CN103937690A - 一种冬虫夏草固态发酵方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了属于发酵技术领域的一种冬虫夏草固态发酵方法。该方法以玉米，大米，谷壳，大豆油，牡蛎壳，马唐粉作为培养基成分，制种固体发酵，培养基硬度和粘度低，克服了固体发酵搅拌问题，质地疏松、透气，有效提高了中国被毛菌的生长速度，发酵生产的冬虫夏草菌丝体无毒、无公害、绿色环保、低残留，可直接作为食品生产原料。
Description
技术领域
本发明属于发酵技术领域，具体涉及一种冬虫夏草固态发酵方法。
背景技术
冬虫夏草(Cordyceps sinensis)，又名虫草，为麦角菌科虫草属真菌寄生在绿蝙蝠蛾幼虫上的子座及幼虫的复合体。冬虫夏草分布在我国西藏、青海、云南、四川及甘肃等省区3000～5000m的高寒草甸区，且对生境要求极其特殊。在自然条件下，其生活史极其复杂，必须经过相对独立的分生孢子阶段和子囊孢子阶段的转变，其寄主蝙蝠蛾需要5～6年才能完成一个世代，其中85％以上的时间营地下生活，全年具有世代重叠现象。冬虫夏草性温而味甘，药用价值极高，具有补肺、益肾、补精髓及诸虚百损、止咳化痰、抗白血病、抗抑郁症、调节免疫系统之功效。
冬虫夏草在目前天然药材中，已经处于濒危灭绝的边缘。产量和产地都非常有限，全世界仅有中国和尼泊尔有野生的冬虫夏草。随着人类的过度采挖.冬虫夏草的野生资源越来越少。因此冬虫夏草菌体人工培育丰富了它的产量和应用。由于商业化需要大量的冬虫夏草菌体，而其中的难点就在于固体发酵冬虫夏草菌丝，传统液态发酵利用蚕蛹粉、酵母膏、蛋白胨等工业原料发酵冬虫夏草菌体有效了解决产量上的问题，但是作为食品原料具有气味难闻和残余的培养基不易清除的弱点，因而不是作为食品原料的最佳生产方法。
发明内容
本发明针对现有技术的缺陷，提供一种冬虫夏草固态发酵方法，实现中国被毛孢子固体发酵，既克服传统固本培养基硬度和粘度大的缺点，同时缩短了生长周期。
一种冬虫夏草固态发酵方法，按照如下步骤进行：
(1)固体培养基配制：按照重量份数，将0-300份玉米，100-250份大米，0-200份谷壳，5-8份大豆油，4-5份牡蛎壳，加入到600-800份去离子水中，搅拌均匀，装于组培瓶中；
(2)将组培瓶置于高压蒸汽锅中，121℃灭菌30分钟；
(3)菌种制作：将斜面上菌种取下，打碎，制作成液体摇瓶，150rpm，18℃培养5～10天，得到液体菌球；
(4)菌种处理及接种：将制作的液体菌球打散，接种于组培瓶中，18℃培养；
(5)菌丝体生长：18℃培养50-70天后长成。
所述步骤(1)中固体培养基配制过程中加入1-5重量份数的表面活性剂。
所述表面活性剂为大豆油，花生油，羊油，棕榈油中的一种或一种以上。
所述步骤(1)中固体培养基配制过程中加入5-15份晒干磨碎的马唐粉。
本发明的有益效果：本发明制备的培养基成分简单，主要成分为农产品，成本低，培养基硬度和粘度低，克服了固体发酵搅拌问题，质地疏松、透气，有效提高了中国被毛菌的生长速度，发酵生产的冬虫夏草菌丝体无毒、无公害、绿色环保、低残留，可直接作为食品生产原料。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步说明。
实施例1
一种冬虫夏草固态发酵方法，按照如下步骤进行：
(1)固体培养基配制：取250g玉米，250g大米，175g谷壳、6.75g大豆油、5g牡蛎壳，650ml去离子水；搅拌均匀，分装于10个组培瓶中；
(2)将组培瓶置于高压蒸汽锅中，121℃灭菌30分钟；
(3)菌种制作：将斜面上菌种取下，打碎，制作成液体摇瓶，150rpm，18℃培养5～10天，得到液体菌球；
(4)菌种处理及接种：将制作的液体菌球打散，接种于组培瓶中，18℃培养；
(5)菌丝体生长：18℃培养60天后长成。
实施例2
一种冬虫夏草固态发酵方法，按照如下步骤进行：
(1)固体培养基配制：取100g大米、400g红高粱、175g谷壳、6.75g大豆油、5g牡蛎壳，650ml去离子水，搅拌均匀，分装于10个组培瓶中；
(2)将组培瓶置于高压蒸汽锅中，121℃灭菌30分钟；
(3)菌种制作：将斜面上菌种取下，打碎，制作成液体摇瓶，150rpm，18℃培养5～10天，得到液体菌球；
(4)菌种处理及接种：将制作的液体菌球打散，接种于组培瓶中，18℃培养；
(5)菌丝体生长：18℃培养60天后长成。
实施例3
一种冬虫夏草固态发酵方法，按照如下步骤进行：
(1)固体培养基配制：取150g大米(带壳)、550g红高粱(带壳)、6.75g大豆油、5g牡蛎壳，水800ml，搅拌均匀，分装于10个组培瓶中；
(2)将组培瓶置于高压蒸汽锅中，121℃灭菌30分钟；
(3)菌种制作：将斜面上菌种取下，打碎，制作成液体摇瓶，150rpm，18℃培养5～10天，得到液体菌球；
(4)菌种处理及接种：将制作的液体菌球打散，接种于组培瓶中，18℃培养；
(5)菌丝体生长：18℃培养60天后长成。
实施例4
一种冬虫夏草固态发酵方法，按照如下步骤进行：
(1)固体培养基配制：取150g大米(带壳)、550g红高粱(带壳)、6.75g大豆油、5g牡蛎壳，马唐粉10g，水800ml，搅拌均匀，分装于10个组培瓶中；
(2)将组培瓶置于高压蒸汽锅中，121℃灭菌30分钟；
(3)菌种制作：将斜面上菌种取下，打碎，制作成液体摇瓶，150rpm，18℃培养5～10天，得到液体菌球；
(4)菌种处理及接种：将制作的液体菌球打散，接种于组培瓶中，18℃培养；
(5)菌丝体生长：18℃培养50天后长成。
检测上述实施例中腺苷的含量，结果如表1所示：
表1各实施例虫草素含量
从表1可以看出，实施例1-4中虫草素的含量均高于中国药典要求的含量，加入马唐粉后，腺苷含量上升明显，证明马唐粉对虫草发酵过程中虫草素的产生起到了关键作用，其与实施例3对比，还缩短了菌丝体长成的时间。
上述实施例中高粱、大米、玉米在发酵中的作用是提供碳源，谷壳和高粱、大米的壳作为膨松剂，无机盐类和氨基酸由牡蛎壳粉碎后提供。
Claims (4)
1.一种冬虫夏草固态发酵方法，其特征在于，按照如下步骤进行：
(1)固体培养基配制：按照重量份数，将0-300份玉米，100-250份大米，0-200份谷壳，5-8份大豆油，4-5份牡蛎壳，加入到600-800份去离子水中，搅拌均匀，装于组培瓶中；
(2)将组培瓶置于高压蒸汽锅中，121℃灭菌30分钟；
(3)菌种制作：将斜面上菌种取下，打碎，制作成液体摇瓶，150rpm，18℃培养5～10天，得到液体菌球；
(4)菌种处理及接种：将制作的液体菌球打散，接种于组培瓶中，18℃培养；
(5)菌丝体生长：18℃培养50-70天后长成。
2.根据权利要求1所述一种冬虫夏草固态发酵方法，其特征在于，所述步骤(1)中固体培养基配制过程中加入1-5重量份数的表面活性剂。
3.根据权利要求1所述一种冬虫夏草固态发酵方法，其特征在于，所述表面活性剂为大豆油，花生油，羊油，棕榈油中的一种或一种以上。
4.根据权利要求1所述一种冬虫夏草固态发酵方法，其特征在于，所述步骤(1)中固体培养基配制过程中加入5-15份晒干磨碎的马唐粉。
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