CN109260149A - 一种含有γ-生育三烯酚的纳米乳液及其制备方法和用途 - Google Patents

一种含有γ-生育三烯酚的纳米乳液及其制备方法和用途 Download PDF

Info

Publication number
CN109260149A
CN109260149A CN201810355711.9A CN201810355711A CN109260149A CN 109260149 A CN109260149 A CN 109260149A CN 201810355711 A CN201810355711 A CN 201810355711A CN 109260149 A CN109260149 A CN 109260149A
Authority
CN
China
Prior art keywords
nanoemulsions
tocotrienols
oil
liquid
injection
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201810355711.9A
Other languages
English (en)
Other versions
CN109260149B (zh
Inventor
周晋
海鑫
赵祎镭
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Individual
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Priority to CN201810355711.9A priority Critical patent/CN109260149B/zh
Publication of CN109260149A publication Critical patent/CN109260149A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN109260149B publication Critical patent/CN109260149B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/107—Emulsions ; Emulsion preconcentrates; Micelles
    • A61K9/1075—Microemulsions or submicron emulsions; Preconcentrates or solids thereof; Micelles, e.g. made of phospholipids or block copolymers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline 
    • A61K31/353—3,4-Dihydrobenzopyrans, e.g. chroman, catechin
    • A61K31/355—Tocopherols, e.g. vitamin E
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/14—Esters of carboxylic acids, e.g. fatty acid monoglycerides, medium-chain triglycerides, parabens or PEG fatty acid esters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/24—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing atoms other than carbon, hydrogen, oxygen, halogen, nitrogen or sulfur, e.g. cyclomethicone or phospholipids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/44—Oils, fats or waxes according to two or more groups of A61K47/02-A61K47/42; Natural or modified natural oils, fats or waxes, e.g. castor oil, polyethoxylated castor oil, montan wax, lignite, shellac, rosin, beeswax or lanolin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

本发明涉及一种含γ‑生育三烯酚的纳米乳液及其制备方法。所述纳米乳液由以下成分组成：以质量百分数计，γ‑生育三烯酚0.02％‑10％，注射用油5％‑20％，乳化剂0.5％‑2％，等渗调节剂1.5％‑3.0％，抗氧化剂0.005％‑0.5％，余量为水。通过乳化剂将γ‑生育三烯酚和注射用油制成粒径小、有效成分含量高、稳定的纳米微粒，且制剂中无需添加吐温、司盘、防腐剂等辅料，安全性更高。本发明制备的γ‑生育三烯酚纳米乳液，扩展了其临床应用的剂型。

Description

一种含有γ-生育三烯酚的纳米乳液及其制备方法和用途
技术领域
本发明属于药物制剂领域，具体涉及一种含γ-生育三烯酚的纳米乳液及其制备方法。更具体的说，本发明涉及一种无吐温、司盘、防腐剂等稳定且安全的纳米乳液及其制备方法。
背景技术
1964年，γ-生育三烯酚首次由Pennock等人发现，主要包括苯并吡喃环和脂肪族不饱和的异戊二烯结构链(结构分别为式I)。经过深入研究，人们发现γ-生育三烯酚结构中的不饱和异戊二烯尾部在抗肿瘤生物活性中作用重大。因此，γ-生育三烯酚备受关注而逐渐成为研究的热点。据报道，γ-生育三烯酚广泛在棕榈油中含量最高(11.3-36.0mg/100g油)，其次是大麦油(8.50-18.6mg/100g油)和米糠油(1.74-23.1mg/100g油)，具有降胆固醇、抗动脉粥样硬化；抑制乳腺癌、前列腺癌等肿瘤；以及调节血糖、肥胖与代谢等作用。
由于γ-生育三烯酚具有脂溶性，其溶解度低，碱性条件不稳定且对氧敏感，因此极大地限制了其在临床的应用范围。鉴于上述特点，为使γ-生育三烯酚更好地发挥临床疗效，研究和开发粒径小、载药量高、稳定性高的剂型，将对其临床应用的促进与推广具有重要的意义。
纳米乳是由油相、水相、乳化剂和助乳化剂组成，通过高压均质、微射流或超声波等高能方式制备而成。目前被认为是一种粒径小，乳粒沉淀、聚集的速率慢的动力学稳定体系。
静脉注射用纳米乳的优点包括：(1)不含或含有少量有机溶剂，对血管刺激性较小；(2)水相中药物较少，能有效降低由药物引起静脉炎现象，增强患者的顺应性；(3)将难溶性药物溶解或增溶于适宜的油相中，制成载药的纳米乳，可用于注射给药；(4)在载药的纳米乳中，大部分药物分布在油相或油水界面，避免与水相直接接触，可增加药物稳定性。此外，静脉注射纳米乳利用粒径特点，通过肿瘤新生血管间隙渗漏到肿瘤组织中，提高药物在肿瘤部位的摄取率，降低被单核吞噬细胞系统吞噬，延长体循环时间，从而起到增加疗效，降低用药剂量的作用。
目前，亲水型非离子表面活性剂吐温-40(65、80)作为纳米乳剂常用的一种辅料。但临床上很多患者注射含有吐温的注射剂后，会引起休克、呼吸困难、低血压与血管性水肿等过敏症状并产生溶血作用。(吐温-80引起动物类过敏反应的原因初步探索，毒理学杂志，2007，21卷，4期)。尽管王云庭等人研究表明，注射用吐温-80的安全性较药用吐温-80明显提高，但仍需要应严格控制吐温-80的用量，以降低类过敏反应发生的风险。(注射用与药用聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯(吐温-80)类过敏反应比较研究，中国中药杂志，2007，37卷，13期)。
现有维生素E纳米乳剂存在的缺陷，即处方中均需要添加吐温作为表面活性剂。例如：陕西科技大学毛跟年等人发明的一种维生素E纳米乳及其制备方法(专利申请号201310479269.8)需要加入吐温-80(维生素E质量：吐温-80质量＝1：(1-5.5))；苏州经贸职业技术学院张小英发明的一种维生素E纳米微乳液及其制备方法(专利申请号201410477268.4)，在处方中需要加入10wt％-15wt％的吐温-65。
中国专利201310479269.8公开了一种维生素E纳米乳及其制备方法；中国专利201410477268.4公开了一种维生素E纳米微乳液及其制备方法；中国专利201310452315.5公开了载水杨酸的维生素E微乳液及其制备方法；史玉红(维生素E自微乳化给药系统的制备，现代生物医药进展，2008)进行维生素E自微乳化传递系统的研究。上述专利与文章的制剂处方中均添加了吐温。中国专利200980118258.9公开了包含生育酚的PEG衍生物的乳剂，此专利中应用防腐剂(苄醇)，将增加临床患者产生不良反应的比例。
此外，由于γ-生育三烯酚结构上存在三烯键，碱性条件不稳定且对氧敏感，现有技术公开的生育酚的乳剂配方以及制备乳剂的方法对于γ-生育三烯酚并不适宜。
综上所述，本领域迫切需要开，发明一种粒径小、载药量高、无吐温/司盘/防腐剂的稳定安全新剂型，可以使γ-生育三烯酚更好地发挥临床疗效。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种含γ-生育三烯酚的纳米乳剂，通过乳化剂将γ-生育三烯酚和注射用油制成粒径小、有效成分含量高、稳定的纳米微粒，且制剂中无需添加吐温、司盘、防腐剂等辅料，安全性更高。
为了实现上述目的，本发明一方面提供了一种含γ-生育三烯酚的纳米乳液，所述纳米乳液由以下成分组成：以质量百分含量计，γ-生育三烯酚0.02％-10％，注射用油5％-20％，乳化剂0.5％-2％，等渗调节剂1.5％-3.0％，抗氧化剂0.005％-0.5％，余量为水。
在本发明的一个优选方案中，所述γ-生育三烯酚的纳米乳液，由以下成分组成：以质量百分含量计，γ-生育三烯酚0.02％-4％，注射用油7％-12％，乳化剂0.7％-1.5％，等渗调节剂2.0％-2.5％，抗氧化剂0.005％-0.02％，余量为水。
在本发明的一个优选方案中，所述γ-生育三烯酚是由棕榈油和大麦油混合物中提取，浓度约为1mg/mL。
在本发明的另一优选方案中，所述注射用油选自：大豆油、中链甘油三酯油中的一种或一种以上。
在本发明的另一优选方案中，所述注射用油为大豆油与中链甘油三酯油的混合。
在本发明的另一优选方案中，所述注射用油为大豆油与中链甘油三酯油的混合，质量比为1:1。
在本发明的另一优选方案中，所述乳化剂选自天然磷脂，优选自大豆卵磷脂或者蛋黄卵磷脂。
在本发明的另一优选方案中，所述等渗调节剂选自：甘油、甘露醇和山梨醇中的一种或一种以上。
在本发明的另一优选方案中，所述等渗调节剂为甘油和山梨醇的混合。
在本发明的另一优选方案中，所述等渗调节剂为甘油和山梨醇的混合，质量比为3:1。
在本发明的另一优选方案中，所述抗氧剂选自：亚硫酸钠、甘氨酸、半胱氨酸、枸橼酸中的一种或一种以上。
本发明所获得的含γ-生育三烯酚的纳米乳液，为水包油型，粒径小于400nm，pH为5.6-8.2，乳液体系稳定。
本发明的第二个方面提供了一种γ-生育三烯酚纳米微乳液的制备方法，所述制备方法包含以下步骤：
(1)取注射用油，水浴加热至60℃-80℃，加入γ-生育三烯酚、磷脂和抗氧化剂，搅拌溶解，形成均匀的混合物，为A液。
(2)取等渗调节剂加入60℃-80℃的碱性水中，搅拌溶解，水浴保温备用，并全程充氮气，为B液。
(3)采用高速剪切前将A液分散，剪切中缓慢加入B液，待B液加入完毕后再继续剪切10-22分钟，获得初乳，全程进行氮气保护。
(4)初乳经高压均质，调节二级均质压力位60-90bar，一级高压均质压力600-900bar，均质5-8次。
(5)用枸橼酸、柠檬酸等酸性溶液调节pH至5.6-8.2，充氮灌装并于121℃灭菌10-15分钟。
在本发明的另一优选方案中，步骤(1)中，以质量百分含量计，所述注射用油的量为7％-12％；所述加入γ-生育三烯酚的量为0.02％-4％；所述加入磷脂的量为0.7％-1.5％；所述加入抗氧化剂的量为0.005％
-0.02％。
在本发明的另一优选方案中，步骤(2)中，以质量百分含量计，所述等渗调节剂的量为2.0％-2.5％。
本发明在制备γ-生育三烯酚纳米乳液中使用高压均质机。高压均质机通过高压往复泵传递物料，将输送混合物料输送至一级均质阀及二级乳化阀。在高压作用产生强烈的剪切、撞击与空穴作用，从而使液态物质/液体为载体的固体颗粒得到超微细化。该设备具有细化做用强烈，可调节压力较高；发热量较小，能够较好的保持药物基本性能等特点。因此，本发明所制备的脂肪乳液既能保护γ-生育三烯酚不被破坏，制备的粒径又均一稳定。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
1.本发明提供的γ-生育三烯酚纳米乳液，采用高压均质的方法，全程通氮气，制备获得的纳米乳液分散均匀、粒径适宜，水溶性较好，提高了γ-生育三烯酚的水溶性和稳定性。
2.本发明提供的γ-生育三烯酚纳米乳液，利用纯天然材料(磷脂、注射用油等)成分，不含有吐温、司盘及防腐剂，所制备的纳米乳剂适宜注射给药，降低了溶血的比例，提高了患者的适应性。
3.本发明提供的γ-生育三烯酚纳米乳液，在注射给药时对血管的刺激性低，制剂在贮存过程中，具有较好的化学物理稳定性，无药物渗漏的现象。
4.本发明提供的γ-生育三烯酚纳米乳液，具有包封率高、稳定性好等优点，拥有广阔的开发前景。
5.本发明提供的γ-生育三烯酚的纳米乳液，能够很好的保护γ-生育三烯酚，免受环境中不良因素的影响。
附图说明
图1所示为本发明实施例1的γ-生育三烯酚纳米乳液的粒径分布图。
图2所示为γ-生育三烯酚与γ-生育三烯酚纳米乳对NB4细胞活力的影响。
具体实施方式
实施例1制备γ-生育三烯酚纳米乳液
(1)取11g的大豆油和中链甘油三酯油(1:1)，水浴加热至60℃，加入γ-生育三烯酚0.05g、蛋黄卵磷脂1.2g和亚硫酸钠0.005g，搅拌溶解，形成均匀的混合物，为A液。
(2)取等渗调节剂甘油和山梨醇(3:1)2.3g加入70℃的磷酸氢二钠碱性水中，搅拌溶解，水浴保温备用，并全程充氮气，为B液。
(3)采用高速剪切前将A液分散，剪切中缓慢加入B液，待B液加入完毕后再继续剪切15分钟，全程进行氮气保护。
(4)初乳经高压均质，调节二级均质压力位80bar，一级压力800bar，均质8次。
(5)用枸橼酸、柠檬酸等酸性溶液调节pH至6.0，充氮灌装并于121℃灭菌12分钟，得到γ-生育三烯酚纳米乳液100g。
实施例2制备γ-生育三烯酚纳米乳液
(1)取大豆油和中链甘油三酯油(1:1)120g，水浴加热至80℃，加入γ-生育三烯酚10g、大豆卵磷脂15g和亚硫酸钠0.1g，搅拌溶解，形成均匀的混合物，为A液。
(2)取等渗调节剂甘油25g加入70℃的磷酸氢二钠碱性水中，搅拌溶解，水浴保温备用，并全程充氮气，为B液。
(3)采用高速剪切前将A液分散，剪切中缓慢加入B液，待B液加入完毕后再继续剪切14分钟，全程进行氮气保护。
(4)初乳经高压均质，调节二级均质压力位80bar，一级压力800bar，均质8次。
(5)用枸橼酸、柠檬酸等酸性溶液调节pH至8.0，充氮灌装并于121℃灭菌13分钟，得到γ-生育三烯酚纳米乳液1000g。
实施例3制备γ-生育三烯酚纳米乳液
(1)取大豆油8g，水浴加热至60℃，加入γ-生育三烯酚0.1g、大豆卵磷脂1.1g和半胱氨酸0.005g，搅拌溶解，形成均匀的混合物，为A液。
(2)取等渗调节剂甘油和山梨醇(3:1)2.1g加入70℃的磷酸氢二钠碱性水中，搅拌溶解，水浴保温备用，并全程充氮气，为B液。
(3)采用高速剪切前将A液分散，剪切中缓慢加入B液，待B液加入完毕后再继续剪切12分钟，全程进行氮气保护。
(4)初乳经高压均质，调节二级均质压力位80bar，一级压力800bar，均质6次。
(5)用枸橼酸、柠檬酸等酸性溶液调节pH至7.0，充氮灌装并于121℃灭菌12分钟，得到γ-生育三烯酚纳米乳液100g。
实施例4制备γ-生育三烯酚纳米乳液
(1)取大豆油100g，水浴加热至70℃，加入γ-生育三烯酚1g、蛋黄卵磷脂12g和枸橼酸0.1g，搅拌溶解，形成均匀的混合物，为A液。
(2)取处方量的等渗调节剂甘油22g加入70℃的磷酸氢二钠碱性水中，搅拌溶解，水浴保温备用，并全程充氮气，为B液。
(3)采用高速剪切前将A液分散，剪切中缓慢加入B液，待B液加入完毕后再继续剪切16分钟，全程进行氮气保护。
(4)初乳经高压均质，调节二级均质压力位80bar，一级压力800bar，均质6次。
(5)用枸橼酸、柠檬酸等酸性溶液调节pH至6.0，充氮灌装并于121℃灭菌13分钟，得到γ-生育三烯酚纳米乳液1000g。
比较例1参照专利201410477268.4制备纳米微乳液
(1)取γ-生育三烯酚0.5g、吐温-65 1.0g、硬脂酸钠0.6g和司盘-80 0.3g，加热45-55℃溶解，溶解后用涡旋振荡器进行涡流振荡得混合溶液，为A液。
(2)取丙二醇0.4g与水混合均匀，为B液。
(3)将A液与B液也混合，混合后再进行涡流振荡，涡流振荡时间为10min，振荡结束后得到γ-生育三烯酚纳米乳液。
比较例2参照专利201410477268.4制备纳米微乳液
(1)取γ-生育三烯酚1.0g、吐温-65 1.2g、硬脂酸钠0.8g和司盘-80 0.4g，，加热45-55℃溶解，溶解后用涡旋振荡器进行涡流振荡得混合溶液，为A液。
(2)取丙二醇0.6g与水混合均匀，为B液。
(3)将A液与B液也混合，混合后再进行涡流振荡，涡流振荡时间为10min，振荡结束后得到γ-生育三烯酚纳米乳液。
比较例3参照专利200410021539.1制备纳米乳液
处方组成：γ-生育三烯酚0.5g、大豆卵磷脂1.2g、甘油2.2g、无水亚硫酸氢钠0.01g，共成100ml。
(1)在配制中设备中投入γ-生育三烯酚0.5g；
(2)将1.2g大豆卵磷脂、2.2g甘油(无水)与适量注射用水混合均匀，并加入0.01g无水亚硫酸氢钠。
(3)将(2)获得的液体在搅拌条件下加入(1)，20℃搅拌后得初乳，过G3漏斗抽滤，所得液体过均质机(第一步均质压力520kg/cm2，第二步调制均质压力100kg/cm2)形成乳剂，反复匀化得均质溶液。用氢氧化钠和盐酸调节pH为3，制的100ml药液，再经微孔滤膜过滤除菌。
比较例4参照专利200410021539.1制备纳米乳液
处方组成：γ-生育三烯酚1.0g、BHT 0.1g、注射用大豆油10g、蛋黄卵磷脂10g、维生素E聚乙二醇琥珀酸酯1.0g、甘油2.2g，共成500ml。
(1)在配制中，将1.0gγ-生育三烯酚、BHT 0.1g溶解于10g注射用大豆油中，混合均匀；
(2)将10g蛋黄卵磷脂、维生素E聚乙二醇琥珀酸酯1.0g、2.2g甘油(无水)与适量注射用水混合均匀；
(3)将(2)获得的液体在搅拌条件下加入(1)，50℃搅拌通过均质仪，反复匀化得均质溶液(第一步均质压力7000psi，第二步调制均质压力16000psi)形成乳剂，反复匀化得均质溶液。用氢氧化钠和盐酸调节pH为7.0，制得500ml药液，再经微孔滤膜过滤除菌。
实施例5本发明的γ-生育三烯酚纳米乳液与比较例1-4的纳米乳液各项性能进行考察
1.制备样品0时各指标的考察结果
表1γ-生育三烯酚纳米乳液的理化性质指标
从表1结果可见，实施例1、2、3和4制备的γ-生育三烯酚纳米乳液分散均匀，粒径适宜、包封率较好、含量高。比较例1、2与3，粒径显著增加、包封率与含量显降。比较例4的粒径虽然接近本发明实施例1、2、3和4制备的γ-生育三烯酚纳米乳，但是包封率与含量明显降低。
2.加速稳定性试验
按照药典2015年版稳定性试验指导原则的说明，将本发明实施例1、实施例2制备的γ-生育三烯酚纳米乳液在25±2℃的条件下放置6个月，考察各项指标的变化，见表2。
表2γ-生育三烯酚纳米乳液加速稳定性试验
由表2结果可见，本发明实施例1和实施例2制备的γ备生育三烯酚纳米乳液在加速6个月(25±2℃)后，外观和稳定性良好，然而比较例1、4稳定性较差，分别在1个月和6个月(25±2℃)考察后已经分层。
3.长期稳定性试验
将本发明实施例1、实施例2制备的γ-生育三烯酚纳米乳液在6±2℃的条件下放置12个月，考察各项指标的变化，见表3。
表3γ-生育三烯酚纳米乳液长期稳定性试验
由表3结果可见，本发明实施例1和实施例2制备的γ-生育三烯酚纳米乳液在长期12个月(6±2℃)后，外观和稳定性良好，然而比较例1、4稳定性较差，在1个月和9个月(6±2℃)考察后已经分层。
4.高温稳定性试验
将本发明实施例1、实施例2制备的γ-生育三烯酚纳米乳液在40±2℃的条件下放置5、10天，考察各项指标的变化，见表4。
表4γ-生育三烯酚纳米乳液高温稳定性试验
由表4结果可见，本发明实施例1和实施例2制备的γ-生育三烯酚纳米乳液在高温10天(40±2℃)后，外观和稳定性良好，然而比较实施例1、4稳定性较差，在1天和10天(40±2℃)考察后已经分层。
综上，本发明实施例制备的γ上生育三烯酚纳米乳液，在25±2℃加速6个月试验、6个月试长期12个月试验和40±2℃高温10天试验考察中，结果仍符合质量标准的规定，可以保证制剂在贮存期间的质量稳定。
5.动物溶血性试验
取新鲜兔血20ml置于烧杯中，用玻璃棒搅动，数分钟后去除纤维蛋白。将血液取出，加入生理盐水，摇匀，2000rpm/min离心10min，弃掉上清液，用等量的生理盐水继续清晰沉淀的红细胞，重复至上清澄清。用生理盐水配制成2％的红细胞悬液。
取干净的试管7个，依次编号按照表5所列，加入各组液体，No6作为空白对照管，No7用蒸馏水代替生理水，摇匀置于37℃水浴中，分别于0.5h、1h、2h、3h、4h和5h观察是否有溶血现象。
表5γ-生育三烯酚纳米乳液的溶血性试验
注：+溶血，-不溶血/不发生凝集
由表5结果可见，本发明实施例1制备得到的γ-生育三烯酚纳米乳液在5小时内未引起溶血。采用上述方法对本发明的实施例2、3和4制备的γ-生育三烯酚纳米乳液进行溶血性试验，结果表明在5小时内未引起溶血。
6.动物过敏性试验
取健康豚鼠18只，随机分成6组，4个试验组(实施例1-4制备的γ-生育三烯酚纳米乳液，0.5mL/只)，1个阴性对照组(生理盐水注射液，0.5mL/只)，1个阳性对照组(10％卵白蛋白溶液，0.1mL/只)。隔日腹腔注射一次，共三次。在末次注射14天后静脉注射阴性对照组、阳性对照组、实施例1、2、3和4，分别进行激发试验。在给药30分钟之内观察豚鼠是否出现过敏反应。
表6γ-生育三烯酚纳米乳液的过敏性试验
注：阳性：如有竖毛、呼吸困难、咳嗽等中两种或两种以上，或抽搐、虚脱或死亡等一种为阳性。
由表6结果可见，阳性对照组在给药5分钟内出现呼吸抑制、抽搐至死亡，而本发明实施例1、2、3和4制备得到的γ-生育三烯酚纳米乳液在30分钟内未出现全身过敏反应。
7.血管刺激性试验
取健康家兔15只，随机分成5组，4个试验组(实施例1-4制备的γ-生育三烯酚纳米乳液)，1个阴性对照组(生理盐水注射液)。实验家兔右侧耳缘静脉注射实施例组，左侧耳缘静脉注射生理盐水，连续3天给药。肉眼观察给药血管是否有血栓形成、周围组织是否红肿、淤血等炎症反应。处死后取耳部组织进行染色分析。
表7γ-生育三烯酚纳米乳液的血管刺激性试验
由表7结果可见，本发明实施例1、2、3和4制备得到的γ-生育三烯酚纳米乳液与阴性对照液比较，无明显差异，表明上述样液对家兔耳血管未存在明显刺激。
8.大鼠体内药动学实验
将18只Wistar种雄性大鼠，体重(220±20)g，随机分成三组：γ-生育三烯酚油溶液组、γ-生育三烯酚纳米乳液(实施例1)、比较例4乳液，每组6只，实验前禁食一夜。分别将三组液体进行腹腔注射，分别于给药后5min，15min，30min，1h，2h，4h，6h，8h，12h，18h、24h、48h和60h眼眶取血0.4mL，置预先肝素化的1.5mL尖底离心试管中，处理后测定药物浓度。
表8γ-生育三烯酚纳米乳液大鼠体内药动学试验
由表8数据可见，三组液体的药动学行为接近，但是本发明制备的γ-生育三烯酚纳米乳液，达峰时间较γ-生育三烯酚油溶液组和比较例4组均明显缩短，达峰浓度明显升高，药时曲线面积也明显增加。上述结果说明，本发明制备的γ-生育三烯酚纳米乳液，不仅增加了药物的稳定性，还能快速发挥临床效果。
实施例6γ-生育三烯酚抗肿瘤效果
将急性早期幼粒细胞白血病NB4细胞接种于96孔板中，每孔100μL；待细胞长到50％时，分别考察实施例4中使用的γ-生育三烯酚溶液组(γ-T3溶液)和制备获得的γ-生育三烯酚纳米乳组(γ-T3纳米乳)。37℃，5％CO2细胞培养箱中培养后，每孔加入10μLMTT(5mg/ml)(避光操作)，孵育4h。弃培养液，每孔加入150μLDMSO(避光操作)，平摇16min溶解混匀。经酶标仪(490nm)测定吸光度A。分别比较γ-生育三烯酚纳米乳与γ-生育三烯酚溶液对肿瘤细胞NB4活性的影响。由图2可见，同等剂量考察，γ-生育三烯酚纳米乳液的抗肿瘤增加，随着浓度的提高，抗肿瘤作用越强。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对上述内容进行一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的修改或改进内容，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (11)

1.一种含γ-生育三烯酚的纳米乳液，其特征在于，所述纳米乳液由以下成分组成：以质量百分含量计，γ-生育三烯酚0.02％-10％，注射用油5％-20％，乳化剂0.5％-2％，等渗调节剂1.5％-3.0％，抗氧化剂0.005％-0.5％，余量为水。
2.根据权利要求1所述的纳米乳液，其特征在于，所述γ-生育三烯酚为0.02％-4％，注射用油为7％-12％，乳化剂为0.7％-1.5％，等渗调节剂为2.0％-2.5％，抗氧化剂为0.005％-0.02％。
3.根据权利要求1或2所述的纳米乳液，其特征在于，所述乳化剂选自天然磷脂；优选自大豆卵磷脂或者蛋黄卵磷脂。
4.根据权利要求1或2所述的纳米乳液，其特征在于，所述注射用油选自大豆油、中链甘油三酯油中的一种或一种以上；优选为大豆油与中链甘油三酯油的混合；更优选为大豆油与中链甘油三酯油的质量比为1:1。
5.根据权利要求1或2所述的纳米乳液，其特征在于，所述抗氧剂选自：亚硫酸钠、甘氨酸、半胱氨酸、枸橼酸中的一种或一种以上。
6.根据权利要求1或2所述的纳米乳液，其特征在于，所述等渗调节剂选自：甘油、甘露醇和山梨醇中的一种或一种以上；优选为甘油和山梨醇的混合；更优选为甘油和山梨醇的质量比为3:1。
7.根据权利要求1或2所述的纳米乳液，其特征在于，所述纳米乳液pH为5.6-8.2，乳液体系稳定。
8.根据权利要求1或2所述的纳米乳液，其特征在于，所述乳化剂选自大豆卵磷脂或者蛋黄卵磷脂；
所述注射用油选自大豆油、中链油中的一种或一种以上；
所述抗氧剂选自：亚硫酸钠、甘氨酸、半胱氨酸、枸橼酸中的一种或一种以上；
所述等渗调节剂选自：甘油、甘露醇和山梨醇中的一种或一种以上；
所述纳米乳液粒径小于400nm。
9.上述任一权利要求所述的一种γ-生育三烯酚纳米乳液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)取注射用油，水浴加热至60℃-80℃，加入处方量的γ-生育三烯酚油、磷脂和抗氧化剂，搅拌溶解，形成均匀的混合物，为A液。
(2)取等渗调节剂加入60℃-80℃的碱性水中，搅拌溶解，水浴保温备用，并全程充氮气，为B液。
(3)采用高速剪切前将A液分散，剪切中缓慢加入B液，待B液加入完毕后再继续剪切10-22分钟，全程进行氮气保护。
(4)初乳经高压均质，调节二级均质压力位60-90bar，一级压力600-900bar，均质5-8次。
(5)用酸性溶液调节pH至5.6-8.2，充氮灌装并于121℃灭菌10-15分钟。
10.一种含有γ-生育三烯酚的纳米乳液的用途，其特征在于，所述的纳米乳液用于制备预防与治疗肿瘤药物中的用途。
11.一种含有γ-生育三烯酚的纳米乳液的用途，其特征在于，所述的纳米乳液用于制备预防与治疗白血病药物中的用途。
CN201810355711.9A 2018-04-19 2018-04-19 一种含有γ-生育三烯酚的纳米乳液及其制备方法和用途 Expired - Fee Related CN109260149B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810355711.9A CN109260149B (zh) 2018-04-19 2018-04-19 一种含有γ-生育三烯酚的纳米乳液及其制备方法和用途

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810355711.9A CN109260149B (zh) 2018-04-19 2018-04-19 一种含有γ-生育三烯酚的纳米乳液及其制备方法和用途

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN109260149A true CN109260149A (zh) 2019-01-25
CN109260149B CN109260149B (zh) 2021-04-06

Family

ID=65148014

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810355711.9A Expired - Fee Related CN109260149B (zh) 2018-04-19 2018-04-19 一种含有γ-生育三烯酚的纳米乳液及其制备方法和用途

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN109260149B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023036813A1 (en) * 2021-09-10 2023-03-16 Sabo S.P.A. Blend of tocotrienols, natural oils and esters as additive for topical application

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1546016A (zh) * 2003-12-04 2004-11-17 东南大学 天然维生素e纳米制剂及其制备方法
CN1596889A (zh) * 2004-07-23 2005-03-23 沈阳药科大学 维生素e乳剂及其冻干乳剂的组方及制备方法
CN1953735A (zh) * 2004-05-18 2007-04-25 雀巢技术公司 用于释放的水包油乳液
EP1784163B1 (en) * 2004-09-04 2012-02-22 Young Dae Kim Nano-emulsion, the use thereof, and preparation method thereof
WO2013154359A1 (ko) * 2012-04-13 2013-10-17 (주)아모레퍼시픽 나노에멀전 조성물 및 그 제조방법

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1546016A (zh) * 2003-12-04 2004-11-17 东南大学 天然维生素e纳米制剂及其制备方法
CN1953735A (zh) * 2004-05-18 2007-04-25 雀巢技术公司 用于释放的水包油乳液
CN1596889A (zh) * 2004-07-23 2005-03-23 沈阳药科大学 维生素e乳剂及其冻干乳剂的组方及制备方法
EP1784163B1 (en) * 2004-09-04 2012-02-22 Young Dae Kim Nano-emulsion, the use thereof, and preparation method thereof
WO2013154359A1 (ko) * 2012-04-13 2013-10-17 (주)아모레퍼시픽 나노에멀전 조성물 및 그 제조방법

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
AKIKO INOUE等: ""Induction of Apoptosis by γ-Tocotrienol in Human Cancer Cell Lines and Leukemic Blasts From Patients: Dependency on Bid, Cytochrome c, and Caspase Pathway"", 《NUTRITION AND CANCER》 *
FEI XU等: ""Emulsions as delivery systems for gamma and delta tocotrienols: Formation, properties and simulated gastrointestinal fate"", 《FOOD RESEARCH INTERNATIONAL》 *
ZAFARIZAL ALDRIN AZIZUL HASAN等: ""In vitro SAFETY EVALUATION OF PALM TOCOTRIENOL-RICH FRACTION NANOEMULSIONFOR TOPICAL APPLICATION"", 《JOURNAL OF OIL PALM RESEARCH》 *
李茜等: ""生育三烯酚抗炎及抗癌作用研究进展"", 《中国慢性病预防与控制》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023036813A1 (en) * 2021-09-10 2023-03-16 Sabo S.P.A. Blend of tocotrienols, natural oils and esters as additive for topical application

Also Published As

Publication number Publication date
CN109260149B (zh) 2021-04-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103313729B (zh) 包括半氟化烷烃的o/w型乳剂
DE3686797T2 (de) Emulsionen zur verabreichung in wasser schwerloeslicher ionisierbarer basischer hydrophober arzneistoffe.
CA2194226C (en) Stable oil-in-water emulsions incorporating a taxine (taxol) and method of making same
CN102159187B (zh) 长春花生物碱纳米乳剂注射液及其制备方法
CN104224711B (zh) 以类固醇复合物为中间载体的紫杉醇亚微乳
JP2002502811A (ja) 亜硫酸塩を含有するプロポフォール組成物
CN102448441B (zh) 一种含有pH值调节剂的紫杉烷类药物溶液及其制备方法
CN112516291B (zh) 含人白蛋白的制剂及其制备方法
JP2018515484A (ja) カバジタキセル脂肪乳剤注射剤、その調製方法およびその使用
CN101829052B (zh) 紫杉烷类化合物的自乳化制剂及其制备方法
CN102274181B (zh) 一种多西他赛脂质微球注射液及其制备方法
CN105147609A (zh) 己烯雌酚脂肪乳注射液
CN109260149A (zh) 一种含有γ-生育三烯酚的纳米乳液及其制备方法和用途
CN106137963B (zh) 抗心律失常药物脂肪乳注射液及其制备方法
CN107049941A (zh) 含有前列腺素的脂肪乳剂
CN100384436C (zh) 非肠道顺铂乳剂
EP1906921B1 (en) Clear pharmaceutical aqueous microemulsion comprising propofol and process for preparation
CN1215834C (zh) 一种用于医药目的的全氟有机化合物的乳液、其制备方法和利用其治疗和预防疾病的方法
CN106109412A (zh) 氟比洛芬酯脂微球注射液及其制备方法
CN105769765A (zh) 己酸羟孕酮脂肪乳注射液
CN105832744A (zh) 一种供注射用的前列地尔冻干乳剂组合物
CN104524583B (zh) 人造乳糜载药组合物及其制备方法与用途
CN100502834C (zh) 两性霉素b结构化乳剂
CN102038636B (zh) 一种含有螯合剂的紫杉烷类药物溶液及其制备方法
CN109432004A (zh) 一种脂肪乳注射液的制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20210406

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee