评分越高,口感越好,以10位评估受试者的平均分计。
3、口感评价结果见表1。
表1:口感评价结果
评价指标 | 实施例3 | 对比例1 | 对比例2 |
口感评分 | 9.8 | 8.7 | 9.2 |
由表1可以看出,与对比例1-2相比,本发明实施例3制备的海洋鱼皮胶原低聚肽的口感评分较高,因此,本发明明显改善了所得产品的口感。
试验例二、抗疲劳试验
1、试验材料:实施例6、对比例5、对比例6、对比例7制备的含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液。
2、试验对象:健康NIH小鼠100只,体重20g,雌雄各半。
3、试验方法:
将100只小鼠随机分成五组,每组20只,雌雄各半,分别为空白对照组、实施例6组、对比例5组、对比例6组、对比例7组。空白对照组每天给小鼠摄入基础饲料,实施例6组、对比例5组、对比例6组、对比例7组分别在基础饲料中添加实施例6、对比例5、对比例6、对比例7制备得到的含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液,剂量1.25g/kg,连续喂养30天。末次灌胃1h后,对各组小鼠分别称重,然后每只尾部系体重5%的负重,放入水深40cm、水温27℃水池中进行游泳测验,记录小鼠在水中持续游泳的时间(至小鼠头部沉入水面以下7s后不再上浮为准)。
4、试验结果:
试验结果如表2所示。
表2:抗疲劳试验结果
由表2可以看出,与空白对照组相比,饲喂含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液的小鼠的游泳时间有了明显提高。与对比例5组、对比例6组、对比例7组相比,实施例6组的小鼠的游泳时间明显提高。由此可见,本发明提供的含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液具有显著的抗疲劳作用。
Claims (2)
1.一种含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液,其特征在于,包括以下组分及其质量百分数:
海洋鱼皮胶原低聚肽4-7%,菊粉6-10%,沙棘果粉3-5%,蓝莓浓缩汁4-7%,雪莲培养物0.05-0.15%,野樱莓浓缩汁0.4-1.2%,鲣鱼弹性蛋白肽0.1-0.3%,N-乙酰神经氨酸0.1-0.3%,蛹虫草粉0.2-0.5%,γ-氨基丁酸0.1-0.3%,蜂蜜9-12%,纯化水56.25-73.05%;
所述海洋鱼皮胶原低聚肽的制备方法,包括以下步骤:
S1将鱼皮用水清洗干净,剪碎成小块,加入正己烷进行脱脂处理,脱脂温度为4-10℃,脱脂时间为10-15h,过滤,用水清洗干净,得脱脂后鱼皮,向脱脂后鱼皮中加入质量浓度为3%的氯化钠水溶液,于4-10℃浸泡5-8h,浸泡过程中以100-150r/min的速度搅拌,过滤,得预处理后鱼皮;
S2向步骤S1所得预处理后鱼皮中加入除味液,搅拌均匀,放置1-2h,进行蒸汽处理,得蒸汽处理后鱼皮,将蒸汽处理后鱼皮冷冻干燥,将冷冻干燥后鱼皮粉碎,过50目筛,得鱼皮粉;
S3向步骤S2所得鱼皮粉中加水,水的加入量为鱼皮粉质量的10-13倍,均质,得均质物料;
S4调节步骤S3所得均质物料的pH至6-7,加热至50-60℃,在100-150r/min的搅拌速度下加入复合酶,复合酶的加入量为均质物料质量的0.5-1‰,酶解时间为0.5-2h,酶解结束后升温至 80-90℃灭酶 10-15min,冷却至25℃,过滤,得酶解液;
S5采用截留分子量为1000Da的超滤膜对步骤S4所得酶解液进行超滤处理,收集截留液,对所得截留液进行电渗析处理,将脱盐后的肽液浓缩,干燥,即得;
所述步骤S2所述除味液的制备方法为:取乳酸、儿茶素和β-环糊精,混合,加入乳酸、儿茶素和β-环糊精总质量6倍的水,搅拌至完全溶解,即得;
乳酸、儿茶素和β-环糊精的质量比为2-4:6-7:9-12;
所述步骤S2所述蒸汽处理的具体操作为:常压下于蒸汽上蒸15-20min,蒸汽温度为100℃;
所述步骤S4所述复合酶由木瓜蛋白酶和氨肽酶按质量比6-10:2-3组成;
所述步骤S5所述超滤处理的具体操作为:超滤的操作压力为0.2-0.4MPa,超滤时间为10-20min;
所述步骤S5所述电渗析处理的具体操作为:电渗析过程中恒定电流1-3A,流量20-30L/min,处理时间10-20min。
2.根据权利要求1所述的含有海洋鱼皮胶原低聚肽的口服液,其特征在于,包括以下组分及其质量百分数:
海洋鱼皮胶原低聚肽6%,菊粉8%,沙棘果粉4%,蓝莓浓缩汁6%,雪莲培养物0.1%,野樱莓浓缩汁1%,鲣鱼弹性蛋白肽0.2%,N-乙酰神经氨酸0.2%,蛹虫草粉0.3%,γ-氨基丁酸0.2%,蜂蜜10%,纯化水64%。
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