CN104152517A - 一种从海马提取短肽的方法 - Google Patents
一种从海马提取短肽的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104152517A CN104152517A CN201310180051.2A CN201310180051A CN104152517A CN 104152517 A CN104152517 A CN 104152517A CN 201310180051 A CN201310180051 A CN 201310180051A CN 104152517 A CN104152517 A CN 104152517A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- hippocampus
- protein
- small peptide
- crude product
- hippocampal
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
本发明涉及一种从海马提取短肽的方法，该方法包括：提取海马蛋白粗品、从海马蛋白粗品中提取海马短肽。本发明的短肽提取率高达70%；成本低、操作简单、反应条件温和且环境友好。
Description
技术领域
本发明涉及一种提取短肽的方法，更具体的说，涉及一种从海马提取短肽的方法。
背景技术
海马为海龙科动物，性温、味甘，是我国名贵的强壮补益中药材。中国历版药典收藏的海马药材有5个品种：线纹海马、刺海马、大海马、三斑海马和小海马的干燥体，具有温肾壮阳，散结消肿的功效。海马具有较高的营养价值，蛋白质含量高达70%，含有7种氨基酸，七种7种为人体必需氨基酸；还含有大量的DHA，是前列腺和精子的主要物质基础；海马含有丰富的磷脂与补益作用有关，海马中Mn、Zn含量高与补肾壮阳作用吻合，并富含Fe，与其滋补肝肾补血生精作用相关。现代药理学研究证明，海马具有很多方面的药理作用。
短肽在胃肠道中消化吸收比蛋白质、游离氨基酸消化吸收均好，速度快，而且短肽比蛋白质在肠胃滞留的时间短，胃下垂感与腹部涨满感频度低，对小肠吸收面积减少。短肽在生命过程中所起的作用比氨基酸更加积极，人体内蛋白质合成分解代谢过程。作为蛋白质补充方式，对健康人而言，主要是从膳食的蛋白质中获得各种短肽和L-氨基酸，提供体内合成激素、酶、蛋白质。
发明内容
本发明的目的在于提供一种从海马提取短肽的方法。
为实现本发明的目的，本发明的技术方案如下：
一种从海马提取短肽的方法，该方法包括以下步骤：
（1）提取海马蛋白粗品
1）将海马内脏除去，清洗干净，晒干粉碎备用；
2）将粉碎的海马放入15倍海马体积的5%的氯化钠溶液中，于3℃连续搅拌20～50小时，用尼龙纱过滤，弃去滤液；滤渣用15倍海马体积的蒸馏水洗涤，重复三次，即得到去除非蛋白的海马；
3）向步骤2）得到去除非蛋白的海马中加入海马质量10倍的蒸馏水和海马质量3～8倍的异丙醇，在45℃下加热6分钟，以脱去脂肪；
4）回收含异丙醇的废液，并分馏回收用于3）的脱脂；
5）于脱脂后的海马中加入5倍蒸馏水，且在60～90℃加热处理10～60分钟，冷却至60℃以下，每100克海马加5克酶酶解40～50小时；
6）将5）酶解后的物料离心，上层溶液中和至中性后，喷雾干燥得蛋白粗品。
分离出的沉淀加入到5）的物料中。
（2）从海马蛋白粗品中提取海马短肽
1）将由步骤（1）提取的海马蛋白粗品加入12倍海马蛋白粗品体积的水成pH值7.0～8.0，在常温下搅拌20分钟；
2）用7500转/分的蝶式分离机分离，得到含有蛋白浆液和细纤维；
3）将含有蛋白的浆液在反应器中与粉状含量90-95%海马分离蛋白调至浓度为6%的蛋白浆液；
4）采用色埋法和交联法将蛋白酶Ⅰ、Ⅱ固定，制成直径1-5mm的颗粒，成为固定化酶，将其装入间歇或连续式反应器中，海马蛋白浆液以1-5倍床体积/小时流进反应器，反应温度50-60℃，pH值控制在8-10，流出液为海马蛋白的水解液；
5）将海马蛋白水解液通过超滤膜过滤，膜下物为MW小于2000的海马短肽超滤液，膜上物为MW大于2000的海马蛋白、海马肽的混合固形物；
6）将混合固形物返回海马蛋白浆液中重新调浆，继续水解；
7）将海马短肽超滤液通过大孔强酸性阳离子柱脱盐，脱盐后料液电解率为10-20us/cm2；
8）脱盐后的料液浓缩至固形物9-11%，经活性炭脱色，炭液比为0.5-1:10，pH值为4-7，温度为30-70℃；
9）脱色后的料液经瞬间高温灭菌喷雾干燥得出精制海马短肽。
在本发明的一优选实施例中，所述步骤（1）中的步骤5）中的酶为酸性蛋白酶、AS.1398蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、风味酶或中性蛋白酶中的一种或两种以上的混合物。
本发明具有以下优点：1、短肽的提取率高达70%；
2、本发明成本低、操作简单、反应条件温和且环境友好。
具体实施方式
实施例1
海马提取短肽的步骤
（1）提取海马蛋白粗品
1）将海马内脏除去，清洗干净，晒干粉碎备用；
2）将粉碎的海马放入15倍海马体积的5%的氯化钠溶液中，于3℃连续搅拌30小时，用尼龙纱过滤，弃去滤液；滤渣用15倍海马体积的蒸馏水洗涤，重复三次，即得到去除非蛋白的海马；
3）向步骤2）得到去除非蛋白的海马中加入海马质量10倍的蒸馏水和海马质量5倍的异丙醇，在45℃下加热6分钟，以脱去脂肪；
4）回收含异丙醇的废液，并分馏回收用于3）的脱脂；
5）于脱脂后的海马中加入5倍蒸馏水，且在70℃加热处理20分钟，冷却至60℃以下，每100克海马加5克AS.1398蛋白酶酶解45小时；
6）将5）酶解后的物料离心，上层溶液中和至中性后，喷雾干燥得蛋白粗品。
分离出的沉淀加入到5）的物料中。
（2）从海马蛋白粗品中提取海马短肽
1）将由步骤（1）提取的海马蛋白粗品加入12倍海马蛋白粗品体积的水成pH值7.0～8.0，在常温下搅拌20分钟；
2）用7500转/分的蝶式分离机分离，得到含有蛋白浆液和细纤维；
3）将含有蛋白的浆液在反应器中与粉状含量90-95%海马分离蛋白调至浓度为6%的蛋白浆液；
4）采用色埋法和交联法将蛋白酶Ⅰ、Ⅱ固定，制成直径1-5mm的颗粒，成为固定化酶，将其装入间歇或连续式反应器中，海马蛋白浆液以3倍床体积/小时流进反应器，反应温度50-60℃，pH值控制在8-10，流出液为海马蛋白的水解液；
5）将海马蛋白水解液通过超滤膜（截留MW2000以上）过滤，膜下物为MW小于2000的海马短肽超滤液，膜上物为海马蛋白、海马肽（MW大于2000）的混合固形物；
6）将混合固形物返回海马蛋白浆液中重新调浆，继续水解；
7）将海马短肽超滤液通过大孔强酸性阳离子柱脱盐，脱盐后料液电解率为10-20us/cm2；
8）脱盐后的料液浓缩至固形物9-11%，经活性炭脱色，炭液比为0.5-1:10，pH值为4-7，温度为40℃；
9）脱色后的料液经瞬间高温灭菌（135℃5s）喷雾干燥得出精制海马短肽。
实施例2
海马提取短肽的步骤
（1）提取海马蛋白粗品
1）将海马内脏除去，清洗干净，晒干粉碎备用；
2）将粉碎的海马放入15倍海马体积的5%的氯化钠溶液中，于3℃连续搅拌40小时，用尼龙纱过滤，弃去滤液；滤渣用15倍海马体积的蒸馏水洗涤，重复三次，即得到去除非蛋白的海马；
3）向步骤2）得到去除非蛋白的海马中加入海马质量10倍的蒸馏水和海马质量5倍的异丙醇，在45℃下加热6分钟，以脱去脂肪；
4）回收含异丙醇的废液，并分馏回收用于3）的脱脂；
5）于脱脂后的海马中加入5倍蒸馏水，且在80℃加热处理20分钟，冷却至60℃以下，每100克海马加5克AS.1398蛋白酶和风味酶，两者以1:1（w/w）组成的复合酶，酶解45小时；
6）将5）酶解后的物料离心，上层溶液中和至中性后，喷雾干燥得蛋白粗品。
分离出的沉淀加入到5）的物料中。
（2）从海马蛋白粗品中提取海马短肽
1）将由步骤（1）提取的海马蛋白粗品加入12倍海马蛋白粗品体积的水成pH值7.0～8.0，在常温下搅拌20分钟；
2）用7500转/分的蝶式分离机分离，得到含有蛋白浆液和细纤维；
3）将含有蛋白的浆液在反应器中与粉状含量90-95%海马分离蛋白调至浓度为6%的蛋白浆液；
4）采用色埋法和交联法将蛋白酶Ⅰ、Ⅱ固定，制成直径1-5mm的颗粒，成为固定化酶，将其装入间歇或连续式反应器中，海马蛋白浆液以2倍床体积/小时流进反应器，反应温度50-60℃，pH值控制在8-10，流出液为海马蛋白的水解液；
5）将海马蛋白水解液通过超滤膜（截留MW2000以上）过滤，膜下物为MW小于2000的海马短肽超滤液，膜上物为海马蛋白、海马肽（MW大于2000）的混合固形物；
6）将混合固形物返回海马蛋白浆液中重新调浆，继续水解；
7）将海马短肽超滤液通过大孔强酸性阳离子柱脱盐，脱盐后料液电解率为10-20us/cm2；
8）脱盐后的料液浓缩至固形物9-11%，经活性炭脱色，炭液比为0.5-1:10，pH值为4-7，温度为50℃；
9）脱色后的料液经瞬间高温灭菌（135℃5s）喷雾干燥得出精制海马短肽。
实施例3
海马提取短肽的步骤
（1）提取海马蛋白粗品
1）将海马内脏除去，清洗干净，晒干粉碎备用；
2）将粉碎的海马放入15倍海马体积的5%的氯化钠溶液中，于3℃连续搅拌35小时，用尼龙纱过滤，弃去滤液；滤渣用15倍海马体积的蒸馏水洗涤，重复三次，即得到去除非蛋白的海马；
3）向步骤2）得到去除非蛋白的海马中加入海马质量10倍的蒸馏水和海马质量4倍的异丙醇，在45℃下加热6分钟，以脱去脂肪；
4）回收含异丙醇的废液，并分馏回收用于3）的脱脂；
5）于脱脂后的海马中加入5倍蒸馏水，且在65℃加热处理13分钟，冷却至60℃以下，每100克海马加5克酸性蛋白酶酶解45小时；
6）将5）酶解后的物料离心，上层溶液中和至中性后，喷雾干燥得蛋白粗品。
分离出的沉淀加入到5）的物料中。
（2）从海马蛋白粗品中提取海马短肽
1）将由步骤（1）提取的海马蛋白粗品加入12倍海马蛋白粗品体积的水成pH值7.0～8.0，在常温下搅拌20分钟；
2）用7500转/分的蝶式分离机分离，得到含有蛋白浆液和细纤维；
3）将含有蛋白的浆液在反应器中与粉状含量90-95%海马分离蛋白调至浓度为6%的蛋白浆液；
4）采用色埋法和交联法将蛋白酶Ⅰ、Ⅱ固定，制成直径5mm的颗粒，成为固定化酶，将其装入间歇或连续式反应器中，海马蛋白浆液以1-5倍床体积/小时流进反应器，反应温度50-60℃，pH值控制在8-10，流出液为海马蛋白的水解液；
5）将海马蛋白水解液通过超滤膜（截留MW2000以上）过滤，膜下物为MW小于2000的海马短肽超滤液，膜上物为海马蛋白、海马肽（MW大于2000）的混合固形物；
6）将混合固形物返回海马蛋白浆液中重新调浆，继续水解；
7）将海马短肽超滤液通过大孔强酸性阳离子柱脱盐，脱盐后料液电解率为10-20us/cm2；
8）脱盐后的料液浓缩至固形物9-11%，经活性炭脱色，炭液比为0.5-1:10，pH值为4-7，温度为65℃；
9）脱色后的料液经瞬间高温灭菌（135℃5s）喷雾干燥得出精制海马短肽。
Claims (2)
1.一种从海马提取短肽的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
（1）提取海马蛋白粗品
1）将海马内脏除去，清洗干净，晒干粉碎备用；
2）将粉碎的海马放入15倍海马体积的5%的氯化钠溶液中，于3℃连续搅拌20～50小时，用尼龙纱过滤，弃去滤液；滤渣用15倍海马体积的蒸馏水洗涤，重复三次，即得到去除非蛋白的海马；
3）向步骤2）得到去除非蛋白的海马中加入海马质量10倍的蒸馏水和海马质量3～8倍的异丙醇，在45℃下加热6分钟，以脱去脂肪；
4）回收含异丙醇的废液，并分馏回收用于3）的脱脂；
5）于脱脂后的海马中加入5倍蒸馏水，且在60～90℃加热处理10～60分钟，冷却至60℃以下，每100克海马加5克酶酶解40～50小时；
6）将5）酶解后的物料离心，上层溶液中和至中性后，喷雾干燥得蛋白粗品。
分离出的沉淀加入到5）的物料中。
（2）从海马蛋白粗品中提取海马短肽
1）将由步骤（1）提取的海马蛋白粗品加入12倍海马蛋白粗品体积的水成pH值7.0～8.0，在常温下搅拌20分钟；
2）用7500转/分的蝶式分离机分离，得到含有蛋白浆液和细纤维；
3）将含有蛋白的浆液在反应器中与粉状含量90-95%海马分离蛋白调至浓度为6%的蛋白浆液；
4）采用色埋法和交联法将蛋白酶Ⅰ、Ⅱ固定，制成直径1-5mm的颗粒，成为固定化酶，将其装入间歇或连续式反应器中，海马蛋白浆液以1-5倍床体积/小时流进反应器，反应温度50-60℃，pH值控制在8-10，流出液为海马蛋白的水解液；
5）将海马蛋白水解液通过超滤膜过滤，膜下物为MW小于2000的海马短肽超滤液，膜上物为MW大于2000的海马蛋白、海马肽的混合固形物；
6）将混合固形物返回海马蛋白浆液中重新调浆，继续水解；
7）将海马短肽超滤液通过大孔强酸性阳离子柱脱盐，脱盐后料液电解率为10-20us/cm2；
8）脱盐后的料液浓缩至固形物9-11%，经活性炭脱色，炭液比为0.5-1:10，pH值为4-7，温度为30-70℃；
9）脱色后的料液经瞬间高温灭菌喷雾干燥得出精制海马短肽。
2.根据权利要求1所述的从海马提取短肽的方法，其特征在于，所述步骤（1）中的步骤5）中的酶为酸性蛋白酶、AS.1398蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、风味酶或中性蛋白酶中的一种或两种以上的混合物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201310180051.2A CN104152517A (zh) | 2013-05-15 | 2013-05-15 | 一种从海马提取短肽的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201310180051.2A CN104152517A (zh) | 2013-05-15 | 2013-05-15 | 一种从海马提取短肽的方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN104152517A true CN104152517A (zh) | 2014-11-19 |
Family
ID=51878143
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201310180051.2A Pending CN104152517A (zh) | 2013-05-15 | 2013-05-15 | 一种从海马提取短肽的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN104152517A (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105200108A (zh) * | 2015-03-09 | 2015-12-30 | 宁波大学 | 一种海马血管紧张素转化酶抑制肽的制备方法 |
| CN107630062A (zh) * | 2017-11-08 | 2018-01-26 | 海南大学 | 一种线纹海马ace抑制肽的制备方法 |
| CN114478687A (zh) * | 2022-04-01 | 2022-05-13 | 青岛浩然海洋科技有限公司 | 一种海马蛋白粗提取工艺 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1329103A (zh) * | 2001-08-07 | 2002-01-02 | 姜浩奎 | 高、低温豆粕提取蛋白、短肽、核酸、异黄酮、皂甙、低聚糖的方法 |
| CN101926826A (zh) * | 2010-09-11 | 2010-12-29 | 海南壹号药业有限公司 | 一种海马有效成分的提取方法 |
| CN101979654A (zh) * | 2010-10-20 | 2011-02-23 | 江西科技师范学院 | 一种从鱼皮中提取胶原蛋白的方法 |
| CN103923201A (zh) * | 2014-04-01 | 2014-07-16 | 宁波大学 | 一种海马活性糖蛋白的制备方法 |
-
2013
- 2013-05-15 CN CN201310180051.2A patent/CN104152517A/zh active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1329103A (zh) * | 2001-08-07 | 2002-01-02 | 姜浩奎 | 高、低温豆粕提取蛋白、短肽、核酸、异黄酮、皂甙、低聚糖的方法 |
| CN101926826A (zh) * | 2010-09-11 | 2010-12-29 | 海南壹号药业有限公司 | 一种海马有效成分的提取方法 |
| CN101979654A (zh) * | 2010-10-20 | 2011-02-23 | 江西科技师范学院 | 一种从鱼皮中提取胶原蛋白的方法 |
| CN103923201A (zh) * | 2014-04-01 | 2014-07-16 | 宁波大学 | 一种海马活性糖蛋白的制备方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 张前进: "海龙海马的化学成分和药理活性", 《陕西中医》 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105200108A (zh) * | 2015-03-09 | 2015-12-30 | 宁波大学 | 一种海马血管紧张素转化酶抑制肽的制备方法 |
| CN107630062A (zh) * | 2017-11-08 | 2018-01-26 | 海南大学 | 一种线纹海马ace抑制肽的制备方法 |
| CN114478687A (zh) * | 2022-04-01 | 2022-05-13 | 青岛浩然海洋科技有限公司 | 一种海马蛋白粗提取工艺 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102533914B (zh) | 一种高纯度无腥异味的鱼胶原蛋白肽及其制备方法 | |
| CN101643767B (zh) | 一种从杏仁粕中制备杏仁肽的方法 | |
| CN101810354B (zh) | 一种鳄鱼饮液及其生产工艺 | |
| CN101948897B (zh) | 从文冠果中提取文冠果油、文冠果多糖、文冠果水解蛋白肽的方法 | |
| CN102766670A (zh) | 一种牡蛎多肽干粉的制备方法 | |
| CN102994602B (zh) | 一种高f值复合低聚肽的制备方法 | |
| CN100497569C (zh) | 扇贝内脏活性成分的制备方法 | |
| CN103333940A (zh) | 利用带鱼制备二肽基肽酶iv抑制肽的方法 | |
| CN105341933A (zh) | 一种海参牡蛎酶解口服液及其制备方法 | |
| CN109486890A (zh) | 一种从粗鱼蛋白制备鱼蛋白混合肽的工艺 | |
| CN109123036A (zh) | 大豆-骨髓多肽组合物及应用 | |
| CN107674905A (zh) | 螺旋藻活性肽、组合物及制备方法 | |
| CN101965897B (zh) | 贻贝分离蛋白的加工方法 | |
| CN104152517A (zh) | 一种从海马提取短肽的方法 | |
| CN107647385A (zh) | 一种鱼骨粉和蛋白肽混合物咀嚼片的制备方法 | |
| CN106119328A (zh) | 一种适合工业化生产的优质虾低聚肽粉制备方法 | |
| JP3185985U (ja) | サツマイモのタンパク質精製抽出装置 | |
| CN109439716B (zh) | 一种白鲢鱼蛋白肽的制备方法 | |
| CN101130801A (zh) | 一种降血压活性肽产品的制备 | |
| CN103349151A (zh) | 从猪小肠粘膜中提取多肽蛋白粉的方法 | |
| CN107893095A (zh) | 一种海洋来源蛋白制备高f值寡肽的方法 | |
| CN106834398A (zh) | 一种蚕蛹活性蛋白肽的制备工艺 | |
| CN107760749A (zh) | 一种水蛭活性肽、组合物及制备方法 | |
| CN106636267A (zh) | 一种小分子参蚝多肽的提取方法 | |
| CN207136152U (zh) | 一种核桃低聚肽与大枣多糖的复合物的生产系统 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20141119 |