CN100497569C - 扇贝内脏活性成分的制备方法 - Google Patents
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Abstract
一种扇贝内脏活性成分的制备方法，其实施部分包括原料处理，装料、控制萃取温度、压力以及CO2流量等进行超临界萃取扇贝内脏脂肪，收集脂肪后将脱脂后的扇贝内脏再进行粉碎，酶解，醇沉，干燥，纯化等步骤提取扇贝内脏多糖。超临界CO2萃取技术是近年来迅速兴起的化工分离新技术，在食品、香料、医药、化工等领域得到了广泛应用。扇贝内脏中不仅含有丰富的不饱和脂肪酸还含有丰富的多糖物质，本发明用超临界的方法提取扇贝内脏脂肪并用脱脂后的扇贝内脏提取多糖，变废为宝使扇贝内脏得到了充分的利用。
Description
技术领域 本发明涉及一种方法，特别是海产品加工废弃物的综合利用的方法。
背景技术 扇贝味道鲜美、营养丰富，富含钙、磷、锌、硒等微量元素和人体必需的氨基酸。目前对扇贝肉的加工利用报道很多，但其加工的大量废弃物扇贝内脏却往往被人忽视。研究表明扇贝内脏中不仅含有丰富的不饱和脂肪酸还含有丰富的多糖物质，但一直未被重视和研究。
中国专利申请200510047410(CN1749281A)中公开了虾夷扇贝多糖的提取工艺，其中原料是虾夷扇贝去壳的全部肉体组织(包括扇贝柱、腮、性腺、内脏、裙边等)，也可以是扇贝柱、“下脚料”(腮、性腺、内脏、裙边等的全部或部分)或扇贝柱和部分“下脚料”。虽然该工艺可以提取扇贝内脏中的多糖，但是，提取的结果存在多糖收率低、纯度不好等缺点，另外，内脏中的脂肪也白白浪费。
研究表明扇贝内脏脂肪中含有丰富的脂肪酸，其中多不饱和脂肪酸EPA含量较高，作为生物体的调节因子，EPA具有降低血小板凝集的作用，对脑血栓和动脉硬化也有防治效果。
关于扇贝养殖技术方面的研究及报道很多，但有关其营养价值方面的研究及报道甚少。特别是关于利用超临界技术提取扇贝内脏脂肪以及充分利用脱脂后的扇贝内脏再提取多糖的方法尚未见报道。
为了克服现有技术的不足，本发明人意外地发现，在提取扇贝内脏多糖前用超临界萃取方法，萃取扇贝内脏的脂肪，不但提高了多糖的产率和纯度，而且所提取的脂肪本身就是非常好的营养品，还可以用来进一步提取多不饱和脂肪酸。
发明内容 本发明是以扇贝内脏为原料，采用现代生物技术和食品高新技术萃取扇贝内脏脂肪并充分利用脱脂后的原料提取多糖的方法。
具体地讲，本发明涉及一种扇贝内脏活性成分的制备方法，其特征在于包括原料干燥、粉碎、超临界萃取脂肪、酶解、醇沉、干燥、纯化等步骤，其中所述活性成分是扇贝内脏的多糖和脂肪。
一、扇贝内脏脂肪的超临界萃取
1、原料及处理：取新鲜扇贝内脏在冷冻干燥机中保持物料温度在40℃以下，真空冻干3000min，使物料含水量达到4％以下。之后用粉碎机粉碎至20目。
2、扇贝脂肪的萃取方法
萃取工艺流程：装料---控制萃取温度---控制萃取压力---控制CO2流量---萃取---控制分离温度与压力---分离
具体实施方法：打开超临界萃取设备，设定萃取温度为30～70℃等待其升温，并同时往萃取釜中加入约占萃取釜体积1/3的物料。待萃取温度达到设定值以后，控制萃取压力为20～40Mpa、CO2流量为10～40L/h，超临界萃取扇贝内脏脂肪，萃取45～120min后，在分离温度为30～40℃和分离压力为6～10Mpa的条件下分离出脂肪，并收集。
二、萃取脂肪后的扇贝内脏提取多糖的方法
萃取脂肪后的扇贝内脏提取多糖的方法可以按照CN1749281A中公开了虾夷扇贝多糖的提取工艺进行。
也可以按照如下方法进行：
将萃取脂肪后的扇贝内脏从萃取釜中取出，加入10～60倍体积的pH值为6～8的缓冲溶液，并加入质量分数为0.1％～1％的酶活力为90～100万单位/克的木瓜蛋白酶，于50～80℃水域中酶解1～8个小时。之后迅速升温至90℃灭酶。在4000n/min的条件下高速离心10min，得到的沉淀物为不溶水解物。向离心所得母液缓缓加入2～6倍体积的质量分数为95％的乙醇，此时不断搅拌，并于10℃以下温度过夜。之后离心，所得上清液可进行减压蒸馏，不仅可回收乙醇，还能获得扇贝内脏水解产物，收集离心的沉淀物，于40～70℃干燥或真空干燥，得到的产物即为扇贝内脏多糖粗品。将多糖溶解在10～50倍质量的水里，离心除去不溶物，在上清液中加入固体K2CO3，使其在溶液中浓度为0.5～4mol/L，10℃以下冷藏过夜。10℃以下收集沉淀。再用5～25倍质量的水将其溶解，用碱溶液调pH至9～11，保持45～55℃滴加H2O2脱色至多糖水解液呈浅黄色为终点。冷却后离心除去不溶物，清液冷却至4℃以下，用酸调pH至1.5～2.5，离心除沉淀，清液中加入固体K2CO3，使其在溶液中浓度达0.5～4mol/L，冷藏过夜，10℃以下收集沉淀，用乙醇洗涤，丙酮脱水，干燥，即得扇贝内脏多糖纯品。
本发明具有如下优点：
1.本发明用超临界的方法提取扇贝内脏脂肪并用脱脂后的扇贝内脏提取多糖，变废为宝，使扇贝内脏得到了充分的利用。
2.本发明采用超临界萃取的方法提取扇贝内脏脂肪，比索氏提取法提高了9％的得率。
3.本发明采用超临界的方法萃取脂肪，排除了遇氧氧化和见光反应的可能性，使脂肪能够保持其自然风味。
具体实施方式
例1 取新鲜扇贝内脏在冷冻干燥机中保持物料温度在40℃以下，真空冻干3000min，使物料含水量达到4％以下。之后用粉碎机粉碎至20目。打开超临界萃取设备，设定萃取温度为40℃等待其升温，并同时往萃取釜中加入30g物料。待萃取温度达到设定值以后，控制萃取压力为25Mpa、CO2流量为20L/h，超临界萃取扇贝内脏脂肪，萃取60min以后，在分离温度为30℃和分离压力为7Mpa的条件下分离出脂肪并收集。将脱脂后的扇贝内脏从萃取釜中取出，并加入20倍体积的pH值为7的缓冲溶液，再加入质量分数为0.1％的木瓜蛋白酶，在60℃水浴中酶解1个小时。之后迅速升温至90℃灭酶。在4000n/min的条件下高速离心10min，得到的沉淀物为不溶水解物。向离心所得母液缓缓加入3倍体积的质量分数为95％的乙醇，此时不断搅拌，并于10℃以下温度过夜。之后离心，所得上清液可进行减压蒸馏，不仅可回收乙醇，还能获得扇贝内脏水解产物，收集离心的沉淀物，并依次用90％的乙醇洗涤、丙酮脱水，于50℃干燥，得到的产物即为扇贝内脏多糖粗品。将粗多糖溶解在10倍质量的水里，离心除去不溶物，在上清液中加入固体K2CO3，使其在溶液中浓度为0.5mol/L，10℃以下冷藏过夜。10℃以下收集沉淀。再用5倍质量的水将其溶解，用碱溶液调pH至9，保持45℃滴加H2O2脱色至多糖水解液呈浅黄色为终点。冷却后离心除去不溶物，清液冷却至4℃以下，用酸调pH至1.5，离心除沉淀，清液中加入固体K2CO3，使其在溶液中浓度达0.5mol/L，冷藏过夜，10℃以下收集沉淀，用乙醇洗涤，丙酮脱水，干燥。即得扇贝内脏多糖纯品。
例2 取新鲜扇贝内脏在冷冻干燥机中保持物料温度在40℃以下，真空冻干3000min，使物料含水量达到4％以下。之后用粉碎机粉碎至20目。打开超临界萃取设备，设定萃取温度为50℃等待其升温，并同时往萃取釜中加入35g物料。待萃取温度达到设定值以后，控制萃取压力为30Mpa、CO2流量为25L/h，超临界萃取扇贝内脏脂肪，萃取60min以后，在分离温度为35℃和分离压力为8Mpa的条件下分离出脂肪并收集。将脱脂后的扇贝内脏从萃取釜中取出，并加入30倍体积的pH值为8的缓冲溶液，再加入质量分数为0.5％的木瓜蛋白酶，在60℃水浴中酶解2个小时。之后迅速升温至90℃灭酶。在4000n/min的条件下高速离心10min，得到的沉淀物为不溶水解物。向离心所得母液缓缓加入3倍体积的质量分数为95％的乙醇，此时不断搅拌，并于10℃以下温度过夜。之后离心，所得上清液可进行减压蒸馏，不仅可回收乙醇，还能获得扇贝内脏水解产物，收集离心的沉淀物，并依次用90％的乙醇洗涤、丙酮脱水，于50℃干燥，得到的产物即为扇贝内脏多糖粗品。将粗多糖溶解在20倍质量的水里，离心除去不溶物，在上清液中加入固体
使其在溶液中浓度为0.5mol/L，10℃以下冷藏过夜。10℃以下收集沉淀。再用10倍质量的水将其溶解，用碱溶液调pH至9，保持45℃滴加H2O2脱色至多糖水解液呈浅黄色为终点。冷却后离心除去不溶物，清液冷却至4℃以下，用酸调pH至1.5，离心除沉淀，清液中加入固体K2CO3，使其在溶液中浓度达0.5mol/L，冷藏过夜，10℃以下收集沉淀，用乙醇洗涤，丙酮脱水，干燥。即得扇贝内脏多糖纯品。
例3 取新鲜扇贝内脏在冷冻干燥机中保持物料温度在40℃以下，真空冻干3000min，使物料含水量达到4％以下。之后用粉碎机粉碎至20目。打开超临界萃取设备，设定萃取温度为55℃并等待其升温，并同时往萃取釜中加入30g物料。待萃取温度达到设定值以后，控制萃取压力为35Mpa、CO2流量为30L/h，超临界萃取扇贝内脏脂肪，萃取60min以后，在分离温度为35℃和分离压力为9Mpa的条件下分离出脂肪并收集。将脱脂后的扇贝内脏从萃取釜中取出，并加入30倍体积的pH值为8的缓冲溶液，再加入质量分数为0.3％的木瓜蛋白酶，在60℃水域中酶解2个小时。之后迅速升温至90℃灭酶。在4000n/min的条件下高速离心10min，得到的沉淀物为不溶水解物。向离心所得母液缓缓加入4倍体积的质量分数为95％的乙醇，此时不断搅拌，并于10℃以下温度过夜。之后离心，所得上清液可进行减压蒸馏，不仅可回收乙醇，还能获得扇贝内脏水解产物，收集离心的沉淀物，并依次用90％的乙醇洗涤、丙酮脱水，于50℃干燥，得到的产物即为扇贝内脏多糖粗品。将粗多糖溶解在40倍质量的水里，离心除去不溶物，在上清液中加入固体K2CO3，使其在溶液中浓度为0.5mol/L，10℃以下冷藏过夜。10℃以下收集沉淀。再用20倍质量的水将其溶解，用碱溶液调pH至9，保持45℃滴加H2O2脱色至多糖水解液呈浅黄色为终点。冷却后离心除去不溶物，清液冷却至4℃以下，用酸调pH至1.5，离心除沉淀，清液中加入固体K2CO3，使其在溶液中浓度达0.5mol/L，冷藏过夜，10℃以下收集沉淀，用乙醇洗涤，丙酮脱水，干燥。即得扇贝内脏多糖纯品。
Claims (2)
1、一种扇贝内脏活性成分的制备方法，其特征在于包括原料干燥、粉碎、超临界萃取脂肪、酶解、醇沉、干燥、纯化步骤，其中所述活性成分是扇贝内脏脂肪或多糖，
具体操作参数如下：
原料干燥：将扇贝内脏放于冷冻干燥机中保持物料温度在40℃以下，真空冻干3000min，使物料含水量达到4％以下，
粉碎：将原料用粉碎机粉碎至20目以下，
萃取脂肪：控制萃取温度为30～70℃、萃取压力为20-40Mpa、CO2流量为10～40L/h的条件下用超临界CO2萃取设备萃取扇贝内脏脂肪45～120min，之后在分离温度为30～40℃和分离压力为6～10Mpa的条件下分离出脂肪，并收集，得到活性成分扇贝内脏脂肪，
酶解：经超临界萃取脂肪后的扇贝内脏，加入10～60倍体积的pH值为6～8的缓冲溶液，再加入质量分数为0.1％～1％的酶活力为90～100万单位/克的木瓜蛋白酶，在50-80℃水浴中加热1-8小时，灭酶后再将酶解液离心除杂，
醇沉：将除杂后的酶解液加入2～6倍体积的质量分数为95％的乙醇醇沉，
干燥：将醇沉出的粗多糖于40-70℃干燥或真空干燥。
2、如权利要求1所述的扇贝内脏活性成分的制备方法，其特征在于所述纯化工艺包括将粗多糖溶解于10-50倍的质量的水里，离心除去不溶物，在上清液中加入固体K2CO3，使其在溶液中的浓度为0.5-4mol/L，10℃以下冷藏过夜，10℃以下收集沉淀，再用5-25倍质量的水将其溶解，用碱溶液调pH至9-11，保持45-55℃滴加H2O2脱色至多糖水解液呈浅黄色为终点，冷却后离心除去不溶物，清液冷却至4℃以下，用酸调pH至1.5-2.5，离心除沉淀，清液中加入固体K2CO3，使其在溶液中的浓度为0.5-4mol/L，冷藏过夜，10℃以下收集沉淀，用乙醇洗涤，丙酮脱水干燥。
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