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Abstract

本发明涉及生物技术领域,具体公开了一种大鲵蛋白肽的制备方法,包括原料准备步骤、蒸煮步骤、粉碎步骤、高温杀菌步骤、脂肪酶酶解步骤、蛋白酶酶解步骤、灭酶步骤、过滤浓缩步骤、酶解液喷雾干燥步骤:将灭酶步骤中的酶解液通过喷雾干燥机进行干燥,喷雾干燥机的压力控制为0.05‑0.19Mpa,喷雾干燥机进口处温度为180‑230℃,出口处温度为80‑100℃,在出口处收集大鲵蛋白肽粉。本方案能对大鲵中的蛋白肽进行提取,同时降低大鲵蛋白肽的加工成本。

Description

一种大鲵蛋白肽的制备方法
技术领域
本发明属于生物技术领域,具体涉及一种大鲵蛋白肽的制备方法。
背景技术
大鲵俗称“娃娃鱼”,其机体中含有50多种天然生物活性物。这些生物活性物在食用、药物、化妆品、健康食品等方面具有独特的研发价值。大鲵肉中蛋白含量丰富,氨基酸组成全面,符合人体需要量模式,有研究证明,大鲵具有提高免疫力和抗疲劳作用。
酶解多肽因其高蛋白质转化率、高免疫调节能力、多种功能性作用,近年来深受医药、食品行业推崇。
目前生物活性肽的制备方法有多种,常见的是酶解法和微生物法,但是由于酶解法中外用酶成本较高,微生物法制备小肽酶解时间太长,成本较高,很难实现工业化大生产。现有大鲵蛋白肽的工艺的水解度普遍较低,制备过程中多采用微生物对大鲵进行降解形成大鲵蛋白肽,微生物对大鲵的降解速度慢,成本较高。
发明内容
本发明意在提供一种大鲵蛋白肽的制备方法,以对大鲵中的蛋白肽进行提取,同时降低大鲵蛋白肽的加工成本。
为了达到上述目的,本发明的基础方案如下:一种大鲵蛋白肽的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
原料准备步骤:准备若干大鲵,除去大鲵的内脏,获得大鲵骨肉,对大鲵骨肉清洗备用;
蒸煮步骤:通过蒸或煮的方式,对大鲵骨肉进行除去油脂;
粉碎步骤:将蒸煮后的大鲵骨肉的投入粉碎机中,按大鲵骨肉与水的重量比1:1-2向大鲵骨肉中加入水进行浸泡处理;启动粉碎机,将大鲵骨肉粉碎至5-15目,形成鱼浆备用;
高温杀菌步骤:将粉碎步骤中的鱼浆加热到80-110℃,保持20min;然后冷却至50-70℃,形成混合物A;
脂肪酶酶解步骤:将高温杀菌后的的混合物A转移至酶解罐,同时按1:1比例加水,按大鲵重量的0.05%-3%加入脂肪酶,进行酶解,酶解时间1-4h,酶解温度为45-60℃,酶解pH7.0,形成混合物B;
蛋白酶酶解步骤:按原料准备步骤中大鲵骨肉重量的0.1%-3%向混合物B中加入复合酶,复合酶包括中性蛋白酶、风味蛋白酶和木瓜蛋白酶,且中性蛋白酶、风味蛋白酶和木瓜蛋白酶在质量比例为2:1:3,酶解时间2-6h,酶解温度为45-60℃,酶解pH7.0;
灭酶步骤:将蛋白酶酶解步骤中的混合物B加热至90℃,保温5-15min灭酶,形成混合物C;
过滤浓缩步骤:对灭酶步骤中的混合物C进行过滤,滤网孔径为40~100目,形成初滤酶解液和固体物,对初滤酶解液和固体物进行分别收集;然后对初滤酶解液进行浓缩处理,使初滤酶解液的含水量为30-70%,收集酶解液;
酶解液喷雾干燥步骤:将灭酶步骤中的酶解液通过喷雾干燥机进行干燥,喷雾干燥机的压力控制为0.05-0.19Mpa,喷雾干燥机进口处温度为180-230℃,出口处温度为80-100℃,在出口处收集大鲵蛋白肽粉。
基础方案的原理及其优点:1、原料准备步骤中准备的原料大鲵,且对大鲵进行去除内脏和清洗的处理,最终获得大鲵蛋白肽产出量最高的大鲵骨肉,在对后续的步骤中会对大鲵骨肉进行各种加工形成大鲵蛋白肽;其中采用大鲵作为制作蛋白肽,是由于大鲵肉中蛋白含量丰富,氨基酸组成全面,加工形成的大鲵蛋白肽具有高营养价值。
2、蒸煮步骤中,能将大鲵骨肉中的大部分油脂去除,减少脂肪氧化产生的腥味物质,改善最终获得的大鲵蛋白肽的风味,能够提高在后续步骤中大鲵骨肉蛋白质提取效率。
3、将大鲵骨肉进行绞碎,形成鱼浆,该鱼浆便于使用到酶解步骤中进行酶解加工,能有效的让鱼肉减小,便于在酶解罐中快速且高效的酶解。
4、高温杀菌步骤中,能对鱼浆进行加热消毒,形成混合物A,保证了后续大鲵蛋白肽的加工品质。
5、脂肪酶酶解步骤中,在混合物A中加热水和脂肪酶,控制混合物B的温度和ph值,脂肪酶能够发挥效用,对大鲵中的脂肪进行酶解,便于在后续的蛋白酶酶解步骤中复合酶充分对大鲵的鱼肉进行酶解,通过脂肪酶的酶解作用,能够降低后续步骤中过滤浓缩步骤中的过滤难度,且能进一步的降低大鲵脂肪氧化产生的腥味。
6、蛋白酶酶解步骤中采用了中性蛋白酶、风味蛋白酶和木瓜蛋白酶对混合物B中的鱼肉进行酶解,复合酶降解大分子蛋白,增加小肽的含量;此过程中需要控制酶解的温度和混合物B的ph值,让复合酶在最佳的环境对大分子蛋白进行水解,使复合酶充分的发挥效用。
7、灭酶步骤中,为后续在微生物发酵步骤中进行进一步的发酵,同时能够避免在后续的加工过程中,无法控制内源酶对鱼浆的发酵进程。
8、当混合物B酶解完成后,需要进行灭酶处理,灭酶处理是为了让将混合物B中的复合酶和脂肪酶转化为蛋白质,便于对混合物B的酶解过程进行控制。
9、过滤浓缩步骤能对酶解步骤中的混合物C进行过滤,形成初滤酶解液和固体物,初滤酶解液能进一步浓缩为酶解液,实现了固液分离。
10、酶解液喷雾干燥步骤中,能将酶解液进行高压浓缩,将酶解液中有效浓缩至粉状,便于将其与后续的烘干料混合包装;对喷雾干燥机的进口和出口处进行控制,能够有效的将酶解液中的固体与液体分离,便于对出口处的酶解粉收集。
综上所述,本方法中采用了大鲵骨肉作为制备大鲵蛋白肽的原料,在对大鲵骨肉进行酶解时,依次采用了脂肪酶和复合酶对大鲵骨肉进行酶解,脂肪酶能对大鲵的脂肪进行进一步的酶解,减少脂肪氧化产生的腥味物质;而复合酶能对大鲵骨肉中的大分子蛋白质进行进一步的酶解,此过程中复合酶能充分的将大分子蛋白质转化为大鲵蛋白肽,提取的效率提高。
进一步,所述粉碎步骤中,所述粉碎步骤中,在对原料进行粉碎后,形成的鱼浆的目数小于等于10。
将鱼浆的目数控制在10以内,能够鱼浆内鱼肉的颗粒小,便于在后续步骤中进行快速的酶解和微生物降解,能够加快原料的分解为蛋白质的速度。
进一步,所述脂肪酶酶解步骤中,用浓度为1.0-2.0mol/L的盐酸溶液及浓度为1.0-2.0mol/L的氢氧化钠溶液调节pH,酶解的同时进行搅拌,搅拌速度为50~60r/min。
酶解的过程中,混合物B的ph值也会变化,此时可采用盐酸溶液或氢氧化钠溶液对,鱼浆的ph值进行调节,让脂肪酶一直保持活性;同时在此过程中对混合物B进行搅拌,能够增强脂肪酶与混合物B中脂肪的接触度,加快脂肪的酶解速度。
进一步,所述蛋白酶酶解步骤中,向酶解罐内的混合物B中加入粉状氯化钙并混合均匀,使混合物B中的氯化钙溶液的浓度为0.02~0.03mol/L。
使用氯化钙对混合物B进行ph值的调节,便于让酶解时的鱼浆的ph=7.0,让鱼浆内的内源酶处于最佳的ph值中,便于蛋白酶对混合物B进行快速的酶解。
进一步,所述蛋白酶酶解步骤中,用浓度为1.0-2.0mol/L的盐酸溶液及浓度为1.0-2.0mol/L的氢氧化钠溶液调节pH,酶解的同时进行搅拌,搅拌速度为40~70r/min。
酶解的过程中,混合物B的ph值也会变化,此时可采用盐酸溶液或氢氧化钠溶液对,鱼浆的ph值进行调节,让蛋白酶一直保持活性;同时在此过程中对混合物B进行搅拌,能够增强蛋白酶与混合物B中鱼肉的接触度,加快大鲵的酶解速度。
进一步,所述酶解液喷雾干燥步骤中,喷雾干燥机的压力控制为0.1-0.13Mpa,喷雾干燥机进口处温度为210℃,出口处温度为90℃。
对喷雾干燥机进口处和出口处的温度进行进一步的控制,该温度与酶解液所需的温度相适应,便于使酶解液中的酶解粉与水分快速分离,使酶解粉能够快速干燥。
进一步,所述高温杀菌步骤中,将粉碎步骤中的鱼浆加热到90-100℃,保持20min;然后冷却至60℃,形成混合物A。
高温杀菌的步骤,其温度的选用区间与保持时长为最佳配合,保证了鱼浆的消毒杀菌,还实现了提高效率和节能的效果。
进一步,所述蛋白酶酶解步骤中,酶解时间3-5h,酶解温度为50-55℃。
是为了给蛋白酶提供一个适宜的温度,便于让蛋白酶充分的发挥作用。
进一步,所述过滤浓缩步骤中,板框压滤机或者精滤机的滤网孔径为60~80目。
采用60~80目的滤孔对混合物C进行过滤,能够充分的将混合物C中的固体物过滤出来,便于对初滤酶解液进行收集。
附图说明
图1为本发明一种大鲵蛋白肽的制备方法的实施流程图。
具体实施方式
下面通过具体实施方式进一步详细的说明:
实施例1中的一种大鲵蛋白肽的制备方法基本如附图1所示,其具体步骤如下:
原料准备步骤:准备若干大鲵,除去大鲵的内脏,获得大鲵骨肉,对大鲵骨肉清洗备用;
蒸煮步骤:通过蒸或煮的方式,对大鲵骨肉进行除去油脂;
粉碎步骤:将蒸煮后的大鲵骨肉的投入粉碎机中,按大鲵骨肉与水的重量比1:1-2向大鲵骨肉中加入水进行浸泡处理;启动粉碎机,将大鲵骨肉粉碎至10目,形成鱼浆备用;
高温杀菌步骤:将粉碎步骤中的鱼浆加热到90-100℃,保持20min;然后冷却至60℃,形成混合物A;
脂肪酶酶解步骤:将高温杀菌后的的混合物A转移至酶解罐,同时按1:1比例加水,按大鲵重量的0.1%-2%加入脂肪酶,进行酶解,酶解时间2-3h,酶解温度为50-55℃,酶解pH7.0,形成混合物B;在此过程中,用浓度为1.0-2.0mol/L的盐酸溶液及浓度为1.0-2.0mol/L的氢氧化钠溶液调节pH,酶解的同时进行搅拌,搅拌速度为40~70r/min;
蛋白酶酶解步骤:按原料准备步骤中大鲵骨肉重量的0.2%-2%向混合物B中加入复合酶,复合酶包括中性蛋白酶、风味蛋白酶和木瓜蛋白酶,且中性蛋白酶、风味蛋白酶和木瓜蛋白酶在质量比例为2:1:3,酶解时间3-5h,酶解温度为50-55℃,酶解pH7.0;用浓度为1.0-2.0mol/L的盐酸溶液及浓度为1.0-2.0mol/L的氢氧化钠溶液调节pH,酶解的同时进行搅拌,搅拌速度为50~60r/min;
灭酶步骤:将蛋白酶酶解步骤中的混合物B加热至90℃,保温10min灭酶,形成混合物C;
过滤浓缩步骤:对灭酶步骤中的混合物C进行过滤,滤网孔径为60~80目,形成初滤酶解液和固体物,对初滤酶解液和固体物进行分别收集;然后对初滤酶解液进行浓缩处理,使初滤酶解液的含水量为40-60%,收集酶解液;
酶解液喷雾干燥步骤:将灭酶步骤中的酶解液通过喷雾干燥机进行干燥,喷雾干燥机的压力控制为0.1-0.13Mpa,喷雾干燥机进口处温度为210℃,出口处温度为90℃,在出口处收集大鲵蛋白肽粉。
实施例2
实施例2与实施例1的区别在于,脂肪酶酶解步骤中,需要对混合物A的pH进行调整,需要将加入到混合物A中的盐酸溶液或氢氧化钠溶液使用搅拌机进行搅拌混合,搅拌机中设有搅拌杆,搅拌杆内设中空的空腔,搅拌杆的下端设有与空腔连通的通孔,便于待加入的盐酸溶液或氢氧化钠溶液放置到空腔内,搅拌时,盐酸溶液或氢氧化钠溶液能从通孔处流出,且此时搅拌杆的搅拌速度为50~60r/min,此设置放置能够让盐酸溶液或氢氧化钠溶液依次从通孔处流出,便于实现充分搅拌,选用该搅拌速度即可对其进行充分搅拌。
以上所述的仅是本发明的实施例,方案中公知的具体结构和/或特性等常识在此未作过多描述。应当指出,对于本领域的技术人员来说,在不脱离本发明结构的前提下,还可以作出若干变形和改进,这些也应该视为本发明的保护范围,这些都不会影响本发明实施的效果和专利的实用性。本申请要求的保护范围应当以其权利要求的内容为准,说明书中的具体实施方式等记载可以用于解释权利要求的内容。

Claims (9)

1.一种大鲵蛋白肽的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
原料准备步骤:准备若干大鲵,除去大鲵的内脏,获得大鲵骨肉,对大鲵骨肉清洗备用;
蒸煮步骤:通过蒸或煮的方式,对大鲵骨肉进行除去油脂;
粉碎步骤:将蒸煮后的大鲵骨肉的投入粉碎机中,按大鲵骨肉与水的重量比1:1-2向大鲵骨肉中加入水进行浸泡处理;启动粉碎机,将大鲵骨肉粉碎至5-15目,形成鱼浆备用;
高温杀菌步骤:将粉碎步骤中的鱼浆加热到80-110℃,保持20min;然后冷却至50-70℃,形成混合物A;
脂肪酶酶解步骤:将高温杀菌后的的混合物A转移至酶解罐,同时按1:1比例加水,按大鲵重量的0.05%-3%加入脂肪酶,进行酶解,酶解时间1-4h,酶解温度为45-60℃,酶解pH7.0,形成混合物B;
蛋白酶酶解步骤:按原料准备步骤中大鲵骨肉重量的0.1%-3%向混合物B中加入复合酶,复合酶包括中性蛋白酶、风味蛋白酶和木瓜蛋白酶,且中性蛋白酶、风味蛋白酶和木瓜蛋白酶在质量比例为2:1:3,酶解时间2-6h,酶解温度为45-60℃,酶解pH7.0;
灭酶步骤:将蛋白酶酶解步骤中的混合物B加热至90℃,保温5-15min灭酶,形成混合物C;
过滤浓缩步骤:对灭酶步骤中的混合物C进行过滤,滤网孔径为40~100目,形成初滤酶解液和固体物,对初滤酶解液和固体物进行分别收集;然后对初滤酶解液进行浓缩处理,使初滤酶解液的含水量为30-70%,收集酶解液;
酶解液喷雾干燥步骤:将灭酶步骤中的酶解液通过喷雾干燥机进行干燥,喷雾干燥机的压力控制为0.05-0.19Mpa,喷雾干燥机进口处温度为180-230℃,出口处温度为80-100℃,在出口处收集大鲵蛋白肽粉。
2.根据权利要求1所述的一种大鲵蛋白肽的制备方法,其特征在于,所述粉碎步骤中,所述粉碎步骤中,在对原料进行粉碎后,形成的鱼浆的目数小于等于10。
3.根据权利要求2所述的一种大鲵蛋白肽的制备方法,其特征在于,所述脂肪酶酶解步骤中,用浓度为1.0-2.0mol/L的盐酸溶液及浓度为1.0-2.0mol/L的氢氧化钠溶液调节pH,酶解的同时进行搅拌,搅拌速度为50~60r/min。
4.根据权利要求3所述的一种大鲵蛋白肽的制备方法,其特征在于,所述蛋白酶酶解步骤中,向酶解罐内的混合物B中加入粉状氯化钙并混合均匀,使混合物B中的氯化钙溶液的浓度为0.02~0.03mol/L。
5.根据权利要求4所述的一种大鲵蛋白肽的制备方法,其特征在于,所述蛋白酶酶解步骤中,用浓度为1.0-2.0mol/L的盐酸溶液及浓度为1.0-2.0mol/L的氢氧化钠溶液调节pH,酶解的同时进行搅拌,搅拌速度为40~70r/min。
6.根据权利要求5所述的一种大鲵蛋白肽的制备方法,其特征在于,所述酶解液喷雾干燥步骤中,喷雾干燥机的压力控制为0.1-0.13Mpa,喷雾干燥机进口处温度为210℃,出口处温度为90℃。
7.根据权利要求6所述的一种大鲵蛋白肽的制备方法,其特征在于,所述高温杀菌步骤中,将粉碎步骤中的鱼浆加热到90-100℃,保持20min;然后冷却至60℃,形成混合物A。
8.根据权利要求7所述的一种大鲵蛋白肽的制备方法,其特征在于,所述蛋白酶酶解步骤中,酶解时间3-5h,酶解温度为50-55℃。
9.根据权利要求8所述的一种大鲵蛋白肽的制备方法,其特征在于,所述过滤浓缩步骤中,板框压滤机或者精滤机的滤网孔径为60~80目。
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