CN109187787A - 一种软胶囊的溶出度检测方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种软胶囊的溶出度检测方法，步骤为：对照品溶液的制备、供试品溶液的制备、采用高效液相色谱法测定供试品溶液中主药的含量，与标示量进行比较，计算软胶囊的溶出度。本发明在不改变现有检测仪器、设备的基础上，提供了一种软胶囊溶出度检测的方法，可以使软胶囊中主药溶出度提高到80%以上。

Description

一种软胶囊的溶出度检测方法

技术领域

本发明属于制药领域，具体是一种软胶囊的溶出度检测方法。

背景技术

固体制剂口服给药后，药物的吸收取决于药物从制剂中的溶出、释放、药物在生理条件下的溶解和在胃肠道的渗透。由于药物的溶出和溶解对吸收具有重要影响，因此，体外溶出度试验有可能预测其体内行为，建立普通口服固体制剂体外溶出试验方法具有评价药品批间质量的一致性、指导新药制剂的研发、在药品发生如处方、生产工艺、生产场所变更和生产工艺放大等变更后，确认药品质量和疗效一致性的重要作用。

含蜂蜡的油性基质软胶囊，采用药典及相关法规性文件收载的一般口服固体制剂的溶出度常规方法检测，药丸在溶剂中崩解后，内容物漂浮于液面不易分散，主药不能分散溶解到溶出介质中，不能顺利溶出目，提高溶出仪的转速，溶出缓慢及溶出率低的问题仍然得不到解决。

发明内容

为了解决上述问题，提供一种软胶囊的溶出度检测方法，本发明对目前《中华人共和国药典》所收集的常规方法进行改进和优化，本发明不改变原有设备，使用降低溶出介质体积和增加表面活性剂的方法，解决药丸崩解后内容物漂浮于液面无法分散开的问题；本发明通过如下技术方案实现。

一种软胶囊的溶出度检测方法，包括如下步骤：

1)对照品溶液的制备：按《中华人民共和国药典》要求进行对照品溶液的配制；

2)供试品溶液的制备：以表面活性剂溶液40mL-250ml为初始溶出介质，转速为每分钟100转，搅拌45分钟，沿溶出杯壁加入预热至37℃±0.5℃的缓冲溶液至杯内液体体积为100ml-1000ml，转速不变，继续搅拌15分钟，取溶液适量，用滤膜滤过，滤液作为供试品溶液；

3)采用高效液相色谱法测定供试品溶液中主药的含量，与标示量进行比较，计算软胶囊的溶出度。

优选地，表面活性剂溶液浓度为0.1％-1.0％，表面活性剂可为吐温、卖泽、十二烷基硫酸钠、泊洛沙姆。

优选地，缓冲溶液可为pH5-7的磷酸盐缓冲溶液、水、盐酸溶液。

优选地，滤膜尺寸为0.45μm。

优选地，软胶囊的溶出度限度不得低于70％。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1“理洫王”血塞通软胶囊溶出度检测图谱，图中1表示三七皂苷R1； 2表示人参皂苷Rg1；3表示人参皂苷Re；4表示人参皂苷Rb1；5表示人参皂苷 Rd。

图2“理洫王”血塞通软胶囊对照品溶出度检测图谱，图中1表示三七皂苷R1；2表示人参皂苷Rg1；3表示人参皂苷Re；4表示人参皂苷Rb1；5表示人参皂苷Rd。

图3“理洫王”血塞通软胶囊空白试剂溶出度检测图谱。

图4“理洫王”血塞通软胶囊专属性试验图谱，图中1表示三七皂苷R1； 2表示人参皂苷Rg1；3表示人参皂苷Re；4表示人参皂苷Rb1；5表示人参皂苷 Rd。

图5“理洫王”血塞通软胶囊对照品专属性试验图谱，图中1表示三七皂苷R1；2表示人参皂苷Rg1；3表示人参皂苷Re；4表示人参皂苷Rb1；5表示人参皂苷Rd。

图6“理洫王”血塞通软胶囊安慰剂溶液专属性试验图谱。

图7“理洫王”血塞通软胶囊对照品溶液空白专属性试验图谱。

图8“理洫王”血塞通软胶囊供试品溶液空白专属性试验图谱。

图9黄藤素软胶囊对照品溶液溶出度检测图谱，图中1表示盐酸巴马丁。

图10黄藤素软胶囊溶出度检测图谱，图中1表示盐酸巴马丁。

本发明在不改变现有检测仪器、设备的基础上，提供了一种软胶囊溶出度检测的方法，可以使软胶囊中主药溶出度提高到80％以上。

具体实施方式

以下通过具体实施方式的描述对本发明作进一步说明，但这并非是对本发明的限制，本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本发明的基本思想，均在本发明的范围之内。

实施例1

以“理洫王”血塞通软胶囊为例：

对照品溶液配制：取三七总皂苷对照品适量，精密称定，加入pH6-6.5的磷酸盐溶液，配制成每1ml含0.625mg的溶液作为对照品溶液。

供试品溶液配制：分别取1％的吐温溶液50ml各6份，倒入6个溶出杯，预热至37℃，取血塞通软胶囊软胶囊6粒，分别投入6个溶出杯中，转速为每分钟 100转，搅拌45分钟，沿溶出杯壁加入预热至37℃±0.5℃的pH6-6.5的磷酸盐溶液至杯内液体体积为100ml，继续搅拌15分钟，取溶液适量，用0.45μm微孔滤膜滤过，滤液作为供试品溶液。

高效液相色谱法测定：精密吸取对照品溶液与供试品溶液，照高效液相色谱法，以十八烷基键合硅胶为填充剂，乙腈为流动相A，水为流动相B，按下表1 中的规定进行梯度洗脱；流速每分钟1.5ml；检测波长203nm；柱温25℃。人参皂苷Rg1与人参皂苷Re的分离度应大于1.5。按外标法以峰面积计算出每粒软胶囊中三七皂苷R₁和人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁、Rd的含量，与标示量比较，以三七总皂苷计，计算血塞通软胶囊的溶出度。试验结果见表2，数据显示，三批“理洫王”血塞通软胶囊的溶出度，每粒溶出值均在80％以上，三批溶出均值为82.8％，且三批溶出相对标准偏差在3％以下。

表1梯度洗脱

表2血塞通软胶囊溶出度测试结果

本发明方法筛选过程如下：

仪器：美国Agilent 1260高效液相色谱仪，D-800L智能药物溶出试验仪(天津市天大天发科技有限公司)，德国赛多利斯CPA225D电子天平，ME204电子天平 (梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司)，北京赛多利斯BSA2202S型电子天平，美国奥利龙828型酸度计。

1.溶出装置的选择

《中华人共和国药典》2015年版收载的普通口服固体制剂溶出度的测定宜选用的仪器装置有蓝法、桨法和小杯法。篮法和桨法是目前最常用的溶出度测定方法，适用于大部分口服固体制剂。小杯法可视为桨法，适用于低剂量规格固体制剂的溶出试验。

通过观察研究发现，软胶囊崩解开后，内容物粘附于转篮壁很难被分散溶解，所以软胶囊不宜采用蓝法。对于目标成分规格剂量低的软胶囊，溶剂体积较大溶出液浓度较小，难以进行定量测定分析，宜选用《中华人共和国药典》2015年版收载的小杯法；对于目标成分规格剂量大的软胶囊，宜选用《中华人共和国药典》 2015年版收载的桨法。

以“理洫王”血塞通软胶囊为例。理洫王牌血塞通软胶囊含三七总皂苷60mg，规格剂量低，溶剂体积较大溶出液浓度较小，难以进行定量测定分析，故选用《中华人共和国药典》2015年版收载的小杯法。

2.溶出介质体积的选择

普通的固体制剂，篮法和桨法溶出介质的体积500-1000毫升；小杯法溶出介质的体积范围为100-200毫升。

根据制剂或原料的含量测定所需上样浓度折算，以每粒胶丸中主药能够被完全溶出计算来确定宜采用的溶出介质体积。

以“理洫王”血塞通软胶囊为例，根据《中华人共和国药典》2015年版一部收载的三七总皂苷含量测定上样浓度折算，以每粒胶丸中三七总皂苷能够被完全溶出计算，溶剂体积为100ml时，进样40μl与三七总皂苷含量测定上样浓度一致，故选择溶剂体积为100ml。

3.溶出介质的选择

根据产品属性，如测定pH值、溶解度等，选择既能满足色谱分析分离条件又能满足产品溶解特性的溶出介质。如可参照《中华人共和国药典》2015年版通则0631pH值测定，测定软胶囊的pH值。根据相似相容原理，选择适宜的溶剂作为溶出介质。

以“理洫王”血塞通软胶囊为例，用高效液相色谱仪按本发明方法测定供试品溶液图谱见图1，对照品图谱见图2，空白溶剂见图3。

4.表面活性剂的选择

以“理洫王”血塞通软胶囊为例。

分别以0.1％、0.5％、1.0％的吐温溶液50ml作为初始溶出介质，转速100rpm，搅拌45分钟，沿溶出杯壁加入预热至37℃±0.5℃的pH6-6.5磷酸盐缓冲液50mL，转速不变，继续搅拌15分钟，取溶液适量，用0.45μm的滤膜滤过，滤液作为供试品溶液。精密吸取对照品溶液与供试品溶液，照高效液相色谱法，测定，记录色谱图，按外标法以峰面积计算出每粒软胶囊主药的含量，与标示量进行比较，计算软胶囊的溶出度。比较不同试验结果筛选出适宜的表面活性剂及其适宜的浓度。试验数据显示，以1.0％吐温6粒药丸平均溶出率74.45％，比另外两组稍高，且溶出值相对均一，故选择1.0％吐温。

表3不同浓度表面活性剂溶液中的溶出度测试数据

5.转速的选择

以“理洫王”血塞通软胶囊为例。

分别选用50rpm、75rpm、100rpm、120rpm四个转速，搅拌45分钟时，沿溶出杯壁加入预热至37℃±0.5℃的pH6-6.5磷酸盐缓冲液，转速不变继续搅拌 15分钟，取溶液适量，用0.45μm的滤膜滤过，滤液作为供试品溶液。精密吸取供试品溶液，照高效液相色谱法测定，记录色谱图，按外标法以峰面积计算出每粒软胶囊中主药的含量，与标示量进行比较，计算软胶囊的溶出度。比较不同试验结果选择适宜的转速。试验结果见表4。

试验数据显示，随转速的提高，溶出率呈趋势增加，但转速为50rpm和75rpm 时，测试结果溶出率均较低，相对标准偏差较大；转速为100rpm时，6粒药丸溶出率均值为74.45％，且溶出相对均一；转速为120rpm时，6粒药丸溶出率均值为75.45％，且6粒胶丸溶出均在70％以上；转速100rpm和120rpm的测试数据均能满足要求，且测试数值相当，故选择转速100rpm。

表4不同转速溶出度测试结果

6.分散时间点的确定

以“理洫王”血塞通软胶囊为例。

根据预试验情况，分别考察30min、45min、60min时的分散情况。具体的试验方法是，取6粒软胶囊，照上述拟定的软胶囊溶出度的测定方法，以1.0％的吐温溶液为初始溶出介质，转速为100rpm，分别在30min、45min、60min时，沿溶出杯壁加入预热至37℃±0.5℃的pH6-6.5磷酸盐缓冲液，转速不变，继续搅拌15分钟，取溶液适量，用0.45μm的滤膜滤过，滤液作为供试品溶液。进样测试，比较不同试验结果选择适宜的时间。试验结果见表5。

试验数据显示，搅拌30min溶出值偏低，相对标准偏差较大，搅拌45min和 60min，测试结果一致，故选择分散时间为45min。

表5不同分散时间点溶出度测试数据

7.软胶囊溶出度测定方法的建立

以“理洫王”血塞通软胶囊为例。

建立了“理洫王”血塞通软胶囊溶出度优选的测定方法是：

对照品溶液制备：取对照品适量，精密称定，配制成适宜浓度的溶液，作为对照品溶液。

供试品溶液制备：溶出介质分两步加入。第一步，取表面活性剂溶液50ml，倒入溶出杯，预热至37℃，取软胶囊6粒，分别投入6个溶出杯中，转速为100rpm；第二步，搅拌45min，沿溶出杯壁加入缓冲溶液至杯内液体体积为100ml，继续搅拌15分钟，取溶液适量，用微孔滤膜滤过，滤液作为供试品溶液。

高效液相色谱仪测定：精密吸取对照品溶液与供试品溶液，照高效液相色谱仪测定，记录色谱图，按外标法以峰面积计算出每粒软胶囊中主药的含量，与标示量进行比较，计算软胶囊的溶出度。

8.方法学验证

以“理洫王”血塞通软胶囊为例。

本发明公开的采用高效液相色谱法测定血塞通软胶囊的体外溶出度的分析方法学验证包括以下内容及方法步骤：

专属性/安慰剂干扰：专属性试验的目的是考察辅料和胶囊壳对溶出度测定有没有干扰。具体的试验方法是，于150ml锥形瓶中加入1％表面活性剂溶液 50ml，置DF-II集热式磁力搅拌器中，控制温度稳定在37℃，取按血塞通软胶囊处方制备的安慰剂1粒，投入容器，搅拌45min，加入相同温度的溶剂A至 100ml，继续搅拌15min，取溶液适量，用0.45μm的滤膜滤过，滤液作为安慰剂供试液；同法制作供试品溶液。另取三七总皂苷对照品适量，加溶剂A，配制成每毫升含0.625mg的溶液，作为对照品溶液。分别取对照品溶剂空白、供试品溶剂空白、安慰剂供试液，对照品溶液和供试品溶液，照高效液相色谱法，进样分析，记录色谱图，见图4-8，试验结果表明对照溶剂空白、供试品溶剂空白、阴性对照安慰剂对测定均无干扰。说明本发明的测定方法专属性强。

线性与范围：精密称取三七总皂苷对照品50mg，置50ml量瓶，加溶剂A使溶解后，定容，摇匀，作为对照品贮备液。分别量取该对照品贮备液5ml、5.5ml、 6ml、6.5ml、7ml、7.5ml，置于10ml量瓶，分别加入溶剂A稀释至刻度，摇匀。分别取上述系列溶液，照高效液相色谱法，依法测定，以对照品浓度为横坐标、峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，并对测定的数据进行回归分析。由结果可知， R1线性范围：1.48μg至2.23μg；Rg1线性范围：5.28μg至7.92μg；Re线性范围： 0.74μg至1.12μg；Rb1线性范围：5.56μg至8.35μg；Rd线性范围：1.52μg至2.29μg，见表6。

表6线性范围测试结果

耐用性考察：血塞通软胶囊溶出度的色谱条件与三七总皂苷含量测定相同，但是样品浓度、溶剂与含量测定不同，因此仍需要考察耐用性。本试验考察了柱温、检测波长、流速和色谱柱等四项。具体的试验方法是，取表面活性剂0.5g，置150mL锥形瓶中，加入50ml水，加热溶解，放冷。将锥形瓶置DF-II集热式磁力搅拌器中，控制温度稳定在37℃，取本品1粒，投入容器，搅拌45min，加入相同温度的溶剂A至100ml，继续搅拌15min，取溶液适量，用0.45μm的滤膜滤过，滤液作为供试品溶液，进样2次。另取三七总皂苷对照品适量，加溶剂A，配制成每毫升含0.625mg的溶液，作为对照品溶液。取上述各溶液，照高效液相色谱法，依法测定，计算。要求：人参皂苷Rg1与Re之间的分离度不得低于1.5，理论板数以Rg1峰面积计，应不得低于6000。各条件下的测定值应不低于标示量的75％。考察结果显示微调四项考察项目对测定结果均无影响，说明本分析方法耐用性好。

滤膜对三七总皂苷的吸附性考察：取同一供试品溶液2份，1份用0.45μl滤膜滤过，弃去不同体积，分别取续滤液进样。另1份离心，取上清液进样测试，测试结果表明滤膜对三七总皂苷几乎不吸附。

准确度/回收率：按本品处方，配制安慰剂，称取按安慰剂适量、三七总皂苷适量，置150ml锥形瓶中，加1％表面活性剂溶液50ml，超声使溶解，加入50 毫升溶剂A，继续超声使充分溶解，放冷至37℃±0.5℃，用0.45μl滤膜滤过，滤液作为供试品溶液。制作3个浓度分别为50％、70％、100％的供试液浓度样品溶液，每个浓度平行制作3份，照软胶囊的溶出度测定方法，配制对照品溶液，依法测定，记录谱图，按公式计算：回收率％＝实测值/加入量×100％。测试结果见表8，3个浓度的5个指标的回收率三七皂苷R₁在97％-101％之间，人参皂苷Rg₁在96％-100％之间、Re在98％-103％之间、Rb₁在98％-103％之间、Rd在98％-101％之间；三七总皂苷回收率在97％-101％之间；5个指标以及三七总皂苷总体回收率的相对标准偏差均小于2.0％。见表7。

表7回收率测试数据

实施例2

以黄藤素软胶囊溶出度测定为例。

对照品溶液配制：取盐酸巴马汀对照品适量，精密称定，加甲醇使溶解，配制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。

供试品溶液配制：分别取1％的吐温溶液250ml各6份，倒入6个溶出杯，预热至37℃，取黄藤素软胶囊6粒，分别投入6个溶出杯中，转速为每分钟100 转，搅拌45分钟，沿溶出杯壁加入预热至37℃±0.5℃的pH6-6.5的磷酸盐溶液至杯内液体体积为1000ml，继续搅拌15分钟，取溶液适量，用0.45μm微孔滤膜滤过，滤液作为供试品溶液。

高效液相色谱法测定：精密吸取对照品溶液与供试品溶液，按照高效液相色谱法，以十八烷基键合硅胶为填充剂；以缓冲溶液(含0.5％庚烷磺酸钠的 0.01mol/L磷酸二氢钠溶液，用磷酸调节pH值为3)－乙腈(68∶32)为流动相，柱温：30℃，流速每分钟为1.0mL；检测波长为265nm。理论板数按盐酸巴马汀峰计算应不低于2000。按外标法以峰面积计算出每粒黄藤素软胶囊中盐酸巴马汀的含量，与标示量比较，计算黄藤素软胶囊的溶出度，试验结果见表8，数据显示三批黄藤素软胶囊的溶出度，每粒溶出值均在80％以上。图谱见图9和图10。

表8黄藤素软胶囊溶出度测试结果

表2和表8数据显示，用本发明所述方法测定不同品种的软胶囊的溶出度值均在80％以上，真实的反映了软胶囊主药溶出情况。本发明在现有仪器装置的基础上，提供了一种软胶囊溶出度的检测方法，可以使软胶囊中主药的溶出度提高到了80％以上，实现了药物溶出目的，为软胶囊的质量控制提供了一个可靠的检测方法。

以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。

Claims (5)

1.一种软胶囊的溶出度检测方法，其特征在于包括如下步骤：

1)对照品溶液的制备：取对照品适量，精密称定，配制成适宜浓度的溶液，作为对照品溶液；

2)供试品溶液的制备：以表面活性剂溶液40ml-250ml为初始溶出介质，倒入溶出杯，预热至37℃时，投入供试品，控制转速为每分钟75-120rpm搅拌45-60分钟后，沿溶出杯壁加入预热至37℃±0.5℃的缓冲溶液至杯内液体体积为100ml -1000ml，转速不变，继续搅拌15分钟，取溶液适量，用微孔滤膜滤过，滤液即为供试品溶液；

3)高效液相色谱法测定：精密吸取对照品溶液和供试品溶液，按照高效液相色谱法进行测定，以十八烷基键合硅胶为填充剂，乙腈为流动相，进行梯度洗脱，流速每分钟1.0-1.5ml，检测波长203-265nm，柱温25-30℃，记录色谱图，按外标法以峰面积计算出软胶囊的含量，与标示量比较，得到软胶囊的溶出度。

2.如权利要求1所述的软胶囊的溶出度检测方法，其特征在于：所述表面活性剂溶液浓度为0.1%-1.0%，表面活性剂为吐温、卖泽、十二烷基硫酸钠或泊洛沙姆。

3.如权利要求1所述的软胶囊的溶出度检测方法，其特征在于：所述缓冲溶液为pH5-7的磷酸盐溶液、水或盐酸溶液。

4.如权利要求1所述的软胶囊的溶出度检测方法，其特征在于：所述微孔滤膜的孔径尺寸为0.45μm。

5.如权利要求1所述的软胶囊的溶出度检测方法，其特征在于：软胶囊的溶出度不得低于70%。