CN109220555A - 一种人工冬虫夏草的母种培养基及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种人工冬虫夏草的母种培养基,其按重量份包括下列原料：牛肉膏0.5‑1.5份，胡萝卜1‑3份，土豆1‑3份，苹果0.5‑1.5份，酵母粉0.5‑1.5份，葡萄糖1‑3份，磷酸二氢钾0.05‑0.15份，硫酸镁0.05‑0.15份，琼脂0.5‑1.5份，高粱0.5‑1.5份,水90‑110份。制备方法包括如下步骤：1.把胡萝卜和土豆及苹果去皮后均切为1公分左右小块；2.将上述三种块状物和牛肉膏及高粱一起用水煮开并保持1小时，得到上清液。3.把上清液和酵母粉、葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、琼脂充分混合后装入玻璃试管内，再经过高温灭菌1个小时，冷却后即可成为冬虫夏草的母种培养基。

Description

一种人工冬虫夏草的母种培养基及其制备方法

技术领域

本发明涉及冬虫夏草，特别涉及一种人工冬虫夏草的母种培养基及其制备方法。

背景技术

冬虫夏草是我国二级保护物种，是我国名贵的中药材瑰宝，它在我国民间流传应用已有两千多年的历史。冬虫夏草不仅是具有良好保健功能的药用真菌，而且是具有很高营养价值的高档滋补食用真菌，随着人们生活水平和生活质量的提高，对功能保健产品的需求也日趋扩大。由于野生冬虫夏草分布地区狭窄、自然寄生率低、对生活环境条件要求苛

刻，所以本身资源比较有限。近年来冬虫夏草主产地生态环境遭到人为严重破坏，大量盲目不合理采挖致使资源日趋减少，产量逐年下降。而冬虫夏草由于可以药食两用，且人们不断发现其新的药理作用，所以多个国家对它的需要倍增，价格逐年上涨，国际市场日益紧缺。因野生资源逐年枯竭，冬虫夏草的资源保护和可持续利用一直是行业内外广泛关注的焦点，人工发酵方法生产的冬虫夏草菌丝粉已被知晓和认可。

目前国内许多个人和单位研究和公开冬虫夏草培养基和发酵生产方法，但是目前这些技术多采用微生物发酵常用培养基，基本上以蛋、奶、等作为发酵食源和培养基成分的选择，虽然都是按照微生物学的发酵原理使菌种能够生长，但食源的不同必然造成菌丝体的性质有所差异，但所述培养基各有不同,产量与品质也高低不一,这种情况严重影响其产业发展。在虫草的母种培养中,培养基的配方是否优良,直接影响菌丝体的生长。所生产的冬虫夏草发酵产品在化学成分和活性物质与天然冬虫夏草有差异，因而现有技术中培育出的冬虫夏草普遍存在质量差，营养成分含量较低的问题。人工培育难度大且技术瓶颈多，其技术瓶颈之一为冬虫夏草母种培育基。

发明内容

本发明的目的之一在于克服现有技术的不足，提供一种人工冬虫夏草的母种培养基及其制备方法。本发明的冬虫夏草的母种培养基的原料根据冬虫夏草菌株所需营养进行合理科学搭配，通过加入苹果和胡萝卜等植物营养元素，原料组分及配科学合理，培养基营养丰富、全面，完全能满足冬虫夏草菌种和菌丝的生长。菌丝体发酵周期短、染菌风险低、能耗低。并且原料来源广泛、价格稳定、成本低。菌丝体收率高，经济效益好。

本发明的一种人工冬虫夏草的母种培养基，其按重量份包括下列原料：牛肉膏0.5-1.5份，胡萝卜1-3份，土豆1-3份，苹果0.5-1.5份，酵母粉0.5-1.5份，葡萄糖1-3份，磷酸二氢钾0.05-0.15份，硫酸镁0.05-0.15份，琼脂0.5-1.5份，高粱0.5-1.5份，水90-110份。

优选其原料配比为：牛肉膏1份，胡萝卜2份，土豆2份，苹果1份，酵母粉1份，葡萄糖2份，磷酸二氢钾0.1份，硫酸镁0.1份，琼脂1份，高粱1份，水100份。

本发明所述的一种人工冬虫夏草的母种培养基的制备方法，其包括如下步骤：

（1）把胡萝卜和土豆及苹果去皮后均切为1公分左右小块；

（2）将上述三种块状物和牛肉膏及高粱加入水中煮沸并保持1小时，得到上清液；

（3）把上清液和酵母粉、葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、琼脂充分混合后装入玻璃试管内，再经过高温灭菌0.5-1.5个小时，冷却后即可成为冬虫夏草的母种培养基。

优选所述步骤（3）的高温灭菌条件是：压强0.114MPa、温度120℃。

优选所述步骤（3）的高温灭菌时间是1小时。

本发明提供的人工冬虫夏草培养基特点是高粱既可以提供碳源，又含有丰富的亚油酸，还有多种维生素、矿物质；再加上葡萄糖和牛肉膏和土豆和酵母粉等可以向冬虫夏草提供其生长充足的氮源和碳源,碳氮比对菌丝的生长影响也非常大,本发明通过大量试验,合理地对各组分进行了配比。苹果营养丰富，性味温和，含有丰富的碳水化合物、维生素和微量元素，有糖类、有机酸、果胶、蛋白质、钙、磷、钾、铁、维生素A、维生素B、维生素C和膳食纤维，另含有苹果酸，酒石酸，胡萝卜素，是所有蔬果中营养价值最接近完美的一个。本发明通过将其做为原料加入，通过大量试验表明，将其与原料中的胡萝卜和土豆等合理配比，可以大大提高其功效，起到了协同作用，更好地提供给培养基培养基提供了充足丰富的营养，促进了菌丝的良好生长。

有益效果：本发明根据冬虫夏草菌株所需营养进行合理科学搭配，通过加入苹果和胡萝卜等植物营养元素，通过对原料组分进行科学合理的组合，最终制造的培养基营养丰富、全面，完全能满足冬虫夏草菌种和菌丝的生长。菌丝体发酵周期短、染菌风险低、能耗低。并且原料来源广泛、价格稳定、成本低。菌丝体收率高，经济效益好。

具体实施方式

为了更好地理解本发明，下面结合实施例对本发明作进一步说明，但本发明要求保护的范围并不局限于实施例表示的范围。

实施例1：

本实施例的一种人工冬虫夏草的母种培养基，其按重量份包括下列原料：牛肉膏1份，胡萝卜2份，土豆2份，苹果1份，酵母粉1份，葡萄糖2份，磷酸二氢钾0.1份，硫酸镁0.1份，琼脂1份，高粱1份，水100份。

本实施例所述的一种人工冬虫夏草的母种培养基的制备方法，其包括如下步骤：

（1）把胡萝卜和土豆及苹果去皮后均切为1公分左右小块；

（2）将上述三种块状物和牛肉膏及高粱一起用水煮开并保持1小时，得到上清液。

（3）把上清液和酵母粉、葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、琼脂充分混合后装入玻璃试管内，再经过高温灭菌1个小时，高温灭菌条件是压强0.114MPa、温度120℃。冷却后即可成为冬虫夏草的母种培养基。

实施例2：

本实施例的一种人工冬虫夏草的母种培养基，其按重量份包括下列原料：牛肉膏0.5份，胡萝卜1份，土豆3份，苹果0.5份，酵母粉1.5份，葡萄糖3份，磷酸二氢钾0.05份，硫酸镁0.15份，琼脂0.5份，高粱1.5份，水100份。

本实施例所述的一种人工冬虫夏草的母种培养基的制备方法，其包括如下步骤：

（1）把胡萝卜和土豆及苹果去皮后均切为1公分左右小块；

（2）将上述三种块状物和牛肉膏及高粱一起用水煮开并保持1小时，得到上清液。

（3）把上清液和酵母粉、葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、琼脂充分混合后装入玻璃试管内，装量为管高的1/4，塞上棉塞封口捆扎，再经过高温灭菌1个小时，高温灭菌条件是压强0.114MPa、温度120℃。冷却后即可成为冬虫夏草的母种培养基。

实施例3：

本实施例的一种人工冬虫夏草的母种培养基，其按重量份包括下列原料：牛肉膏1.5份，胡萝卜1份，土豆3份，苹果1.5份，酵母粉0.5份，葡萄糖3份，磷酸二氢钾0.15份，硫酸镁0.05份，琼脂0.05份，高粱0.5份，水90份。

本实施例所述的一种人工冬虫夏草的母种培养基的制备方法，其包括如下步骤：

（1）把胡萝卜和土豆及苹果去皮后均切为1公分左右小块；

（2）将上述三种块状物和牛肉膏及高粱一起用水煮开并保持1小时，得到上清液。

（3）把上清液和酵母粉、葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、琼脂充分混合后装入玻璃试管内，装量为管高的1/4，塞上棉塞封口捆扎，再经过高温灭菌0.5个小时，高温灭菌条件是压强0.114MPa、温度120℃，冷却后即可成为冬虫夏草的母种培养基。

对比例1：

本实施例的一种人工冬虫夏草的母种培养基，其按重量份包括下列原料：牛肉膏5份，胡萝卜1份，土豆3份，苹果1.5份，酵母粉5份，葡萄糖1份，磷酸二氢钾0.15份，硫酸镁0.05份，琼脂0.05份，高粱5份，水90份。

本实施例所述的一种人工冬虫夏草的母种培养基的制备方法，其包括如下步骤：

（1）把胡萝卜和土豆及苹果去皮后均切为1公分左右小块；

（2）将上述三种块状物和牛肉膏及高粱一起用水煮开并保持1小时，得到上清液。

（3）把上清液和酵母粉、葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、琼脂充分混合后装入玻璃试管内，装量为管高的1/4，塞上棉塞封口捆扎，再经过高温灭菌0.5个小时，高温灭菌条件是压强0.114MPa、温度120℃，冷却后即可成为冬虫夏草的母种培养基。

对比例2

本实施例的一种人工冬虫夏草的母种培养基，其按重量份包括下列原料：牛肉膏1份，胡萝卜2份，土豆2份，酵母粉1份，葡萄糖2份，磷酸二氢钾0.1份，硫酸镁0.1份，琼脂1份，高粱1份，水100份。

本实施例所述的一种人工冬虫夏草的母种培养基的制备方法，其包括如下步骤：

（1）把胡萝卜和土豆去皮后均切为1公分左右小块；

（2）将上述两种块状物和牛肉膏及高粱一起用水煮开并保持1小时，得到上清液。

（3）把上清液和酵母粉、葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、琼脂充分混合后装入玻璃试管内，装量为管高的1/4，塞上棉塞封口捆扎，再经过高温灭菌1个小时，高温灭菌条件是压强0.114MPa、温度120℃。冷却后即可成为冬虫夏草的母种培养基。

相关指标测试：

取一市售的冬虫夏草的母种培养基做为对照例，测试各实施例和对比例及对照例的相关指标，其各培养基的使用方法及条件均相同，结果汇总见表1。

1.接种与培养：

从天然冬虫夏草上分离菌种，纯化，进行分子生物学鉴定，确定其为真正的冬虫夏草菌种菌株，接种前将冬虫夏草的母种菌株在在恒温箱中活化1d,然后菌种移入接种室,在超净工作台中按无菌操作要求,将其在起始PH值为6.0下，向试管斜面中央接种,接种块大小为5mm×25mm。接种后移入恒温箱中培养,培养条件为10-18℃,无光照。接种后每2d记录菌落形成及菌丝生长情况。

测定菌丝长速：

菌丝长速是菌丝生长的指标。将菌丝接种到斜面培养基中,每天测量1次菌落直径,直至菌落满管为止。

统计满管天数：

满管天数是菌种接种到斜面培养基上,到菌丝布满斜面所需要的时间。

观察菌丝长势：

菌丝长势是评价菌丝生长情况的重要指标。以菌丝的洁白程度、生长健壮程度、菌丝浓密程度、菌台厚度为指标,观察并记录每种配方的菌丝的长势。观察结果用很强、强、较强、一般、弱5个等级表示。

表1

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Claims (5)

1.一种人工冬虫夏草的母种培养基，其特征是其按重量份包括下列原料：牛肉膏0.5-1.5份，胡萝卜1-3份，土豆1-3份，苹果0.5-1.5份，酵母粉0.5-1.5份，葡萄糖1-3份，磷酸二氢钾0.05-0.15份，硫酸镁0.05-0.15份，琼脂0.5-1.5份，高粱0.5-1.5份，水90-110份。

2.如权利要求1所述人工冬虫夏草的母种培养基，其特征是其按重量份包括下列原料：牛肉膏1份，胡萝卜2份，土豆2份，苹果1份，酵母粉1份，葡萄糖2份，磷酸二氢钾0.1份，硫酸镁0.1份，琼脂1份，高粱1份，水100份。

3.如权利要求1所述人工冬虫夏草的母种培养基的制备方法，其特征是包括如下步骤：

（1）把胡萝卜和土豆及苹果去皮后均切为1公分左右小块；

（2）将上述三种块状物和牛肉膏及高粱加入水中煮沸并保持1小时，得到上清液；

（3）把上清液和酵母粉、葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、琼脂充分混合后装入玻璃试管内，再经过高温灭菌0.5-1.5个小时，冷却后即可成为冬虫夏草的母种培养基。

4.如权利要求3所述人工冬虫夏草母种培养基的制备方法，其特征是所述步骤（3）的高温灭菌条件是：压强0.114MPa、温度120℃。

5.如权利要求3所述人工冬虫夏草母种培养基的制备方法，其特征是所述步骤（3）的高温灭菌时间是1小时。